Uso del orégano (origanum vulgare) en el control de (salmonella typhimurium) en pollos de engorde

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(1)UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZAN ESCUELA DE POSGRADO. _____________________________________________________ USO DEL ORÉGANO Origanum vulgare EN EL CONTROL DE Salmonella typhimurium EN POLLOS DE ENGORDE ______________________________________________________ TESIS PARA OPTAR EL GRADO DE DOCTOR EN MEDICINA VETERINARIA. TESISTA : M.SC ROSEL APAÉSTEGUI LIVAQUE. ASESOR : DRA. MARÍA VILLAVICENCIO GUARDIA. HUÁNUCO – PERÚ 2017.

(2) ii. DEDICATORIA A DIOS Con amor y gratitud a la memoria de mi madre Lucila Livaque Pósito. A mi esposa Consuelo, mis hijos Hypatia y Lenin, por su comprensión y paciencia por las horas que dejé de compartir con ellos.

(3) iii. AGRADECIMIENTO  A Dios por darme la vida y la salud para la culminación de la tesis.  A la Dra. María Villavicencio Guardia, por el apoyo, dedicación en la ejecución y culminación de la presente tesis.  A mi esposa Consuelo y mis hijos por haberme apoyado para la culminación de la presente tesis.  A todas las personas que de una y otra forma colaboraron en la culminación de la presente tesis..

(4) iv. RESUMEN Objetivo: Demostrar el uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde.Métodos: Se realizó una hembras. investigación experimental, con 60 pollos de. engorde machos y. de la Línea Cobb500 en los galpones de aves de la. Facultad de. Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Hermilio Valdizan de Huánuco, durante el periodo. de setiembre a diciembre del 2016. Se formó 4. grupos de 15 pollos cada uno; tres experimentales donde se administró 0,5; 1,0 y 1,5 mL de aceite esencial de orégano y un grupo control los cuales no recibieron el estímulo experimental. Los datos se. obtuvieron mediante una guía de. observación. Para el análisis inferencial de los resultados se utilizó la prueba de ANOVA y prueba de medias se utilizó Duncan. Resultados: Se encontraron diferencias significativas entre los grupos experimentales 1: 0,5 mL; grupo experimental 2:1,0 mL y grupo experimental 3: 1,5 mL. ( p ≤0,0001) durante 5,. 15 y 25 días pos inoculación en el control de Salmonella typhimurium. Los mejores resultados se obtuvieron de los animales que recibieron 1.5 mL aceite. de. esencial de orégano por litro de agua con una diferencia estadística. significativa (p≤0,0001). Conclusiones: El aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) extraído de laboratorio a dosis de 1,0 y 1,5 mL tiene efecto significativo en el control de salmonelosis durante 5, 15 y 25 días pos inoculación. Palabras claves: Origanum vulgare, Salmonella typhimurium, pollos de engorde..

(5) v. ABSTRACT Objetive:To demonstrate the use vulgare). on. the. control. of. of the essential oil of oregano (Origanum Salmonella. typhimurium. in. fatten. up. chicken.Methods: It was made an experimental research, with 60 chickens for fattening of the Cobb 500 in the birds’ shed of the Faculty University of Huanuco, during the period of 2016. It was formed 4 groups of chickens each, three experimentals where it was administed 0,5; 1,0 and 1,5 mL of essential oil of oregano, and a control group who did not recibe experimental stimulation.The data were obtained through an observation guide. For the inferential analysis of the results it was used the ANOVA proof and proof of halves were used Duncan.Results: We found significant differences between experimental group 1(0.5 mL) experimental group 2 (1.0 mL) and experimental group 3,( 1.5 mL) ( p ≤0,0001), during 5, 15 and 25 days post inoculation in the control of Salmonella typhimurium. The best results were obtained form the animals that recived 1.5 mL of essential oil of oregano for liter wáter, whit a significant difference ( p≤ 0,0001).Conclusiones: Oregano essential oil (origanum vulgare) extracted from the laboratory at doses of 1.0 and 1.5 mL has a significant effect on the control of salmonellosis during 5, 15 and 25 days. Key words: Origanum vulgare, Salmonella typhimurium, chickens..

(6) vi. RESUMO Objetivo: Demonstrar o uso do óleo essencial de orégano (Origanum vulgare) relativo o controle de salmonelas typhimurium em engorde de frango.Métodos: Foi feita uma pesquisa experimental, com 60 frangos de engorde de Cobb 500 no galpão de aves da Facultad de Medicina Veterinaria e Zootecnia da Universidad Nacional Hermilio Valdizan de Huánuco, durante o período de 2016. Formou-se 4 grupos de 15 cada, Três frangos experimentais onde se administrado 0,5; 1,0 e 1,5 mL de óleo esencial do oregano e um grupo controle que não recebeu o estímulo experimental, os dados foram obtidos por meio de uma guía de observação. Para o. análise inferencial dos resultados foi. utilizada a prova. ANOVA e a prova de medias utilizou-se Duncan. os melhores resultados foram obtidos dos animais que receberam 1.5 mL uma diferença significativa (0,0001). Resultados: Encontramos diferenças significativas nos grupos experimentais 1 (0,5 mL) e 2 (1.0 mL) durante Salmonelas. 5, 15 e 25 dias após inoculação no controle da. typhimurium.). Conclusões: O óleo essencial de orégano. (origanum vulgare) extraído do laboratório em doses de 1,0 e 1,5 mL tem um efeito significativo no controle da salmonelose durante 5, 15 e 25 dias. Palavras-chave: Origanum vulgare, Salmonella typhimurium, frango..

(7) vii. INTRODUCCIÓN En Latinoamérica la salmonelosis, es una enfermedad que en general, está controlada en aves reproductoras, aún suelen ocurrir brotes en granjas de gallinas ponedoras y pollitos jóvenes, como los ocurridos en Brasil y Argentina1 En Perú se encuentra presente en algunos lugares y en ciertas ocasiones se presentan brotes inesperados causando serias pérdidas económicas reflejadas en alta mortalidad y bajos rendimientos en los parámetros productivos2. La salmonelosis tiene. implicancia. en el mercado. nacional e internacional. particularmente en productos destinados al consumo humano o animal como huevos, carnes y harinas, en la actualidad los países exportadores de agro alimentos están siendo cada vez más exigidos por los países compradores para que ofrezcan productos libres de salmonellas de cualquier serovariedad; la presencia de salmonella puede ser causa frecuente de decomisos con una notable pérdida de valor de los productos alimenticios contaminados3 Para prevenir la diarrea de los pollos de engorde se usan promotores de crecimiento como. los antibióticos. que. mejoran la. eficiencia. productiva,. extractos de plantas y enzimas4 que ejercen efectos nutricionales en la salud de los pollos. La terapia natural y la industria de la medicina alternativa han utilizado extractos de plantas. y aceites esenciales, como sustancias naturales con. propiedades farmacéuticas en los humanos, su utilización en avicultura con la finalidad de prevenir enfermedades diarreicas, se consideran relativamente nuevas5. Así mismo, se afirma que los mecanismos de acción de compuestos presentes en los productos botánicos podrían inducir distintos efectos como activación del consumo de alimento, secreción de jugos digestivos, estimulación del. sistema. antioxidantes6. inmunitario,. efectos. antibacterianos,. antiinflamatorios. y.

(8) viii. La Organización Mundial de la Salud demuestra que entre 35.000 a 70.000 especies de plantas son actualmente usadas para fines medicinales, cifra que es marginal (14-28%) frente a las 250.000 especies de plantas disponibles universalmente con estas características. En este escenario un país mega diverso como Perú tiene amplias posibilidades para utilizar gran variedad de plantas y sus aceites esenciales como aditivos funcionales en el tratamiento de enfermedades bacterianas en las aves domésticas. Para este caso, el orégano asociado de manera estratégica con la fito medicina, ha demostrado contener poderosos compuestos anti-microbianos y antioxidantes con un amplio potencial para generar soluciones innovadoras a diferentes problemas y requerimientos de la industria avícola y del consumidor. Estas plantas medicinales pueden ser utilizadas como complemento alternativo a las diversas patologías de las aves domésticas especialmente la Salmonella typhimurium7 El presente trabajo de investigación tiene como finalidad demostrar el efecto del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde, dicha investigación fue desarrollada en el departamento de Huánuco durante el periodo de 2016, el mismo que aportó hallazgos importantes acerca del efecto antibacteriano de los aceites esenciales del orégano a diferentes dosis ( 0,5; 1,0 y 1.5 mL por litro de agua) en los grupos experimentales 1,2 y 3 respectivamente, que controlaron a la Salmonella typhimurium a partir de los 5, 15 y 25 días pos inoculación en los diferentes órganos e intestinos. El trabajo de investigación está dividido en cinco (05) capítulos: Capítulo I: Se refiere al problema de investigación, que comprende la descripción del problema, formulación del problema, los objetivos, las hipótesis, las variables,.

(9) ix. la justificación e importancia, así como la factibilidad y limitaciones del presente trabajo de investigación. Capítulo II: Menciona los aspectos teóricos y epistemológicos que respaldan la investigación con el marco teórico, el cual incluye los antecedentes de la investigación; las bases teóricas que sirvieron para el sustento y afianzamiento del problema planteado, las definiciones conceptuales y las bases epistémicas. Capítulo III: Se desarrollan aspectos importantes como el metodológico, es donde se describe la metodología de la investigación la cual está compuesta de las siguientes partes: tipo de estudio, diseño, población y muestra y las técnicas de recolección, procesamiento y análisis de datos. Capítulo IV: Está referido principalmente a la exposición de los resultados, donde se presentan los resultados obtenidos estadísticas descriptivas. y procesados mediante técnicas. e inferenciales que nos sirvieron para describir y. comparar cada uno de los tratamientos usados para el presente trabajo experimental. Capítulo V: Se refiere a la discusión de los resultados el cual nos sirve para comparar y discutir teóricamente nuestros resultados obtenidos con otros investigadores. Finalmente se discuten las conclusiones, recomendaciones, las referencias bibliográficas y los anexos. El autor.

(10) x. INDICE DE CONTENIDO. Pág.. DEDICATORIA. ii. AGRADECIMIENTO. iii. RESUMEN. iv. ABSTRAC. v. RESUMO. vi. INTRODUCCIÓN. vii. CAPITULO I EL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN. 15. 1.1 Descripción del problema. 15. 1.2 Formulación del problema. 17. 1.3 Objetivos. 17. 1.4 Hipótesis. 18. 1.5 Variables. 19. Operacionalización de las variables 1.6 Justificación e importancia. 20. 1.7 Viabilidad. 22. 1.8 Limitaciones. 22. CAPITULO II MARCO TEORICO. 23. 2.1 Antecedentes del problema. 23. 2.2 Bases teóricas. 27. 2.3 Salmonella typhimurium. 32. 2.4 Fisiopatología de la diarrea en aves 2.5 Definiciones conceptuales. 35 37 39. 2.6 Bases epistemológicas. CAPITULO III MARCO METODOLOGICO. 42. 3.1 Tipo de estudio. 42. 3.2 Nivel de investigación. 42.

(11) xi. 3.3 Diseño de esquema de la investigación. 42. 3.4 Población y muestra. 43. 3.5 Instrumentos de recolección de datos. 46. 3.6 Técnicas de Recojo, Procesamiento y Procesamiento de datos de los pollos. 46. 3.7 Análisis o comprobación estadística. 50. CAPITULO IV RESULTADOS. 51. 4.1 Análisis descriptivo de resultados. 51. 4.2 análisis inferencial de resultados. 51. CAPITULO V DISCUSIÓN DE RESULTADOS. 66. CONCLUSIONES. 70. SUGERENCIAS. 71. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 72. ANEXOS. 76.

(12) xii. ÍNDICE DE TABLAS Tabla 1: Distribución de los animales según la dosis de aceite de orégano en el control de Salmonella typhimurium. 45. Tabla 2: Unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium en diferentes muestras de pollos de engorde, en función a dosis de aceite esencial de orégano y diferentes tiempos.. 52. Tabla 3: Interacción de dosis de aceite de orégano versus tiempo para unidades formadoras de colonias ( UFC) de Salmonella typhimurium en heces de pollos: Prueba de comparación de medias Duncan. 53. Tabla 4: Prueba de comparación de medias Duncan para unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium en hígado de pollos tratados con aceite esencial de orégano.. 54. Tabla 5: Prueba de comparación de medias Duncan para unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium en bazo de pollos tratados con aceite esencial de orégano.. 55. Tabla 6: Prueba de comparación de medias Duncan para unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium en vesícula de pollos tratados con aceite esencial de orégano.. 56. Tabla 7: Prueba de comparación de medias Duncan para unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium en duodeno de pollos tratados con aceite esencial de orégano.. 57. Tabla 8: Prueba de comparación de medias Duncan para unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium en yeyuno de pollos tratados con aceite esencial de orégano.. 58. Tabla 9: Prueba de comparación de medias Duncan para unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium en íleon de pollos tratados con aceite esencial de orégano.. 59.

(13) xiii. Tabla 10: Prueba de comparación de medias Duncan para unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium en intestino grueso de pollos tratados con aceite esencial de orégano.. 60. Tabla 11: Lesiones anatopatológicas en pollos de engorde tratados con aceite esencial de orégano en el control de Salmonella typhimurium.. 62. Tabal 12: Promedio de mortalidad y sobre vivencia de pollos de engorde tratados con aceite esencial de orégano.. 63. Tabla 13: Número de aislamientos e identificación bioquímica de Salmonella typhimurium en heces pollos de engorde tratados con aceite esencial de orégano.. 64. Tabla 14: Total de muestras positivas a Salmonella typhimurium en diferentes órganos e intestinos de pollos de engorde.. 65.

(14) xiv. ÍNIDICE DE FIGURAS Fig. 1: Esquema del diseño de investigación. 45. Fig. 2: Posición de cúbito dorsal de un pollo. 117. Fig. 3: Corte de piel desde la cloaca hasta la base del pico. 117. Fig. 4: Exposición de la parte ventral del pollo. 118. Fig. 5: Exposición de los órganos de la cavidad abdominal. 118. Fig. 6: Exposición de los órganos internos de la cavidad abdominal de un pollo alimentados con aceite esencial de orégano. 119. Fig. 7: Hígado normal de un pollo alimentado con aceite esencial de orégano. 119. Fig. 8: Hígado con focos necróticos de un pollo del grupo control. 120. Fig. 9: Bazo aumentado de tamaño. 120. Fig. 10: Acumulación de fibrina en el peritoneo de un pollo del. 121. grupo control Fig. 11: Enteritis hemorrágica intestinal en un pollo del grupo control. 121. Fig. 12: Enteritis hemorrágica aguda de un pollo del grupo control. 122. Fig. 13: Cogestión renal de un pollo del grupo control. 122. Fig. 14: Congestión renal aguda de un pollo del grupo control. 123.

(15) CAPITULO I EL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN. 1.1. Descripción del Problema. La salmonelosis en las aves y en el ámbito mundial, está asociada con mucha frecuencia a las enfermedades diarreicas, las cuales continúan siendo una de las causas más importantes de morbilidad y mortalidad sobre todo en los pollos jóvenes. Se ha estimado que, en algunos lugares del Perú, dependiendo de factores socioeconómicos y nutricionales, la probabilidad de que los pollitos mueran por una enfermedad diarreica antes de los 7 días puede llegar al 90%. Las infecciones agudas del tracto gastrointestinal están consideradas como una de las enfermedades más frecuentes en la avicultura en el Perú8 Actualmente existe gran interés mundial sobre la salmonelosis aviar por la facilidad con que pueden ser trasmitidas al hombre. De todas las enfermedades infecciosas aviares es ésta la más importante desde el punto de vista de su transmisión a las personas, la avicultura es cada día más extensa por todo el orbe y el consumo mundial de huevos aumenta sin cesar, se tiene el interés por esta enfermedad por los daños que causa en las aves de cualquier edad9 Las infecciones con bacterias del género Salmonella causan enfermedades agudas y crónicas en la industria avícola; de hecho, las aves afectadas representan uno de los reservorios más importantes de salmonellas que pueden ser trasmitidas en la cadena alimenticia, con más frecuencia que de cualquier otra especie. Las estrategias de control de las enfermedades de las.

(16) 16. aves se han basado principalmente en la quimioprofilaxis de los procesos entéricos ocasionados por Salmonella sp y Shigella sp, las cuales ocasionan pérdidas económicas por millones de dólares anuales para la industria avícola nacional y mundial; en los EE.UU, se estima que 1,6 millones de personas contraen salmonelosis y el costo anual de esta enfermedad incluyendo la pérdida de productividad es de 5 millones de dólares10 En los últimos años la avicultura ha crecido vertiginosamente, estimándose que gran parte del consumo de proteína de origen animal de la población es aportada por la industria avícola; sin embargo uno de los problemas más comunes que afronta la avicultura es la salmonelosis producida por Salmonella typhimurium, caracterizada por una marcada variación en la morbilidad y mortalidad, lesiones y signos clínicos patognomónicos, además causa grandes pérdidas económicas por su alta mortalidad en pollos jóvenes y porque su diagnóstico en una granja implica necesariamente la eliminación de las aves afectadas10 Las infecciones con bacterias del género Salmonella causan enfermedades agudas y crónicas en la industria avícola; de hecho las aves afectadas representan uno de los reservorios más importantes de salmonellas que pueden ser trasmitidas en la cadena alimenticia, con más frecuencia que de cualquier otra especie, el aislamiento de Salmonella typhimurium y E. coli, tanto de aves como de productos avícolas11. Las infecciones por salmonella ocurren en todos los países del mundo y en especial en aquellos que se dedican a la explotación avícola, como el nuestro, produciendo pérdidas considerables a la economía pecuaria causando hasta un 95% de mortalidad en pollos de engorde. La importancia. de. la salmonelosis. se. ve. acrecentada por el riesgo que representan en el aspecto de salud.

(17) 17. pública. En el Perú se presenta en forma esporádica cuando no se tiene en cuenta las medidas profilácticas y en la región Huánuco la salmonelosis ocurre también en forma esporádica en la explotación avícola; siendo frecuente en pollitos jóvenes llevando a trastornos digestivos ocasionando grandes pérdidas económicas hasta un 90% en la producción de pollos12. 1.2. Formulación del Problema Problema General  ¿Cómo es el efecto de los vulgare) en el. aceites esenciales de orégano (Origanum. control de Salmonella typhimurium en pollos de. engorde? Problemas específicos:  ¿Cómo es el efecto de los aceites esenciales de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 0.5 mL/litro de agua; en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde?  ¿Cómo es el efecto de los aceites esenciales. de orégano (Origanum. vulgare) en la dosis de 1.0 mL/litro de agua; en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde?  ¿Cómo es el efecto de los aceites esenciales de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 1.5 mL/litro de agua; en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde?. 1.3. Objetivos: Objetivo General:  Demostrar el uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde..

(18) 18. Objetivos Específicos:  Evaluar el uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 0.5 mL/litro de agua; en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde.  Evaluar el uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 1.0 mL/litro de agua; en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde.  Evaluar el uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 1.5 mL/litro de agua; en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde.. 1.4. Hipótesis a. Hipótesis General:  Ha: El uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) controla a la Salmonella typhimurium en pollos de engorde.  Ho: El uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare ) no controla a la Salmonella typhimurium en pollos de engorde. b. Hipótesis Específicas:  Ha1: El uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 0.5 mL/litro de agua controla a la Salmonella typhimurium en pollos de engorde.  H01: El uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 0.5 mL/litro de agua no controla a la typhimurium en pollos de engorde.. de Salmonella.

(19) 19.  Ha2: El uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 1.0 mL/litro de agua controla a la Salmonella typhimurium en pollos de engorde.  H02: El uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 1.0 mL/litro de agua no controla a la Salmonella typhimurium en pollos de engorde.  Ha3: El aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 1.5 mL/litro de agua controla a la Salmonella typhimurium en pollos de engorde pollos de engorde.  H03: El uso del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en la dosis de 1.5 mL/litro de agua no controla a la Salmonella typhimurium en pollos de engorde.. 1.5. Variables: a. Identificación de Variables.  Variable Independiente: Aceite esencial de Origanum vulgare . Variable Dependiente: Control de Salmonella typhimurium.

(20) 20. b. Operacionalización de las Variables. Tipo de Nombre. Indicadores. variable. Indicadores. Cuantitativa. Tiempo días. Fuente. Variable independiente Aceite esencial 0.5 Aceite esencial de orégano. mL/litro de agua Aceite esencial 1.0 mL/litro de agua Aceite esencial 1.5 mL/litro de agua Guía de. Variable dependiente. observación. Disminución de ufc/g Control de Salmonella typhimurium. de muestra de heces. Disminución ufc/ g de muestra de diferentes. 5 Cuantitativa. órganos e intestino. 15 25. 1.6. Justificación e importancia. El presente trabajo de investigación se justifica por las siguientes razones: En la actualidad se están utilizando los promotores de crecimiento naturales en la alimentación de las aves y en el tratamiento de enfermedades diarreicas producidas por salmonellas. El consumidor demanda carne de pollos de alto valor proteico y bajo niveles de grasa, se conjetura que este beneficio se podría obtener al utilizar los aceites esenciales del orégano adicionado a la dieta de los pollos de carne con lo que se beneficiaran los avicultores de la región13 Existen evidencias en todo el mundo que el uso de antibióticos utilizados en el tratamiento de las enfermedades entero patógenas de las aves domésticas.

(21) 21. ha incrementado la resistencia de las cepas bacterianas, siendo actualmente restringido su uso por ser potencialmente peligroso para la salud humana 14 El Perú un país con una biodiversidad botánica muy amplia por los diversos pisos ecológicos que son excelentes para producir estas plantas y obtener aditivos con valor competitivo en el campo de la medicina alternativa y con los resultados encontrados en el trabajo va a tener una repercusión fundamental para dejar de utilizar los antibióticos como promotores de crecimiento en la industria avícola nacional y mundial15. La importancia medicinal del orégano por sus propiedades antibacterianas, sus extractos de hojas, cuya composición fitoquímica ha sido evaluada frente a ciertos microorganismos, han permitido obtener aceites que ya se han patentado con efecto antibacterial y se considera como una alternativa en la prevención de las enfermedades entéricas de las aves domésticas y mamíferos en general15 Se han desarrollado diversas alternativas, entre las que se encuentra el uso de prebióticos, pro bióticos, ácidos orgánicos, enzimas, extractos de plantas, aceites esenciales y aditivos fitogénicos,. para mejorar la salud y el. comportamiento de los animales16 La salmonelosis es una enfermedad de alto riesgo en las aves, ocasiona grandes pérdidas millonarias de soles a la avicultura, con la utilización de los aceites esenciales del Orégano en el agua de bebida se estaría controlando a la enfermedad17. Los resultados encontrados en la presente investigación va a contribuir al desarrollo de una industria avícola tecnificada con la utilización de aceites esenciales de orégano como un aditivo natural en la profilaxis. de las enfermedades entéricas entre ellas la Salmonella. typhimurium.

(22) 22. No existen reportes sobre trabajos relacionados al uso de orégano (Origanum vulgare) en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde en Huánuco.. 1.7. Viabilidad. La crianza de pollos de carne es una actividad pecuaria muy difundida a nivel local, nacional y mundial proporcionando proteína de origen animal a las mayorías de bajo recursos económicos. Por lo tanto fue factible su ejecución del trabajo de investigación, por el aporte científico de la planta, además que en nuestra región se encuentra disponible a bajo costo. Además, se contó con el potencial humano, materiales necesarios para la ejecución del trabajo de investigación.. 1.8. Limitaciones. Existe escasa información sobre trabajos relacionados al uso del orégano en la dieta de los animales especialmente en las aves domésticas en Huánuco. La falta de interés de parte de la población hace que esta crianza se desarrolle en forma deficiente y los índices productivos sean inferiores a los estándares normales de la crianza tecnificada y por lo tanto la presentación de las enfermedades entéricas..

(23) CAPITULO II MARCO TEORICO 2.1. Antecedentes de la investigación. Antecedentes internacionales Suarez, H18 (México, 2009) manifiesta que los recientes hallazgos de cepas multirresistentes de bacterias zoonóticas como salmonella aumentaron los niveles de preocupación en los organismos sanitarios y públicos en general, asimismo realizó un trabajo de investigación para la determinación de salmonella en 600 muestras de huevos y 100 muestras de hígado de aves sacrificadas, provenientes de dos empresas de la ciudad de Monterrey (México) las cuales representan el 90% del mercado de esta ciudad, como resultado del estudio se aisló Salmonella enteritidis del 60% de la muestra de huevos y 80% de Salmonella typhimurium de las muestras de hígados Patric y Holk19 (Cuba, 2011), Evaluaron la inclusión de aceites esenciales de orégano en dosis de 0.75 mL por litro de agua en la alimentación de pollos de carne, con la finalidad de prevenir la presentación de cualquier trastorno digestivo. especialmente. las. diarreas. ocasionadas. por. Salmonella. typhimurium; quienes concluyen que se puede administrar hasta 2 mililitros por litro de agua, sin afectar el comportamiento productivo de las aves, así mismo manifiestan que estos resultados se deben. a la presencia de. flavonoides los cuales tienen efecto bactericida. Lafita, H20 (Cuba, 2012), Evaluó la inclusión de 10, 20 y 30 % de harina de frutos del árbol del pan, como sustituto del maíz en piensos para pollos de ceba y gallinas de postura. Llegó a la conclusión que se debe incluir como.

(24) 24. máximo 20%, mejorando los parámetros productivos de los pollos, asimismo disminuyendo. los. trastornos. digestivos. presentados. por. Salmonella. typhimurium; el mismo autor manifiesta que utilizando el 20% de harina de frutos del árbol de pan en la dieta para ponedoras eliminó grandes cantidades de unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella enteritidis, Klebsiella spp y Clositridium sp a través de las heces. Quispe, C21 ( España, 2008), en su trabajo de investigación con pollos y pavos en la etapa de acabado demostró que la vitamina E puede ser utilizado de una manera efectiva para reemplazar a los antibióticos promotores de crecimiento, en dosis de 90 mg por kilogramo de alimento adicionada a la dieta de pollos de engorde, obtuvo un peso vivo de 2.4 kg a los 42 días de edad, y en pavos 10 kilos de peso vivo a las 20 semanas; sin embargo utilizando dosis de 60 mg por kilogramo de alimento obtuvo una conversión alimenticia de 2.2 y una mortalidad de. 1% ocasionada por Salmonella. typhimurium Food Net22 (EEUU, 2014), En un trabajo de investigación demostró que la salmonelosis origina hasta el 90% de mortalidad en pollitos de 10 días de edad, los cuales manifestaron grados de susceptibilidad a la enfermedad, también observó una diarrea blanquecina alrededor de la cloaca y a la necropsia encontró esplenomegalia y hepatomegalia, lesiones características de la Salmonella typhimurium Bayer, Lab23 (Colombia, 2016), Al orégano se le considera, no sólo como una alternativa para sustituir a los antibióticos promotores del crecimiento y evitar la presentación de enfermedades diarreicas en las aves domésticas, sino también como medio para obtener incremento en la eficiencia y palatabilidad en sistemas donde se utilicen subproductos y alimentos de.

(25) 25. escaso. valor. nutricional,. que. generalmente. tienden. a. afectar. el. comportamiento animal. Los extractos de plantas probablemente son los productos más antiguos utilizados en. medicina humana, pero su uso en. Medicina Veterinaria es relativamente nueva y los aceites esenciales de las plantas son metabolitos secundarios que generalmente ejercen una función de defensa de las plantas frente a agresiones externas, por otra parte poseen distintas propiedades como son antioxidantes, estimulantes en la función hepática y de producción de enzimas digestivas. Jawets, P24 ( Colombia, 2013), En su trabajo de investigación realizado en una crianza de aves de postura, demostró que el extracto de orégano utilizado a una dosis de 20 mg por kilogramo de alimento obtuvo excelentes resultados en control de enfermedades entéricas; además manifiesta que el orégano posee. flavonoides,. antibacterianas. los. cuales. son. y además refuerzan. considerados. como. sustancias. la colonización y el predominio. de. bacterias ácido lácticas en el intestino delgado de las aves, evitando de esta manera la invasión de las bacterias E. coli y Salmonella typhimurium Hans, U25 (Uruguay, 2007), Manifiesta que los aceites del orégano actúan como antioxidantes, su efecto se produce sobre los ácidos grasos no saturados como el araquidónico, evitando en los animales el desarrollo de la encefalomalacia y distrofia muscular generada por la oxidación de grasas. Sus investigaciones ejecutadas demostraron la utilidad terapéutica que poseen los extractos de plantas. como alcachofa conocida por sus. propiedades hepatoprotectoras, el orégano por poseer el carvacrol y timol con acción antioxidante, incremental el flujo biliar que es necesario para el pollo. Se considera importante en la avicultura por sus efectos benéficos en la prevención de las enfermedades diarreicas ocasionadas por salmonellas..

(26) 26. Cardona, F26 (Argentina, 2013), Las salmonellas infectan a los animales y al hombre vía oral, las cuales deben pasar las barreas y las células del hospedador en lugares específicos del intestino delgado; una proporción de microorganismos resisten el pH bajo del estómago alcanzan el íleon, ciego y penetran a las células epiteliales, invaden la mucosa y se replica en la submucosa y en placas peyer presentándose hipertrofia e hiperplasia retículo endotelial; así mismo manifiesta que en las hojas de orégano se encuentran flavonoides de acción bactericida. A nivel nacional. Carlos, et al27 (2012), en su trabajo de investigación “Evaluación del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) y extracto deshidratado de Jengibre ( Zinziber officinale) como potenciales promotores de crecimiento en pollos de engorde”, en la ganancia de peso, consumo de alimento e índice de conversión alimenticia en dosis de aceite esencial de orégano (1 kg/ TM), Jengibre deshidratado (10 kg/TM) en comparación. con la utilización de. bacitracina disalicilato metileno (1 kg/TM) de alimento y sulfato de colistina 8% (0.25 kg/TM), no encontraron diferencia estadística en peso, consumo de alimento ni conversión alimenticia entre grupos experimentales, además concluyen que el uso de aceite esencial de orégano y Jengibre deshidratado como. promotores. de. crecimiento. no. difieren. de. los. tratamientos,,. probablemente por el bajo reto sanitario. Gaspar Hernández, K28 (Ayacucho, 2013), En su trabajo de tesis Titulada “Efecto del extracto de orégano (Origanum vulgare) en dosis de 250 mg por kilogramo de alimento en el control de diarreas ocasionada por E. coli en lechones”, comparó el efecto del extracto de orégano con un antibiótico comercial antidiarreico (enrofloxacina 10%); llegando a la conclusión que el.

(27) 27. extracto de orégano disminuyó la diarrea durante el tiempo de tratamiento de los animales, gracias al aceite esencial de orégano que favorece el mantenimiento de Lactobacilos en el tracto gastroentérico que impide el desarrollo de bacterias entéricas. Tapia Meza, P29 (Tumbes, 2012), en su trabajo de investigación demostró que el extracto de orégano utilizado en la dieta para aves de postura, controla a las enfermedades diarreicas, lo cual aumentó hasta 90% la producción de huevos; en comparación a la producción de las ponedoras que no recibieron el extracto de la planta, que sólo alcanzaron un 70%, asimismo manifiesta que se presentaron diarreas y al realizar los cultivos microbiológicos encontraron Salmonella typhimurium que ocasionó una mortalidad de 65% A nivel local No se han reportado ninguna investigación con la utilización del orégano en la alimentación de las aves.. 2.2. Bases teóricas. En la actualidad grandes sectores de la población peruana y específicamente en las zonas rurales de la región de todo el Perú, vienen utilizando, a través de muchas generaciones transmitidas de padres a hijos el uso de las plantas medicinales; hojas, flores, semillas cortezas, raíces, etc con propiedades curativas en forma de infusión, cocimiento, baños, emplastos, frotaciones y otros30 El uso de la medicina natural está al alcance de la población social y económicamente menos favorecida; por otra parte, sabemos que las plantas no ejercen acción en algunas enfermedades como la tuberculosis, neumonías, etc., por lo tanto, se orienta y se educa a la población que en.

(28) 28. dichos casos utilice la medicina científica, como es el uso de vacunas, sustancias antioxidantes y antibióticos31 El término "medicina tradicional" surgió relacionado principalmente con la antropología y la sociología ante la necesidad de denominar al conjunto de conceptos, prácticas y recursos utilizados por la cultura de una comunidad que se encuentra al margen, en interacción o contrapuesto a la medicina universitaria e institucional. La organización mundial de la salud OMS define la "medicina tradicional" como el conjunto de todos los conocimientos teóricos y prácticas, sean susceptibles de explicación o no, utilizados para prevenir, diagnosticar y eliminar los desequilibrios físicos, mentales o sociales de generación en generación31 El orégano ha sido utilizado desde tiempos antiguos, tanto es cierta esa afirmación que en la mitología griega se cuenta que la hierba fue creada por la diosa Afrodita para hacer más feliz al ser humano. Con la conquista de Grecia por los romanos, su uso se esparció por todo el imperio y los doctores de la antigüedad descubrieron sus beneficios. Los usos del orégano en los tiempos romanos y en la Edad Media eran muchos y se empleaba para darle sabor a la carne, así como por sus propiedades medicinales entre las cuales se destacaba masticar las hojas para aliviar dolores reumáticos, dolores de encías y dientes, indigestión y hasta supresor de la tos. Los beneficios conocidos en la antigüedad son pocos comparados con lo que la ciencia moderna ha descubierto32 2.2.1. Clasificación Taxonómica del orégano. Reino. : Plantae. Sub reino. : Tracheobionta. División. : Magnoliophyta.

(29) 29. Clase. : Magnoliopsida. Orden. : Lamiales. Familia. : Lamiaceae. Subfamilia. : Nepetoideae. Tribu. : Mentheae. Género. : Origanum. Especie. :O. vulgare33. 2.2.2. Propiedades farmacológicas del orégano: El uso de orégano tiene muchos beneficios, ya sea en harinas o extractos como aditivo. en la alimentación de los animales domésticos por sus. propiedades benéficas33. 2.2.3. Propiedades antioxidantes: El orégano contiene timol y ácido rosmarinico que ayudan al cuerpo a disminuir los efectos de los radicales libres, que son los responsables del envejecimiento celular33 2.2.4. Propiedades anti fungicidas: Ha sido utilizado históricamente como preservante alimenticio y sus credenciales para combatir hongos es impresionante. El orégano ha sido exitosamente utilizado en preparaciones tomadas y aplicadas para combatir hongos y levaduras como cándida albicans33 2.2.5. Propiedades antibióticas del orégano: Un fenol en el orégano llamado carvacrol ha generado gran interés en la comunidad científica por su alto potencial para eliminar bacterias. Estudios preliminares de la universidad de Gerogetown sugieren que el carvacrol puede incluso ser más potente que la penicilina y estreptomicina. Un estudio científico aún más interesante de la universidad de Western England en.

(30) 30. Bristol Inglaterra, sugiere que las propiedades antibióticas del orégano podrían matar el conocido superbug, Staphylococcus aureus, que es resistente a los antibióticos más poderosos de la ciencia moderna como la meticilina33 2.2.6. Propiedades antiparasitarias: Exitosamente utilizado para matar una gran cantidad de tipos de parásitos intestinales como amebas y lombrices, e infestaciones externas del pelo como piojos, pulgas, liendres33 2.2.7. Propiedades bioactivas de los aceites esenciales del Orégano. Diversos estudios atribuyen los múltiples efectos de los aceites a sus dos metabolitos secundarios más abundantes: el carvacrol y el timol. Estos metabolitos han demostrado un efecto antibacterial contra una amplia gama de bacterias, afirma que la presencia de terpineno y el pcimeno en el aceite contribuye a un efecto sinérgico sobre la actividad antimicrobial del aceite. Aparentemente, el timol es más efectivo que el carvacrol contra bacterias Gram-negativas, aunque con una actividad variable en las diferentes cepas de bacterias analizadas33 Los compuestos encontrados en los aceites esenciales de orégano el carvacrol. y eugenol, son los componentes de más amplio espectro de. actividad antibacteriana contra 25 diferentes géneros de bacterias que incluyen patógenos de plantas, animales y alimentos. El autor manifiesta que esta actividad se debe a la presencia de grupos hidroxilo en la estructura fenólica de la molécula34.

(31) 31. 2.2.9. Evaluación de aceites esenciales de orégano en la dieta de pollos de engorde Las propiedades. antibacterianas que poseen los aceites esenciales de. orégano, unidas a otros efectos funcionales, han conducido a investigar la posibilidad de utilizar los aceites como aditivos promotores de crecimiento en alimentación animal. Los aceites se constituirían en aditivos de origen natural,. sin. riesgos. de. crear resistencias. bacterianas,. ni. efectos. residuales, ya que el carvacrol y el timol son degradados a metabolitos inactivos y así son excretados en la orina (90%) o expirados por los pulmones (10%), en forma de CO235. La actividad antibacteriana de los aceites se basa en la alteración de la Integridad de la membrana celular, la cual tiene un gran impacto sobre el sistema de transducción de energía disminuyendo la cantidad de ATP a valores cercanos a cero. Otros efectos que pueden estar relacionados con la acción bactericida o bacteriostática son una reducción en la síntesis de ADN y reducción de la actividad metabólica de la bacteria. A pesar de que los estudios sobre la actividad antibacteriana in vitro de concluyentes,. se. conoce. muy. poco. acerca. de. los aceites son los. efectos. multifuncionales in vivo, principalmente, sobre la dinámica de la microflora intestinal. en respuesta a la suplementación y nivel de los metabolitos. secundarios: carvacrol y timol36. El género orégano es uno de los grupos de. plantas. más. estudiado. de. la familia Labiatae, por lo que es. ampliamente reconocido que sus aceites esenciales, son entre otros los de mayor actividad antimicrobiana, ya que inhiben diversas bacterias patógenas, virus y hongos37..

(32) 32. 2.3. Salmonella typhimurium La salmonelosis aviar es una enfermedad bacteriana de transmisión vertical y horizontal, de declaración obligatoria y considerada una zoonosis, por crear problemas de salud pública. Es una enfermedad que ataca a todas las especies, tanto de sangre fría como de sangre caliente, incluyendo al hombre. Las aves domésticas constituyen el principal reservorio de organismos de salmonella que existe en la naturaleza. Dentro de todas las especies animales, son señaladas con mayor frecuencia a partir de aves y subproductos, particularmente por la población y los programas de aislamiento e identificación38 2.3.1. Agente etiológico. La salmonelosis causada por Salmonella typhimurium. 2.3.2. Características de la enfermedad. La salmonelosis aviar puede presentarse bajo tres formas, de acuerdo con el agente etiológico. a). Salmonelosis Aviar. Es producida por la Salmonella typhimurium conocida también como tifosis o diarrea blanca. Se presenta en forma aguda y septicémica en pollitos de engorde y en forma crónica en aves en desarrollo o adultas. Generalmente se presenta como una infección crónica localizada, transmitiéndose la enfermedad a la progenie a través del huevo. En las aves reproductoras esta transmisión puede llevarse a cabo por infección transovárica o por contaminación y penetración a través de la cáscara. La enfermedad también es transmitida en forma horizontal por medio de la contaminación oral con heces o vía respiratoria inhalando el polvillo, plumón o cualquier otro material contaminado en las nacedoras. La enfermedad se puede considerar como propia de las aves muy jóvenes, generalmente.

(33) 33. menores de un mes. Las aves adultas, generalmente presentan pocos signos clínicos y entre éstos, los frecuentes son: caída de la curva de postura, poca fertilidad e incubabilidad, diarrea y claudicación39 b). Tifosis aviar. Es causada por Salmonella. typhimurium y el cuadro. clínico es variable c). Infecciones paratifoideas. Es producida por cualquier Salmonella diferente a las anteriores. Las infecciones paratifoideas afectan el normal desarrollo en las aves sobrevivientes, lo cual contribuye a la susceptibilidad a otras enfermedades. Se. observa somnolencia, diarrea seguida de. deshidratación, ano empastado y alas caídas. Las aves adultas no suelen mostrar síntomas, pero son portadores intestinales de la infección durante largo tiempo39 La salmonelosis producida por especies de Salmonella sp, se manifiesta en humanos como una gastroenteritis o enterocolitis aguda de inicio repentino, cuyos síntomas aparecen de 6 a 48 horas después de la ingestión de alimentos o agua contaminada. La salmonella se transmite principalmente por el consumo de productos avícolas contaminados o por contaminación cruzada a través de manipuladores de alimentos o utensilios de cocina. La importancia de este patógeno en la generación de enfermedades trasmitidas por alimentos y el impacto que tiene el control de puntos críticos en la cadena de producción de los huevos y la vigilancia epidemiológica como mecanismos de control, la infección de las aves con gérmenes del genero Salmonella abarca una gran variedad de enfermedades tanto agudas como crónicas.. Los. miembros del genero salmonella son muy numerosos (más de 2500 serovariedades) y se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza. Durante los últimos años se han hecho algunos cambios en la taxonomía y.

(34) 34. nomenclatura de estos organismos que incluye el reconocimiento de especies importantes en la avicultura40 Dentro de las salmonellas paratíficas, Salmonella enteritidis y Salmonella typhimurium se han encontrado con mayor frecuencia afectando la calidad del pollito durante la primera semana. También estos dos serotipos se han encontrado con mayor prevalencia en las infecciones humanas originadas por el consumo de alimentos contaminados, aunque la mayoría de infecciones paratíficas ocurren en forma asintomáticas para las aves, estas pueden generar significativas implicaciones en salud pública ya que los lotes infectados se convierten en reservorios importantes de salmonella que potencialmente puede transmitirse a los consumidores. Por ejemplo en Chile se estimó que más de 182,000 personas se infectaron con Salmonella enteritidis a través del consumo de huevos infectados durante el año 201341 También se ha encontrado que del 3 al 25% de los pollos que entran a la planta de faenamiento resultan positivos a salmonella con la tendencia a incrementarse al final del proceso. Esto ha obligado al establecimiento de estrategias de control tanto a nivel de granja como a nivel de la planta de proceso que son monitoreadas constantemente por las autoridadesoficiales 42 Debido a que muchos animales de granja portan Salmonella typhimurium en sus tractos intestinales, los subproductos de matadero son altamente contaminados. En contraste se ha demostrado que salmonella puede sobrevivir hasta16 meses a 25°C en este tipo de alimentos. Se calcula que entre el 1 y 5 % de los suplementos para animales producidos y el 31% delos animales para producirlos pueden estar contaminados con Salmonella sp. Los productos avícolas son una fuente común de infección ya que la avicultura.

(35) 35. actualmente requiere de una gran cantidad de subproductos. para la. formulación de una dieta alta en proteínas para las aves42. 2.4. Fisiopatología de la diarrea en aves. La salmonelosis es un conjunto de enfermedades producidas por el género bacteriano salmonella, perteneciente a la familia Enterobacteriaceae un. microorganismo ubicuo. La salmonella es la causa mayoritaria de los. brotes de toxiinfecciones alimentarias y de alteraciones gastroentéricas en las aves y en otras especies domésticas. El principal reservorio de salmonella son las aves de corral, el ganado vacuno y el porcino; por lo tanto, son fuentes de infección importantes las carnes de estos animales y los huevos43 2.4.1.Patogenia Las. fuentes. de. infección. suelen. ser. otros. animales. portadores. infectados, pero también otros mamíferos, aves, roedores, insectos, el hombre, el agua o el alimento contaminado y el ambiente de la granja (heces, polvo, equipos, suelos mal desinfectados). La principal puerta. de. entrada de la Salmonella es la vía oral, por contacto con heces de animales infectados. Resistente al pH del estómago, sales biliares y peristaltismo, linfáticos. coloniza. el. intestino. delgado. e. invade. los. ganglios. mesentéricos provocando una infección localizada, la salmonella. evade las defensas intracelulares de las células intestinales sin ser destruida y comienza a dividirse dentro de la célula. Posteriormente, pasa a la sangre y produce una infección sistémica, multiplicándose en macrófagos, y localizándose en hígado, bazo, médula ósea, etc. Se elimina por las heces y se multiplica en el ambiente donde es muy resistente44.

(36) 36. 2.4.2. Contagio La enfermedad entra en la granja a través de la compra de nuevos animales,. pudiendo permanecer dichas explotaciones infectadas durante. años. El contagio se produce principalmente de forma directa a través de animales infectados por vía oral ( contacto feco-oral), aunque también por vía aerógena y conjuntival. Las infecciones por algunos tipos de salmonella pueden ser indirectas y proceder del agua, del pienso y de las más variadas especies de animales. Los factores estresantes actúan como desencadenantes de la enfermedad. En general, muchos animales se convierten en portadores y pocos enferman. La contaminación de alimentos para el consumo humano se debe a deficiencias. higiénico-sanitarias. y. de. conservación. y. puede. darse. durante la fase de la producción animal o durante la realización de los procesos culinarios44 2.4.3. Síntomas y lesiones. El periodo de incubación es variable. Suele durar varias semanas, aunque. puede. reducirse a pocas horas.. Normalmente se produce una. evolución en forma crónica. Según los órganos afectados, el tipo de salmonella y la especie animal, se pueden dar diarreas persistentes, afección de. la. parte. superior. del. aparato. respiratorio;. inflamación de. articulaciones, tendones, meninges, testículos, matriz y abortos. En aves: retraso del crecimiento y caída de la producción es frecuente. Las lesiones son alteraciones septicémicas (debidas a la presencia en la sangre de microorganismos patógenos), congestión y degeneración de los tejidos; petequias en el epicardio, pleura, hígado, corteza renal, y mucosa gastrointestinal e hipertrofia del bazo45.

(37) 37. 2.4.4 Efectos colaterales La importancia de las salmonelosis en animales, especialmente las causadas. por. Salmonella enteritidis y Salmonella tiphymurium, que. pueden infectar a las aves. Las que. las. consecuencias. patológicas. y. sanitarias. toxiinfecciones alimentarias causan en la salud pública.. La. salmonelosis en las aves es más un problema de salud pública que de sanidad. animal,. ya. que. produce. toxiinfecciones. en. personas. que. consumen alimentos contaminados por Salmonellas45 2.4.5 Diagnóstico de laboratorio Los hallazgos clínicos y anatomopatológicos (lesiones en células, tejidos y órganos) sólo permiten sospechar la enfermedad. En los casos de evolución lenta de la enfermedad, la probabilidad de diagnóstico es mayor si hay alteraciones características en los órganos46. Las muestras sospechosas se. confirman. mediante. la. demostración. bacteriológica de la salmonella en muestras orgánicas46 2.4.6 Prevención Para reducir la salmonelosis, es necesario un enfoque completo desde la granja hasta la mesa. Los granjeros, la industria, los inspectores de alimentos, los vendedores. de. cadena. consumidores son, cada uno de ellos, un. alimenticia. y. los. alimentos,. los. trabajadores. de. la. eslabón importante en la cadena de inocuidad alimentaria47. 2.5. Definiciones conceptuales. 2.5.1. Pollos de engorde Es el pollo en su fase inicial de vida, el cual es criado en granja y engordado, es un animal famoso en el mundo gastronómico, su principal producto son los.

(38) 38. huevos y éstos es altamente demandado tanto por los hogares familiares como por los grandes y pequeños comercios48 2.5.2. Alimentación animal La alimentación es la fase más importante dentro del proceso del pollo, ya que constituye mínimo del 70% del costo de producción y por ende es el factor más considerado49 2.5.3. Densidad de crianza. Es la cantidad de pollos que se crían en un metro cuadrado49 2.5.4. Línea genética. Animales que trasmiten sus características genéticas a otras generaciones 50 2.5.5. Líneas de pollos de engorde: Arbor Acress: Es una línea de pollos que se caracterizan por tener una alta rusticidad y adaptabilidad a diferentes climas51 Ross 308: Es una línea precoz, de buena conversión alimenticia, pero son pollos con menor velocidad de crecimiento51 Cobb 500: Esta línea que se caracteriza por su rápido crecimiento, buena conversión alimenticia, alta viabilidad, alta rusticidad en el manejo y de fácil adaptación a cambios climáticos51 2.5.6. Antibióticos. Los antibióticos son medicamentos potentes que combaten las infecciones bacterianas52 2.5.7. Colonia: Conjunto de bacterias de un mismo género52.

(39) 39. 2.5.8. Promotor de crecimiento: Es el antibiótico que se utiliza en pequeñas cantidades en la dieta de los animales domésticos, para ganar más peso y la prevención de enfermedades que atacan a los animales52 2.5.9. Microclima: Es la condición que ofrece el galpón para un buen confort de las aves, proporcionando el calor necesario que necesita los pollitos, especialmente en los primeros días de vida53 2.5.10. Morbilidad: Es el número de animales enfermos que se presenta en una crianza53 2.5.11. Mortalidad: Es el número de animales muertos en una explotación avícola, se determina en porcentajes54. 2.6. Bases epistemológicas Las bases epistemológicas que dan un sustento de la medicina natural está basado en el conocimiento filosófico del relacionalismo de la utilización del orégano en el control de la Salmonella typhimurium en pollos de engorde. Se dice que la inducción nos permite generalizar una serie de observaciones en los casos que se han inducido una enfermedad como la del presente trabajo de investigación para tener un punto de partida como lo manifiesta los defensores de la medicina tradicional, sin embargo el problema surge cuando nos preguntamos cuanto vamos a solucionar el problema con la medicina tradicional utilizada como una alternativa a los antibióticos55 El pensamiento médico y el ejercicio de la medicina folklórica plantean un cúmulo de problemas filosóficos de las plantas medicinales empleadas en los.

(40) 40. tratamientos de las enfermedades de los animales domésticos y la población humana. Éstos estriban desde la caracterización de la medicina tradicional hasta los problemas epistemológicos, lógicos y éticos56 El uso de las plantas con propiedades curativas en la investigación actual debe tener implicancias en las políticas de desarrollo científico, sin embargo a las autoridades no les importa nada, la medicina a base de plantas se basa en evidencias como un nuevo horizonte y su caracterización y el análisis de su "verdadero" rol en la práctica médica en las diferentes especies de los animales domésticos y silvestres; el problema de la falta de un concepto general de enfermedad; la epistemología personal y sus implicancias en la labor del médico; por último, el examen filosófico sobre la validez de la llamada medicina alternativa57 Este ensayo pretende mostrar que el abordaje filosófico de muchos problemas médicos no representa un mero juego intelectual, sino una herramienta eficaz para la investigación y la enseñanza de la medicina a base de extractos de plantas, principalmente, para la observación crítica de la problemática en juego. Se pretende mostrar, además, que la filosofía de la medicina tradicional no puede resumirse sólo a la parcela de lo ético, lo axiológico o lo histórico58 La medicina no convencional está creciendo exponencialmente; ya no es patrimonio de sociedades con historia cultural tradicional; su uso está muy extendido tanto en el mundo industrializado como en el preindustrial. En los Estados Unidos se ha determinado que el número de visitas a los "consultorios" de medicina alternativa alcanza los 425 millones, cifra que supera ampliamente el número de visitas a los consultorios médicos convencionales. Además, se ha estimado que los norteamericanos gastan.

(41) 41. aproximadamente 13 700 millones de dólares al año en servicios de medicina alternativa, cifra que, asombrosamente, representa casi la mitad de todo el gasto en servicios médicos de los Estados Unidos58 Como vemos, el interés actual respecto a la medicina alternativa es alto. Esto es debido, en parte, a la supuesta "validación" reciente de las terapias alternativas por parte de la ciencia. La cantidad de investigación biomédica sobre medicina alternativa está en aumento, el número de ensayos aleatorios se duplica cada quinquenio. La conocida base de datos Cochrane Library incluye hasta la actualidad cerca de cuatro mil estudios referidos a medicina alternativa59.

(42) CAPITULO III MARCO METODOLOGICO 3.1. Tipo de Investigación: Según la intervención del investigador: El estudio fue experimental, porque se manipuló la variable independiente. Según la planificación de la toma de datos: El estudio fue prospectivo, porque los datos necesarios para el estudio son recogidos a propósito de la investigación. Según el número que mide la variable de estudio: El estudio fue longitudinal, porque la variable de estudio es medida en dos o más ocasiones. Según el número de variable de interés: El estudio fue analítico, porque el análisis estadístico por lo menos es bivariado, porque plantea y pone a prueba una hipótesis.. 3.2. Nivel de Investigación. La presente investigación pertenece al nivel explicativo, porque explica el comportamiento de una variable en función de otra por ser un estudio de causa efecto.. 3.3. Diseño y esquema de la investigación. El diseño utilizado de la presente investigación fue experimental de series cronológicas con post test para el grupo control y grupos experimentales con repetición de tratamiento, se utilizó el esquema siguiente:.

(43) 43. Grupos. Tratamientos. Después. RG0. inoculación. --. O1. 02. O3. RG1. de la. X1. O4 x1 O5. RG2. bacteria a. X2. O7 x2. O8 x2 O9. RG3. los 7 días. X3. 010 x3. O11 x3 O12. x1 O6. Donde R: asignación al azar o aleatorización G: grupo de sujetos X: tratamiento, estímulo o condición experimental O: medición --:. Ausencia de estímulo. X1. Tratamiento experimental 1 X2. Tratamiento experimental 2 X3. Tratamiento experimental 3. 3.4. Población y muestra 3.4.1. Población La población de estudio estuvo conformada por 1000 pollos BB de la Línea Cobb500 de Huánuco. Características de la población Criterios de inclusión.  Pollos de una sola edad  Pollos de buen estado de salud  Pollos de ambos sexos Criterios de exclusión Se excluyeran del estudio.

(44) 44. . Pollos con deformaciones anatómicas. . Pollos enfermos. . Pollos desnutridos. Ubicación de la población en el espacio y tiempo. a. Ubicación en el espacio. La crianza de los pollos se realizó en los galpones de aves la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia y de la Universidad Nacional Hermilio Valdizan; y la necropsia de los pollos durante el experimento para extraer las muestras y realizar los cultivos microbiológicos se realizaron en el laboratorio de Microbiología de la Facultad y la DISA Huánuco. b. Ubicación en el especio: La duración del presente trabajo de investigación fue durante el periodo de 2016 (setiembre – diciembre). 3.4.2. Muestra. El muestreo fue probabilístico que pertenece al muestreo aleatorio simple, ya que todos los pollos que llegan a Huánuco tuvieron la asignación al azar para ser seleccionados los 60 pollos y pertenecer a cualquiera de los cuatro grupos, para ello se empleó el programa Epidad 3.161, que nos permite una aleatorización de los animales en estudio, los 15 primeros fueron asignados al grupo control; 15 ( grupo experimental 1) ; 15 (grupo experimental ( 2 ) y 15 (grupo experimental 3) ..

(45) 45. Tabla 1. Distribución de los animales según dosis de aceites esenciales de orégano (Origanum vulgare) en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde. Especificación. Grupo control. N° de pollos. 15. Grupos experimentales 1. 2. 3. 15. 15. 15. 0,5. 1,0. 1,5. Dosis de aceite esencial mL/litro. 00. de agua Fuente: Guía de observación. Animales Edad. 0 – 40 días. Tratamiento con aceite esencial de orégano. 07 días de edad. Prueba de desafío con Salmonella typhimurium. 12 días de edad. Evaluación 5 días pos prueba 4 pollos. 22 días de edad 32 días. Fig. 1 Esquema del diseño de investigación.. Evaluación 15 días pos prueba 4 pollos. Evaluación 25 días pos prueba 4 pollos.

(46) 46. 3.5. Instrumentos de Recolección de datos. La técnica utilizada fue: La observación El instrumento: Guía de observación. Se recolectaron todos los datos de acuerdo a las dosis del orégano (Origanum vulgare) administradas a los pollos. durante el estudio, se. consideró el tiempo de 5, 15 y 25 días pos inoculación.. 3.6. Técnicas de recojo, procesamiento y presentación de datos de los pollos  Instalación y Equipo. Los pollos BB fueron alojados en un mismo galpón, en corrales separados de 4,0 m2 por corral bajo las mismas condiciones, tales como: comederos y bebederos, disponibilidad de alimento y agua e incluso el mismo horario de alimento y recolección de datos.  Sistema de alimentación La alimentación fue por grupos y el consumo de alimento fue ad – líbitum, para llevar a cabo esto se preparaban cantidades adecuadas de alimento según las guías y especificaciones técnicas, suministrándose el alimento hasta tres veces por día, todos los animales recibían cantidades constantes y similares de alimento. El alimento se preparó de acuerdo a las necesidades y requerimientos de los pollitos, para lo cual se prepararon las siguientes raciones:  Ración de inicio con 24 % de proteína bruta  Ración de crecimiento con 22% de proteína bruta  Ración de engorde con 20% de proteína bruta La composición de las raciones se encuentra (anexos 9 al 11).

(47) 47. 3.6.7. Efecto del aceite esencial de orégano (Origanum vulgare) en el control de Salmonella typhimurium en pollos de engorde. Prueba de Desafío. Los pollos fueron desafiados con la bacteria a los 7 días de edad, para realizar dicho desafío. se utilizó una dosis infectiva de 106 unidades. formadoras de colonias de Salmonella typhimurium; la cual se administró vía oral. Los pollos fueron evaluados hasta los 40 días de edad; considerando: A). El promedio de unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium/ gramo de muestra de heces, órganos e intestino. B). Lesiones anatomopatológicas encontradas a la necropsia de los pollos durante el experimento. C). La recuperación de Salmonella typhimurium se realizó después de la necropsia de los pollos efectuados a los 5, 15 y 25 días pos inoculación, cuatro pollos por grupo para extraer los órganos e intestino y realizar los cultivos microbiológicos utilizando el medio diferencial Verde Brillante. Adquisición del aceite esencial de orégano. El aceite esencial de orégano para la ejecusión de la investigación fue adquirido del Laboratorio de Nutrición Animal de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Pedro Ruíz Gallo – Lambayeque; agosto 2016. A). Determinación del promedio de unidades formadoras de colonias (UFC) de Salmonella typhimurium/g de muestra de heces, órganos e intestinos de pollos de engorde sometidos a la Prueba de Desafío. Se siguieron las especificaciones47 Enriquecimiento selectivo.

(48) 48. Se tomó un gramo de muestra y se colocó en tubos conteniendo 3,00 mL de caldo selenito Se llevó a incubación a 37°C / 24 horas 1. Fase de aislamiento A partir del medio de enriquecimiento se realizaron diluciones hasta 10-6 De cada una de las diluciones se sacó una alícuota de 10 microlitros para ser sembrada en agar Verde Brillante Se llevó a incubación a 37ºC / 24 horas Se realizó el recuento de UFC de cada una de las placas Petri (anexos 12 al 19) 2. Fase de identificación Con el asa bacteriológica en punta se tomaron colonias sospechosas y se Sembraron en los medios TSI, LIA, Citrato, Urea y SIM para la identificación bioquímica de la bacteria. Se llevó a incubación a 37ºC / 24 horas Se realizó la identificación bioquímica de Salmonella typhimurium mediante la comparación de los resultados con tablas patrón47 y 9 (anexos 20 al 39) B). Determinación de las lesiones anatomopatológicas y de mortalidad en pollos de engorde de 40 días de edad tratados con aceite esencial de orégano. La necropsia de los pollos sacrificados. por sospecha de presentar la. enfermedad se realizó en el laboratorio de Microbiología, siguiendo la técnica convencional60 y 9 Para determinar las lesiones ocasionadas por Salmonella typhimurium se realizaron la necropsia de 4 pollos por grupo cada 5, 15 y 25 días pos inoculación y. las lesiones encontradas fueron: petequias a nivel hígado,. congestión renal, enteritis hemorrágica en intestino delgado, acumulo de.

(49) 49. fibrina en el peritoneo, necrosis en hígado, hepatomegalia y esplenomegalia ( fig. 2 al 14). Las muestras para los cultivos microbiológicos órganos e. procedieron de heces,. intestino que macroscópicamente presentaban las lesiones a. Salmonella typhimurium. El hígado fue el órgano afectado con mayor frecuencia, se encontró agrandado de tamaño ocupando gran parte de la cavidad abdominal y con zonas cremosas compatibles a salmonelosis. La mortalidad encontrada fue: 100% para el grupo control y 0% en los grupos experimentales y con una sobrevivencia de 0% para el grupo control y 60% para los grupos experimentales. El examen de la necropsia determinó que las aves del grupo control y grupos experimentales 1 y 2 presentaron lesiones compatibles a la enfermedad y en las aves del grupo experimental 3 no se encontraron lesiones. C). Recuperación de Salmonella typhimurium de heces, órganos e intestino de pollos de engorde tratados con aceites esenciales de orégano. Para la recuperación de Salmonella typhimurium de los órganos e intestino se realizó la necropsia de pollos (4 por grupo) a los 5, 15 y 25 días pos inoculación de los pollos que presentaron síntomas característicos a salmonelosis; se siguió la técnica convencional60 1. Enriquecimiento selectivo Se tomó un gramo de muestra y se colocó en tubos conteniendo 3.00 mL de caldo selenito. Se llevó a incubación a 37ºC / 24 horas 2. Aislamiento selectivo Se realizó en medio de cultivo selectivo agar Salmonella – Shigella..

(50) 50. Se llevó a incubación a 37ºC / 24 horas. 3. Identificación bioquímica Las colonias sospechosas se sembraron en los medios de cultivo: LIA, TSI, Citrato, Urea y SIM, para la identificación bioquímica de Salmonella typhimurium se empleó tablas patrones50. 3.7. Análisis o comprobación estadística.  Análisis Descriptivo. De las tablas de unidades formadoras de colonias (UFC), de cada una de las muestras de heces, hígado, bazo, vesícula, duodeno, yeyuno, íleon e intestino grueso.  Análisis inferencial. Para realizar la interacción entre dosis tiempo, cuya significancia se basó en la Prueba de Duncan a un nivel P≤ 0,0001. Para el procesamiento de datos se usó el programa Infostate61.

(51) CAPITULO IV RESULTADOS 4.1 Análisis descriptivo de resultados De las tablas de unidades formadoras de colonias (UFC), de cada una de las muestras de heces, hígado, bazo, vesícula, duodeno, yeyuno, íleon e intestino grueso.. 4.2 Análisis inferencial de resultados. A). Determinación del promedio de unidades formadoras de colonias UFC de Salmonella typhimurium/g de muestra de heces, órganos e intestino de pollos de engorde sometidos a la prueba de desafío ( anexos 12 al 19).

(52) 52. Tabla 2. Unidades formadoras de colonias(UFC) de Salmonella typhimurium de diferentes muestras de pollos de engorde, en función a dosis de aceite esencial de orégano y diferentes tiempos. Factores UFC. Hígado * Bazo*. Vesícula *. Duodeno * Yeyuno * Íleon *. Heces. Dosis. Intestino grueso*. 0.0001 0.0001. 0.0001 0.0001. 0.0001. 0.0001. 0.0001 0.0001. Tiempo 0.0001 0.0001. 0.0001 0.0001. 0.0001. 0.0001. 0.0001 0.0001. DXT. 0.0001 0.0001. 0.0001 0.0001. 0.0001. 0.0001. 0.0001 0.0001. CV%. 7.62. 11.56. 12.16. 15.08. 14.66. 13.47. 9.55. 12.43. Dosis 0.0. 43.89d 12.67d. 12.67c. 14.00d. 13.3d. 13.00d. 12.33d 14.33d. 0.5. 33.25c. 2.67c. 2.67b. 1.33b. 2.33b. 1.33b. 2.33b. 2.33b. 1.0. 11.25b 2.00b. 4.00b. 4.33c. 4.00c. 4.33c. 4.67c. 5.67c. 1.5. 6.33a. 0.00a. 0.00a. 0.00a. 0.00a. 0.00a. 0.00a. 0.00a. 5. 23.88b 5.25c. 6.00b. 7.00c. 7.50c. 6.75c. 7.00c. 8.50c. 15. 26.42c. 4.75b. 5.50b. 4.75b. 4.50b. 4.75b. 4.75b. 5.25b. 25. 20.75a 3.00a. 3.00a. 3.00a. 2.75a. 2.50a. 2.75a. 3.00a. Días. *Datos transformados. Interpretación: Para realizar el ANOVA de las unidades formadoras de colonias (UFC), de Salmonella typhimurium de heces y órganos se llevó a cabo una transformación de datos, los cuales fueron estadísticamente significativos (p≤ 0,0001), así mismo se realizó una interacción dosis tiempo por la forma como actúa el aceite de orégano en los tres tiempos y las tres dosis; se observa que en heces y órganos sin la adición de aceite de orégano el desarrollo de la bacteria es contundente, luego de acuerdo a la dosis y tiempo disminuye paulatinamente..