Prevalencia serológica de la toxoplasmosis ovina en Marulanda Caldas

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(1)PRVALENCIA. SEROLOGICA DE LA TOØPLASMOSIS. OVINA EN. MARULANDA. (CALDAS). JESUS ARTURO HENAO MUÑOZ EDGAR GOMEZ GOMEZ. Trabajo de Grado presentado como requisito para optar al título de Médico Veterinario Zootecnista. Presidente RODRIGO HOYOS ZULUAGA M.V.Z., M.Sct.. UNIVERSIDAD DE CALDAS FACULTAD DE MEDICINA V1FERflARIA Y ZOOTECNIA JLtNIZÁLES, 1983.

(2) DEDICO At. Cern especial cariilo:. Mis Padres (Alfonso y Oliva) MI 9 Hermanas Mi. Hijo. (Jaime Andrs). Mi querida esposa (Rosaura). Jesas Arturo.

(3) • -.. •. DEDICO A:. mis. Padres (Alfredo y Doily). Mis H,rmano Un e 1. Cdgar.

(4) .3. ARTICULO 127 DEL REGLAMENTO D LA FACULTAD. "El Presidente de Tesis, e]. Consejo da Jueces de Tesis minador, no serán. ej. Jurado xa-. responsables. las ideas emitidas tos".. y. por. de. los candida-.

(5) El jurado calificador le confiri6 al pra,ente trabajo ].s calificaci6u da Aprobada..

(6) RtTOR DE LA UNIVERSIDAD:. Dr. Alfonso Da1ga1tt1 P.. VIC ERECTOR. Dr. Hctor González O.. SECRARIO:. Dr. Conralo Caldur6n G.. DECANO DE LA FACULTAD:. ¡ir, Uriel Giz-a].:lo G.. SECRETARIA:. Sra. Ana Luefa 5uárez Je J.. PFilSXi.)INTW DE TiSIS. Dr. Rodrigo Hoyos Z.. PROFESORES DE LA MATERIA: Dr. Hernando Dur&k A. Dr. ?ectertco Patiiio T.. JURADOS:. Dr. £ederjco Patiw T.. Dr. Kiidebrando Vloz R. Dr. Edgar Ar13tizbaJ. L..

(7) AGtAJ)E 01 MI ENTOS. Lok3. atores agradacori de manera muy eclal. Al joctor Augusto Corredor A., Jefe deL Dearta:rnto d ParasitolQgfa del Instituto Nacional de SaLud.. Al doctor J034 L)arfu Mogotln O., Jefe d la SecciSri de Patolga ' e1 Laboratorio d Investigaciones M4dico Veteririari a *. A la doctora Olga Lica Mariio. Y,, Jefe de la Seccit5n d. Inmunologfa del. Laboratorio de Icwosti;aciones Mr1ico Toterinaria. Al. doctor César Augusto Lobo A.,, Subgireate de ProducciSn Pecuaria del Instituto Colombiano Agropecuario, lOA. Al doctor Fernando Villafade .4., Director del Laboratorio de Invetigacionee Mdioo Veterinarias. A la Bactori1oga Alba Lucía Hernández de G..

(8) A don Wilsori Marularida, Gerente de la Cooperativa Ovina d )larulanda. Caldas. Al ¿ro de Parasl.tologfa del. Instituto Nacional- : le Sal»i.. A todas aquel-Las personas que en una u otra forma hicieron posible La culminaci6n del presente trabajo..

(9) TABLA DE CONT4IDO Pg. INTRODIJCCION. i. 1.. REVISION DE LIPEIUbTUIbt.. 1.1. HISTORIA.. 1.2. CARACTERISTIA3 TAXON QM.I CA Y MOR?OLO . -GICASDELTOXPMAGNDI. EPIU1NIOLOGIA DE LA, TOXOPLASNOSIS.. 1 • 3. 1 1 • 3.. •1. ciclo evolutivo.. 5. pase roiifrativa.. 5. 1 • 3. 1 • 2. Fa, quftica o de repoo.. 1 • 3.. Pase. •3. • 3• 1 • 1 • 3. . 3 •. 2. ngSnica.. 7. Pase gametog6nica.. 7. Fase de esporu1aci5n.. o. Formas de tranisi6n ca ovinos.. 1 • 3.2. 1. Transrnlsidn cougkiita.. 9. 1 • 3. 2.2. Traisni*i6t adquirida.. i. 1.L. ASPECTOS CLINICOS DE LA TOXOPLASNOSIS OVINA. LESIONES DE LA E. NEDAiJi FETOS Y. PLACENTA.. 13. 1•. i)1MOSTICO DE LABORATORIO.. 1). 1•6•1. Métodoa Indirectos.. 17. 1•o•1•1. Reacción de Sabín y Feidman.. 18.

(10) Pág 1.. 1U.1.2. 1.61.3. 1 (, 1 .. Fijaci6n del complemento. ELISA (Enzyme Linked Inmunoaorbant Assay).. 19. Intraderrnoreacei6ri.. ¿9. t1moag1iitinaci6n indirecta,. 20. Inmunofluoreecencia,. 21. 1..'.6.1 Inhibición de los anticuerpos fluorescentes. (ni).. ». 21. Inmunof1uorooancia directa IFD).. 22. Inmuofluoreecencia indirecta (IFI).. 22. 1.6,2. Métodosdirectos.. 24. 1. TOXO?LASMOSIS OVINA Y LA SALUD. .7. PUBLICA. 1.8. 23. CSUISTIOA EXISTENTE EN EL CENTRO D1 DIAGNOSTICO DEL INSTITUTO COLONT3IAN0 AGROPECUARIO ICA (n.A?azAL1s).. 26. 2.. MATERIALES Y MTODOS. 28. 2. 1. LOCALIZACION GEOGRAFICA.. 28. 2•2. DIS iÑo EXPERIMENTAL.. 23. 2.2.1. Poblaoi6n.. 23. 2.2.2. muestra.. 28. 2.2.3. Ádici6n muetraL,. 2). 2,2.4. Fracci6n rnuetral.. 30. 2.2.5. Selecoi6n de loe animalee.. 30.

(11) Pg 2. 3. PRUEBA Dí3,. 2.3. 2. Obtención del antígeno.. jo. 2. 3. 1 1. Inoculación (13 ratones.. 30. 2.3. 1.2. Lavado de los trofozoltos,. 2.3. 1..3. Fijación en las láminas portaobjetos.. ;. 3.2. Preparación de La soluci6'i buffer. 130. LABORATORIO.. 32. Í'O3fatO salina (ras).. -33. 2.3.3. Preparación del reactivo az-1 de ivans.. 33. 2. j. 4. Dilución y titulación del conjugado.. '34. 2.3.5. Sueroa controles.. '4. 2.3.6. Técnica 1e inmunofluorescencia indirecta (lyl).. :34. 2.3.6.. Dilución de los sueros.. 34. 2.3. (. 2. Confrontación de los sueros. CQU. el. antígeno. Adición del conjugado.. 2. 3. )• 4. 36. Lectura al microscopio.. 3.. RESULTADOS. 3. 1. MONTAJE DE LA IN)I1JNOFLUOEESCENCIA. j¿. INDIRECTA (IFI).. 57. 13. 1 • 1. Titulación y dilución del conjugado.. 37. 3. 1 • 2. Prearaoión del antígeno.. 37. Sueros controles.. 38. 3..3. Técnica de inmunofluorescancla iaciirecta (ITI),.

(12) A,. P&g 3.2. ANÁLISIS r$TADISTICO.. 4.. DISCUSION. 5.. CONCLUSIOS 45. 6.. RLÇSUHEN SUNARY REFERENCIAS BIBLIOGRAF'ICAS. ?4o. 7 48.

(13) LISTA DE FIGURAS. Figura 1.. Características morfol6gicas y estructurales del Tooplasrna gouctit.. Figura 2. Ciclo de vida del Toxop].ama Éjoadí1.. Figura 3. ¿votuei6n rio la forma quí.tica del. t?jlarna. gondii.. Figura 4. 3upuezta trazistnii6n de la toopLasmosis.. Figura 5. Irihibici&i de la inmunofluoz-esoeneja.. Figura. . lnmunofluor,3cexlcia directa.. Figura 7. Inmunofluorescencia indirecta. Figura 3. Inmunofi.uorescencia indiroot. Lámina portaobjetoe conteniendo el antgono para efectuar la diluci6n de los sueros problema.. Figura 9, Cámara de miorotecuja..

(14) Figura 10. Toxoplasma gondii. Trofozoítos de toxoplasma en exudado peritoneal de ratón coloreados con giemza. Objetivo 140X.. Figura 11. Prueba de Inmunofluorescencia Indirecta para toxo-. plasmosis. Suero control positivo.. Figura 12. Prevalencia serológica por IFI para toxopiasmosis ovina en Marulanda, Caldas..

(15) •.. '_.;. LISTA DE TABLAS. Tabla 1. Población ovina de la Cooperativa de Mar.landa, Caldas. rabia 2. Tama:o - di3tribuci6n proporcional de la muestra y fracción maestral. Tabla 3. Títulos de anticuerpos contra Toxp1asa Sondii en el municipio de Marulanda, Caldas, mediante la prueba ele IFI..

(16) IN RODUCd 1 UN. 1•. I problema.. La toxopl*37to1i es una de lai entidadesparasitarias más Importantes y , reconocida por s4 carácter re Tgong3le, la cual cte-tro de la especie ovina es respoaahLe de numerosas prdidas eoon6micaa en las explatucíanes y a la vez. como fuente de contarni.naci6n para loa humarioa que cgqeewan carnee de ovinos, infectadai con las Tifercates forna evolutivas. La iafecci5n se ha comprobado en todas las área. :gecrá-. ficas en ilurnero3a3 ospeciea animales, por Lo. se p. QUC. afirmar loe animales heotermos son susceptibles a 'ta. ua-. rasito5i3 aunque en diferente grado. Desde el punto de vista de Salud P 'íblia y ocon5mien es la es!Jecie ovina la lo más interés; por tal. Motivo las investiaciories han. tomado una fuerza irtsitaa tratando de pre-. ver metidas proficticas necesarias para evitar su dosarroilo. Para su dia. fl tico a veces sQ pres2atas dificultases quo.

(17) derivan por .tia parte de la alta prevalencia de la. fere-. dad oa los ovinos y por otro lado de la amplia gana de canifestaciunca clínicas y subclnica8 que pueden originar este parásito en la mayoría de las célula. el organismo.. 2. Justificaci6no. Fuera de su importancia en Salud Pblia, la toxoplaw-. sis ovina es. La mayor causante de mortalidad embrionaria y. aborto.. Por lo tanto se justifica realizar asta ínventienci6n para conocer si estado mnmuiol6gico de la poblaci6ri o yina, evaluando al mismo tiempo la importancia de la entilad como factor liraitante en la producci&i.. J. Objetivo.. 5.. Objetivo general... Determinar la prevalencia cia coxoplaswois ovina en e1 municipio de ?4arulanda, Caldas, mediante sval.2aei6ri serol6gica.

(18) 3.2 Objetivo específico.. Cuantificar la prevalencia de anticuerpos 4ricos en ci ¿ros de estudio, atílizando la prueba de Inlnunofluoresc'3ucia Indirecta (IFI).. Correlacionar y comparar loi resultados obtenidos tro medio, con los obtenidos en simítaros regiones colombianas y extranjeras..

(19) 1. RVISION DE LITERATURA. 2. 1 JLISTO1UA.. i1'uoron ralete Charles Nicolle y L. t4ancoaux, qi-. nos describieron por vez primera la existencia de un nuevo par1sito, observado en frotis de sangre, de bazo e hígado en das ejemplare3 Je un pequei'io roedor (oda'i, o2i L... 1 77 5 11, cu,tirado ese1r_:' Los unt g rosi. 'J. :: parásito el. -.3r'. H lo. tu. PAr,. ma p or su forma crva (del griego toxon) y gondi.i por el reservarlo donde so encontr6.. Casi simultáneamente Splaadore (oitio por Giralo .) en brasil hali6 en el oonajo dómetico Toxoj4asma gud10 1 primer reparte sobre toxoplasnusis ovina fue logrado por. Olafsu y Monlux en 1942 en 'Iew Yor, las manifestacioie clínicas observadas oonsistan en trastornos Jel g ístama nerviosa central asociados a la pre3encia de toopLa.. iichham 'i Carne en 1950 realizaron obrervac1-)rt:, similare.3 ni otro caso de encefalitis en Australia (;8, lo, 5d, .5)).. 51,.

(20) In 1954 Cole y col.. recoraciaron la toopla. eu. ira reba d en el ca*l se produjeron muertes espus de observar síntomas de encefalitis y neu 'itis; se. 1..jgrfí. aislar el urganirio y reproducir la enternodai ea ':veJa corderos y se establecí la causa del aborto da las pra;\adas.. y. overi. n el mi.3mo ao flartley y coi. () describie-. rui las lesioiio:-i en ol material plaoeutari) abortado, lando l. toopLasmas (2, 8, 15 1 24,. 43,. 32,. 7, y),. 75). Hartley y Marshafl. 1957 demoetraron que la t tituyo wi caut iiii'ortante eJ. T'abise glatarra. 1a. aborto. Lasrnoi3 cirks-. •:iu. coorobado en. (I33verley,. Watson, 959-i962).. Reportes similares describen problemas de aborto on Ausraha etectoa.los por Osborne 1959; .tiddex't y Johaso I59; smith }9(. 1 • En Prancia. 3e. ha reconocido ].at tox • iasriosis ovi-. na, pero sin que los abortos sean su resultado principal (ouilio y Dsmorits 1 9 6 0). De otro lado en Canadá so han cern-. probaJo tarnbi6u la prsenoia de brotes ocaionaUo5 por toxoplasma (Fish i91; I-lui.land y Tobe 9i1). (i !4, 1C,. 2,. 2).. Se ha emu'trado que la tooplasmois en ovinos pue!e produ-.

(21) oir cortero3 irife taUo oo. uttanent, placentitis y. te fetal (Coo. Panda y col.; Smith. 9; Wat son 192) 9. d3. igual manera, que los corderos iaaoidoe aarenternete sanos, pueden ser porta.ore de toxopLascas. .4o ha sugerido que la resorci'n fetal puede ser mA.5 importante que la mortalidad perinaai en los casos de toop1asrnosis ovina (Smith. 61).. 98 fue encontrado el toxoplasina como causa co:in de aborto ovino en el norte de Inglaterra, de d7 cass ;;rce-. tados, 29 de estos fueron positivoe, sin encontrar ctr agente oaosal J.,a toxo:)la.imosis es reconocida couo una causa d€ 3 aborto,' rortinatos, esterilidad y muertee despu&s del naciriiento en ovejai, cerdos y otroci animales dornstioos (5). Dii Ci1ombia en 1944 fue aislado el To. asma Londit por. Fa-. tiuo y col, en coba yos y a la vez Toro Mejía tambiki lo hall en cobayos era el curso de un estudio sobre iUcietstas (¿9). Del Vasto 1960 diagnostic6 2 casos de to€op1asmos1s eu conejos. Entre 9'.3 y 199 el Instituto Zoo1.rofil.cticomediante pruebas biot6gicae, seroi6icae e hi.stoLica obex'-.

(22) virca 31 casos e to piasmoi en auinials, ¿lo el]. mayor porcentaje a 1a eeciG cunícula, 1.ieo cniva equina y bovina respectivamente. En. 1978 Perry y col. ()). realizaron un estudio serol6,zico en algunos de.artamento ovínicultores. encontrando. una prevalencia. ciel. 2, 70, 8).. 1.2 CCiUSTI(,AS TAKONOMICS Y N0R'0L0GICA3 :EL, TO:¼0PL5MA.. La to.oplasmoeis es trna enfermedad causada por un protozoo, el Toxopiama gondii. Afecta :1 hombre y a numeroa es-.oentre mamíf•3ros, aves y animales i1votro; (, L),. cie. :32, :) Lt,. 43, 48,. 0, 81, 87, 92).. Este organismo ha sido clasificado dentro de lo clase S)orooaida, Orden Euooccidas, Pamília Eimeríidae ( Id, •s').. Los toxoplasmas són cftuLas pequeñas que geíeralnento tienen forma de medialina, aunque en casione3 son ovi, miden de 3.5 a. '.5. micri do largo. y .e 1 a'. rñiera. de La célula terminan era :;urita,. nro. ::j Lio. ancho y más aguzado qte el otro ('i). El no Leo Inico se halla cerca ¿del extremo romo y. es un cariosa central,.

(23) r6xirn n S3te puede haber un gránulo o cuerpo paraic1ar. cuya f.Áoci6rl os Aosconoci d a, en al otro extremo. oborva?. mitocndrias (Fisura i). Son tnícroorganlamo3 grannativos, oaroter que permite distinguirlo de nango.,s y levaduras, los caa*Los contaminan frsauenterente el tnateia1.. examu (2)). :e localizan oo1nrnerte en el intorior d ciuIa rnticulo-endot,:>iialaa de diversos 6ranos dol urp, pero tanb1n. 5o9 hallan en loe leucocitos rnononuclea.io y. las fibras m'a3c1arss (3, 30, 33, 4 5, 50, 58,. 1 • 3 FPI!Jf.MIOLOGIA DL LA TOXOPLÁ3MOSX.. I..1 ciclo evolutivo.. La evoluciu del ?__oasrna. yidii difiero en lot;. hi;de• definitivos, en los Intermediarios y n ls nedios hí,ticoes y gogán las variaciones observadas, g a ar1mien Lo iguieutes estadios (?¡gura ). 1. 3. 1 •. Pase prol..tforativa.. oaracterí3ttca de los hu. lnterrn1ario.s. (gatos y dern.e aiirnalos mamfft.iros y lilve:3trO5) y úe Los medios rdsticos, pero también observada en felinos, e ini-.

(24) ti. 3. -.. .. - ..-... .. VCJ m :. .. •.. -. ..'--.•. 5-. k.. •. -:. - -Y1-.. •-. . -. . _ 4.. c. ]J1 J T ______ 1. 1. -. !-. •. ". -. ¡. '.. ¡. (. rr-ir. >3. 1.•'-. •. :--. .-..--. .. •. -. -'-.-. FIGURA 1. Caracterí3ticas morfol'5gicas y estructurales del. Toxoplasma gondii. -,. •-1''3. -. -. 1. -, .. -.. 1 .. -. - -. .. -3. -1.t'--:-.. 1. ..--. --. ,. •-.-:..;-1-. -:--. ;.. •:.l.1(-. 1 «1 :-. -. -?. '.-. •. -. 4 1. —. ... k. 1. -. - -.-. -. -'. 4-.-:-- -.-. --.. -. -. 4.

(25) HOSPEDERO DEFINITIVO. Sc. fha. :es hilas. i. 0^) m Mic. o qu st e 21-24. dIGS. FIGURA 2. Ciclo de vida del Toxoplasma Gondi. (3).

(26) cía con La llegada 1e Los oftos (quistes),esporoft.,s (00q.4ite). y en ciertas condiciones los trofo3Lto, pro-. cedentes do La infecci$n aguda. Los parsito3 invaden elementos celulares de aumero.4o3 tejidos; poro de modo ' refurente el rnusciiar (5culos del o r jeleto, diafragma y coraLn),. eJ. nervioso, La retina. €i pará g ito se multíplica úr .:todo asexual (enodiogenia y oidopoLienia), formando acm:2l:s citoplasmáticoi que al dastruirse La c61:ila hod adora dan. rienda. 1.. 3•.. Ciri. quistes (38, •34, 4ü, 45, 85 9).. ? ase qdtica o de r0,50.. i.reente en 1.rs hu6siodes ofinitivcs sato y fLinos afines (19) e intermediarios (gato y otro g aniiaIe.),. pero ausente de los histocultivos (s6io Jacobs ')7, 5O)O cha que pueden formarsa). Deriva de lo trofo)ítos liburaÚo5 do. ti;.do. las colonias torminales, las cuales ir1vudotk al rnio. de Células antes mencionadas, poro con ma y ar afinidad. por el an3ciL ') carfaco, diafragma y especialmente el si-3t-ama nervioso cefltral (euctfaIo). yerma y B:,wie3 Consideran que el O4 de loe qiteo encefálicos se hallan local¡ .Jo en los 16bulos olfatorios (5). Las causas de su forraci:ri no se conocen bien, poro se atribuye a la cioteuci6n do la fase proliferativ, y al desarrollo de una iraunidad asucifica.

(27) 7. (Hutchisori y col. L9 citados por Cór1ero ci Cam.iiL) (.Fig.Lra 3). La io; fame3 descritas, :or caracterftic del toxn l ,Iasma y oontituyen una du las iferencias funa-ientales con Las •em. coccidii, las fa..3es a con tinJac±iSri. sor semejantes en gran medida (id, :'4 5&).. 1 • ). 1 3 Fase ag'wiog&iica.. La liberaciSn de eporo'oto a partir i€ quistes ho y a a La invasión. de. La subnicosa y Je otros $rga-. en lo que :e producen varias ge cacine3 nseu.l por dc*diogonía y endopligouía; antes de que s los oítelio y se realice el ciclo do tipo coccidian co.. o:(UlZoíite3 k, geont. que acaban de oriinar OIJ15to5. esta fase s6lo se ha observado hasta ariora en. y es sensible a tris quiniotero1cos (7, 37). 1. .. 1.. Fase. garnetog6nica,. :on5i3te en la formación de gametocitos, a ;arlir de merozoítos Aferenciados, que producen anisoamitos trae la couj gacióu, se forma el ooquiste que ¿Slo tiene .r a al epitelio de revestimiento intestinal de losíieubros .e la familia f'elidae, igualmente es sensible a Los picos (Id,. 30).. ioter-.

(28) 1..:. . -. '. —. Áç.._. ,.. .). \,',. ,;4. 1. -. ". 1 •/ 1. ¼ .c. ',. '.. -.1. (. -. _. -. .-. &7.. .; •'.'. .•-fl. 1.. .51 -. y. L. - '.i. -. .. .... 1... -.->. ¿. -'. -. 1.1. -. ... '.. .. 4. 1. -.. 1. .-. .. ••. .... ,. _ -.. —. 1. .. •. c. ;. -. 1. Ç. 1. '. ,.*. '\. -. /. .. -;,. - ' 3-p. •<:. 1. •. T. ;•_. -. -. IT / Pior. .1. - -... HUESPED NO INMUNE. — -—. 4. :L'J*T' INMUNE. c-. .. .5.. '. FIGURA. -. •. -. 'l. Evo1uci6n de la forma quística del ToxO4a3rna. 3.. •:-•. -:. Élondi. 1. 1. 11. . -!. -: .. 1. ç. -/. 1. 1. 1. -. 1. —. .-. -. -. 1. 1. <y. .. t -. 5.. .. ,. .. 1 ). 1. .. 1; '.. ,. '. .1. •p. -.. -.. —. ç. •. :' -:. '. -. 1. •1. •ç. C. :-... . -. t. —. ... • • 1. -,. -. 1•. - -'. -.. -. -. ,_1. -. ). • -. - -;. •. 1. -Y -. . -. :-. 1. , '-. -• -'.

(29) 1 3. 1. 3.1.5. 'ase de esporLaci6n. Tiene lugar en el medio externo y concluye con la. formaciÓn de los esporozotos, que albergan cuatro esoro-• ;oítos cada uno, dicho proceso es obligatorio, sin el c:zal el ociquiste nunca. alcarizará. su estado infeccioso, requirien-. do buena cantidad de oxfgeao, humedad y temperatura. ;n los huéspedes elefíaitivos ej ciclo es propio de los felinas; se descubrió por primera ocasi6n en esta especie, en cuyo intestino, preferentemente en el epitelio del íleon se curn;:ieri las dos etapas o fases que compLementan el ciclo biolflgico del to.'oplasma; la fase nultiplioativi (esquizogonias sucesivas) llamada agamog5nica, seguida por una fase prolif'erativa (21, 25, 2L ' , 91). 1.3.2 Formas de transmisión en ovinos. An fl() so ha dilucidado, aun q ue el tuxoplasma no puede crecer y multiplicarse fuera de las células de un huésped vivo; como posibles fuentes se consideran los huéspedes definitiv3 lel parásito como son 1s gatos domésticos y algunos félidos silvestres de los géneros Felís y tdyns (lb). Los fétidos son de fundamental importancia en la epidemiología, porque eliminan con sus heces ooquistes que al espori-.

(30) resistentes a loa fc-. lar en el medio. externo son. tures físicos. químicos. Los gatos se infectan al ingerir. y. sumamente. carne cruda (c:rnivoris!no), pájaros o ratono3 con quistes contoiiiendo braiizoítue (Figura ) ( 13, 26, 2,. 3 3). El suelo contaminado con materias. fecaILs del gato srm una fuente. de. irifeccia para muchos mamíferos y aves, conducin-. dolos a una infecci5ri asintomática o a un estado de enfermeíS 7, 70). A. sii Y(kz la. oon probaci&n del. cicJ. ,>.o. deL parsite en el intestino del sato y la rormaci6:i de ooquistes ha permitido entender, por lo monos en parte, el mecanismo de nos), que sería a. la infocci6n. travs. de pastos o forrajes contaminados. con ooquists esoorula(ios (2, 1 • j. 2.1. de Lis herbívoros (ovi-. 52,. 5,. 570. )7, 7).. Frausmisin congénita.. Existen dos opiniones d1ferentesi unos autores apoyado.s en to.s conceptos. dl..sicos. cJe Sabin y su escuela 952 y. ampliamente respaldados por Thalhamer 1 9o 5 sostienen que la trannisi6n congénita de toxoplasma puede ocurrir solamente uandn la hembra. adquiera la infecciri durante la. o6pula con. la eyaculación y pooiblemerite durante el embarazo; segitn ellos.

(31) 1\ Esr rrogonio e. h€ces 3-4 dios.. Ip HUESPED DEFINITIVO : GATO. Ooquites (. 2. \ÇY ICE. gesticfn d ame cruda.. 2 Bistec casi. ' crudo. ru. Huéspedes irtermedarios infectados. { CoryfarnjflGc. —. -9—. J. POR. Vio _-[plocenf Durante la infeccion . - raton / cro1nica. FIGURA. -' Durante la infecciorr aguda -. 4 « Manera supuesta de transmsin de ToxopIasmoss. (33).

(32) lo. no habría repetici6n de este fenómeno en preleces sucesivas. y el :)aaje intrauterino del parásito se liiara a la (Lfl). gunda mitad de ella, pudiendo provocar fctopatía. Se. trata Je conceptos muy difundidos, ciya repeticin sin restricciones a travie de los años Les ha otorgado un valor eaj dogmático (id, 22, 28, 24 0 35, 7). La otra opiriin, basada obtenidos. p9r. fundamentalmente en los resultados. Werner y coi. Langer y Weinmau 19J sostienen. que puede haber traisie0n corignita durante la fase crónica de la toopiasosis; de acuerdo a estos datos, habría por consiu.iente pasaje trasplacentario en preieces incesívas y acLem3 afirman que puede ocurrir en cualquier período de la gestacin a partir de la cuarta o quinta semana, con Lo que otorgan importancia a la toopla3mo9i como causa de embriopatía-. y abortos. (.j , Li. , 5, 7, 9, 1 2, 1 3, 20. Watson y 3everley (citados por Cordero del. 7.. Campillo) (8),. trabajando con ovejas experimentalmente infectadas, afirman que el aborto puede provocarse si el parásito se inocula hacia la mitad de la gestaci6n, mientras que es poco probnlJ..o hacia el final de ella. Los corderos nacidos dr madrcs infectadas tienen títulos serolgicos pottivus que P ueden elevaree posteriormente al nacimiento (calotro7). F.n la si-.

(33) 1. guiente preñez ya no hay problema a causa de La inivai.ci5u natural. Estos mimos autores soetienen que no siempre hay aborto es la getaci6n avanzada de la oveja, resalando lo posibilidad de que las ovejas sanas que convivei con las enfermas, se infecten (infeci5a "horizontal"). Trarii3rx edqzirida. Para que sea posible esta forma do tran3misi6n existen factores medio ambientales como temperatura, humedad, >xigenaci6n, que en asocio con ciertos factores individuales permiten un mejor desarrollo del ciclo vital del ende la. parásito y por. 1 )resentaci6n de la infeocia y Con esta la enfermedad. (25, 3, ,5). Las fuentes de infecci6n más importante; para los ovinos con el contacto con gatos y . féliAp a afinas, el cooslrr') de pastos y forrajes contaminados con ooquttes orniaios, y contactos directos con materia focal 1e los aui:nales oitado3 ( 19,. 2, In la transislri adquirida son muy combres iob portadoru,3 cr5rUc.s asintoticos que siguen presentandi títulos de anticueros iranto toda La vida (0, 54, 3:)..

(34) A'. 1. Aunque puedan invadir. -. cualquier tipo de tejido cororal los. toop1ass, parecen predominar en pulmones, hígalo, ba:o y Mulos linfátio; en las infeccines agudas. Fi Zeneral se pueda sos:echar tesuplasmosis en enfermcdalesin dian3tico y que ni responden antibioteri.ia y asemás cursan coi fiebre, anorexia, deresi3ri ; rie .uía con iinea Proiresiva, leucopertia moc9oraJa, ictericia, iritis, coriniriti. (.)T,. 33). Mucho 5 avínos son portadores le la £nfeccin con la enfermedad eliica en forrnaci6n y el aborto cal .lien)rn. Li1). lugar n eL itlirio res de la Enstaci1n o al cumrlírse 6st, las corr ros pueden nacer débiles o muertos y otarior;'neate morir (, si, 47, 50, 51, 6 0 711. En los ovinos se sabe q ue después col aborto cja.i. or. te microorganismo, la placenta y secreciones pueden convertirse oi foco de -Jiseinaci6n, ya que los preda1ores la pueden difundir -a gran. distancia (atson 1 1970 y Archer y col,. 1971, citados ;•.r Vargas 197)). Le eliminací6n -le tooj'la-mas. hacia el exterior a partir :e un organi5rn9 infectaz, se. realiza por rn1io de la erina; ecoreci9nes n a s a l e s , ocd.ars y va.inales; la leche y las heces (iL, 151 521 T 5, 9 7,. 33,. 90). Existe la pozibilidad de que los helrinto, artr-pos y pro-.

(35) 1 .3. tozoarias pueden. 9Q1'. una y-fa de transmisj6n, ya q.ue los ha-. vos embriouados de Iscaris soa viables por mucha tiemaD y si. están previamente iafsotados, aunque la p,sibilidd es muy remota (79). La inf r eci6n oral tabiSn ve i e sor otra J..- las rutas fecci6o., p orqa una sugerencia plantea que las ooquists es-. porulados p ueden pasar a través de loo criales alimenticios de las ovejas y corderos, alcanzando tao canales rio otro3 animales y 6stos infectar a. los demás (7).. Otra de las posibles causas es el continuo movimiento malas de. de. unos potreros a otros, pues es mSs fácil la adqiisi-. ci'5n de esta. u otras enfermedades, por la posible cissina-. cir5n y viabilidad del agente productor (:37).. 1ASPECTOS CLINICOS DS LA. TOXOPLASMOSIS OVI.. Mucho lanares son perta'ores ra la infc'c-'i ferresad clínica ou evoiuci6n, reaccionue. l a es-. u L-.- riaban. 16gioas y el organismo puede rescatarse de sus tejidos. Aunque los primeros tres informes sobre tooptasmiosls aviia escribían como signos clínicos trastornos del sistema nerviosa central y dificultades respiratorias la mayoría. da los in.

(36) 114. vestigadores han estudiando desde entonces rnicamorte 1. efecto más graves do la infecoi6a de la placenta, la cual hace que se pruduzcan abortos y que los corderos nazcan muertos sin mencionar otros efectos clínicos. El aborto tiene lugar durante el 11timo mes del periodo de La gestaciSo o,. a] cumplirse éste, los corderos pueden nacer muertos les. (7, Y, 5, 53).. CoI.e y col. 054 (citados por Marsh) (jO) dieron cuenta de que su una enfermedad experimental producida por la moculaci3r& de 10 ovejas predadas y tres corderos, tl Período de incubacl5n fue de 1 a ( días y s u cursO da 4 a 21 días Hubo fiebre, disnea, temblores e in000rdinaoiones; y casi toda las vsjas gestantes abortaron. !studios realihado3 ¡,or.)Ltciaei 1 97 2 (citado p9r iaid1and) (), revelan que des ov*as infectadas experimentalmente resultaron con cambios en Los valores normales de la ncre sobre todo en lo que respecta al cuadro leucocitario, aplicable porque dentro del experimento el orfgen de la Infección Podu ser máa severo a difererioJu ir utroe realizados anteriorarate. neto puede indicar que soga la severidaJ de La infeooii, habrá una respuesta con cambios significativos las valDro3 5unguíneas.. 0 110 Ofl.

(37) ¿e tiene poca evidencia. seroF6gica para sostener una rda-. ci6n entre el parásito y la esterilidad eu las ovejas, ea r 9 baijo 3 con influencia de anticuerpos mayor o 1, ,11enor del 25%; el promedio de anticuerpos tiende a ser escasamente más alto entre ov e jas amamantando que antro ovejas estériles, mientras, que en robalos con prevalencia de anticuerpos menores o iguales al 2u.b. la situaoi6n es inversa. Una de. las dificultades. al analizar este problema es que existen varios factores que asociados conllevan a producir esterilidad en lae ovejas, re abs'rci6n embrionaria y abortos ( j , o8, 70, o,. , 89).. 1.'5 LSI0N1!8 DD4 LA tFDRMEI)AD LIN rnos Y PLÁCjr!\.. En los corclerorn abortados, muert oT,, se eocuentra in &dma subcutáneo oo'rnln a otros abortos a uivui del h.gado observaron focos diseminados do un color blanquecino o 0.5 a 2 mm rie diámetro.. iistoLSgicamarite ea al cerebro del feto aparecen eqeoe focos de. necrosis en la materia. blanca cerebral, on ocasionas. focos Se gli .sis y raramente toxodasmas agrupados; en oriaral las Lesiones se localizan en el cerebro y en la médula con necrosis focal, daña veuir, infiltración celular perivascutar y foca]... los nasos cr6nicos se observan n6du-.

(38) 1u u. los Eliales y mlrieraii,;aci6i vascuar (2, 51, 5,3). Las lesiones m-acroopicaa más frecuentes se observan sri la placenta y lo.s cotiledones que aparecen plido y firries cori mdltip1e nódulos blancos distribuidos sobra el rnes4nquina cotiledonar y can infiltzaciorres de grandes c6lulas norionucleare». t,os fçcos biaqtieciz&i ricrosc.ico otr tuído por unas. árk3a.5. crtt-. oecr6tica o , tro las v a l 1<i. foblstioas, a veces con un centro caseificado mineralizado y en cuya periferia pueen.:vere toxoplasas intracelulares o libres (i ú9, 70, 88) La intestaci6n de tocoplasas en las ovejas sri gestaci5rt causa una placentitis que. acrosc6picaments afectaba casi ue. con exclusividad a los cotiledones, pero en la placenta aparecen infiltraciones linfocitarias, 1e3inee focales que conllevan a ua necrosis central (, 50 9 8). DIAGNOSTICO DE LABORATOIIO. El diagn6stico de la toxoplasosis depende de la combinación de síntomas, pruebas sro16gions, lo rniero que del aislamiento del parásito. Los anticuarpo contra tooplasma se encuentran cornírimente en La pobLaci6n normal y una prue-..

(39) 17. ba 5erolp,'ica sente. ;i)i.tiVa. 9610 indica uiifecciS!. necoiariainerate enfermela.a (17,. y. 9, 3;.),. •4,. 74).. Por- esta raz5n e considera de fundamental imortaiicia la se1.cc16n cuidadosa de los oass. CII. estudio, p revio iaaSs-. tico ditrsriciaJ. con otras etiología, y la aecueia interpretaci6n. de. de laboratorio (20).. lD8. Para el iiagnstico se han descrito mtodo iirecto3 e iridirects. primeros L:s consistan en la 1etostraci6 directo del ;:arsito y .s.n los de técnica más difci1. y limiento en la práctica.. ron-. 11,8. undos corraoden al estudio. L08. de las reacciones iumohiol.gicas que e]. ,arsito des::ierta en el orga2limo riel huped, y por .-u técnica te rendimiento, nalizar'mo. a I.a. 7)&S. SeCi1].t. uti 1izado en 1a actual L:1a;. ato ea primer lugar.. 1.6.1 Mtodo indirectos.. 0stn co.nstituCdos ror las roacciories orol'gicas a saber. la :reba de coloraci6n de Sabfr y Feldmar. test e', La reacci6n de hernoalutinacin, la do rijcl.n. coipleetico, la irlmunotluDreseexioia iirecta r1irect 4 la inhjbicj5n do la tnm 2ofluorescencja. EL13ji, difu9i6n doble ea agar, intrdermoreacei5n coa. y. toopla3iuin. (7;3).

(40) 13. 1.).),I. .eacctcSu de. Sabín y Feidman.. Prueba del colorante o Dye test (94), es la más antigua y más conocida. Constituye a&i el método de preJilecciSa para la mayoría 3e los autores. Con3i3to en q ue los anticuerpos presentes en el suero de los individii Infectados, alteran 10% toxop1asmas haciéndoles perder afinidad tintortal normal por el azul de metileno, para rac-. ticarla se colocan toxoplasmas vivos obtenidos del exudado peritoneal de ratones previamente infectado, su citoplasma se lisa en presencia del anticuerpo especifico y de un factor accesorio que es la properdina más magnesio y que se encuen-. tra en el suero humano fresco. La ax;riencia recolectada a travs de los as ha ;urmitido establecer que se trata de un método de alta sensibilidad y espeoiicidad reproducible; comienza a dar positiva siete. díaspost-¡afeecin. tus tftuløs alcanzan su valor mimo. entre Las. G. y 8 semanas, tardando aloe para dtsinuir. Es-. ta prueba es equivalente con la prueba indirecta do anti0uerpol fluorescentes (70, 71, 790 1... ;-'ijaci6n del complemento.. (Bozioevich y col. 946), modificado »ur kriisrin.

(41) ( 14 2). La servibi].idad y eseciticidad de esta raacciSn. de-. penden del antígeno utilizado, y a igual que la !ienioaglutinación indirecta, consiste en contactar gl6bulo3 rojos sen sibilizados con el suero problema, para detectar auticueros que fijen el complemento (5, ki, 44, 79). La fijación del complemento se hace positiva alrededor de un nes de realizada la infección, a ;artir de ase momento los títulos se elevan y más o menos a los 18 meses desaparecen. l..).3 ELISA (nzytne Linked Irimunosorbent i.ssay). Engvall y Perlmann 10952. Consiste en el em.Leo de reactivos marcados con enzimas, depende fundamentalmente de le adherencia cia antígenos o anticuerpos a un 5oporte ótido (pollesticeno) y- da la fijación de una enzima adecuada a antígenos y anticuerpos sin alterar la actividad erizimt.tca ni la reactividad inmunot6ioa. Es la técnica rns nueva. hoy. día y da títulos semejantes a les obtenidos con Sabia. y Ietdman (19, )14). intraderrnoreacción.. itá basada en una reacción cutánea tarda, se na-. ce pO3ittVa a 1)5. pGOOS meses de la inf g c,i5n P) eJ. toxo-.

(42) 2). plasm4 P a ri más tarde que las preubas. serol6gica) y, la. poeitividad 3e mantiene durante toda la vida del sujeto, Lo-5 antígenos pueden obtenerse de diversos productos: exudado peritoneal de ratones, membranas corioalaritoideas, cultivo. tisu3.ares ¡afectadas y su potencia varia seta el nmero de paríitos y de. la proporci5n. de material ¡norte que cootn-. gan; conviene obtener más información sobre la relación ei-. tente entro la reacción cutánea y la evoluciSa de la infección toxoplásmica en el hombre y los animales (o,. 16, ¿,. 79, 3).. 16.1.5 Hornoaglutiriacióri indirecta.. (Jacobs y Landa 19570 Consiste 3n. cargar orit'c.-. citos d€ procedencia humana o do corderos tratases con do tánico, con antígenos prot4icos; esta. célula en presen-. cia de sueros que contienen el anticuerpo específico aglutinan por acción de las gamaglobulinas específicas (20, 0). Al. principio do la infección los titules son relativamente bajos, pero rápidamente ascienden durante el curso de la enfermelas, para descender tiempo deapus cuando las otra-.. prueba lo han heoho. lsta reacción Proporciona resultados eaecfficos y equivalentes a los do la reacción Sabín y Feidman, coincidiendo incluso en la mayoría la los casos en los.

(43) títulos de anticuerpos (31 9 42 9 h. prueba. 3.. 54, 59, GO, 6,. indirecta. 7u, 7). s' i_ia y e. cífica; cirto es que se ha observa:o una débil roacct zada con ienoitin JeLlisoi, pero lors. é9ta. cru-. s&lo se k •roduce c0.1. 3ueroe obtenide3 experimentalmente en conejos (57). En. la actualidad la hsnioaglutinacin indirecta es tttl para el diagn6stico de ciertas ifeccionee cr6nica5 fliefltras que en la infecciones. sirven de compl ei:tto a La reba de. la coioraci6rlg ya ue los anticuerpos -i. aclr in.. directa aparecen con rn&, lentitud, también se puede emplear con b-Ienos resultados. en las encuestas seroepidemioi6gica. (57, 71,83).. 1. .6. 1 •. Xnmunofl..iorocencia.. (Coons 1941).. t avanoe más valioi en •L iar6o-. tico seroltgico de la tooplasmosie es la adaptacin oi. rn. todo de la innuniofluorescencia, utilizadas por su rapidez y sensibilidad p ara detectar o identificar antígenDs o anticuerpos (fli, 79). Inhibici6n de los anticuerpos fluorescentes (?Á1) .sicarnente consiste en la intitbicir de la prue-.

(44) 2',.'. ha directa, consiste en enfrentar un conjugado específico antitoxo.l.smico en una di ' luci5n que tenga el mínimo de an ticueroos marcados y ds ,.tu r dmo de,fluorescencia, ccii un suero i9spechn5n que también posee anticuerpo la inhtbtcian s6lo detecta títulos mayoros de 1 O24 (Figura ). (16, ig,. ,'. 70).. 15.1,6,2 Iziinunofluoraceneia directa (Iti).. Es muy sencilla, se utilizan. inrnunoglobuliria an-. titoxolasma que se conjugan con tluorocromo; de asta manera ei encontrarse el parásito en te-jidos o líquidos, el anticuerpo marcado se unirá específicamente al antígeno, apareciendo fluorescente el parásito. Esta técnica se utiliza de rutina rara La datecaiSn de tooplasmas presentes enqiacntas o tejidos fetales ovinos (figura 6) (31, 74).. 1.6.1.6,3 Inm.inofluorescencia indirecta (I'I).. Debido a la afinidad que preaentau las proteínas de unirse con colorantes conservando sus características originales, las inrumcglobulinas se han conjugado con fluorocroos manteniendo su actividad inmunolgica. Fs así como utilizando sustancias fluorescentes se puelan detectar comple-.

(45) 1. L. 1 2 Reaccidn. +. Antiqeno conocido. 17 v. rT 1. /. C i ^-. Anticuerpos Anti - toxopasma -. 2 2 Reacción Anticuerpos Antitoxopkisma Marcados. FIGURA. 5. Inhibición. de. la. lnn.'.mo fluorescencia.

(46) II. VV +. UI II ti. 11111 ti. vv 11111 ti. Antigeno conocido. FI G FA. Anticuerpos M a ca d c s 6.. Inríuno for es. cenci:. Directa.

(47) 2). jos antígeno-anticuerj.o, corno e. el caso de la IFI para la tOOpiaSmO31. (Figura 7). ( . 31, 71, '77).. La prueba se basa en dos reaceiqriss fuadatntaios. la pri-. mera ie rea i .iza entra un antígeno coricido y el sisro del. paciente. La segunda es el contacto de lás anti-irimunoglobulinas marcadas con los autictierpo que reaccionan con el antLgeuo conocido (i, 1'l, 43).. Una rsacciri positiva se detecta por una fioresceriota amarulo verdosa brillante o color vordo aianana en el antígeno al observars' Ita reacción por medio de an microsQopio fluoroconts.. título en la IFI presentan concordancia con. La prueba del Dys test, ainque los títulos del primero tienden a ser lovornenta superiores, los tftulos 'iguales' sUpe-. riores a so consideran que reflejan una infcci6n pasada, y generalmente, tftuloe superiores a : Q2 ! , g ijgieren la posibilidad de una infHcci6n aguda (6,. La importancia de la IFI radica en que tiene caractorí:ticas semojantes a las de $abn y Feidman, dero no se npl..ian toxo-. Ola5nas vivos y además se usa en el diagn5stico de toxoilasmosi- aguda congénita porque no solamente se puee determinar Ig M, sino tavnbi6n parte de la Ig Q. Desde que erne6 a uti-.

(48) + 77. 1 Recccion. b\ Ant igeno. Anticuerpos. conocido. Ant itoxoDiasma. 1 2. r- r+. R a oo. 1//. Ag +Acs \ II. /. L. i '-. ]. Anflcuerpos An'. FIGURA. 7. Inrnuno fluorescencia. Indirct.

(49) lizarse la IFI ara €1 ian&stio 1' iiv•?r 5 efer:e ia ti. Cada voz 1.3 .311 ii. ar ;,racticar1... natria1. 1. fj'rnd.1. Otro. aL.no3 casos y F€1dFnar1. e'. 1 Lagar a s er. t caL::r. ti j.L. cm. es i lectfica,3 cie Sabín. 1c' rci fases crrica. nibi 1 tii. y. la J-LLA. pc.fic'ida 41tos p. tOCIOS. iL or 1rneto de la IFI. E. y 'elr1rDan con la IHIA,. I-. MI. Ini3. crí. oagiutiaci'n irHi recta. q u e ésta. doterçnira arLticnrp3.. 1,..2. Las for. (7).. En cnar*ci5c coI ]. relaci. rcc.r. Tr-1b. I.&I. nes recic:t ; y r Lctivaoio;i. tu a. tsi.nn ci1. clLico qe. U,-s. i wy s. jate, arqe. frcL.1er4cia (. -. j'rcto.. a .?m3trac 'n :iel par4i to s la •r eb cíente. ra coifirr 1. ciagxi3st1oo •. la to. .1a3ri. Su tiiii r! :rctica.sín embargos esbata.t . 1inita; si. S 1to ç1. are. deeide en graa parte.ci l infecciSn. misma es del acitz,. decir. ' 19 La i tnL.ia 1 y la fasecL. prQce3'> infccios en el ¡nc.nento de to'iarse la :n.etz'a (79)..

(50) 2z. Otro factor imurtautc lo ou3t±tuye la oatid el rnatria1 't. y. recibe ara el est4dii Lra5itoL1co. - ¡*o usa la 1c.laci5n a ariima1e.. 1.abzratorl. í. que todo para al i tentiiento de reserva Jacpa.s y un -tro3. para La ampLiaciSa 'e estudios e invcsti. itnes ( !. 1.7 TOXOPLASMOSIS OVINA Y Uk SALUD PJBLICA. 1?l IaoTtIbre .e infecta neJianta la i eti3u -:e carne cruda a iuuficienteeioto cocida, sobre toda deviuos cer-. do y bovirs. Las altas tasas de quite y dad eocontr3.'1a. .c.ia. rz ovinos. indican que estos anils cou:. 'rtaite fuenta de infecciri. oi i>.. r,itivi-. .'r. j' lo. rçihem 91 consumo de carne vina puco. el p)rcentaje uu reaccionar:tes llega hasta el 36.. 'ntro L; judts 'le orn iraní, con gustos soAeJantee eL -'.orcen-taje es 'it. t.da. ¿4. actividad 2rofesional infliye también en Ls. lbiLidad. del coritagi o. .n tina enciesta sorol6Iíca. reciente cutre 14. Le-&J- y obreros de un matadero de IeLL -iriou?,. Brasil,. Aw. enoontr5 una prevaloneía le reactores Jr?¡ 721. cotrob:nctose la taza mám alta (92%) entre Lo'. i;ecto-.

(51) h). res le carno y L'. iná3 baja el O% entre loa obreros. corralee. Tambl6a iio ha enoontra10 ana p revalencia ta le reactores en lam aiwi. Ic. casa, que. s. :311-. ani;.Lctu carno on. la cocina que en la pobiaciSu general.. cric .Jr. ewiiare por la oataminaci6n de las manos y la coriuiente iniscci3i r')r va bca1 (13, 19).. Se h.a confirmado corno osible contagio el contacto crji ant•. males, corno l!_)3. granjeros,. r*ale3 le la Meiciria Veterinaria,. tuiantes y profeiofl. :ersorit le. r¡ ,> hay, ocurrido infecciones por iraocnlaciSri accidental con hax agujas contaminadas.. El hrnbre es un huésped accidental y no de mee iiinn apsl en el mantenimiento de la infecciri (u, 70, (!tj). 1.4 CASUI;TIcA JXIST1NTE EN EL CCNTRO DIAGNOSTICO DEL INSTITUTO COLOMBIANO AGROPECUARIO, i. (. NIzAL,).. r1tre 1939 y 1 983, tiempo de funcionamiento del Centro de OiaCuSstico de la RegIonial 9 del ICA, se han rija oticad' cas-e 1e tooplamosis en diferentes esriecies, dos de c3,9 varias ciudades, cuyo mayor porcentaje ee hi tado en Hanizajes y en menor prororci6n en BoGotá, Poreira,.

(52) '(. Ibau, 3arra;uil1a, Viii. ;rí3,. Cabal entre tras. La3 especies. C1i1nchirI y. CO'-1. más casos. -ta Rsa ' 3')fl.. .. Coiejos Cniuos. S.). R->edorcs. S.2. Bovinos. 2.7. Pelin. u.. Se justitica que. el porcetitaje. 79.Y1 en la o.pceie ouuícuta. sea el 'n.s alto, debido a la alta sueceptibiLidaU a t*sta a-. r4ito y a la convivencia gato-conej, tan frecuenta en ntetro rnecli3. Dentro de los ovinos no se han pre g entaJo ca,.-;e. semejantes ()q.

(53) 2. MATERIALES Y MJTODOS. 2.1 LOCALIZAION GEOG1AP'ICA. El stwii) se realiz6 en tres f'irica JeL rnunicipi' Marulada, Caldas, ,situada ati cabecera a. 59 17 1. e. latitud nor-. te y a 752 l l í t de longitud oeste; altttud sobre el nivel Jel mar 2.25 m 1 teperatira media 1 gradns c tíra'1os; el área municipal es de 47 2 k, 2 los pisos térmicos están distribuídos. así:. clima medio. km, 2; clima frío 272 km ; pra. 189 çm 2 El territ'rio es en general monta:iso y su reileve )ertenece. la cordillera central. Su rincipaL activi-. dad econ6iica es la ganaderfa. iguierd. cn. iiuportanci l;. agri cii. tura.. 2. 2 i)XSO EXPERIMENTAL.. 2.2.1. Poblaci&j.. Para efectos s estudio y con base en la inforuao16n suministrada, la d9blací3n de las tres tincas 1rob1ewa ascier, de a 2.325 ovinos en total (Tabla ¡).. 2,2.2 Muestra..

(54) 29. Con un nivel de confianza del 95% (0.05) y asumiendo una prevalencia crítica para ].a entidad del 58% (Proyecto Ovino Coloibo-Británico) y un margen de error equivalente al Mi de la prevalencia estimada; el tamao de mue9tra estuvo dado por la siguiente ecuaci6n de ditribuoi6n binomial:. (los -.. 22 275. (io ID)2 loo. n. Tamaúo de la nuetr.. P. Prevalencia estimada antes del estudio.. Z 2 19. Área bajo la curva de dietribuciSn norral cian-. do ea trabaja con un nivel de oonfiana de 954. (10 p)2 - _-Error de muestreo con el cual se trabaja. 00 2.2.3 Ádicin i8ue9ral.. Con el fía de obtener una mayor eficacia tU el muestreo, el tamaüo de muestra calculado (nz 2 75) se adidoná ci'. -n 3% obteniudoae un tarnano de muestra definttívo de nw. 97 (:ioo)..

(55) Poblacidn. FINCA. (Ns). El aIo de LA VIRGEN. LOS PIRINEOS. EL PINO. 675. 1.200. 450. 2.32b. TOTAL TABLA 1.. Población Ovina de la cooperativa de Marulonda ( CaId iCi s ).

(56) 2.2»4. ?racci5n rues.al.. Para calcular el nimero de animales a uiuestroa.r en cada finca se calcui la fracción muestral, 'f" y se procdi6 de acuerdo a la siguiente fórmula ('rabia 2):. u N. O,29. 2.2.5 Selección de los animales.. Los anímales muetreadoe en cada uno de los prdio se seleccionaron, s,gtln las condiciones del azar, o sea que cada uno de los animales tuvieron iguales probabilidades de. er seleccionados para integrar y completarla m u e s tra. cO--. rrespondiente a cada explotación.. 2.3 PRUE13Á DE LABORATORIO.. 2.3.1 Obtsnci6n del antígeno.. 2. -5. 1. 1 InoculaciSn de ratone:;.. Se inocularon ratones suizos de aroximsdarnente 43.

(57) FINCA El alto de LA VIRGEN. LOS PIRINEOS. EL PINO TOTAL. Poblacion (N2). Muestras (Ns). 675. 0.129. LO-N. 1.200. 0.129. 155. 450. 0.129. 58. 2.325. TABLA. E. 300. proporcional de la Mues2. Tamaño - Distribuck tro y Fracc ion muestra¡ (E)..

(58) :51. días de edad y un peso de 30 gramos, usando la cepa de Toxo¿a ondi dal instituto Nacional de Salud (XNA). iiihoras, ches ratones eruiaueciero luego de la inocuiaci6n al cabo de las cuales se procedi6 al sacrificio irroduciLidolos en uu; cámara iprognada con áterg luego se les inocu16 vía iritraerItoueal 2 ml. de soluci5n salina estri1 al 0.83%,. se les. hizo. un masaje suave en el abornen extryn-. de exudado peritoneal, del cual se coloc5 una g ota en una lámina portaobjetos, 38 le adiciori6 u na laminilla y se observ5 al microscojl-o para 3U selecci r5u; db ose. luego 1 ¿nl. tr libro de célula3 y bacterias y a la vez rico en trofDzoítos.. Se 9aorificarorl 11 ratones y so obtuvieron 1. 3. ml de exudado. peritoneal, que so repartieron en 2 tubos do centrífuga estrl1s y so las agreg6 a cada uno igual cantidad de foraúl al. ., se agitaron vigorosamente para iowogenizarlos y se dejaron en renos ,) por 30. jnutos.. 2.3.1.2 Lavado de lis trofozeítos. La soLuc.i6n formada se centrifug6 (Centrífuga Literutional. lEO). nar el. ecdiiente.. a .3.000 RPFI Y.Jor .0 segundos, c ara elimi-.

(59) 2. El 3obrenadante se centrifug de nuevo a las úismas revolLtclones, pero esta vez or 15 minutos, desoartanio (31 30br0aadaate. :i sedimento se reconstituy& con 5 m1 Je s,luciEr1 salina buffer fsfato (PBS) çf 7.15) para caJa tubo, ve se centrifuga a 3. )00 RPM por 10 minutos en tres ocas¡el ,:obrenadanto al final de ca- -in Lavado.. 2.3.1.3 VIiJaci3n en las láminas portabeto. iiueit tinal obtenido so recoustituy con stril hasta obtener ciiludiones de 132o tro-. fo:oCtoA por campo microscópico (39), (objetivo 4UX, ocular y con la ayuda de un rotat o r. (variable 5.00LI), se lo-. la dilución requerida, y el antígao qued5 Listo para fijar -:obre las placas de ii. (portaobjetos) (Figura );. I.or WeClif) de una jeringa tubercu].rnica est é ril ,. e colocó. una Cota en cada uno do los agujeros de las l ám i na s, posteriormente to r1. las bandejas con Las láminas se introdujo-. mu a la estufa a 37 9 C durante 30 minutos, con el fin de que la fiJac iSn. a la mejor; cumplido el tieno se extra-. p o se emacaron ael sve ua y luego, jeron, oc envolvieron en pp en bolsas plásticas y 59taS se depositaron en queo que conteua.rano5 de. :licLI. LIC. gat6ri pa-. ;el de color violeta y. cuando virfan a bl anaos indican que las lómlrias con el an-.

(60) Ou(. nm'.'c. fur:c. o:1. d ¡ti cone. n, c1 r. áá á C) E) Di1ucio. n. s. 1. : 2 7. 1: Al. 1:. 1 : 16. 1:32. 1:64. n n CDC? 8. 9. 10. con1 poit. control. en.

(61) Ti. tlUcun rnaceu. -3e. ensejAda i rciir1t. han. i ui coniador a. -20' C. ,ara evitar w }t'riro. e hicrataci'n.. 1 5'1..uei-S' Pref.araci i r1 buffer fsfto 2. 3. 2 de. 3aLtRa. (P133).. 0.1 'o1ar y J{ 7..,'-'.. Consta, i i n. At NaPO. 0.2 ciolar (27.. S c,1ucj6r 3t NaHP0. 7 d0. 513.63 g/1. ittiada. 7.64 g,'l. gu' ';tirc3. 0,2 rrn1ar 2 H,0. Na,,HP0 uffer. aL1ira 0.2 molar pH 7.2. 2kS. 4 2 g/1 as7 ua esti1ad. 7»4. ç) 01 A. 0 13 - 50u ti1 agua iti1a:, y Liego. e ooriisrva en retrigeraci6n.. 2.. j.. Prepacaoi6 del reactivo azul de. L.a s1uoj6n debe quedar al 200 1. ci o. U); 0.0' iz. azul de. agua cle3tilada y se conserva ii refrir-.

(62) 2 .:).. ii.ci n y tituLaci6 del con,jgado.. l título del conjugado estaba en t 2 y La conccntraci6n al J.5 o sea 0.5 1. rtes del conjugado r& Li.5 1. del reactivo a.u1. de Evans, es centrifug6 (Centrífuga IEC B-20Á) a j.Ou0 RPM. durante 5 minutos; el recipiente o fras-. co se envolvi5 en papel de aluminio y se conservó en retrigorciSn hasta su uso.. 2 .3.5 Suero controles.. :5 emplearon sueros controles cedidos por el Labora-. torio d9 Uiagn6stico de las enfermedades ovinas del LII4V, y se probaron antes de emprender el montaje de la prueba, resultando el control positivo con un título de. y el con-. trol negativo o suero fetal bovino respondi6 a la negativi . -dahrequi.. 2.3.6 Tcnioa de inmunofluorescencla indirecta (ii).. Se realt . 6 segzn las t6cnicae estandarizadas çor el Laboratorio de Investigaciones Médico Veterinarias L1MY.. 2.,.G.1 Dílucl6n de los sueros,.

(63) k. -'. ;' ,'•:. 35. Para realizar las diluciones. 3o. utilizaron cámaras. ticrotecni& (icrotiter) (rigura 9; en La .rimera horizontal de la letra A a la 11 se (1Op)itarOn to. uc. controles y problms con una pipeta calibrada para 5. mi; en ¡as restantes celdas g e hicieron las -Junco-. partiendo de 12 hasta 1.4Q9. se sirvi6 el ?B3 0.1 mopH 7.2 - 7.4 con una pipeta calibrada para. 3.025 mI;. eriormente con microdiluidores se efectuaron las dilues correspondientes. 6.2 Confrontaoi6n de los sueros con el antígeno.. A los sueros problema y a los controles se les aiirna placa con el cospndiente antígeno, p'r medio de pipeta graduable (Variapetto 471 0 ) se. .ciones, partiendo de la mayor a la. 3irvieron las. menor y cambiando de. opipeta (ri)iF n cada suero; listas las laninullae ntrodujeron en cÇklars htlmedas y se llevaron a iricuba• a la estufa a 37 C por 30 minutos posteriormente se izaron dos lavados con PBS por 3U minutos cada uno y, o otro con agua destilada por igual tiempo en3eguida c i aron secar al aire (se pueden secar también suaveteaon secador de aire frío)..

(64) G F E D C B A. 0000000 1 1:2 00000000 2 1:4 n n n n n n n n 3 1:8 00000000 4 1:16 00000000 5 1:32 00000000 61 1:64 00000000 1:128 00000000 81 1:256 00000000 1 00000000 l 1:1.024 00000000 11 :2.O48 00000000 12li:4.096. io. 9 o. N) (71. 91. FIGURA 9. Camara de Mcrotecnia.

(65) 2.3.6.3 Adici6n del conjugado. 1l título del conjugado se cauci6n. y de. U36 F,,1. 2 corno pre-. esta soluci6n se coloi,6 en cavia una de las cel-. daa de las lrniéas pertaobjetoa 0.02. l con una pipeta gra-. duable se lle y6 a la cámara h1ec1a y después a la estufa a 37. C por 30 minutos para la incubacii; desp4s se :.roce-. di6 a nacer los lavados, igualrná1tó corno e describIS en el anterior numeral,. 2 .3... k. Lectura al microscopio.. Realizados loe lavados, en cada una de las celdas de las laminas portaobjetos se les adicion6 una gota del líquido de montaje (Glicerina Bufferada pH. 9),. e los co-. loc la laminilla eubroobjetos para realizar la lectura correspondiente en un mioroscopio de campo oscuro (ZEISS West Germany, objetivo 10, ocular 8.iR), se intel6 la lectura con los. sueros. controles positivo y negativo y esu$s. con los sueros problema..

(66) 1• RESULTADOS. . 1 )iGNTAJi DED LA. I11UrOFLUORESC1NCIA INDIRECTA (II).. `5..1 Titulaci6n y diluci6n del conjugado.. 3asa3os en la titulac16n del conjugado para ol Pro; ecto Ovino Culornbo-F3r j tátiico, el. cual se encontraba en I:64 y despuSs 4e confrontarlo con Lis sueros controles,. se ieterrnin& uarto con un título final de 1: 32 tiara permitir .tia fayor seguridad on la realización del presente estudio.. 3.1.2 PrearaciHn. del aitgsao.. Las dIficultades que se presentaron en un principio, fueron por la muerte da la cepa que se tenía en esemomento para hacer los pases respectivos en otros ratones. oste-. riortnente se inici6 con la inocuiaci6n de la cepa cedida por el Intituto Nacional da Salud (IRAS), y en esta ocasión al hacer i . s repiques a los dos días se obtuvo un eidodo con un alto ní.ero de trofooftos libres de células y bacterias (Figura lo). Luego de haberse extraído, atenuado y lavado, se logrS conseguir una densidad de 25-30 trofooítos por.

(67) _J_. .-. •4. y.. .. .'-. ..,- .. •?4. c--. 'k. ... -. ,.. ,... - - ,. -- .. ... •.•••:• .. -..'... ... 4. t ..-. ...,.. - .. .- (. ., -,". .. ..-. .. . ...'.-, :. .. t. .•. •.. •. .. .. •.. :....._... .. --. a .. ",. ... -. .. :. k :. . . ... .':••. Wi.¿). E1S. 'w•-;-. I .\. t i. . .-. .-. 1. .. '. ,',.. - '-•... .f !. -. -. -'. ). ,. '. :. -L. ;. !-.. (. t. w. ..',: -. }-:. -: -•.'-- -. :;-. d. ... (•.. i. w. -. h. u. •. ,. 4. ... -.. e. __. - __________________________________________________________________________. -. 1. :::c • - -- -:'-. 1. 2• , .- .;::-. ¡. 1. •-. ¡1. -y. • —. PIGURA 10 Toxopla3ma 011dii1 Trofooítos de to\ola$ma en oxidado peritoneal de ratones. Coloreados con ie'na. Objetivo 40X. •. — ---. . ----..-:. ::.-:-. •. --- --. . --i:-1. ¿ - .—. -. .-- -- -. - .......... 1 .......................- 1. -. •WLJOTECA Or .. 1. 1. -:--. — -. 41. t -...................................... 1. kUn.

(68) carnicroscpico, ayor que la. nihJ Niia e ) 5-20. recomendada por algunos autores.. 3..3 :ueros controle. Los sueros controle,, tanto al íjositívo corno el oegativo (suero fetal bovino), estaban oorrectarneto en diluciones suministradas y corroboradas antes de iniciar ci. montaje de la orueba mediante previo anlisi, lo-3 títulos tuorori respectivamente de. y 1*3 (figura 11),. 3.I.4 rnica de inmnofluorescencia indirecta (IFI).. Ls reslta1os obtenidos por medio de la pz'"ela, d los ovinos muestreados en la Cooperativa Ovina do ?'arulnnda,. Caldas, se muestran en la Tabla 1 y Figura 12.. 32 A.NitLISIS, 2STADISTICO.. Por lo resultados obtenidos y considerando que títulos iguales o superiores a HtA son indicativos de seroreac. tividad ' ositivu, la irrevalencia () de la eritida en las fincas estudiaas ostf dada ¡or.

(69) .. ..,,. .fr. ,.. ('. &. ,-. .>. '. + _\. y ,. 'ç. « ,. -. '•. -. -. N.. r. -. '. -. -. •. » . •;. 1. -. r. :.. ... II. 1. .11. 1 ç l 7. •. •:. •. -. •-. -. _•#. 1. d'. -. 1. ,. ... -. -,. k 4!.. •. 4! .,;.... -. :. FIGURA 11. Prueba de Inmunofluoresconcia Indirecta para Toxoplaamoais. Suero Control. Positivo.. -' --. 1. '...?-•. 1. .. ..,'. . 1. •;. • .-'-. .1'. r.. Z. -.

(70) FINCA. TITULOS MUESTRAS No Reaciivos 1:8 (NR). El alto de LA VIRGEN. 87. LOS PINOS LOS PIRINEOS TOTAL. 1:16. 1:321:64. 18. 45. 14. WOO. 13. 32. 12. 155. 29. 40. 67. 15. Ti. 60. 117. 93. 23. 233. 20. 39. 31. 766. .IøJ lOO. 3. 7. TABLA 3. Titulos de Anticuerpos contra gQadii en el municipio de Marulanda (Caldas ), mediante la prueba 1 E 1.

(71) O'. N. R. FIGURA. 1:8. 1.64 t;16 132 TITULOS ['. Prevalencia Serokgica por 1 F 1 para Toxoplasmosis Ovina en Marulanda ( Caldas )..

(72) .,.-. O 0/. No, de reactores positivos No. d. 23 300. 'antrna1es exarninado. x 10. x 10C>- 7.7%. Así mismo por el margen de error asumido (io% d e la prevalencia estimada) se estima que esta prevalencia no es mayor de 8.47%, o bien que se encuentra entre 6.7. y 77%.

(73) :4,. DJSCUSION. La prevalencia de anticuerpos ccL' toxoplassa de 1,93 ani-. maLee examinados r'e de 7.7 traron títulos que oscilen. ( entre i.. de anticuerpos indica nsce8ariament área. tudiado han. 5), los reactores mos3 y 1.6 14. PA Fiallao ie los. OVifl)&. !el. estado en contacto con el. ondtt, di4ndoe afirmar que alganos a»ric s cercano3 (le menor magnitud pobiaciozial pueden presentar tJtol.; d anticuerpos semejantes a ].os obtenidos.. Sin embargo s La presentaci6n de problemas rerpoductivos que pudieran estar reLacionadoe con toxoplasmosis se remonta cinco aoe atr.e cuando se produjo una serio de abortos en los ovinos rl árna estudiada, por un t1rnçio no definido; después de cierto lapso de tiempo ástos desa;arocieron has-. ta la fecha do la presente inestigaoi6a, no se tenía información acerca de problemas esimílazesí además, tampoco se lien tenido datos de posibles infecciones en los habitantes de la región, puesto que es frecuente el consumo de carnes de ovejos siendo ésta una 1e las principales fuantos. do. contagio. al hombro ( 1 9)4 es preciso aclarar que en oinu: vomento se determi el diagnóstico exacto sobro la posible causa da aquellos ubortos.

(74) 1.1. i se oonparan los reuitados obteniios con trbaj s lares realizados tanto en Colombia corno en otrcs paí se observa que la prevalencia observada es baja. Así un estudio seroigico roiizado por Perry y col. (eil) en los artaieritos de Uoyac, Cesar, Guajira, 1ui1a, Nari te de Santauder, encontraron un 58 de reactores. u. y 'or-. sitivo.s '3 oinos. Juntro de una pob1acin de. d lo cua-. los títulos fluctuaron desdo Ii Í6 hasta. les con este último título se detectaron Li auirnt1es,ienJo el d. rtamento de Bayao el ms representativo con 33. de los 41 casos sealados; las diferencias. en. relación a los. ha.UaZO'3 de La presente investigacin son rnaroads, pueSto que el título m.s elevado fue 1:4 .ado por "- 1 3 animle roactoree.. De otro lado, en Noruega se obtuvieron porcentajes •:11 2-.. jQ% positivos, cuyas manifestaciones clínicas mís. iortu .-. tes eran abortos (J, 47). Investigaciones roalizadas ;rr el norte de Inglaterra indican que de una serie de aoortos repetidos, 29 de 10 7 casos respondieron al at.amiento de toxoplasrna. Un Tasmania, Australia, se encontraron un cje reactores en corderos y 1 31.7 en ovius de nj. o.iad (u).. La presentaci3n de los títulos en La zona estudiada podría.

(75) 42. explicare or la intro uc!n ir rjict'r. hembras rocødntos de las regione3 de Cundinamarca y Boyo_c, siendo este dlticno deatarneoto ua c las reCl-inejS con prevalencías rn.s altas y un porcentaje de 63% de poitividad (61). coy'. oce cní' pueda 1 1var•. flç obtit • ao -. vin.. itrc 10. f'cci6n 1atraJ. pero. Cb. '. la irifecjrt cuando se mezclan individuos infectados con no irifectaos. Además la trarxsmisi6n por el semen. e3 'i. hec,io,. aunque de limitado significado •piderniol3ico.. La reencia de trifecci6n con Tox1asa. ¡s fact J , I•im. cli;:. tiende a ser. medos, pero mientras. 4s-.. tulos cambian de una regi. te varía. J.i1tura, 1'. a otra (iS). Por lo anterior, se puede considerar que el. ?r1. país tiene un clima favorable para el mantenimiento del agente y en la ragi6n. estudiada el clima húmedo que viría. con la altura, guarda cierta similitud con lo seaLado anteriormente. Qui. el hecho más triortante puede ser, la. cc:). -toi. 1,cii d ri. rías, ci6n.. ya. las. y. :. '. pradsra,. CO. contacto de ástos o: tn ij. 1. vivien-. is cercanía al pueblo pueda ser una contradic-.

(76) 1-. El manejo es otra de las variantes a dilucidar en este campo, ya que e3tas prácticas de mantenimiento sni apenas las necearlas para mantrier los rebars en jieu : s condiciones y produoci4n. Analizando j i u untos obtenidos es puedeconsiderr que la topgrafia es otra de laa razns vaIoderrs en b'3ca do una. olicuci6n a la prevalencia tan baja; a g. í. 3apla iorry y la regi6n. col. (61) en Byacá se distinguen das reios. norto, una zona quebrada, m gntadona y de difícil acceso, la. poblacitu ovina se halla generalwente l isperna, do roba. eroor. ioni.v. rio aparecien-. La zona sur presente come carac-. terístiL3 ii jen3iini de poblaci6n, sa topografía. e5. rr-. uos irregiiar, losapriscos aparecen en mayor cantidad, hay má contacto directo de los ovinos con los humanos. y COÍ. es mayor la cercanía de los pueblos, la pre"cn aia le lsgatos ya. r3. fundamental para la preeitac16n de in infecci6n. tos títilos obtenidos en ambas regiones difírren altamente, :ií)dÓ la rgi3n norte de. iCt. la quo ns no as .meja a la. zona estadiada en al presente trabajo, tanto cor la topografía ., (:5 y. 'eretract6n a r1].a o mena contacto con felipál alejadas ic. !a9. z'ria. ti p o comercial y en otros parajos son cie. dimentaria por. ol. i..tai5n do. La ti:JO. fatliar y ru-. misio otitema de exp1utact6..

(77) 4. Pn releción a ¡afi ventajas do la inmun)fluorescancia indirecta está estandarizada ,ara detectar anticuerpos lg G,. permite detectar anticuerpos Ig ) producidos en La fase aguda de la enfermedad; en la actualidad la IFI ha despiaado a todas las pruebas por ser más sensible y específica ((u); el almacenamiento del antígeno a -20 C es otro de 1cM. factores veutajosos de esta prueba; en relación con la. hemoaglutinación indirecta no detecta anticuerpos en la fame aguda de la enfermedad y sus títulos serolgicos aparecen más tardíanents y, a veces, presenta reacciones cruzadas con Besnoítía y. Haiondia (64),. Las desventajas más concretas sran que require de laboratorioa y personal técnico especializado; el trabajo directo con toxoplasmas vivos es un p1igro de infaccióu, a su vez la kUA es factible su realizaci6n porque no requiere laboratorios sofisticados y es la más usada en ovinos para detectar anticuerpos hemoaglutinantes4 o recomienda realizar estudios ssrol6gico de voblacioi1es cv-mas cercanas y efectuar un seguimiento en relación al aumento de la poblaci6n. llados :el. felina, Llevar a cabo exámenes deta-. tracto reproductivo de las ovejas y, asu vez,. mantener una vigilancia epidemiológica para establecer la. evoluci6n do los títulos a través del tiempo..

(78) 5. CONCLUSIONS Las ovejas pertenecientes a la Cooperativa de Maru1anda CaLUa,da" estado en contacto con el Toxcplasma goodii. La prevalencia Je antícuerpos actitoxo7lasma h se estima que no os mujer J: 1.471,. o bien qua se encuentra entre. y• 7.7,;. Lo,. tftuls. obtenidol oon Indicativos de una irfecci6nPa-. gada. La baja prevalencia rira .eq.' licare, quizás, por 1.a ausencia io felinos domésticos y por la reducción de la it purtaci3n po ovinos de otros departamentos con altas tasas de infecciti.. e comprobó una vez más la utilidad do la técnica Je inmunf.Li'ro'cuneia indirecta para el estudio de la Toxoulaaniçiinj $11 iiicina Veterinaria. Se etablcci6 pie hasta el presente la ToxoPlaimosí5 ;via no ei un factor limitante en la producción de ovirLo3 del írea estudiada..

(79) Se oousiciera im ki % ortai-itn rrartenor un iitema ie vigilancia epidernioLica para estudiar la evoluci 6n del estado inmunoltSgico de la poblaci6n ovina do 1icha Srea.. lo.

(80) y • f ,-. 6, RESUMEN. Se realizó una encuesta serollca para establecer la prevalencia lo anticuerpos contra 'OQpla5ma eZndit en 10s ovinos del municipio 4, Marulanda, Caldas y regiones al'? .-. dafae, mediante. La tcniea de la. Inmunofluorescencin Indi-. recta (IFI).. Para tal efecto, ine recolectaron 32W) 3114ro. e cuer'D cc. un dlseio estadf3ticO de distribuci6n hin nmial. Lja sieros fueron analizados por la prueba de IFI, según las técnicas estandarizadas en el Laboratorio de Investioiones Mdico Veterinarias LIMV, Bogotá.. Se anooritr6 un 97.66 de aniina1. ue. reactores con ttuto. oscilan entre 1:8 y 1a6. La prgvalencia seroL6gica es de. 77% valeuci. :3), la oal es baja sí se compara con la. re-. .00ntracia en otras 4rea3 ovinocultoraa dl país.. Sedisoutn algunos aspectos epiclemic'l6gicos de La roxopiasno3i en el. área atudiada y se recomiendan etudtos poster.iore de vigilancia epidemtoi6glca para conocer a tiempo la evoluci6n de. la. enfermedad en dicha área..

(81) SUMARY s carrid out to estabiih the prv-. stro1'gic isurvey. of acittbodis agalnat. Toxo.ilasma gomiii in tho ovine. of' MaruLaida CLia towti&dp ai4 lirniting F2,i'13. usiag tho. indirct iunot1uorecenc teeflique I?I. Por tliat. 3J:J. wore COIteCt(l tr une. binuria1 distributiori 5tati3tl.cal ri. ¿... ces1gr.. erunis wro aialised by the IFI tt &ocordirir -Co stan-. dardized tchniie in the Medical Veterinarv : earci Labo ratory LIMV, Boot to 1ive titor3r1: r!. of th ractr animais wore found h€t:ee 7:8 and 14. T:i. aroLogica1. r with wicii i 10- wh el, prova1ence found in otcr 5hee;rai9in p arnas cf t¡-.te country.. prevalonco is 7.7'. Alio iscussi ar .orne enid1:'loiccl. B lr, 9c t. f th Toco-. rth? tu1ioi arca F. TI J t'ur'thor g ii 1ogic to d1ovr on ti:o t 1'e evoiution voy studies .re JlaStfl!)5iS ii. uf tho laso in tht ares..

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