El presente estudio es de tipo experimental “In vitro”, cuyo propósito fue conocer el efecto inhibitorio in vitro del vino tinto var. Cabernet Sauvignon a concentraciones del 12.5% y 25%, sobre Streptococcus mutans ATCC 25175; a su vez comparar este efecto con el ejercido por el vino blanco var. Chardonnay y Alcohol Etílico a la concentración de 14% que viene a ser la máxima que puede tener un vino, diluidos ambos igualmente al 12.5% y 25%.
El procedimiento se realizó de acuerdo con lo que se ha reportado en la literatura y, para determinar el efecto inhibitorio se hizo uso del método de difusión en discos y placas, con procedimientos que se han realizado en el Laboratorio de la Sección de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.
Según lo observado, los resultados del efecto bactericida, medida a través del diámetro de los halos generados por el vino tinto var. Cabernet Sauvignon en concentraciones de 12.5% y 25%. Se determinó que, el vino tinto a 48 horas en ambas concentraciones presentó mayor efecto bactericida que las otras concentraciones del mismo. Para el vino blanco var. Chardonnay en concentraciones de 12.5% y 25 se determinó que a 48 horas y en ambas concentraciones, presentó mayor efecto bactericida
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concentraciones de 12.5% y 25% se determinó que a 48 horas en ambas concentraciones presentó mayor efecto que las otras concentraciones del mismo (Tabla 1-3). Pero en especial se observa que siempre en las concentraciones del 25% a las 48 horas se genera un mayor efecto bactericida sobre Streptococcus mutans ATCC 25175. Estos resultados muestran un predominio en el efecto del vino tinto por sobre el blanco y el alcohol etílico con respecto al tiempo, pudiendo los flavonoides presentes en éste generar un efecto antibiótico residual. Este efecto es el que permitiría la inactivación prolongada de importantes mecanismos enzimáticos generados por la bacteria en estudio como por ejemplo la inhibición de la enzima glucosiltransferasa de Streptococcus mutans; enzima responsable de las interacciones adhesivas y expresión de virulencia34.A su vez en un estudio utilizando los taninos de Caesalpina spinosa ( taya) coinciden en que los taninos serían los fitoconstituyentes con mayores propiedades antibacterianas al precipitar proteínas (enzimas) ,implicadas en las diversas rutas microbianas35.
En la Tabla de análisis de varianza para los diámetros de halos de inhibición se presentan los resultados estadísticos, donde se determinó a través de los datos obtenidos en los grupos experimentales (concentraciones al 12.5% y 25% de vino tinto, vino blanco y alcohol etílico respectivamente) son estadísticamente significativos, ya que se cumple que p<0.05, para el promedio del halo de difusión de los mismos; ya que el valor calculado de P en la tabla de ANOVA es (0,00), el cual es
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menor que 0,05. Este resultado nos permitió poder evaluar cuál de los tratamientos usados ejercía un mayor efecto bactericida sobre la cepa en estudio (Tabla N°4). Este resultado es similar con la investigación de Valladares, en el cual se estudió el efecto inhibitorio “in vitro” sobre el crecimiento de Streptococcus mutans. La investigadora utilizando taninos a través una infusión de anís estrella a 5 diferentes concentraciones, encontró que existía una diferencia significativa entre las diversas concentraciones de la infusión de anís estrella (Illium verum) y el crecimiento de Streptococcus mutans36.
A su vez, la Prueba de Duncan nos permitió determinar qué grupos experimentales son diferentes entre sí y cuales son iguales estadísticamente. Obteniendo que el tratamiento que maximiza el diámetro del halo; es decir, que tiene un mayor efecto bactericida sobre Streptococcus mutans es el tratamiento 2 que viene a ser el de vino tinto a una concentración del 25% (Tabla N°5). Este efecto bactericida coincide con el estudio de Neira y col37.usando taninos de Psidium guineense Sw (Choba),en el cual se concluye que debido a que la bacteria evaluada (Streptococcus mutans ATCC 25175 )posee dentro de su estructura una membrana citoplasmática con fosfolípidos y proteínas; por fuera de ésta se encuentra la pared celular que está compuesta por una ancha capa de peptidoglicano y bajo contenido lipídico, esto hace que las catequinas y taninos abundantes en el vino tinto al ser compuestos polares catiónicos
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sustancias a su interior, alterando el balance electrolítico y por consiguiente generando la lisis bacteriana.
En el análisis realizado para evaluar la cantidad de Unidades Formadoras de Colonias que lograban crecer en presencia de vino tinto var. Cabernet Sauvignon, vino blanco var. Chardonnay y Alcohol Etílico en sus diferentes concentraciones, se comprobó que existe diferencia altamente significativa entre los tratamientos, pues la significancia obtenida cumple; p <0.05 (p= 0.000). Es decir, permitió determinar el mejor tratamiento a usar para reducir las Unidades Formadoras de Colonias (Tabla N°6), logrando consigo una mayor inhibición en el crecimiento de Streptococcus mutans ATCC 25175.
Al realizar la Prueba de Duncan, para agrupar los tratamientos según su grado de significancia, se obtuvieron tres grupos, donde en el primero aparecen el vino tinto al 25% y el vino blanco al 25%; ambos de entre todos los tratamientos tienen los menores promedios, es por eso que se les clasifica en un mismo grupo (Tabla N°7). Sin embargo el que menor conteo de Unidades Formadoras de Colonias tiene es el vino tinto al 25%, siendo este el mejor de los tratamientos para reducir la cantidad de Unidades Formadoras de Colonias. Esto nos podría demostrar que el agente causal del efecto inhibitorio en el crecimiento de Streptococcus mutans son los polifenoles (catequinas y taninos) debido a que la diferencia entre los vinos usados, tinto y blanco, es la cantidad de taninos
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presentes en ellos; ya que el alcohol presente en estos fue evaluado y se determinó que por sí mismo no produce un efecto bactericida tan importante.
De esta manera, el estudio por lo antes expuesto lleva a aceptar la hipótesis propuesta al inicio de la investigación, pudiendo afirmar que el vino tinto var. Cabernet Sauvignon tiene un efecto inhibitorio sobre el crecimiento de Streptococcus mutans ATCC 25175.
Los resultados obtenidos a partir de esta investigación apoyarían a las conclusiones de otros investigadores, donde además de los beneficios planteados por ellos se permitiría agregar una reducción de la prevalencia de caries como aporte adicional al consumo habitual y moderado de vino17- 27. Entiéndase por consumo moderado y, apoyado en diversos estudios, a una toma diaria máxima de 30 ml (una copa de vino aproximadamente), para una persona de 70 kg en promedio17, 18.
Dentífricos como Parondontax® poseen taninos en su composición en una presentación de tintura como por ejemplo la tintura de Ratania, de Equinácea, de Mirra, de Camomila y de Salvia38. Surge la pregunta entonces si es que estos son los más adecuados o es que podría evaluarse la posibilidad de sustituirlos por taninos encontrados en el vino. Esto con la finalidad de mejorar las propiedades organolépticas y