UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

TRABAJO DE INVESTIGACIÓN II

EFECTO DEL DECOCTO DE Gentianella alborosea “Hercampuri” SOBRE NIVELES SÉRICOS DE PROTEÍNAS TOTALES Y ALBÚMINA EN

Rattus norvegicus var. albinus

PARA OPTAR EL GRADO DE ACADÉMICO DE:

BACHILLER

EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA

AUTOR:

- Baltodano Lavado, Eleodoro Reynaldo. ASESORA:

- Dra. Elena Mantilla Rodríguez

TRUJILLO – PERÚ

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ÍNDICE Pag. Resumen……… i Abstract………. ii I. Introducción…….…….…….….…….…….…….…….…….………..1

II. Material y Método…….…….….…….…….…….…….…….…...6

III. Resultados…….…….…….…….….…….…….…….…….………15

IV. Discusión…….…….…….…….….…….…….…….…….……….25

V. Conclusiones...……….…….…….…….…….………28

VI. Sugerencias………...29

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RESUMEN

El presente trabajo de investigación titulado “Efecto del decocto de Gentianella

alborosea “Hercampuri” sobre niveles séricos de Proteínas totales y Albúmina en Rattus norvegicus var. albinus”, tiene como objetivo principal determinar si la administración

del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” provoca cambios significativos sobre los niveles séricos de Proteínas totales y Albúmina en Rattus norvegicus var

albinus. Se realizó un estudio experimental in vivo siguiendo al diseño clásico de

estímulo creciente para el que se utilizó un grupo control y dos grupos problemas con controles previos y sucesivos. Luego los especímenes en estudio recibieron la administración del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” a la dosis de 150 y 300 mg/Kg p.c.por vía oral durante 21 días. El análisis fue desarrollado en tres etapas: la preparación de la especie vegetal, tratamiento de los animales y la evaluación y determinación de las pruebas bioquímicas en estudio. A los resultados obtenidos en estos ensayos, se le aplicó el tratamiento estadístico respectivo tales como: Análisis de Varianza y la Prueba de Duncan (alfa = 0,05). Resultados: No se encontró diferencia significativa de proteínas totales, albúmina y globulina (p > 0.05) en los tres grupos de investigación. Conclusión: La administración de 21 días del decocto de Gentianella

alborosea, no generó cambios significativos en los niveles de proteínas totales, albúmina

y globulina en Rattus norvegicus var. albinus.

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ABSTRACT

This paper titled Effect of Gentianella alborosea “Hercampuri" decoct on serum total protein and albumin in Rattus norvegicus var. albinus main objective is to determine whether administration of Gentianella alborosea “Hercampuri" decoct significantly changes in serum total protein and albumin in Rattus norvegicus var albinus. Experimental study was performed in vivo following the classical design for increased stimulation that used a control group and two groups of problems with previous and successive checks. Then the specimens were studied decoct administration of

Gentianella alborosea “Hercampuri" a dose of 150 and 300 mg / kg p.c. orally for 21

days. The analysis was developed in three stages: preparation of the plant species, treatment of animals and the assessment and determination of biochemical tests in the study. The results obtained in these trials, treatment was applied to the respective statistics such as ANOVA and Duncan test (alpha = 0.05). Results: No significant difference was found between total protein, albumin and globulin (p> 0.05) in the three research groups. Conclusion: The 21-day administration of Gentianella alborosea decoct, did not produce significant changes in levels of total protein, albumin and globulin Rattus norvegicus var. albinus.

Keywords: Gentianella alborosea, Total protein and Albumin.

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El conocimiento de las plantas medicinales se extiende a cualquier parte del mundo, donde el hombre tradicionalmente ha necesitado de estos seres para curar sus enfermedades. Nadie sabe exactamente donde se utilizaron plantas medicinales por primera vez. La búsqueda de algún remedio fue algo que se dio en todas las culturas a la vez, fruto del deseo del hombre de sanar por cuestión mágica – religiosa o de algún preparado que le proporcionase una mayor felicidad temporal. La mayoría de las veces los descubrimientos fueron simplemente resultado de las búsqueda de nuevos alimentos. Los antepasados tenían que comprobar si las nuevas especies eran comestibles, lo que les llevaba descubrir en su propio cuerpo que muchas de ellas eran evidentemente comestibles; otros venenosos, y otros producían un efecto diferente: aumentaban el sudor, eliminaba el dolor de las articulaciones, calmaba la fiebre, etc. Así mezcla de magia y religión, mezcla de necesidad y casualidad, de ensayo y de error, el paso de las diferentes culturas ha creado todo un conocimiento de remedios vegetales que han constituido la base de la medicina moderna1.

La fitoterapia, nombre que se aplica al uso medicinal de las plantas, nunca ha dejado de tener vigencia. Muchas de las especies vegetales utilizadas por sus virtudes curativas entre los antiguos egipcios, griegos y romanos pasaron a formar parte de la farmacopea medieval, que más tarde se vio enriquecida por el aporte de los conocimientos del Nuevo Mundo. Dichas plantas medicinales y los remedios que entonces se utilizaban se siguen usando hoy en día y constituyen un recurso valioso en los sistemas de salud de los países en desarrollo. Aunque no existen datos precisos para evaluar la extensión del uso global de estas especies, la Organización Mundial de la Salud (OMS) ha estimado que más del 80% de la población mundial utiliza, rutinariamente, la medicina tradicional para satisfacer sus necesidades de atención primaria de salud y que gran parte de los tratamientos tradicionales implica el uso de extractos de plantas o sus principios activos. De acuerdo a la OMS (1979) una planta medicinal es definida como cualquier especie vegetal que contiene sustancias que pueden ser empleadas para propósitos terapéuticos o cuyos principios activos pueden servir de precursores para la síntesis de nuevos fármacos 2,18.

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Estas plantas también tienen importantes aplicaciones en la medicina moderna. Entre otras, son fuente directa de agentes terapéuticos, se emplean como materia prima para la fabricación de medicamentos semisintéticos más complejos, la estructura química de sus principios activos pueden servir de modelo para la elaboración de drogas sintéticas y tales principios se pueden utilizar como marcadores taxonómicos en la búsqueda de nuevos medicamentos. Además la reconocida dependencia creciente del uso de sistemas de medicina alternativa para reducir costes y conseguir objetivos de asistencia sanitaria ha hecho que gobiernos de todo el mundo aumenten la inversión en medicinas complementarias y alternativas 1,2, 3,18.

El Perú es considerado un país mega diverso por ser uno de los primeros en número de especies de plantas de propiedades conocidas y utilizadas por la población; alberga cerca de 80 mil especies de flora, de las cuales unas dos mil son utilizadas por los nativos con fines curativos. De la flora se calculan un 10% total del mundial. Tiene una vasta reserva en plantas medicinales (4400 especies), ornamentales (1600 especies) y plantas alimenticias (unas 1200 especies). Es depositario de importantes recursos fitogenéticos; diversas especies de plantas contienen un enorme potencial de importancia estratégica para la industria farmacológica 4.

La familia Gentianaceae consiste en unos 75 géneros y aproximadamente 1000 especies de distribución cosmopolita, pero más común en regiones templadas y subtropicales y en pequeñas montañas tropicales. El género más grande es Gentianella, con 400 especies 4_.

El Hercampuri (Gentianella alborosea) es una planta oriunda de la sierra del Perú, crece entre los 3,500 y 4,300 metros sobre el nivel del mar. Desde los tiempos de Imperio Incaico, es usado para aliviar dolores estomacales y combatir las fiebres producidas por el paludismo. El extracto acuoso de la planta entera ha sido usado en la medicina tradicional peruana como un remedio para: la hepatitis, el tratamiento de la obesidad y como un colagogo. Investigaciones realizadas sugieren que es un gran regulador del metabolismo de las grasas, motivo por el cual se le utiliza para ayudar a reducir la obesidad. Aún no se conocen con certeza los principios activos ni el mecanismo de acción de la actividad hipocolesterolémica del Hercampuri. Se cree que sus efectos se deben a la gran cantidad de principios amargos que contiene la planta, los cuales estimularían la secreción de los ácidos biliares y como consecuencia esto

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disminuye los niveles del colesterol LDL, conocido como malo, movilizándolos para ser transformados en ácidos biliares. Su acción colagoga facilita la secreción de bilis y como colerético ayuda a la excreción de la misma. Así también actúa como desintoxicante y diurético, es usado para regular la presión sanguínea, regular la circulación y reduce los riesgos de problemas cardiovasculares Esta especie contiene sustancias amargas de tipo glucosídicas, como eritaurina (sustancia amarga de tipo glucosídica), amarogencina y genciopicrina, eritrocentaurina, genciopicrósidos (lactonas insaturadas), alcaloides, saponinas, taninos, resinas, hemicelulosa y minerales; asimismo, aceites volátiles, azúcares, mucílagos, ácido genciánico, terpenoides y entre ellos los monoterpenos del pentano-secoiridoides (secologanósido, amarosverina, amarogentina) y sesterpenoides (alborosin). Además la presencia de sales de aluminio, calcio, potasio, magnesio, sodio y cloro 5,6,20.

Las proteínas son un constituyente muy importante de las células y los tejidos del cuerpo humano. Se componen de aminoácidos. Hay diferentes tipos de proteínas con diferentes funciones, son así proteínas los enzimas, algunas hormonas, la hemoglobina, el LDL (transportadora de colesterol), el fibrinógeno, el colágeno, las inmunoglobulinas, etc. Estas se pueden separar en dos grandes grupos la Albúmina y las globulinas. La albúmina es la proteína de más concentración en la sangre. La albúmina transporta muchas moléculas pequeñas (bilirrubina, progesterona, y medicamentos), y tiene también la función de mantener la presión sanguínea ya que favorece la presión osmótica coloidal para mantener líquidos en el torrente sanguíneo y que no pasen a los tejidos, manteniendo un equilibrio. Las globulinas se pueden

dividir en alfa-1, alfa-2, beta y gamma globulinas.

La albúmina representa el 60% de las proteínas que contiene el suero, el resto son las globulinas. La alteración de la concentración en sangre de estas proteínas, puede indicar la presencia de anomalías o patologías en el cuerpo humano 7,17,19.

Al igual que cualquier droga que entra a nuestro organismo; cada persona, asimila las plantas medicinales de cierta manera, diferente a otros individuos. El consumo en cantidades y/o proporciones erróneas de éstas, puede afectar seriamente nuestra salud, puesto que conlleva un latente riesgo de intoxicación para nuestro organismo al asimilar las plantas ingeridas. Estos problemas prioritarios de salud, deberían encontrarse bajo un mayor control por parte de los organismos y centros de ensayos

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estatales y municipales correspondientes, como medida de protección a los consumidores 4,8_.

En el Perú, el Instituto Nacional de Salud (Dependencia del Ministerio de Salud), es la entidad que se encarga de proponer políticas y normas, promover, desarrollar y difundir la investigación científica-tecnológica y brindar servicios de salud en los campos de salud pública, control de enfermedades transmisibles y no transmisibles, alimentación y nutrición, producción de biológicos, control de calidad de alimentos, productos farmacéuticos y afines, salud ocupacional, protección del medio ambiente y salud intercultural, para contribuir a mejorar la calidad de vida de la población 8.

El uso creciente de plantas medicinales en estos últimos años, ha provocado el ingreso de una gran variedad de nuevos productos que han sido lanzadas al mercado, dentro de ellos, el hercampuri, que diariamente es usado por muchas personas para adquirir algún beneficio. Ello es lo que motiva a conocer los efectos del mismo sobre los niveles séricos de Proteínas totales y Albumina, ya que éste es producto de consumo de la población de nuestro país, y además porque la existencia de una variación de estos parámetros, conduce a diversas complicaciones en el organismo; así por ejemplo en un estado de hipoproteinemia se manifestaría: extravasión de líquidos, aumento de la fracción libre de fármacos, entre otros; caso contrario, una hiperproteinemia, traería consigo la presencia de enfermedades cardiacas, lesiones renales, etc.. Además permitirá plantear algunas sugerencias y recomendaciones sobre el uso de este nuevo producto, y a la vez concientizar sobre la importancia del manejo adecuado de productos naturales destinados al consumo, si se desea que su contribución al bienestar de la creciente población sea sostenible 10,12.

El presente estudio estuvo orientado a determinar el efecto del decocto de Gentianella

alborosea “Hercampuri” sobre los niveles séricos de Proteínas totales y Albúmina en Rattus norvegicus var albinus

Por todo lo expuesto se planteó el siguiente problema:

¿Cuál es el efecto del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” sobre los niveles séricos de Proteínas totales y Albúmina en Rattus norvegicus var albinus?

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Los objetivos trazados para el presente estudio fueron los siguientes:

OBJETIVO GENERAL:

 Determinar si la administración del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” provoca cambios significativos sobre los niveles séricos de proteínas totales y albúmina en Rattus norvegicus var albinus.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

 Determinar el efecto del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” sobre los niveles séricos de proteínas totales en Rattus norvegicus var

albinus.

 Determinar el efecto del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” sobre los niveles séricos de albúmina en Rattus norvegicus var albinus.

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MATERIAL Y METODO 1. MATERIAL. 1.1. MATERIAL BIOLÓGICO. a. Animales de experimentación:

Se emplearon 36 ejemplares de la especie Rattus norvegicus var.

albinus, aparentemente sanos, machos de 3 - 4 meses de edad, con peso

corporal de 200 a 250 g, procedentes del Instituto Nacional de Salud, Chorrillo-Lima. Los especímenes fueron sometidos a similares condiciones ambientales y de alimentación por 15 días antes de iniciar el estudio.

b. Vegetales:

Se emplearon aproximadamente 1.5 Kg. de hojas y tallos de

Gentianella alborosea “hercampuri”, procedente del Distrito:

Atuncolla, Provincia de Puno y Departamento de Puno. N° de Lote: 2010. La muestra fue obtenida del centro autorizado en la venta de medicina homeopática “Shangri – La”, ubicado en Jr. Bolívar N°186 - Trujillo.

La especie en estudio fue identificada en el Herbarium Truxillensis de la Universidad Nacional de Trujillo, según el sistema de clasificación Filogenético de A. Engler (1994).

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División : Angiospermae Clase : Dicotyledoneae Subclase : Metachlamydeae Orden : Campanulales Familia : Asteraceae Genero : Gentianella Especie : alborosea

Nombre común : hercampuri, hercampue, hircampure, hilcampuri, té amargo, té de Chavín, harcapura, hir-campurek, hjircan purek, té indio. 1.2. MATERIAL DE LABORATORIO. 1.2.1. MATERIAL DE VIDRIO:  Probetas 100 ml  Vasos de precipitación 150, 250 ml  Pipetas de 5 y 10 ml  Tubos de ensayo de 15 ml  Vasos de precipitación de 50 y 100 ml  Varillas de vidrio  Placa de porcelana 1.2.2. EQUIPOS:

 Balanza analítica Sartorius Ag Gottingen PT 310 _{Cocina eléctrica Glovana S 001}

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1.2.3. REACTIVOS:

 Solución salina fisiológica al 0.9%

 Kit comercial Proteínas Totales (Wiener Lab)  Kit comercial Albúmina (Wiener Lab)

1.2.4. FARMACOS:

 Ketamina. Ampolla

1.2.5. OTROS:

 Agua destilada

 Sondas nasogástricas Medex N° 2  Algodón  Alcohol de 70°  Jeringas  Jaulas metálicas  Jeringas de 5 ml  Jeringas de 1 ml 2. MÉTODO.

2.1. Tipo y Diseño de Estudio:

Se realizó un estudio experimental in vivo siguiendo al diseño clásico de estímulo creciente para el que se utilizó un grupo control y dos grupos problemas con controles previos y sucesivos. Luego los especímenes de

Rattus norvegicus var. albinus recibieron la administración del decocto

de Gentianella alborosea “hercampuri” a la dosis de 150 y 300 mg/Kg p.c. por vía oral durante 21 días.

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2.2. Preparación de la especie vegetal:

2.2.1. Recolección y selección de la especie vegetal:

Después de adquirir las hojas y tallos de Gentianella alborosea, se procedió a realizar una inspección visual para verificar el buen estado de la superficie. Se seleccionaron aquellas hojas y tallos en buenas condiciones, luego fueron lavadas y secadas.

2.2.2. Preparación del decocto:

Para la preparación del decocto se partió de la dosis recomendada en medicina popular: 2 vasos (250 mL) para una persona de 70 Kg del decocto: 50 g de Gentianella alborosea en 1L de agua. Se preparó el decocto con las hojas y tallos, obteniéndose un volumen promedio de 95.2 mL a partir de los 5 g. Del decocto obtenido, se tomó 5 mL para llevar a sequedad hasta peso constante, obteniéndose un peso promedio de extracto seco de 57.2 mg/mL de decocto. Se calculó la dosis en peso del extracto seco del tallo y raíz obteniéndose 204 mg/Kg

p.c.11.

2.3. Tratamiento de los Animales:

2.3.1. Alimentación de los animales de experimentación:

Los especímenes fueron alimentados con una dieta balanceada a base de maíz, cebada y purina durante el desarrollo del estudio.

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2.3.2. Distribución de los grupos en experimentación:

Los animales de experimentación fueron distribuidos aleatoriamente en 3 grupos, identificados y distribuidos de la siguiente manera:

 Grupo I (Grupo Control): Formado por 12 animales de experimentación a los cuales se les realizó una lectura basal de los parámetros en estudio y posteriormente, se les administró 1 mL de solución salina fisiológica dos veces al día (en ayunas y por las tardes) vía oral durante 21 días, finalizado este tiempo se cuantificó las proteínas totales y albúmina (lectura final).

Control

Grupo I: Lectura Basal 21 días Lectura Final

 Grupo II (Problema 1): Formado por 12 animales de experimentación a los cuales se les realizó una lectura basal de los parámetros en estudio y posteriormente, se les administró el decocto de Gentianella alborosea a una dosis menor de 150 mg/Kg dos veces al día (en ayunas y por las tardes) vía oral durante 21 días, finalizado este tiempo se cuantificó las proteínas totales y albúmina (lectura final).

Estimulo X

Grupo II: Lectura Basal 21 días Lectura Final

Donde:

Estímulo X: Se le administró 150 mg/Kg del decocto de

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 Grupo III (Problema 2): Formado por 12 animales de experimentación a los cuales se les realizó una lectura basal de los parámetros en estudio y posteriormente, se les administró el decocto de Gentianella alborosea a una dosis mayor de 300 mg/Kg dos veces al día (en ayunas y por las tardes) vía oral durante 21 días, finalizado este tiempo se cuantificó las proteínas totales y albúmina (lectura final).

Estimulo 2X

Grupo III: Lectura Basal 21 días Lectura Final

Donde:

Estimulo 2X: Se le administró 300 mg/Kg del decocto de

Gentianella alborosea por vía oral

2.3.3. Evaluación de las pruebas bioquímicas:

A todos los animales de experimentación se les sometió a ayuno de 10 a 12 horas para determinar los niveles séricos de proteínas totales y albúmina.

2.3.4. Determinación de las pruebas bioquímicas: A) Obtención de la muestra:

Se obtuvo 1 mL de sangre haciendo un corte en el extremo distal de la cola del animal de experimentación previamente anestesiado con Ketamina a la dosis de 120 mg/Kg p.c. La muestra de sangre se recolecto en tubos

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heparinizados. El suero obtenido por centrifugación a 1500 rpm durante 15 min. se utilizó para determinar las proteínas totales y albúmina 15.

B) Procesamiento de la muestra:

Determinación de los niveles séricos de proteínas totales: Fundamento: Los enlaces peptídicos de las proteínas

reaccionan con el ión cúprico, en medio alcalino, para dar un complejo color violeta con máxima absorción a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la concentración de proteínas totales presentes en la muestra.

Procedimiento: Se rotularon 3 tubos de ensayo como

“muestra”, “patrón” y “blanco reactivo”. Posteriormente se añadió a cada tubo:

Tubo blanco Tubo estándar Tubo muestra Reactivo Biuret 2 ml 2 ml 2 ml Agua destilada 20 ul - - Estándar - 20 μl -

Muestra - - 20 μl

Se mezcló y se dejó incubar los tubos por 15 minutos a una temperatura de 37°. Posteriormente se hizo la lectura de la absorbancia a una longitud de onda de 550 nm en el espectrofotómetro. Valores normales: 4.70 – 8.15 g/dL

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Determinación de los niveles séricos de albúmina: Fundamento: La albúmina reacciona específicamente sin

separación previa con la forma aniónica de la Bromo Cresulfon Ftaleina (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3.8. El aumento de absorbancia a 625 nm respecto del blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albúmina presente en la muestra.

Procedimiento: Se rotularon 3 tubos de ensayo como

“muestra”, “patrón” y “blanco reactivo”. Posteriormente se añadió a cada tubo:

Tubo blanco Tubo estándar Tubo muestra Reactivo BCF 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml Estándar - 10 μl -

Muestra - - 10 μl

Se mezcló y se dejó incubar los tubos por 10 minutos a una temperatura entre 15 y 28°. Posteriormente se hizo la lectura de la absorbancia a una longitud de onda de 625 nm en el espectrofotómetro. Valores normales: 2.70 – 7.10 g/dL 13,16.

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2.4 Análisis Estadístico:

Para determinar la variabilidad interindividual e intergrupal de los efectos en los grupos problema y control se aplicó el Análisis de Varianza y para determinar la significancia estadística entre los grupos problema y el control se aplicó el Método de Duncan con un nivel de significancia de 0.05 14.

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TABLA 1: Determinación basal y final de los niveles séricos de Proteínas totales, Albúmina y Globulinas en Rattus norvegicus var albinus. Grupo I (Grupo control)

ANIMAL DE ANÁLISIS

(N°)

PROTEÍNAS TOTALES (g/dl) ALBÚMINA (g/dl) GLOBULINA (g/dl) Lectura Basal Lectura Final Lectura Basal Lectura Final Lectura Basal Lectura Final 1 5,4 6,3 3,8 3,1 1,6 3,2 2 5,8 6,2 3,9 2,7 1,9 3,5 3 5,4 6,3 3,7 3,2 1,7 3,1 4 5,6 5,5 3,9 2,9 1,7 2,6 5 5,4 5,9 3,4 2,9 2 3 6 5,9 6,3 3,9 2,7 2 3,6 7 5,7 6,2 3,9 2,9 1,8 3,3 8 5,5 5,9 3,8 3,1 1,7 2,8 9 5,8 6,3 3,9 3 1,9 3,3 10 5,3 5,5 3,6 3,1 1,7 2,4 11 5,4 6,3 3,4 2,9 2 3,4 12 5,8 6,3 3,9 2,8 1,9 3,5 Promedio X 5,58 6,08 3,76 2,94 1,83 3,14 Leyenda:

Lectura Basal: Antes de la administración de solución salina fisiológica. Lectura Final: Post- administración por 21 de solución salina fisiológica.

GRÁFICO 1: Determinación basal y final de los niveles séricos de Proteínas totales en

Rattus norvegicus var albinus. Grupo I (Grupo control)

0 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Co ncent ra ció n ( g /dl ) N° de Muestra

Determinación de Proteínas Totales: Grupo Control

Basal Final

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GRÁFICO 2: Determinación basal y final de los niveles séricos de Albúmina en Rattus

norvegicus var albinus. Grupo I (Grupo control)

GRÁFICO 3: Determinación basal y final de los niveles séricos de Globulinas en Rattus

norvegicus var albinus. Grupo I (Grupo control)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 N° de Muestra Co ncent ra ció n ( g /dl )

Determinación de Albúmina: Grupo Control

Basal Final 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Co ncent ra ció n ( g /dl ) N° de Muestra

Determinación de Globulinas: Grupo Control

Basal Final

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TABLA 2: Determinación basal y final de los niveles séricos de Proteínas totales, Albúmina y Globulinas en Rattus norvegicus var albinus. Grupo II (Grupo Problema 1)

(N°)

PROTEINAS TOTALES (g/dl) ALBÚMINA (g/dl) GLOBULINA (g/dl) Lectura

Basal Lectura Final

Lectura Basal

Lectura

Final Lectura Basal

Lectura Final 1 6,2 5,6 4,2 2,9 2 2,7 2 5,6 6,2 4 2,9 1,6 3,3 3 5,6 6,5 3,6 2,7 2 3,8 4 5,9 5,5 3,7 3 2,2 2,5 5 5,6 5,4 3,6 2,8 2 2,6 6 6 4,9 3,8 2,9 2,2 2 7 6,1 6,4 3,8 3,1 2,3 3,3 8 6,2 5,4 3,9 2,8 2,3 2,6 9 5,9 5,6 4,1 2,6 1,8 3 10 6,2 6,3 4,1 3 2,1 3,3 11 5,6 6,6 3,6 3,3 2 3,3 12 6,2 5,5 4,1 3,1 2,1 2,4 Promedio X 5,93 5,83 3,88 2,93 2,05 2,90 Leyenda:

Lectura Basal: Antes de la administración del decocto.

Lectura Final: Post- administración por 21 días del decocto a 150mg/Kg p.c

Rattus norvegicus var albinus. Grupo II (Grupo Problema 1)

0 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Co ncent ra ció n ( g /dl ) N° de Muestra

Determinación de Proteínas Totales: Grupo Problema 1

Basal Final

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GRÁFICO 5: Determinación basal y final de los niveles séricos de Albúmina en Rattus

norvegicus var albinus. Grupo II (Grupo Problema 1)

GRÁFICO 6: Determinación basal y final de los niveles séricos de Globulinas en Rattus

norvegicus var albinus. Grupo II (Grupo Problema 1)

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Co ncent ra ció n ( g /dl ) N° de Muestra

Determinación de Albúmina: Grupo Problema 1

Basal Final 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Co ncent ra ció n ( g /dl ) N° de Muestra

Determinación de Globulinas: Grupo Problema 1

Basal Final

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TABLA 3: Determinación basal y final de los niveles séricos de Proteínas totales, Albúmina y Globulinas en Rattus norvegicus var albinus. Grupo III (Grupo Problema 2)

(N°)

PROTEINAS TOTALES (g/dl) ALBÚMINA (g/dl) GLOBULINA (g/dl) Lectura Basal Lectura Final Lectura Basal Lectura Final Lectura Basal Lectura Final 1 6,1 6 3,8 3,1 2,3 2,9 2 6,2 6,4 3,8 2,9 2,4 3,5 3 5,5 6,1 3,8 3,1 1,7 3 4 5,4 6,4 3,6 3,1 1,8 3,3 5 5,5 5,9 3,7 3,1 1,8 2,8 6 5,4 6,3 3,7 3 1,7 3,3 7 6,2 5,8 4 3,1 2,2 2,7 8 5,5 5,7 3,6 2,9 1,9 2,8 9 5,4 5,8 3,8 3,1 1,6 2,7 10 6,1 5,9 3,9 3 2,2 2,9 11 5,4 5,8 3,7 2,8 1,7 3 12 6,2 6,1 4 2,9 2,2 3,2 Promedio X 5,74 6,02 3,78 3,01 1,96 3,01 Leyenda:

Lectura Basal: Antes de la administración del decocto.

Lectura Final: Post- administración por 21 días del decocto a 300mg/Kg p.c.

Rattus norvegicus var albinus. Grupo III (Grupo Problema 2)

0 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Co ncent ra ció n ( g /dl ) Concentración (g/dl)

Determinación de Proteínas Totales: Grupo Problema 2

Basal Final

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GRÁFICO 8: Determinación basal y final de los niveles séricos de Albúmina en

GRÁFICO 9: Determinación basal y final de los niveles séricos de Globulinas en

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Co ncent ra ció n ( g /dl ) N° de Muestra

Determinación de Albúmina: Grupo Problema 2

Basal Final 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 C o nce nt ra ció n (g /dl) N° de Muestra

Determinación de Globulinas: Grupo Problema 2

Basal Final

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TABLA 4: Análisis de varianza de Proteínas totales, Albúmina y Globulina antes y después de la administración del decocto de Gentianella alborosea en Rattus norvegicus var. albinus.

VARIABLE GRUPO N° BASALES FINALES (21 días de adm.) P X±D.S. X±D.S. Proteínas Totales (g/dL) Grupo I 12 5,58±0,21 6,08±0,31 0,35 Grupo II 12 5,93±0,26 5,83±0,55 Grupo III 12 5,74±0,37 6,02±0,24 Albúmina (g/dL) Grupo I 12 3,76±0,19 2,94±0,16 0,24 Grupo II 12 3,88±0,22 2,93±0,19 Grupo III 12 3,78±0,13 3,01±0,11 Globulina (g/dL) Grupo I 12 1,83±0,14 3,14±0,38 0,06 Grupo II 12 2,05±0,20 2,90±0,51 Grupo III 12 1,96±0,28 3,01±0,26

En la tabla se muestran los valores promedio (X), desviación estándar (D.S) y el análisis de varianza (P) de las determinaciones basales y finales para Proteínas totales, Albúmina y Globulina en el grupo control y los dos grupos problema.

Leyenda:

Grupo I: Grupo Control

Grupo II: Hercampuri 150 mg/Kg Grupo III: Hercampuri 300 mg/Kg

P<0,05: significancia estadística ANOVA: Análisis de Varianza

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TABLA 5: Análisis DUNCAN para Proteínas totales, después de la administración del decocto de Gentianella alborosea en Rattus norvegicus var. albinus.

Prueba de Duncan Tratamiento ni alfa = 0,05 Grupo I Grupo II Hercampuri 150 mg/Kg 12 5,825 Control 12 6,083 Hercampuri 300 mg/kg 12 6,017 Leyenda:

ni: Número de muestras analizadas.

TABLA 6: Análisis DUNCAN para Albúmina, después de la administración del decocto de Gentianella alborosea en Rattus norvegicus var. albinus.

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TABLA 7: Análisis DUNCAN para Globulina, después de la administración del decocto de Gentianella alborosea en Rattus norvegicus var. albinus.

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DISCUSIÓN

Gentianella alborosea (Hercampuri) especie vegetal nativa peruana, actualmenteestá siendo valorada por sus propiedades terapéuticas; y es utilizada para el tratamiento de dolores estomacales y de fiebre amarilla; asimismo, se reportan propiedades: hepatoprotectora, desintoxicante y depurativa, de acción hipoglucemiante (antidiabética) y diurética. También es usado para regular la presión sanguínea, regular la circulación, reducir el peso corporal y el colesterol, actuando como hipocolesterolémico y contra la obesidad. Recientes investigaciones demuestran la eficacia de hercampuri en terapia alternativa para distintas enfermedadessin embargo según la búsqueda en MEDLINE y PUBMED (desde 1960 hasta Febrero del 2011) no existe estudio pre-clínico que haya demostrado su seguridad sobre parámetros bioquímicos en animales de investigación mucho menos en seres humanos 6,8,22.

Las proteínas presentes en el suero son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo. Actúan como elementos estructurales y de transporte. Estas se dividen en: albúminas y globulinas. La albúmina es una proteína sintetizada en el hígado, permanece en circulación unos diecinueve días, hasta que es metabolizada en los tejidos para los que es fuente de aminoácidos. Se encuentra en mayor concentración en el plasma sanguíneo constituyendo el 50-60% del total de las proteínas plasmáticas. Sus funciones más importantes guardan relación con su tamaño, que la mantiene dentro del torrente circulatorio, contribuyendo a transportar moléculas de pequeño tamaño (ácidos grasos, bilirrubina, calcio, progesterona, drogas, etc.). Es la más homogénea, soluble, estable y de mayor movilidad electroforética de todas las proteínas plasmáticas. También es de vital importancia para el mantenimiento de la presión oncótica de la sangre (la presencia de un valor normal de albúmina en sangre impide el pasaje de agua desde la sangre a los tejidos). Las globulinas alfa y beta son las fracciones de proteínas plasmáticas más heterogéneas y están constituidas fundamentalmente por glucoproteínas y lipoproteínas 19,21.

La determinación de proteínas totales es un examen que permite conocer la concentración de proteínas totales en el suero y se realiza para evaluar la posible presencia hiperproteinemia e hipoproteinemia, de enfermedades nutricionales,

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enfermedades del riñón o del hígado, o bien que el cuerpo no absorba bien suficientes proteínas 16.23,24.

En la tablas 1, 2, 3; se muestran los valores de las lecturas basales y finales de Proteínas totales, Albúmina y Globulinas para el grupo control y los dos grupos problema respectivamente. Analizando estos valores con las gráficas correspondientes para cada grupo (graficas 1 – 9), evidenciamos que no existe una variación significativa entre ellos; ya que se encuentran dentro sus parámetros normales; ello corrobora la inexistencia de situaciones que podrían conllevar a graves consecuencias en la salud de las personas. Así por ejemplo, una disminución en los niveles séricos de proteínas (hipoproteinemia), tendría como consecuencias: edemas (por pérdida de la presión oncótica), anomalías en el transporte de moléculas, aumento de la fracción libre de fármacos (exceso de efecto farmacológico), ascitis, derrame pleural, déficit de cicatrización de heridas, etc. Por otro lado, el aumento de estos niveles (hiperproteinemia) conduce a estados tales como: lesiones renales, enfermedades cardiacas, desequilibrio bioquímico en los tejidos (acidosis), artritis, estreñimiento, pérdida de masa ósea (osteoporosis), entre otros 24,25.

Asimismo, en las tablas 4, 5, 6 y 7; se muestra el análisis estadístico realizado a los valores de de Proteínas totales, Albúmina y Globulina en los tres grupos de investigación, post-administración del decocto de Gentianella alborosea. En el primero (Tabla N°4) se muestra los valores promedio, desviación estándar y el análisis de varianza de los proteínas totales, albúmina y globulina de los tres grupos investigados. Analizando los parámetros de Proteínas totales, observamos que no existe una diferencia significativa entre los valores del grupo control y los dos grupos problema (p>0.05). Lo mismo ocurre en los parámetros de Albúmina, no encontrándose variabilidad (p>0.05) entre los valores de los tres grupos de estudio. Estos resultados se corrobora en las tablas posteriores (Tabla 5, 6 y 7) al analizar los datos con la prueba de DUNCAN, donde se evidenció que no existe variabilidad significativa de los parámetros en estudio después de 21 días de administración del decocto de Gentianella

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Ello indica que los resultados tanto del grupo control como de los dos grupos problema, fueron semejantes, lo cual pone en manifiesto que la administración del decocto de

Gentianella alborosea no ha producido cambios significativos en los parámetros de

Proteínas totales, Albúmina y Globulina, ya que estos se encuentran dentro sus rangos normales, con lo que se descarta la posibilidad, respecto a los parámetros estudiados, de que la administración de esta especie por un periodo de 21 días, conduzca a la manifestación de situaciones que podrían afectar a la salud de los consumidores.

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CONCLUSIONES

De los resultados obtenidos del presente trabajo, se llegó a las siguientes conclusiones: - La administración de 21 días del decocto de Gentianella alborosea, no generó

cambios significativos en los niveles séricos de proteínas totales en Rattus

norvegicus var. albinus.

- La administración de 21 días del decocto de Gentianella alborosea, no generó cambios significativos en los niveles séricos de Albúmina en Rattus norvegicus

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SUGERENCIAS

- Se recomienda el uso responsable y cauteloso de este nuevo producto vegetal, ya que en este trabajo se ha demostrado la inexistencia de efectos sobre los niveles de proteínas por un periodo de 21 días; pero aún no existen estudios pre-clínicos que hayan demostrado su total seguridad sobre parámetros bioquímicos con un mayor tiempo de administración.

- El desarrollo de nuevos trabajos científicos con Gentianella alborosea “Hercampuri”, con mayores tiempos de administración, permitirá fortalecer el conocimiento existente hacia esta especie vegetal, y esclarecer nuevas alternativas de concientizar a la población sobre su manejo y uso adecuado.

- Es importante que exista un mayor control sobre el uso de medicina tradicional por parte de los centros de ensayos estatales y municipales, ya que no sólo hablamos de utilizar una planta con propiedades curativas, sino también de una especie que al igual que un fármaco o droga, va a generar cambios en el organismo humano.

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