UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIAFACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
“IDENTIFICACION Y FRECUENCIA DE NOSEMOSIS EN COLMENAS DE ABEJAS Apis mellifera EN LA REGION
APICOLA GOLFO CENTRO DE MEXICO”
TRABAJO RECEPCIONAL EN LA MODALIDAD DE:
TESINA
COMO REQUISITO PARCIAL PARA OBTENER EL TITULO DE:
MEDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA
PRESENTA:
ANDRÉS GUERRERO SÁNCHEZ
ASESOR
M en C. Sóstenes Rafael Rodríguez Dehaibes
ii
INDICE GENERAL
Página 1.0 Introducción 1 2.0 Antecedentes 3 2.1 Apicultura en México 3 2.2 Nosemosis 3 2.3 Historia de la nosemosis 4 2.4 Epizootiología 62.5 Ciclo biológico de Nosema spp. 7
2.6 Patogenia 9
2.7 Diagnostico 10
2.8 Tratamiento 11
3.0 Situación actual de nosemosis en México 13
4.0 Justificación 14
5.0 Objetivos 15
5.1 Objetivo general 15
iii
6.0 Materiales y métodos 16
6.1 Área de estudio 16
6.2 Material y equipo 17
6.3 Obtención de las muestras 17
6.4 Colecta de muestras 18 6.5 Período de estudio 18 6.6 Metodología 19 7.0 Resultados y discusión 21 8.0 Conclusión 24 9.0 Bibliografía 25
iv
ÍNDICE DE CUADROS
Página
Cuadro 1. Determinación del grado y nivel de infestación de
Nosema spp……….
20
v
ÍNDICE DE FIGURAS
Pagina
Figura 1. Esporos de Nosema apis Zander observados al
microscopio óptico a 40 x………
7
Figura 2. Ciclo biológico de Nosema spp……….. 8
Figura 3. Ubicación de la empresa Citrofrut S.A. de C.V. carretera
Perote-Nautla Km 120.5, Paso Largo Martínez de la Torre, Ver………..
vi
DEDICATORIA
A mis padres la Sra. Matilde Sánchez Galicia y el Sr. Amado Guerrero Molina,
porque me han dado su amor y apoyo incondicional a lo largo de la vida,
inculcándome valores para poder triunfar; los quiero muchísimo.
A mí cuñado Ciro y a mi hermana Pati a quienes quiero mucho y han sido mis
segundos padres, que pese a sus dificultades siempre me han dado su apoyo
incondicional, motivándome para llegar hacer una persona exitosa.
A mis queridos hermanos, Amado, Ramiro, Lili, Héctor, Erick, Mau y Magda
quienes me han dado todo su cariño y apoyo cuando más lo he necesitado, estoy
orgulloso de ellos y agradezco a Dios por darme unos excelentes hermanos.
A mi amigo Agustín por el apoyo incondicional que me ha brindado en el último
vii AGRADECIMIENTOS
Agradezco al M en C. Sostenes Rafael Rodríguez Dehaibes por dedicar parte de
su tiempo para la asesoría de este trabajo así como también a la empresa
Citrofrut ApiZano por el apoyo y las comodidades brindadas.
A mis sinodales el Dr. Álvaro E. de J. Peniche Cardeña y al M en C Genaro
Cocom Euan por dedicar parte de su tiempo para la revisión de este trabajo.
A mis compañeros, Víctor Balderrama, Juan Crispín, Erick Fuentes, Fernando
González, Raúl Galván, Emmanuel Jiménez y Gustavo Vela por el apoyo y los
viii
La vida me ha enseñado, que al tratar de agradecer a las personas que han
contribuido a mi existencia, así como a mi desarrollo profesional, podría ser injusto
si olvidara a alguien, tratando de mencionar uno por uno. Es por eso que las
personas que tendría que mencionar individualmente, saben que al decir que “Dedico este trabajo de titulación a todos”, están incluidos.
Y estarán de acuerdo que a la persona que no puedo dejar de agradecer y
mencionar, es a Dios y a la Virgen María, quien agradezco diciéndole:
Padre Nuestro…
ix
RESUMEN
Guerrero Sánchez Andrés, 2010, “Identificación y frecuencia de Nosemosis en colmenas de abejas Apis mellífera en la Región Apícola Golfo Centro de México”. Tesina, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Veracruzana. Veracruz, Ver; México. Asesor: M en C. Sóstenes Rafael Rodríguez Dehaibes. Los pocos casos reportados de nosemosis en abejas Apis mellifera en la región ha ocasionado que no se realice un monitoreo continuo para conocer la presencia y nivel de infestación. Se realizó un muestreo en la Región Apícola Golfo Centro de México para determinar la presencia, el nivel y grado de infestación mediante la técnica descrita por Cornejo y Rossi basada en el conteo de esporos mediante la cámara de Neubauer.
Los resultados obtenidos fueron menores a 1 o nivel de infestación muy leve para la localidad de Misantla, mientras que las localidades de Tlapacoyan, Veracruz y Mtz. de la Torre no presentan la enfermedad.
Palabras Clave: nosemosis, infestación, Apis mellífera, técnica Cornejo y Rossi, esporos.
1
1.0 INTRODUCCIÓN
Uno de los factores más importantes para la obtención de un alto rendimiento en
apicultura, está dado fundamentalmente por la sanidad apícola, debido a las
diversas enfermedades que atacan a las abejas, traduciéndose así en una
disminución de las poblaciones existentes en las colmenas (Chen et al., 2009).
Un patógeno particular puede ser letal para las abejas, pero la colonia puede ser
capaz de compensar su pérdida. El síndrome de despoblación de las abejas ha
sido recientemente el foco de muchos reportes donde se ha tratado de determinar
el porqué las colonias fuertes, han llegado a debilitarse y ocasionalmente han
muerto (Higes et al., 2008).
La Nosemosis es una enfermedad parasitaria, la cual causa pérdidas económicas
considerables en la industria apícola mundial (Sagarpa 1997).
Esta parasitosis genera una grave desnutrición en la abeja productora de miel y,
como consecuencia, la muerte prematura de éstas. La colonia (al menos en los
climas templados) sufre esta enfermedad principalmente en el otoño y primavera,
siendo en el ámbito productivo generadora de importantes pérdidas (Higes et al.,
2008).
Hasta el año 1993 y publicado en 1995, el organismo causal de esta patología
eran Nosema apis, microsporidio y parásito específico del tracto intestinal de las
abejas melíferas europeas Apis mellífera (Sarlo et al., 2009).
Este concepto se mantuvo hasta el año 1996, cuando se publica la descripción de
2
Se realizaron infestaciones cruzadas demostraron que N. ceranae no solo se
multiplicaba en la abeja europea sino que también lo realiza con una mayor
virulencia. Para el año 2007, se presenta una situación a nivel mundial de la
presencia de este parásito en colonias de A. mellifera destinadas a la producción
con registros para Europa, España, Francia, Italia, Alemania, Dinamarca,
Finlandia, Suiza, Serbia y Grecia; para Asia y Oceanía; Vietnam y Nueva Zelanda.
Para América 3 registros: Estados Unidos, Argentina y Brasil (San Paulo).
Desde el año 1999 el Laboratorio de Artrópodos de la Universidad Nacional de
Mar del Plata cuenta con registros de esta patología que no concordaban
exactamente con los síntomas a nivel de colonia descriptos para N. apis, pero sí
con los presentados recientemente para N. ceranae, mortalidad sin deyecciones y
3
2.0 ANTECEDENTES
2.1 APICULTURA EN MÉXICO
La miel de abeja en México es uno de los productos naturales de mayor
importancia. Nuestro país cuenta con una gran tradición en la producción de miel
de abeja desde hace más de dos siglos (Sagarpa, 2007).
En 2008 se exportaron 30,866 toneladas de miel, de las 55,271 toneladas
producidas en el país, con un valor de 83.8 millones de dólares, cifra record en los
últimos 15 años, siendo sus principales destinos: Alemania, Gran Bretaña, Arabia
Saudita, Suiza, EE.UU. y Japón. México ocupa el tercer lugar como exportador
mundial de miel de abeja y es el quinto productor, después de China, Argentina,
EE.UU y Turquía. El año pasado, de acuerdo con la FAO, la producción fue de
1, 073,017 toneladas en todo el mundo (Álvarez, 2009).
La apicultura mexicana se ubica entre los primeros lugares en el sector pecuario
nacional como generadora de divisas, sobre todo porque el dulce que se produce
en el país es una de las mieles de mejor calidad y más cotizadas en el mundo
(SAGARPA, 2007).
2.2 NOSEMOSIS
La Nosemosis también es conocida como Nosemiasis o Enfermedad de la
desaparición espontánea, es una parasitosis del tracto digestivo de las abejas
adultas, causada por el protozoario Nosema apis Zander y descubierto
4
Apis mellifera. La enfermedad es altamente contagiosa y los daños que ocasiona
pueden ser muy graves cuando el nivel de infección es elevado (Sagarpa, 2002).
2.3 HISTORIA DE LA NOSEMOSIS
Las primeras noticias sobre las enfermedades de las abejas, las reportan algunos
sabios de la antigüedad como Aristóteles, Virgilio, Plinio entre otros, quienes se
ocuparon del problema indicando enfermedades como la nosemosis, la acariosis y
las diarreas (Cornejo y Rossi, 1975).
En la historia de la patología apícola, Pasteur marco un verdadero descubrimiento,
al estudiar la enfermedad del gusano de seda (Bombix mori).Estos estudios
dieron la base a numerosos investigadores en el campo de la Nosemosis de las
abejas, causada por un protozoario de la misma familia y género del que originaba
el mal del gusano de seda (Cornejo y Rossi, 1975).
El primero en observar las esporas del Nosema apis, fue Donhoff en 1857, y en
1909 Zander demostró que las esporas eran la causa de una enfermedad
enzoótica de las abejas a la que denominó nosemiasis (Sagarpa, 1997).
Posteriormente en 1912 se describe la existencia de un protozoario parásito del
tracto intestinal de la abeja adulta y lo denominaron Nosema apis Zander, ello en
honor de este investigador alemán quién en 1909, había ya descrito este parasito
5
Poco después en la Universidad de Wisconsin se realizaron importantes
investigaciones, principalmente el estudio de la correlación entre la esporulación
de Nosema apis Zander y los agentes climáticos.
En 1972 en Brasil se inicio el primer curso de profilaxis y prevención de
enfermedades de las abejas adultas y se realizó la primer curva de esporulación
de Nosema apis Zander para esa zona determinándose la incidencia principal en
primavera (Cornejo y Rossi, 1975).
En cuanto a Nosema ceranae originario de Apis cerana, miembro de los microsporidios descubiertos por Pasteur, fue descrita por primera vez de las
colonias de la abeja melífera de Asia, Apis cerana, causante de la enfermedad
denominada Nosemosis que ataca las abejas adultas.
Desde su descubrimiento en China se ha presentado una distribución mundial muy
rápida y al parecer compite con N. apis, debido a que en la mayoría de los
estudios realizados se encuentra que las abejas están parasitadas por N. ceranae
o bien por el conjunto de N. ceranae y N. apis. Este nuevo parásito produce en las
abejas signos muy parecidos a los que desencadena N. apis aunque se sospecha
la posibilidad de que sea responsable de la sintomatología conocida como
"despoblamiento" o "desabejamiento" de las colmenas (Chen et al., 2009).
Hasta hace unos años se conocía a N. apis como el único agente causal de
Nosemosis en A. mellifera. Pero a partir del año 2005 es detectada Nosema
ceranae en Apis mellifera en Taiwán, España Alemania y E.E.U.U (Sarlo et al.,
6
La característica de Nosema ceranae es despoblamientos de colmenas, esta
característica ya se presentaba en Argentina, por lo que el Laboratorio de
Artrópodos de la Universidad Nacional de Mar del Plata, decidió iniciar
investigaciones en búsqueda de determinar la presencia de este nuevo parasito en
las abejas argentinas. Los resultados preliminares indicaron la posibilidad de tener
este patógeno en Argentina. Poco después el mismo laboratorio realizó un estudio
para la determinación de Nosema ceranae por la técnica de biología molecular y
los resultados obtenidos determinaron que N. ceranae se encuentra ampliamente
distribuido en la región Sudeste de la Provincia de Buenos Aires (Sarlo et al.,
2009).
2.4 EPIZOOTIOLOGÍA
La Nosemiasis se considera la enfermedad de las abejas más diseminada en el
mundo, por lo que se ha encontrado en todos los países donde se practica la
apicultura.
Esta enfermedad es exclusiva de abejas adultas. Se encuentra latente durante
todo el año dentro de las colmenas, y se hace aparente después de períodos de
confinamiento de las abejas dentro de su colmena (lluvias, fríos, vientos, nevadas,
etc.); entre más largo sea el período de encierro, más grave es la manifestación de
la enfermedad. Los apiarios ubicados en lugares húmedos, fríos o con mucha
sombra, suelen tener niveles de infección más altos que los situados en lugares
7 2.5 CICLO BIOLÓGICO DE Nosema spp.
La fase larvaria inicial y final están constituidas por la espora que sirve para la
diseminación de la enfermedad (Figura 1).
Figura 1 .Esporos de Nosema apis Zander observados al microscopio óptico a 40 x.
La infestación se produce por vía oral y el ciclo biológico comienza cuando una
abeja adulta ingiere las esporas de Nosema spp. Al llegar las esporas al ventrículo
(o estómago de las abejas), y debido entre otras causas a que los jugos
estomacales tienen un pH básico, el casquete polar de las esporas se digiere. Al
digerirse el casquete polar comienzan a entrar líquidos en la espora ejerciendo
presiones que causan que el filamento polar se dispare y salga al exterior
perforando las células epiteliales del tubo digestivo. Posteriormente y como causa
de estas presiones, el contenido de la espora se inyectará en las células
8
En el citoplasma de la célula epitelial de la abeja crecerá el esporoplasma de
Nosema spp. y se fusionaran los dos núcleos, transformándose en meronte (célula
madre) que se dividirá asexualmente, originando merozoitos (células hijas), este
proceso se conoce como merogonia. Los merozoitos en un momento determinado
se diferencian en esporontes, donde cada esporonte dará origen a dos
esporoblastos, que una vez maduros darán lugar a una espora. Las esporas serán
vertidas al lumen del tubo digestivo, con lo cual pueden infectar otras células
epiteliales y aumentar la infección de esa abeja o salir al exterior con las heces
(Figura 2).
Figura 2. Ciclo biológico de Nosema spp. Fuente: Pacheco 2008.
9
Si la infestación de las células epiteliales no es detenida (por mejoría del tiempo o
por medio de un tratamiento), las funciones digestivas de la abeja son inhibidas en
dos ó tres semanas, lo que acarrea un debilitamiento progresivo y una muerte
prematura del insecto huésped. El parásito también pasa del tracto digestivo a
otros órganos como los túbulos de Malpighi, tejido adiposo, músculos torácicos,
glándulas hipofaríngeas y ovarios, causando disfunciones en todos estos órganos
(IICA, 2009).
Las obreras nodrizas infectadas producen poca jalea real o dejan de producirla,
mientras que las reinas ponen menos y sus huevos y crías son menos viables.
Todos estos daños provocan una reducción de la población de la colonia, una baja
productividad y cuando el caso es severo, la perdida de la colonia.
El ciclo biológico de Nosema ceranae es similar con la diferencia que no se
produce diarrea en las abejas (Sarlo 2008).
2.6 PATOGENIA
Cuando las abejas no pueden salir de su colmena por varias semanas o meses,
se ven obligadas a defecar sobre los panales contaminándolos con esporas
cuando están enfermas. Los panales son limpiados por las obreras jóvenes, las
cuales adquieren la enfermedad. Las reinas la adquieren con la jalea real
proporcionada por abejas nodrizas enfermas; los zánganos se infectan cuando
10
Efectos nocivos sobre las abejas:
• Altera el metabolismo: hay menor digestión de las proteínas (polen), disminuyen
así las energías (sustancias de reserva) y se reduce su longevidad.
• Se produce atrofia de las glándulas hipofaríngeas, que degeneran y atrofian
prematuramente.
• Sobre la reina: se atrofian los ovarios hasta producir esterilidad (recambio
frecuente de la reina).
• Anemia: se manifiesta como una parálisis, al no tener fuerza para mover las alas
y volar (Tanús 2008).
2.7 DIAGNÓSTICO
Entre las diferentes técnicas de diagnóstico se tienen:
1. Laboratorio. Se diagnostica visualizando esporos ya sea de Nosema apis
Zander o Nosema ceranae en preparación microscópica.
Dado que la Nosemiasis puede confundirse con otras enfermedades, la ayuda del
laboratorio es fundamental para establecer el diagnóstico. El laboratorio debe
reportar si existe la enfermedad y a qué niveles de infección. Los niveles de
infección se establecen de acuerdo con el número de esporas que se hayan
encontrado por abeja analizada. Por lo que la severidad de la enfermedad se
11
Intensidad de la Infección No. de Esporas (millones/Abeja)
Muy ligera 0,01 -1,00 Ligera 1,00 -5,00 Regular 5,00 -10,00
Semisevera 10,00 -20,00 Severa Más de 20,00
Fuente: Cornejo y Rossi (1975).
2. Biología molecular. Caracterización por PCR para diferenciación entre N.
ceranae y N. apis (IICA, 2009).
2.8 TRATAMIENTO
Se han probado muchos fármacos para el tratamiento de la Nosemiasis, pero
pocas han dado resultado. No hay duda de que la mejor opción es el uso de la
fumagilina, pudiendo ser una segunda opción el uso de sulfas (aunque su
efectividad es menor al 60% comparada con la fumagilina). Sin embargo, estos
medicamentos afectan a la salud humana por su residualidad en la miel, por lo que
ha sido prohibido el uso de los mismos. Los tratamientos también implican
medidas de manejo y fumigación del equipo, por lo que resultan costosos; por ello,
sólo se recomienda tratar a las colonias cuando los niveles de infección sean de 5
millones de esporas por abeja (infección regular) o superiores.
Fumagilina: Es un antibiótico que se obtiene del hongo Aspergillus fumigatus, es
12
Nosema-X. La fumagilina es 100% eficaz contra la forma vegetativa de Nosema,
pero no destruye las esporas del parásito, razón por la que la infección no puede
ser del todo eliminada, pero sí controlada.
Se recomienda administrar un jarabe de agua y azúcar que contenga 25 mg del
producto activo por cada litro. Se deben proporcionar 4 litros de jarabe a cada
colonia (100 mg en total) (Sarlo 2005).
Fumigación del equipo.- Los panales procedentes de colonias infectadas, pueden
tratarse con los gases liberados por una dilución de ácido acético al 80% (4 partes
de ácido acético glacial por 1 de agua), los gases de este producto destruyen las
esporas del Nosema apis. El procedimiento consiste en apilar cubos con su
paneles y depositar un trapo empapado con 150 cc (ml) del producto sobre los
cabezales de los bastidores de cada cuerpo de colmena. Luego de una semana
los panales estarán libres de esporas. Estas fumigaciones también controlan las
polillas.
Es importante mencionar que tanto el uso de quimioterápicos como la fumigación
del equipo no tendrán los efectos deseados si no se llevan buenas prácticas de
manejo.
Los tratamientos, fumigaciones y medidas de manejo deben ser continuos en los
criaderos de reinas donde el problema sea enzoótico. El muestreo y diagnóstico
anual de todos y cada uno de los apiarios debe ser una práctica de rutina mientras
13 3.0 SITUACIÓN ACTUAL DE NOSEMOSIS EN MÉXICO
En México el primer reporte de nosemosis se realizo en 1965, 15 años después se
realizo otro estudio donde se obtuvo una prevalencia a nivel nacional de 3.8 % por
lo que no se consideraba una problemática para la apicultura, sin embargo,
estudios realizados en 1990 revelaron una prevalencia de un 7.2 % cifra que se
elevó a un 14.8 % en 1992 y a un 81.8 % en el 2006 (Martínez y Medina, 2009).
La principal problemática que causa la elevada prevalencia de nosemosis es la
presencia del acaro V. destructor, debido a que provoca el debilitamiento de la
colmena (Cisneros 2010).
Reportes de la elevada prevalencia de N. apis en Yucatán, podrían deberse a la
presencia de Nosema ceranae ya que se ha reportado que se encuentra
parasitando a las abejas A. mellifera en gran parte del mundo.
En Yucatán la elevada prevalencia de Nosemosis tiene un comportamiento similar
al descrito en España, aunque aun no existen reportes relacionados con el
despoblamiento de las colonias, lo cual posiblemente se deba a que se cuenta con
la presencia de la abeja africanizada la cual presenta diversos mecanismos de
14
4.0 JUSTIFICACIÒN
Como sabemos, la sanidad es uno de los tres pilares más importantes para tener
una apicultura rentable.
Debido a una falta en el monitoreo de las enfermedades de las abejas no es
posible conocer e identificar las enfermedades que afectan a dicha especie.
Como la nosemosis es una enfermedad que necesita diagnóstico de laboratorio y
no se encuentran datos suficientes para determinar si se hace o no tratamiento, la
realización de esta investigación tiene como principio el identificar y conocer la
frecuencia de nosemosis (N. ceranae o N. apis) en la Región Apícola Golfo Centro
15
5.0 OBJETIVOS
5.1 OBJETIVOS GENERAL
Identificar y conocer la frecuencia de Nosemosis en abejas Apis
mellifera en la región Apícola Golfo centro de México.
5.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Identificación y conteo de esporos de Nosema mediante la técnica Cornejo-Rossi basado en la cámara de Neubauer.
Determinar del nivel y grado de infestación de acuerdo a la escala a partir de la técnica Cornejo y Rossi.
16
6.0 MATERIALES Y MÉTODOS
6.1 Área de estudio
El estudio se realizo en el Laboratorio de ApiZano de la empresa Citrofrut S.A de
C.V donde se realizarán los análisis correspondientes para la identificación de
nosemosis.
La empresa Citrofrut S.A de C.V se encuentra ubicada en el estado de Veracruz,
carretera Perote-Nautla km 120.5, Paso Largo Martínez de la Torre, Veracruz, con las coordenadas geográficas de 20º9´6.86”. Latitud Norte y 96º56´25.46” Longitud
Oeste. Presenta un clima tropical con una temperatura durante el verano de 35ºC
y durante el invierno de 18ºC (Figura 3).
Figura 3.Ubicación de la empresa Citrofrut S.A. de C.V. carretera Perote-Nautla Km 120.5, Paso Largo Martínez de la Torre, Ver.
APIZANO CITROFRUT
17 6.2 MATERIAL Y EQUIPO
Los materiales utilizados se dividen en implementos de laboratorio, equipos
y material biológico.
Implementos de laboratorio y equipo fueron los siguientes:
Pinzas de disección de punta fina.
Pipeta de 0.5 ml.
Mortero de porcelana de 15 cm. De diámetro.
Pistilo.
Cámara de Neubauer.
Porta objetos.
Cubre objetos.
Vaso de precipitado de 100 cc.
Microscopio óptico binocular.
Material biológico. El material utilizado fue:
Muestras de 750 abejas adultas, particularmente abejas pecoreadoras.
18 6.3 OBTENCION DE LAS MUESTRAS
Para la realización de dicho estudio se colectaron 735 abejas obtenidas de
colmenas de 5 apiarios. Se considero que 35 abejas conformarían una
muestra por lo que en total se obtuvieron 21 muestras. Los cinco apiarios
se encuentran localizados en las regiones de, Tlapacoyan, Misantla,
Martínez de la Torre y Veracruz, pertenecientes a la región apícola Golfo
Centro de México.
6.4 COLECTA DE MUESTRA
Para la toma de muestra se debe utilizar frascos de plástico con cierre hermético
de 250 ml. Para la conservación de las muestras se utilizo formol al 4%.
Inicialmente se tapo la piquera con la finalidad de colectar la muestra de abejas
retornantes del pecoreo, ya que estas son las abejas más viejas o de más edad en
donde podemos encontrar con mayor precisión la presencia de este protozoario.
Se sugirió que 35 abejas conformarían una muestra, esto con la finalidad de que
el análisis resulte representativo. Las abejas colectadas se conservaron en 100
ml. de formol al 4 % para su análisis.
6.5 PERIODO DE ESTUDIO
Las muestras colectadas se obtuvieron durante el periodo comprendido entre
19 6.6 METODOLOGÍA
Ya colectadas las muestras, se comenzaron a analizar en el Laboratorio de
ApiZano.
Se sacan las 35 abejas del frasco, posteriormente con las pinzas de disección
de punta fina se va separando el abdomen del tórax de cada abeja, los cuales se
fueron depositando en un mortero de porcelana previamente lavado y enjuagado
con agua destilada. Una vez obtenidos los 35 abdómenes y colocados en el
mortero, se procedió a realizar el macerado con el pistilo, agregando 7 cc. de agua
destilada. Posteriormente el macerado se filtro en un colador de malla metálica de
1 mm por 1 mm.
El filtrado obtenido del macerado se guardo en un frasco de 40 ml. Se realizo el
mismo procedimiento para las 20 muestras restantes.
Para la identificación de las esporas se utilizo la cámara de Neubauer y un
cubreobjetos, la observación se realizo directamente en la cámara.
La cámara debe estar bien limpia, debe ser enjuagada con agua destilada y
secarla.
Se homogeniza el filtrado que se obtuvo del macerado; con la pipeta de 0.5 ml se
toma un poco del filtrado y se coloca una gota sobre los retículos de la cámara y
se coloca un portaobjetos.
Todas las muestras se observaron al microscopio optico a 10 x y posteriormente
20
Para realizar la cuantificación se procede a contar la cuadricula de la cámara de
Neubauer de la siguiente forma.
Se debe primero comentar que cada retículo, es un cuadrado de 1 mm², el cual se
halla dividido en 16 cuadros más pequeños. Según Cornejo Y Rossi (1975) se
contaràn los esporos que se observan en 40 cuadritos de los mas pequeños, los
cuales corresponden a 2 ½ cuadrados de los grandes. Se recomienda no hacer
menos de 3 recuentos para sacar el promedio y disminuir así el error. El resultado
se multiplicará por 10,000 y esta será la cantidad de esporos por mm³ obtenidos
(Cuadro 1).
No se cuentan los esporos encontrados en la línea inferior e izquierda de los
cuadros ni los que están en las líneas que separan los recuadros.
Cuadro 1. Determinación del grado y nivel de infestación de Nosema spp.
VALORACIÓN EN GRADO DE INFECCION
Nº DE ESPORAS/MM3 NIVEL DE INFESTACIÓN
1 10.000 a 100.000 MUY LEVE
2 100.000 a 600.000 LEVE
3 600.000 a 800.000 MEDIO
4 800.000 a 1.000.000 GRAVE
21
7.0 RESULTADOS Y DISCUSIÓN
De acuerdo al análisis realizado en laboratorio solo se identificaron esporos en 1
de las 21 muestras obtenidas. (Cuadro 2).
La muestra positiva pertenece al apiario muestreado en la localidad de Misantla.
Una vez identificado los esporos se procedió al conteo para conocer el grado de
infestación.
De acuerdo a la técnica de conteo de esporos según Cornejo Rossi (1975), el
número de esporos contados fue de 6.000/mm³.
Obtenido este resultado el grado de nosemosis encontrados en la muestra no fue
superior a 1, que equivale a un nivel de infección muy leve (dentro de una escala
de 1 a 5, basada en la valoración establecida por Cornejo y Rossi (1975).
Esto nos indica que la muestra positiva representa el 4.6 % del total de las
muestras analizadas. Mientras que en el 95 % de las muestras no hay presencia
de la enfermedad.
El 95 % de las muestras negativas observadas al microscopio solo se observaron
granos de polen.
Pacheco (2008) menciona que dentro de los múltiples factores predisponentes a la
esporulación las condiciones ambientales y el manejo de las colmenas son las
22
Cuadro 2. Numero de muestras y grado de infestación.
Municipio Numero de apiarios muestreados Numero de muestras Numero de muestras positivas Grado de infestación Nivel de infestación Veracruz 1 7 0 - - Tlapacoyán 1 5 0 - -
MIsantla 2 6 1 1 Muy leve
Martínez de la torre
1 3 0 - -
Otro factor preventivo muy importante es el recambio de reinas en cada colmena,
es una actividad periódica que va modificando los patrones fenotípicos, así
también, como medio para evitar la caída en la efectividad de postura de huevos.
Los apicultores de estos apiarios realizan una revisión constante de sus colmenas
y realizan tratamientos periódicos contra la varroasis. (Martínez y Medina, 2009)
nos dicen que la principal problemática que causa la elevada prevalencia de
nosemosis es la presencia del acaro V. destructor, debido a que provoca el
debilitamiento de la colmena.
Molina et al. (1990),citado por Pacheco (2008) señala que la tendencia estacional
de la infección exhibe niveles bajos durante el verano, una pequeña presencia en
otoño y una subida lenta de la infección durante el invierno, aumentando en
23
Es importante realizar un monitoreo periódico sobre la nosemosis ya que
recientemente se ha detectado Nosema ceranae y esta ha estado parasitando a
Apis mellifera en gran parte del mundo.
Pese a que no existe un programa de monitoreo para diagnosticar la nosemosis
en esta región, las constantes asesorías que reciben los apicultores por parte de
los médicos veterinarios de la empresa ApiZano sobre la importancia de la
sanidad, el manejo adecuado, la genética y la nutrición en las colmenas le ha
ayudado al apicultor a mantener colmenas fuertes y en bajos niveles de incidencia
de enfermedades.
Otro factor importante es el clima de esta región ya que los efectos de nosemosis
se consideran poco importantes en los climas tropicales y subtropicales, a
diferencia de los países con climas templados, donde la esporulación se ve
estimulada por las temperaturas y humedad predominantes. Además FRIES et al.
(2003) citado por Pacheco (2008) señalan que no hay suficiente información
disponible para evaluar el impacto de este parásito en climas cálidos.
La época de muestreo es otra variante importante para conocer el nivel de
infestación de Nosema ya que el muestreo se realizo a finales de primavera y
principios de verano, siendo que los mayores índices de la enfermedad se
24
8.0 CONCLUSION
Se logró identificar la nosemosis solo en colmenas pertenecientes a la localidad
25
9.0 BIBLIOGRAFIA
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