Mejoramiento genético vegetal simultáneo para el manejo del virus del mosaico común, la antracnosis y la ascochyta que afectan al cultivo del fríjol en la zona andina

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(1)67q. MEJORAMiENTO GENETiCO VEGETAL S1ULTANEO PARA EL MANEJO DEL VIRUS DEL MOSAICO COMUN, LA ANTRACNOSIS Y LA ASCOCHYTA QUE AFECTAN AL CULTIVO DEL FRIJOL EN LA ZONA ANDINA. INFORME FINAL MINISTERIO DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL a - reyIuudI 'a. Centro de Investigación La Selva. '.JIL)I Íc. --.-----i IL_c. Ji iici Id 1 UI. Líder del proyecto. Rionegro, Junio 30 de 2003.

(2) IfDAltaUz pjTr. dZTU'r. rç r rtit L1 IrIlI.,J'.j 1JI-..l. VIRUS DEL MOSAICO COMUN, LA ANTRACNOSiS Y LA ASCOCHYTA QUE AFECTAN AL CULTIVO DEL FRIJOL EN LA ZONA ANDINA. 1. 'L.L 1 I%J. Ir'T1t.g CPI U TAdr DADA. V L..%,L.. 1 I'.l. sIlVtJLg iII.J. CORROIGA, Grupo Regional de Investigación Agrícola, Regional 4 !nvestgador Principal Gloria Esperanza Santana Fonseca" Grupo Regional de Investigación Agrícola, Regional 4. Cipriano Díaz Diez2 Pablo Julián Tamayo Molano3 Grupo Regional de Investigación Agrícola, Regional 7 Coinvestigador. C). Jaime Villa mizar Moren 04. LU. en. EXPERTOS ASESORES Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT) UI IVIQLL11 1 V VV. Bl air 5 Dr. George Mahuku6 Dr. Francisco Morales7. 1. Bióloga, M.Sc. Mejoradora Genética Vegetal Ingeniero Agrónomo Ingeniero Agrónomo, M.Sc. Fitopatólogo Ingeniero Agrónomo Ingeniero Agrónomo, Ph.D. Fitomejorador y Biotecnólogo 6 Ingeniero Agrónomo, Ph.D. Fitopatólogo Ingeniero Agrónomo, Ph.D. Virólogo 2. '3. NUI.

(3) ut rAI,rrrir'r U ./ %1_IL.. TA.Ir U rtLI_.J. IrTAt CERA¡¡¡ y I%..U_ 1 i%I_ s1IVl1.J. DADA = y. FRAI,J. F %I'tt ¡..I.. IIIItILJ. J1..1... VIRUS DEL MOSAICO COMUN, LA ANTRACNOSIS Y LA ASCOCHYTA QUE AFECTAN AL CULTIVO DEL FRIJOL EN LA ZONA ANDINA Lugar de Ejecución del Proyecto Centro de Investigación "La Selva", Rionegro- Antioquia CRECED Altiplano Norte, Santa Rosa de Osos - CORPOICA Regional 4 Centro de Investigación " E! Arsenal" CORPO!CA Regional 7,Málaga- Santander Centro de Investigación "Tinagá" CORPOICA Regional 7, Málaga- Santander Centro Internacional de Agricultura Tropical, C!AT. Palmira- Valle. Convenio: 130- 2001. Ministerio de Agricultura y desarrollo Rural y CORPOICA, Regional 4 Código de Agenda CORPOICA 2002-2003: PR 04100146 D,,- 1oa'.-, ,-l-,. tJcL.u,lul de ct_,uvtLUcuc;:, Fecha de Inicio: 28 Febrero-2002 Fecha de finalización : 30 Junio - 2003.

(4) AGRADECIMIENTOS. Gracias al apoyo financiero del Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural, al apoyo científico y logístico del Centro Internacional de Agricultura Tropical - CIAT, al apoyo técnico de las UMATA's, al acompañamiento y dedicación de los productores de fríjol, al apoyo científico, técnico y logístico de CORPOICA Regional 4, Rionegro.. 4.

(5) TABLA DE CONTENIDO 1. INTRODUCCIÓN..............................................................................................14. 2. OBJETIVOS.. ............ .. ................. .......................... .............................. .............. 15 2.1 OBJETIVO DE DESARROLLO A LARGO PLAZO .................... ......................15 2.2 OBJETIVO GENERAL ......... ...... .... . .... ................... ... ... . ....... ..................... .......16 2.3 OBJETIVOS ESPECÍFICOS ...... ... ..... . ..... .................... .................................... 16 2.3.1 Desarro llar variedades de frijol tipo Cargamanto con resistencia al virus del mosaico común, la antracnosis y la ascochyta para clima frío moderado de la ZonaAndina . ............................. .... ..... . ................. . ...... . ........ . .................. . ............. 18 2.3.1.1. Desarrollo de híbridos Fi de cruces simples e híbridos de cruces triples entre los genotipos Cargaman tos regionales y genotipos resistentes a antracnosis y virus del mosaico común, en el Centro de Investigación La Selva, Rionegro. .............. . ... . ........ . .... . ....... .... . .............. . ............. ............................ .. ........ 18 2.3. 1.2. Evaluación de un vivero de líneas tempranas de cruces triples entre Cargaman tos regionales y fuentes de resistencia en condiciones de campo y laboratorio....... . ................ . ......... ............. . ....................... . ....... . .... .... ........... . ... . ...... 21 2.3.1.3. identificación de líneas tempranas con resistencia a ascochyta (Phoma exigua va r. Diversispora) que puedan servir como padres para mejorar el frijol Cargamanto, procedentes del C/AT. ........ . ...... . ........ . ........................ .................... 37 2. 3.2 Desarrollar variedades de frí/ol Radical resistentes a la antracnosis y con el tipo de semilla comercial en el Nororiente Colombiano. ........................................ 41 2.3.2.1. Evaluación de un vivero de líneas avanzadas de fríjol Radical de hábito voluble para clima frío en Santander . ............................. . ...................................... 42 2.3.3 Desarrollar variedades de frijol arbustivo con altos rendimientos, resistentes a antracnosis y con el tipo de semilla comercial para clima frío moderado en Anuoquia................................................................................................................53 2.3.3.1. Evaluación de un vivero de líneas avanzadas de frijol arbustivo resistente a antracnosis y de tipo de g rano comercial para clima frío moderado en Antioquía. ................................................................................................................53. 5.

(6) EU. 2.3.4. Evaluar y mantener fuentes de resistencia nativas y foráneas de las -. principales enfermedades de clima frío moderado. ... ..... . ...................... ................ 72 2.3.4.1. Evaluación de viveros por resistencia a antracnosis y por resistencia al virus del mosaico común, procedentes del proyecto de frijol del CIA T cultivos comerciales.... . ......... .... .............. . ........................................................................... 72 2.3.4.2. Caracterización de aislamientos del hongo Colletotrichum lindemuthienum. ........ ............. ................ ....... ............................................ . ........... 84 3. LOGROS ..........................................................................................................97 3.1 Objetivo específicos ...... .... ... ............... .............. ..................................... .......... 97 4.. BIBLIOGRAFÍA ................ .............................................................................103. 6.

(7) LISTA DE TABLAS. Página 19. Tabla 1. Genotipos parentales utilizados en el plan de cruzamientos en 2003 en Rionegro, Antioquia.. Tabla 2. Número de semillas Fi obtenidas en cruces simples y triples durante el plan de cruces en el 2003 en el Centro de Investigación La Selva, Rionegro.. Tabla 3. Evaluación de selecciones individuales F4 a virus del mosaico común y alfr del mosaico necrótico del fríjol.. Tabla 4. Fuentes de germoplasma donantes de genes de resistencia al virus del mosaico común y antracnosis y genotipos de tipo cargamanto.. 29. Tabla 5. Genotipos evaluados con el marcador ROC 11 420bp tipo SCAR.. 32. Tabla 6. Genotipos evaluados con el marcador SCAR SW13 690bp tipo SCAR.. 33. Tabla 7. Evaluación de selecciones individuales F4 mediante el marcador molecular tipo SCAR ROO 11 420bp.. 35. Tabla 8. Iias F4 y F5 y testigos evaluados por resistencia a ascochyta en el Centro de Investigación 'La Selva".. 38. Tabla 9. Evaluación de las generaciones F5 y F6 por reacción a ascochyta en Centro de Investigación "La Selva".. 40. Tabla 10. Caracteres cuantitativos y cualitativos evaluados en 64 selecciones individuales de frijol voluble en Santander.. Tabla 11. Estadísticas simples para caracteres cuantitativos de frijol radical de la zona Nororiente de Colombia.. 44. Tabla 12. Resumen de las variables cuantitativas correlacionadas en la evaluación.. 45. --. Tabla 13. Evaluación de genotipos de frijol radical arbustivo en el Centro de Investigación 1 El Arsenal en el Nororiente Colombiano en 2002.. Tabla 14. Caracteres cuantitativos y cualitativos evaluados en 100 selecciones individuales de frijol arbustivo de Santander.. Tabla 15. Estadísticas simples para caracteres cuantitativos de 100 selecciones individuales de frijol rojo arbustivo de la zona Nororiente de Colombia.. Tabla 16. Variables cuantitativas correlacionadas en la evaluación de fríjol arbustivo radical.. 20. 5. 51.

(8) Página 54. Tabla 17. Genopos de frijol arbustivo tipo Cargamanto y radical evaluados en tres localidades de clima frío moderado en Antioquía.. Tabla 18. Grado de severidad a ascochyta de líneas LSA avanzadas de frijol arbustivo en dos localidades de clima frío moderado en Antioquía.. Tabla 19. Grado de severidad a antracnosis de líneas LSA avanzadas de frijol arbustivo en tres localidades de clima frío moderado en Antioquía.. Tabla 20. Evaluación del grano de lineas LSA arbustivas de frijol por productores en Entrerríos.. Tabla 21. Lineas escogidas por los agricultores por mejores características de grano.. Tabla 22. Líneas LSA con evaluación desfavorable en características de grano por los agricultores en Entrerríos.. 62. Tabla 23. Líneas LSA arbustivas de frijol evaluadas por arquitectura por productores en Entrerrios.. 63. Tabla 24. Líneas LSA de fríjol arbustivo escogidas por los agricultores por mejor arquitectura.. 63. 58. 61. LU. Tabla 25. Líneas LSA con evaluación desfavorable en la arquitectura de la planta por los agricultores en Entrerrios.. 64. Tabla 26. Líneas LSA de fríjol arbusbvos evaluadas por rendimiento por productores en Entrerrios.. 64. [Tabla 27. Líneas LSA con evaluación desfavorable en rendimiento por los agricultores en Entrerríos.. 65. Tabla 28. Tabla 31: Líneas LSA de fríjol arbustivo con características favorables de grano evaluadas por productores en Entrerrios.. 68. Tabla 29. Lineas LSA con evaluación desfavorable en las características de grano por los agricultores en Entrerríos.. 69. Tabla 30. Lineas LSA de frijol arbustivo con características favorables en la arquitectura de planta por productores en Entrerríos.. Tabla 31. Líneas LSA con evaluación desfavorable en las características de arquitectura de planta por los agricultores en Entrerrios.. 69. Tabla 32. Líneas LSA de frijol arbustivo con características favorables en el rendimiento por productores en Entrerríos.. 70. (. LU. -J. LL. ______. CO. L..

(9) Página 70. Tabla 33. Lineas LSA con evaluación desfavorable en las características de arquitectura de planta por los agricultores en Entrerrios.. Tabla 34. Reacción al virus del mosaico común y al virus del mosaico necrótico del frijol de 7 genotipos BRC.. 77. Tabla 35. Evaluación por reacción a BCMV de 29 genotipos en condiciones de invernadero en CIAT, procedentes de Rionegro Antioquía.. 78 Página. Tabla 36. Variedades Colombianas evaluadas por resistencia a tres razas de antracnosis identificadas en Anboquia.. 79. Tabla 37. Cargamantos regionales procedentes de Antioquía que han sido evaluados bajo condiciones de invernadero con cuatro aislamientos de antracnosis de Rionegro.. 80. Tabla 38. Reacción de 24 líneas seleccionadas en Río Negro inoculadas en condiciones de Invernadero con tres razas de Colletotrichum Iindemuthianurn,. 83. Tabla 39. Fenotipo de virulencia de las 13 Razas de Colietofrichum !indemuthianum presentes en el Departamento de Santander.. 85. Tabla 40. Frecuencia de los aislamientos presentes en los campos de Santander.. 86. Tabla 41. Identificación de los Aislamientos, Raza y Municipio donde fueron colectados en el Departamento de Santander.. 88. Tabla 42. Fenotipo de virulencia de las 12 Razas de Coiíetotrichum Iindemuthianum presentes en Altiplano Norte, Departamento (Antíoquia).. 89. Tabla 43. Frecuencia de los aislamientos presentes en el Altiplano Norte.. 90. Tabla 44. Identificación de los Aislamiento, Raza y Municipio donde fueron colectados en Altiplano Norte, Departamento de Antioquia.. 92 -.. Tabla 45. Fenotipo de. virulencia de las 18 Razas de Colletofrichum Iindemufhianum presentes en el Oriente Antioqueño.. 93. Tabla 46. Frecuencia de los aislamientos presentes en el Oriente Antioqueño.. 94. Tabla 47. Identificación de los Aislamientos Raza y Municipio donde fueron colectados en el_Oriente _Antioqueño._Departamento _de_Antioquia.. 96.

(10) LISTA DE FOTOS Página 26. Fotol. Plantas de frijol con síntomas de mosaico común en condiciones de invernadero.. Foto 2. Plantas de frijol con síntomas de mosaico necrótico del frijol en condiciones de invernadero.. 26. Foto. Fotografía de un gel de agarosa con bandas del producto del PCR, bajo luz ultravioleta.. 31. Foto 4. Parcelas experimentales de mejoramiento de fríjol radical arbustivo en el Centro de Investigación El Arsenal, Enciso , Santander.. 47. LISTA DE GRAFICAS. Página 87. Figura 1. Compatibilidad de las variedades diferenciales en porcentaje a los aislamientos de Santander.. Figura 2. Compatibilidad de las variedades diferenciales en porcentaje abs aislamientos de Altiplano Norte.. Figura 3. Compatibilidad de las variedades diferenciales en porcentaje a los j 95 aislamientos del Oriente Antioqueño.. 91. 10.

(11) MEJORAMIENTO GENETICO VEGETAL SIMULTANEO PARA EL MANEJO DEL VIRUS DEL MOSAICO COMUN, LA ANTRACNOSiS Y LA ASCOCHYTA QUE AFECTAN AL CULTIVO DEL FRIJOL EN LA ZONA ANDINA.. Gloria Esperanza Santana Fonseca' RESUMEN EJECUTIVO La producción comercial de fríjoles regionales Cargamantos y Radicales es afectada por la antracnosis (Colletotrichum Iindemuthianum), ascochyta (Phoma exigua var.. Diversispora) y virus del mosaico común. Enfermedades transmitidas por la semilla cuyo control ecológico, económico y duradero es mediante el mejoramiento genético vegetal. Este proyecto de investigación fue realizado bajo el convenio entre CORPOICA, Rionegro y el Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. Fue desarrollado en los municipios de Santa Rosa de Osos y Rionegro, en el departamento de Antioquia y en los municipios de Enciso, Cerrito y Málaga en Santander con la coordinación de las UMATA's en la selección de fincas, agricultores y socialización del proyecto. El objetivo del proyecto fue desarrollar variedades de fríjol voluble y arbustivo resistentes a las principales enfermedades limitantes de la producción, con el tipo de semilla comercial que contribuyan a la disminución del uso de agroquímicos y pérdidas en el rendimiento. Para el frijol voluble tipo cargamanto se seleccionaron 8 genotipos con resistencia a antracnosis entre variedades diferenciales y variedades mejoradas (Kaboon, G2338, G2333, T.O, Widusa, AB 136, G19833 y G 7602), por inoculación de razas de antracnosis presentes en Antioquia, 14 genotipos con resistencia al virus del mosaico común del frijol (BRB 151, BRB 203, BRB 204, BRB 211, BRB 197, BRB 183, BRB225, BRC 12, BRC 14, BRC 30, BRC 31, BRC 32, BRC 33 y BRC 34) por inoculación de la cepa NL3 y mediante marcadores moleculares tipo SCAR; y 5 genotipos con características comerciales de grano por evaluaciones de campo (GES 5, Ica Viboral, GES 11, 137.T2.pl4,. (36.T3.pl2 y LAS22O). Fueron realizados cruces simples y triples para obtener 141 familias F1 de cruces triples.. 1. Mejoradora genética vegetal. Grupa de investigación Agrícola. Centro de investigación La Selva. CORPOICA. ho p [email protected] . Apartado aéreo 100 Rionegro Antioquia. 1.

(12) Así mismo, fueron evaluadas las generaciones tempranas F2 y F3 y se identificaron 1400 selecciones individuales F3, a las cuales se les confirmó la resistencia a antracnosis con inoculaciones de 7 razas del hongo (9, 129, 141, 525, 645, 651, y 653) en condiciones de campo. A 11 selecciones F3 se les confirmó la resistencia al virus del mosaico común con la inoculación de la cepa NI-3 y se identificó mediante selección asistida por marcadores moleculares 148 selecciones F3. De otra parte, se evaluaron líneas F4 y F5 de cruces interespecíficos entre Phaseolus vuigris y Phaseolus coccineus, por resistencia a ascochyta ( Phoma exigua var. Diversispora) y fueron seleccionadas 16 líneas promisorias como padres resistentes a esta enfermedad en un programa de mejoramiento con dicho objetivo. Fueron evaluados de forma participativa en finca de agricultores, dos viveros de líneas avanzadas de fríjol arbustivo tipo cargamanto para clima frío moderado; por evaluaciones de rendimiento, arquitectura de planta erecta, buena carga, sanidad y color del grano fueron seleccionadas 16 lineas. Para la zona Nororiental del país, se evaluaron los frijoles rojos tipo radical volubles para clima frío y arbustivos para clima medio. Entre los volubles se evaluó un vivero conformado por líneas LAS y otro vivero de fríjol cabrerano común (R-C), de los cuales fueron seleccionados por altos rendimientos , calidad de grano y sanidad las líneas LAS 449 , LAS 450, R-C 316 y R-C 323, las cuales puedes ser evaluadas en pruebas regionales como futuras variedades. Para los frijoles de hábito arbustivo se evaluaron los viveros R-SG y R.ARS, de los cuales fueron seleccionadas 5 líneas, por los altos rendimientos, la resistencia a antracnbsis y grano comercial; estas líneas son promisorias como padres para un programa de mejoramiento de fríjol arbustivo rojo. Por último se realizaron 57 colectas de variedades regionales de frijol con el objetivo de buscar fuentes de resistencia a las principales enfermedades que afectan la producción de frijol en la Zona Andina. En estas colectas se observó los síntomas del virus del mosaico común, la antracnosis y la ascochyta en condiciones de campo. Así mismo, se hicieron 110 colectas de material vegetal entre hojas y vainas con síntomas de antracnosis, en 21 y 11 municipios de los departamentos de Antioquia y Santander 12.

(13) respectivamente. Fueron caracterizadas 30 razas en Antioquia y 13 Santander; las variedades diferenciales resistentes a las razas encontradas en Antioquia son Kaboon, AB 136, G-2333, T.O y Widusa, en Santander Kaboon, G2333, y México Como un resultado adicional, se realizó un día de campo con 24 agricultores, quienes evaluaron dos viveros de fríjol cargamanto arbustivo. Se capacito a 14 investigadores y asistentes de investigación en el reconocimiento de los síntomas del virus del mosaico común en condiciones de campo. Se capacitó al mejorador genético en la estandarización y uso masivo de metodologías en marcadores moleculares como una herramienta de la biotecnología al servicio del mejoramiento clásico. Se capacitó a la estudiante Claudia Julio del SENA La Salada, en las actividades relacionadas al establecimiento, mantenimiento y evaluación de viveros de fríjol en condiciones de campo, mediante la modalidad de práctica empresarial. Se participó y presentó resultados parciales del proyecto en dos cursos nacionales realizados uno en Antioquia y otro en Santander. Se presentó resultados parciales en la XLVIII Reunión Anual del Programa Cooperativo Centroamericano para el Mejoramiento de Cultivos y Animales celebrado en Santo Domingo, República Dominicana, así como en al Primer Curso Internacional de Mejoramiento Genético de Frijol asistido por marcadores moleculares, en Palmira Valle. Se participo en el primer concurso nacional de productos biotecnológico con fines industriales organizado por Colciencias. Se participará en el Vlfl Congreso de protección de cultivos y fitomejoramiento el próximo 2 de Julio.. Descriptores ¡Palabras claves: Phaseolus vulgaris L.,Phaseolus coccineos,. mejoramiento genético, Col/e fotricun lindemuthianum, marcadores moleculares tipos SCAR, resistencia múltiple, Phoma exigua var. Diversispora y virus del mosaico común.. 13.

(14) 1.. INTRODUCCIÓN. En Colombia, el 65% del fríjol producido es de tipo voluble y el 35% es arbustivo, de los cuales el 90% es con variedades regionales (Cargamantos, Radicales y Bolas Rojas y calimas), Los fríjoles regionales son de semilla grande (>60g1100 semillas) y altos rendimientos (>2.000 klha) en ambiente favorables, pero son susceptibles a plagas y enfermedades. Entre los principales limitantes que aquejan la producción colombiana en las zonas de clima frío y frío moderado están las causadas por hongos antracnosis (Colletotrichum Iindemuthianum) y mancha ascochyta (Phoma exigua var. Diversispora), y el virus del mosaico común (Schwartz and Gálvez, 1980; Cardona et al., 1997). Este último es una enfermedad transmitida por semilla, que a venido tomando importancia desde comienzos de la década de] 90, debido a la epidemia en el Oriente Antioqueño por cambios ambientales causados por el fenómeno del niño. Las pérdidas ocasionadas por este patógeno oscilan entre el 40 y el 100% y su control ha sido mediante prácticas culturales, pero la solución duradera y efectiva es mediante el uso de variedades resistentes al virus (Tamayo y Arias, 1992; Tamayo et al., 1993; Provvidenti, 1993). La resistencia a este virus es conferida por 6 genes recesivos e independientes y un gen dominante 1. Entre estos el gen recesivo bc-3 es el requerido en los programas de. z1. 3. c. e. mejoramiento genético en Colombia, porque confieren resistencia a todas las cepas virales conocidas hasta el momento y no está ligado al color oscuro de las testa de la. LU. semilla (Provvidenti, 1993).. —J. co La antracnosis es probablemente la enfermedad más importante del fríjol común (Phaseolus vulgaris) de distribución mundial. En Colombia es endémica en las zonas productoras de frijol ubicadas en clima medio, frío y frío moderado, en donde ocasiona pérdidas en rendimiento entre el 38 y 100%, cuando se siembra semilla infectada de una variedad susceptible (Tamayo et al., 1995). La antracnosis afecta la calidad del grano así como la vaina, lo que es muy importante si el frijol se consume en verde o como habichuela. La alta variabilidad patogénica que representa Colletotrichum Iindemuthianum es un obstáculo para la creación de variedades resistentes. Esta variabilidad patogénica se ve reflejada en el número de razas encontradas (Otoya y Pastor Corrales, 1 991;Tamayo et al, 1995). También se conoce que, la resistencia a la antracnosis presenta una variabilidad representada en los seis genes mayores e. r.

(15) independientes (Co - 1, Co-2, Co-3, Co-4, Co-5 y Co-6) (Young and Kelly, 1996). El conocimiento de estos genes de resistencia facilitan la piramidación de los mismos en diferentes combinaciones, mediante el cruce de genotipos que los posean. La ascochyta causa pérdidas del 40% en zonas de clima medio y frío moderado en todas las variedades de frijol común; solo hoy día se cuenta con accesiones resistentes en Phaseolus coccineus en la subespecie polyanthus, con la cual se han desarrollado híbridos interespecíficos (Schwartz, 1994). La mancha ascochyta afecta todas las partes de la planta (Pastor - Corrales y Schwartz, 1994) y se transmite por semilla generando un problema endémico (Pastor-Corrales, 1997). Entre las alternativas de control a estas enfermedades están el manejo cultural, el uso de semilla certificada, el uso de agroquímicos y el uso de variedades resistentes. Esta última alternativa es la más económica, ecológica y duradera. Por esta razón, el programa de mejoramiento vegetal de CORPOICA continuará las investigaciones tendientes a desarrollar variedades de frijol tipo Cargamanto y Radicales de hábitos volubles y arbustivos resistentes antracnosis, virus del mosaico común y la mancha ascochyta con el tipo de grano comercial, para los climas frío moderado y cálido de la Zona Andina de Colombia. 2. OBJETIVOS 2.1 OBJETIVO DE DESARROLLO A LARGO PLAZO . Contribuir a la producción de un cultivo tradicional más tecnificado, menos dependiente de insumos químicos, a la recuperación de las hectáreas que se han dejado de sembrar, a la reducción de las importaciones y al incremento duradero en la disponibilidad de un recurso agrícola autóctono mejorado, alimento nutritivo y básico para la población Colombiana.. 15.

(16) 2.2 OBJETIVO GENERAL • Desarrollar variedades de fríjol voluble y arbustivo resistentes a las principales enfermedades limitantes de la producción, con el tipo de semilla comercial que contribuyan a la disminución del uso de agroquímicos y pérdidas en el rendimiento. 2.3 OBJETIVOS ESPECHCOS Objetivo Específico Uno • Desarrollar variedades de frijol tipo Cargamanto con resistencia al virus del mosaico común y la antracnosis y a ascochyta para clima frío moderado de la Zona Andina. Actividades • Desarrollo de híbridos Fi de cruces simples e híbridos de cruces triples entre los genotipos Cargamantos regionales y genotipos resistentes a antracnosis y virus del mosaico común, en el Centro de Investigación La Selva, Rionegro. • Evaluación de un vivero de líneas tempranas de cruces triples entre Cargamantos regionales y fuentes resistencia en condiciones de campo y laboratorio. • Identificación de líneas tempranas con resistencia a ascochyta (Phoma exigua var. Diversispora) que puedan servir como padres para mejorar el frijol Cargamanto, procedentes del CIAT. Objetivo Específico Dos • Desarrollar variedades de frijol Radical resistentes a la antracnosis y con el tipo de semilla comercial en el Nororiente Colombiano.. 16.

(17) Actividades Evaluación de un vivero de líneas avanzadas de fríjol Radical de hábito voluble para clima frío en Santander. • Evaluación de un vivero de líneas avanzadas de fríjol Radical de hábito arbustivo para clima cálido en Santander. Objetivo Específico Tres • Desarrollar variedades de fríjol arbustivo cargamanto resistentes a antracnosis, con altos rendimiento y semilla comercial para clima frío moderado en Antioquia Actividades • Evaluación de un vivero de lineas avanzadas de frijol arbustivo resistente a antracnosis y de tipo de grano comercial para clima frío moderado en Antioquia. Objetivo Específico Cuatro o Evaluar y mantener fuentes de resistencia nativas y foráneas de las principales enfermedades de clima frío moderado. Actividades • Evaluación de un vivero por resistencia a antracnosis y de uno por resistencia al virus del mosaico común, procedentes del proyecto de frijol del dAT. o Caracterización de aislamientos del hongo Colletotrichum Iindemuthianum.. 17.

(18) 2.3.1 Desarrollar variedades de frijol tipo Cargamanto con resistencia al virus del mosaico común, la antracnosis y la ascochyta para clima frío moderado de la Zona Andina.. 6922. Actividades. 2.3.1.1. Desarrollo de híbridos FI de cruces simples e híbridos de cruces triples entre los genotipos Cargamantos regionales y genotipos resistentes a antracnosis y virus del mosaico común, en el Centro de Investigación La Selva, Rione gro.. Gloria Esperanza Santana Fonseca Ovidio García Osorio. Ubicación geográfica El Centro de Investigación "La Selva" de CORPOICA está ubicado en el municipio de Rionegro, Antioquia a una altura de 2.100 m.s.n.m., temperatura promedio 17°C y una precipitación de 1.800 mm. Materiales Para los cruces simples y triples fueron utilizados cuatro genotipos resistentes a antracnosis, siete genotipos resistentes al virus del mosaico común, procedentes de CIAT, Palmira y cinco genotipos con el tipo de semilla comercial procedentes de CORPOICA (Tabla 1). Métodos Los genotipos fueron sembrados en parcelas de 5m de largo, con distancias de siembra de 0,25m entre plantas y 1 m entre surcos. Para el establecimiento y mantenimiento de las parcelas se utilizó cal dolomítica, gallinaza y triple 15, desyerbe con azadón y control fitosanitario establecido para el cultivo (Tamayo, 2001), cuando fue necesario.. 18.

(19) Tabla 1. Genotipos parentales utilizados en el plan de cruzamientos en 2003 en Rionegro, Antioquia.. Los cruzamientos simples y triples se realizaron manualmente mediante la técnica de emasculación con el estigma cubierto (Temple, 1977). Para los cruzamientos simples se utilizaron las fuentes de resistencia a antracnosis y virus del mosaico común y para los cruces triples los genotipos con el tipo de semilla comercial. Resultados y discusión Fueron realizados 10 cruzamientos por cada cruce simple planeado. Se obtuvo un total de 181 semillas FI, con un rango entre 5 y 45 semillas por cruce. Para los cruces triples se realzaron 15 cruzamientos por cruce planeado. Se obtuvo 141 semillas Fi, con un rango entre 2 y 39 semillas (Tabla 2). En los cruces simples para descartar las plantas Fi formadas a partir de la autopolinización, fueron eliminadas las plantas con síntomas de antracnosis, debido a que este carácter es dominante, es decir que todas las plantas heterocigotas para el carácter deben ser resistentes. Las plantas seleccionadas fueron utilizadas como parentales machos en los cruces triples..

(20) Tabla 2 Número de semillas FI obtenidas en cruces simples y triples durante el pian de cruces en el 2003 en el Centro de Investigación La Selva, Rionegro. Cruce simple. No. Semillas. G-2333xBRC32 G-2333xBRB34 G-19833xBRB197 G-2333xBRB197 G-2333xBRC33 G-1 9833xBRC14 lcaviboralxBRCl 2 BRB 225xKaboon AB 1 36xBRB225 TOTAL SEMILLAS. 26 10 20 15 22 45 33 5 5 181. Cruce Triple GES-5x (G-2333x BRC 325F1 lcaviboralx (G-2333xBRC 32)F1 GES-llx(G 2333x BRC 32)F1 LAS 220x (G2333x BRC 34)F1 LAS 220x (G2333 x BRC 33)F1 G.7-T.3. P11 x(G-1 9833xBRB1 97)F1 G.7-T.3.PI1x (G-2333xBRB1 97)F1 Icaviboralx (BRB 225xKaboon)F1 Icaviboralx (A131 36xBRB225)F1. No. Semillas 2 4 15 4 31 23 39 9 20 141. Los cruces simples entre G-19833xBRC14 fueron realizados en el segundo semestre de evaluación, razón por la cual aún no se han realizado los cruces triples con los genotipos de semilla comercial. Los cruces simples entre lcaviboralxBRC12, no fueron utilizados para realizar cruces triples, debido a que el genotipo BRC12 presenta resistencia al virus del mosaico común con el gen recesivo bc-3 y a la antracnosis. Se desconoce cual o. LJ Z L.. C). CD. cuales genes de resistencia a esta última enfermedad posee, pero se espera que presente por lo menos uno de los tres genes (Co-4 2 , Co-5, y Co-7) identificados en el genotipo G-2333, porque la línea fue desarrollada a partir de éste. El bajo número de semillas Fi de los cruces triples fue debido a que no coincidió la fecha de floración entre las plantas parentales machos y las hembras. En los cruces simples para descartar las plantas Fi formadas a partir de la autopolinización, fueron eliminadas las plantas con síntomas de antracnosis, debido a que este carácter es dominante, es decir que todas las plantas heterocigotas para el carácter deben ser resistentes. Las plantas seleccionadas fueron utilizadas como parentales machos en los cruces triples.. 20. (_) 4.. o co.

(21) 6qegz8 2.3.1.2. Evaluación de un vivero de líneas tempranas de cruces triples entre Cargamantos regionales y fuentes de resistencia en condiciones de campo y laboratorio. . Evaluación en condiciones de campo: Evaluación de familias F2 y F3 de fríjol voluble tipo cargamanto en condiciones de campo en Rione gro. Gloria E. Santana Fonseca Matthew W. Blair Ovidio García Osorio Mauricio Castaño Carlos Jara Ubicación geográfica El Centro de Investigación "La Selva" de CORPOICA está ubicado en el municipio de Rionegro, Antioquia a una altura de 2.100 msnm, temperatura promedio 17°C y una precipitación de 1.800 mm. Material Vegetal La población base fueron 516 familias F2 de plantas FI de cruces triples realizados en el Centro de investigación "La Selva", entre el 2000 y 2001. Estas poblaciones involucraron los genotipos resistentes a antracnosis (G 2338, G 2337, G 2333, G 19833, G 7602, AB 136, Kaboon, 1.0 y Widusa ), genotipos resistentes al virus del mosaico común (BRB 203,13RB 204, BRB 197, BRB 151. BRB 211 y BRB 183) y padres con características comerciales de grano (GES 4, GES 5, GES 9 e Ica viboral). Para la generación F3 la población base a evaluar fueron 867 familias. Métodos Para las familias F2 con color de semilla crema-rojo moteado, rojo-crema moteado o rojo se sembraron 100 semillas y familias con otros colores se sembraron 50 semillas. Para la evaluación de las familias F3 fueron sembrados surcos esparcidores de antracnosis y virus cada 10 surcos, quince días antes de la siembra de las familias a evaluar en un área de 14.000m 2 . Para cada familia F3 fueron sembradas 60 semillas. En los dos 21.

(22) El. semestres la distancia de siembra entre plantas fue de 0.30m y entre surcos de im. No hay repeticiones por tratarse la evaluación de un gran número de genotipos. Las familias F2 y F3 fueron inoculadas tres veces con 500 litros de la mezcla de 7 razas de antracnosis (9,129, 41, 525, 645, 651, y 653). El primer inóculo se realizó en el estado de V3, el segundo y el tercero se aplicaron con intervalos de dos semanas. La concentración del inóculo fue de 1.2 x 106 conidias/mI y asperjado por medio de una bomba de espalda. Para la evaluación por reacción a antracnosis se utilizó la escala de severidad (1= sin síntomas visibles, 9= muerte de la planta) en las épocas de floración (R6), formación y llenado de vainas (R7 y R8) respectivamente. Las evaluaciones de campo fueron realizadas conjuntamente entre un funcionario del programa de la unidad de patología de fríjol de dAT, quien viajó tres veces a Rionegro y funcionarios de CORPOICA Regional 4. La evaluación al virus del mosaico común se realizó en las etapas de V2 y R5, eliminando las plantas con síntomas visibles de moteados verdes claro y oscuro, arrugamientos y deformación de las hojas. Las evaluaciones de campo fueron realizadas conjuntamente entre un funcionario de la unidad de virología de fríjol de dAT, quien viajó dos veces a Rionegro y funcionarios de CORPOICA, Regional 4. Resultados y discusión. Generación F2. Por reacción a enfermedades fueron eliminadas 140 familias (35,36,37,38,39,40, 41 ,42,43,44,45,46,47,48,82,83,84,85,92,93,94,95,96,97,100,111,124,125 126 ,127 128, 129, 130,131,132,133,134,135,136,137,138,139,140,146,151,157 158 159 160161 162, 163, 164,165,274,275,275,277,278279,286,331,332,333,371, 383, 384, 385,386 ,387 ,388,389,390,391 ,392 ,393,394,395,403,404,461 ,462,463,465,466,467, 470,471,500 ,505, 518,519 ,520,521 555,523,536,537,546,547,550,554, 555,556 ,557 ,558, 559, 560,561,562,563,564,565,566,567,568,569, 570, 571, 572, 573, 574,575,576, 22.

(23) 577 ,5 7 8579,580,581,582,583,584,585,586,587,588,589,590,591,592 y 595) que incluían el genotipo T.O o Widusa como fuente de resistencia a antracnosis. A estos genotipos se les confirmó la presencia del gen dominante. 1,. por medio de las pruebas de marcadores. moleculares tipo SCAR y virología (ver estandarización de metodología de marcadores molecualures y evaluación de viveros por inoculación de la cepa NI-3). Por susceptibilidad a antracnosis grado de severidad mayor a 4 fueron eliminadas 75 familias (1,2,6,8, 9,10, 11, 13, 14,15,16,27,31,51 ,53,56,57 ,59,60, 63, 64,73 ,110 112,116,122, 315, 316, 322,323, 327,328,329, 330,335, 336,337,338, 341,346 347,348,349,350,351,352,353, 354,355,362, 363 364,366,372, 375,396,398, 399, 400,401,402,416, 417, 419,424, 426,428, 430,431, 433,434,435,436,442 y 450). Por arquitectura de planta no deseada (ramificadas o arbustivas postradas) fueron eliminadas 8 familias (26,80,81,97334,463,536 y 546); por color no comercial (negro, morado, café, rosado y amarillo) de la semilla fueron eliminadas 21 familias (288,289,290,291, 292,293,294,295,296, 297,298,299, 300,301,301,303, 301,305,306,307 y 308) y por presentar un ciclo de vida más tardío que el testigo Ica Viboral (>a 180 días) fueron eliminadas 13 familias (80,81,252,253, 254 255,256,257,258,259,494,509 y 513). En total fueron seleccionadas en campo 5.000 plantas individuales de las familias resistentes a antracnosis, con buena arquitectura, carga, tipo de vaina y color comercial del grano. Después de realizar el beneficio de la semilla en la bodega, las semillas de las 5.000 plantas fueron nuevamente seleccionadas por tamaño de grano, para lo cual fueron pasadas por una zaranda que clasifica por tamaño. Las semillas que no pasaron la zaranda fueron pesadas y las que presentaron más de 55 gramos/100 semillas se clasificaron para formar la generación F3. Con este criterio fueron seleccionadas 1400 selecciones individuales, pero solo fueron sembradas 867 por disponibilidad de recursos, terreno y mano de obra. Las restantes 533 familias pueden ser evaluadas en una segunda fase del proyecto.. 23.

(24) ri Generación F3 Se realizó la selección entre familias F3 por reacción a enfermedades, arquitectura de planta y características comerciales de grano. Por susceptibilidad al virus del mosaico común fueron eliminadas 184 plantas en diferentes familias; por susceptibilidad a antracnosis (grado de severidad > a 4) fueron eliminadas 93 familias, de las cuales 47 incluyeron el genotipo G-2337; el surco testigo de este genotipo también fue susceptible con un grado 7 de severidad; y una familia por susceptibilidad a ascochyta (Phoma exigua var. Diversispora) grado de severidad 8. Por poca carga y hábito fueron eliminadas 175 familias; por la vaina corta y curva 28 familias; una familia por presentar un ciclo de vida más tardío que el testigo lca viboral y por grano pequeño y color no comercial 12 familias. En total fueron seleccionadas en campo 562 familias, en las cuales se realizaron cerca de 4.000 selecciones individuales. Después de realizar el beneficio de la semilla en la bodega, las semillas de las 4.000 selecciones fueron nuevamente seleccionadas por tamaño de grano, para ¡o cual fueron pasadas por una zaranda que clasifica por tamaño. Las semillas que no pasaron la zaranda fueron pesadas y las que presentaron más de 55 gramos/100 semillas se clasificaron para formar la generación F4. Con este criterio fueron seleccionadas 1400 selecciones individuales, de las cuales fueron enviadas a la unidad de patología de CIAT 96, al laboratorio de caracterización genética de fríjol 262 y a la unidad de virología 247 para confirmar la resistencia a la antracnosis y.al virus del mosaico común. Para la evaluación de este último se decidió enviar a la unidad de virología solo las plantas que tenían como padre de resistencia al virus uno de los tres genotipos (BRB 151, BRB 204 o BRB 203), que fueron dudosos en la evaluación por marcadores moleculares (ver estandarización de metodología de marcadores molecuaires).. 24.

(25) o Evaluación en condiciones controladas: Evaluación de selecciones individuales F4 por resistencia al virus del mosaico común y al virus del mosaico necrótico del frijol en condiciones de invernadero.. Francisco Morales Mauricio Castaño Ubicación geográfica El Centro Internacional de Agricultura Tropical está ubicado en la ciudad de Palmira, Valle del Cauca a una altura de 965 m.s.n.m., temperatura promedio 24.5°C y una precipitación de 1.000 mm. Material Vegetal Se envió a la unidad de virología del CIAT 20 semillas F4 de 241 selecciones individuales, las cuales tienen como padre a un genotipo resistente al virus del mosaico común (BRB151, BRB 204 ó BRB 203). Métodos Las 241 selecciones individuales fueron sembradas en bandejas en condiciones de invernadero. Las hojas primarias bien extendidas fueron inoculadas con las cepas NL3 del virus del mosaico y la necrosis del frijol (BCMNV) y la cepa NL4 del virus del mosaico común del frijol (BCMV) (Morales, 1983). La evaluación se realizó en el estado V3, con la observación de síntomas de mosaico o de necrosis (Foto 1 y 2). Las plantas resistentes fueron sembradas individualmente en materas. Resultados y discusión El vivero de cruces triples (Cargamanto-BCMV-Antracnosis) mostró que de las 241 selecciones individuales que comprendía, 178 presentaron Mosaico o sea con invasión sistémica y expresión de mosaico en aquellas selecciones susceptibles (M) debido a la presencia de genes recesivos no activos a la cepa BCMNV-NL3 utilizada. Una sola selección mostró una reacción de necrosis (N) indicando que posee el gen dominante de 25.

(26) necrosis (1). Solamente 2 selecciones (381 plantas 1 y 3) reaccionaron con ausencia total de síntomas (0) lo cual confirma la presencia del gen recesivo bc- 3. El total de las semillas de las dos selecciones serán sembradas en condiciones de campo para realizar evaluaciones por rendimiento y reacción a antracnosis. También se pudo comprobar que 37 selecciones estaban segregando por genes recesivos no activos contra la cepa del BCMNV inoculada y genes recesivos bc-3 (M y O). Se detectó otro tipo de segregación en 15 selecciones por presentar reacciones de necrosis (N) y mosaico (M) y finalmente se observó que 8 selecciones reaccionaron con segregación de mosaico (M), necrosis (N) y genes recesivos bc 3 (0) (tabla 3). Al observar la respuesta a la inoculación con la cepa BCMNV-NL3 de las selecciones que comprenden este vivero, se deduce que de los tres padres (BRB 151, BRB 203 y BRB 204) utilizados como fuente de resistencia del gen recesivo bc-3, los materiales identificados BRB 203 y BRB 204 son los responsables de la presencia de la segregación por el gen de necrosis (N). En cuanto al vivero de otros colores, el cual incluyó 20 selecciones individuales, se observó que 15 de ellas presentaron Mosaico (M) y las 5 restantes segregaron mostrando reacciones de Mosaico (M) y presencia del gen recesivo bc- 3 (0). Cabe anotar que todas y cada una de las plantas que reaccionaron con ausencia total de síntomas (0) debido a la presencia del gen recesivo bc- 3, fueron chequeadas por prueba inmunoenzimática ELISA con un antisuero policlonal de BCMNV NL3 para corroborar su reacción y posteriormente colectar la semilla de estas plantas.. 2. 1. -. N: Necrosis. Genotipos con reacción de hipa-sensiblidad a BCMV FJt Mosaico. Gemtipos con reacción de susceptibilidad a BC(vW Cr. Sin síntonDs. Genoos cm resistencia recesiva a BCMV (Gen x3). 26.

(27) , -. x ....,. Fotol - Plantas de frijol con síntomas de Foto 2. Plantas de frijol con síntomas de puntos mosaico común en condiciones de invernadero necróticos en condiciones de invernadero. Tabla 3. Evaluación de selecciones individuales F4 a virus del mosaico común y al virus del mosaico necrótico del frijol. Parcela Noplanta o selcc. mdiv.. 39 1 __ 2 3. 4 44 1 47 2 __ 4 5 _______ 7 __ 8 _______ 9 10 48 3 51 1 53 1 _______ 3 4 5 78 1 88 1 374 1. Padre. No.Plantas con reacción. ___ N BRB151 20. BRB151 BRB151. 20 14. Parcela No.planta o selcc. mdiv. M 14. 17 52. BRB151 BRB151 BRB151. 14 120 18. ___ BRB151 BRB151 BRB151. __ 4 5 381 1 BRB15I _______ 3 5_____ 406 1 BRB2O3. 67 71 90. 96 459. 18 19 19 - - 20 20 15 5--. O 1 2 3 4 5 1 3 4 1 2 1 3 1 3 4 3 1 2 3 4. 6 7 8 9 1 ____ 2. Padre No.Plantas con reacción NMO BRB151 20-2 10. BRB203. 15 5 - iT 16-. BRB151. -Ó -. BRB203 -17 2 BRB204 - V9-BRB203 - 19 BRB203 - Ti BRB204 -:f -. 19 1 16 3 2 18 BRB203 - 20. N. con síntomas de necrosis, resistente. M: con síntomas ce mosaico, susceptible. O: Sin síntomas, inmune. - - -. 27. .4.

(28) . Evaluación en condiciones controladas: Evaluación de selecciones individuales F4 de frijol por resistencia a antracnosis en condiciones de casa de malla.. George Mahuku Carlos Jara Material Vegetal Se envió a la unidad de patología del CIAT 50 semillas F4 de 96 selecciones individuales, las cuales tienen como padre a un genotipo resistente a la antracnosis (G-19833 ó AB 136). Métodos Las 96 selecciones individuales serán sembradas en bandejas en condiciones de casa de malla. Las hojas primarias bien extendidas serán inoculadas con razas de antracnosis identificadas en Antioquia. La evaluación se realizará en dos semanas en el estado V3, * con la aparición de síntomas en el envés de las hojas o muerte de las plantas . Las familias resistentes a antracnosis se compararán con las evaluaciones realizadas en la unidad de virología y biotecnología, para conocer cuales familias presentan resistencia simultanea a las dos enfermedades y cuales solo a una de ellas.. • Evaluación en condiciones controladas: Estandarización de la metodología de marcadores moleculares tipo SCAR para los genes bc-3 e / del virus del mosaico común y virus del mosaico necrótico del frijol.. Gloria E. Santana Matthew W. Blair Material Vegetal Ocho genotipos como fuentes de resistencia a antracnosis, 17 genotipos fuente de resistencia al virus del mosaico común procedentes del proyecto de fríjol de dAT, Palmira y 16 fuentes de germoplasma tipo Cargamanto, de las cuales 5 son líneas avanzadas (CC 21148-) del programa de mejoramiento de frijol del dAT, 12 colectas procedentes de cultivos comerciales del Oriente Antioqueño (GES-), una variedad regional (mocho) y dos 28.

(29) variedades mejoradas volubles, para un total de 45 genotipos enviados al laboratorio de caracterización de germoplasma de fríjol de CIAT; asimismo se utilizó cuatro genotipos testigos (Tabla 4). Tabla 4. Fuentes de germoplasma donantes de genes de resistencia al virus del mosaico común y antracnosis y genotipos de tipo cargamanto. Germoplasma Característica BRB 32, BRB 211, BRB 151, BRB 183, BRB 197, BRB 152, Fuente de resistencia al virus del BRB 217, BRB 203, BRB 204, BRB 225, BRC 12, BRC 14, BRC mosaico común 30, BRC 31, BRC 32, BRC 33 y BRC 34 G-2333, AB 136, T.O, Kaboon, G-2337, G-2338, G-19833, G- Fuente de resistencia a 7602 antracnosis CC 21148- 74-1, CC 21148-R191-1, CC 21148- 67-1, CC Susceptibles a antracnosis y 21148- R67-3, CC 21148- 25-2, GES 1 GES 3, GES 4, GES 5, virus del mosaico común; semilla GES 6, GES 7, GES 8, GES 9, GES 11, G7-T2.Pl 3, G7-T3.Pl 1, tipo comercial G7-T2.Pl 4, mocho La Ceja, lca Vibora y LAS106. G-6416, Jalo, Flor de Mayo, BAT 93 y Kaboon Testigos para las pruebas con marcadores tipo SCAR Métodos Con los 44 genotipos se estandarizó la metodología de marcadores moleculares tipo SCAR (Sequense Charactenzed Amplified Regions) ligados al gen recesivo dominante. bc-3. o al gen. 1.. La aplicación de los marcadores involucró los siguientes pasos: Extracción de ADN: Se realizó a partir de 8 semillas de cada genotipo que fueron sembrados en condiciones de invernadero; se cosecharon entre 4 y 6 hojas trifoliadas jóvenes en forma masa¡. El tejido fue almacenado a -80 °C hasta la extracción del ADN. Al ADN extraído se le realizó la prueba de calidad , la cual consistió en sembrar en un gel de agarosa al 2% una solución de 2 pi de ADN, 3 pi de blue juice y 7 pi de agua destilada estéril, luego se corrió la electroforesis delas muestras en solución. Las bandas corridas fueron observadas bajo la luz ultravioleta y fotografiadas para la lectura. En las 35 muestras preparadas se observó una banda bien definida, que indicaba que sí se había extraído el ADN.. 29.

(30) Cuantificación de ADN: Conocida la presencia del ADN, se cuantificó en ng/pi la cantidad inicial de ADN extraído con el espectrofotómetro en cada una de las muestras para realizar una dilución de 10ng/.1l Amplificación por medio de POR (Reacción en cadena de la Polimerasa): Se preparó un coctail para cada SCAR: SCAR SWI 3. Marcador para el gen dominante /. Agua bidestilada (11.8 pi), buffer con Mg (1.5 pi), buffer sin Mg (1.0 pi), dNTPs (0.5 111 ), primer (F) (2.5 j.tl), primer (R) (2.5 pi), Taq polimerasa (0.2 pi ) y ADN (5 pi). SCAR ROO 11. Marcador para el gen recesivo bc-3. Agua bidestilada (15.2 jd ), buffer (2.5 pi ), dNTPs (1.0 pi ), primer (F) (0.5 pi), primer (R) (0.5 pi), Taq polimerasa (0.3 pi) y ADN (5 pi). Programa para la amplificación de los dos SCAR's: 92 °C130 s. CD. 55 00/30 s. : (.). 72°C/1 mm. L!J. 34 veces (1). CD -J co. 72 °C/ 5 mm. co. 14 °C/ hasta finalizar Fin El ADN de cada muestra se amplificó para los dos SCAR's. Lectura de electroforesis: Los productos de amplificación (POR) fueron teñidos con blue juice, sembrados en un gel de agarosa al 2%, corridos en electroforesis y fotografiados bajo la luz ultravioleta para la lectura (Foto 3).. 30. i. ,.

(31) Ausencia de la banda, presencia del gen he-3. Presencia de la banda, ausencia del gen he-3 Presencia de banda tenue: dudosa. Foto 3. Fotografía de un gel de agarosa con bandas del producto del PCR para el. marcador ROC 1. lázqu bajo luz ultravioleta.. Resultados y discusión SCAR ROC 11 La presencia de la banda (+) es la ausencia del gen. bc-3,. es decir,. los genotipos son susceptibles. Solo los genotipos BRB 32, , BRB 211, BRB 217, BRB 183, BRB 197, BRB 152, BRC 12,BRC 14, BRC 30, BRC 31, BRC 32, BRC 33 y BRC 34 poseen el gen bc-3, es decir son resistentes al BCMV; los genotipos BRB 203, BRB 204 y BRB 151 presentaron una banda tenue, considerados como dudosos y los demás genotipos son considerados como susceptibles (Tabla 5). Los genotipos resistentes son seleccionados como genotipos parentates, en donde se requiera una fuente de resistencia al virus del mosaico común. SOAR SW1 3 La presencia de la banda (+) es la presencia del gen. 1,. es decir son. genotipos resistentes. Los genotipos T.O, CC 21148-25-2, CC21 148- R67-3, CC21 14874-1, CC21148-R191-1 presentan el gen. 1,. 6). Los genotipos que presentan el gen. son descartados como padres en el programa. 1,. los demás genotipos son susceptibles (tabla. de cruces del proyecto de frijol cargamanto para Antioquía. Este gen está estrechamente ligado al color oscuro de la testa de fríjol. El típico color rojo—crema del frijol cargamanto cambiaría por un color morado—crema, no deseado por los agricultores debido a que los comerciantes compran esta semilla mucho más barata. De otra parte, solo el gen / usado 1.

(32) como fuente de resistencia no es viable, debido a la presencia de la cepa necrótica NL3 del virus en Colombia, la cual causa muerte descendente en ¡as variedades resistentes que presentan el gen dominante. Tabla 5. Genotipos evaluados con el marcador ROC 11 420b ip tipo SCAR Genotipo. Banda. Genotipo. Banda. BRC12 0-5 + BRC14 G-6 + BRC3O 0-7 + BRC31 + G-8 + BRC32 0-9 + BRC33 0-11 + BRC34 G7T2PI1 + G-2337 + 07 T2 Pl 3 + G-2338 + G7 T2 P14 + G-19833 + 0021148-25-2 + 0-7602 CC21148-67-1 + + BRB32 CC21148-67R-3 + BRB 151 D CC 21148-74-1 + BRB 152 CC21148-191-1 + BRB 183 ICAVIBORAL + BRB197 + LA CEJA BR13203 LAS 106 + BR13204 D + AB 136 BRB 211 + KABOON BRB 217 0-2333 + BR13225 - T.O + + 0-1 Flor de Mayo 0-3 + BAT93 0-4 + G-6416 + Jalo + Lectura con +: presencia de la banda, genotipos susceptibles; -: ausencia de la banda, genotipos resistentes: a: presencia ae oanaa tenue, genotipos dudosos.. 32.

(33) Tabla 6. Genotipos evaluados con el marcador SCAR SWI3 690bp tipo SCAR Genotipo BANDA Genotipo BANDA BRC12 G-5 5RC14 G-6 BRC3O G-7 BRC31 G-8 BRC32 G-9 BRC33 G-11 BRC34 G7T2PI1 G-2337 G7 T2 Pl 3 G-2338 G7 T2 P14 G-19833 + CC 21148-25-2 G-7602 CC21148-67-1 + BRB32 CC21148-67R-3 BRB 151 CC 21148-74-1 + BRB 152 CC21148-191-1 + BRB 183 ICAVIBORAL BRB 197 LA CEJA 8R13203 LAS 106 BRB2O4 AB 136 BRB 211 KABOON BRB 217 G-2333 BRB 225 T.O + G-1 KABOON G-3 G-6416 + G-4 Lectura con +: presencia de la banda, genotipos resistentes; -: ausencia de la banda. aenotioos suscentibls • Evaluación en condiciones controladas: Selección de plantas F4 resistentes al virus del mosaico común y virus del mosaico necrótico del frijol mediante el marcador molecular tipo SCAR ROC 1 1 420b para el gen recesivo bc-3. Gloria E. Santana MatthewW. Blair Héctor Fabio Buendía Material Vegetal Se envió al laboratorio de caracterización genética de frijol de dAT, 10 semillas F4 de 281 selecciones individuales, las cuales tienen como padre a un genotipo resistente al virus del mosaico común (BRB 203, BRB 204, BRB 211, BRB 217, BRB 183 y BRB 151) con el gen recesivo bc-3.. 33. ).

(34) Métodos Cosecha de material vegetal: Se realizó a partir de 4 semillas de cada selección individual, las cuales fueron sembradas y marcadas (A,B,C y D) en materas en condiciones de invernadero. De cada planta se cosechó el corte de tres discos de 6mm de diámetro de una hoja trifoliada joven. El tejido fue colocado en placas de ELISA y almacenado a —80 0 hasta la extracción del ADN. Extracción de ADN: Fue utilizada la metodología de extracción alcalina. A cada pozo se le adicionó 60. 0 de NaOH (0.21M), se colocó en condiciones de baño maría (1000 0) por. 2 mm., se maceró el tejido, se adicionó 60 pi de HCL (0.251VI) y 30 pi de Tris HCI (0.5 M), se calentó a baño maría (100°C) por 2 mm, se diluyó 1:1 en agua bidestida estéril y almacenó a —20°C, hasta la amplificación. Amplificación por medio de PCR (Reacción en cadena de la Polimerasa): Se preparó el coctail para SCAR ROO 11. 420bp,. volumen por reacción:. Agua bidestilada microfiltrada y estéril (7.45 pi ), buffer Mg (1.5 pi ), dNTP's (0.15 pi ), primer ROO 11(F) (0.3 pi), primer ROC1 1(R) (0.3 pi), Taq polimerasa (0.3 pi) y ADN (5 pi). Programa para la amplificación del SCAR ROO 11: 92 00/30 s 55 00/30 s 72°O/1 mm 34 veces (1 a 3) 72 00/ 5 mm 14 0 0/hasta finalizar Fin Lectura de electroforesis: Los productos de amplificación (POR) fueron teñidos con 5 pi de blue juice, sembrados en un gel de agarosa al 2%, corridos en electroforesis a 120v y fotografiados bajo la luz ultravioleta para la lectura. 34.

(35) Resultados y discusión Para el marcador molecular tipo SCAR ROC 11 420bp la presencia de la banda (+) es la ausencia del gen bc-3, es decir, las plantas son susceptibles. Fueron identificadas 148 selecciones individuales con la presencia del gen recesivo bc-3, resistentes al virus; 97 están segregando para el gen; 8 no tienen el gen, susceptibles y 25 no fueron leídas por pérdida de la banda en la electroforesis (tabla 7). Las selecciones individuales F4 resistentes serán sembradas en condiciones de campo , para ser evaluadas por rendimiento y características comerciales de grano; así como las selecciones F4 que están segregando en viveros diferentes, con el fin de seleccionar en este último las plantas resistentes. Las selecciones F4 susceptibles son eliminadas, a pesar que en la evaluación preliminar en campo fueron asintomáticas. Esto pudo deberse a la falta de inóculo o de condiciones ambientales que favorecieran la expresión de los síntomas. Tabla 7. Evaluación de selecciones individuales F4 mediante el marcador molecular tipo SCAR ROC 11 4P Parcela. Con el gen bc-3 Segregando Resistentes 748 1,23,4 5 749 2, 1,3 750 2 751 2 1 752 6 753 2,3,4 1 754 1,3,4 2 755 2 1,3,5,6 756 3 2,4 757 2,3,4 759 4,5 1,3 760 1,2,4 3 761 1 2,6 768 1,3,4 769 1a7 770 2,3 1,4 771 1,3,4,5 2 772 1a7 773 3,4,5,6 _____________________ Parcela Con el gen bc-3 Segregando Resistentes 775 2,3,4,5,8,9,10,11 1,7 776 6 1,3 777 1a5 778 1a6 779 1,3,4,5,6,7 2. Sin el susceptibles. gen, Repetir. 3 7,3,4,5 1a5 4. Sin el susceptibles. gen, Repetir. 35.

(36) 780 1,3,4 2 782 4,5,6,7 1,3 784 5 1,2,3,4 785 1,2 3,5,6 786 4 1,2,3,5 787 2,3 1 2 788 5 789 3,4,6 1,5 790 12,314,5 1 791 1,2 3,6 793 794 796 836 2,4,7, 837 1,3,5 6 838 56 1 58 1 2 61 1 365 3,4 367 2 1,3,4,5 371 1,3 372 555 558 559 3,4 1,2,5 560 1,3,4,5 561 2,3 1,4,5 562 213,4 1 563 ,2,3,5 4 564 1,2,3 64 1 571 1,3 2 576 3,4,52,4 12 13 1,4 2,3,5 47 1,3 48 1,2 49 4 1,2 116 1,2,3 840 4 1,2,3 841 2,3 842 1,5 2,3 843 1,2,3,5. - 1,2,4 1,3,5,6 5,6 7 4. 5 1,3,4,5 2,3 1,3,4. 1,35,6. 3.

(37) 5c18I 2.3.1.3. Identificación de líneas tempranas con resistencia a ascoch yta (Phoma exigua var. Diversispora) que puedan servir como padres para me/orar el frIjol Carqamanto, procedentes del CIA T. Gloria Esperanza Santana Fonseca George Mahuku Pablo J. Tamayo M. Carlos Jara Ovidio García Osorio Material vegetal La población estuvo conformada por 100 semillas de 14 familias en generaciones tempranas (F4 y F5) procedentes del proyecto de frijol del Centro Internacional de Agricultura Tropical (dAT), Palmira-Valle. Las familias son el resultado de cruces interespecíficos entre fríjol común tipo Cargamanto (Phaseolus vulgaris L.) y fuentes de resistencia a ascochyta de Phaseolus coccineus, las cuales fueron seleccionadas durante dos ciclos bajo presión de ascochyta en condiciones de campo en Popayán. Como testigos susceptibles se seleccionaron 17 genotipos entre variedades regionales y mejoradas de Cargamanto y dos genotipos foráneos como testigos resistentes (tabla 8).. 37.

(38) Tabla 8. Familias F4 y F5 y testigos evaluados por resistencia a ascochyta en el Centro de Investigación "La Selva". Familias No. entrada Codigo 1. 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15. Testigos Nombre. ASIN 13458-7 200201-0014 IOTA HUNAPU ASIN 13439-19 200201-0013 ASQ75 ASIN 13439-16 200201-0012 ICAVI BORAL ASIN 13439-15 200201-0011 LAS 106 ASIN 13439-15 200201-0010 las 220 ASIN 13439-14 200201-0009 LAS 435 ASIN 13439-13 200201-0008 LAS 399 ASIN 13439-13 200201-0007 ICALLANOGRANFJE ASIN 13439-5 FRIJOL lOA 200201-0006 ASIN 13439-5 200201-0005 G-4 ASIN 13439-3 200201-0004 G-5 ASIN 13438-6 200201-0002 G-6 ASIN 13457-3 200201-0001 G-7 ASIN 13438-11 200201-0003 G-8 ASIN 13457 200201-0014 G-9 G-11 G-1 G-3 MOCHO LA CEJA. Característica Resistente. Foráneos. Susceptibles. Variedades mejoradas. Susceptibles. Variedades regionales. Métodos Las familias F4 y F5 del primer semestre y F5 y F6 de segundo semestre fueron sembradas con una distancia de siembra entre plantas de 0,25 m y entre surcos de 1 m.; en surcos de 0,70 m de ancho y 30m de largo. A los 40 días después de la siembra, se realizaron tres inoculaciones sobre el follaje con 10 aislamientos purificados del hongo 38.

(39) causante de la ascochyta, a una concentración de 1 .2X1 06 conidias/mI, con intervalos de dos semanas entre cada aspersión con bomba de espalda en el Centro de Investigación La Selva, Rionegro. La evaluación se realizó de acuerdo a la escala de severidad para ascochyta (1= sin síntomas visibles, 9= síntomas severos o muerte de la planta). La selección individual por resistencia se realizó dentro de cada familia y entre familias. Resultados y discusión. Generaciones F4 y F5 Como resultado de la evaluación de las 1400 plantas, se seleccionó 158 plantas en 12 familias que presentaron un grado de severidad entre 5 y 7. Las dos familias restantes (entradas 8 y 10) fueron descartadas por presentar un grado de severidad a ascochyta entre 8 y 9. Las 158 poblaciones fueron evaluadas por tamaño de grano y fueron seleccionadas 36 (peso de 100 semillas mayor a 40 g), para conformar las generaciones F5 y F6. Los testigos susceptibles (variedades regionales y mejoradas de Cargamanto) presentaron un grado de severidad de 8, mientras que los dos testigos resistentes Icta Hunapú y Asq 75 presentaron un grado de 6. Generaciones F5 y F6 De las 36 selecciones individuales dos tuvieron grado 3, cinco grado 4, nueve grado 5, seis grado 6, diez grado 7 y siete grado 8. Entre los 19 testigos, el Icta Hunapú y ASQ 75 presentaron grado 5 y 4 respectivamente y los otros 17 testigos tuvieron uno grado 4, uno grado 5, tres grado 3, cinco grado 7 y 10 grado 8. Por esta razón, se seleccionan 16 líneas como materiales parentales fuente de resistencia a ascochyta, por presentar grados de severidad entre 3 y 5, las demás líneas son descartadas (tabla 9)..

(40) Taba¡ 9. Evaluación de las generaciones F5 y F6 por reacción a ascochyta en Centro de Investigación "La Selva". Familias Severidad ASIN 13457-3 200201-0001-46p 6 ASIN 13438-6 200201-0002-3p 8 ASIN 13438-6 200201-0002 5 ASIN l3438-620020l-0002-12p 5 ASIN 13438-6 200201-0002-15p 7 ASIN 13438-6 200201-0002-32p 7 ASIN 13438-6 200201-0002-50p 8 ASIN 13438-11 200201-0003-13p 4 ASIN 13438-11 200201-0003-18p 3 ASIN 13439-3 200201-0004-66p 3 ASIN 13439-3 200201-0004-70p 5 ASIN 13439-3 200201-0004-71 8 ASIN 13439-3 200201-0004-73p 5 ASIN 13439-3 200201-0004-80p 4 ASIN 13439-5 200201-0006-6p 5 ASIN l3439-132002O1-0008-6p 8 ASIN 13439-13 200201-0008-7p 4 ASIN 13439-14 200201-0009-18p 6 ASIN 1343914 200201-0009-32p 6 ASIN l3439-142002O1-0009-34p 5 ASIN 13439-14 20020I-0009-69p 5 ASIN 13439-15 200201-0010-7p 4 ASIN 13439-15 200201-0010-60p 5 ASIN 13439-15 200201-0010-75p 5 ASIN 13439-15 200201-0010-76p 6 AS1N13439-15200201-0011-22p 7 ASIN 13439-15 200201-0011-29p 4 ASIN 13439-15 200201-0011-30p 6 ASIN 13439-15 200201-0011-37p 8 ASIN 13439-15 200201-0011-52p 8 ASIN 13439-16 200201-0012-2p 6 ASIN 13439-16 200201-0012-59p 7 A51N13439-16200201-0012-72p 7 ASIN 13439-19 200201-0013-9p 7 ASÍN 13458-7 200201-0014-5p 8. Testigo ICTA HUNAPU ASQ 75 LAS 106 LAS 220 LAS 435 LAS 399 ICAVIBORAL GES-1 GES-3 GES-4 GES-5 GES-6 GES-7 GES-8 GES-9 GES-li ICALLANOGRANDE FRIJOL ICA MOCHO LA CEJA G-19833. Severidad. 5. 4. 7 7 8 7 6 8 8 8 7 8 8 8 8 8 8 7 6 6. 40.

(41) 2.3.2 Desarrollar variedades de frijol Radical resistentes a la antracnosis y con el tipo de semilla comercial en el Nororiente Colombiano. El fríjol es uno de los sistemas agrícolas más importantes de Santander, con cerca de 14.000 hectáreas por año y una producción de 14 mil toneladas, que representan el 12,4% del total nacional. El 35% de la producción es bajo los sistemas de fríjol voluble. Del total departamental, el 57% es producido en la zona suroriental del departamento, seguida por García Rovira al Oriente con el 37%. El departamento tiene en Villanueva el principal centro productor con una participación del 35,7% de la producción regional. Los diagnósticos participativos y estudios especializados realizados para determinar los problemas y limitantes de la producción de fríjol en la región nororiente de Colombia, entre los que se destacan el "Análisis de los sistemas de producción de los departamentos de Santander y Norte de Santander" y la "Caracterización Biofísica y Socioeconómica de la Provincia de García Rovira", indican que éstas limitantes están principalmente relacionadas con las plagas y la incidencia de enfermedades. La antracnosis (Co/Ietotrichum Iindemuthianum) es una de las enfermedades que más pérdidas en rendimiento puede causar, pudiendo llegar hasta el 100%; igual sucede con el virus del mosaico común y la mancha anillada o ascochyta (Phoma exigua var. Diversispora) con pérdidas de hasta el 40%. Estas patologías, sin desconocer la importancia de las enfermedades radiculares, son problemas que afectan la calidad de la semilla. constituyéndose en la principal preocupación de los productores del grano, así como la dependencia de los agroquímicos que elevan los costos de producción y contaminan el ambiente. La estrategia de control basada en el manejo del germoplasma, tiene en el mejoramiento genético la mejor opción para desarrollar soluciones viables, eficientes, económicas, sanas, ecológicamente, y duraderas, además fáciles de adoptar por el agricultor a sus sistemas particulares de producción. Teniendo en cuenta la importancia que se le viene dando a la calidad, definida como "seguridad alimentaria", con una producción libre de contaminantes químicos, el programa de mejoramiento vegetal de CORPOICA ha orientado las investigaciones al 41.

(42) desarrollo de variedades de frijol comercial tipo radical, tanto volubles como arbustivas, resistentes a la antracnosis, para los climas frío y cálido al Nororiente de la Zona Andina de Colombia.. 6dtZ. Actividades. 2.3.2.1. Evaluación de un vivero de líneas avanzadas de fríjol Radical de hábito voluble para clima frío en Santander. Jaime Villamizar Moreno Ubicación geográfica. En la Granja experimental de Tinagá, municipio del Cerrito, Santander, propiedad del Instituto Colombiano Agropecuario ((CA), ubicado 6° 42' de latitud Norte y 721 56' de longitud Oeste, con una altitud de 2670 msnm, temperatura media de 13.5° C, precipitación anual de 1142 mm y humedad relativa de 72%, se llevó a cabo un estudio de evaluación de materiales de fríjol voluble. Los suelos donde se realizaron los trabajos son de textura franco - arcillosa, moderadamente profundos y fertilidad media, perteneciente a la zona agroecológica Fm (Inceptisol), con pendiente entre 25 y 50%. Material vegetal. Se seleccionó del banco de germoplasma de CORPOICA, Rionegro, un vivero con 52 líneas avanzadas y dos variedades mejoradas de frijol voluble tipo radical, que presentaron características de color, forma y tamaño comercialmente aceptadas y registradas como tolerantes a antracnosis, en condiciones de campo . Las líneas fueron desarrolladas durante el convenio de investigación en mejoramiento genético entre CORPOICA y CIAT desde 1978 hasta 1992.. 42. c, ç. r '. o -4.

(43) Métodos Los 54 genotipos junto con 10 selecciones individuales de fríjol "cabrerano" y un testigo local se sembraron en un arreglo de láttice 8x8; con 64 entradas y una repetición. Se sembraron parcelas de un surco de 1.0 m de ancho por 5 m de largo. Cada 8 surcos se sembró un testigo de "cabrerano" común, para un total de 72 parcelas durante dos semestres en la Estación Experimental Tinagá, municipio de Cerrito Santander. Se multiplicaron las líneas LAS con el objeto de llevar a cabo en el año 2003 las pruebas de adaptación y rendimiento, en busca de una variedad mejorada para la región y seleccionar progenitores de la serie cabrerano a fin de establecer un plan de cruzamientos considerando las variables de resistencia a antracnosis y rendimiento. La preparación del terreno se hizo mediante dos pases de arado y una surcada; el control de arvenses se realizó en forma manual y mecánica para evitar cualquier fitotoxicidad por la aplicación de herbicidas, que pudieran alterar la expresión fenotípica de los caracteres de interés para la evaluación. En los controles de plagas primó el uso de controladores biológicos. Las evaluaciones se realizaron según el estado fenológico, considerando 8 descriptores varietales propuestos por el Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT, Palmira) para el cultivo de frijol. Se tomaron 3 m centrales del surco para la toma de los datos de rendimiento y dado que las variables cuantitativas pueden verse afectadas por el ambiente, la evaluación de cada material se hizo sobre 10 plantas tomadas al azar en las que se midieron en forma individual las variables (Tabla 10). Tabla 10. Caracteres cuantitativos y cualitativos evaluados en 64 selecciones individuales de fríjol voluble en Santander. Caracteres N° de vainas / planta N° de granos/ vaina indice de cosecha Longitud Ancho Peso de 100 semillas Rendimiento Reacción a enfermedades. Medidas de evaluación Unidades Unidades % (mm) (mm) (g) KIha Antracnosis y ascochyta. 43.

(44) Con la información se elaboró una base de datos en la matriz electrónica Excel y se procesó utilizando el paquete estadístico SAS (Stadististycal Ana/isis System, versión 10, 1005). A través de un análisis de correlación, se determino el grado de asociación entre caracteres y se seleccionaron algunas variables altamente correlacionadas. El análisis de agrupamiento se realizó de acuerdo al agrupamiento jerárquico, utilizando promedios aritméticos y la distancia euclidiana al cuadrado (Crisci y López, 1983). Resultados y discusión En la Tabla 11 se presentan los valores promedio, desviación estándar y el coeficiente de variación de los descriptores cuantitativos considerados para la evaluación. El carácter más variable fue el rendimiento por hectárea con 46,47% y los más estables los que tienen que ver con el tamaño del grano (longitud y ancho) con 4,38 y 3,17% respectivamente. Otros contrastes que se observan se encuentran en el número de granos por vaina y número de vainas por planta con 20,42 y 23% respectivamente. Tabla 11. Estadísticas simples para carácteres cuantitativos de fríjol radical de la zona Nororiente de Colombia. Caracteres evaluados N° de vainas / planta N° de granos! vaina Índice de cosecha (%) Longitud (mm) Ancho (mm) Peso de 100 semillas (g) Rendimiento (ton/Ha). Desviación estándar. Promedio 60,4 4,75 46,74 13.01 10.1 64,37 2,75. 13,89 0,970 3,08 0,57 0,32 10,4 1,278. Coeficiente de variación (%). 23,0 20,42 6,59 4,38 3,17 16,15 46,47. El alto grado de variación que se observó entre los carácteres evaluados, se debe a la alta diversidad genotípica de los materiales en estudio y a problemas de adaptación que presentaron algunos de los materiales. En la serie LAS, se observaron rendimientos entre 49 y 183,2% más altos que el obtenido por el testigo 'Cabrerano Común". Entre las selecciones de "Cabrerano" los incrementos en rendimiento respecto al testigo variaron entre 24,25 y 38,6%. En cuanto a los componentes de rendimiento: peso de 100 semillas, índice de cosecha y número de vainas por planta se observó una relación lineal altamente significativa con la producción (Tabla 12). 44.

(45) El análisis de agrupamiento permitió la conformación de tres grupos; el primer grupo quedó constituido por accesiones caracterizadas por presentar problemas de adaptación, de las cuales no se lograron tomar datos de importancia para el estudio; fueron eliminados del análisis. El segundo grupo fue conformado por 24 accesiones con ciclos cortos (165 días en promedio) y peso promedio de semillas entre 64,0 y 76,1 g/lOosemillas. Finalmente, el tercer grupo se constituyó con materiales cuyas semillas presentaron pesos promedios mayores a 76 g 1100 semillas. Tabla 12. Resumen de las variables cuantitativas correlacionadas en la evaluación.. En conclusión se puede señalar que pese a las condiciones ambientales desfavorables que predominaron durante los dos semestres de evaluación, los resultados obtenidos en la serie "CABRERANO", muestran que las selecciones R-C 316 y R-C 323 son promisorias como padres para un programa de cruces para fríjol radical, por presentar rendimientos superiores a 3.700 K/ha frente al promedio del ensayo de 2,371,8 KIHa y al del testigo con 3.353 K/Ha. En la serie LAS, las accesiones LAS- .449 y LAS-450 son promisorias como líneas avanzadas para la s pruebas regionales, porque mostraron rendimiento superiores 4.000 K/Ha; además, en condiciones de campo fueron resistentes a antracnosis y ascochyta. Los resultados sugieren que entre las accesiones de fríjol voluble evaluadas en la región Nororiental de Colombia, existe variabilidad en la productividad y reacción a enfermedades.. 45.

(46) Bibliografía CRISCI,J.V. 1983. Introducción a la teoría práctica de la taxonomía numérica. OEA, Washington, D.C. 132 PP. Santana, G. 2002. Proyecto Mejoramiento genético vegetal simultaneo para el manejo del virus del mosaico común y la antracnosis; y la ascochyta que afectan al cultivo de frijol en la Zona Andina. Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural - CORPOICA. Rionegro, Antioquia. SAS INSTITUTE. 1995. Procedures Guide: Release 6.10. SAS Institute, North Caroline..