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Efecto Antibacteriano In Vitro Del Colutorio A Base De Matricaria Chamomilla (Manzanilla) A Diferentes Concentraciones Sobre La Cepa Atcc 2652263 De Streptococcus Mutans

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Academic year: 2020

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(1)Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. FO R. MA TI. CA. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGÍA. IN. “EFECTO ANTIBACTERIANO In vitro DEL COLUTORIO A BASE DE Matricaria chamomilla (MANZANILLA) A DIFERENTES. MA S. E. CONCENTRACIONES SOBRE LA CEPA ATCC 2652263 DE Streptococcus. TE. mutans”. TESIS. DE. SI S. PARA OPTAR EL GRADO DE BACHILLER EN ESTOMATOLOGÍA AUTOR. OF. IC. IN. A. JÁUREGUI ALVAREZ GUSTAVO ADOLFO ASESOR. Ms. Gustavo Guardia Méndez COASESORES Dra. Elva Mejía Delgado. Mg. Marilú Roxana Soto Vásquez. TRUJILLO – PERÚ 2013. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. FO R. MA TI. CA. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGÍA. IN. “EFECTO ANTIBACTERIANO In vitro DEL COLUTORIO A BASE DE Matricaria chamomilla (MANZANILLA) A DIFERENTES CONCENTRACIONES. MA S. E. SOBRE LA CEPA ATCC 2652263 DE Streptococcus mutans”. TE. TESIS. DE. SI S. PARA OPTAR EL GRADO DE BACHILLER EN ESTOMATOLOGÍA. AUTOR. OF. IC. IN. A. JÁUREGUI ALVAREZ GUSTAVO ADOLFO ASESOR. Ms. Gustavo Guardia Méndez COASESORES Dra. Elva Mejía Delgado. Mg. Marilú Roxana Soto Vásquez. TRUJILLO – PERÚ 2013 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. DEDICATORIA. MA TI. A DIOS Por darme siempre fuerza. A MIS PADRES Por darme su apoyo y brindarme todo lo necesario para estar y sentirme bien.. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. por estar siempre a mi lado y protegerme.. FO R. para levantarme de cada caída,. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. AGRADECIMIENTO. MA TI. A aquellos docentes de la Escuela de Estomatología de la Universidad Nacional de Trujillo, que contribuyeron realmente con mi crecimiento académico y motivaron a seguir estudiando y a superarme, en especial, a la C.D. Esp. Teresa Etelvina Ríos Caro y al C.D. Esp. Antonio Armando Aguirre Aguilar, por su. FO R. enseñanza, ejemplo profesional y humano, su asesoría y apoyo constante en la realización del presente trabajo.. IN. Al Ms. Gustavo Guardia Méndez por brindarme los conocimientos necesarios, su apoyo, amistad y. MA S. E. motivación a lo largo de mi vida universitaria.. A la Dra. Elva Mejía Delgado y a la Mg. Marilú Roxana Soto Vásquez y sus respectivos equipos de. TE. trabajo, personal técnico de la sección de Microbiología y Parasitología Médica de la Facultad de Medicina y. SI S. a la Sección de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad nacional de. DE. Trujillo.. A. A mi Alma Mater ‘’Universidad Nacional de Trujillo’’ a la cual ingresé, pertenezco, y le agradezco por su. OF. IC. IN. prestigio y la llevaré siempre en todo momento en mí.. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ÍNDICE. MA TI. CA. RESUMEN. ABSTRACT. PÁG.. TITULO………………………………………………………………………. 5. II.. RESUMEN…………………………………………………………………… 5. III.. ABSTRACT …………………………………………………………………. 7. IV.. INTRODUCCION……………………………………………………………. 8. V.. MATERIAL Y MÉTODOS………………………………………………… 22. VI.. RESULTADOS…………………………………………………………….. 32. VII.. DISCUSIÓN………………………………………………………………… 34. VIII.. CONCLUSIONES……………………………………………………...……37. IX.. RECOMENDACIONES………………………………………………....…..38. X.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS……………………………………....39. XI.. APENDICES Y ANEXOS………………………………………………...…47. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. I.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. I. TITULO. “EFECTO ANTIBACTERIANO In vitro DEL COLUTORIO A BASE DE. CONCENTRACIONES. (MANZANILLA). SOBRE. A. DIFERENTES. CA. chamomilla. LA CEPA ATCC. 26522653 DE. MA TI. Matricaria. FO R. Streptococcus mutans”. IN. II. RESUMEN. El presente estudio de tipo experimental in vitro, de orientación aplicada,. E. tuvo como objetivo determinar la efectividad de un colutorio a base de. MA S. Matricaria chamomilla (Manzanilla) sobre Streptococcus mutans ATCC 2652263.. TE. Se observaron cinco grupos de estudio integrados por 3 colutorios a. SI S. base de manzanilla a 0.10% , 0.25% y 0.50% de concentración, y dos. DE. grupos controles, blanco positivo (aceite esencial de manzanilla puro) y blanco negativo (fórmula del colutorio sin aceite). Se sembró un inóculo. A. de Streptococcus mutans ATCC 2652263 en medio agar soya- tripticasa. IN. por 24 horas correspondiente, para cada tratamiento.. OF. IC. Se aplicó el análisis de varianza utilizando la distribución F, con un nivel de significancia del 5%, y. la prueba de Dunkan, con un nivel de. significancia de 5%.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Al analizar los resultados se encontró que el grupo con concentración de 0.10% tuvo un crecimiento promedio de 5,727 UFC/ml, el grupo al 0.25% 5.545 UFC/ml, y el tercer grupo al. 0.50%. 4.818 UFC/ml.. CA. Correspondiendo a la concentración al 0.50% la Inhibitoria Mínima. MA TI. (CMI).. Se concluye que no existe diferencia significativa entre los 3 colutorios.. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. concentración, Streptococcus mutans.. FO R. Palabras Clave: Antibacteriano, colutorio, Matricaria chamomilla,. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. III. ABSTRACT. The present experimental study in vitro, applied orientation, aimed to. CA. determine the effectiveness of a mouthwash based on Matricaria. MA TI. chamomilla (chamomile) on Streptococcus mutans ATCC 2652263. Five groups were observed for 3 integrated study based on chamomile mouthwash 0.10%, 0.25% and 0.50% concentration, and two control. FO R. groups, positive white (pure chamomile essential oil) and white negative (no oil mouthwash formula) . A mycelial inoculum of Streptococcus ATCC. 2652263. on. corresponding to each treatment.. trypticase-soy. agar. for. 24. hours. IN. mutans. E. Was applied to analysis of variance using the F distribution, with a. MA S. significance level of 5%, and Dunkan test with a significance level of 5%. When analyzing the results it was found that the group with 0.10%. TE. concentration had an average growth of 5,727 CFU / ml, 0.25% Group. SI S. 5,545 CFU / ml, and the third group to 0.50% 4,818 CFU / ml. Corresponding to 0.50% concentration to the minimum inhibitory (MIC).. DE. We conclude that there is no significant difference between the 3. IN. A. mouthwashes.. IC. Keywords: Antibacterial, mouthwash, Matricaria chamomilla,. OF. concentration, Streptococcus mutans.. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IV. INTRODUCCION. La boca alberga innumerables microorganismos en un ecosistema de. CA. complejidad considerable que todavía no ha sido investigado en su totalidad y está lejos de ser comprendido en toda su magnitud. Hasta. MA TI. hace muy poco, la boca se consideraba como un hábitat simple para los microorganismos pero en la actualidad se reconoce que los dientes, el surco gingival, la lengua, otras superficies mucosas y la saliva, todos. FO R. forman hábitats o sitios diferentes donde los microorganismos se multiplican. Cada zona o hábitat contiene su propia población característica, a menudo, con muchas especies microbianas distintas,. IN. las cuales pueden complementarse o competir con otras en la misma. E. población, por tanto, la flora bucal es una entidad dinámica afectada por. MA S. numerosos cambios durante la vida del huésped. 1 La asociación de ciertos microrganismos con determinadas partes del. TE. organismo ha sido denominada con varios términos: flora normal, flora autóctona, flora indígena, flora residente y asociación microbiana. El rol. SI S. de ésta flora normal en la cavidad oral es controvertido, pero parece que desempeña un papel importante en los mecanismos de defensa local de. DE. la superficie mucosa, previniendo la colonización y la invasión por microrganismos más patógenos. A pesar de ello, este mismo grupo. IN. A. posee el potencial de convertirse en patógeno bajo ciertas condiciones. 2. IC. Se considera que la complejidad de la flora bucal del adulto es quizá su. OF. característica principal. Puede haber cantidades variables de placa dental y el grado de enfermedad periodontal crónica estará en relación al número y tipos de microorganismos encontrados. Las lesiones cariosas y las restauraciones poco satisfactorias, propiciarán ambientes para acumulaciones locales de bacterias. La mayoría de los estudios de la flora bucal del adulto, muestra que existen variaciones considerables entre. los individuos, en el número total de bacterias y en las 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. proporciones de muchas de las especies; de hecho puede haber variación en un mismo individuo si se toman muestras en diferentes momentos.1. CA. Aunque desde el nacimiento se introducen en la boca una extensa variedad de microorganismos, sólo ciertas especies son capaces de. MA TI. establecerse en ella. Muchos de estos organismos tienden a ubicarse en sitios particulares como labios, dorso de la lengua, paladar duro, otros. FO R. tejidos blandos, surco gingival o dientes.1. La retención de los microorganismos, por lo general, está confinada a un. IN. sitio particular en la boca, probablemente como consecuencia de la interacción, a menudo compleja de los mecanismos de retención y. MA S. E. desprendimiento. 1. Las Caries y Enfermedad Periodontal, tienen su origen en la existencia de una placa dentobacteriana previa o biopelícula de la placa, definida. TE. según la Organización Mundial de la Salud (OMS) como una entidad. SI S. bacteriana proliferante con actividad enzimática que se adhiere firmemente a las superficies dentarias y que por su actividad bioquímica y metabólica ha sido propuesta como el agente etiológico principal en el. DE. desarrollo de la caries dental. 3. A. El Streptococcus mutans miembro del Grupo Viridans, se considera la. IN. como. especie. IC. dentobacteriana.. más. 3-8. Por. frecuentemente consiguiente,. aislada. en. la. hecho. de. reconocer. el. placa. OF. a Streptococcus mutans como el microorganismo más importante en la iniciación de la caries, conduce a diseñar medidas de prevención dirigidas hacia la eliminación o disminución de éste, en la cavidad oral.7 Al. respecto,. se. han. planteado. diferentes. estrategias:. Control. inmunológico, control microbiológico, educación sanitaria, control de la dieta, detección previa de factores de riesgo, higiene bucodental, ingestión y aplicación de fluoruros, aplicación de sellantes de puntos y 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. fisuras, ingestión y aplicación de fármacos.. 9-11. En tal sentido, el uso de. antimicrobianos y antisépticos, principalmente de uso tópico o local se ha utilizado conjuntamente con las técnicas de cepillado para lograr la eliminación de la placa dentobacteriana. Sin embargo el uso de. CA. antimicrobianos en el control de placa no tiene sentido, por los problemas sensibilización planteados en el hospedador, multitud de bacteriano plagado de cepas resistentes.7. MA TI. efectos secundarios y el ir creando de forma progresiva un mundo. la. Endocarditis. bacteriana. FO R. Los Streptococcus del grupo Viridans también son la causa principal de subaguda. y. al. ser Streptococcus. IN. mutans miembro importante de este grupo dado que se encuentran en grandes cantidades 1010/g en la bio-película de la placa, luego de una. E. cirugía dental o cualquier procedimiento odontológico donde se lesione. MA S. mucosa bucal pueden vehiculizarse en sangre y viajar hasta las válvulas cardiacas, siempre y cuando existan causas favorecedoras como por ejemplo, un daño previo valvular en pacientes que han sufrido fiebre. SI S. TE. reumática.12. Entre las más antiguas actividades del ser humano está el estudio de plantas, en particular como fuentes de alimento. Siempre, el hombre se. DE. vio en la necesidad de hacer la distinción entre aquellas plantas que eran venenosas y las que no lo eran, adquiriendo así un amplio. A. conocimiento sobre aquellas que poseían propiedades medicinales, que. IN. fue transmitiendo a través del tiempo al principio en forma verbal y luego. IC. por medio de la escritura. Sin duda alguna, en el reino vegetal existen. OF. muchas especies de plantas que contienen sustancias de gran importancia para la medicina y que aún están por descubrir. Muchas especies son estudiadas con frecuencia para hallar en ellas su posible valor farmacológico, en especial por sus propiedades estrogénicas, antipiréticas, antihelmínticas, astringentes, fungicidas, antibióticas.13,14. Actualmente, las plantas medicinales están recuperando parte del protagonismo que tuvieron en los primeros tratamientos médicos, se 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. percibe un nuevo auge de las aplicaciones terapéuticas de las plantas, una recuperación de su uso. La eficacia de algunos principios activos de origen natural ha quedado demostrada, como es el caso de la acción conocida como hierba de San Juan o Hypericum 15.. CA. vasodilatadora del Ginkgo biloba y las propiedades antidepresivas de la. MA TI. La medicina natural aunque ha sido utilizada como tratamiento médico general desde hace muchos años, es muy poco conocida como posible aporte al ámbito Odontológico. Al respecto, existen investigaciones para. FO R. estudiar el comportamiento de ciertos compuestos de origen vegetal sobre la bacteria Streptococcus mutans, entre las que se pueden señalar las realizadas con aceite esencial de Melaleuca alternifolia "Te verde". IN. 16,17. ; extracto de Anacardium occidentale L. "Merey"s y con la Matricaria. E. recutita "Manzanilla alemana" como irrigante endodóntico,. 18. ; varios. cultivos bacterianos 19.. MA S. aceites esenciales solos y/o combinados con la clorhexidina sobre. TE. Con el aceite esencial de Matricaria Chamomilla ‘’Manzanilla’’ ocurre. SI S. algo similar; son muchas las propiedades adjudicadas a esta planta entre aquellas que han sido ampliamente estudiadas tenemos: antiespasmódico, antiinflamatorio, sedante leve, en la prevención de la. DE. úlcera péptica y tiene también una acción antipigmentaria 20-26.. A. Otros usos populares (de los que existen pocos o ningún estudio),. IN. incluyen: antiséptico, cicatrizante, carminativa, digestivo, antiséptico. IC. ocular, en transtornos nerviosos, transtornos biliares, estomatitis,. OF. dispepsias, acelerando el parto, contra el asma, bronquitis y como antihemorroidal. 20-22 La propiedad antibacteriana de la manzanilla es atribuida principalmente al bisabolol que forma parte de su composición química. 27. , sin embargo. tanto los flavonoides, cumarinas y los sesquiterpenos en general,. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. presentes en la manzanilla, muestran también actividad antimicrobiana. 27- 29. A pesar de su gran número de usos, la manzanilla esta contraindicada. CA. en personas alérgicas a las Asteráceas (compuestas); también no se encuentra información (informes) acerca de efectos teratógenos en el. MA TI. feto, daños en la madre gestante y tampoco interacciones con otros fármacos 25.. FO R. Aún cuando los estudios reportados sobre su acción antibacteriana no son abundantes, existen investigaciones que atribuyen dicha cualidad a. IN. esta planta. Es así que Cinco M, encontró que un extracto hidroalcohólico de Manzanilla inhibió el crecimiento de Staphylococcus Streptococcus. mutans,. Streptococcus. E. aureus,. del. grupo. B. y. MA S. Streptococcus salivarius; y tuvo también un efecto bactericida in vitro, sobre Bacillusmegatherium y Lepospira icterohaemorrhagiae.. 30. Aggag. ME y Yousef RT, encontraron que el aceite volátil de manzanilla inhibió. SI S. TE. al Stafilococcus aureus y al Bacillus subtilis. 31. La manzanilla no presenta efectos secundarios ni contraindicaciones,. DE. como ocurre con la clorhexidina que produce tinciones dentales después de 15 días de uso prolongado,. 32. hipertrofia reversible de la mucosa. A. cambios en el gusto y aumento de los depósitos supragingivales. IN. calcificados.33 Es por esto que se ha buscado agentes naturales que. IC. tengan una óptima acción antimicrobiana con bajos efectos secundarios.. OF. Estudios in vitro han mostrado que tinturas de Matricaria chamonilla poseen efectos sobre ciertos microorganismos formadores de biofilm comparable al de la clorhexidina.. 34. Además se ha evidenciado que. existe una reducción en el índice de placa e índice gingival con el uso dentífricos que tienen una base de extracto de manzanilla.35. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. El uso de colutorios, los cuales son una forma farmacéutica tipo solución acuosa viscosa usada para el tratamiento tópico de afecciones bucales (estomatitis, gingivitis, piorreas, etc). Se aplican con pinceles o espátulas astringente, emoliente o calmante y antiséptico.36. CA. generalmente incorporadas en el tapón. Un colutorio puede ser. MA TI. Se diferencia de un enjuague bucal y de un gargarismo solo por su viscosidad pues es más espeso al incorporar un gelificantes para aumentar la adherencia a la mucosa bucal, además de edulcorantes no. FO R. cariogénicos y agentes para mantener el pH neutral. Sin embargo, un colutorio más diluido puede servir también para hacer buches y usarlo. IN. igual que un gargarismo o enjuage bucal. 36. Realizar enjuagues bucales con un colutorio es un buen complemento a. E. la pasta dentífrica. Un colutorio es una solución líquida acuosa o. MA S. hidroalcohólica con los mismos principios activos que las pastas dentífricas pero en concentraciones más bajas. Es decir, pueden contener flúor si el colutorio está destinado a la prevención de la caries,. TE. o agentes antisépticos o cicatrizantes si se destinan a la prevención de. SI S. la gingivitis. 36. Por tanto, los colutorios dentales han de entenderse como un buen. DE. complemento en la higiene dental, pero no como un sustituto. No obstante, es muy válido su uso en ocasiones como postoperatorios, en. A. casos específicos como el de los portadores de dentaduras postizas, o. IN. en casos extremos en que sea dificultosa la utilización del cepillo. 36. OF. IC. El objetivo principal de los colutorios es: . La eliminación de la placa bacteriana que se deposita en los dientes causando los problemas bucales.. . Controlar o reducir la halitosis y la formación de placa bacteriana.. . Prevenir y controlar la caries y gingivitis.. . Interaccionar con la saliva y proteínas de la mucosa.. . Facilitar la eliminación mecánica del biofilm.36 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Se ha comparado la eficacia de los antisépticos más utilizados en los enjuagues. La clorhexidina es significativamente superior en eficacia al triclosan. En general, ordenados de mayor a menor efectividad contra. CA. la placa bacteriana, clorhexidina, cloruro de cetilpiridinio y triclosan.37,38 Lima y col.39 realizaron un estudio in vitro de actividad antibacteriana de. MA TI. los aceites esenciales obtenidos de las siguientes plantas medicinales: zeylanicum (canela),. Cinnamomum. Cymbopogom citratus (Capim-. Citrus. santo),. Eucalyptus. Limonium (limón),. globulus. (eucalipto),. FO R. Eugenia caryophillus (Clavo), E. uniflora (Surinam cerezo), Lippia alba (bálsamo), Matricaria chamomilla (manzanilla), Pneumus boldus (Boldo),. IN. Ruta graveolens (rue) y Zingiber officinalis (jengibre) en cepas de bacterias Gram negativas. Los aceites esenciales se obtuvieron mediante la. E. técnica de destilación por arrastre de vapor en el agua. Las pruebas de. MA S. las propiedades antibacterianas de los aceites esenciales se han llevado a cabo por la técnica de difusión en medio sólido. Los resultados obtenidos fueron cinco de los nueve aceites esenciales probados mostró. TE. una inhibición del crecimiento de una o más cepas de bacterias Gram. SI S. negativas. Sólo los aceites esenciales de R.graveolens y Z. officinalis no mostró acción inhibidora sobre cualquier cepa prueba. Sin embargo, el aceite esencial de C. citratus recibido destaco entre los productos. DE. probados, mostró una concentración mínima inhibitoria de un 8 por ciento de las cepas analizadas. Concluyendo que los aceites esenciales. A. de plantas medicinales se presentan como agentes potencialmente. IN. eficaces para inhibir el crecimiento de bacterias Gram negativas, y se. OF. IC. destaca la acción del aceite esencial de C. citratus.. Mirón y col.40 evaluaron el efecto inhibitorio de la infusión de Matricaria Chamomilla (Manzanilla) sobre el crecimiento de microorganismos cariogenicos , Lactobacillus acidophilus y Streptococcus mutans in vitro ; demostrando que la concentración al 5% estimula el crecimiento del Streptococcus. mutans. e. inhibe. el. crecimiento. del. Lactobacillus acidophilus, la concentración al 10% obtuvo mayor efecto 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. inhibitorio para los dos microorganismos estudiados, la concentración al 20% tuvo menor efecto inhibitorio que la concentración al 10%. Zapata y col.41 realizaron un estudio del efecto de la Matricaria. CA. chamomilla (Manzanilla) sobre el proceso de cicatrización de tejidos blandos, post extracción; concluyendo en su estudio que la realización. MA TI. de buches con infusión de manzanilla una y dos veces al día da igual proceso de cicatrización de tejidos blandos post extracción de una forma eficaz; además los resultados demostraron que no existe ningún. FO R. tipo de reacción colateral.. IN. Vieira y col.42 realizaron un estudio en la Clínica de Bebes departamento de Odontopediatria de la Facultad de Odontología de la Universidad de. E. Río de Janeiro ; fueron seleccionados 40 bebes, de los cuales se. MA S. recolectaron saliva no estimulada y el biofilm dental, siendo evaluados los efectos de soluciones de dentífricos concentrados y diluidos (1:2 hasta 1:128) utilizados en el higiene oral de bebes, verificándose que la. TE. saliva y el agua deionizada (soluciones de control) y las soluciones de dentífricos. SI S. bicarbonato de sodio e infusión de Matricaria chamomilla , así como los conteniendo. xilitol,. lactoperoxidase,. glicoseoxidase. y. lactoferrina combinados con extractos de Calendula officinallis no. DE. presentan cualquier efecto antimicrobiano, independientemente de la. A. concentración y de la metodología utilizada.. IN. Modesto y col.43 realizaron un estudio sobre la actividad antimicrobiana. IC. de soluciones utilizadas en la higiene bucal del bebe, el objetivo del. OF. estudio fue evaluar y comparar el efecto de los antibióticos utilizados en soluciones de higiene oral en la microflora de los lactantes. Después de recoger la saliva y placa dental de 20 niños, se llevó a cabo el método de difusión en agar. Los resultados obtenidos y analizados por ANOVA y el test de Tukey, se encontró que la soluciones de control, bicarbonato de sodio y la infusión de Matricaria chamomilla no mostraron efecto antimicrobiano, independiente de la concentración. La solución deH2O2 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. (3 por ciento) y NaF (0,02 por ciento) tuvo un efecto significativo (p<0,01), y la solución de H2O2 mostró una mayor actividad (p <0,01) que el NaF, independientemente del origen del inóculo.. CA. Filoche y col.44 realizaron un estudio comparativo de los efectos antimicrobianos de los aceites esenciales por sí solo y en combinación. MA TI. con clorhexidina y digluconato contra biofilm de Streptococcus mutans y Lactobacillus. Incluidos los aceites esenciales de canela, Melaleuca (árbol. alternifola. de. té),. Leptospermum. scoparium. (Manuka),. FO R. Leptospermum morrisonii , árnica, eucalipto, toronja y el aceite esencial de menta; fueron además analizados el enjuague bucal Listerine. ®. y dos de. IN. sus componentes, timol y mentol y el aceite de manzanilla; Canela exhibió la mayor potencia delos antimicrobianos. Manuka, L. morrisonii,. E. aceites de árbol de té y timol mostraron potencia antimicrobiana pero en. MA S. menor medida. El efecto de la combinación del aceite esencialclorhexidina fue mayor en contra de ambos biofilm de S. mutans y Lactobacillus. La cantidad de clorhexidina necesarias para lograr un. TE. crecimiento equivalente de inhibición en contra de la biopelícula se redujo de 4 a 10 veces en combinación con la canela, Manuka, L.. SI S. morrisonii, timol, y Listerine®. Llegando a la conclusión de que puede haber un papel para los aceites esenciales en el desarrollo de nuevos. DE. tratamientos anticaries.. A. Sainz de Net y col.45 realizaron un estudio de flora bacteriana en. IN. pacientes tratados ortodóncicamente, aplicando enjuagues bucales de. IC. Matricaria chamomilla. “manzanilla”; obtuvo como resultado que la. OF. Matricaria chamonilla ayuda a la no formación de la placa dentobacteriana que se forma alrededor de los brackets en pacientes con tratamiento ortodóncico. El enjuague evita la formación de las bacterias al mismo tiempo que la formación de ácidos que desmineralizan el diente, dejando pigmentación blanquecina, antiestética.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Barreto y col.46 realizaron un estudio del potencial antimicrobiano in vitro de 7 dentífricos conteniendo fitoterápicos sobre bacterias orales recuperadas de la saliva y cepas patrón de S. mutans, S. sanguis y L. casei . Fueron obtenidas soluciones concentradas de los dentífricos evaluados y. CA. delos controles; mezclándose 3 gramos de cada uno con 10 mL de agua deionozada estéril, seguido de centrifugación; los sobrenadantes. MA TI. resultantes fueron diluidos en proporciones de 1:2 hasta 1:32. Fue realizado un test de difusión en ágar, colocando cepas patrón y la saliva total estimulada de 10 pacientes saludables. Discos empapados con las. FO R. suspensiones de los dentífricos fueron dispuestos en las placas, las cuales fueron incubadas en anaerobiosis por 48 horas, siendo los halos. IN. de inhibición medidos en milímetros. Los resultados obtenidos fueron analizados mediante ANOVA y teniendo en consideración el control. E. positivo se constató que, solamente las soluciones puras de los. MA S. dentífricos presentaron capacidad antimicrobiana contra cepas patrón, equivalente a la del dentífrico con triclosan, excepto el Gessy Cristal ®. Además, los dentífricos diluidos a 1:2 presentaron acción antimicrobiana. TE. contra las bacterias orales recuperadas de la saliva, excepto el. SI S. Parodontax®.. Sadr y col.47 realizaron un estudio sobre el efecto de la Matricaria recutita. DE. (manzanilla alemana) y Melaleuca alternifolia L. (extracto de árbol de té), usado como sustancias irrigadoras en la remoción del barro dentinario.. A. Demostró La eficacia de la manzanilla para eliminar la capa de frotis. IN. siendo superior a NaOCl solo, pero menos que NaOCl en combinación. OF. IC. con EDTA. García48 realizó un proyecto experimental sobre el efecto antibacteriano in vitro del Aceite Esencial de Matricaria Chamomilla sobre la cepa 2652263 de Streptococcus mutans ATCC. Demostró que las cinco concentraciones. de. aceite. esencial. de. Matricaria. Chamomilla. (Manzanilla) estudiadas, presentan efecto antibacteriano sobre la cepa 2652263 de Streptococcus mutans ATCC, in vitro; la concentración de 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 1,0 mg/ml del aceite esencial de Manzanilla. presentó mayor efecto. inhibitorio, in vitro que las demás concentraciones sobre la cepa 2652263 de. ATCC; y que la concentración. Streptococcus mutans. Mínima Inhibitoria del aceite esencial de Manzanilla contra la cepa. realizaron. un. estudio. descriptivo-exploratorio,. MA TI. Romero y col.49. CA. 2652263 de Streptococcus mutans ATCC, fue de 0.09mg/ml.. longitudinal no experimental en la Facultad de Odontología de la Universidad de Carabobo Venezuela, demostraron el efecto antiséptico y. FO R. antiinfeccioso de la Matricaria recutita dado por la presencia de derivados terpénicos como: matricina, camazuleno, β -bisabolol y los. IN. óxidos α y Β del b-bisabolol. El principal mecanismo de acción antibacteriano es la disrupción de la membrana celular bacteriana, el. E. cual es posible mediante tres vías: 1.- Aumentando su permeabilidad a. MA S. pequeños iones, 2.- Afectando la estabilidad estructural y 3.Desestabilizando el empaquetamiento de la bicapalipídica, produciendo. TE. la muerte del Streptococcus mutans.. SI S. Carpio 50 realizó un estudio preliminar de actividad antimicrobiana de extractos de plantas contra bacterias de la cavidad oral. En la facultad de odontología de la UPCH, encontró resultados positivos para 24 extractos. DE. de 27 de estas plantas. Los extractos con mayor efecto antimicrobiano corresponden a las especies Momordica charantia L., Piper dumosum. IN. A. Rudge,Byrsonima poeppigiana A. Juss, Anacardium occidentale L., Psidum guajava L., Marcia paivae O. Berg Couroupita guianensis Aubl.,. IC. Vismia angusta Miq .,y cuatro aceites esenciales correspondientes a las. OF. especies Cymbopogon citratos (D.C.) Staf, Mentha pulegium L, y Minthostachys mollis (Kunth) Grises. Borba y Col.51 realizaron un estudio de las especies vegetales utilizadas por la comunidad de la Santa Cruz en el barrio de la ciudad de Chapada dos Guimarães, sus indicaciones y las formas de utilización en relación con la salud bucodental. Realizo entrevistas con 40 residentes, a través 18. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. de un enfoque cualitativo. 65 especies fueron recogidos, catalogados y mantenidos para su posterior identificación en UFMT / Herbario Central. Obtuvo como resultado que las especies más usadas fueron; Matricaria chamomilla L. (manzanilla) como sedante y antiinflamatorio en la erupción (Brickelia brasiliensi). y. ( Spreng. CA. del diente, el Crocussativus L. (azafrán) y árnica para estomatitis Robinson) para. el dolor. de muelas:. MA TI. siendo La hoja la parte más utilizada de la planta, que se obtiene por recolección; y el té fue la forma más común de uso.. FO R. Cosco52 realizó un proyecto experimental sobre la actividad inhibitoria del crecimiento de Streptococcus mutans y de flora mixta salival por. IN. acción de aceite esencial de la Matricaria chamomilla (manzanilla). Demostró que Existe un efecto inhibitorio positivo a las concentraciones. E. de 25%, 50% y 100% del aceite esencial de. Matricaria chamomilla. MA S. “manzanilla” en cultivos de flora mixta salival, cepa aislada del grupo mutans de flora mixta salival y cepa patrón de Streptoccocus mutans; Las concentraciones al 25% y 50% del aceite de Matricaria chamomilla grupos de estudio evaluados; Las concentraciones al 100% del. SI S. tres. TE. “manzanilla” no mostraron diferencias significativas entre ellas, sobre los aceite de Matricaria chamomilla “manzanilla”. tiene una diferencia. estadísticamente significativa con respecto a las concentraciones de. DE. 25% y 50% sobre los tres grupos de estudio evaluados.. A. Cárcamo y col.53 demostraron al efectividad antimicrobiana del colutorio. IN. de Matricaria recutita, en funcionarios de la facultad de odontología de la. OF. IC. universidad del desarrollo. Gaete y col.. 54. demostraron la efectividad del colutorio de manzanilla. comparado con placebo y clorhexidina en pacientes con gingivitis entre 19 y 25 años: ensayo clínico controlado.. Debido a que existen muchas enfermedades que comprometen nuestra salud oral, se tiene que tomar medidas adecuadas para en lo posible 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. prevenir cualquier tipo de malestar que aflige a la humanidad, es por esto que el primer paso para poder resolver este problema es lidiar con el principal microorganismo responsable del inicio de los procesos infecciosos de la cavidad oral, el Streptococcus mutans, para ello se. CA. han realizado grandes esfuerzos para encontrar la forma de eliminarlo o controlarlo, entre ellos tenemos la creación de pastas dentales,. MA TI. enjuagatorios bucales y soluciones tópicas que contienen diferentes compuestos químicos que pretenden actuar a nivel local como sistémico, Es así que se mantiene una permanente búsqueda de mejores. FO R. propuestas innovadoras, que permitan erradicar los problemas que involucran a esta bacteria.. IN. El presente proyecto se basa en determinar la efectividad del colutorio a base. de Matricaria Chamomilla (Manzanilla) sobre la cepa ATCC. E. 2652263 de Streptococcus mutans, teniendo en cuenta que la utilización. MA S. de un producto netamente natural y ampliamente difundido y rico en abundancia en nuestro país, reducirá los altos costos en los tratamientos de prevención, intercepción y rehabilitación de problemas orales en la. TE. población y sobretodo de aquellos problemas que guardan relación con. SI S. caries dental.. DE. 1. ENUNCIADO DEL PROBLEMA: ¿Cuál es el efecto antibacteriano in vitro del colutorio a base de. A. Matricaria Chamomilla (Manzanilla) a diferentes concentraciones. IC. IN. sobre la cepa ATCC 2652263 de Streptococcus mutans?. OF. 2. HIPÓTESIS: El colutorio a base de Matricaria Chamomilla (Manzanilla) a diferentes concentraciones presenta efecto antibacteriano in vitro sobre la cepa ATCC 2652263 de Streptococcus mutans.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 3. OBJETIVOS 4.1. OBJETIVO GENERAL: Conocer el efecto antibacteriano in vitro del colutorio a base de. CA. Matricaria chamomilla (Manzanilla) a diferentes concentraciones. MA TI. sobre la cepa ATCC 2652263 de Streptococcus mutans.. 4.2. OBJETIVO ESPECÍFICO:. el efecto del colutorio a. FO R.  Determinar mediante pruebas in vitro. IN. base de Matricaria Chamomilla a diferentes concentraciones que produce la mayor inhibición del crecimiento de la cepa ATCC. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. 2652263 de Streptococcus mutans, in vitro.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. V. MATERIAL Y MÉTODOS. 2.1 TIPO Y ÁREA DE ESTUDIO:. Laboratorio del Departamento de. MA TI. vitro”. El cual se desarrolló en el. CA. El presente trabajo de investigación corresponde al tipo experimental “in. Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de. FO R. Trujillo. 2.2. POBLACION Y MUESTRA. IN. Conformada por un microrganismo de ensayo seleccionado, cepa ATCC 2652263 de Streptococcus mutans, procedente de una muestra. E. proporcionada por el laboratorio de Microbiología de la Facultad de. MA S. Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo, sembradas en medio de. TE. tioglicolato en tubos de ensayo.. SI S. 2.3. DISEÑO ESTADÍSTICO DEL MUESTREO:. DE. 2.3.1 Unidad de Análisis: La unidad de análisis la constituyó cada placa Petri con la cepa. A. ATCC 2652263 de Streptococcus mutans sembrado en medio. IC. IN. agar soya- tripticasa por 24 horas correspondiente al tratamiento.. OF. 2.3.2 Tamaño de muestra: Para determinar el tamaño de la muestra por ser experimental se hizo uso de la siguiente fórmula:. (Zα/2 + Zβ)2 2S2 n= (X1- X2)2 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Donde:. Zα/2 = 1.96 para un α = 0.05 Zβ = 0.84 para un β = 0.20 ó una potencia del 80%.. CA. S = 0.8 (X1- X2) / donde 0.8 es valor asumido por no haber. MA TI. estudios previos.. (1.96 + 0.84)2 2 (0.64) (X1- X2)2. FO R. n= n= n=. 10.03 10.. MA S. E. Con corrección por finitud:. IN. (X1- X2)2. gl +3. Donde:. gl +1. SI S. TE. nf = n. DE. gl: grado de libertad = 2(n-1). IN. A. nf = 11.. Con estos datos se determinó una muestra de 11 repeticiones. OF. IC. para cada tratamiento.. 2.3.3 Análisis Estadístico: Para analizar la información se construyeron tablas de frecuencia de una entrada con valores absolutos y se calculó el promedio y la desviación estándar. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Para determinar que colutorio es más efectivo según las diferentes concentraciones del aceite esencial de Matricaria Chamomilla (Manzanilla), se hizo un análisis de varianza. CA. para la Unidad Formadora de Colonias, utilizando la. MA TI. distribución F, con un nivel de significancia del 5%. Luego se aplicó la prueba de comparaciones múltiples de Dunkan,. FO R. con un nivel de significancia de un 5%.. IN. 2.4. CONSIDERACIONES ÉTICAS:. Se tuvo en cuenta la manipulación y desecho de las muestras. E. sobretodo de la cepa ATCC 2652263 de Streptococcus mutans. MA S. de acuerdo al manual de Bioseguridad en Laboratorios de Microbiología y Medicina durante la ejecución del trabajo, previa. SI S. TE. autorizaciones.. DE. 2.5. MÉTODOS Y TÉCNICAS A) OBTENCIÓN DEL ACEITE ESENCIAL:. A. La obtención del aceite esencial de Matricaria chamomilla se llevó. IN. a cabo en el laboratorio de Farmacognosia de la Facultad de. OF. IC. Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo.. - Preparación de la Muestra: Se seleccionó y se realizó la división grosera de la materia vegetal (Matricaria. chamomilla),. en. donde. las. flores. fueron. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. cuidadosamente separadas de los tallos, luego se fraccionaron las flores en pequeño trozos.55. CA. - Extracción del hidrolato:. MA TI. La obtención del aceite esencial se realizó por el método de ‘’Destilación por arrastre de Vapor’’ (convencional), el cual permite un buen rendimiento.. FO R. La muestra vegetal previamente fraccionada en pequeños trozos,. IN. se colocó en un balón de fondo plano y se la sometió a una corriente de vapor de agua sobrecalentada; de esta manera se. E. arrastró la esencia que posteriormente por la acción del. MA S. refringente de bolsas, se condensó; luego se recolectó y separó de la fracción acuosa mediante la incorporación en el equipo de. TE. una pera de decantación. El producto final obtenido se denominó. DE. SI S. Hidrolato.55,56. - Saturación del Hidrolato:. A. Una vez obtenido el hidrolato se saturó con Cloruro de Sodio, a. IN. una concentración de 10g. por cada 100mL de hidrolato. OF. IC. obtenido.55,56. - Separación del Aceite del Hidrolato: Saturado el hidrolato se separó la fase orgánica, utilizando peras de decantación, para luego someterla a un proceso de purificación. 55,56 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. - Purificación del Aceite Esencial: Se adicionó 50 mL de Éter en la pera de decantación, para disolver y separar el aceite esencial de las impurezas que. CA. pudieran existir en la fase orgánica y se deshidrató con Cloruro de. MA TI. Calcio.. La capa orgánica conteniendo el aceite esencial se transvasó a un vaso de precipitación, previamente tratado, se llevó a un baño. FO R. maría a la temperatura adecuada y durante el tiempo necesario. IN. para que se evapore todo el disolvente presente, de esta manera quedó en el vaso el aceite esencial extraído. Dicho aceite esencial. E. se guardó en un recipiente de vidrio color ámbar, para evitar la. TE. MA S. reacción de descomposición por la luz. 55,56. B) OBTENCIÓN DEL COLUTORIO. FORMULACIÓN. SI S. -. DEL. COLUTORIO. DE. Matricaria. DE. Chamomilla57,58. Para la formulación del colutorio se procedió de acuerdo a lo. A. establecido por Muñoz (2000). Dentro de la formulación se. IN. consideraron. las. materias. primas. más. importantes:. un. OF. IC. tensioactivo o detergente (lauril éter sulfato de sodio), sustancias humectantes (sorbitol y glicerina), un edulcorante (sacarina sódica), y el principio activo (aceite esencial de la manzanilla). Las concentraciones utilizadas de cada materia prima estuvieron dentro de los rangos sugeridos por la bibliografía (Muñoz, 2000). Se elaboraron tres formulaciones, una con 0.10%, 0.25%, 0.50% 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. de aceite esencial de manzanilla. En las Tablas 1,2 y 3 se presenta la fórmula unitaria para una presentación de 80 mL:. MA TI. Porcentaje 3,75% 18,38% 5,63% 0,04% 6,25% 0.10 % 33,88%. Cantidad 3g 14.7 g 4.5 g 0.032 g 5 mL 0.08 mL c.s.p. 80 mL. IN. FO R. Sustancia Emal 70 (Lauril éter sulfato de sodio) Glicerina Sorbitol Sacarina sódica Alcohol 96º Aceite esencial de manzanilla Agua destilada. CA. Tabla 1. Fórmula Unitaria de colutorio de aceite de manzanilla al 0.1 %. MA S. E. Tabla 2. Fórmula Unitaria de colutorio de aceite de manzanilla al 0.25 % Porcentaje Cantidad 3,75% 3g 18,38% 14.7 g 5,63% 4.5 g 0,04% 0.032 g 6,25% 5 mL 0.25 % 0.08 mL 33,88% c.s.p. 80 mL. DE. SI S. TE. Sustancia Emal 70 (Lauril éter sulfato de sodio) Glicerina Sorbitol Sacarina sódica Alcohol 96º Aceite esencial de manzanilla Agua destilada. OF. IC. IN. A. Tabla 3. Fórmula Unitaria de colutorio de aceite de manzanilla al 0.50 % Sustancia Emal 70 (Lauril éter sulfato de sodio) Glicerina Sorbitol Sacarina sódica Alcohol 96º Aceite esencial de manzanilla Agua destilada. Porcentaje 3,75% 18,38% 5,63% 0,04% 6,25% 0.50 % 33,88%. Cantidad 3g 14.7 g 4.5 g 0.032 g 5 mL 0.08 mL c.s.p. 80 mL. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. -. ELABORACIÓN. DEL. COLUTORIO. CON. EL. ACEITE. ESENCIAL DE MANZANILLA57,58,59. ingredientes. de. la. fórmula. a pesar y medir todos los unitaria. de. cada. CA. En primer lugar se procedió. colutorio.. MA TI. Seguidamente se mezcló el lauril éter sulfato de sodio junto con la glicerina, el sorbitol en un agitador magnético a 800 rpm durante 10 minutos y, poco a poco, se añadirán las ¾ partes del. FO R. disolvente (agua). En este punto se adicionaron la sacarina. IN. sódica, se agitó durante cinco minutos hasta su completa disolución. Así se fue completando la formulación con el resto del. fórmula.. MA S. E. disolvente hasta alcanzar el volumen total especificado en la. Posteriormente, se procedió. al envasado y etiquetado del. TE. colutorio en un frasco de vidrio, dejándolo reposar por 24 horas. SI S. para que desaparezca la espuma formada durante el proceso de. DE. manufactura. Finalmente, se determinó el efecto antibacteriano de. IN. A. los colutorios preparados.. C) OBTENCIÓN DE LA CEPA. OF. IC. La cepa 2652263 de Streptococcus mutans ATCC, se obtuvo del. cepario del banco bacteriológico del Laboratorio de la Sección de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. D) PREPARACIÓN DE LA CEPA Una vez obtenida la cepa, ésta fue cultivada en tubos de ensayo con tapa rosca conteniendo el medio Soya tripticasa, incubándose. CA. a 37º con el fin de obtener colonias jóvenes. Luego de 24 horas. MA TI. de cultivadas se las sembró en medio de Caldo Tioglicolato, hasta obtener una turbidez semejante al tubo número 0.5 de la escala de Mac Farland, que corresponde a 108 bacterias por mL.. FO R. Los tubos que contienen la bacteria estudiada, fueron girados. IN. entre la manos durante 30 segundos, antes de proceder al sembrado, para distribuir los microrganismos adecuadamente.. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. 60,61,62. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.6 VARIABLES DE ESTUDIO Y ESCALA DE MEDICIÓN. VARIABLES. INDICADOR. TIPO. ESCALA. Negativo (-). Antibacteriano in Vitro. MA TI. DEPENDIENTE. antibacteriano): 0 a 300 UFC. Cualitativa. Nominal. Cuantitativa. Nominal. Positivo (+++) (Sin efecto. FO R. Efecto. CA. (Con efecto. IN. antibacteriano): >300 UFC. MA S. E. 0% (Blanco Negativo). TE. de Colutorio. 0.10% 0.25% 0.50%. 100% (Blanco Positivo). IN. A. DE. SI S. INDEPENDIENTE. Concentración. OF. IC. 2.7 DEFINICIÓN DE VARIABLES.. Efecto Antibacteriano in vitro. Definición conceptual: Capacidad para evitar la reproducción o producir la muerte de la bacteria en condiciones experimentales..63. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Definición Operacional: En el presente estudio, la sensibilidad bacteriana se medió con el registro del número promedio de Unidades Formadoras de Colonias del crecimiento del Streptococcus mutans. Se consideró de más efectividad a la concentración que logre la menor. CA. formación del número de colonias. Teniendo en cuenta, aquellas placas petri en las cuales no exista crecimiento microbiano alguno o se observe. MA TI. un crecimiento menor o igual de 300 UFC fueron designadas como negativo (-); mientras que en aquellas placas que presentaron crecimiento mayor de 300 UFC, el resultado será emitido como positivo. FO R. (+); según la variabilidad en cuanto al número de colonias se adjudicó un mayor número de cruces para aquellas placas que muestren mayor. IN. crecimiento, obteniéndose:. Negativo (-): 0 a 300 UFC.. MA S. E. Positivo (+++): >300 UFC. 64 Concentración del Colutorio:. TE. Definición conceptual: Relación que existe entre la cantidad de una. SI S. sustancia disuelta y la del disolvente en una disolución.65 Definición Operacional: Disolución del Aceite esencial de Matricaria. DE. Chamomilla en el colutorio que serán: - 0.08ml a 0.10% del total del colutorio.. A. - 0.08ml a 0.25% del total del colutorio.. IC. IN. - 0.08ml a 0.50% del total del colutorio.. OF. Así como también se evaluó un blanco positivo – 100.00% (aceite esencial de manzanilla puro), un blanco negativo – 0.00% (fórmula del colutorio sin aceite).. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VI. RESULTADOS El estudio experimental realizado sobre el efecto antibacteriano in vitro del colutorio a base de Matricaria Chamomilla (Manzanilla) a diferentes. CA. concentraciones sobre la cepa ATCC 2652263 de Streptococcus mutans medido a través de las unidades formadoras de colonias, evidenció los promedios:. 4.818;. 5.545;. 5.727,. correspondientes. MA TI. siguientes. a. las. concentraciones 0.50%; 0.25%; 0.10%. Se trabajó con el blanco positivo (aceite esencial de manzanilla puro) en el cual se determinó un promedio de. FO R. 5.727 UFC, y con el blanco negativo (fórmula del colutorio sin aceite) un. IN. promedio de 5.909 UFC.. El análisis estadístico de los promedios, que utilizó la Prueba de Duncan nos. E. permitió determinar la existencia de efecto antibacteriano del colutorio a base. MA S. de Matricaria chamomilla (manzanilla) sobre la cepa ATCC 2652263 de Streptococcus mutans. El análisis permitió la identificación de cinco grupos de concentraciones homogéneas entre sí, pero significativamente diferentes. TE. entre dichos grupos. Un primer grupo al que le corresponde la concentración. SI S. 0.08 ml a 0.10% del total del colutorio produjo un promedio de UFC de 5.727, un segundo grupo que corresponde la concentración 0.08ml a 0.25% del total del colutorio produjo un promedio de UFC de 5.545, un tercer grupo que. DE. corresponde la concentración 0.08ml a 0.50% del total del colutorio produjo un promedio de UFC de 4.818, el cual representa la mayor inhibición, luego se. A. trabajó con los grupos control (Dos), el grupo control, blanco positivo –. IN. 100.00% (aceite esencial de manzanilla puro) produjo un promedio de UFC de. IC. 5.727 y el último grupo control, blanco negativo – 0.00% (fórmula del colutorio. OF. sin aceite), un promedio de 5.909 de UFC. (GRÁFICO Nº1).. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. GRÁFICO Nº 1 EFECTO DEL COLUTORIO A BASE DE Matricaria Chamomilla. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. A DIFERENTES CONCENTRACIONES. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VII.. DISCUSIÓN. Se reconoce al Streptococcus mutans como el microorganismo más. CA. importante en la iniciación de la caries, lo que obliga a diseñar medidas de prevención dirigidas hacia el control de ésta bacteria en la cavidad oral. En tal. MA TI. sentido, el uso de antimicrobianos y antisépticos, principalmente de uso tópico o local, se vienen utilizando conjuntamente con las técnicas de cepillado para. FO R. lograr su control mediante la eliminación de la placa dentobacteriana. La fitoterapia o tratamiento con las plantas medicinales está siendo cada vez. IN. más aceptada en los diferentes estratos sociales alcanzando un auge insospechado. A pesar de tener una larga historia de saber popular, ha sido. E. menospreciada por los profesionales de la salud. La información científica. MA S. sobre la utilidad de las plantas medicinales es sin embargo, hoy en día, muy numerosa, y el creciente número de plantas conocidas e investigadas hace que el profesional de la salud se vea cada vez más obligado a tener un. SI S. TE. conocimiento serio y objetivo sobre la utilidad real de las plantas. Actualmente, las plantas medicinales recuperan parte del protagonismo que tuvieron en los primeros tratamientos médicos, surgiendo así nuevamente el. DE. auge de las aplicaciones terapéuticas con plantas. Un ejemplo de esto, es el colutorio a base de aceite esencial de la Matricaria chamomilla "Manzanilla" el. A. cual tiene múltiples beneficios médicos bien conocidos, pero su posible uso. IN. como bacteriostático de la principal bacteria implicada en la formación de. OF. IC. placa dentobacteriana, no reúne mayores referencias.. En la presente investigación se buscó determinar si el colutorio a base de aceite esencial de Matricaria chamomilla “manzanilla” ejercía efecto antibacteriano in vitro sobre la cepa ATCC 2652263 de Streptoccocus mutans, lo cual quedó demostrado, al comprobar el efecto de inhibición del desarrollo bacteriano con el colutorio estudiado, según los resultados obtenidos, produciendose un crecimiento Negativo. No se encontraron diferencias 34. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. significativas con respecto al promedio de las Unidades Formadoras de Colonias (UFC) en las distintas concentraciones utilizadas.. El estudio permitió establecer los valores promedio de la inhibición de. CA. Streptococcus mutans evidenciando que, el uso del colutorio a distintas concentraciones del aceite esencial (100.00%, 0.50%, 0.25% y 0.10%). MA TI. producen inhibición, sin embargo no se encontró diferencia significativa entre los promedios obtenidos.. FO R. En investigaciones realizadas por Cinco M30, determinó que un extracto hidroalcohólico de Manzanilla inhibe el crecimiento de Streptococcus mutans,. IN. coincidiendo estos resultados con el presente estudio, en el cual se analizó a la manzanilla en tres concentraciones como componentes de colutorios y con. E. controles positivo y negativo, ambos estudios combinan la esencia de la. MA S. planta en un vehículo hidro-alcohólico; método que permitiría postular la hipótesis, que habiendo encontrado efecto inhibitorio en todos los grupos. TE. estudiados, el solvente es el que estaría produciendo efecto inhibitorio sobre. SI S. la bacteria.. Lima E y col.39, realizaron un estudio in vitro de actividad antibacteriana de los. DE. aceites esenciales obtenidos de plantas medicinales en cepas de bacterias Gram negativas. Las pruebas de las propiedades antibacterianas de los. A. aceites esenciales fueron llevados a cabo por la técnica de difusión en medio. IN. sólido y los resultados obtenidos fueron, cinco de los nueve aceites. IC. esenciales probados mostró una inhibición del crecimiento de una o más. OF. cepas de bacterias Gram negativas, entre las cuales estaba la Matricaria chamomilla (Manzanilla); el presente estudio coincide con el efecto inhibitorio que produce el colutorio a diferentes concentraciones y con el control positivo (aceite esencial de manzanilla puro) sobre dichas cepas de bacterias, debido al efecto potencial antimicrobiano de dicho aceite.. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Los resultados obtenidos evidencian inhibición del crecimiento bacteriano con una variación mínima en todos los grupos estudiados. al ser uno de ellos el control negativo, mismo que contiene (Emal 70 - Lauril éter sulfato de sodio, glicerina, sorbitol, sacarina sódica, alcohol 96º, agua destilada) se podría. CA. afirmar que la inhibición se produciría con o sin la acción del aceite esencial y esto podría deberse a cualquiera de los componentes que forman parte del. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. control negativo; por lo que se rechaza la hipótesis alternativa.. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VIII.. -. CONCLUSIONES. Los 3 colutorios a base de aceite esencial de Matricaria chamomilla y. los. dos. controles. estudiados,. presentan. efecto. CA. (Manzanilla). MA TI. antibacteriano in vitro sobre la cepa ATCC 2652263 de Streptococcus. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. mutans.. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IX. RECOMENDACIONES. -. Se sugiere realizar un estudio para determinar el efecto inhibitorio de. Realizar investigaciones experimentales en animales y posteriormente. MA TI. -. CA. cada uno de los componentes del solvente utilizado en el colutorio.. en personas para probar la eficacia del colutorio en el control de placa. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. dentobacteriana y efecto sobre la mucosa oral.. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

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