PRUSINER,
MONTAGNIER Y
KARY BANKS
Descubrimientos, experimento y aportaciones.
Integrantes:
Vania Guadalupe Baeza Carrillo
Raquel Andrea fierro Varela
Alexa cristina Del real Quezada
STANLEY B. PRUSINER
Antecedentes:
los agentes de enfermedades transmisibles del sistema nervioso central requerían
material genético, compuesto por ácido nucleico (ADN o ARN). Es decir, tenía que haber un virus o un agente infeccioso
concreto que fuese el causante de la enfermedad.
Fue en la década de los setenta cuando un grupo publica un informe en el que sugiere que el agente causante de alguna patología espongiforme podría carecer de ácidos
nucleicos.
¿
Que descubrió?
El experimento:
Stanley B. Prusiner, en 1974, desplegó un laboratorio.
• El primer paso que siguió fue de origen mecánico: se dispuso a purificar el
material infeccioso de los cerebros de animales afectados por la enfermedad y analizó su composición.
• En 1982 ya se habían hecho algunos progresos a través de extractos de cerebro de hámster con la enfermedad.
• Todos los resultados obtenidos hasta el momento apuntaban hacia una
conclusión: el agente infeccioso (y quizá de enfermedades afines) carecía de ácido nucleico y estaba constituido sobre todo, por proteínas. No había ADN ni ARN.
• Cuando Prusiner utilizó técnicas de desnaturalización sobre el misterioso agente
• De este modo, se concluyó que la proteína era un componente esencial del enigmático agente.
• Dado que no se había descrito hasta el momento ningún agente que presentase estas características, Prusiner acuñó un nuevo término para designarlo y lo llamó “Prión”.
La enfermedad
Los priones son responsables de afecciones contagiosas y hereditarias relacionadas con la conformación de las proteínas. Pueden causar también enfermedades
esporádicas letales. Suelen recibir la denominación común de encefalopatías
espongiformes, porque producen en el cerebro adoptar una morfología similar a la de una esponja.
En los animales, los priones causan también la encefalopatía transmisible, la
encefalopatía espongiforme de los felinos y encefalopatías espongiformes del ganado vacuno. Esta última, conocida a menudo con el nombre de “la enfermedad de las
Aportaciones
1. Amplía las posibilidades para una mejor
comprensión de enfermedades como el mal de Alzheimer. (La presencia de estas
moléculas facilita la estabilidad de otra
proteína presente en todas las neuronas, la mielina. Esta sustancia es imprescindible en el funcionamiento del sistema nervioso).
LUC MONTAGNIER
¿Que descubrió?
Descubrimiento del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), causante del sida.
El experimento:
• Experimentaban con la adición de anticuerpos contra interferón a los cultivos de virus en líneas celulares para facilitar su crecimiento, ya que el interferón ejerce un efecto inhibidor en la
• El 3 de enero de 1983 colaborador de Montagnier, obtuvo una biopsia de un ganglio linfático de un paciente joven homosexual con un estado precedente del SIDA.
Procedieron a separar los linfocitos T de este tejido y se preparó un cultivo con IL-2 y con anticuerpos contra interferón. Detectaron indicios de la enzima transcriptasa
reversa (TR) , lo cual señalaba la presencia de un retrovirus.
• Al continuar con esta serie de experimentos los cultivos se expusieron a anticuerpos contra HTLV I y se sometieron a microscopia electrónica. Los resultados revelaron que se trataba de un virus diferente de los virus linfotrópicos de células T hasta ese
• El equipo de Robert C. Gallo lograron la purificación, aislamiento y cultivo, así como el desarrollo de una prueba diagnóstica para el virus.
• También en 1984 se identificó la molécula CD4 como el receptor para el VIH, lo cual explicaba la vía de entrada a la célula, evento de primordial importancia para
entender el ciclo biológico del virus.
• El Subcomité de Retrovirus Humanos presidido por Harold Varmus, publicó en mayo de 1986 una carta en Science donde se propuso el nombre virus de la
inmunodeficiencia humana (VIH)
Aportaciones
KARY BANKS MULLIS
¿Que descubrió?
Desarrollo la prueba de la prueba PCR,
utilizada en ingeniería genética y en pruebas de identidad de personas por su ADN
Kary se pusiera manos a la obra con la búsqueda de la forma de producir
oligonucleótidos para secuenciar mutaciones causantes de ciertas enfermedades depender de la
El experimento:
Observando como los coches discurrían por la autopista de un lado a otro, a Mullis se le ocurrió la idea de utilizar ciclos térmicos repetitivos que permitieran la separación de las dos cadenas del ADN y adiccionar dos oligonucleótidos complementarios al
molde de DNA, que por medio de una operación matemática exponencial, permitirían amplificando dicho molde hasta 100 billones de veces.
• El único problema de partida que le surgió a Mullis fue el de que en cada ciclo había
que añadir la enzima ADN polimerasa, ya que esta se inactivaba con las
• El problema se lo resolvieron dos compañeros de la compañía Cetus quienes fueron
capaces de aislar y purificar la la Taq polimerasa, un tipo de DNA polimerasa termoestable denominada así por su bacteria de origen, la Thermus aquaticus
• Así con un mix de reacción compuesto por: el ADN a amplificar, una solución tampón (con cloruro de magnesio), los nucleótidos necesarios para amplificar, los cebadores, oligonucleótidos y fundamentalmente, la Taq polimerasa, que junto con la aplicación de ciclos térmicos repetitivos, provocaban que se repitieran las aplicaciones de las DNA polimerasas conduciendo a una reacción en cadena de replicación continua para un segmento específico del genoma, la conocida como
PCR o reacción en cadena de la polimerasa.
• Tras varias pruebas con resultados desalentadores, finalmente el 16 de diciembre de 1984, Kary Mullis y su equipo, consiguieron visualizar los productos de amplificación quedando así probada la realización de la amplificación del DNA por medio de la
Aportaciones
La técnica de la PCR tiene multitud de aplicaciones: ya en ciencia básica, como herramienta de detección y/o generación de acervos de fragmentos de ADN de interés; ya en ciencia aplicada, como elemento resolutivo en sí mismo. PCR
