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III. MATERIALES Y METODOS

3.5. Procedimiento

3.5.1. Fase de campo

Las muestras de madera para el estudio anatómico y propiedades físicas de primera y tercera corta de Eucalyptus globulus Labill son procedentes de un cerco vivo de la comunidad de Huanchar, Concepción.

3.5.2. Selección y procesamiento de trozas

En el momento en que se realizó la selección, se tomaron en consideración que tenían que ser de diámetro de 20 a 25 cm con fuste recto, pocos nudos, copa amplia.

Se realizó de conformidad a la norma NTP 251.008 y las facilidades de accesibilidad a la zona, el acondicionamiento de la madera destinada a la elaboración de probetas de ensayo se realizó según la NTP 251.009

Tabla 4.Caracteristicas generales de la muestra colectada

Fuente: Elaboración propia

Para el estudio macroscópico se cortaron rodajas de 20 cm de ancho por árbol (6 rodajas de primera corta y 6 rodajas de tercera corta). Así mismo para las xilotecas se cortó una troza de 60 cm, mientras que para los estudios de las propiedades físicos se cortaron rodaja de 40 cm de ancho

TIPO DE CORTA Este Norte

Diámetro a 1 /1.30 cm

Diámetro a 1/30 cm E. globulus L. de tercera

corta

465691 8687408 19 21

465729 8687410 19 21

465810 8687416 18 22

E. globulus L. de primera corta

465813 8687560 19 22

465810 8687566 20 21

465806 8687570 18 21

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Figura 2. Modo de colección de la muestra

3.5.3. Estudio anatómico

3.5.3.1. Descripción macroscópica: Se utilizó rodajas de 20 cm de espesor, xiloteca de 2 cm x 10 cm x 15 cm orientadas adecuadamente; se observó con la ayuda de una lupa de 10x, se hizo uso de la vista, olfato, tacto y el gusto.

3.5.3.2. Descripción microscópica: Se emplearon cubos de 1.5 cm x 1.5 cm x1.5 cm. de lados debidamente orientado en los tres planos radial, tangencial y transversal de los cuales se prepararon 30 montajes temporales y 10 montajes permanentes para cada corta. Cada montaje contenía tejido histológicos de la sección transversal, tangencial y radial. Con la ayuda del microscópico se realizó las observaciones microscópicas, así como la identificación y descripción de las células xilematicas .También se realizó las mediciones de los elementos celulares .Esta descripción se basó según la COPANT.

Rodaja para la descripción macroscópica

Xilotecas 60 cm

Probetas 40 cm

1.30cm 20 cm

1m m

39 a) Preparación de láminas histológicas

 Ablandamiento.- Para el ablandamiento los cubos de 1.5 cm. fueron colocados en un vaso de precipitación 50 ml y se añadió agua destilada para ser colocado en baño María por un tiempo de 32 a 40 horas en promedio.

En esta etapa se controló el nivel de agua, así como el estado de ablandamiento de los cubos .Posteriormente se hizo remojar en glicerina por dos días.

 Corte de láminas.- Las láminas se obtuvieron de los cubos ablandados, con un micrótomo de deslizamiento horizontal, de un espesor de 22 µ, para las tres secciones y colocadas en una placa Petri en un conteniendo de alcohol de 30º

 Deshidratación.-Se dejó las láminas en la placa Petri con el alcohol de 30º, por espacio de 15 minutos, luego se eliminó el alcohol y se agregó inmediatamente alcohol de 60º dejando en reposo por 15 minutos, después se procedió de igual manera con el alcohol de 96°.

 Coloración.-Después de haber eliminado el alcohol de 96° se agregó de 5 a 6 gotas de safranina hasta un coloreado parejo, por aproximadamente 20 minutos. Luego se procedió a lavar con alcohol de 96° por dos veces consecutivos y finalmente se agregó xilol para fijar el colorante por espacio de 20 minutos.

 Montaje.-Cada lámina se ubicó sobre un vidrio y se procedió a cuadrarlas con bisturí para ser puesto en el porta objeto en el siguiente orden; transversal,

40 tangencial y tangencial, luego se agregó una gota de bálsamo de Canadá a cada lámina y se colocó el cubre objeto.

 Secado de láminas.-Las láminas fueron secadas en la estufa a 30°C de

temperatura por espacio de 7 días.

b) Preparación de tejido macerado

Se astillo la madera semejante a los palitos de fósforo, de aproximadamente 1,5 mm.

de espesor; los cuales se colocaron en un frasco, agregando 20 ml de ácido nítrico al 33 % hasta que el ácido cubriera a las muestras, quedando listo para la cocción.

En este último se observó en cada momento que la cocción se realizara aproximadamente 20 minutos a 70°C, hasta que las astillas empiecen a perder el color y se ablandan. Una vez ablandadas se lavaron aproximadamente 6 veces con abundante agua destilada, evitando la pérdida de astillas. A las astillas se agregó 5 a 6 gotas de safranina, hasta obtener un coloreado parejo por aproximadamente 20 minutos, después se separó una pequeña cantidad de astillas se les paso a una placa Petri, agregando xilol para fijar el colorante dejando reposar por 30 minutos, con la ayuda del pincel y la aguja se separaron las fibras y los vasos.

3.5.4. Estudio de las Propiedades Físicas

Para los estudios físicos se emplearon 50 probetas para cada corta de 3 cm X 3 cm X10 cm estas fueron preparadas de acuerdo a la NTP 251.009, ellas fueron orientadas en sección radial, tangencial, longitudinal para determinar en estados verde, seca al aire y anhidro.

a) Contenido de Humedad, Densidad, Peso específico y Contracción.- Se identificó y codifico las probetas, luego se procedió a medir las secciones (radial, tangencial,

41 y transversal), pesarlas en la balanza analítica y se determinó el volumen saturado de cada probeta por el método de inmersión ,se colocó las probetas en la estufa eléctrica a una temperatura de 80°C a 120°C ,las pesadas se repitieron hasta conseguir un peso constante y luego proceder a medir las secciones y determinar el volumen anhidro , las mediciones se realizaron con vernier digital Se determinó el contenido de humedad según la NTP 251.010; para lo cual de hallo con la siguiente fórmula para determinar las densidades verde, seca al aire, anhidra y el peso específico se empleó la NTP 251.010 y finalmente para las contracciones se empleó NTP 251.012

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