PRÁCTICA 4
. MANEJO DEL MICROSCOPIO
-Número de procedimiento: 4
-Técnica: Manejo del microscopio.
-Nombre técnico/a que lo realiza: Marta Rodríguez Martín
FUNDAMENTO
: Aprender a utilizar el microscopio.
MATERIAL
: microscopio , boli , papel
TÉCNICA
1
Coger el microscopio y observar todas sus partes identificándolas. Haz un
dibujo esquemático con sus partes del microscopio.
2
Calcular en cada microscopio:
2.1
Aumento de oculares: 10x/18
2.2
Aumento de cada objetivo: 3,2; 10; 40; 100
2.3
Aumento combinado de los dos anteriores:
10x3, 2= 32
10x10= 100
10x40=400
Realizar una tabla con las mismas:
3
Recortar un trozo de papel cuadriculado, de manera que tenga la forma y
tamaño de un portaobjetos. Dibujar en el medio del mismo un signo (+), con dos trazos
de 4 cuadrados cada uno y escribir, lo más pequeño posible:
SP
3.1
Una letra D, en el extremo derecho del signo (+).
3.2
Una letra IZ, en el extremo izquierdo del signo (+).
IZ
D
3.3
Una letra SP, en el extremo superior del signo (+).
3.4
Una letra IN, en el extremo inferior del signo (+).
IN
Entonces fijarlo a un portaobjetos mediante una cinta adhesiva.
Situar el portaobjetos en la platina del microscopio.
Enfocar la zona central del signo (+), con cada uno de los objetivos, excepto con el de inmersión.
Volver al objetivo de menor aumento, sin dejar de mirar por los oculares y utilizando los tornillos reguladores de la platina:
Desplazar el campo microscópico hacia la derecha ¿qué letras se visualizan? IZ
Desplazar el campo microscópico hacia la izquierda ¿qué letras se visualizan? D
Volver a la zona central
Desplazar el campo microscópico hacia arriba ¿qué letras se visualizan? N
Por último, enfocar sucesivamente, con el objetivo de menor aumento, las letras rotuladas. Fíjate en las escalas longitudinal y transversal de la platina, establece la posición exacta de las mismas. Hacer una tabla con las mismas.
Manejo del nonius o escala de vernier (presentación adjunta → en el A/V) o web)
Después de calculadas las coordenadas quitar el portaobjetos de la
platina y moverla. Volver a poner el portaobjetos en la misma y situando las
escalas en las posiciones establecidas, localizar directamente cada letra.
PREPARACIÓN Y OBSERVACIÓN DE SANGRE EN FRESCO.
INTRODUCCIÓN
La observación de las muestras sin teñir permite evitar los efectos secundarios de la tinción, como pueden ser la coagulación de las proteínas o la solubilización de los hidratos de carbono y grasas.
De este modo, es posible visualizar la estructura natural de las células, o los cambios
estructurales en procesos patológicos, que de otro modo, podrían ser achacados al método de tinción.
MATERIAL
Microscopio.
Portas y cubres.
Sellador histológico o laca de uñas.
MUESTRA
Sangre capilar o sangre venosa anticoagulada.
TÉCNICA
1. Depositar una pequeña gota de sangre completa sobre un cubreobjetos.
2. Invertir inmediatamente el cubre, apoyándolo sobre un porta, permitiendo que la sangre se extienda formando una película delgada.
3. Sellar la preparación, si se va a retrasar mucho la visualización microscópica, para evitar que se seque la muestra.
4. Observar la preparación al microscopio de 40x.
5. Repetir el proceso añadiendo a la gota de sangre otra de SSF.
6. Finalmente usar una suspensión al 3 o 5% de hematíes para la observación
RESULTADOS
a) Al poner en un porta 1 gota de sangre y 2 gotas de suero fisiológico la observación será que la muestra está llena de células.
b) Después, 1 gota de sangre y 1 gota de agua destilada observamos que al entrar el agua se rompen los hematíes (específicamente su pared o membrana celular) y se hemolizan. Sirve para obserar no para contar. c) Finalmente al usar una suspensión al 3 ó 5% de hematíes para la
observación. Se utilizan 9x10 5 litros = 0,09 ml = 90 microlitros de hematíes
CUESTIONES
1.
Dibuja lo que ves. ( imagen anterior)
2.
¿Qué células eres capaz de diferenciar? Eritrocitos
3.
¿Qué tonalidad domina en la muestra? Rojo; con agua destilada la
muestra está más clara, la célula se hemoliza.
4.
¿Cuánta densidad de células observas en cada caso?
ESTUDIO MICROSCÓPICO DE LA CRISTALIZACIÓN DE LA SALIVA.
Contestar las siguientes cuestiones
1.
Fundamento de la técnica o estudio :
En el período preovulatorio, debido a la creciente concentración de estrógenos en el organismo de la mujer comienzan a formarse cristales en forma de helecho en la saliva, aumentando en cantidad y visibilidad a medida que se acerca a la ovulación.
TÉCNICA
1.
Limpiar un portaobjetos con un pañuelo de papel.2. Depositar una gota de saliva sobre el portaobjetos limpio.
3. Extender la gota, con la ayuda de otro portaobjetos.
4. Dejar secar la extensión (luz solar, bombilla, aire caliente, etc)
5. Pone el portaobjetos en la platina.
6. Enfocar la preparación con cada uno de los objetivos, excepto con el de inmersión. Mejor que se atraviese con poca luz:
1. Alejando el condensador de la preparación.
2. Cerrando parcialmente el diafragma.
