091. TASA DE GESTACIÓN EN CICLOS DE ICSI CON ESPERMATOZOIDES PROCEDENTES DE BIOPSIA DE TESTÍCULO
J. Albericio Portero, I. González Hevia, M. Sánchez Parrilla, A. Lasierra Monclús, L. Rello Varas y Y. González Irazabal
Servicio de Bioquímica Clínica. Hospital Universitario Miguel Servet. Zaragoza. España.
Objetivos: En la actualidad, la realización de ICSI con esperma-
tozoides procedentes del testículo obtenidos mediante TESE (Tes-
ticular Sperm Extraction), es un medio altamente efi caz y con ex- celentes resultados en tratamientos de fertilidad cuando el factor masculino es severo. Presentamos los resultados obtenidos en ciclos de reproducción realizados con espermatozoides procedentes de biopsias testiculares en la unidad de Reproducción Humana Asistida del Servicio de Bioquímica Clínica del Hospital Universitario Miguel Servet de Zaragoza.
Material y métodos: Desde enero de 2006 hasta abril de 2010 se
realizaron 42 ciclos de reproducción con muestras procedentes de biopsias de testículo. Las muestras fueron obtenidas directamente de conducto seminífero, se procesaron con medio G-MOPS PLUS (Vitrolife) y se criopreservaron con FREEZING MEDIUM (Irving) en nitrógeno líquido a -196 oC. La técnica utilizada fue una ICSI con
muestra de biopsia previamente descongelada, realizándole un swim-up con medio IVF Universal (Medicult) y añadiendo pentoxifi - lina previa a la microinyección para aumentar la movilidad de los espermios. La edad media de los pacientes fue de 34 años en la mujer (entre 24 y 39 años) y 35 años en el hombre (entre 29 y 50 años). La media de ovocitos recuperados tras la punción folicular fue de 9,9 ovocitos (entre 2 y 21 ovocitos) y se microinyectaron un total de 316 ovocitos maduros.
Resultados: El porcentaje total de ovocitos fecundados (2 pronú-
cleos entre 16 y 20 horas después de la microinyección) fue de 64,71% (198 ovocitos fecundados). La media de embriones transfe- ridos fue de 1,6 embriones. La clasifi cación morfológica de los em- briones transferidos fue el 36,36% tipo A, 25,75% tipo B, 22,72% tipo C y el 15,15% tipo D. La tasa de gestación fue de 21,43% de emba- razos por ciclo realizado, siendo la tasa de gestación por transfe- rencia del 23,68% (no se realizó la transferencia en 5 casos).
Conclusiones: La introducción de la técnica ICSI utilizando esper-
matozoides procedentes de biopsia de testículo es una herramienta útil para varones con problemas de fertilidad, no teniendo que recu- rrir a un donante o a la adopción. El uso de la pentoxifi lina mejora la movilidad espermática (Burot Kovacic 2006). La tasa de fecundación ovocitaria es similar a la que consiguen otros autores (61% Nagy 1995, 68% Gil-Salom 2003, 59,9% Moshe Wald 2005). La tasa de gestación es similar a las obtenidas en otros estudios (16% Fumero Arteaga 2009, 26% Nagy 1995, 15% Gil-Salom 2003, 27% Moshe Wald 2005). Estos datos deben ser tenidos en cuenta en nuestro medio a la hora de in- formar a los pacientes sobre el resultado de la técnica ICSI con esper- matozoides procedentes de biopsia de testículo.
092. PAREJAS CON ESTERILIDAD PRIMARIA DE ORIGEN DESCONOCIDO: ¿ES NECESARIO EL ESTUDIO GENÉTICO? PRESENTACIÓN DE UN CASO
M. Alcaine Villarroya, M. Bassecourt Serra, A. Lasierra Monclús, B. Pérez Lasala, M. Viso Soriano y M. Calvo Martín
Hospital Universitario Miguel Servet. Zaragoza. España.
Introducción: La indicación de realizar estudios genéticos a las
parejas con esterilidad o con infertilidad está recomendada por diversas asociaciones científi cas con el fi n de mejorar su atención y seguimiento; sin embargo la realidad es muy distinta pues todavía en la actualidad nos encontramos con pacientes que después de estar sometidos a técnicas de reproducción asistida: inseminación homóloga (IAC), fecundación in vitro (FIV) o inyección intracitoplas- mática de espermatozoides (ICSI), con posteriores fallos de implan- tación, abortos precoces o fetos malformados; al realizarles el es- tudio genético se encuentran alteraciones que justifican lo anterior.
Caso clínico: Pareja de 35 años con antecedentes de esterilidad
primaria de origen desconocido, es sometida a cuatro ciclos de in- seminación homóloga y uno de fecundación in vitro sin éxito. Un ciclo de FIV posterior culmina con una gestación; en la semana 14,6 se remite a nuestra sección el líquido amniótico de la gestante con la indicación de marcadores ecográfi cos.
Material y métodos: En líquido amniótico se realiza hibridación
in situ fl uorescente (FISH) interfásico (con las sondas CEP X, CEP Y, CEP 18 y LSI 13, LSI 21), cultivo según métodos habituales, técnicas GTG y QFQ. En ambos progenitores se realiza el estudio citogenéti- co en sangre periférica según los métodos convencionales. Diagnós- tico genético preimplantacional (DGP) de aneuploidías en blastó- meras. El análisis de las blástomeras biopsiadas por FISH, utilizando las sondas CEP 15, Tel 15q y LSI 21.
Resultados: El FISH interfásico se informa como varón con 2 se-
ñales para los cromosomas 13, 18 y tres señales para el cromosoma 21. Finalizado el cultivo, se observan 46 cromosomas en todas las metafases analizadas con una translocación 15;21 confi rmada con bandeo GTG, los puntos de fractura están a nivel 15q10, 21q10; no se detectan anomalías estructurales en el resto de cromosomas. Cariotipo fetal: 46, XY t(15;21)(q10;q10) +21. Cariotipo materno: 45, XX t(15;21)(q10;q10). Cariotipo del padre: 46, XY. Asesoramien- to genético: se informa a la pareja del riesgo que tienen de triso- mía 21 en futuros embarazos que al ser la madre la portadora de la translocación robertsoniana se aproxima al 10%. Se les oferta la realización de DGP si así lo desean. Se realizan dos ciclos de DGP. En las dos ocasiones se remitieron al laboratorio 3 blastómeras re- sultando todas ellas aneuploides. No se transfi ere ningún embrión.
Conclusiones: Es fundamental la realización de estudio genético
en todas las parejas con esterilidad de causa desconocida antes de iniciar tratamiento de reproducción asistida. Siempre se debe in- formar y asesorar a la pareja de la patología encontrada así como la disponibilidad para el estudio de los familiares directos. La trans- ferencia de embriones sin alteraciones citogenéticas tras DGP evita en parejas de riesgo fallos de implantación, abortos precoces o fetos con anomalías cromosómicas.
093. NUEVA UNIDAD DE REPRODUCCIÓN ASISTIDA DEL CHUVI
P. Casado Rey, D. Rodríguez Pérez, V. López Gómez, R. Requeijo Pascual, C. Pousa Fuente y A. Andrade Olivié
Hospital Xeral (CHUVI). Vigo. España.
Introducción: La Unidad de Reproducción Asistida del CHUVI
(Complejo Hospitalario Universitario de Vigo) abre sus puertas en el año 2001, siendo la unidad de referencia para toda la zona sur de Galicia, atendiendo a una población de alrededor de 222.305 muje- res de las cuales el 60% viven en pareja y entorno al 15% (20.000 parejas) tendrán algún problema de infertilidad/esterilidad. En enero de este año 2010 se traslada la Unidad al nuevo Anexo del Hospital Xeral. El traslado de la Unidad supone una mejora en las instalaciones y en el equipamiento, fundamentalmente en el Labo- ratorio. El objetivo es estudiar los datos obtenidos en la Unidad de Reproducción Asistida de nuestro hospital desde la apertura de las nuevas instalaciones con el fi n de evaluar los resultados, detectar las posibles variables que nos puedan afectar y adoptar medidas de cambio si fuera necesario.
Material y métodos: Análisis retrospectivo de los datos de los
ciclos de FIV/ICSI (fecundación in Vitro/ microinyección citoplas- mática), IAC (inseminación artifi cial conyugal), IAD (inseminación artifi cial de donante) y criotransferencias (transferencia de embrio- nes congelados/vitrifi cados) de los 299 pacientes que asistieron a la Unidad de Reproducción Asistida del CHUVI durante el periodo com- prendido desde 11 de enero hasta 31 abril del 2010.
Resultados: Ciclos FIV/ICSI: Total ciclos iniciados: 120,0, Total
punciones: 107,0, Total cancelaciones: 13,0, Sólo FIV: 36, Sólo ICSI: 50, FIV/ICSI: 21, Tasa embarazo/transferencia: 44,6%, Mediana edad: 36,0, Número de embriones vitrifi cados: 65; Ciclos IAD: Nú- mero de ciclos IAD: 36, Tasa de gestación por IAD: 22,2%; Ciclos IAC: Número de ciclos IAC: 127, Tasa de gestación por IAC: 11%; Crio- transferencias: Número total: 16, Tasa de gestación por criotrans- ferencia: 19%.
Conclusiones: Según los indicadores de calidad del Laboratorio
de Embriología Clínica presentados en el último congreso de ASEBIR la tasa de gestación clínica por transferencia para FIV/ICSI se con- sidera óptima en un 30%. Nuestra tasa de gestación clínica medía a lo largo de estos años ha sido de 35,73% y siempre superior a este valor (30%), mientras que la tasa de gestación clínica actual, coin- cidiendo con la apertura de la nueva Unidad, en el 1º cuatrimestre del año 2010 es 44,6%. Estos buenos resultados son fruto tanto de la mejora en las instalaciones del laboratorio y la adquisición de nuevo equipamiento, como a la nueva organización de la Unidad. Esta nueva situación favorece por un lado, la incorporación de nue- vas técnicas como la criopreservación de gametos, la biopsia de blastómeras para el diagnóstico génetico preimplantacional (DGP) o la donación de ovocitos y por otra para la introducción a la acre- ditación del laboratorio de FIV.
094. ANÁLISIS DEL GRADO DE ACUERDO ENTRE LABORATORIOS EN CRIOPRESERVACIÓN EMBRIONARIA
C. Gonzalvo López, A. Clavero Gilabert, B. González Soto, E. Palacios Méndez, N. Morales Rincón y J. Castilla Alcalá
Unidad de Reproducción. Servicio de Análisis Clínicos. Hospital Virgen de las Nieves. Granada. España.
Introducción: Hasta ahora diversas Sociedades Científi cas, como
ASEBIR, han tratado de estandarizar criterios a la hora de realizar la evaluación embrionaria, como se hace patente en la publicación de las dos ediciones del Cuaderno de Embriología Clínica II. Esto, unido a la política de reducción del número de embriones a trans- ferir para evitar el embarazo múltiple, establece una serie de cri- terios para la elección del número y el tipo de embriones a transfe- rir.
Objetivos: Este estudio pretende llamar la atención sobre la fal-
ta de criterios estandarizados a la hora de decidir si un embrión debe o no, ser congelado.
Material y métodos: Se compararon los resultados obtenidos en
el programa español de control de calidad externo de evaluación embrionaria, con los de un grupo de cinco expertos miembros del grupo de trabajo de calidad embrionaria de ASEBIR. Se compararon las imágenes de cigotos y embriones en día 2 y 3 y se les preguntó, en el caso de los cigotos cuales mantendría en cultivo, congelaría y desecharía; y en el caso de los embriones, cuales transferiría, con- gelaría y desecharía. Consideramos que existía acuerdo entre labo- ratorios cuando más del 75% adjudicaba la misma categoría a un embrión. Se consideró que existía acuerdo entre expertos cuando los cinco coincidían en la misma categoría para un embrión.
Resultados: Se observa un menor porcentaje de embriones con
acuerdo entre los laboratorios cuando se decide congelar (30,8%, 8/26) que al transferir (42,9%, 18/42) o desechar (66,7%, 18/27). También se observa que el acuerdo entre laboratorios y expertos en la decisión clínica presenta un índice kappa de 0,51 (IC: 0,36-0,66) y que existe menor acuerdo a la hora de congelar un embrión (54,5%, 18/33) que al decidir transferirlo (78,9%, 30/38) o des- echarlo (72,2%, 13/18). Cuando no tenemos en cuenta los embrio- nes que se deciden transferir, los laboratorios deciden congelar el 87,5% (21/24) de los embriones clasifi cados como regular, mientras que los expertos el 100% (24/24). Además los expertos deciden Con- gelar más embriones Malos que los laboratorios (28,0% vs 4,0%; 7/25 vs 1/25) (p < 0,05).
Conclusiones: La decisión de congelar o no un embrión depende
del observador. No existe acuerdo entre laboratorios a la hora de decidir qué embriones congelar, y a su vez tampoco se ponen de acuerdo con los expertos que presentan mayor tendencia a conge- lar embriones que no transfi eren. Esta diferencia nos llevaría a que las tasas de gestación por ciclo congelado serían porcentualmente mayores en el grupo de laboratorios que en el de expertos, pues los primeros congelan mejores embriones. Por esto creemos que la ma-
nera de evaluar un programa de congelación embrionaria debería ser analizando la tasa de embarazos por ciclo con embriones frescos y congelados de manera conjunta. También creemos que estas dife- rencias en la decisión de congelar van a depender de la política de cada laboratorio, que estará asociada a los resultados de sus técni- cas de congelación/descongelación. Creemos necesario establecer unas recomendaciones claras por parte de las Sociedades Científi - cas sobre que embriones deberían congelarse y cuáles no.
095. RESULTADOS DEL LABORATORIO DE SEGURIDAD BIOLÓGICA EN LAVADO SEMINAL DE VARONES CON VIH Y/O VHC
A. Clavero Gilabert, C. Gonzalvo López, B. Romero Guadix, S. Zamora López, J. Aguado Merlo y J. Castilla Alcalá
Unidad de Reproducción. Servicio de Análisis Clínicos. Hospital Virgen de las Nieves. Granada. España.
Introducción: La elevada incidencia del VIH y de la hepatitis en
pacientes en edad fértil unido al aumento de expectativa y calidad de vida por la mejora de los tratamientos, han hecho que cada vez más parejas de este tipo tengan deseos reproductivos.
Objetivos: Conocer la epidemiología y datos de laboratorio de
parejas serodiscordantes con deseos de gestación que llegaron a nuestro centro, así como la efi cacia del lavado seminal y los resul- tados en Técnicas de Reproducción Asistida de estas parejas.
Material y métodos: Estudio de parejas con VIH, VHC, VIH + VHC
de nuestro programa de lavado de semen desde el 8/11/05 al 31/12/2009, usando como fuente de información la base de datos del centro y revisión de historias clínicas. Se citaron 106 parejas, de las que se realizaron 85 lavados, siendo aptas para congelación el 87,1%. Los parámetros a analizar son vías de transmisión, carga vi- ral sérica, carga viral en semen lavado, presencia y años de esteri- lidad. En el caso de pacientes con VHC también se analiza el geno- tipo del virus. Analizamos 11 casos de VIH, 37 de VHC y 26 de VIH + VHC. Para el estudio de la carga viral en semen postlavado se utili- zó PCR (límites de detección de menos de 40 copias/ml en el caso de VIH y de menos de 10 UI/ml en la hepatitis C).
Resultados: La vía de transmisión en pacientes con VIH fue ADVP
en cinco casos (45,4%), el resto desconocida. En los pacientes VIH + VHC, la vía de transmisión de diez casos fue ADVP (38,5%), dos he- mofi licos (7,7%) y catorce desconocida. El motivo de consulta del 54,5% de los pacientes VIH fue infertilidad e infección, mientras que el resto acudió únicamente por la infección, para evitar el contagio a su pareja. De los pacientes VIH + VHC el 35% se presen- taron por esterilidad e infección, 50% por la infección y en el 15% desconocemos si existía esterilidad. La carga viral sérica media en los pacientes con VIH fue de 3.429 ± 365 copias/mL, en los pacien- tes VIH + VHC fue de 2004 ± 126 copias/mL (VIH) y 5,1 ± 0,4 millo- nes UI/mL (VHC). Los pacientes con VHC tuvieron una carga viral sérica media de 4,9 ± 0,5 millones UI/mL. Tras realizar el lavado de semen la carga viral postlavado fue indetectable en 84 casos. Sólo 1 caso (1,1%) de VIH + VHC dio positiva la carga viral de VHC, con lo que la muestra congelada fue desechada y tras realizar nuevo lava- do seminal el resultado fue indetectable. El genotipo más común de VHC fue el tipo 1. Hemos realizado 160 ciclos de FIV/ICSI a 112 parejas serodiscordantes, con una tasa de embarazo por transfe- rencia embrionaria de un 21,5% en VIH y 27,5% en VHC. Realizamos ciclos de inseminación artifi cial conyugal a 3 parejas con VIH obte- niendo una tasa de gestación de un 33,3%. Desde noviembre 2005 hemos tratado a 130 parejas serodiscordantes (incluyendo 18 pare- jas de VHB), con resultado global de gestación de un 32.3% de las parejas tratadas.
Conclusiones: El lavado seminal fue efectivo en el 98,9% de los
pacientes, independientemente de su Carga Viral sérica. Al no ser efectivo en la totalidad de los casos consideramos necesario seguir determinando la carga viral postlavado. Existe un mayor porcentaje
de pacientes VHC que se estudian por su esterilidad que de pacien- tes VIH o VIH + VHC, los cuales acuden en mayor proporción debido al deseo de no contagio de la pareja. En nuestro programa de aten- ción a parejas serodiscordantes hemos aplicado técnicas de Repro- ducción Asistida a 130 parejas, con un resultado global de gestación de un 32,3%.
096. ABORTO DE REPETICIÓN EN REPRODUCCIÓN ASISTIDA: DATOS DE LABORATORIO
C. Gonzalvo López, A. Clavero Gilabert, I. Molina González, A. Rosales, N. Morales Rincón y J. Castilla Alcalá
Unidad de Reproducción. Servicio de Análisis Clínicos. Hospital Virgen de las Nieves. Granada. España.
Introducción: El aborto recurrente se defi ne como dos o más
abortos espontáneos consecutivos. Su prevalencia en Reproducción Asistida (RA) es de un 1-5%, y su etiología no se puede identifi car en un 40-50% de los casos.
Objetivos: Conocer las causas del aborto recurrente en las pare-
jas que consultan por esta razón en la Unidad de Reproducción de nuestro hospital.
Material y métodos: Estudio retrospectivo observacional de 172
parejas que consultaron por aborto recurrente entre los años 2002- 2008. A cada pareja se le realizó un estudio consistente en: anam- nesis, exploración general y ginecológica, ecografía, cariotipo, se- minograma, analítica general y hormonal y estudio de trombofi lias.
Resultados: El estudio fue normal en 122 pacientes (70,9%),
mientras que en 50 pacientes se encontraron alteraciones. En 24 casos (48%) existían alteraciones uterinas, en 22 casos (44%) apare- cieron alteraciones en la coagulación, en 1 caso (2%) alteraciones genéticas y en el resto (6%) más de una alteración. De las alteracio- nes en la coagulación, la mayoría fue por presencia de Ac antifosfo- lípido (7 casos), anticoagulante lúpico (4 casos) y mutaciones del gen MTHFR (4). En el resto hubo combinación de los anteriores (1), Ac anticardiolipina (2), mutaciones en el gen de la protrombina (1) o Factor V de Leiden (1). En estos casos, en la siguiente gestación hubo un 58,1% de abortos, mientras que el 41,9% llegó a término.
Conclusiones: La mayoría de las parejas (70,9%) que acude a
nuestro centro por aborto de repetición será clasifi cada como idio- pática tras realizar el estudio de abortabilidad. De las parejas que presentaron alteraciones en los parámetros de laboratorio (altera- ciones de coagulación), la más frecuente fue la presencia de Ac antifosfolípido. Estas parejas, tras concebir de nuevo, sufrieron un aborto en un 58,1% de los casos.
097. VALIDEZ CLÍNICA DEL TEST DE EVALUACIÓN DE LA ESTRUCTURA DE LA CROMATINA ESPERMÁTICA (SCSA) FRENTE A LOS PARÁMETROS CLÁSICOS DE SEMEN
C. Gonzalvo López, A. Clavero Gilabert, S. Zamora López, J. Aguado Merlo, I. Molina González y J. Castilla Alcalá
Unidad de Reproducción. Servicio de Análisis Clínicos. Hospital Virgen de las Nieves. Granada. España.
Introducción: El presente estudio está basado en una búsqueda
sistemática en PubMed y compara la validez clínica de los paráme- tros clásicos de semen (CSP) con la evaluación de la estructura de la cromatina espermática (SCSA) en diferentes escenarios clínicos, cuyo objetivo es evaluar la validez clínica del SCSA frente a CSP.
Material y métodos: Estudiamos los resultados de revisiones siste-
máticas publicados de cada test en tres escenarios clínicos: parejas que buscan embarazo mediante relaciones naturales (RN); grupo for- mado por varones de parejas fértiles vs varones de parejas estériles por factor masculino (F vs E); parejas que requieren técnicas de re- producción asistida mediante inseminación intrauterina por una es-
terilidad por factor masculino (IUI). En caso de no hallar ninguna, efectuamos una búsqueda sistemática de artículos publicados al res- pecto en PubMed utilizando palabras clave (test diagnóstico, semen, espermatozoide, embarazo). Se encontraron 3 revisiones sistemáti- cas para IUI: 2 para SCSA y 1 para morfología espermática. Para los escenarios clínicos RN y Fvs E no se encontraron revisiones sistemá- ticas y se llevó a cabo la mencionada búsqueda en PubMed. Inicial- mente se obtuvieron 1.592 resultados. Fueron excluidas 1.563 tras consultar los títulos y analizar sus “abstracts”, 6 fueron comparar pacientes normozoospérmicos y oligoastenozoospérmicos, 8 por ba- sar su estudio en “time to pregnancy” y 4 por imposibilidad de re- construcción de las tablas 2 × 2. El estudio incluye en total 14 artícu- los. La probabilidad pre-test de esterilidad por factor masculino en cada escenario fue: 7,5% en RN, 50% en F vs E, 85% en IUI. A continua- ción se calcularon los estadístico de efi ciencia diagnóstica derivados de la tabla 2 × 2 y la probabilidad post-test de esterilidad por factor masculino se calculó utilizando el Nomograma de Fagan.
Resultados: Para RN la probabilidad de esterilidad por factor
masculino varía de un valor pre-test de 7,5% a un valor post-test de 32,1% (IC95% 15,7-54,5) cuando se obtiene un resultado anormal de SCSA, mientras que tras un resultado anormal en los CSP la proba-