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TECNICAS DE MICROBIOLOGIA Y MEDIOS DE CULTIVOS CELULARES

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Academic year: 2020

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Lcda. Luisauris Jaimes

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La

nutrición microbiana

consiste en aportar a las células los ingredientes químicos que necesitan para la síntesis de monómeros, que son los componentes de las macromoléculas, que a su vez construyen las estructuras celulares.

Monómeros Macromoléculas Estructuras

celulares Monosacáridos Aminoácidos Ácidos grasos Bases nitrogenadas Polisacáridos Proteínas Lípidos Ácidos nucleicos Pared celular Glicocàlix Membrana Ribosomas Flagelo

Pelos y fimbrias Enzimas

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Macronutrientes [ g/l ]

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Micronutrientes o elementos trazas [mg/l o

µg/l]

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Los nutrientes además de estar presentes en el medio

de de cultivo, deben estar

disueltos

para estar

disponibles

para ser usados por la célula.

¿POR QUÉ PUEDEN NO ESTAR DISPONIBLES?

La esterilización por calor. Se debe tener en cuenta

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Los componentes de los medios de

cultivo son de naturaleza química,

desempeñan un rol esencial en los

procesos

Requerimientos del crecimiento:

Formación de productos

Fuministrar energía para la síntesis

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Sintéticos o Definidos

El medio de cultivo

químicamente definido se prepara añadiendo cantidades

precisas de compuestos

orgánicos e inorgánicos puros a un volumen conocido de agua destilada.

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Complejos

Para elaborar el medio complejo

se utilizan hidrolizados de proteínas y otras sustancias muy nutritivas pero no definidas químicamente que se pesan y se añaden a un volumen conocido de agua.

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Medios sólidos

Los medios sólidos se preparan como los medios líquidos y se les añade agar (1.5%) como agente gelificante.

El agar es un polímero sulfatado compuesto por D-galactosa, 3,6-anhidro-L-galactosa y ácido glucurónico.

El agar se funde a 80-90ºC y se puede enfriar hasta una temperatura de 40 a 42 ºC sin endurecerse.

La mayoría de los microorganismos no pueden degradarlo.

El agar se funde durante el proceso de esterilización, el medio fundido se vierte sobre placas Petri y se deja solidificar antes de su uso.

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Efectores intracelulares :

información

genética que posee el MO. Puede ser

modificada por el agregado o extracción de

genes.

Efectores extracelulares

son los factores del

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Agitación

Aeración

formación de espuma

nutrientes del medio

de cultivo

pH

presión osmótica

parámetros físicos

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Medios líquidos

Son los que se presentan en este estado, denominándose por esta razón caldos. El medio líquido más utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente de extracto de carne, peptona y agua.

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Medios líquidos

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Medios Semisólidos

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Medios Selectivos

Favorecen el crecimiento de microorganismos particulares. Ej.,agar Levine (eosina-azul de metileno) y Agar MacConkey se emplean para detectar enterobacterias. Contienen colorantes y sales biliares que inhiben el crecimiento de las bacterias Gram positivas.

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Medios Diferenciales

Medios que diferencian entre grupos distintos de bacterias e incluso permiten una identificación tentativa de los microorganismos según sus características biológicas.

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Medios Diferenciales

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Medios generales

Los medios generales mantienen el crecimiento de muchos microorganismos. Ej., el caldo y agar nutritivo

Medios enriquecidos

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Medios generales

Medios enriquecidos

Cuenta estándar

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Diseño: Elección de los componentes necesarios

para lograr el crecimiento y la formación de

productos

Formulación: Proporciones, concentraciones de

cada componente.

Optimización: Encontrar la mejor formulación para

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Técnicas de diagnostico. Estos anticuerpos

permiten la realización de pruebas y reacciones mas

especificas, sensibles y estandarizadas.

Estudio y tipificación de la estructura y morfología

de patógenos, contribuyendo al desarrollo de

vacunas.

Terapia en el caso de enfermedades, autoinmunes y

cáncer.

Transplantes.

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El término cultivo in vitro es un término muy genérico que se

refiere más bien a la metodología usada que al propio objetivo de ese método. En sentido estricto, in vitro quiere decir "dentro de vidrio", es decir, el cultivo de plantas o de alguna de sus partes (pero también de células y tejidos animales) dentro de recipientes de vidrio en condiciones de ambiente controlado.

El cultivo en medio nutritivo, bajo condiciones estériles, de plantas, semillas, embriones, órganos, tejidos, células y protoplastos de plantas superiores

Cultivo

in vitro

de plantas

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Algunas de las medicinas más importantes o sus

precursores derivados de plantas y sus ventas en el 2002

Nombre Tipo Origen Uso terapéutico Alcaloides: ventas proyectadas para el 2002: 4045 millones US$

Hiosciamina, escopolamina

Alcaloides del tropano Solanaceas Anticolinérgicos Camptotecina Alcaloide indólico Camptotheca

acuminata

Antineoplásico Capsaicina Alcaloide fenilalquilamino Capsicum spp. Analgésico local Codeína, morfina Alcaloide opiáceo Papaver somniferum Analgésico Colchicina Alcaloide isoquinolinico Colchicum autumnale Antigota

Galantamina Alcaloide isoquinolinico Leucojum aestivum Inhibidor coliesterasa Pilocarpina Alcaloide imidazólico Pilocarpus jaborandi Colinérgico

Nicotina Alcaloide pirrolidínico Nicotiana spp. Terapia antitabaco Quinina Alcaloide quinolínico Cinchona spp. Antimalárico Quinidina Alcaloide quinolínico Cinchona spp. Cardiotónico

Reserpina Alcaloide indólico Rauwfolia serpentina Antihipertensivo, psicotrópico Vinblastina,

vincristina

Alcaloide indólico Catharanthus roseus Antineoplásico Yohimbina Alcaloide indólico Apocynaceae,

Rubiaceae

Afrodisíaco

Terpenos y esteroides: ventas proyectadas para el 2002: 12400 millones US$

Artemisinina Lactona sesquiterpénica Artemisia annua Antimalárico

Diosgenina, Esteroides Dioscorea spp. Hormonas esteroidales Taxol Diterpenos Taxus brevifolia

Glicósidos: ventas proyectadas para el 2002: 9230 millones US$

Digoxina, digitoxina Glicósidos esteroidales Digitalis spp. Cardiotónico Sennósidos A y B Antracenos Cassia angustifolia Laxante

Otros: ventas proyectadas para el 2002: 5014 millones US$

Ipecac Mezcla de alcaloides de ipecacuana

Cephaelis ipecacuanha

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