Determinación del estado inflamatorio

86

87

3º Mes 9º Mes

0 10 20

30 C

HFD-L R

HFD-VOO HFD-O

‡ *

IL-6 (pg/mL)

Figura 4.29. Efecto de las dietas HFD a 12 y 36 semanas sobre los niveles de IL-6 plasmáticos. Los valores, representan la media ± SEM de 10 ratones en cada grupo experimental. Se obtuvieron diferencias significativas del grupo HFD- L, con respecto al control (*p<0,05 y ^‡p<0,001).

3º Mes 9º Mes

0 2 4 6

8 C

HFD-L R

HFD-VOO HFD-O IL-1b (pg/mL)

Figura 4.30. Efecto de las dietas HFD a 12 y 36 semanas sobre los niveles de IL-1β plasmáticos. Los valores, representan la media ± SEM de 10 ratones en cada grupo experimental. No se produjeron diferencias significativas entre los grupos.

88

3º Mes 9º Mes

0 20 40

60 C

HFD-L R

HFD-VOO HFD-O TNFa (pg/mL)

Figura 4.31. Efecto de las dietas HFD a 12 y 36 semanas sobre los niveles de TNF-α plasmáticos. Los valores, representan la media ± SEM de 10 ratones en cada grupo experimental. No se produjeron diferencias significativas entre los grupos.

4.4.2 Parámetros inflamatorios en el tejido adiposo subcutáneo.

En el caso del tejido adiposo, solo se produjo un incremento significativo (*p<0,05) en el grupo HFD-L con respecto al grupo control para la IL-6 (figura 4.33), no modificándose el resto de citoquinas (figuras 4.32 y 4.34).

3º Mes 9º Mes

0 1 2 3 4

5 C

HFD-L R

HFD-VOO HFD-O IFNg (pg/ mg prot)

Figura 4.32. Efecto de las dietas HFD a 12 y 36 semanas sobre los niveles de IFN-γ en el tejido adiposo subcutáneo. Los valores, representan la media ± SEM de 5 ratones en cada grupo experimental. No se obtuvieron diferencias significativas entre los grupos experimentales.

89

3º Mes 9º Mes

0 5 10 15

*

C HFD-L R

HFD-VOO HFD-O

IL-6 (pg/ mg prot)

Figura 4.33. Efecto de las dietas HFD a 12 y 36 semanas sobre los niveles de IL-6 en el tejido adiposo subcutáneo. Los valores, representan la media ± SEM de 5 ratones en cada grupo experimental. Se obtuvieron diferencias significativas del grupo HFD-L, con respecto al control y reversión (*p<0,05).

3º Mes 9º Mes

0 20 40

60 C

HFD-L R

HFD-VOO HFD-O TNFa (pg/mL)

Figura 4.34. Efecto de las dietas HFD a 12 y 36 semanas sobre los niveles de TNF-α en el tejido adiposo subcutáneo. Los valores, representan la media ± SEM de 5 ratones en cada grupo experimental. No se obtuvieron diferencias significativas entre los grupos experimentales.

90 4.4.3 Parámetros inflamatorios en el tejido adiposo epididimal.

La dieta HFD-L incrementó significativamente los niveles de IFN-γ, con respecto al grupo control (*p<0,05 a los meses; **p<0,01 a los 9 meses. La modificación del perfil de las grasas (grupos HFD-VOO y HFD-O) o la reversión normalizaron los niveles de la citoquina (figura 4.35). Para la IL-6, a los 3 meses la dieta HFD- L incrementó significativamente (*p<0,05) sus valores, con respecto al grupo control. A los 9 meses, los niveles de IL-6 estaban normalizados en todos los grupos (figura 4.36). Los valores de la TNF-α no se modificaron en ninguna de las circunstancias (figura 4.37).

3º Mes 9º Mes

0 5 10 15 20

25 C

HFD-L R

HFD-VOO HFD-O

*

**

IFNg (pg/ mg prot)

Figura 4.35. Efecto de las dietas HFD a 12 y 36 semanas sobre los niveles de IFN-γ en el tejido adiposo epididimal. Los valores, representan la media ± SEM de 5 ratones en cada grupo experimental. Se obtuvieron diferencias significativas del grupo HFD-L, con respecto al control (*p<0,05) a los 3 meses. A los 9 meses las diferencias significativas fueron entre el grupo HFD-L y el resto de los grupos (**p<0,01).

91

3º Mes 9º Mes

0 5 10 15 20 25

*

C HFD-L R

HFD-VOO HFD-O

IL-6 (pg/ mg prot)

Figura 4.36. Efecto de las dietas HFD a 12 y 36 semanas sobre los niveles de IL-6 en el tejido adiposo epididimal. Los valores, representan la media ± SEM de 5 ratones en cada grupo experimental. Se obtuvieron diferencias significativas del grupo HFD-L con respecto al control (*p<0,05).

3º Mes 9º Mes

0 10 20 30

40 C

HFD-L R

HFD-VOO HFD-O TNFa (pg/ mg prot)

Figura 4.37. Efecto de las dietas HFD a 12 y 36 semanas sobre los niveles de TNF-α en el tejido adiposo subcutáneo. Los valores, representan la media ± SEM de 5 ratones en cada grupo experimental. No se obtuvieron diferencias significativas entre los grupos experimentales.

92 4.4.4 Expresión de marcadores de inflamación en macrófagos del tejido graso epididimal.

Hemos examinado la expresión de diversos marcadores de inflamación (figuras 4.38-4.40) en macrófagos y como resultado hemos obtenido un aumento significativo de la expresión de F4/80+ (*p<0,05), CD11b (**p<0,01) y CD11c (^‡p<0,001) en el tejido adiposo del grupo HFD-L, con respecto al resto al grupo control. El paso a las dietas HFD-VOO, HFD-O o R normalizó los niveles de todos los marcadores.

C

HFD-L R

HFD-VOO

HFD-O 0

10 20 30

*

F4/80+ (expresión relativa)

Figura 4.38. Efecto de las dietas HFD a las 36 semanas sobre los niveles de expresión del marcador macrofágico f4/80+, en el tejido adiposo epididimal. Los valores, representan la media ± SEM de 5 ratones en cada grupo experimental.

Se obtuvieron diferencias significativas del grupo HFD-L, con respecto al resto de grupos (*p<0,05).

93

C

HFD-L R

HFD-VOO

HFD-O 0

20 40 60 80

*

cd11b(expresión relativa)

Figura 4.39. Efecto de las dietas HFD a las 36 semanas sobre los niveles de expresión del marcador macrofágico CD11b, en el tejido adiposo epididimal. Los valores, representan la media ± SEM de 5 ratones en cada grupo experimental.

Se obtuvieron diferencias significativas del grupo HFD-L, con respecto al resto de grupos (**p<0,01).

C

HFD-L R

HFD-VOO

HFD-O 0

20 40 60 80 100

*

cd11c(expresión relativa)

Figura 4.40. Efecto de las dietas HFD a las 36 semanas sobre los niveles de expresión del marcador macrofágico CD11c, en el tejido adiposo epididimal. Los valores, representan la media ± SEM de 5 ratones en cada grupo experimental.

Se obtuvieron diferencias significativas del grupo HFD-L, con respecto al resto de grupos (^‡p<0,001).

94