2.4 Población y Muestra .1 La población
2.4.8. Evaluación de Muestras a Nivel de Laboratorio
Se procedió a realizar el procesamiento de muestras en el laboratorio con el manejo de muestras con la utilización del equipo ankom (FDN y FDA) y la lignina, mediante el método Van Soest, Leco, que viene hacer la proteína cruda, además se utilizo el método Dumas y
mufla, siendo aquellas minerales y cenizas totales, por el método de quemado, la estufa o la ventilación forzada cuando se cuenta con materia seca.
a) Determinación de Materia Seca (MS)
Se considero identificar la humedad mediante el uso: de 100 – MS= Humedad del siguiente procedimiento.
- Los residuos de cosecha se guardaron en un sobre debidamente rotulado, el cual se sometió a una temperatura de 65°C durante 48 horas, a esta etapa se le denomina pre deshidratación y el peso resultante de este procedimiento se denomina MSA (materia seca al ambiente).
- Siguiendo con el procedimiento se molieron aquellas muestras de residuos o sobrantes de las cosechas de quinua, trigo, cebada, etc.
- Después se tomaron muestras de residuos de las cosechas moliodos, con una balanza se peso que tiene de 2.000 gramos a 2.0256 gramos, y en el crisol se llevo para ser cocido por 24 horas a una temperatura de 105º C.
- Se usó la siguiente ecuación para conocer la materia seca:
MS= (MSE*MSA)/100 Donde:
MS= Materia seca, MSE= Materia seca a la estufa, MSA= Materia seca al ambiente b) Determinación de Proteína Cruda (PC%)
c) Determinación de Fibra Detergente Neutra (FDN%)
d) Determinación De Fibra Detergente Ácida (FDA%)
e) Determinación de Lignina en detergente ácido con ácido sulfúrico (%)
- Se colocó un vaso precipitado de 2 litros dentro del vaso precipitado de 3 litros para mantener las bolsas sumergidas.
- Se agitó las bolsas al principio y en intervalos de 30 minutos empujando y levantando suavemente el vaso de precipitados de 2 litros hacia arriba y hacia abajo aproximadamente 30 veces.
- Después de 3 horas se vertió el ácido sulfúrico (H2SO4) y se enjuago con agua destilada para eliminar el ácido.
- Se enjuago con acetona durante tres minutos para luego secar las bolsas a temperatura ambiente.
- Se secó las bolsas en un horno a 105°C durante 2-4-horas.
- Se retiraron las bolsas del horno y se colocó directamente en las bolsas de desecante, se enfrió a temperatura ambiente y se pesó las bolsas.
- Después se colocó la bolsa en una maquina que fue pesado antes, realizándose un calentamiento de la mufla a una T° de 525°C por 3 horas para luego pesar.
- Teniendo que pesarse los crisoles para luego llenarlos en la bolsa blanca, llevando la mufla con las muestras y después realizar el registro del peso.
- La determinación de lignina se realizó mediante la siguiente fórmula:
f) Determinación de Hemicelulosa (%)
Para determinar el valor de la hemicelulosa se usó la siguiente fórmula:
% ℎ𝑒𝑚𝑖𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑜𝑠𝑎 = %𝐹𝐷𝑁 − %𝐹DA
%FDN=porcentaje de fibra detergente neutral.
%FDA=porcentaje de fibra detergente ácida.
g) Determinación de pH.
Para poder medir el pH de las muestras encontradas se necesita seguir el procedimiento siguiente:
- Realizándose la calibración del electrodo del potenciómetro con una solución patrón llamado buffers con un valor de pH.
- Se vertió pequeñas soluciones buffers en vasos limpios.
- Continuando, se tomó 12 gramos del ensilaje de muestra.
- Ubicándose la muestra en un vaso de precipitación, para después agregar 100 ml. De agua destilada.
- Se procedió desmenuzar el contacto de partículas de agua.
- Preparándose en 16 minutos y su respectiva agitación.
- Traspasándose toda la fase que se encuentra en estado líquido a otro vaso diferente - Después se conoció el pH con la ayuda del peachimetro digital.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN 3.1 Análisis de Información e Interpretación de Resultados 3.1.1. Composición química de residuo de trigo
El contenido de fibra detergente neutra (%FDN) y fibra detergente ácida (%FDA) y lignina no está influido significativamente por los niveles de levadura y tiempos de fermentación (Tabla 2).
Tabla 2. Análisis de varianza de materia seca, proteína cruda, fibra detergente neutra, fibra detergente ácida, lignina y hemicelulosa de ensilado de residuo de trigo en función a niveles de levadura y tiempos de fermentación.
Variables Gl Cuadrado de la media (trigo)
MS PC FDN FDA LIGNINA HEMI
Levadura(L) 2 5,593 8,7653* 41,898 3,0237 0,1724 1,8170**
Tiempo (T) 1 46,673* 2,2148 3,368 0,0393 0.2551 0,0540 Interacción
(DXL) 2 0,326 3,0257 7,484 0,7815 1,0865 0,0289
Residual
(Error) 12 4,263 1,1061 52,885 6,3028 0,4473 0,1326
Total 17
*** p<0,0001; ** p<0,001; * p<0,05; MS: materia seca; PC: proteína cruda; FDN: fibra detergente neutra;
FDA: fibra detergente ácida; HEMI: hemicelulosa.
En la elaboración del ensilado a través de composición química a base de sobrantes de trigo y diversos rangos o niveles de levadura y tiempos de fermentación se observan en la Tabla 2, donde el contenido de materia seca (MS) presentó diferencia significativa (P<0,05) en función a los tiempos de fermentación (30 y 60 días), presentando un %MS superior significativamente (p<0.05) a los 60 días de fermentación con 2% y 4% de nivel de levadura alcanzando a un 57.120%MS y 59.240%MS respectivamente, plasmado en la (Tabla 3).
El porcentaje de proteína cruda (%PC) presentó diferencias significativas (P<0,05) con respecto a la inclusión de niveles de levadura (Tabla 2), siendo superior al incluir un 2%
de levadura en el ensilado obteniendo 5.417%PC en 30 días de fermentación y a los 60 días siendo mejor al incluir 4% de levadura con 4,303%PC (Tabla 3).
Mientras la cantidad de fibra acida, neutra y la lignina no presentaron diferencias significativas en función a los niveles de levadura y tiempos de fermentación.
Por otro lado, el contenido de hemicelulosa presentó diferencias significativas (P<0,05) con respeto a la adición de niveles de levadura, presentando un %HEMI alta en un ensilado sin adición de levadura (0%) alcanzando a un 30.213%HEMI a los 60 días (Tabla 3).
Tabla 3. Promedios medios de materia seca, proteína cruda, fibra detergente neutra, fibra detergente ácida, lignina y hemicelulosa de ensilado de residuo de trigo en función a niveles de levadura y tiempos de fermentación.
Tiempo
Niveles de Levadura (%) C.V.
(%)
Probabilidad
0 2 4
Materia Seca
30 55.147Aa 53.847Ba 55.586Ba 2.793 0.4085
60 57.877Aa 57.120Aa 59.240Aa 4.279 0.5976
C.V. (%) 5.627 1.263 2.575
Probabilida
d 0.3524 0.0046 0.0389
Proteína Cruda
30 2.177Ab 5.417Aa 3.940Aab 31.477 0.0459
60 2.023Bb 3.100Aab 4.303Aa 27.522 0.0484
C.V. (%) 1.865 36.308 23.428
Probabilidad 0.0087 0.1404 0.6689
Fibra Detergente Neutra
30 84.750Aa 79.843Aa 83.830Aa 10.808 0.7828
60 87.247Aa 81.623Aa 82.150Aa 6.055 0.3839
C.V. (%) 5.273 14.104 3.478
Probabilidad 0.5371 0.8575 0.5154
Fibra Detergente Ácida
30 53.580Aa 52.36Aa 52.630Aa 1.715 0.2972
60 53.600Aa 52.93Aa 51.767Aa 6.506 0.8097
C.V. (%) 3.757 4.977 5.419
Probabilidad 0.9909 0.8042 0.7275
Lignina
30 20.123Aa 19.497Ba 20.580Aa 4.310 0.3691
60 20.030Aa 20.700Aa 20.183Aa 1.886 0.1581
C.V. (%) 2.767 2.315 4.415
Probabilidad 0.8470 0.0339 0.6179 Hemicelulosa
30 30.270Aa 29.550Aa 29.290Aa 1.443 0.0721
60 30.213Aa 29.543Aab 29.020Ab 0.965 0.0064
C.V. (%) 1.069 1.645 0.827
Probabilidad 0.8406 0.9874 0.2422
El %MS y %PC incrementa con la inclusión de levadura, de lo contrario el
%Hemicelulosa, disminuye conforme se incrementa el nivel de levadura independientemente al tiempo de fermentación en el ensilado de residuo de trigo.
52 54 56 58 60
0 2 4
Porcentaje (%)
Niveles de Levadura (%)