UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR
SISTEMA DE POSTGRADO UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR
PROGRAMA DE MAESTRIA EN CLINICA Y CIRUGIA CANINA
TESIS DE INVESTIGACION COMO REQUISITO PREVIO PARA LA OBTENCION DEL TITULO DE
MAGISTER EN CLINICA Y CIRUGIA CANINA
PREVALENCIA DE Malassezia spp. EN OTITIS EXTERNA EN PERROS EN LA CLINICA VETERINARIA DOGS & CATS DE LA
CIUDAD DE IBARRA
MARIA FERNANDA VILLOTA BURBANO
GUAYAQUIL, ECUADOR 2016
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SISTEMA DE POSTGRADO UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR
CERTIFICACION
Yo, Cesar Carrillo, M.Sc Docente de la Universidad Agraria del Ecuador, en mi calidad de Director CERTIFICO QUE: He revisado la Tesis de Investigación titulada: “PREVALENCIA DE Malassezia spp. EN OTITIS EXTERNA EN PERROS EN LA CLINICA VETERINARIA DOGS & CATS DE LA CIUDAD DE IBARRA”, la misma que ha sido elaborada y presentada por el maestrante: Dra.
María Fernanda Villota Burbano; la cual cumple con los requisitos técnicos y legales exigidos por la Universidad Agraria del Ecuador, para este tipo de estudios.
Atentamente
………..
MVZ. Cesar Carrillo Cedeño M.Sc.
Guayaquil, 1 de Marzo 2016
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UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR
SISTEMA DE POSTGRADO UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR
TEMA
“PREVALENCIA DE Malassezia spp. EN OTITIS EXTERNA EN PERROS EN LA CLINICA VETERINARIA DOGS & CATS DE LA CIUDAD DE IBARRA”
AUTOR
MARIA FERNANDA VILLOTA BURBANO
TESIS DE INVESTIGACION
APROBADA Y PRESENTADA AL CONSEJO DE POSTGRADO COMO REQUISITO PREVIO A LA OBTENCION DEL TITULO DE
MAGISTER SCIENTIAE EN CLINICA Y CIRUGIA CANINA TRIBUNAL DE SUSTENTACION
MVZ. María Emen Delgado M.Sc.
PRESIDENTE
Dr. Eduardo Pino López M.Sc. Dr. Alfredo Bruno Castillo M.Sc.
EXAMINADOR PRINCIPAL EXAMINADOR PRINCIPAL
MVZ. Cesar Carrillo Cedeño M.Sc.
EXAMINADOR SUPLENTE
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AGRADECIMIENTO
A la Universidad Agraria del Ecuador por ser pionera en la educación continua de las pequeñas especies, quien con su calidad educativa ha forjado en nosotros un estímulo para mejorar la atención clínica y quirúrgica veterinaria hacia nuestros pacientes en el día a día.
Al Dr. César Carrillo que con sus conocimientos y entusiasmo han permitido la culminación de esta investigación.
A todos nuestros queridos docentes de maestría que con su amplia experiencia y dedicación al transmitirnos sus vastos conocimientos han hecho de esta una experiencia de vida para mejorar no solo en nuestro campo de trabajo sino de amistad y familiar.
A la Pontificia Universidad Católica del Ecuador Sede Ibarra (PUCESI), a la Escuela de Ciencias Agrícola y Ambientales (ECAA), por la colaboración en el desarrollo la investigación.
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DEDICATORIA
A mi querido esposo Diego quien con su amor y ejemplo han hecho que cada día sea una oportunidad para mejorar y hacer de esta una experiencia de unión familiar y sobre todo de compresión y cariño.
A mi amada hija Naty que con su ternura y paciencia ha permitido que esta nueva meta profesional sea culminada con éxito.
A mis padres Marit y Jacinto que con su experiencia y fortaleza han hecho que en mi siempre exista el espíritu de motivación para ser mejor no solo como hija, sino como esposa, madre y profesional.
A mis hermanas quienes con su compañía y entusiasmo hacen que mi vida sea plena rodeada de cariño y de apoyo incondicional.
A Sra. Anita y Don Fidel por su apoyo a lo largo de estos años de estudio, por permitir que mi pequeñita viva esta experiencia sin contratiempos, muchas gracias.
A mis amigos y colegas de estudio por ser parte de esta travesía que sin duda hacen que esta haya sido gratificante.
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RESPONSABILIDAD
Yo, MARIA FERNANDA VILLOTA BURBANO, Estudiante de Postgrado, declaro haber realizado a cabalidad el tema:”PREVALENCIA DE Malassezia spp. EN OTITIS EXTERNA EN PERROS EN LA CLINICA VETERINARIA DOGS & CATS DE LA CIUDAD DE IBARRA”. Documento que es de mi autoría, cumpliendo los requisitos técnicos y legales exigidos por la Universidad Agraria del Ecuador, para este tipo de estudios.
Atentamente,
………
Dra. María Fernanda Villota Burbano C.I. 100294749-5
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RESUMEN
La otitis externa es una inflamación del conducto auditivo externo, su etiología es multifactorial, puede ser muy compleja cuando se asocia a Malassezia spp. El objetivo de esta investigación fue determinar la prevalencia de esta levadura en perros con otitis externa en la Clínica Veterinaria Dogs & Cats de la ciudad de Ibarra, obteniéndose los siguientes resultados: de los 158 animales analizados, 47 (29,7%) presentaron otitis clínica, de los cuales el 57,45% (27/47) fueron positivos por medio de citología ótica y por el cultivo micológico fue del 59,57% (28/47). Los caninos machos representaron el 55,6% y las hembras el 44,4%. La raza Caniche fue la más representativa con el 33.3%. Los caninos positivos estuvieron entre 1 a 7 años de edad con el 74,1%. Por medio del Test Exacto de Fisher (P<0,05) revela que la presencia de Malassezia spp. es independiente en relación a la edad, morfología auricular y la raza. Y por medio del Chi-cuadrado es independiente al sexo. El diagnóstico por citología y cultivo micológico no hubo diferencia significativa.
Palabras claves: Prevalencia, Malassezia spp., otitis externa, canino.
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SUMMARY
Otitis externa is an inflammation of the ear canal, its etiology is multifactorial, and it can be very complex when it is associated with Malassezia spp. The objective of this research was to determine the prevalence of this yeast in dogs with otitis externa in the Veterinary Dogs & Cats Clinic city of Ibarra, with the following results: of the 158 animals tested, 47 (29.7%) had otitis clinical, of which 57.45%
(27/47) were positive by otic cytology and mycological culture was 59.57% (28/47).
Canines males accounted for 55.6% and females 44.4%. The Poodle breed was the most representative with 33.3%. Positive canines were between 1 to 7 years old with 74.1%. Through the Fisher exact test (P <0.05) reveals that presence of Malassezia spp. It is independent in relation to age, atrial morphology and race.
And through the Chi-square it is independent of sex. The diagnosis by cytology and mycological culture was no significant difference.
Keywords: Prevalence, Malassezia spp, external ear, canine.
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INDICE DE CONTENIDO
AGRADECIMIENTO ... IV
DEDICATORIA ... V
RESPONSABILIDAD ... VI
RESUMEN ... VII
SUMMARY ... VIII
INDICE DE CONTENIDO... IX
I. INTRODUCCION ... 1
1.1 CARACTERIZACION DEL TEMA ... 2
1.2 PLANTEAMIENTO DE LA SITUACIÓN PROBLÉMICA ... 3
1.3 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ... 4
1.4 OBJETIVOS ... 5
1.4.1 General ... 5
1.4.2 Específicos... 5
1.5 TESIS A DEFENDER ... 5
1.6 APORTE TEORICO ... 5
1.7 APLICACIÓN PRÁCTICA ... 6
1.8 ACTUALIDAD CIENTÍFICA ... 7
II. CAPITULO 2 ... 11
2.1 ESTADO DEL ARTE ... 11
2.2 ANATOMÍA Y FISIOLOGÍA DEL OÍDO ... 12
2.2.1 Oído Externo ... 12
2.2.2 Oído Medio ... 13
2.2.3 Oído Interno ... 13
x
2.3 ANATOMÍA DEL OÍDO ... 14
2.4 OTITIS EXTERNA ... 14
2.4.1 Factores y Causas de Otitis Externa ... 15
2.4.1.1 Factores Predisponentes ... 15
2.4.1.2 Factores Primarios ... 16
2.4.1.3 Factores Secundarios ... 16
2.4.1.3.1 Bacterias ... 17
2.4.1.3.2 Levaduras – Malassezia spp. ... 17
2.4.1.4 Factores Perpetuantes ... 18
2.5 PATOGENIA ... 18
2.6 SIGNOS CLÍNICOS ... 19
2.7 DIAGNÓSTICO ... 20
2.7.1 Anamnesis ... 20
2.7.2 Examen Auricular ... 21
2.7.3 Examen del Cerumen ... 21
2.7.3.1 Citología por Hisopado del Conducto Auditivo Externo ... 21
2.7.3.2 Cultivo Micológico ... 23
2.8 TRATAMIENTO ... 24
III. CAPITULO 3 ... 25
3.1 METODOS ... 25
3.1.1 Modalidad y Tipo de Investigación ... 25
3.1.2 Métodos ... 25
3.1.3 Variables ... 25
3.2 POBLACIÓN Y MUESTRA ... 26
3.2.1 Población ... 26
3.2.2 Muestra ... 26
3.3 TÉCNICAS... 26
3.3.1 Examen Clínico ... 26
3.3.2 Toma de Muestra ... 26
3.3.3 Pruebas de laboratorio ... 27
3.3.3.1 Citología ... 27
3.3.3.2 Cultivo Micológico ... 27
IV. RESULTADOS ... 29
V. DISCUSION ... 39
xi
VI CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ... 42
6.1 CONCLUSIONES ... 42
6.2 RECOMENDACIONES ... 43
VII. BIBLIOGRAFÍA ... 44
VIII ANEXOS ... 49
ANEXO 1 ANATOMÍA DEL OIDO ... 49
ANEXO 2 FICHA OTOLÓGICA ... 50
ANEXO 3 GRÁFICO CANINOS ATENDIDOS PERIODO ENERO - JUNIO 2015 51 ANEXO 4 GRÁFICO PREVALENCIA DE Malassezia spp. EN PERROS CON OTITIS EXTERNA EN LA CLINICA VETERINARIA DOGS & CATS ... 51
ANEXO 5 GRÁFICO CANINOS POSITIVOS A Malassezia spp. SEGÚN SINTOMATOLOGIA ... 52
ANEXO 6 GRÁFICO CANINOS POSITIVOS A Malassezia spp. SEGÚN LA RAZA 52 ANEXO 7 GRÁFICO CANINOS POSITIVOS A Malassezia spp. SEGÚN LA EDAD 53 ANEXO 8 GRÁFICO CANINOS POSITIVOS A Malassezia spp. SEGÚN EL SEXO 53 ANEXO 9 GRÁFICO CANINOS POSITIVOS A Malassezia spp. SEGÚN MORFOLOGÍA AURICULAR... 54
ANEXO 10 GRÁFICO CANINOS POSITIVOS A Malassezia spp. SEGÚN CANTIDAD DE PELOS ... 54
ANEXO 11 GRÁFICO CANINOS POSITIVOS A Malassezia spp. SEGÚN TIPO DE SECRECIÓN ... 55
ANEXO 12 GRÁFICO CANINOS POSITIVOS A Malassezia spp. POR CULTIVO MICOLÓGICO ... 55
ANEXO 13 ANEXO DE LA PUCESI ... 56
ANEXO 14 MATERIALES DE LABORATORIO ... 57
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ANEXO 15 FOTOGRAFÁAS DE LA INVESTIGACIÓN ... 58
VIII APENDICES ... 62
APENDICE 1 LUGAR DE INVESTIGACION Y MAPA DE UBICACIÓN ... 62
APENDICE 2 MATERIALES DE LABORATORIO ... 63 APENDICE 3 TABLA DE RESULTADOS GENERALES ... 10-65 APENDICE 4 TABLA CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES ... 10-67
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1. INTRODUCCIÓN
Las especies del género Malassezia son organismos levaduriformes,
lipofílicos y no lipofílicos, que habitan de manera natural sobre la piel de los perros sanos y actualmente es considerado como un patógeno emergente en medicina humana.
La levadura Malassezia spp. es un patógeno oportunista, comensal que, en determinadas circunstancias como cambios en la superficie de los estratos epidérmicos, producción de cerumen, maceración, traumatismos, infecciones bacterianas, enfermedades endócrinas, etc., pueden alterar el estado
inmunológico del hospedador y permitir el crecimiento acelerado de este y producir infección, especialmente sobre la piel y el conducto auditivo externo, siendo uno de los factores perpetuantes de las otitis externas en caninos.
Así Malassezia spp. es una de las causas más comunes en la presentación de las otitis externas, pudiendo redundar en la aparición de infecciones
secundarias después de la antibioterapia, muchos autores la describen como el microorganismo mayoritariamente aislado en casos de otitis externas crónicas, con porcentajes que incluso llegan al 90%.
El diagnóstico de otitis externa por Malassezia spp. puede ser realizado mediante la evaluación citológica del exudado ótico, obteniendo un resultado certero, de fácil acceso, bajo costo y podemos hacerlo de forma rutinaria en la consulta diaria. Esta levadura puede ser identificada tanto en los oídos de perros sanos o con otitis, y dependerá su diagnóstico del número de estas en la citología ótica.
Así los veterinarios dedicados a la clínica de pequeños animales al ver que esta patología frecuente se convierte en una afección crónica y recurrente, y en un dolor de cabeza para sus propietarios, les es necesario tomar los correctivos necesarios para ser diagnosticada de una manera adecuada. La mayoría de las veces se instauran tratamientos empíricos, y se logra controlar la sintomatología durante un periodo relativamente corto, pero luego vuelve a presentarse el cuadro
2 ótico, otras veces se prescribe un tratamiento más preciso en función de los aislamientos bacterianos y sus correspondientes patrones de sensibilidad, pero aun así a menudo la terapia fracasa si no se identifican y se tratan los factores perpetuantes subyacentes, como Malassezia spp.
Por ser una causa frecuente de consulta en dermatología veterinaria y por el incremento de pacientes con esta patología se propuso los siguientes objetivos:
Como objetivo general:
Determinar la prevalencia de Malassezia spp. en otitis externa en perros en la Clínica Veterinaria Dogs & Cats de la Ciudad de Ibarra.
Y como objetivos específicos:
Correlacionar los casos positivos a Malassezia spp. en otitis externa de acuerdo a su sintomatología.
Analizar los perros positivos a Malassezia spp. en otitis externa tomando en consideración la raza, edad y morfología del pabellón auricular.
Comparar los resultados de los exámenes de citología ótica vs. el cultivo micológico de Malassezia spp.
1.1 CARACTERIZACION DEL TEMA
La otitis externa es un desorden común que afecta al conducto auditivo externo de los perros y constituye una de las patologías más frecuentes en la consulta veterinaria, siendo el 40% de los pacientes en dermatología.
A menudo las otitis son a la vez graves y dolorosas que se muestran resistentes a los tratamientos debido al uso indiscriminado de medicamentos prescritos de manera empírica que no solo agravan el problema sino incluso dan resultados desfavorables y pronósticos inciertos, muchas veces alivian de manera temporal los síntomas llevando el proceso a un estado más crónico y de mayor gasto económico, frustrando así al cliente por el inadecuado manejo de la
afección ótica y todo esto se desencadena por no realizar un diagnóstico certero.
3 Estas otitis recidivantes se presentan debido a la presencia de factores
perpetuantes como es por bacterias y sobre todo por Malassezia spp.
Hoy en día muchos propietarios preocupados por la salud ótica de su mascota acuden con más expectativas acerca del diagnóstico, tratamiento y control de esta patología, razón por cual es necesario realizar un diagnóstico adecuado de la otitis externa causada por Malassezia spp. así, con todos los antecedentes citados, y con el aumento de pacientes con esta afección en los últimos años en la Clínica Veterinaria Dogs & Cats de la Ciudad de Ibarra, fue necesario realizar esta investigación con todos los pacientes que la presentaron entre el mes de Enero y Junio del 2015, en la cual se tomó muestras mediante el hisopado del conducto auditivo externo (CAE), y se realizó un estudio citológico y micológico, para evaluar la presencia de la misma, tomando en cuenta la raza, sexo y edad del paciente.
1.2 PLANTEAMIENTO DE LA SITUACIÓN PROBLÉMICA
La otitis externa se presenta por un sin número de factores, así de manera fisiológica encontramos una flora bacteriana y fúngica normal, las cuales pueden incrementar en número y producir infección en el CAE.
La otitis por Malassezia spp. es muy frecuente en el perro, a menudo de manera secundaria a otras enfermedades dermatológicas, suele ser una patología muy compleja debido a que su diagnóstico ha sido subestimado. Los signos
clínicos presentados son: dolor, eritema, sacudidas de la cabeza, la presencia de prurito es de débil a intenso, el cerumen se presenta espeso, marrón, seco, maloliente y en algunos casos de color negruzco e incluso algunos autores manifiestan que puede ser purulento.
Pueden encontrarse numerosas especies de Malassezia: así M.
pachydermatis, es la más frecuente, de forma ocasional se han encontrado M.
furfur, M. obtusa, M. sympodialis y M. globosa, de las cuales no se ha podido comprobar ninguna variación en el poder patógenos de estas, así Malassezia
4 spp., puede multiplicarse en exceso y ser responsable de los signos clínicos antes mencionados en la otitis externa en caninos.
Las otitis externas (OE) causadas por Malassezia spp., son de las
enfermedades que pueden tornarse frustrantes tanto en su diagnóstico como en su terapéutica. Estas levaduras han ido adquiriendo gran importancia en los últimos años, donde los pacientes sufren terribles dolores y los propietarios recorren veterinarios en busca de alguno que logre resolver el problema, por lo cual es necesario instaurar en la clínica diaria un protocolo para su diagnóstico certero.
1.3 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
En la consulta diaria se presentan muchos casos de pacientes con OE no resuelto o que recidivan, muchos de ellos complicados por organismos
levaduriformes como es Malassezia spp., que hacen que la enfermedad se perpetúe y de esta manera los caninos afectados sufran terribles dolores y sobre todo alteren su bienestar.
Esta problemática hace que los veterinarios busquen más información y se auto eduquemos en el tema de la Otología, así como en los procedimientos básicos de diagnóstico como son: anamnesis, el examen externo e interno del conducto auditivo y una citología ótica realizada de manera correcta podemos tener un diagnóstico acertado de la presencia de Malassezia spp. en las OE, estas técnicas las podemos realizar de forma rutinaria en la consulta diaria, las cuales son de fácil acceso, requieren poco tiempo y sobre todo son a bajo costo.
Por lo antes mencionado y a la creciente cantidad de caninos afectados que llegan a nuestra consulta con esta patología se realizó esta investigación.
5 1.4 OBJETIVOS
1.4.1 General
Determinar la prevalencia de Malassezia spp. en otitis externa en perros en la Clínica Veterinaria Dogs & Cats de la Ciudad de Ibarra.
1.4.2 Específicos
Correlacionar los casos positivos a Malassezia spp. en otitis externa de acuerdo a su sintomatología.
Analizar los perros positivos a Malassezia spp. en otitis externa tomando en consideración la raza, edad y morfología del pabellón auricular.
Comparar los resultados de los exámenes de citología ótica vs. el cultivo micológico de Malassezia spp.
1.5 TESIS A DEFENDER
Los perros que asisten a la Clínica Veterinaria Dogs & Cats de la Ciudad de Ibarra y que manifiestan otitis externa presentan una alta prevalencia de
Malassezia spp.
1.6 APORTE TEÓRICO
Un caso dermatológico en especial ótico, puede ser considerado como un enigma en el que la anamnesis, la sintomatología clínica y los procedimientos de laboratorio utilizados son las principales herramientas para llegar a un diagnóstico certero. Así Malassezia spp., debe ser tomada siempre en cuenta en un
diagnóstico diferencial, especialmente como agente patógeno comensal y secundario en todos los cuadros dermatológicos y óticos.
El interés de la Malassezia spp. en dermatología veterinaria de pequeñas especies ha ido creciendo desde que, en 1983, Dufait, la reconoce como agente causal, no sólo secundario sino también primario de diversas patologías que
6 afectan a los caninos y en la práctica de la clínica veterinaria, se la aísla con frecuencia en casos de dermatitis y otitis externa (Boehringer 2009).
Las otitis externas son una causa frecuente de consulta, su elevada incidencia se explica por la coincidencia de factores predisponentes, factores primarios y de los factores perpetuantes que en este caso las levaduras como Malassezia spp, son las responsables de la inflamación de la pared de los conductos auditivos.
Las levaduras del género Malassezia spp. son los aislados con mayor frecuencia, así estas frecuencias de aislamiento sus cantidades y proporciones relativas varían en función de las investigaciones y de los autores, esto puede estar relacionado con la técnica de la toma de muestras, y / o el clima., así Harvey 2001, señala que el aislamiento de la Malassezia spp., varía entre un 14 y 37 % en perros sanos, grandes cantidades de Malassezia spp., se observaron en el 50 al 80 % de perros con otitis externa y se demostró que causan inflamación tal vez por interacción de metabolitos de lípidos de Malassezia spp., y reacción de tipo I a la levadura o sus metabolitos (Ettinger y Feldman 2005).
Bensignor y Germain (2009) citan la investigación realizada por Matousek (2004) que clasifica a las dermatosis de los pabellones auriculares en función de sus lesiones primarias y/o secundarias, y las infecciones por Malassezia spp., se las clasifica con lesiones costro – escamosas. Para su diagnóstico algunos autores consideran que la observación de 5 a 10 levaduras por campo de 40 es representativa en una otitis por Malassezia spp., y justifica un tratamiento de prueba.
1.7 APLICACIÓN PRÁCTICA
Mi tema de tesis aporta con datos científicos y corrobora que, con un
método diagnóstico sencillo, de bajo costo y eficaz como lo es la citología ótica se puede obtener un diagnóstico definitivo en la otitis externa causada por
7 Malassezia spp. con lo cual evitamos problemas óticos recurrentes, y así el
sufrimiento animal, de esta manera el propietario obtiene un diagnóstico
confirmado y un tratamiento específico para este tipo de patología con lo cual el costo es mucho menor en relación al de los tratamientos tradicionales y
empíricos.
Sirve como una guía práctica y un medio de consulta para los futuros colegas que se encuentran interesados en profundizar estudios en el campo de la dermatología especialmente en el campo de la Otología.
1.8 ACTUALIDAD CIENTÍFICA
Las investigaciones de Malassezia spp. en perros con otitis y sin otitis son variados, debido a que el conducto auditivo es muy vulnerable a cambios o alteraciones que desarrollan un microclima que favorece a la proliferación de bacterias y levaduras, así la evaluación definitiva para llegar al diagnóstico certero se debe basar en los ensayos tanto clínicos como de laboratorio, siendo los
análisis citológicos, cultivos y biopsias los más utilizados.
Cafarchia et al., 2005, manifiesta que el método de diagnóstico citológico es altamente específico, rápido de realizar y de fácil disponibilidad, debido a todo esto, este examen citológico para Malassezia spp. tiene gran importancia en la práctica diaria.
Existen muchos estudios a nivel mundial en donde Malassezia spp. por ser altamente patógeno tiene una alta importancia así Stepanov et al., 2013 en un estudio donde se evaluó la otitis externa por esta levadura en un total de 100 caninos, 49 presentaban OE (49%) y de estos el 90, 9% se evidencio la presencia este patógeno oportunista. En otro estudio realizado por Crespo et al., 2002, en la Universidad de Barcelona, por medio de la evaluación citológica en un total de 172 caninos 110 (63,9%) fueron positivos a otitis por Malassezia spp. y por medio de cultivo micológico el 76% de ellos evidenciaron crecimiento de esta levadura, siendo los más afectados los caninos entre 1 a 5 años y machos.
8 Burdshiri et al., 2014 mediante el estudio citológico dio los siguientes
resultados 18/27 (66,7%) presentaron OE por Malassezia spp. en donde el tipo de oreja péndula 42,8% era la más predispuesta y los caninos de entre 1 a 8 años de edad presentan la enfermedad y no existe relación en referencia al sexo.
En América Latina se ha realizado los siguientes estudios, así: Martínez (2009), evidenció que la presencia de M. pachydermatis, fue del 50 % de un total de 16 pacientes, de los cuales el 50 % fueron hembras y el restante fueron
machos, con una predisposición racial del 12,5 % Pastor Alemán, Labrador 6,25
%, Caniche 18,75 %, Lasha Apso 6,25 % y Mestizo del 6,25 %, además los rangos de edad en la que se presentó la afección fueron, de 0 – 1 años el 12, 5
%, de 2 – 4 años 25 %, de 5 a 7 años del 6, 25 %, de 8 – 10 años 0% y del 11 - 13 años del 6, 25 %.
Ochoa (2008), en un estudio realizado con 40 pacientes con otitis externa se evidenció la presencia de M. pachydermatis en un 85 %, y en 40 casos sin otitis externa el 90 % de casos fueron negativos a esta, utilizando la técnica de citología ótica con tinción Gram, lo que nos indica que la levadura permite perpetuar la otitis en el CAE de los caninos.
En otro estudio realizado por Cruz (2009), la presencia de M.
pachydermatis, en 50 pacientes del grupo testigo sin OE representó el 46 % positivo y el 54 % negativo a la misma, y en el otro grupo representando a 50 pacientes con OE, se dieron los siguientes resultados, el 82 % positivo a la presencia de la levadura y el 18 % restante no se identificaron levaduras, dando como conclusión que M. pachydermatis es un factor perpetuante en las Otitis Externa (OE) en caninos.
En México en un estudio realizado por Hernández et al, 2012, de un total de 250 perros 180 (72%) son positivos a Malassezia spp. los parámetros para este estudio fueron: tipo de oreja donde el 77,6% corresponde a orejas caídas, longitud de pelo y el tamaño del animal.
9 En la Universidad de Zulia - Venezuela, Fernández et al., 2006, por medio de la evaluación citológica se evidenció que Malassezia pachydermatis se
encontró presente en un 68,80% de los casos estudiados. Las razas mayormente afectadas fueron Poodle (30,19%), mestizos (26,42%), Cockers spaniel (16,98%) y pastor alemán (9,49%); así mismo se observó mayor incidencia de otitis en caninos entre los 2 y 5 meses de edad (43,40%).
Así, Rejas en el 2008, señala que en perros atópicos, el área cutánea que con mayor frecuencia se aísla Malassezia spp., es la zona interdigital (70,7%), lecho ungueales (35,7%), ingle (30,9%), axila (23,8%) o periné (19%); y
evidentemente en el conducto auditivo externo se aísla con una frecuencia importante (63,4%), por lo tanto no se debe subestimar la patogenicidad de esta levadura sobre el conducto auditivo y debemos seguir con mayores estudios en esta afección por la facilidad de su diagnóstico, poco tiempo y bajo costo.
(Boehringer 2009), en un estudio realizado sobre la prevalencia de M.
pachydermatis en otitis externas en Argentina, de 168 muestras procesadas 85 (50.6%) resultaron con el aislamiento de esta levadura, por lo que podemos decir que la presencia de la misma es alta en el CAE y de alta frecuencia en la
población canina por lo que es necesario realizar investigaciones en nuestro medio para saber a qué nos enfrentamos en el día a día sobre esta patología.
En el Ecuador se han realizado los siguientes estudios, Mendoza (2011), mediante las técnicas de citología, cultivo bacteriológico y micológico en 35
perros, encontró que la presencia de Malassezia spp. fue del 65.71 %, también se determinó que la infección mixta de mayor presencia es la combinación del S.
epidermidis con Malassezia spp., en un 31,43% del total de los casos, además se determinó que los factores predisponentes que inciden en la enfermedad se destaca la raza y el tipo de oreja, siendo la raza más afectada el Labrador
Retriever (17,14%) y el tipo de oreja pendulante (51,43%), semi erecta (25,71%) y erecta (22,86%), además el tipo de secreción fue de oscura a negra con un
65,71% y el tipo de presentación bilateral 91,93% y unilateral del 8,57% restante.
10 Otro estudio realizado en la Universidad Central del Ecuador por
Gómezjurado (2009) donde se aisló Malassezia spp. en un 76% de cien pacientes analizados, mediante el estudio citológico de exudados óticos, y Carrión D. en el año 2011 en un estudio realizado en la ciudad de Loja se encontró que la
prevalencia de Malassezia spp. por medio del método de cinta scoch en orejas fue del 17,19 % en 150 casos estudiados y por medio del método del cotonete fue del 27,27 %.
Pacheco (2012), en un estudio realizado en la ciudad de Quito en la
utilización de una crema a base de Ozono para la Otitis Externa Canina, evidenció que dentro de los casos estudiados el 30% de ellos correspondió a Malassezia spp.
11
2. II. CAPITULO 2
2.1 ESTADO DEL ARTE
El estudio de las levaduras del género Malassezia spp. ha estado relegado por más de un siglo y medio debido a una serie de factores inherentes al hongo, sus estrictos requerimientos nutricionales, su capacidad de presentar
simultáneamente forma micelal y de levadura, y la inestabilidad de este último estado, han condicionado su aislamiento e identificación, dificultando por muchos años su estudio in vitro (Boehringer 2009).
Recién en el año de 1989, a partir de que los veterinarios Scott y Miller, comienzan a realizar estudios en cultivos puros de esta levadura, relacionan su presencia en la piel de perros jóvenes con trastornos pruriginosos (Martínez 2009). La nomenclatura de Malassezia spp. fue de controversia y a veces
confusa, y con el desarrollo de nuevas técnicas y muchas de ellas moleculares se ha podido realizar una nueva revisión en la taxonomía de este género (Boord 2014). Con el paso del tiempo ha despertado mucho interés sobre su importancia clínica, lo que impulsa a nuevas investigaciones para estudiar cuál es la relación de estas levaduras con determinadas enfermedades de piel y conocer su
verdadero rol patogénico.
Existen diferentes géneros de esta levadura, pero M. pachydermatis, es el más patógeno, lipofílico y comensal que se encuentra en el canal auditivo externo y la piel de perros sanos y enfermos (Nealón 2001). Diversas investigaciones manifiestan reacciones de hipersensibilidad canina contra sustancias alergénicas de Malassezia spp. Aparte de todo esto, es conocido la participación de esta levadura en las otitis externas caninas (López 2008).
De forma ocasional se han encontrado M. furfur, M. obtusa, M. sympodialis y M. globosa, de estas no se ha podido comprobar ninguna variación en el poder patógeno, así Malassezia spp., puede multiplicarse en exceso y ser responsable de los signos clínicos de la otitis en caninos (Boehringer 2009).
12 La otitis por Malassezia spp. es muy frecuente en el perro, a menudo de manera secundaria a una dermatitis alérgica (Schaer 2006). La signología clínica de la otitis por Malassezia spp. se presenta con mucho dolor y prurito, existe inflamación y eritema en el conducto auditivo externo, el cerumen puede ser espeso, marrón y negruzco, a veces seco y maloliente (Manzuc, Nolasco y Fogel 2011).
2.2 ANATOMÍA Y FISIOLOGÍA DEL OÍDO
El oído está dividido en tres porciones: oído externo, medio e interno.
2.2.1 Oído Externo
El oído externo está formado por el pabellón auricular y el conducto auditivo externo, la función de este es de localizar, captar el sonido y de transmitirlo hacia el tímpano (Manzuc, Nolasco y Fogel 2011).
El pabellón auricular en forma de cono protege la forma vertical del conducto auditivo (CA), formado por una estructura cartilaginosa, recubierta de piel en sus dos caras, interna y externa, el cual está dividido en varias porciones que son: hélix, la porción libre; en antihélix, una protuberancia situada en la parte medial y opuesto a este se encuentra el Trago, formado por un cartílago denso (Bensignor & Germain, 2009).
El conducto auditivo externo (CAE) tiene forma de “L”, su epitelio es
generalmente liso y en ella se implantan pelos, cuya densidad varía según la raza, este tejido cutáneo también es rico en glándulas ceruminosas (apócrinas) y
sebáceas responsables de la producción de cerumen. Según Stout y otros (1990), sostiene que se encuentra establecida una asociación entre el desarrollo de una otitis externa y la densidad de glándulas ceruminosas.
El cerumen se produce de manera permanente, pero en cantidades variables en función de la densidad de las glándulas del CAE y de su estado de inflamación, su aspecto en situación normal es de color marrón o amarillo, más o menos oscuro de espeso a céreo y su composición varía de acuerdo a la raza, a
13 la edad y de acuerdo al grado de inflamación. Se han identificado
Inmunoglobulinas en el cerumen como IgG, IgA e IgM. La función de este no se conoce muy bien, pero se describe que protege mecánicamente al CA, retiene la suciedad y los cuerpos extraños, además actúa como bacteriostático (Bensignor y Germain 2009).
La membrana timpánica es una estructura epitelial que separa el oído medio del oído externo, tiene una estructura cóncava en forma de “C”, oval dirigida en un ángulo de 45 a 60°, membrana es muy fina, transparente, gris pálida y se observa mediante un examen otoscópico correcto. Se divide en dos partes: pars tensa y pars flácida (Müller y Kirk’s 2002).
2.2.2 Oído Medio
El oído medio está compuesto por la bulla timpánica, y los huesillos del oído (martillo, yunque y estribo, es una cavidad llena de aire, situada en la porción petrosa del hueso temporal, numerosas estructuras anatómicas importantes se sitúan en la proximidad del oído medio como los nervios vagos y faciales y por otra parte las arterias lingual y carótida, razón por la cual tenemos que tener en cuenta cuando realicemos intervenciones terapéuticas invasivas en el mismo (Bensignor y Germain 2009).
2.2.3 Oído Interno
El oído interno localizado en el hueso temporal está formado por los canales semicirculares, el vestíbulo y la cóclea, la función de este es de la interpretación de los sonidos y de la localización del individuo en el espacio (Manzuc, Nolasco y Fogel 2011).
14 2.3 ANATOMÍA DEL OÍDO
El oído canino se encuentra conformado de la siguiente manera como se indica en el anexo N° 1.
2.4 OTITIS EXTERNA
La inflamación del conducto auditivo externo es una afección frecuente en los caninos, algunos autores como Bensignor y Germain (2009), prefieren hablar de “Síndrome inflamatorio auricular”, para evocar las afecciones dermatológicas localizadas en esta zona.
Estudios recientes consideran que del 5 al 12 % corresponden a consultas sobre otitis externa en el perro, la edad de aparición de los síntomas es muy variable, pero están muy predispuestos los de 5 a 8 años, con orejas caídas, con hipertricosis auricular y con tendencia seborreica, la vida en perreras o en
comunidad, la presencia de espigas de gramíneas en el entorno son elementos favorecedores según Müller y Kirk´s (2002).
Los signos clínicos en los perros incluyen dolor, prurito, enrojecimiento o inflamación de la oreja y/o canal externo, además sacudir su cabeza, frotar las orejas contra el piso y los muebles, rascarse con las extremidades posteriores, incluso puede mostrar agresión y/o puede disminuir su apetito y su actividad diaria (Thomas 2005).
La otitis externa (OE) es una condición muy compleja, muchos factores la afectan, estos se han clasificado en tres tipos: los factores primarios que causan la otitis externa en cualquier individuo; factores perpetuantes que tienden a
aumentar su susceptibilidad, pero que no predisponen, por sí mismos a causar la enfermedad, y los factores que sólo contribuyen a la enfermedad cuando ha sido provocado por otros factores predisponentes pero que sí requieren también un control con el fin de tratar esta condición (Griffin 1993).
15 2.4.1 Factores y Causas de Otitis Externa
Los factores y las causas de la otitis externa se clasifican de la siguiente manera:
2.4.1.1 Factores Predisponentes
Los factores predisponentes son aquellos que aumentan el riesgo de otitis, sin que por sí solos puedan desencadenar una alteración del CAE, estos actúan modificando la flora normal del conducto y alterando su acción fisiológica de
“autolimpieza”. La anatomía particular del CAE hace que disminuya la aireación, el drenaje natural de exudados y residuos dando lugar a la inflamación y la aparición de otitis.
Varios autores manifiestan que los caninos jóvenes y adultos, y sin predilección racial afectados con dermatitis atópica canina (DAC), alergia
alimentaria, y con alteraciones de la queratinización presentan OE (Schaer 2006).
Las razas que presentan mayor predisposición a las otitis externas son el Cocker Spaniel (hiperplasia glandular), Labrador Retriever (atresia congénita del conducto auditivo), Caniche y el Terrier (pilosidad del CA), además Shar Pei (pliegues y estenosis en el CA) los cuales son los más afectados según Couto, 2002.
La temperatura ambiental, la humedad y la higrometría juegan un papel importante en la aparición de la otitis, esto explicaría el rápido desarrollo de bacterias y levaduras responsables de esta afección como es en los perros nadadores (Müller y Kirk’s 2002).
Los tratamientos empíricos con antibióticos y limpiezas mal realizadas son otro factor para la irritación e inflamación del CA, en donde al propietario no se le aconseja el uso de hisopos recubiertos de algodón usados mucho en medicina humana (Boord 2014).
16 2.4.1.2 Factores Primarios
Los factores primarios son los responsables de la otitis, actúan modificando el ambiente cutáneo produciendo oclusión del conducto e inflamación auricular, pueden provocar esta afección por sí solos y/o acompañados por los factores predisponentes o secundarios. Entre estos factores encontramos a Otodectes cynotis, Demodex canis, Sarcoptes scabei y larvas de Trombícula, pueden llegar a ser causantes de otitis externa.
En los pacientes atópicos y/o alergia alimentaria entre el 50 al 80 % suelen tener otitis eritematosa comúnmente bilateral. En perros con hipotiroidismo y Síndrome de Cushing, existen alteraciones metabólicas como en la producción excesiva de cerumen lo que favorece a la acumulación de residuos celulares y exudados. Los cuerpos extraños son motivo frecuente de inflamación del CAE así las espiguillas, arena, etc., producen otitis unilaterales muy dolorosas y
supurativas, muchas veces atraviesan la bulla timpánica y suelen ser el origen de la otitis media crónica (Méndez, Lorenzana y Nolasco 2010).
Los tumores suelen ser poco comunes, pero pueden encontrarse tanto benignos (papiloma, adenoma sebáceo, etc) y malignos (fibrosarcoma,
mastocitoma, etc).
2.4.1.3 Factores Secundarios
Son aquellos que pueden contribuir al desarrollo de una otitis. Así en el CAE tanto las bacterias (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., y
enterobacterias) como las levaduras (Malassezia spp.) están presentes
normalmente en el perro, donde estos constituyen la microflora cutánea, y toda afección o inflamación del conducto auditivo externo modifica el clima y la multiplicación tanto bacteriana como de las levaduras es inminente, provocando una afección auricular (Carlotti, Trenti y Germain 2006).
17 2.4.1.3.1 Bacterias
Las bacterias por lo general rara vez son causa primaria en una otitis, por lo que su diagnóstico por lo general suele ser incompleto. Las más
frecuentemente aisladas en episodios de otitis externa en el perro son
Staphylococcus intermedius y Streptococcus spp. (cocos gram +) y Pseudomonas spp. O Proteus spp. (bacilos gram -), estos cuatro microorganismos
gramnegativos no se desarrollan con regularidad en los cultivos de material de oídos normales (Blanco 1996).
2.4.1.3.2 Levaduras – Malassezia spp.
La levadura en estudio es Malassezia spp. que pertenece a la siguiente clasificación taxonómica:
PHYLUM: Basidiomycota FAMILIA: Cryptococaceae CLASE: Ustilagomycetes Orden: Malasseziales Género: Malassezia
Especie: M. furfur, M. sympodialis, M. globosa, M. restricta, M. obtusa, M.
slooffiae, M. dermitis, M. yamatoensis, M. japonica, M. pachydermatis y M. nana.
(Giusiano 2006).
Weidman en 1925 dio el nombre de pachydermatis para una especie de levadura no lipofílica aislada de animales, a la cual Dodge en 1935 propone incluirla dentro del género Malassezia (Gordon 1979, citado por Giusiano 2006).
La levadura de mayor frecuencia en caninos es M. pachydermatis, ya que es un factor perpetuante en la otitis externa (Breitwieser 1997). Se trata de una levadura gemante con forma de maní de botella que puede encontrarse en el conducto auditivo de perros sanos (26,2%) o afectados por otitis externa (53,8%) según un estudio realizado por Urbina et al., 2009. Así esta levadura se aísla con mayor frecuencia en caninos con otitis externa, de igual manera hay factores que intervienen en el transporte de esta levadura como orejas pendulantes e
18 hipertricosis de la raza Basset Hound y Caniche respectivamente (Bensignor y Germain 2009; Couto 2002).
S. epidermidis es otro de los factores que estimulan el crecimiento de M.
pachydermatis presente en otitis externas (Mendoza 2011). Según un estudio realizado por Boehringer 2009, Malassezia spp. es una complicación común de los trastornos de hipersensibilidad y podría causar sobre infección posterior al tratamiento antibiótico aplicado en esta afección.
En la actualidad Malassezia spp. es considerado como un patógeno
emergente en medicina humana (Broglia 2011), y tenga gran importancia en salud pública, así en un estudio realizado por Chang 1998, se aisló esta levadura de 15 lactantes donde tuvieron cultivos positivos, presentaron bajo peso y manifestaron otras en enfermedades graves, luego de investigaciones se estableció que las levaduras fueron introducidas por un trabajador del hospital obtenidas de sus perros.
2.4.1.4 Factores Perpetuantes
Todos estos factores constituyen elementos que hace que sea difícil o imposible la curación de la otitis. Los factores comunes son aquellos que alteran la reducción de la luz del CAE, dando lugar a la multiplicación de patógenos y la disminución de la migración epitelial, así a la formación de exudados y hacen que las glándulas apócrinas aumenten de tamaño y alteren la fracción lipídica del cerumen, perpetuando la afección ótica (Thomas 2005).
2.5 PATOGENIA
La acción de las levaduras sobre las superficies cutáneas de los animales es poco conocida, pero la acción de algunos mecanismos enzimáticos puede hacer que se vuelva patógena (Bensignor y Germain 2009).
19 Uno de los mecanismos patogénicos de esta levadura es su gran acción queratolítica, en donde produce ruptura mecánica o química de la queratina en las células invadidas (Nealón 2001).
La actividad fosfolipasa de esta levadura actúa liberando el ácido araquidónico, el cual es el responsable del proceso inflamatorio de la piel, afectando las funciones celulares y favoreciendo la invasión del tejido a otros microorganismos. Las proteinasas de Malassezia spp. se desempeñan como mediadores químicos causantes del prurito (Giusiano 2006). De la misma manera que otras levaduras, la actividad fosfolipasa y proteinasa de Malassezia spp., puede ser considerada un potencial determinante de virulencia y probablemente juegue un activo rol en la invasión de los tejidos del hospedado (Martínez 2009), en este caso en la otitis externa.
En algunos estudios realizados por Bensignor 2009, mediante el uso de un extracto de M. pachydermatis sobre la piel de cánidos se demostró que esta levadura juega un papel alergénico aproximadamente en un tercio de los perros con “dermatitis seborreica", teniendo reacciones de hipersensibilidad inmediatas, así los niveles de IgG específicos son mayores en los perros con dermatitis por Malassezia spp. que en los perros normales.
2.6 SIGNOS CLÍNICOS
Los signos clínicos de la otitis externa son bastante característicos como:
prurito auricular con frotamientos de la cara, rascado, movimientos de la cabeza, además dolor auricular intenso, mal olor y en muchas ocasiones acompañada de agresividad (Schaer 2006).
En la actualidad los autores Bensignor y Germain 2009, proponen la
clasificación de las otitis según su cuadro clínico en otitis eritematosas (OE), otitis eritematoceruminosas (OEC) y otitis supurativas (OS).
La otitis por Malassezia spp. es muy frecuente en el perro, a menudo de manera secundaria a otras enfermedades dermatológicas, el cerumen puede ser
20 marrón, con fuerte olor, espeso a seco, y en otros incluso purulento, el prurito presente suele ser de débil a intenso (Thomas 2005).
2.7 DIAGNÓSTICO
2.7.1 Anamnesis
La anamnesis permite al clínico orientar el problema al que está expuesto el paciente y de las posibles hipótesis diagnósticas, lo cual constituye una etapa decisiva en el diagnóstico (Schaer 2006). La edad en la que aparece la afección ótica causada Malassezia spp., es en cachorros, jóvenes y adultos, están
predispuestos los perros muy desnutridos y los perros atópicos así esta levadura suele ser secundaria a enfermedades dermatológicas (Nealón 2001).
La raza también debe tenerse en cuenta: los Cockers están en riesgo, y toda otitis dentro de esta raza no se debe banalizar, además en perros con orejas caídas e hipertricosis auricular y con tendencia seborreica como los Caniches están también predispuestos (Bensignor y Germain 2009; Couto 2002). Además, el mismo autor comenta que las razas Basset Hound, Pastor Alemán, Golden Retriever y Labradores se encontraron mayores problemas óticos asociados a factores perpetuantes como levaduras y bacterias.
Otros factores a tomar en cuenta se encuentran el entorno y el estilo de vida, como es el caso de perros nadadores y aquellos que viven y sin ningún cuidado tienes más problemas óticos (Mendoza 2011).
Finalmente hay que tomar en cuenta, la observación de otros síntomas generales presentes o anteriores en cada paciente, por ejemplo, caninos que sufren de problemas alérgicos y/o dermatitis atópicas, hipotiroidismo, Malassezia spp. suele ser secundaria a estas enfermedades (Schaer 2006).
21 2.7.2 Examen Auricular
Se debe realizar la inspección por la que menos le duele, muchas veces es necesario la sedación y localizar con precisión la enfermedad auricular ya sea en el pabellón, en el canal auditivo externo, oído medio y oído interno (Bensignor y Germain 2009).
2.7.3 Examen del Cerumen
En la otitis causada por Malassezia spp. el cerumen es maloliente, marrón a negro, a veces seco y abundante (Bensignor y Germain 2009).
Clínicamente el color de la secreción presente en una otitis tendría cierto valor presuntivo en el diagnóstico etiológico como lo describe Fraser y
colaboradores (1970). En Malassezia spp, ya sea en cultivos puros o asociado a S. epidermidis genera un exudado de color café oscuro a negro (Mendoza 2011).
2.7.3.1 Citología por Hisopado del Conducto Auditivo Externo
Es la prueba de diagnóstico más común que se realizan en muchas consultas otológicas, la toma de muestra es fácil y se puede hacer durante el examen clínico, se requiere un mínimo equipo y los resultados se determinan inmediatamente por lo que se requiere de entrenamiento y un poco de confianza, además del bajo costo que representa en relación a otras pruebas diagnósticas, como las histopatológicas, etc. (Boord 2014).
Esta técnica es inicial para evaluar las posibles causas de otitis,
especialmente para valorar factores perpetuantes como bacterias y levaduras del género Malassezia spp., así los hisopados deben tomarse en el conducto auditivo externo con tanta profundidad como sea posible, en lo necesario con un hisopo estéril, después de tomada la muestra se hace rodar sobre el portaobjetos limpio y se tiñe, puede ser con May-Grunwald-Giemsa, Diff Quik, etc., y se observa al microscopio a gran aumento con aceite de inmersión.(Manzuc, Nolasco y Fogel 2011).
22 Históricamente, cuando la toma de muestras del oído se hace por hisopo se fija la muestra por calor para asegurar una buena calidad de la misma, esto se ha debatido recientemente, determinándose que no es necesario la fijación por calor de las muestras recogidas por hisopos (Raskin y Meyer 2010).
La observación microscópica del exudado ótico aporta con los siguientes datos: células de descamación, muy frecuente en otitis alérgicas, además se ha encontrado casi siempre junto a Malassezia spp., Células inflamatorias
polimorfonucleares (PMN) neutrófilos y macrófagos, además bacterias y
Malassezia spp., la cual se ve como una forma similar a la huella de un zapato o a un cacahuete, midiendo entre 3 y 5 micras de largo por 2-3 micras de ancho (Bensignor y Germain 2009).
Griffin (1993) en un estudio realizado el 18% de los casos con detección citológica de Malassezia spp. tuvieron cultivos estériles en un medio de cultivo específico para este a 37°C. En otro estudio realizado por Huang y Little en 1993, se comparó la sensibilidad del examen citológico con el cultivo para detectar bacterias o levaduras en perros con oídos normales o con otitis, la sensibilidad del examen citológico del cerumen para la detección de cocos gram positivos, bacilos gran negativos y levaduras fue del 84, 100 y100%, respectivamente. Sin embargo, la sensibilidad del cultivo para descubrir estos microorganismos fue del 59, 69 y 50%, respectivamente.
Así se ha sugerido que el hallazgo de Malassezia spp. en el examen citológico de un hisopado ótico en un promedio de 10 o más por campo de inmersión en aceite, indica que esta levadura es un patógeno importante.
Mientras que Bensignor y Germain, 2009 han demostrado que un número de Malassezia superior a 5 o de bacterias superior a 25 por campo a gran aumento estaba asociado de forma significativa a una otitis externa y por lo tanto debe considerarse como anormal y tenerse en cuenta en el tratamiento.
Lloyd 2007, considera que la presencia de una sola agrupación o racimo de Malassezia, o la observación de una levadura por cada 1-3 campos observados con el objetivo de inmersión en la citología de un paciente con cuadro clínico
23 compatible, hacer recomendable un ensayo terapéutico. Y Manzuc, Nolasco y Fogel (2011) sugieren que cuando aparecen más de 10 levaduras por campo de inmersión de 1000 aumentos se considera sobrecrecimiento, y aún sigue siendo un tema de debate, y debe juzgarse según la signología clínica.
Boord (2014) indica que en el conducto auditivo externo puede tener un máximo de 10 microorganismos de Malassezia, lo que indica una gran carga por campo observado, aunque en un estudio realizado por ella en perros, observó que aquellos que tenían 3 o menos en campo de inmersión presentaban ya una
afección muy marcada en el CAE produciendo ya otitis.
Estudios de Cole y colaboradores (1998) demostraron que los hallazgos citológicos del conducto auditivo externo y oído medio tienen una gran
variabilidad. Las levaduras se consideraron significativas en el 65,8% de los conductos auditivos y en el 34,2% de los oídos medios en 38 oídos con otitis media y externa.
2.7.3.2 Cultivo Micológico
El cultivo micológico puede mostrar la presencia de Malassezia spp. tanto en la en la piel, como el conducto auditivo de los caninos, para este fin se pueden utilizar pelos, hisopados del conducto auditivo externo, placas de contacto, o técnicas de remoción con detergentes. Los medios apropiados para el cultivo de Malassezia pachydermatis son el agar glucosado de Sabouraud con cloranfenicol y cicloheximidina (DTM) qué mejora el crecimiento de la levadura y el agar de Dixon modificado en el que crecen todas las especies de Malassezia spp. dado que las levaduras son un componente normal de la flora cutánea del perro, un cultivo positivo tiene muy poco o ningún valor en sí mismo. Sin embargo, al igual que con otros agentes oportunistas, el número de colonias es quizás un indicio lo cual debe ser comparable con número de levaduras demostrado por examen citológico (Nealón 2001).
En general las colonias son pequeñas, variando en la coloración desde un aspecto cremoso al amarillento, algunas veces son lisas o ligeramente rugosas,
24 brillantes o mates, planas o convexas con el margen liso y con una textura
cremosa o quebradiza (Hernández 2005).
2.8 TRATAMIENTO
El manejo exitoso de otitis externa por Malassezia spp., requiere la identificación y el control de la causa primaria (Medleau y Hnilica 2003).
Normalmente en esta afección la terapia tópica funciona adecuadamente y es necesario aplicar un volumen suficiente del fármaco a utilizar para recubrir todo el conducto auditivo, así en los pacientes de raza pequeña se debe colocar de 4 a 5 gotas del producto en cada oído, y en los de raza grande de 10 a 12 gotas
(Manzuc, Nolasco y Fogel 2011).
Se puede iniciar con la limpieza previa del conducto auditivo, muchos autores recomiendan incluso, solo limpieza del CAE por 5 días seguidos y aplicar por vía local derivados azólicos activos como clotrimazol o miconazol, estas
moléculas son muy eficaces frente a Malasseziaspp.se debe aplicar 2 veces al día durante 10 a 14 días o hasta la curación del proceso infeccioso (Bensignor y Germain 2009). En casos difíciles se puede utilizar enilconazol diluido, dentro del conducto auditivo externo o antimicóticos sistémicos como ketoconazol (10 mg/kg cada 24 horas), itraconazol (5 – 10 mg/kg cada 24 horas) y fluconazol (5 mg/kg cada 24 horas), los cuales deben ser administrados por vía oral por un tiempo mínimo de 30 días y hasta que la respuesta del paciente y los resultados del control citológico así lo determinen (Manzuc, Nolasco y Fogel 2011)
Medleauy Hnilica (2003) recomiendan mantener los tratamientos hasta tener una respuesta clínica positiva del paciente y realizando el control de esta por medio de citologías óticas negativas a Malassezia spp.
25
3. III. CAPITULO 3
3.1 MÉTODOS
3.1.1 Modalidad y Tipo de Investigación
La investigación fue de carácter descriptivo-transversal y el diseño no experimental.
3.1.2 Métodos
3.1.2.1 Bibliográfico Documental
Para la presente investigación se realizó una revisión bibliográfica de tesis, libros, artículos publicados en revistas internacionales e información a través del internet que aportaron para el desarrollo de la misma.
3.1.2.2 Método Estadístico Descriptivo-Transversal No experimental
Para la investigación se empleó técnicas estadísticas de tendencia central y la correlación entre las variables dependientes e independientes se hizo por medio análisis de chi- cuadrado de Pearson y Prueba de Fisher exacta. La prevalencia fue expresada de acuerdo a la fórmula establecida y los resultados fueron expuestos porcentualmente y acompañados de gráficos estadísticos cuando las variables resultantes lo permitieron.
3.1.3 Variables
Se analizaron las siguientes variables:
Variable dependiente:
Levaduras del género Malassezia spp. (cultivo y citología positiva).
Variables independientes:
Ordinales:
Cantidad de células Nominales:
Edad
