Informe anual 1987 :programa nacional de microbiología

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(1)s. ••. '1. JJJ DIISTITU'OO C()'][.,Qlq!8IA/N!O AGROPECUARIO S1JJBGERENCIA DE INVESTIGACION y TP.MifSFERENCIA DIVISIOS DE DISCIPLINAS PECUARIAS. ,,. \. PROGRAlM NACIONAL DE lm.l:CROBIOLOOIA. 1 •. 981. GUSTAVO RAVE VADENCIA DIRECTOR. BOGarA,DICIEf\1BRE 1. 987. 9440. 1987.

(2) --------------------------------................ MEMO RANDO 4 08 02.86. FECHA. ·. PARA. Bogotá I. 2 9 Die. ' ,.,. 1.t!'ii.7 '.J'U. Doctor ENRIQUE ALARCON MILLAN Subgerente de InvestigaciOn y Transferencia Oficinas Nacionales. DE. ··. GUSTAVO RAVE VALENCIA Director Programa de Microbiología. ASUNTO. ·.. Informe Anual Microbiología. -.. Anexo me complace remitirle el informe general del Programa de Microbi.ología correspondiente al año 1987. Cordialmente, ......-. Anexo.

(3) DilSTITOm COlLOI4lBIAlNlO AGROPECUARIO SlDBGERENCIA DE INVESTIGACIOH y "l'PANSFERENCIA DIVISION DE DISCIPLINAS. PECUARIAS. 1 .. 981. GUSTAVO RAVE VADENCIA DIRECTOR. BOGarA, DICIEl\1BRE 1. 987.

(4) ....---------------. ~. PROGRAlMIA MACIONAL DE mCROBIOL()G;IA. "UN APORTE A LA SOLUCION DE LOS PROBLEMAS DE SALUD DE l.AS ESPECIES DOMESTICAS COMO BASE DE LA INVESTIGACIONP~~ EL DESARRO LLO ". Gustavo Rave Valencia. íi. r.

(5) PROGRAIMIA mmcIORAL DE KICROBIOLOOIA INFORME GllRERAL 1987 PERSDIIlIIAL DEL PROGRAIlA. SEDE BOGOTA. ". LABORATORIO DE INVESTIGACIONES MEDICAS VE"l'ERIRARIAS ". Gustavo Rave Valencia. MVZ.MS.. Director del Programa. Manuel Isaac Gallego Marin. MVZ.MS.. Coordinador Areas Virología. y Enfermedades de la Reproducci6n. Germán Rodríguez Martínez. MVZ.MS •. Ph.D.. Q::x)rdinador Area Bacteriología Comisi6n de estudios en el exterior hasta Noviembre/8?. Juan Frlgar Villate Granados. MVZ. Coordinador Areas Enfenuedades Porcinas y Cultivos Celulares. OIga Mariño de Peña Andrés. ~:. Mic.Ph.D.. Q::x)rdinador Area Inmmología Mi?dico Veterinario encargado. Triana. Area Bacteriología hasta agosto 1987 (Eh camisi6n de estudios en el exterior a partir de seE.. tiembre/87) MMico Veterinario rab.Virolo-. ]))ra lllc1.a A. de Agudelo. gía Médico Veterinario rab. Culti-. Maria Cristina Ranúrez. vos Celulares. Bacteriblogo rab.. Ligia Sedano de Deleón. de la. Enfenredades. ~producci6n. Bacteri610g0 rab. Enfexna:lades aviares iii •.

(6) Miryam 'lbrres Ruiz. Bacteri6logo lab. Ehfenredades Porcinas. Esperanza R. de Clavi jo. Microbiólogo lab. Inmunología. Esperanza. Cbr~. c.. Bacteriólogo lab. Virología. Alba Lucia de Galvis. Bacteriólogo Iab. Bacteriología. Ines de Herrera. Bacteri6logo lab. Bacteriolog1a. Alba de Aragan. Secretaria Dirección Programa. Magdalena de Villate. Secretaria. Imctor Julio PinzOn B.. Ayudante de. victor Raúl Navarro P.. Ayudante de Té:nico en Biblioteca. Cecilia M. de Glznán. Ayudante de 'recnico en Serolog1a. Maria R. de Quintero. Ayudante de Té:nico en Inmunología. Alvaro Cárdenas. Ayudante de 'l'écnioo en Virología. Melesio Rodríguez. Ayudante de T€cnico en Ehfenneda.des de. ~ico. en Medios de cultivo. la Reproducción Bertha Medina C.. Ayudante de Té:nico en CUltivos Celulares. Osear Alberto Vanegas Eliseo Garcia. Ayudante de T"ecnico en Cultivos Celulares. Ieop:üdo Garzm. AyuJante de recnico en Esterilización. Gregorio mvila. Ayudante de. Ayudante de Técnico en Ehfennaiades Porcinas ~ico. en Ehfe:rmedades Aviares. SEDE KMrERIA. Mario Navarrete Suárez. MVZ.Ph.D.. CoordinadOr Seccional Microbiología. Jaime Orjuela Messa. ~oo Veterinario MS.Epidemiología. sara. aacteriólogo Bacterio1og1a y Serología. E.. Otero O.. 'fulia Argel S.. Secretaria. Juan Oviedo. ~te. iv. de Técnico.

(7) CON'J."mIOO. iii. Personal del Programa 1.. Introducci6n. 1. 2.. Investigación Enfermedades Infecciosas Especie Bovina. 2. 2.1. Proyecto B.1. Mejoramiento Integral de la Reproducción en Ganaderías de Leche en Colombia. 2. 2.1.1. Experimento B.1.l. Determinaci6n de la importancia de agentes infecciosos en abortos. y desOrdenes reproductivos en ganado de leche l.. 3. l. 2. ExpE!rimento B.l.3. Determinaci6n indirecta de contaminación en semen bovino por agentes in5. fecciosos 2.2. Proyecto B.2. Estudio Epidemio16gico y Econ6mico de la Mastitis en la Sabana de Bogotá. 6. 2.3. Proyecto B.3. Metodologías para Evaluaci6n de para. metros de Respuesta. Inmune Celular en Bovinos.. 7. 2.3.1. Experimento B.3 2. Estudios preliminares sobre Q. comportamiento de macr6fagos y linfocitos bovinos en infecci6n natural por Brucella. 8. 2.3.2. Experimento B.3.3. Estandarizaci6n de la prue ba de ELISA. para las proteínas de membrana externa de B. abortus 2.4. Proyecto B.4. Evaluación de Perfiles. 14 Electrofor~. ticos .Y Clases deInmunoglobulinas en hatos lecheros. 15. 2.5. Proyecto. Evaluaci6n de Medidas de Control para Leucosis Bovina en los Centros Experimentales 16 del ICA 2.6. Proyecto B.5. Intensificación del Control de Enferme dades Animales en Colombia. 17. 2.6.1. Experimento B.5.2. Estudios de rentabilidad en fincas ganaderas utilizando un sistema de registro simplificado. 17.

(8) 2.6.2. Experimento I1.5.3. Análisis. clínico-r~. productivo en fincas con diferente. uso. tecnol6gico 2.6.3. Experimento. 18 B.~.5.. Prevalencia e inciden. cia de brucelosis en bovinos del departa mento de C6rdoba. 20. 2.6.4. Experimento B.5.6. Prevalencia e incidencia de leptospirosis en bovinos del departamento ¡Jo. c6.. t1uu~. :.!l. 2.6.5. Experimento B.5.7. Evaluaci6n de mastitis en el departamento de Córdoba. 24. 2.6.6. Experimento B.S.S. Suplementación de vacas en producción con bloques multinutritivos durante la. 30. ~poca. de sequía. 26. Investigación Enfermedades Infecciosas Especie Porcina. 28. 3.1 •. Proyecto P .1. Vigilancia Epidemiológica del Cólera Porcino y de la Peste Porcina Africana. 28. 3 •. 1.1. Experimento P •. I.I. Estudios seroepidemioló gico de la peste porcina africana en cerdos de matadero. 28. 3.1.2. Experimento P.l.2. Caracterización según pa togenia de cepas de c6lera porcino actuantes en el pa1s. 29. 3.2. Proyecto P.4. Factores Infecciosos de Infertilidad y su Repercusi6n Económica en Colombia. 30. 3.2.1. Experimento P.4.1. Evaluación de la leptospi rOS1S en porcinos destinados a la reproduc-. 4.. ci6n en Cundinamarca Investigaci6n Enfermedades Infecciosas en la Especie. 30. Caprina 4.1. Proyecto C.l. Enfermedades Infecciosas en Caprinos. 31 31. 4.1.1. Experimento C.l.l. Prevalerlcia serol6gica de artritis y encefalitis en cabras dinamarca y Santander. vi. de Cun 31.

(9) 5.. Investigaci6n Enfermedades Infecciosas en la Especie Equina. 31. 5.1. Proyecto E.1. Enfermedades Infecciosas en Equinos. 31. 5.1.1. Exper1mento E.1.1. Prevalencia de brucelosis y leptospirosis en equinos del Casanare 6.. Transferencia de Tecnología. 32. 6.1. Aporte de Tecnología. 32. 6.2. Capacitaci6n Recibida. 33. T~cnico. 7.. Acciones de Apoyo. B.. Actividades de Diagn6stico 8.1. Sede. 9.. 31. LI~W. 35 36 37. - Bogotá. B.2. Sede LIVET - Montería. 38. Publicaciones. 41. vii.

(10) El Programa de Microbiolog1a como estamento t€cnico del Instituto continúa compartiendo, con amplios aportes, la responsabilidad de buscar soluciones a la problem~tica en sa lud animal, determinada por una gama de factores que inciden negativamente limitando la producci6n y productividad de las especles anirnctles.. Para cumplir este objetivo el Programa identifica Y reu . ne un conjunto de disciplinas y acciones, orientadas a enfren tar a nivel de investigaci6n, transferencia Y diagn6stico e~ pecializado, la problemAtica resultante del influjo de un variado conjunto de agentes virales, bacteriales, mic6ticos etc., que determinan las Enfermedad~Infecciosas que ocasio nan cuantiosas pérdidas a la economía pecuaria nacional. Las labores se realizan dent.ro de las políticas de prioridades gubernamentales e institucionales tratando de cubrir con los limitados recursos los problemas de orden infeccioso mas protuberantes en la explot.aci6n de las especies de mayor interés para el pa1so En este informe se condensan los datos fundamentales frE to de las actividades de las unidades técnicas del Programa de Microbiolog1a realizadas a través de sus sedes de Bogotá (Laboratorio de Investigaciones Médicas Veterinarias) Y de Montería (Laboratorio de Investigaciones Veterinarias en En ferme<lades Tropicales)..

(11) 2. 2.. INVESTIGACION ENFERMEDADES INFECCIOSAS ESPECIE BOVINA. 2.1.. PROYECTOB.l.. INTEGRAL DE LA REPRODUCCION EN GAN'ADERIAS DE LECHE EN CQ¡'OMl3I1\ Responsable:: Manu.el Isaac Gallego Localización: Zonas de Ubat€, Armenia, Mede11in, Sabana de Bogotá Area de Influencia: Zonas de explotaciones de bovinos de leche Objetivos:: Utilizar fincas piloto para aplicar un plan inte gral de salud, manej'o y nutrición tendiente a au mentar la productividad de los hatos mediante el incremento en la reproducci6n de los bovinos. ~EJORAMIENTO. Estado Actual:: a.) Trabajos concluidos: - Un estudio aplicando un plan integral de salud manejo y nutrición en 15 fincas piloto situadas en las áreas de Vi1lavicencio, Medel1in, Armenia y Ubaté. Los resu1. tadoe fueron incluidos en el Informe 1986. - Efecto de la vacuna antiaftosa sobre par~metros repro ductivos e influencia de infecciones asociadas. Resul tados incluidos en Informe 1986. - Estudios experimentales sobre producci6n de abortos por Alnus acuminata en animales de laboratorio. Resultados incluidos en informe 1986. _ Prevalencia de Brucel1a, Leptospira y Salmonella en ganado de leche en el departamento de Caldas. Los re su1tados estan en trámite de publicaci6n. Prevalencia de Brucel1a, Leptospira y Sa1mone1la en el departamento de Santander. Resultados en trámite de pub1icaci6n..

(12) 3. b). Trabajos en ejecuci6n Experimento B.l.l .. Determinación de la. importancia de agentes infecciosos en abortos y des6roenes reproducti ~os en ganado de leche. Experimento B.l.3. DeterminaciOn indirecta de contaminaci6n en semen bovino por agentes infecciosos.. 2.1.1. EXPERIMENTO B.l.1. Determinaci6n de la importancia de agentes infecciosos en abortos y des6rdenes reproductivos en ganado de leche. Responsable: Manuel l. Gallego Dora Lucía de Agudelo Germ&n Rodríguez M. Ligia S. de Deleón Esperan2:a Cortés C. Alba Lucia de Galvis Duraci6n: Permanente a partir de 19~3 LocalizaciOn: Sabana de Bogotá Area de Influencia: Aplicable a zonas de explotación bovinos de leche. de. Objetivos: a.) Determinar la asociaci6n que existe entre partos, días abiertos y la presencia de anticuerpos a diarrea viral bovina, rinotraqueitis infecciosa, parainfluenza tres, brucelosis y leptospirosis .. b.) Estudiar la flora bacteriana y mic6tica del tracto reproductivo en vacas problema. Estado Actual: En este experimento se realizan los trabajos siguientes: a.) Se hizo el aislamiento de dos cepas del virus PlJ en dos finr.nn Clnmprnh:lnrlosp 1", cnrr0]i1C1it'm ('mtrp el aiRlilmi0!1. to, la serología y la alteración en parámetros reproduc tivos..

(13) 4. b.) Estudios de diagnóstico de DVB mediante pruebas de. c.). d.) c.). f.). g.). interferencia en n6mero de 70. Al mismo tiempo se han hecho 30 pruebas de inmunofluorescencia. Se modificó la técnica de seroneutralización para IBR según Edwards y col •. , con el objeto de aumentar la sensibilidad de la prueba. Con esta modificación se observa un incremento en el núm.ero y título de sueros positivos. Se esta estandarizando la técnica de seroneutraliza ción para IBR y DVB en CO 2 • Se estandarizó la técnica de las placas de seroneutralizaci6n con Cristal Violeta con el fin de agill zar la lectura de las mismas. Se realizó el aislamiento de una cepa citop§.tica de virus de DVB de un caso cl1nico de la enfermedad de las mucosas. Se produjeron tres lotes de Antigeno de DVB cepa ci topá tica para ser pUL' ir icados y uSc1dos en Cl.<JIHa toy!'E. fía de adsorción con el fin de obtener IgG especifi. ca de conejo .. h.) Se realizaron t,res cromatografías de intercambio i6 nico para la obtención de IgG de conejo hiper inmune a DVE. i.) Se realizaron los primeros ensayos con la técnica de. ELISA para titulación de anti IgG bovina .. j.) Se han procesado para IBR, DVB y PI 3 241 muestras de sueros sanguíneos y 118 muestras en pases de cul ti. vos celulares. k.) Se comenzó un trabajo para buscar el aislamiento de Haemophillus somnus a partir de lavados prepuciales, secreciones vaginales y productos de abortos. Con tal motivo se han procesado aproximadamente 80 muestras sin resultados..

(14) 5. Del Laboratorio Control de Weybridge se recibi6 la cepa de referencia de ~. ~.9.~~':1s para este trabajo. Se proyecta realizar un muestreo sero16gico de la enfermedad. 2.1.,2. EXPERIMENTO B.l.3. Determinaci6n indirecta de contamina ci6n en semen bovino por agentes infecciosos. Responsable Manuel l. Gallego Ignacio Ramos Dora Lucía de Agudelo Esperanza Cortés Alba Lucía de Galvis Duraci6n: 1985 - 1988 Localizaci6n: LIMV Area de influencia: Nacional Objetivos: a.) Estandarizar técnica de laboratorio para detectar virus en semen bovino. b.) Comprobar la presencia de virus en semen de reproductores valiosos y serol6gicamente positivos. c.) Estudiar la contaminación bacterial y mic6tica del semen bovino. Estado Actual: Mediante las técnicas de cromatografía y determinación de proteínas se realiz6 la purificaci6n. y cuantificaci6n de IgG hiperinrnune a DVB a partir de bovinos y conejos como metodología básica para ser aplicada en el desarrollo del experimento. Se continuó con la inmunizaci6n de conejos para obte,!!. ción de sueros hiperinmunes a IBR. Se controlaron estos conejos para prueba de seroneutralizaci6n y estan próximos a sangría total..

(15) 6. 2.2.. PROYECTO B.2. ESTUDIO EPIDEMIOLOGICO Y ECONOHICO DE LA MASTITIS BOVINA EN LA SABANA DE BOGOTA. Responsable:Germán Rodr1guez M. Localización: Sabana de Bogotá Area de Influencia: Zonas lecheras del pa1s Objetivos: Realizar estudios de prevalencia e incidencia de los microorganismos que estan ocasionando casos de mastitis en la Sabana de Bogotá. Estudiar la epidemiolog1a de la entidad en la zona. Efectuar estudios económicos, considerando costos y tratamientos de !a enfermedad. Estado Actual: En este proyecto se ha avanzado de acuer do con la información descrita en el Informe de 1986 para los cuatro experimentos titulados: a.) "Agentes etiológicos causantes de mastitis bovina en ganader1as lecheras de la Sabana de Bogotá", median te el cual se determinaron los agentes de mayor importancia. b.) "Evaluaci6n de las medida.s de control para la preve!!. ci6n de la mastitis bovina en diferentes explotaciones de la Sabana de Bogotá ll determinándose que la pr~ venci6n y control de la enfermedad es muy deficiente en los hatos. c.) Aislamiento de Brucella~. de muestras de leche If. en vacas reactoras a la prueba del anillo en la Saba na de Bogotá" se comprobó por aislamiento la elimina di6n do .!lrtw(,11n. d.) "Estudio de. ,1hnrt-.~~. p~rdidas. hiotipo Rl por la leche.. económicas causadas por la mas-. titis bovina en ganaderías de leche de la Sabana de Bogotá". Con este trabajo se determin6 que las p~r didas debidas a la mastitis cl1nica y subcl1nica ascienden a 12.000 millones de pesos año..

(16) 7. El proyecto de mastitis fue suspendido temporalmente por ausencia en comisi6n de estudios del lider del trabajo y se reanudarán las actividades a partir de 1988.. 2.3.PROYECTO B.3. METODOLOGIAS PARA EVALUACION DE PARAMETROS RESPUESTA INMUNE CELULAR EN BOVINOS. Olga Mariño Responsable: Esperanza Rueda de Clavijo Jorge Almansa M.. DE. Localizaci6n: Sabana de Bogotá Area de Influencia: Nacional Ohj f' ti VO!l:. Proporcionar metodología y parámetros de evaluaci6n de respuesta celular como apoyo a proyectos de inve~ tigación sobre infecciones virales o bacterianas de importancia en la poblaci6n bovina del país. Contar con metodologías específicas para la medici6n de capacidad fagocítica, blastogénica y citot6xica asi como de evaluación de factores solubles produc~ dos ante estímulos específicos o no específicos de macrófagos y linfocitos bovinos. Estado Actual: Se logró efectuar evaluaciones sobre las condiciones óptimas de conservaci6n y manejo de las muestras de campo. Sinembargo la fase correspondiente a la etapa final del proyecto, evaluación de transfor maci6n linfocitaria, no se pudo complementar debido a la carencia de los reactivos solicitados. Se avanz6 en la implementaci6n de evaluaci6n de pobla ción linfoide tipo T por detecci6n de receptor a lec tina Helix-pomatia. El proyecto se IlIantiene en un 7S'i. de ejecuc.i6n..

(17) 8. 2.3.1.EXPERIMENTO B.3.2.. Estudios preliminares sobre comportamiento. de macr6fagos y linfocitos bovinos en infecci6n natu ral por Brucella. OIga C. Mariño Responsable Manuel l. Gallego Ligia S. de Dele6n Localizaci6n: Sabana de Bogotá Area de Influencia: Nacional Duraci6n: 1985 - 1988 Objetivos: El objetivo de este experimento es la aplica ci6n especifica de las metodologias establecidas has ta el momento y el desarrollo y aplicación de nuevas metodologias. Estado Actual: a.) Inmunologia Se inici6 la purificación y caracterización de la pro teina de membrana externa (OMP) a partir de cultivos en suspensi6n de B. abortus Cepa 19, obteniéndose con centraciones bajas de proteina luego de tratamientos enzimáticos, detergentes bipolares y cromatografía. Se requiri6 de la validaci6n de técnicas para evalua ci6n y caracterizaci6n como Bradford para determinación de concentración proteica, Electroforesis en geles de poliacrilamida (PAGE) y Western blotting para visualizar reacción de antígenos proteicos con sueros de animales infectados naturalmente. Para esta G.ltima se contó con la colaboración del Instituto de Cance rologia en la fase de transferencia de los geles. La visualización de la reacción se efectuó por técnica de ELISA empleando los conjugados elaborados localmente. El perfil electroforético de los extractos crudos mo~ tró una gran complejidad con bandas comprendidas entre los 14.000 y 200.000 D, observándose en los tratamie~ tos con Triton X-lOO y Zwittergent, patrones electroforéticos muy semejantes en las metodologías aplicadas.

(18) 9. (Figura 1). Se procedió l:lIlJr,'1C1';1. du. illl[Q('.lIl1ldu. entonces a purificar por croma¡tltlÍ('(). ('\)II. IJl<ldi¡'IlII'. lIt). 1111".11. en solución Tris HC1 10 mM 0.1% Zwittergent y concentra ción desde 0.15 M hasta 0.75 M de NaCl durante 16 horas. Los picos obtenidos de las cromatograflas fueron llevados a PAGE y calculados sus pesos moleculares por anali sis de regresión lineal, con base en marcadores de peso molecular de referencias (Tablas 1, 2, Y 3). Se observa ron entre 5 y 9 bandas de proteína desde 111.000 hasta 14.000 O en las tres primeras fracciones de las distintas cromatografías. Estos picos iniciales fueron muy si milares tanto en el gradiente continuo como en el discon tinuo diseñado con el objeto de aumentar la resolución. Sinembargo, el gradiente discontinuo permitió mejor visualización de proteínas de alto y bajo peso molecular. En general los pesos moleculares del orden de 50, 40 Y 3 30 X 10 0, están claramente presentes y en concentraciones que los evidencian, sugiriendo se trata de grupo 11 de proteínas de membrana (porinas) de nuestro interés particular. Con el propósito de comprobar reacci6n de sueros positivos a Brucella frente a estas fracciones se probaron en inmunodifusión doble en agarosa al 0.9% en Tris HC1 mM con sueros control positivos y negativos di. lUldos 1:4, encontrándose reacción positiva, mejor eviden ciada en los primeros picos cromatográficos. Se intentó confirmar la reacción específica de sueros control con reacción positiva a Brucella abortus por in fección natural, por la técnica de inmunotransferencia (Blotting) en láminas de nitrocelulosa, se encontraron reacciones positivas en bandas correspondientes a 109, 3 86, 64, 58, 49, 30 Y 18 X 10 0..

(19) 10. • I. '~. 0.2?. '.. -'. ''!''I'!'. -. ~ ~. 't. f. '.,. .'a. ... -. --, .. .. Col. 2. 4. re .dores p ••• (nuevos) S. M.reldores p ••• (descong). -. --- -. Po,t-~w;ttergent. 2. ~o't-trltón X100 Col. ~ 3. Post-¡wjtter~tnt Col. 1. , ..(i. --. PAGE 027·. 1.. -.... ...... __o. .. 6. 7. 8. 9. 10. 11.. Post-¡w;ttergent Wlnt.2 Post-tritón X100 Wint.2 Pre-lisos!•• Col. 1 POlt-¡vitt,rgent W;nt.1 Post-lw;ttergent Col. 2 Post-lw;tttrgent Wint.2 lZ. Post-tritón X100 Col. 2 13. Post-tritón X100 Wint.2 14. - - - - -_ __. 1 5 . - - - - -_ _. .. ,4 • Proceso de purificación previo. la cromatogr.ff ••. Figura 1. PerfiLes eLectroforéticos de los pasos de purificación de las proteinas de membrana externa <OMP) de BruceLla. abortus. procesos Colombia y Winters..

(20) 11. PESOS MOLECULARES' PROTUNAS t1EMBRIINA EXTERNA (OtIP) Brueella abortuB. PESOS I-1OLECULARES ( 10. POOLES l.. 3 ). CROtll\TOGRAFlA N°. PAGE N°. ----54.4 55.6 55.6. 42.2 44.4. 29.9. iln7. 57.4 r,5,(). 4',. q. 31.7. tí., I. aHI. ~/.. 4J. J !J'í.t jéd 9 ..'í .HY jUj. 031. 2287 2587 2687. 028 032(Blott)H 031. 1687 HiB7 2187. 011. 035(Blott). OJ5(1l1ott). 111. 3. 76.9 76.7. 62.7. 68.4. 103.8. 36.1. 4. 26.7. 30.7. 57.4 55.6· 46.6 64.6 619 . 45.4 71.6 60.6. 18.4 I/.H. 32.2 40-9. --_._---- ---------POOLES 2. f'M:I N. n. PESOS MOLECULARES ( 10. 3 ). 1/lm:1I1Ilr;fllI//1I N°. 0'_--- . _________ ._. _____.__ "__________ ..________ . ____ .. __. - -- --_ ... - --_._-. ~_.. 1687 1G87 2Hl7 2187 2287 2587 2687 2787. 028 032(Blott) 031 (B1 031 032(Blott) 035(61ott) 035(Blott). 111. 3. 76.9 76.6. 109.2 102 76.6 101. 7 89.9. ... CJI.aulo.Je peRon moleeuZm'(w. .... Inmu>1(1tral1~.rn'l'neia. <'>1. ~_~."_. .___. +_~ _ _ _ •. +-_._-.. 36.1 54.4 56.2 45.2 53.13 505 416 46.3 57.4 55.6 53.8 52·1 43.7 397 45.2 35.1 562 44A G06 51.4 3Q2 34 582 632. 20.3. 62.7. 15.9 19.8. 30.6 26.7 303 3Z2. 30.3 3Q6 26.7. lC.7. 14.7. 19.5. (let"f) ,]•. ,'oli¡J"ri lami.Ja-:ms r"ioiema LaerrrnZiJ al 10%. e>1 1-6mhza8 dI' nitY'Oo"z"lollQ.. j. / ------_._-------- --_._._-..._--PESOS MOLECULARES ( 10. POOLES 3. PAGE N° __ - -. ~. __. CROMATOGRAFIA N°. ~.. 028 OJI 032(Blott) 032(fllott) 035(Blott). _~.. _"' ___ ._________._. _____________. ___________. ~. ?Hlll. ~. ~. ~Q5. 4Q3 39.4 394. 55.6 f)~>'u. 30.7. 4l.6. 76.7 65.3 56.9 54.3 49.3 44.4. 59.4 5/\2. 40.1. 14.3. 33.9. 49.1 5J!l. 108 103.1 110 105.6. ). __.__.___________ ,______"____ ___._0_. _ _ _ _ _ __. 59. 16B7 2167 2187 2587 2587 2687. .. ___. 3. 4J.~1. 3El.5. 27.9 24.9 24.9 28.

(21) 12. La experiencia adquirida en esta fase inicial de conoci-. mianto da. la~. proteínas de membrana de. ~.. abortus dio la. base para la iniciación de un trabajo profundo de las mis mas empleando la Cepa RB-51, lo cual elimina los riesgos de obtención de proteínas contaminadas con liposacaridos, posible responsable del elevado número de proteínas reac cionantes con sueros de animales infectados. Trabajo que se efectuará como tesis de Magister de un profesional de Control de In sumo s del ICA. En la fase de serología del proyecto, efectuada en el la boratorio de bacteriología, se continuó comparando y eva luando la funcionalidad de la prueba de aglutinación len ta modificada con EDTA en 737 sueros de hatos infectados con aislamientos confirmados y en hatos vacunados sin in fección. Se confirmó la obtención de resultados mas esp~ cíficos en caso de sueros negativos a fijación de comple mento y títulos mas reales e incluso iguales o mas eleva ci6n confirmada. Se decidió emplear esta prueba como parámetro de medici6n de niveles de anticuerpos aglutinantes y la fijaci6n de complemento para confirmación. Con respecto a las pruebas complementarias de rutina la prueba del 2 Mercaptoetanol confirmó su alta correlación con la Fijación de complemento. Estas a su vez serán comparadas con la prueba de ELISA, Kit- de referencia proporcionado por la Agencia de Energía At6mica para lo cual se logró financiación independiente. En lo correspondiente a comunicaciones, área de máximo interés para la entidad financiadora UNU, se solicit6 y 10gr6 a través de TELECQt1 la conexi6n al sistema computa rizado de mensajes ElES Y se insta16 el modem proporcionado por UNU para tal fin. Se recibió la visita del Asesor.

(22) 13. de la UNU, Soledad Robina, para la instalaci6n del sistema, con lO labora torios de América La tina, Canadá y .JapÓn, que trabajan en la Red Internacional de Biotecnología en brucellos1::i.. Se hcUlloy.tdUO ldS cOllluulcdcÜ..'lIe::i COll ld lL!d,. I:H.:.to. aun existen limitaciones para el aprovechamiento total del sistema por carencia de línea telef6nica directa asi. corno. mayor disponibilidad de tiempo de computador. El sistema pu~ de ser de máxima utilidad a todos los grupos del Instituto involucrados en trabajos de brucellosis. En el cuarto trimestre se asistió y presentó, a la reunión coordinadora de la Red de brucellosis de la UNU ( Valdivia., Chile), el informe de avances del proyecto, lográndose aceE taci6n y continuación del mismo con renovaci6n d.e financiación por US$lO.OOO. y asignación de equipo de computaci6n para uso del proyecto y su sistema de comunicación inter nacionalo En dicha oportunidad se recibió entrenamiento en la utilización de una nueva modalidad conferencia por computador, a la cual fue suscrita toda la red y bajo la cual se harán evaluaciones corno grupo experimental. El sistema consiste en la organización de mensajes en funci6n de un tópico, el cual permite intercambio y expresión simultánea de ideas, proporcionando versatilidad y agilidad en la can tidad de información intercambiada. Se considera que el proyecto ha alcanzado un 50% de avance en función de sus objetivos.. b.} Bacteriolog1a En la fase de serología efectuada en el laboratorio de bacteriología, se continuó comparandO y evaluando la funcio nalidad de la prueba lenta modificada con EDTA en 737 sueros de hatos infectados con aislamientos confinados y hatos vacunados sin infecci6nQ. en.

(23) 14. Se confirm6 la obtenci6n de resultados mas específicos en caso de sueros negativos a fijaci6n del complemento y títulos mas reales e incluso iguales o mas elevados en el caso de sueros altamente positivos por fijaci6n confirmada. Se decidi6 emplear esta prueba como parámetro de medición de niveles de anticuerpos aglutinantes y la fijaci6n de complemento para confirmaci6n. Con respecto a las pruebas complementarias de rutina la prueba del 2 Mercaptoetanol confirma su alta correlación con la fijación del complemen too Durante la realizaci6n de ~ste proyecto se han hecho pruebas rápida, lenta,mercaptoetanol y fijación de comple mento en 299 muestras de suero; Pruebas de California test y Ring test en diluciones en 172 muestras de leche y a la vez se hicieron 11 aislamientos de Brucella abortus confir mados por el Centro Panamericano de Zoonosis. 2.3.2.EXPERIMENTO B.3.3. Estandarizaci6n de la prueba de ELISA para las proteínas de membrana externa de B. abortus Localización: Sabana de Bogotá Cobertura Nacional Objetivos: Estandarizar la metodología inmunoenzimática (ELIS~) para evaluaci6n de anticuerpos a B. abortus en anima les infectados naturalmente. Se busca comparar los niveles de anticuerpos inducidos a proteínas de membrana externa (OMP) y a lipopolisacarido (LPS) y cadpn" o ("0mo ("omplpmpnto a. PVill11i'l("ionps ("pllllilrPR pro. puesta anteriormente. Estado Actual: Se elabor6 la presentaci6n del proyecto financiado por FAO-IAEA para su discusión ante la reunión de coordin~ ción titulada " Improving the diagnosis and control.

(24) 15. of infectious and parasitic diseases of livestock in deve loping countries, with the aid of inununoassay and relateo. techniques" , efectuada en Uppsala, Suecia del 4 al 14 de mayo. Se discutieron las ventajas inherentes a la técnica de ELISA en su potencialidad para análisis masivos y en especial su objetividad en los resultados obtenidos luego de un proceso exhaustivo de estandarización. El proyecto recibió acogida y aseguró financiación por un período de cinco años en funci6n del rendimiento. Los ase sores recomendaron dar el máximo énfasis y prioridad a la estandarizaci6n de ELISA para el diagnóstico de B. abortus comparando el antígeno propio con el propuesto por la agen cia. La financiaci6n consiste en reactivos y equipo de con sumo para implantar las metodologías mencionadas y posibilidad de entrenamiento::> Y a::>etiot:!ct::> tit.!lJÜn Ht.!L:t.!bldLldt.!b. .:h:l. proyecto. Asi mismo, la posibilidad de obtener reactivos de referencia para agilizar la estandarizaci6n de dichas técnicas. Se ha avanzado en la preparaci6n del antígeno OMP Y en la colecci6n de sueros problemas, se esta elaborando el estu dio estadístico para un muestreo epidemiol6gicamente representativo, se continu6 con la colecci6n de muestras, sueros controles positivos y negativos. Se esta elaboran do informe y renovación de contrato. 2.4. PROYECTO B.4. EVALUACION DE PERFILES ELECTROFORETICOS Y CLASES DE INMUNOGLOBULINAS EN HATOS LECHEROS. Responsable: Jorge Almansa OIga Mariño Duración: 1985 - 1987 Localizaci6n: Sabana de Bogotá y Valles de Ubaté y Chiquinquirá nroa do Influencia: Zonas lecheras del país.

(25) 16. Obietivos: Sentar las bases para el recnnnclm;entn nel es. tado inmunltario en bovinos neonatos con el fin de prevenlr p~rdidas econ6micas por mortalidad en bovinos inmunodeficientes. Estado Actual: Se efectu6 y termin6 el muestreo de sueros de terneros pertenecientes a la finca control y se elaboraron las electroforesis respectivas. Se n estadísticamen te los valores protelcos según os de trabajo y se establecieron los valores normales. Los resultados se presentan en dos publlcaciones, " Proteinograma serico bovino: Observaciones Clínicas " la cual se encuen tra en trámite de evaluaciOn y " Perflles electrofor€ticos de bovinos sanos en distintas ca die iones de manejo " actualmente en corrección. 2.5. PROYECTO" EVALUACION DE MEDIDAS DE CONTROL PARA LEUCOSIS BOVINA EN LOS CENTROS EXPERIMENTAL S DEL ICA. (Colaboración de los Programas de atología, Micro bi 010<]1:a y Mcd ici na Vctcr in.-. rLl Pr ~v('nti. va). LocalizaciOn: Nacional Cobertura: Nacional Estado Actual:,. Se han procesado 4.000 sueros. dientes a Tibai. -~. tatá, Palmira, Macagual, Obonuco, Turipaná y El Nus. Se ha preparado el antígeno correspond-ente. Se insiste en las limitaciones físicas para la produc iOn de cantidad apropiada para cubrir las necesidades de i vestigaciOn y de diagnóstico..

(26) 17. 2.6.. PROYECTO B.5. INTENSIFlCACION PEL CONTROL PE ANIMALES EN COLOMBIA.~. EN¡;E~PAPES. Este proyecto corresponde al conjunto de actividades que se realizan dentro deL Convenio Colombo-Alemán cuyo campo de acci6n se u.bica especialmente en el departamento de C6rdoba y zonas aledañas. El Programa de Microbiología continúa siendo lider del grupo multidisciplinario en el desarrollo de este proyecto y durante el año de 1987 dedico la mayoría del tiempo al analisis de datos correspondientes a la fase de monitoreo del proyecto y a labores de transferencia de tecnología. 2.6.1. EXPERIMENTO B .. 5.2. Estud,ios de rentabilidad en fincas gana. deras utilizando un sistema de registro simplificado. Responsable: Mario Navarrete Estado: Se perfeccion6 aún mas el modelo d,e computador para el manejo y cálculo de los datos. La entrada de datos al com putador esta hecha en un 90%, habiéndose introducido los datos correspondientes a las fincas de Sincelejo. Queda pendiente la interpretaci6n de las cifras de medida econ6 mica calculadas. Resultados: Los cálculos financieros parciales hechos sobre 6 fincas con los mismos objetivos de producci6n (carne + leche) pero clasificados con diferente uso tecno16gico, mostraron una variabilidad en la rentabilidad desde -16.37%. hasta +25.51% con indices de beneficio costo entre 0.15 y 2.85..

(27) I------------------------------------------~. 18. 2.6.2.. EXPERIMENTO B.5.3. Análisis clínico reproductivo en fincas con diferente uso tecnológico Responsa.bles;;. Jaime Orj uela .Mario Navarrete Sara Otero. Estad,o Actual :; Los datos arcn.iyados en el computador fueron sometidos a una nue'\(a y exhausti'\(a revisi6n con el objeto de eliminar una serie de inconsistencias biol6gicas las cuales estaban influenciando negativamente en el proceso de análisis. Este trabajo fue arduo y ocup6 gran cantidad de tiempo del per::;onal pro,fesionalu Actualrnente se esta t.t-dbdjdndo en el. respectivo análisis de los datos, espectficamente sobre el parámetro lnter'\(alo .... Pa.rto .... c;oncepci6n. Resultados ;; El an~lisis se ha entocado primeramente, para observar la posible intluencia del mes del parto en el comportamie~ t.o reproductivo, sin tener en cuenta otros factores que pu.eden estar influyendo este comportamiento.. ~-------.

(28) 19. Go ohfH'rv() el. i ntcrv.-d o. q\lf'. trnn~~Cllrrr. d('f';clc el lT\OlT\0nto del. parto hasta la concepci6n y la propor c i6n acumulada de hem bras del hato que quedan preñadas. A los 30 días s610 el 2.9% de las vacas conciben Y hasta los 6 meses el 51.3% de. los animales esta preñado Y al finalizar el año se hallO el 90% del hato preñado. La ~poca del año es uno de los factores que siempre se ha pensado influye en mayor magnitud en el rendimiento produE tivo de los animales Y en particular desde el punto de vis ta reproductivo. La imagen general que se observ6 resalta en el hecho de hallar dos épocas bien definidas una buena y una mala asi: Una de mayor protRedio porcentual de preñe ces ocurriendo cuando las vacas paren entre los meses de Diciembre a Enero y en los meses de Abril, Mayo y Junio.De otro lado una segunda época de partos en que posteriormen te los porcentajes de preñez' son bajos, este en partos ocurridos al fin de Enero durante Febrero Y Marzo con un segundo pico en partos ocurridos entre Agosto hasta Noviero. breo Pnr. ntr~ p~rt0,. R0. 110v~. a cAho. An~liRiR ~e. P. rpqr Ri6n to-. mando como variable dependiente Concepción positiva o negativa ocurrido antes del dia lB3 post-parto Y COtRO varia ble independientes cuatro grupOS de factores clasificados en la siguiente forma:. 1.- Factores fijos: Finca, Año del parto t19l32-l986), Mes del parto, categoría número de partos ('Novillas, vacas de 2 a 3 partos, vacas con 4 o mas partos), Sexo del ternero, Raza de la vaca (Cebú criollo versus vacas con sangre de razas exóticas). 2.- Factores Nutricios: Glucosa, Urea, Albumina, ~-caroteno, Fósforo AST, Hetnoglobína Y Bil ubina Y condició!l corporal.

(29) :.w. 3.- Factores de tipo clínico:. Endo~etritis,. Vestibulitis y. Aciclia ovárica. 4.- Infecciones especificas: leptospirosis y brucellosis. 5.- Producci6n: La producción máxima de leche media en el período parto hasta el día 183. Los resultados de esta prueba estadistica mostraron que los factores fijos:. E'INCA, HES PAR'I'O, CAfl'E(~OHlA No. PAH'I'OS y AÑO DEL PARTO fueron significativos (p¿.05). Los demás fac tores fueron paulatinamente adicionados a los factores fi jos resultando que los factores ACICLIA y SEROCONVERSION a LEPTOSPIRA contribuyeron también significativamente a "me jorar" el modelo de la regresi6n. Los factores CONDICION CORPORAL y CATEGORIA PARTOS tomados independientemente, fueron significativamente correlacion~ dos con la probabilidad de concepci6n, pero al considerarlos al mismo. tiempo, el primero de ellos perdió dicha. si~. nificancia. 2.6.3. EXPERIMENTO B.5.5. Prevalencia e incidencia de brucellosis en bovinos del departamento de Córdoba. Responsables:. Jaime Orjuela Sara Otero Mario Navarrete. Estado: Se encuentra en el perfodo de análisis de datos Resul tados: La prevalencia preliminar hallada fue de 4.8% para vacas y 2.62% en novillas. A nivel de fincas se halló una prevalencia de 23%. La incidencia fue de 3.9% en vacas y de 2.5% en novillas..

(30) 21. No se encontr6 evidencia de relación significativa entre los animales seroconvertidores y los coeficientes técnicos de producción analizados. Sinembargo se propone usar la técnica de casos y controles para continuar el análisis de los animales encontrados sera-positivos a brucellosis. 2.6.4. EXPERIMENTO B.5.6. Prevalencia e incidencia de leptospirosis. Responsables:. en bovinos del departamento de Córdoba. Jaime Orjuela Sara Otero M.ario Navarrete. Estado: ejecución de las correspondientes pruebas de laboratorio para determinar las cifras de incidencia. Se efectuaron 8835 pruebas correspondientes a 1767 animales completando en esta forma un total acumulado de 36400 pruebas de 7280 muestras pertenecientes a 1456 animales. Simultáneam.ente, algunos análisis parciales de corre lación han venido haciéndose. Resultados: Resultados parciales muestran una prevalencia de la enfermedad en el área del 41.06%. La discriminación por serotipos ha sido: Hardjo 24.27%; Pomona 7.78%; Canicola 2.32%; Icterohaemorrhagiae t~59% y Grippotyphosa 15.17%¡ Un 15.85% de las muestras han mostrado reacciones cruza das..

(31) 22. I..os análisis parciales llevados a cabo independientemen te por serotipo, han arrojado los siguientes resultados: L. hardjo : Su frecuencia de ocurrencia se encontr6 asocia da con la estaci6n de la visita, siendo mayor durante la transici6n del verano al invierno. No hubo asociación con la condición corporal del animal. Se hal16 fuerte asociaci6n entre sero-positiVidad y número de partos, explicable como directo reflejo del contacto con tllluu eUIl el u~Jl:JlLl: cLlo16yico.. Bastante diferencia hubo igualmente en la frecuencia de ocurrencia de la sero-positividad entre fincas esto debi do a las diferencias que existen entre las fincas en si y. los varios. factores epidemio16gicos involucrados en dicha. enfermedad. L. pomona:. Este serovar. tuvo una débil pero significativa. asociación en su frecuencia de ocurrencia y la estaci6n de la visita, la prevalencia fue mayor en la época seca. No hubo asociaci6n con este serovar y la condici6n corporal del animal, sinembargo animales en pobre o mala condici6n eran mas prevalentes en esta condici6n que el resto de ani males. Las n.ovillas fueron la categoría mas afectada con este se rovar. En forma similar al anterior serovar hubo diferen cias en la frecuencia de ocurrencia de este entre fincas. Lo. icterohaemorragiae: No hubo diferencia según estaci6n de visita. Se hal16 evidencia significativa de mayor núme ro. d~. ::;ero-po::;ltivu::; en luo ctlllll1ctluo L"lct;:.ílIlI..:ctLlut.l. L'UllIll. LIt.;. mala condici6n corporal al compararlos con el resto de ellos..

(32) 23. Similarmente, según el número de partos hubo diferencias entre las varias categorias analizadas. Los animales que tenían 5 o mas partos fueron proporcionalmente mas afecta dos que los jóvenes. L. canícola: Hubo mayores niveles aparentes de infección durante las €pocas secas y específicamente en la transición de esta al invierno. En forma similar a los ant.eriores serovars, anImales en co~ dición pobre o mala fueron mas prevalentes a este serovar¡ esta diferencia fue altamente significativa. No hubo dife rencias según el número de partos. Entre fincas, la variación de la prevalencia fue significa tiva. En las fincas 1, 4 Y 16 no se hallaron sero-pos i tl vos a este serovar, mientras que las fincas 8 y 15 eran las mas altamente infectadas •. L.,S.EifJ)otyphosa: La prevalencia general para este serovar fue del 9.5%. Según la €poca de la visita 1 hubo variación significativa en la frecuencia de ocurrencia. El período transicional hacia el invierno aparece como el mas benigno en cuanto a infección se retiere. No se halló asociación entre la prevalencia de este sero-. var y la condici6n corporal del animal, tampoco según el número de partos. Hubo diferencias en la frecuencia de la prevalencia con e~ te serovar entre fincas. Todas las fincas investigadas fue ron positivas a este. Leptospira ~. Esta parte se refiere al diagnóstico final animal si fue sero-positivo a uno o mas de los serovars investigados. La prevalencia general hallada fue de 48.4%. Animales en pobre o mala condición corporal fueron en general mas preva1entes a la infecci6n. Animales que tenían 5 o mas partos igualmente fueron los mas infectados. La prevalencia fue igualmente mas alta en animales con solo un parto que en animales con mas de dos partos..

(33) 24. Tal como se esperaba, hubo significativas diferencias entre fincas. Los animales pariendo en la estaciOn lluviosa aparecen mas infectados que otros pariendo en épocas diferentes. Se hallO una asociaci6n entre la frecuencia de ocurrencia de sero-conversión a cualquier serovar y el intervalo entre partos. El análisis hecho incluye análisis de regresi6n para estimar los intervalos entre partos de animales sero-conver tidores. El efecto de Leptospira ~. fue estimado en una prolong~ ción del 9% en los intervalos entre partos, para animales • sero-convertidores. 206.5. EXPERIMENTO B.5.7o Evaluaci6n de Mastitis Bovina en el De-. pa.rtamen to de C6rdoba .. Responsables: Jaime Orjuela Andrés G6mez Sara Otero Mario Navarrete Estado:, Se diseñO un modelo de análisis d.e interrelaci6n con el componente económico tendiente a conocer el impacto de esta enfermedad sobre la productividad ganadera. Se ana11 zó la ocurrencia de mastitis en los datos del monitoreo., con miras a descubrir los factores que influyen en la pre valencia y los efectos de la enfermedad en la fertilidad y la producción de leche. Resultados: 1.,1 llIatiLiLl:1 dt.'l.ul.'!ada 1II".li;lIll<,. la. [lJun11rt. C.,"lif'JI"ni ... Mastitis Test (CMT) ocurrió con una prevalencia general de 9.68% en las vacas..

(34) 25. La prevalencia fue menor en novillas que en vacas; además se observO indicaci6n de fluctuaciones estacionales. La presencia de moscas al tiempo de la visita tiene una alta asociaci6n con la prevalencia de mastitis. El gérmen mas frecuentemente aislado de los cultivos hechos con leches reaccionantes a CMT fue E. aureus. Se detectó un pequeño pero muy significativo efecto en la producción. Al hacer el análisis econ6mico en forma general, se encontró que la p~rdida diaria en producción de leche por vaca por cada punto de C~T es de aproximadamente de 0.0524 litros. Al categorizar los animales d.e acu.erdo al grado de presen taci6n de mastitis en: Mastitis negativa, infecciones mode radas e infecciones severas, la prevalencia general halla da fue la siquiente: ~. CATEGORIA -----------------. Negativas 1 a 4 5 o mas. No. OBSERVACIONES ---------------------~---------. 2538 134 138. PORCENTAJE ---------------------. 90.32% 4.77% 4.91%. j ~. r,. ..c. 'i. .;j ¡. ,. ~;t. TOTAL. :¿810. 100.00 %. =========================================================. Parece haber menos mastitis en vacas de primera lactancia. Otras asociaciones entre edad y mastitis son difíciles de interpretar, a pesar de que fueron significativas. Marcadas diferencias en la prevalencia de mastitis entre fincas fueron observadas. Esto estaba dentro de los previ~ to y es debido presumiblemente a las diferentes caracterís ticas de manejo de la finca Sinembargo, la raza Y los Q.

(35) niveles de la producción de leche varian entre fincas y por ende estos factores pueden ser en parte los responsables de la variación en los niveles de la prevalencia.. El an~lisis de los posibles efectos de la raza no fue llevado a cabo puesto que la gran mayoría de los animales fueron registrados simplemente como cruces de cebú-criollo, a pesar de que existe variación en la proporción de sangre cebú y criollo. Se hal16 una asociación negativa entre el total de leche producida por lactancia y la calificación por mastitis durante la misma. Sinembargo esto no debe interpretarse como que las vacas que producen menos leche sufren mas de masti tis. Existe una interrelación causal entre mastitis y caE tidad de leche producida en dos sentidos. Vacas con alto potencial de producción de leche son mas susceptibles de tener mastitis. Si la relación anteriormente enunciada se quiere investigar se debe medir en algun grado el potencial de producción, que es independiente del estado de la ubre. La frecuencia de ocurrencia de niveles severos de mastitis es menor en vacas pariendo en época seca. Este puede ser el reflejo de la época en la incidencia, aunque el análisis hecho de estaci6n de la visita no mostrO fuertes asociacio nes. Se conoce que algunas fincas tienen ciertos patrones de nacimientos estacionales aunque no marcados, estas diferencias podrfan contar para las asociaciones entre mastitis y. la estaci6n d.el parto.. 2.6.6. EXPERIMENTO B.S.8. Suplementación de vacas en producción con bloques multinutritivos durante la época Responsable:. de sequfa. Grupo multidisciplinario LIVET.

(36) 27. Estado: Se analizaron los datos mediante la estadística descriE tiva y posteriormente se montaron las pruebas estadisticas de correlación. Resultado : No fue posible establecer diferencias estadísticamente significativas entre el grupo experimental y de control en relación con producción de leche, peso de las vacas y sus crias, ni comportamiento fisiol6gico reproduct~vo en los animales. Sinembargo, el análisis mostró que el grupo de animales s~ plementados con bloques tuvieron tendencia a producir mayor cantidad de leche y de mantener su peso corporal durante la época de suministro, en relación con el grupo control. Discusión: Los resultados anteriormente anotados, conducen a las siguientes consideraciones: El bajo consumo de la cantidad de bloque ( 200 gms/día/ animal) por parte de los animales, ha impedido la expre si6n esperada en cuanto a los parámetros de producción tomados como medida evaluativa. Por Su parte, este bajo consumo es a su vez atribuido a su baja palatabilidad y también a algunas fallas so bre su manejo a nivel de finca. La tendencia positiva mostrada en los parámetros de producci6n utilizados como medida, sugieren que al co rregir las fallas detectadas, es posible esperar resul tados satisfactorios. Conclusión: Se recomienda repetir el experimento, conside randa tomas las medidas correctivas a los error.e!J eH contrados..

(37) 28. 3.. INVESTIGACION ENFERMEDADES INFECCIOSAS ESPECIE PORCINA. 3.1.. PROYECTO P •. 1.. VIGILANCIA EPIDEMIOI.OGIA DEL COLERA PORCINO y DE LA PESTE PORCINA AFRICANA Juan Edgar Villate. Responsable: Objetivo: a.) Caracterizar el c6lera porcino y estud.iar su comportamien to en las diferentes condiciones de manejo de los cerdos en el país •. b.) Desarrollar la infraestructura y capacitación necesaria para el estudio de las enfermedades de los cerdos con énfasis en el cólera porcino, asi como para la prevenci6n de la entrada de enfermedades ex6ticas a Colombia tales como la peste porcina africana. Eflb"ldo l\ct\1i11:. El Proyecto se ha desarrollado alrededor de mataderos y porquerizas en ~reas de importancia económica y epidemio16gi ca. Se trabaja simultáneamente para el Cólera Porcino y la Peste Porcina Africana. Se ha organizado la lnfraestructura necesaria para la vigilancia contínua orientada a detectar oportunamente la eventual entrada al país de la Peste Porci na Africana. 3.1.1. EXPERIMENTO P.l.l.. Estudio seroepidemiológico de la Peste Porcina Africana en cerdos de matadero. Responsable : Juan Edgar Villate Localizaci6n: Mataderos de los principales centros de consu mo y de riesgo del país. Objetivo: Organizar y aplicar un sistema adecuado para detectar la presencia de reactores serol6gicos de la peste porcina africana y a la vez investigar el posible aislamiento del virus en vísceras de cerdos destinados a matadero..

(38) 29. Estado Actual: Despu~s. de analizar para peste porcina africana y cólera porcino 3.810 sueros y 341 muestras de vísceras, procedentes de los mataderos de: Bogotá, Cali, Medellln, Pasto, Cficuta, Bucaramanga e Ipiales no se encontraron animales reactores,c~ tlllUc1!HJo l~l. pntu llln'u de peutu putCilHl nrri.l~nn'-l.. nPI:I',,¡·tn. al c61era porcino se detectó positividad para todas las zonas estudiadas.. 3.1.2. EXPERIMENTO P.1.2. Caracterización según patogenia de cepas de cólera porcino actuantes en el país. Responsable: Juan E. Villate Localización: Principales centros porclcolas Objetivo: Estudiar cepas aisladas de muestras de vísceras de cer dos sacrificados en matadero y brotes de campo, para observar sus diferentes grados de virulencia, signos cllnicos y lesio nes producidas por dichas cepas en animales susceptibles,com plementadas por estudios serológicos e histopatológicos. Estado Actual: Se aislaron 61 cepas mediante el procesamiento de 341 muestras de v1sceras, material procedente de brotes de campo ocurridos en los departamentos de: Cesar, Nariño, CundinamaE ca, Tolima y Santander y muestras de los frigor1ficos de Bogot~, c11cuta y Pasto. Como puede observarse el c61era porci. no continfia en forma enzoótica en el país y es una de las principales limitantes de la producci6n porcícola..

(39) 30. 3.2.. PROYECTO P.4. FACTORES INFECCIOSOS DE INFERTILIDAD Y SU RE PERCUSlQN ECONO~UCA EN LA ESPECIE PORCINA EN COLOMBIA~. Responsables:. And.rés G6m.ez. .Manuel l., Gallego Gustayo Raye V., Qbj eti VQ:. Oeterminar las principales enfermedades infecciosas que inciden en el baj'o rendimient.o d,e las explotaciones porcinas desde el punto de vista reproductivo. Estado Actual:. El proyecto se inició con el planteamiento de experimen tos, contacto de pr·oduct.or,es y muestreos en piaras y matade ros .. 3 .. 2.1 •. EXPERIMENTO P.4 •. 1 .. Evaluaci6n de la leptospirosis en porCinos destinados a la reproducci6n en Cundinamarca .. R,esponsables: An.dres Gómez Manuel l •. Gallego Gu,staYo Rave V. LocalizaciOn:: Areas porcícQlas de Cundinamarca Obj'etiYo:. Oeterminar la preyalencia serológica y tipos de leptospira.s pred'ominantes en la zona de estudio •. Estado Actual: Este experimento fue terminado a nivel de matadero. EncontrAndose 29.6% de reactores positiyos a Leptospira pomona, Lo. canícola, L. icterohaemorrhagiae y ~.grippoty phosa. Actualmente se esta planeando utilizar el mismo nQ múro de. mUUtitL'ctti. pct.Cd. Ut: LUUlIludl. la J;;Hevo 1 ellV 1 el. lÍl.!. ul.. n>u. serotipos. El examen bacterio16gico facilitó el aislamiento de 3 cepas de Lo pomona (2.5%) confirmadas por el Centro Panamericano de Zoonosis..

(40) 31. 4.. INVESTIGACION ENFERMEDADES INFECCIOSAS EN LA ESPECIE CAPRINA. 4.1. PROYECTO C.1. EtTFEFlJI..EDADES INFECCIOSAS EN CAPRINOS 4.1.1. EXPERIMENTO C.l.1. Prevalencia sero16gica de artritis y encefalitis en cabras de Cundinamarca y Santander. Localizaci6n: Sabana de Bogotá y departamento de Santander Responsables: Dora L. de Agude10 Alba L. de Galvis Esperanza Cortés Objetivo : Comprobar la presencia de esta entidad infecciosa en cabras. Estado Actual: Se procesaron 100 muestras de suero por inmunoditusi6n para artritis-encefalitis caprina y para PI 3 procedentes de santander, encontrándose 17 muestras positivas para artritisencefalitis caprina y ocho positivas para PI 3 • A pesar de que este experimento no esta concluído se pone en evidencia la presencia de una entidad pato16gica nueva en el país fren te a la cual es necesario establecer métodos de control.. 5.. INVESTIGACION ENFERMEDADES INFECCIOSAS EN LA ESPECIE EQUINA. 5.1. PROYECTO E.lo ENFEFMEDADES INFECCIOSAS EN EQUINOS 5.1.10 EXPERIMENTO Eol.l. Prevalencia de brucelosis y leptospirosis en equinos del Casanare. Localizaci6n: Intendencia del Casanare Responsables: Manuel l. Gallego Ligia S. de Dele6n Objetivos: Conocer la prevalencia de las principales enfermedades infecciosas que afectan los equinos de esta Intendencia..

(41) 32. Estado Actual: Se procesaron 300 sueros sanguineos proceden tes del Casanare mediante las pruebas de microaglutinaci6n para leptospirosis y aglutinaci6n lenta para brucelosis, encontrándose los siguientes resultados: Brucelosis: Se encontraron 114 reactores en títulos que flu~ tuaron entre 1:25 y 1:50. Leptospirosis: Se encontraron 208 sueros reactores a dife-. rentes serovar5 ge LeptQspira.. 6.. TR,ANSFERENCIA DE TECNOLOGl,A,. 6.1. ApOrte de Tecnología (A,sesortas, ~e~,n.ariQS, Conferencias,. Simposios, Cursos) Se practicaron 14 visitas de asesoría sobre problemas repro ductivos a diez fincas de la Sabana de Bogotá. - "Curso internacional sobre Comunicaci6n Educativa en Sanidad Animal" Conferencias Dr. Juan E. Villate Conferencia" Diagn6stico de brucelosis en Colombia", Dr. Manuel Isaac Gallego. 11 Congreso Latinoamericano y V Colombiano de Medicina Tropical. Centro de Convenciones Gon zalo Jimenez de Quesada, Bogotá, Mayo 29/87. Conferencia "Enfermedades Infecciosas del Tracto Reproduc~ tivo", Dr. Manuel l. Gallego, Facultad de Medicina Veteri naria, Universidad de C6rd.oba, Monterí.a, mayo 8/87. Curso "Manejo de la fertilidad en ganadería bovina" Con..ferencistas Dr. Mario Navarrete, Dr. Manuel l. Gallego, mayo 18 al 23, Medelllfn. Conferencia "Respuesta Inmune en Aves", Ora .. OIga Hariño, para 40 Médicos Veterinarios de la R.egión de Fusagasugá, Mayo de 1987. Se colabor6 en un seminario sobre Enfermedades de la Repr~ ducci6n, realizado el 13 y 14 de julio en Villavicencio..

(42) 33. Conferencia sobre brucelosis y leptospirosis, Dr. Manuel Isaac Gallego, en el Comité de Ganaderos de Pereira,Septie~ bre 25/87. Conferencia "El Laboratorio en Medicina Veterinaria", Dr. Gustavo Rave Valencia. IV Congreso Nacional de Patología Clinica, Teatro Fundadores, Manizales, octubre 9-12,1987. El Programa de Microbiologia organizó y desarrolló en conjunto con ANALAC el IV Simposio sobre trastornos de la re producción en ganado de leche, Bogotá, octubre 29-30/87. Conferencia Diagnóstico de bruqelosis, Dr. Manuel Isaac Gallego, I Seminario Regional sobre Zoonosis, Manizales, no viembre '20/í:n. Conferencia Diagn6stico de brucelosis, Dr.Manuel Isaac Gallego, Servicio de Salud de Boyacá, Tunja, diciembre 4/87. Curso "Introducción al uso de microcomputadores en salud y producción animal", CICADEP, Bogotá, octubre 26 al 30. 7 participantes. Curso taller sobre " El uso del monitoreo para el manejo de hatos" Estudiantes Medicina Veterinaria, Universidad de C6rdoba, LIVET, Noviembre 12 y 13. 45 participantes. Conferencia " El uso del monitoreo como herramienta para la asistencia técnica ". I Simposio estudiantes d.e Medicina Veterinaria y Zootecnia. Monteri.a, Novie¡nbre 1.8 a 19. 250 participantes. 6.2. Capacitación Recibida (Cursos, Seminarios, Consultorías) Congreso Latinoamericano de Alergia e Inmunología, Bogotá 14-17 febrero. Un participante •. Curso Estadística para Médicos Veterinarios y z.ootecni~ 11. tas" CICADEP Universidad do La Salle, 2 - 13 febrero/87,. Un participante..

(43) 34. Seminario" Ejercicio Simulacro sobre Enfermedades y los Sistemas y Planes de. Ernergenc~a. Ex6t~cas. ". Autosim 1, para re!:. sonal de laboratorio. LIMV abril 20 al 29/87. Seis participantes. Curso " Improv~ng the diagnosis and control of infectious and parasitic diseases of livestock in developing countries with the aid of irnmunoassay and related techniques " Uppsalla Suecia, mayo 3-15/87. Un participante • •. " 11 Congreso Latinoamericano y V Colombiano de ~I[edicina Tropical " Centro de Convenciones Gonzalo Jimenez de Quesada, Bogotá, 25 - 30 mayo /S7. Un participante. IV Seminario Internacional de Medicina Bovina n, Bogotá 2 - 4 septiembre/87. Un participante. \f. Curso Actualización en Inmunología Veterinaria " Centro de Investigaciones Palo Alto, Mexico 7-19 septiembre/87, Un participante. 11. Curso •. I!. Introducción al uso de microcomputadores en salud. y producción animal CICADE?. ~. Universidad de La Salle, 26-. 30 octubre/87. Un participante. Simposio sobre Brucella y Brucellosis. Valdivia, Chile 1923 octubre/8?. Un participante.. Consultoría sobre Investigaci6n en Enfermedades Virales de Bovinos, para el rrograma de Microbiología, Dr. Thomas Yuill 14 .,.. 18 septiembre/87. Consultoría sobre Enfermedades Infecciosas del Tractro Reproductivo. Dr. Manuel García, 26-30 octubre/S7..

(44) 35. 7.. ACCIONES DE APOYO TECNICO Asesoría en el desarrollo de tesis: - Prevalencia serológica y bacterio16gica de leptospirosis porcina. Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional. Anticuerpos en lechones contra el cólera porcino. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad. •. del Tolima • Prevalencia de Anemia Infecciosa Equina en Casanare. F~ cultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional. PurificaciOn de antígenos de larvas de Boophilus microplus. PreparaciOn de conjugado para inmunofluorescencia indirecta en diagnóstico de toxoplasmosis bovina. Preparación de antígeno para inmunodifusión y diagn6stico de anemia infecciosa equina. l'Lt;pctLctclÓll. ut;. ctIlLf'Jt;IIU. Vct.lct. l;llyctll('¡~Lll'u. ¡:H~JU](¡tJ.i,·u. elc. l,'!:. cosis bovina. En la sede del LIVET se ha continuado prestando asesoría técnica a los Centros de Diagnóstico de Montería y Since lejo y se colabora en algunos aspectos t€cnicos a Programas de otras Disciplinas y/o especies en la Regional. Se ha dado el entrenamiento al director del centro de dia.9:. n6stico de Montería, para la implementaci6n rutinaria de la técnica de inmunodifusión en agar gel para el diagn 6sti co de Anemia Infecciosa Equina. Al personal del centro de diagn6stico de Sincelejo, se le ha apoyado sobre el manejo y análisis de los datos corres pondientes al proyecto de monitoreo en fincas del departa mento de Sucre o.

(45) 36. Se ha dado entrenamiento al cuerpo docente del. departame~. to de reproducción animal de la Facultad de Medicina Vete rinaria de la Universidad de Córdoba, sobre el uso del sis teflld Ut.! JIIolll.Coreo con. ld dyudd de 1II1.croccHIIl-'utdLÍOr. ,. l-'dl(l L!1. manejo de la salud y productividad de hatos de doble propósito. Se ha prestado el apoyo técnico necesario para que los. pr~. gramas de ganado de carne, de doble propósito y fisiología y genética del CNIA de Turlpaná, inicie el proceso de si2_ tematización de sus actividades de investigación. A. •. este. respecto, la informaci6n de los animales de la sección de Ganado de Carne se encuentra ya sistematizada en un 25% •. También se ha prestado asesoría t~cnica para el proceso de sistematización del programa d.e mejoramiento ganadero de la Secretaría de Agricultura del departamento de Córds> ba.. 8.. ACTIVIDADES DE DIAGNOSTICO. 8.1. SEDE LIMV -. Bogot~. Diagnóstico sero16gico Brucelosis Especie. Muestras procesadas. Negativas. Reactoras. ~~-. Bovinas. 2688. 1877. 8] 1. Porcina. 99. 87. 12. Equina. 5. 4. 1. Humana. 94. 82. 12.

(46) 37. Diagnóstico serológico Leptospirosis Especie. Bovina Porcina Equina Caprina Humana. Muestras Procesadas. Negativas. Reactoras. 1889. 1252. 637. 1496. 1154. 342. 25. 25. O. 20. 20. O. 5. 5. O. • Eiagn6stico serol6gico ParvoVirosis canina Se estandarizó la prueba de i.nhibici6n de la hemoaglutinaci6n para parvovirosis canina y se procesaron doce muestras de suero canino procedentes de la Universidad del To1ima~ Diagnóstico serológico Leucosis Bovina (Inmunadifusión) Positivas Negativas. 1018. Total. 1544. 526. Diagnóstico serológico Rinotraqueitis Infecciosa(Seroneutrali zación) positivas Negativas. 100. Total. 151. Positivas Negativas Total. 51. 88 49 137.

(47) s 38. Diagnóstico serológico Parainfluenza tres (Inhibición de la hemoaglutinación) Posit~vas. Negativas Total. •. 128 23 151. piasnóstico serolósico Anemia Infecciosa Equina (Inmunodifusión) 35 positivas 630 Negativas 665 Total. • Diasn6stico Bacterio16gico EUf'ocio. r"llnn -------. Bovina Porcina. 128 31. 219. Aves Caninos Caprinos. 143. 200. 7. 8. 6. 8. Ovinos. 2. 2. Roedores Aguas Total. 9. 12 5 503. 5 331. Mllf'!1 ... ---~. t r,' r:. "~-,-~._,--.-. 49. 8.2. SEDE LIVET - Montería. Las. actividades de diagn6stico estan encaminadas especí.ficamente a apoyar al centro d.e Diagnóstico en la ejecución de pruebas de laboratorio no implementadas aun en dicho cen t.ro. También comO colaboraci6n cu.ando se presentan oetermina das dificultades en el manejo e interpretaci6n de algunas de ellns..

(48) p. 39. El apoyo prestado se encuentra especificado en el siguien te esquema: Cultivo Bacteriológico: Se procesaron las siguientes muestras:. Cantidad. •. 36. Especie Bovinos. G€rmenes aislados Brucella sp., Corynebacterium pyogenes Clost,ridi um sp. Pasteurel1a sp. Staphylococcus aureus Shigella sp. pseudomona auroginosa Cocobacilos Gram Positivos Dermatophitos sp.. No. 1 2. 3 2. 3. 1. 1 1 1 1. 1. Caprinos. Fusarium Proteus vu,lgaris rnadecuadas Estéril Cephalosporium sp.. 17. Alimentos. Staphylococcus aureus. 5. Streptococcus sp. E. coli Est€ril. 3. Candida sp. staphylococcus aureus. 2. E. coli. 2. Pseudomona aeuroginosa Estéril Clostridium sp., Corynebacterium sp.. 1. •. 11. Humana. 2. Equinos. 1. Porcinos. 1 2. 10 1. 7 5. 2. 4 1. 1.

(49) 40. Antibiogramas. 10. Serolog1a Brucellosis:. NO. Bovinos Humano. Q. Muestras. 259 Roj'o de Bengala 25 R.ojo d.e Bengala.. :E'ositivos 37. (14.2%). 5 (20% ). Anemia Infecciosa Equina 112 Inmunodi.f'usión. 32. (26.,2%). Leucosis bovina 63 Inmunodifusi6n. o(. 0% ). ~eptospirosis. •. Bovinos: De un total de 89 sueros bovin.os trabajados por la t€cnica de microaglutinación li.sis, se encontró: 6 (6 .. 7%) Hardjo. 1 (1.1 %) Grippotyphosa.

(50) 41. 9.. PUBLICACIONES 1. A1mansa.,J.O.¡O.C.Mariño. Relación Nutrici6n-Inmunidad-Sa1ud. Importancia para la Ganader1a en Colombia. Revista ICA (En prensa). ¿. Almansa,J.¡ O.C.Mariño,R.Neira. Estudios electroforéticos en bovinos: Algunas observaciones. En correcci6n Revista ICA. 3. Gallego, M.l. Manejo del Problema Reproductivo en Ganado de Leche. Manual de Asistencia Técnica 90 p. 1987. 4. Gallego, M.I.¡ Cortés,E.r Galvis de,A.L.;Agudelo de D.L. Diarrea Viral Bovina en Colombia (Art1culo Cientffico) Revista ANALAC, año XI No.70 Enero-Febrero 1987. 5. Gallego,M.I. Brucelosis Diagnóstico de Laboratorio. I Se minario Regional sobre Brucelosis. Memorias. Manizales ¿O octubre/87. 6. Gallego, M.T. Deleón de,L. Situación de la Brucelosis en Colombia. Simposio sobre Brucel1a y Brucelosis. Memo rias. Va1divia,Chi1e 19-23, octubre 1987. 7 ~ González,G.; Mogol16n, J •. D. ¡Vizcaíno, o. ¡Bustos, F. ; Villa te, J •. E. ¡Rodríguez, G. Enfermedades Preva1entes y Ex6ticas para las Especies Animales en Colombia. Informe Técnico No.50. Bogotá 1987. 8. Marino,O.C.;R.P.Hanson. Ce1lular and humoral response of in Ovo-Bursectomized chickens to experimental challen ge with velogenic Newcastle Disease virus. Avian Disease,v.31.no.2.p. 1987. 9. Mogoll6n,J.D.¡Cort~s,E.¡Galvis de,A.L. Artritis Encefali tis Caprina. Su Prevenci6n y Control. Artículo Divul gativo. Revista ICA-Informa (En prensa)..

(51) , 42. 10. Rave-Valencia,G.¡ Rocha,J.¡Bello G. La investigación en Salud Animal. Laboratorio de Investigaciones Médicas Veterinarias. Plegable Divulgativo. 1987. 11. Rave-Valencia,G. La Protecci6n de la Salud Animal. Exitos del lCA 25 Años. Edición Especial, Revista. • t. ASIAVA,22:118-120. 1987. 12. Rodr1guez,G. An Appraisal of mastitis and the potencial for its control in dairy herds on the Savannah of Bogotá Colombia. University of Reading. Ph.D. Thesis. 254 p. September 1987 • 13. Rueda de C1avijo,O.E. El papel del macr6fago en la respuesta inmune. Revista ICA (En prensa). 14. nl1CdR dA C1Rviin,O.E.;O.C.MRrifio. Evaluaci6n de respuesta inmune en bovinos a proteinas estructurales del virus de la Rinotraqueitis Infecciosa Bo vina. En corrección Revista ICA •. •.

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