UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
TESIS II
“Acción reductora del extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleifera sobre
ión férrico”
PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE:
BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA
AUTORA:
SÁNCHEZ ARROYO, María Pía de los Milagros
ASESOR:
Mg. RENGIFO PENADILLOS, Roger Antonio
TRUJILLO –PERÚ
i
DEDICATORIA
A Dios
A mis padres
Belinda Arroyo & Carlos Sánchez
Por el amor y la fortaleza, los consejos y los reproches, la confianza y la educación; y me quedan pequeños estos renglones para describir todo lo que me dieron para poder convertirme en la persona que ahora soy, ya que todo lo que tengo y lo que soy se lo debo a ustedes.
Son mis héroes y ejemplo a seguir. Los amo.
A mis abuelitos
Rosa , José & Adán
Gracias a ustedes tengo a los mejores padres. Gracias por protegernos cada día.
Los llevo en mi corazón.
ii
A mi abuelita
María Elena Zavaleta “Mamilena”
Por su cariño, protección, por recibirme con una dulce sonrisa que refleja la mirada en aquellas lunas polarizadas; y por aceptar mis muestras de amor, con pequeñas mordiscas en las que le delatan sus años.
A mi amor
Edward Zelada
Por ser aquella persona que me enseña que el amor puede ser delicado y complicado pero, con bondad, cuidado y paciencia llega a convertirse en algo fuerte y sincero.
Gracias por tu amor incondicional, calma y ser el que me acompaña en cada aventura.
iii
AGRADECIMIENTOS
Deseo expresar mi gratitud y aprecio a mi asesor, un gran profesional
Roger Antonio Rengifo Penadillos
Por la paciencia y los buenos consejos que me ha brindado a lo largo de estos doce ciclos y en la asesoría.
A los miembros del jurado, unos grandes profesionales Edmundo Venegas , José Gavidia
Por el apoyo y las enseñanzas que me han impartido a lo largo de mi carrera profesional.
A unas grandes amigas
Janibet Alvarado & Katerin Rubio
vi RESUMEN
El presente trabajo de investigación tiene como objeto determinar la acción reductora del extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleifera sobre el ión férrico, las cuales fueron recolectadas de la provincia de Bagua. Para determinar la actividad reductora del extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleifera se empleó el método modificado de Oyaizu M; preparándose extractos hidroalcohólicos a concentraciones de 0,25, 0,50, 0,75, 1,00 y 1,25 % v/v; las cuales se mezclaron con el ferrocianuro de potasio, donde se obtienen porcentajes de reducción de 33,64%, 36,92%, 41,11%, 48,70% y 55,38 % respectivamente; con diferencia significativa de (p<0,05). Se concluye que el extracto hidroalcohólico de las hojas de Moringa oleifera posee una acción reductora frente al ión férrico.
.
vii ABSTRACT
The purpose of this research work is to determine the reducing action of the hydroalcoholic extract of Moringa oleifera leaves on the ferric ion, which were collected from the province of Bagua. To determine the reducing activity of the hydroalcoholic extract of Moringa oleifera leaves, the modified method of Oyaizu M. was used; preparing hydroalcoholic extracts at concentrations 0,25, 0,50, 0,75, 1,00 y 1,25 % v/v; which were mixed with potassium ferrocyanide, where reduction percentages of 33.64%, 36.92%, 41.11%, 48.70% and 55.38% respectively with significant difference of (p <0.05). It is concluded that the hydroalcoholic extract of the Moringa oleifera leaves has a reducing action against the ferric ion.
ÍNDICE
.
DEDICATORIA i
AGRADECIMIENTOS ii
AGRADECIMIENTOS iii
PRESENTACIÓN iv
JURADO DICTAMINADOR v
RESUMEN vi
ABSTRACT vii
I. INTRODUCCIÓN 1
II. MATERIALES Y MÉTODOS 5
III. RESULTADOS 9
IV. DISCUSIÓN 10
V. CONCLUSIONES 15
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 16
I. INTRODUCCIÓN
Hoy en día, gracias a la propiedades de algunas plantas pueden llegar a producir un efecto reductor ante una sustancia; lo cual se produce mediante una reacción química de óxido-reducción también llamado redox, el punto clave para realizar estudios posteriores con un órgano blanco; y así encontrar un a beneficio para la población.
Los procesos redox, se realizan a través de la transferencia de electrones de un átomo hacia otro1. Para que ocurra una reacción redox es necesario la presencia de una especie que ceda electrones (reductor) y otra que acepte electrones (oxidante). Tras la reacción redox, el reductor se transforma en su forma oxidada y el oxidante en su forma reducida2.
La oxidación es un proceso en el que una especie pierde uno o más electrones, de forma que, cuando la especie se oxida su estado de oxidación toma valores más positivos. Una especie oxidante es aquella que al ganar electrones, se reduce durante el proceso3.
Por otro lado, en la reducción hay ganancia de electrones; el elemento que se reduce toma valores más negativos de su estado de oxidación. Un agente reductor es aquel que pierde electrones en una reacción, oxidándose en el proceso. Ambos procesos, oxidación y reducción tiene que verificarse simultáneamente4.
Existen diversos métodos para determinar la capacidad reductora de los extractos de las plantas entre ellas se encuentra el método de transferencia de electrones en el hierro. El poder reductor de los compuestos fenólicos se determina mediante la capacidad de reducir de Fe+3 (férrico) a Fe+2 (ferroso) que luego reacciona con el cloruro férrico para formar un complejo ferroso férrico que tiene un máximo de absorbancia a 700 nm5.
Moringa oleífera es un árbol que forma parte de la familia Moringaceae, es oriundo de las estribaciones meridionales del Himalaya; en la actualidad se cultiva prácticamente en todas las regiones tropicales, subtropicales y semiáridas del mundo6.
2
Así mismo, su aspecto es fácil de identificar ya que, se caracteriza por la combinación inconfundible de caracteres; el cual posee hojas grandes, pinnadas que logran alcanzar unos 60 cm de longitud; están divididas en foliolos sobre un raquis. En la articulación de cada raquis se encuentran pequeñas glándulas de 1 mm de longitud. Su fruto es una capsula ligera, leñosa y seca, que en la madurez mide de 10 a 30 o hasta 50 cm, además el fruto se abre en 3 partes o valvas. Con respecto a sus semillas poseen un diámetro de 1,5- 3 cm de diámetro con un centro de color café oscuro y 3 alas de color beige8.
En la mayor parte de países tropicales se torna complicado diferenciar entre el uso alimenticio y medicinal de Moringa oleifera, debido a su calidad se utiliza tanto por sus cualidades nutricionales como por sus atributos médicos, los cuales son reconocidos desde hace milenios8.
En la India, la medicina ayurvédica contemplaba el uso de esta planta para prevenir, mitigar o curar “más de 300 enfermedades”. Se dice que las hojas, frutos, raíces y semillas son útiles para combatir: anemia, ansiedad, asma, ataques de parálisis, bronquitis, catarro, cólera, congestión del pecho, conjuntivitis, deficiencia de esperma, déficit de leche en madres lactantes, diabetes, diarrea, disfunción eréctil, dolor en las articulaciones, dolores de cabeza, dolor de garganta, escorbuto, esguince, espinillas, falta de deseo sexual femenino, fiebre, gonorrea, hinchazón glandular, hipertensión arterial, histeria, impurezas en la sangre, infecciones cutáneas, llagas, malaria, otitis, parasitismo intestinal, picaduras venenosas, problemas de la vejiga y la próstata, soriasis, trastornos respiratorios, tos, tuberculosis, tumores abdominales, úlceras, etc9.
Según la (FAO, 2017) sus hojas, ricas en proteínas, vitaminas y minerales, son recomendadas para mujeres embarazadas y lactantes, así como para niños pequeños.
De igual manera se ha establecido que la moringa es una fuente alimenticia de proteínas, grasa, calcio, potasio, hierro, carotenos, vitamina C, entre otros; y por lo tanto, también como una fuente energética10.
3
Las hojas de esta planta pueden secarse a la sombra y conservarse enteras o molidas. Cuando uno las muele, el producto permanece por meses sin perder sus propiedades, además de que resulta útil para ser usado como condimento o ser añadido a sopas, caldos y jugos, entre otros12.
Los primeros estudios de reportes en usos medicinales de la Moringa oleífera afirman que sus hojas tienen usos purgativos, aplicado como cataplasma para heridas, se frota en las sienes para dolores de cabeza, se utiliza para las hemorroides, fiebre, dolor de garganta, bronquitis, infecciones del oído y ojo, el escorbuto y el catarro. Además, el jugo de la hoja se cree que controla los niveles de glucosa, aplicado a reducir la hinchazón glandular 13.
Siddhuraju y Becker (2003) afirman que la corteza del tallo puede tener uso vesicante, rubefaciente, se utiliza para curar enfermedades de los ojos y para el tratamiento de los pacientes delirantes, previene el agrandamiento del bazo y la formación de las glándulas tuberculosas del cuello, ideal para destruir tumores y para sanar las úlceras. El jugo de la corteza de la raíz sirve para aliviar los dolores de oído y también se coloca en una cavidad del diente como un analgésico y, además, tiene propiedades anti- actividad tuberculosa14.
La goma del árbol se utiliza para tratar la caries dental, es astringente y rubefaciente; la goma mezclada con aceite de sésamo se utiliza para aliviar dolores de cabeza, fiebre, molestias intestinales, disentería, asma y algunas veces es utilizado como abortivo, y para el tratamiento de la sífilis y el reumatismo 15.
La flor contiene un alto valor medicinal como estimulante, afrodisíaco colagogo, abortivo, y se utiliza para curar inflamaciones, enfermedades musculares, la histeria, los tumores, agrandamiento del bazo, baja el colesterol, fosfolípidos, triglicéridos, VLDL, LDL colesterol a fosfolípido y el índice aterogénico; disminuye el perfil de lípidos del hígado, el corazón y la aorta en conejos hipercolesterolémicos y el aumento de la excreción fecal de colesterol16.
4
Las plantas siempre han sido de vital importancia para el hombre, supliendo necesidades básicas como alimento y medicina. Por tal razón, se han estudiado desde hace muchos años, demostrando sus grandes efectos biológicos en la salud la implicación crucial del estrés oxidativo causado por el desequilibrio entre los sistemas antioxidantes y la producción de oxidantes, el ser humano necesita radicales libres para realizar procesos biológicos sin embargo, la acumulación excesiva de estos agentes en el organismo puede provocar daños en las células, originando degeneración de los tejidos, lo que conlleva al desarrollo de diferentes enfermedades.
La manera más efectiva de evitar el daño producido por dichos radicales es su destrucción o estabilización.
PROBLEMA
¿Tiene acción reductora el extracto hidroalcohólico de las hojas de Moringa oleifera sobre el ión férrico?
HIPÓTESIS
El extracto hidroalcohólico de las hojas de Moringa oleifera reduce el ión férrico.
OBJETIVOS GENERAL
Determinar la acción reductora del extracto hidroalcohólico de las hojas de Moringa oleifera sobre el ión férrico.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Determinar el porcentaje de reducción del ión férrico por las diferentes concentraciones del extracto hidroalcohólico de las hojas de Moringa oleifera. ● Determinar la cinética de reacción del ión férrico con el extracto hidroalcohólico
II. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1. MATERIAL
2.1.1. MATERIAL BOTÁNICO:
1kg de las hojas de Moringa oleifera, procedente de la ciudad de Bagua
(Altitud: 420 msnm; 5°45’24.03” Latitud Sur, 78°26’38.16” Longitud Oeste),
provincia de Bagua.
Una muestra de la especie fue llevada al Herbario Truxillensis de la Universidad Nacional de Trujillo para su identificación correspondiente.
2.1.2. MATERIAL DE LABORATORIO:
2.1.2.1. Materiales de vidrio:
● De uso común en el Laboratorio
2.1.2.2. Equipos:
Mortero
Balanza analítica Sartorius serie BP301S Bomba de vacío Emerson serie E22922
Espectrofotómetro UV Genesys serie 20356G080003 Estufa Memmert serie DIN12880-K1
Baño María Memmert serie DIN12877-K1 Centrifuga BOECO GERMANY serie 0001096
2.1.3 MATERIAL QUÍMICO
6 ● Ácido Tricloacético 10%
2.2. MÉTODO
2.2.1. Recolección de la muestra
Se recolectó 500g. de Moringa oleifera de la provincia de Bagua en bolsas de papel y no se ha expuesto mucho ante la luz,se obtuvo teniendo en cuenta sus propiedades organolépticas de la planta como olor, textura, color y buen estado.
Se transportó a la ciudad de Trujillo, al laboratorio de Química Física de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo inmediatamente después de haber sido obtenida.
2.2.2. Preparación de la muestra
2.2.2.1. Secado.
El secado de las hojas se realizó a temperatura ambiente sobre papel Kraft por 24 horas y luego se llevó a estufa a 40°C por 1 día.
2.2.2.2. Molienda.
Las hojas se molieron en un mortero hasta obtener partículas de tamaño uniforme.
2.2.2.3. Tamizado.
El polvo obtenido fue tamizado usando el tamiz número 0,75 “. 2.2.3. Obtención del extracto
Se pesó 10 g del polvo de hoja de hoja de Moringa oleifera, se dejó macerar por 48 horas con 100 mL de etanol de 80°G.L., filtrándose seguidamente para obtener el extracto hidroalcohólico.
2.2.4. Preparación de las muestras de extracto hidroalcohólico de las hojas de
7
Se transfirió volúmenes de 0.05, 0.10, 0.15, 0.20 y 0.25 mL del extracto hidroalcohólico en fiolas de 10 mL, con alcohol de 80º G.L, obteniendo concentraciones de 0.25, 0.50, 0.75, 1.00, 1.25 % v/v las cuales constituyeron las muestras de trabajo.
2.2.5. Acción del extracto hidroalcohólico de las hojas de Moringa oleifera sobre el ión férrico.
La evaluación del poder reductor del extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleifera sobre el ión férrico (Fe, III) se realizó aplicando el método modificado de Oyaizu M. 1 mL de las muestras de trabajo, se mezcló con 5 mL de buffer fosfato, a pH 6,6 y con 5 mL de ferricianuro de potasio [K3Fe(CN)6] al 1% y después de un periodo de incubación de 20 minutos a una temperatura de 50 ºC, a la mezcla reaccionante se le adicionó 5 mL de ácido tricloroacético al 10% y se centrifugó a 4000 r.p.m por 15 minutos. 5 mL del sobrenadante de la solución se mezcló con 5 mL de agua destilada y 1 mL de cloruro férrico al 1%. La absorbancia se midió a 700 nm.
Se utilizó una solución de ácido gálico a una concentración de 5 mg/mL como patrón que se le sometió al procedimiento antes mencionado.
Una vez obtenidas las lecturas de las absorbancias, se procedió a evaluar el porcentaje de reducción del ión férrico por las muestras del extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleifera, de acuerdo a la siguiente ecuación:
%𝑅 = 𝐴𝑚
𝐴𝑎𝑔 × 100
Donde:
%R= Porcentaje de Reducción
Am= Absorbancia de la muestra
8 2.2.6. Análisis estadístico
III. RESULTADOS
Tabla 1: Porcentaje de reducción del ión férrico a diferentes concentraciones
del extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleifera.
CONCENTRACIÓN DE LAS
MUESTRAS
% v/v
%REDUCCIÓN
0,25 33,64
0,50 36,92
0,75 41,11
1,00 48,70
1,25 55,38
Gráfico 1: Cinética de reacción de primer orden para el ión férrico y extracto
hidroalcohólico de Moringa oleifera a la concentración de 0,25%v/v.
y = -0.1124x + 0.6749 R² = 0.9958 -4.5 -4 -3.5 -3 -2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0 0.5
0 10 20 30 40 50
Ln [A ] / [A0 ] Tiempo
IV. DISCUSIÓN
El presente trabajo de investigación se realizó con el fin de determinar la acción reductora del extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleifera sobre el ión férrico, donde se empleó el método modificado de Oyaizu M. Además, se utilizó diferentes diluciones de la muestra a 0.05, 0.10, 0.15, 0.20 y 0.25 mL, las cuales corresponden a las concentraciones de 0.25, 0.50, 0.75, 1.00, 1.25 %v/v, respectivamente.
El método empleado (Modificado de Oyaizu M) se basa en la capacidad de los extractos para reducir el ión Fe+3 (férrico) a ión Fe+2(ferroso); esta reacción se debe al poder reductor de la sustancia polifenólica que transforma el ferricianuro de potasio en ferrocianuro de potasio, el cual reacciona con el FeCl3 formando un complejo Fe4[Fe(CN)6] 3 (ferrocianuro férrico), conocido como azul de Prusia, ya que presenta una intensa coloración verde esmeralda, esta intensidad depende de la cantidad de polifenoles que se pueda obtener de la muestra, por ende a mayor cantidad de polifenoles, mayor intensidad de color, lo que conlleva a un mejor resultado en la reducción. Por otro lado, el método empleado es sencillo y eficaz, gracias a la formación del complejo ferricianuro férrico el cual está representado por el color verde esmeralda; y así ofrece sensibilidad y versatilidad para la determinación espectrofotométrica.
Según Mahamadou, A en su investigación “Propiedades fungicida, bactericida y aglutinante de las hojas de Moringa oleífera”, menciona que el poder reductor de los extracto de moringa aumenta con la concentración de polifenoles18.
11
porcentaje de reducción del ión férrico, esto posiblemente se deba al incremento en la cantidad de polifenoles en las muestras analizadas.
En el anexo 2, se puede evidenciar que la intensidad de la coloración verde esmeralda se va incrementando a medida que aumenta la concentración del extracto, lo cual se refleja en el ascenso de los valores de la absorbancia promedio de las muestras; si lo antes mencionado se relaciona con los resultados plasmados en la tabla 1, se deduce que a mayor cantidad de polifenoles, mayor es el efecto reductor.
Según Yong-Bing Xu, Gui-Lin Chen & Ming-Quan Guo en su estudio “Antioxidant and anti-inflammatory activities of the crude extracts of Moringa oleifera from Kenya and their correlations with flavonoids”, al comparar cuatro métodos en diferentes partes de la planta para demostrar la actividad antioxidante de la Moringa oleifera se evidenció que las hojas responden mejor al método de reducción del ión férrico19. Por tal razón se utilizó las hojas de Moringa oleifera en el presente trabajo de investigación.
La cinética de reacción es el producto de la velocidad de la reacción química donde se mide la variación de la concentración de reactivos y productos en función al tiempo, la velocidad de reacción es la rapidez con que se modifica la concentración de un producto o un reactivo al transcurrir el tiempo.
12
En la gráfica 1 representado por ln de [At/A0] frente al tiempo se obtiene una línea recta, lo que considera que la reacción de reducción del ión férrico por el extracto hidroalcohólico de Moringa oleífera a la concentración de 0,25 % v/v, sigue una cinética de reacción de primer orden.
Cuando gráficas de diferente orden de reacción tienen similar linealidad, la forma más exacta de determinar el orden es por el valor de R2, que cuanto más cerca el valor este al 1, mayor será el ajuste del modelo a la variable que se desea explicar.
El presente trabajo de investigación se realizó con el fin de determinar la acción reductora del extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleifera sobre el ión férrico, donde se empleó el método modificado de Oyaizu M. Además, se utilizó diferentes diluciones de la muestra a 0.05, 0.10, 0.15, 0.20 y 0.25 mL, las cuales corresponden a las concentraciones de 0.25, 0.50, 0.75, 1.00, 1.25 %v/v, respectivamente.
13
En el anexo 3, se puede evidenciar que la intensidad de la coloración verde esmeralda, producto de la cantidad de polifenoles en la muestra, depende de la concentración de cada muestra, lo cual se refleja que la absorción promedio de las muestras se va incrementando (Anexo 2- Tabla 2); si lo antes mencionado se relaciona con los resultados plasmados en la Tabla 1, se deduce que a mayor cantidad de polifenoles, mayor es el efecto reductor.
Según Mahamadou, A en su investigación “Propiedades fungicida, bactericida y aglutinante de las hojas de Moringa oleífera”, menciona que el poder reductor de los extracto de moringa aumenta con la concentración de polifenoles20.
Para la investigación se utilizó las hojas de Moringa oleifera, ya que es la parte de la planta con la mayor cantidad de polifenoles además, según Yong-Bing Xu, Gui-Lin Chen & Ming-Quan Guo en su estudio “Antioxidant and Anti-Inflammatory Activities of the Crude Extracts of Moringa oleifera from Kenya and Their Correlations with Flavonoids”, al comparar cuatro métodos en diferentes partes de la planta para evidenciar la actividad antioxidante de la Moringa oleifera se evidenció que las hojas responden mejor al método de reducción del ión férrico.
La cinética de reacción es el producto de la velocidad de la reacción química donde se mide la variación de la concentración de reactivos y productos en función al tiempo, la velocidad de reacción es la rapidez con que se modifica la concentración de un producto o un reactivo al transcurrir el tiempo.
14
de 0,25%v/v; al graficar la [At/A0] vs. t; ln[At/A0] vs t y 1/[ At/A0] vs. t respectivamente, la que presente mayor linealidad es el orden que corresponde a esta reacción.
En la gráfica 1 representado por ln de [At/A0] frente al tiempo se obtiene una línea recta, lo que considera que la reacción del ión férrico con el extracto hidroalcoholico de Moringa oleífera a la concentración de 0,25 % v/v, sigue una cinetica de reacción de primer orden para el peróxido de hidrogeno.
V. CONCLUSIONES
1. El extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleífera posee acción reductora frente al ión férrico.
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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anti-inflammatory activities of the crude extracts of Moringa oleifera from Kenya and their correlations with flavonoids. Journal of Functional Foods. [Internet]. 2002 [01 de Octubre del 2019]. Disponible en: 267036262_Phenolic_composition_antioxidant_and_antimicrobial_activities_of _free_and_bound_phenolic_extracts_of_Moringa_oleifera_seed_flour
20
21
ANEXO 2: ESQUEMA DEL MÉTODO DE ACCIÓN REDUCTORA DEL IÓN
FÉRRICO SOBRE LAS HOJAS DE Moringa oleifera.
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
SECADO
A temperatura ambiente sobre papel
22 MOLIENDA
OBTENCIÓN DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO
Con un mortero hasta obtener partículas de tamaño uniforme.
TAMIZADO
PESAR MACERAR
(48 horas)
23
FILTRACIÓN AL VACÍO PARA OBTENCIÓN DEL EXTRACTO
HIDROALCOHÓLICO
PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO BOMBA AL VACÍO
0,05 0,10 0,15 0,20 0,25
24
26
ANEXO 3: ABSORBANCIAS DEL ÁCIDO GÁLICO 5 mg/mL Y IÓN FÉRRICO
REMANENTE CON LAS DIFERENTES CONCENTRACIONES DEL EXTRACTO
HIDROALCOHÓLICO DE HOJAS DE Moringa oleifera.
Tabla 1: Absorbancias del Á
CONCENTRACIÓN DE
ÁCIDO GÁLICO
ABSORBANCIA ABSORBANCIA
PROMEDIO
Abs1 Abs2 Abs3
5 mg/mL 0,883 0,882 0,885 0,883
Tabla 2: Absorbancias del ión férrico remanente con las diferentes concentraciones del
extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa oleifera
CONCENTRACIÓN DE LAS MUESTRAS (% v/v) ABSORBANCIA DE LOS SISTEMAS ABSORBANCI A PROMEDIO
S1 S2 S3
0,25 0,297 0,296 0,297 0,297
0,5 0,326 0,325 0,326 0,326
0,75 0,364 0,364 0,362 0,363
1,00 0,429 0,435 0,426 0,430
27
Tabla 3: Absorbancia promedio, desviación estándar y coeficiente de variación de los
datos obtenidos. CONCENTRACIÓN DE LAS MUESTRAS (% v/v) ABSORBANCIA PROMEDIO DESVIACIÓN ESTÁNDAR COEFICIENTE DE VARIACIÓN
0,25 0,297
0.05381171 14.8159991
0,5 0,326
0,75 0,363
1,00 0,400
1,25 0,430
ANEXO 4. CÁLCULOS DEL PORCENTAJE DE REDUCCIÓN DEL EXTRACTO
HIDROALCOHÓLICO DE LAS HOJAS DE Moringa oleifera SOBRE EL PERÓXIDO
DE HIDRÓGENO A DIFERENTES CONCENTRACIONES.
El porcentaje de reducción se determinó con la siguiente ecuación:
%𝑅 = 𝐴𝑚
𝐴𝑎𝑔 × 100
Porcentaje de reducción del extracto hidroalcohólico de las hojas de Moringa oleifera sobre el ión férrico a diferentes concentraciones.
% R = Am/Aag x 100 = 0,297/0,883 x 100 = 33,64
% R = Am/Aag x 100 = 0,326/0,883 x 100 = 36,92
% R = Am/Aag x 100 = 0,363/0,883 x 100 = 41,11
% R = Am/Aag x 100 = 0,430/0,883 x 100 = 48,70
28
ANEXO 5. CINÉTICAS DE REACCION PARA EL IÓN FÉRRICO Y EXTRACTO HIDROALCOHOLICO DE Moringa oleífera A LA CONCENTRACIÓN DE 0,25% V/V.
Tabla 4: Cinética de reacción de orden 0 para el ión férrico y extracto hidroalcohólico
de Moringa oleífera a la concentración de 0,25%v/v
Tiempo (min) Absorbancias a 700 nm [A]/[A0]
0 0,2976
4 0,2989 1,04626335
8 0,2952 0,91459075
12 0,285 0,55160142
16 0,2783 0,31316726
20 0,2757 0,22064057
24 0,2732 0,1316726
28 0,2719 0,08540925
32 0,2709 0,04982206
36 0,2705 0,03558719
40 0,2701 0,02135231
44 0,2695 0
Gráfico 1: Cinética de reacción de orden 0 entre el ión férrico y extracto hidroalcohólico
de Moringa oleífera a la concentración de 0,25%v/v
y = -0.0174x + 0.6538 R² = 0.3854
-0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
0 10 20 30 40 50
[A
/A
0
]
Tiempos
29
Tabla 5: Cinética de reacción de primer orden para el ión férrico y extracto
hidroalcohólico de Moringa oleífera a la concentración de 0,25%v/v
Tiempo (min) Absorbancias a 700 nm Ln[A]/[A0]
0 0,2976
4 0,2989 0,0452251
8 0,2952 -0,08927858
12 0,285 -0,59492955
16 0,2783 -1,16101785
20 0,2757 -1,51122028
24 0,2732 -2,02743676
28 0,2719 -2,46030084
32 0,2709 -2,99929734
36 0,2705 -3,33576958
40 0,2701 -3,8465952
44 0,2695 0
Tabla 6: Cinética de reacción de segundo orden entre el ión férrico y extracto
hidroalcoholico de Moringa oleífera a la concentración de 0,25%v/v
Tiempo (min) Absorbancias a 700 nm [A0] / [A]
0 0.28299
4 0.28046 1.61557178
8 0.28014 1.75197889
12 0.2789 2.60392157
16 0.2788 2.71020408
20 0.2779 4.28387097
24 0.27738 6.44660194
28 0.27734 6.70707071
32 0.2772 7.81176471
36 0.27705 9.48571429
40 0.27695 11.0666667
30
Grafico 3: Cinética de reacción de segundo orden entre el ión férrico y extracto hidroalcohólico de Moringa oleífera a la concentración de 0,25% v/v.
y = 1.0937x - 11.472 R² = 0.7771
-10 0 10 20 30 40 50
0 10 20 30 40 50
[A0/ At
]
Tiempo
31
ANEXO 6. ANÁLISIS ESTADÍSTICO UTILIZANDO ANOVA PARA LA
REDUCCIÓN DEL IÓN FÉRRICO
Análisis de varianza de un factor
RESUMEN
Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza
Muestra 1 3 0.89 0.2966666667 3.33333333333334E-07
Muestra 2 3 0.977 0.3256666667 3.33333333333334E-07
Muestra 3 3 1.09 0.3633333333 1.33333333333334E-06
Muestra 4 3 1.29 0.43 0.000021
Muestra 5 3 1.466 0.4886666667 2.33333333333334E-06
ANÁLISIS DE VARIANZA
Origen de las variaciones Suma de cuadrados Grados de libertad Promedio de
los cuadrados F Probabilidad
Valor crítico para F
Entre grupos 0.0734370667 4 0.0183592667
3623.5394 736842 9.341982751 81931E-16 3.4780496 908 Dentro de los
grupos
5.0666666666 6668E-05 10
5.0666666666 6668E-06
32 Dentro del grupo
HO= No existe diferencia significativa
Ha= Existe diferencia significativa entre las concentraciones en la acción reductora del extracto hidroalcohólico de hojas de Moringa Oleifera sobre el ión férrico.
Criterio Eexp>Ftab
3623.5394736842>3.4780496908 Decisión rechazar H0