Estudio preliminar de biología floral en mora de castilla (Rubus glaucus Benth)

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(1)L/" )11 ESTUDIOPRELIIIINARDE BIOLOGIAFLORAL Et{ MORAOECASTTLLA (RubusgraucusBenth} ' GloriaEsoeranza Fonsecaá Santana t MariaV¡ctoriaEcheveÍiMárouez La morade Castilla(Ruóusg/aucusBenth)se ha cons¡derado una frutapromisoriadesdesus ¡nic¡os,cuandoen huertosjunto a las casascampesrnas crecíans¡ngu¡asn¡ podas,sin fertilizac¡ón o muchasvees hecftacon los desperdicios ofgán¡cosde la mismacasa;que se autoconsumía en dulceso iugosy los excedenlesde una buena cosechase vendÍana los vecinos,en las tiendaso plazasde mercadopor puchasenvueltjas en hojasde papel (Rodríguez et al., 1998).Hoydíagraciasa lasprácticas sobresalientes y empeñados de productores ingu¡etos en hacerde la mora un cultivocomercialy a las ¡nvestigaciones realizadasen la décadade los 90, se €ncuentran cultivoscaserosy comercialesque aplicanen diferentegradola tecnologiadisponibleen cuantoa calidaddel suelo,densidades de siembra,propagac¡ón; manejode podas,malezas,enfermedades y plagas,sistemasde tutorado,fertilización,cosecha,poscosechay comerc¡alización(Eraso,1982;Monroyet a1.,1985;Botero €t a1.,1996). junto con el crecienteinterésde la agroindustria, El efectodirectode esta tecnif¡cación de consumidor€s, de asoc¡ac¡ones de agricultoresy de programasde gobierno,se observóen un ¡ncremento del área cultivadaque pasóde 2-585hectáreasen 1992,a 5.662hectáreasen '1998,y en la producciónnacionalque a su vez pasóde 17 700Uañoen 1992,a 40.000Uañoen 1996(CCt,1999). A pesarde estoslogros, los rend¡m¡entos só¡omlrestranun incremento de 1.8%en los últ¡mosd¡ezaños:además, las exportac¡ones han pasadode 210 toneladasen 1992,a 6.4 en 1998,consecuencia del uso de material vegetat¡voque carecede las mejorescaracteristtcas puesla morade Castillapresentaentre6.8 y agronómicas, 7.8gradosBrix,factorquela hacepocaapetecida (CC|,1999). en losmercados internac¡onales Esteescenario, es debido a la cate¡cia de bancosde germoplama,a la talla de caracter¡zación de los materialesy a ta poc€ d¡sponibilidad de los mismos. Así mismo,a la laltade programas que liberenmateriales que de mejoramiento suplanlas neces¡dades del agr¡cultory de los dosgrandesconsumidores, los de frutafrescay las agroindustrias. En los programasde mejoramiento en fruiales, E nibr¡dación es uno de los métodosutilizadospara obtener progen¡esde característi@ssobresalientespor medio de polinizaciones controladas.Para ello es necesario conocerla biologiafloral, que permiteident¡ficarla morfologia,factoresfisiológ¡cos o genéticosque f,avorecen o impidenla polinización,la fertiltzacióny el métodode cruzamrento práciico y más efectivopara obtenersemllla viable.Aunqueen la mayoríade los frutalesse @nocela biologiaflorales necesarioreal¡zarun estudiode éstaen los lugaresen dondese realizanlas hibr¡dac¡ones, debidoa que las cond¡ciones amb¡entjales Duedenocasionar cambiosen ¡aflorac¡ón El presentetrabajot¡enecomoobjetivocontribu¡ral estudiode la biologíafloraldel cultivode la morade Castilla, comoun pasoparaestablecerel programade mejoramiento vegetal,encaminado hac¡al¿ búsquedade materiales concalidadde frutaparael consumoen frescoy/o parala agroindustr¡a. MATERIALESY METODOS La investigación se llevó a cabo en un lote semicomercial de.22 mesesde edad, establecidoen el Centrode Invest¡gación "La selva", de coRPolcA, en Rionegro,Ant¡oquia;a una alturade 2.120 m.s.n.m.,temperatura promed¡o de 17oC,Precipitación anualaprox¡mada de 1.800mm y la zonade v¡daes bosquehúmedomontano bajo(bh-MB). I Bióloga,l\4sc.Fitomejoramiento. Grupoinvestigación Agr¡cola,Corpo¡caC.t.La Selva,R¡onegro, Antioqu¡a, ApártadoA. 100-E-mail: [email protected]! Fax(094)5371369. '?Tecnólogaen Producción Agrícola,Tecnotógico de Antioqura. 46.

(2) DETERMINACIÓN DELNÚMERODEPISTILOS Y ESTAMBRES EN LA FLORDE MORADE CASTILLA Paradeterminar presentes el númerode pistilosy estambres en ¡a flor de morade Castillase escogieron cinco plantassanasde mora de Castillaque pr€sentababotonesfloralessin abr¡r;cada plantafue una repetic¡ón. En cada repet¡ciónse ma¡'caron10 flores de 0.7 mm de diámetro.Se recolectaronlas 50 inflorescencias al día y se realizóel conteode estambresy pistilosde cadaflorconayudadel estéreo-microscopio. sigu¡ente DETERMINACIÓN DEL GRADO DE APERTURAFLORALOUE PRESENTAMAYOR PORCENTAJE DE VIABILIDAD DELGRANODEPOLEN Con el f¡n de determ¡narla edad de la flor, en la cual presentael mayornúmerode granosde polenviablesse clasif¡cóla flor en variosestados.El estadoinicialo uno se identificócomobotónfloralde 7 mm de diámetro,con los órganosreproductores (estambres y pistilos)biendesarrollados.Los estadosintermedios se establecieron al aumentarun dia en la aperturafloral,tomandoporreferencia el estadouno,hastallegaral dia séptimo. Para determinarla viabilidaddel granode polense utilizarondost¡nciones. T¡ncióncon acetocarm¡n.Se escogieron dosplantassanasde morade Castillaque presentaban botonesflorales cerados de 7 mm de diámetro.Se marcaron28 florespor planta,parahacerla evaluac¡ón desdeel día cero de aperturafloralhastael día séptimo.Paracadaunode los días,sólose tomarontresflorespor planta,paraun total de seispor día;dejandolas demásfloresen la plantahastael día de la evaluac¡ón. Se extrajeronlas anterassobre un portaobjéto, en dondese cubrieroncon una gotade Tween-2o(1 ml/l)y se rompieronlbs sacospolínicoscon una pinzaparaextraer los granosde polen. La colorac¡ón de los granosde polenen 0.1 ml de acetocarmfn fue por tres minutos.Parala lecturase realizarondos montajesen la cámarade Neubauer.porflor, paraun totalde doceparacadaestadode aperturafloral. Los conteosde los granosde polencoloreadosse realizaronen cinco cuadrantes conel objetivo10X. Tincióncon trifeniltetrazolio. La tinciónse realizóconla mismametodología utilizada conacetocarmin desdela selecc¡Ón de las plantashastacolocarlos granosde polenen 0.1 ml de trifeniltetrazolio, durante '16horasa temperatura y en oscuridad. ambiente Parala lecturase realizarondos montaiesen la cámarade Neubauerpor flor, paraun totalde doceparacada estadode aperturafloral.Losconteosde los granosde polencoloreados se realizaronen cincocuadrantesconel obietivode 10X. Determinacióndel mótodo de polin¡zaciónque presentael mayor porcentajede cuajami€ntode fruto. Paradelerminarcuál de los métodosentreautopolinización y polinizac¡ón cruzadafavorecíaél mayo.númerode frutosformados,se seleccionaron 30 plantras sanasde morade Castillaque presentaban botonesflorales.Diez botonesfloralescerradosde 7 mm de diámetropor planta,fueroncub¡ertoscon glacines,parael tratamientode autopolinización (foto1 ), Así mismo,se seleccionaron otras30 plantasy se marcarondiezbotonescerradospor planta.A estafloresse les ret¡raronlos estambres,parael tratamiento de polinización cruzada. Se dejaronen el campolas 300floresdel tratamientode autopolinización comode polinizac¡ón cruzadadurante20 dÍas,al cabode los cualeslasfloresfueroncolectadas y se realizóel conteode drupasformadasportratamiento. De otraparte'se evaluó el promediode drupasformadasen autopolinización con sólo las anterasinternasy con sÓlolas externas. Para esto se escogieron10 botonescerradospor cada una de las 30 plantas sanas seleccionadas.Las 300 floresfueroncub¡ertaspor un glacín.Al día siguientese retiraronlos estambresinternos a 150 floresy los externosa las otras 150 flores. Las floresfueronóubiertaspor los glacinesnuevamentepor espaciode 20 días,al terminode los cualesfueroncosechados parael conteode las drupasformadas. I. 47.

(3) RESULTADOS Y DISCUSION DETERMINACIÓN DEL NÚMERODE PISTILOSY ESTAMBRES EN ¡-A FLORDE MORADE CAST]LLA Al promediarlas c¡ncorepeticiones se obtuvo173.6pistilosy 65.8 estambres.Según(Mc Gregor,1976)la flor poseede 50 a 100 estambresalrededor de un númerosemejantede pistilos.Esto muestrael potencialque presentala morade Cast¡llaparaformarlas drupas,en el frutocompuesto. Además,se observóque las florescon un día de aperturafloral y formade campana,presentarondos tamañosen la alturade los estambres,los más cortos estabanadyacentesa los estigmasy los más largos en la parte extema de la flor; estas mismas observaciones fueronreportadaspor Free,en 1968. DETERMINACIÓN DEL ESTADODE APERTURAFLORALQUE PRESENTAMAYOR PORCENTAJEDE VIABILIDADDE LOS GRANOSDE POLEN Tinción con acetocarmin. Con el análisisde varianzase obtuvieron diferenciassignificalivasentre los días de apertura floral que presentanun mayor númeropromediode granosde polenviablespor mililitro. Los granosv¡ablespresentaronuna coloraciónroja,que tambiénha sido descritaen tomatede árbol (Castroy Tríllos,1998) y en especiesdel géneroPassillora (Palacio Mediante et a1.,1997). la pruebade Duncanal 0.05%,los promediosmás altos de viabilidadde grano de polen se. Fotol. Bdonesfloral€sde moracubiertos con glacines enellratamiento de autopo{¡nización. respect¡vamente, mientras que los dias de apeftura florclde 4, 5 y 6 días no muestrand;ferenciasentresí y presentan lospromedios másbajos(Tabla1). de viab¡lidad Tinción con trifeniltetrazolio, Los granosde polen viables mostraronuna coloraciónroja, TABLA . Comparación de mediaspor Duncana 0.05olo, en la m¡entrasque los no viables no presentarontinción de granos de polen de mora de Castilla con coloración.Se observóque los granosde polen acetocarmin viables presentabanuna forma más definida, m¡entrasque los no viableseranarrugadosy de Orden Ordende las modias diversasformas,esta iftegularidaden la forma granos granoade d6 Apertura tamb¡én ha sido descrita en estud¡os polen (r10r/mt) polcn floral (xl0r/ ml) Floral morfológicos (Mccregor,l976). Mediante el promedio (días) Dromedio análisisde varianza se obtuvierondiferencias ldiasl n B 6.75 2 1 7. 2 5A altamentesignif¡cativas entrelos dfasde apertura 1 6.00 Bc 16.00A floralque presentaban rnayornúmerodé granos 17.25 A 0 6.75 B de polenv¡ables.El dfa dos de aperturafloral presentóel mayor promediode 43.34x 103/ml;16.00A 1 6.00 Bc que los díasde apertura0,3 y 4 dias 4 m¡entras t.55 CD 4 3.55 CD no mostrarondiferenciasentreellos. Asi mismo, 2.46 D 2.46 D los días 5 y 6 de aperturafloralpresentaron los 2.05D 2.05D promediomásbajos(tabla2)-. 48.

(4) Al compararlos dos tiposd€ tinciones,el dfa dosde aperturaflorales el día másaptoparatomarel pol€nviable. La identificación de estedla fac¡li{€rá los trabaiosde polin¡zación cruzadaen el programade mejoramiento vegetal, que util¡ceel métodode hibridación. Asf mismo,los dlas 5 y 6 de aperturafloralson los de menorviabilid€dlo que determinael t'rempoque deben estarlas florescubiertaspor los glachesen tratamientos cruzada de poünización controlada. TABI-A 2. Cornparaciónd6 medias por Duncanal 0.05%,en la tinción de granos de polen de mora de Castilla con hifenilietrazolio. Ordenorlglnal glanoa dé Apertura floral(dlas) polon(xlovml) promedio. 0 1. 2 a. 4 o. 19.25B 7.09 C 43.34 A 10.67 BC 16.25B 1.88D 1.80D. Ordende las medias granoade polen(x10¡,ml) promcdio. Ap.rtura Floral (dhs) 2 0 4. 3 1. 5 b. 43.34A. 19.25B 16.25B 10.67BC 7.09 C 1.88D 1.80D. Détermlnaclóndel mótodo de polinlraclón que presenta el mayor porcéntale de cuajamlentode fruto. D€ acuerdoa los resultados de análisis de varianza se encontró que hay diferenc¡asaltamente signif¡cativasentre los tratam¡entosde y polinizaclón autopolinización cruzda. Est€ último favorecióel mayornúmerode drupas formadas con un promedio de 112.52, mientrasla autopdinizaciónes de 24.6. Asi mismose observóque la calidaden cuantoa la homogon€idad del tamañode las drupas formadaspor polinización cruzadafue mqor (Foto2).. En cuanto a la formacián dé drupas con autolinización con las anterasinternasy extemas, hubo diferenciassignifrcaüvas entre t¡atamientos. La formaciónde drupasse vío iavorecidapor la autopolinización con las anteras internascon un promediode 29.94,mientrasque la autopolinización con fas anterasexternasfue de 23.72. (Foto 3 ). Esto se puededeberal hechode que primerose liberael polende los ostambresmás e)demosque normalmentecaen afu€rade la flor, m¡éntrasque los estambresmás internos son oor su ubicación los únicos que logran fertilizaralgunosestigmas directamenteadyac€ntes,sino hay un agente transportador de polen(Botero,1994; Condor,1973; Free,1968).. ) i. Foto¿ A. Frutofomadoporal@linizaclh; B. Frutofttmadoporodin¡?:ción cruzEda. Estos resultrados sugierenque aunque la mora de Castillaes unaespeciede polinizac¡ón cruzáda,puede presentarparcialmenteautoincompat¡bilidad, con20% de autopolinización. De otra oart6,teniendoen cuentael númerooromedio de pistilospresentesen la flor de mora,sólo 64%d6 los pistilosde la flor formandrupaspor mediode la polinización cruzada,y 14%con la autopolinización. Foto 3. A. Drupasformadaspor autopolin¡zación con las antoras intsmas: B. Drupas fomadasporautopolinizaclón con lasanteras exbmas,enel frutodemora 49.

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