UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA

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UNIVERSIDAD PERUANA

CAYETANO HEREDIA

Facultad de Ciencias y Filosofía

Departamento Académico de Microbiología

Sección Inmunología

Departamento Académico de Bioquímica, Biología

Molecular y Farmacología

SILABO

I. DATOS GENERALES

1.1. Nombre de la asignatura

TÉCNICAS DE INVESTIGACIÓN EN

INMUNOLOGÍA

1.2. Código

1.3. Año

2010

1.4. Semestre Académico

1.5. Créditos

02

1.6. Tipo de asignatura

CURSO CORTO

1.7. Prerrequisitos

INMUNOLOGIA I o AFINES

1.8. Semestre/Año de

estudios/Nivel

/ /

1.9. N° de horas lectivas

Teoría

13 h

Práctica

42 h

Del

01 de Febrero de 2010

1.10. Duración de la asignatura

Al

11 de Febrero de 2010

1.11. Profesor coordinador/

responsable

DR. JOSÉ LUIS AGUILAR OLANO

II. SUMILLA

Dentro del desarrollo de conocimientos en Inmunologìa se está experimentando

un vertiginoso avance. Junto al progreso de esta especialidad, paralelamente se ha

logrado un explosivo desarrollo en el área de la inmunología básica, la que actualmente

complementa a la inmunología clínica para el entendimiento del comportamiento del

sistema inmune en muchas enfermedades.

A nivel mundial los inmunólogos emplean diversas técnicas inmunológicas y

diseñan experimentos para obtener información de los mecanismos inmunológicos

implicados en el comportamiento del sistema inmune frente a todo aquello que lo altera.

Por tal motivo, es importante conocer las técnicas para aplicarlas en el campo de

interés. En este curso se brindan técnicas básicas que sin embargo, pueden responder

a cuestiones inmunológicas de manera eficiente.

III. OBJETIVOS EDUCATIVOS

OBJETIVOS GENERALES DEL CURSO:

• Entregar el fundamento de las principales técnicas inmunológicas aplicadas en

investigación

• Realizar las técnicas inmunológicas mediante diseños experimentales que permitan

enseñar los detalles de las mismas e interpretar los resultados obtenidos.

• Evaluar agentes estimuladores de los mecanismos inmunológicos y medir sus

efectos

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IV. CONTENIDOS

DÍA 1:

FECHA HORA

TEMA

ACTIVIDAD PROFESOR

08:00 – 10:00 h

_{Introducción. Aplicación de las}

técnicas inmunológicas en

investigación

Clase

Dr. José L.

Aguilar Olano

10:00 – 13:00 h

_{Aislamiento de CMSP}

Práctica

_{MSc. Iván}

Lozada Requena

Bach. Yubell

Alvarez

Valdivia

13:00 – 14:00 h

_{Criopreservación de CMSP}

Práctica

_{MSc. Iván}

Lozada Requena

Bach. Yubell

Alvarez

Valdivia

14:00 – 15:00 h

Almuerzo

Lunes 01-02-10 15:00 – 17:00 h

Discusión de resultados y

planificación ensayos

Clase

MSc. Iván

Lozada

Requena

DÍA 2:

FECHA HORA

TEMA

ACTIVIDAD PROFESOR

08:00 – 10:00 h

Descongelamiento de CMSP y

tratamiento con fitofármaco

para ensayos de MTT

Práctica

MSc. Iván

Lozada Requena

Bach. Yubell

Alvarez

Valdivia

10:00 – 12:00 h

_{Ensayos de citotoxicidad}

Clase

_{Dr. José L.}

Aguilar Olano

12:00 – 13:00 h

_Almuerzo

13:00 – 14:00 h

_{Ensayo MTT: Adición de MTT}

Práctica

_{MSc. Iván}

Lozada Requena

Bach. Yubell

Alvarez

Valdivia

14:00 – 15:00 h

_{Descongelamiento de CMSP e}

inicio de ensayo de apoptosis

por naranja de acridina

(inmunofluorescencia)

Práctica

MSc. Iván

Lozada Requena

Bach. Yubell

Alvarez

Valdivia

15:00 – 17:00 h

_Apoptosis

Clase

_{Dr. José L.}

Aguilar Olano

Miércoles

03-02-10

17:00 – 18:00 h

_{Ensayo MTT: Lectura}

Práctica

_{MSc. Iván}

Lozada Requena

Bach. Yubell

Alvarez

Valdivia

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DÍA 3:

FECHA HORA

TEMA

ACTIVIDAD PROFESOR

08:00 – 10:00 h

_{Discusión de resultados}

Ensayo MTT

Clase

Dr. José L.

Aguilar Olano

MSc. Iván

Lozada Requena

10:00 – 13:00 h

Ensayo de apoptosis por

naranja de acridina

(inmunofluorescencia)

Práctica

MSc. Iván

Lozada Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

13:00 – 14:00 h

_{Discusión de resultados}

Ensayo Apoptosis

Práctica

Dr. José L.

Aguilar Olano

14:00 – 15:00 h

Almuerzo

Jueves 04-02-10 15:00 – 19:00 h

_Aislamiento

_y

criopreservación de CMSP

Práctica

MSc. Iván

Lozada Requena

Bach.

Yubell

Alvarez Valdivia

DÍA 4:

FECHA HORA

TEMA

ACTIVIDAD PROFESOR

08:00 – 10:00 h

_{Descongelamiento de CMSP}

y tratamiento con fitofármaco

para ensayos de ELISA para

IL-12

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

10:00 – 12:00 h

ELISA (Enzyme Linked

ImmunoSorbent Assay)

Clase

Dr. José L.

Aguilar Olano

12:00 – 13:00 h

_{Estímulo con LPS de las}

CMSP tratadas con

fitofármaco

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

13:00 – 14:00 h

Almuerzo

14:00 – 16:00 h

_{Citometría de flujo}

Práctica

_{Dr. José L.}

Aguilar Olano

Lunes 08-02-10 16:00 – 18:00 h

_{Obtención y almacenamiento}

de sobrenadantes para

medición de IL-12

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

DÍA 5:

FECHA HORA

TEMA

ACTIVIDAD PROFESOR

08:00 – 10:00 h

_{Inicio ELISA}

Descongelamiento de CMSP

y tratamiento con fitofarmaco

para ensayos de ELISA

(caspasa 3) y citometría de

flujo

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

Miércoles

10-02-10

10:00 – 11:00 h

Estímulo con LPS de las

CMSP tratadas con

fitofármaco

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

(4)

Alvarez Valdivia

13:00 – 14:00 h

Inicio ELISA para IL-12

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

14:00 – 15:00 h

Almuerzo

15:00 – 18:00 h

Lisis celular para ensayo de

ELISA (caspasa 3)

Ensayo de citometría de flujo

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

DÍA 6:

FECHA HORA

TEMA

ACTIVIDAD PROFESOR

08:00 – 11:00 h

Ensayos de ELISA para IL-12

y Caspasa 3

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

11:00 – 13:00 h

_{Lectura de resultados en}

citometro de flujo

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

13:00 – 14:00 h

Almuerzo

14:00 – 15:00 h

_{Manejo de Software para}

citometría de flujo

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

15:00 – 18:00 h

Lectura y análisis de

resultados de ELISA para

IL-12, caspasa 3 y citometría de

flujo

Práctica

MSc. Iván Lozada

Requena

Bach. Yubell

Alvarez Valdivia

Jueves

11-02-10

18:00 – 19:00h

_{Interpretación de resultados}

Clase

_{Dr. José L.}

Aguilar Olano

V. ESTRATEGIAS DIDÁCTICAS

El curso comprende 06 sesiones, que se desarrollarán en un formato de clases

teóricas y prácticas de laboratorio realizadas por los profesores del curso.

Los alumnos contarán con información pertinente sobre las clases y protocolos de

ensayo. Así como también se estimulará la discusión durante y después de la

obtención de los resultados de cada una de las técnicas realizadas en el presente

curso.

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VI. EVALUACIÓN

Componentes de la nota:

NOTA (%)

01 EXÁMEN TEÓRICO

100 %

Durante el desarrollo del curso, se tomará en cuenta la asistencia, participación,

desarrollo y aporte del alumno en la clase.

Para ser aprobado en un curso se requiere obtener como mínimo la Nota Final 11. Sólo

para efectos del cálculo de la Nota Final del curso (NF), la fracción 0.50 se redondeará

a la unidad inmediata superior a favor del alumno.

VII. BIBLIOGRAFÍA

1. Immunobiology: The immune system in health and disease. Charles Janeway y

Paul Travers, Mark Walport, Mark J. Shlomchik. 6ta. Edición 2005.

2. Current Protocols in Immunology. Coligan JE et al. John Wiley and Sons INC.

2002.

3. Cellular and Molecular Immunology. Abdul K. Abbas, Andrew H. Lichtman,

Jordan S. Pober. 6th edition. Saunders ELSEVIER. 2007

4. Inmunología: Roit Ivan, Brostoff Jonathan, Male David; 9º Edicion;

Harcourt-Brace; España; 1997.

5. Inmunopatología molecular. Gabriel Rabinovich. Editorial Panamericana. 2004.