DISCUSION DE RESULTADOS

Debido a la gran cantidad de material vegetal incautada en Guatemala se realiza pruebas de identificacio n para determinar si dicho material vegetal es marihuana; Sin embargo, se requiere de una nueva metodologí a instrumental para poder identificar los componentes especí ficos de la marihuana y así mismo tener una prueba confirmatoria que le de validez al ana lisis cualitativo.

Las pruebas de identificacio n que se hacen regularmente en el Laboratorio de Sustancias Controladas del INACIF es la prueba bota nica y pruebas quí micas, para darle seguimiento, las muestras se trataron de la misma forma y en la tabla No. 1 se observa los resultados de dichas pruebas. Se analizo 15 muestras de material vegetal y fueron observadas por medio de un estereoscopio el cual se pudo identificar material vegetal color verde, el Cannabis sativa puede identificarse por la presencia en la superficie de la planta con tricomas que son formaciones semejantes a un cabello proyectadas desde un ce lula epide rmica de la planta. Los tricomas cistolí ticos se encuentra en la superficie superior de las hojas de cannabis, poseen una caracterí stica forma de garra y pueden tener cristales de carbonato de calcio (cistolitos) apreciables en su base (Naciones Unidas, 2010),en algunas muestras (No. 1, 6 y 10) se logro observar semillas ovoidales, con una cubierta reticulada y de color verdoso, estas son caracterí sticas bota nicas

60 propias de la marihuana, por lo que se puede considerar que el material vegetal es marihuana (Anexo No. 1).

Tambie n se realizaron pruebas quí micas; tales como PABA que dio una coloracio n rojo ladrillo que indica positivo para marihuana (Anexo No. 2) y la prueba de Duquenois- Levine modificado que dio una coloracio n azul violeta en capa inferior clorofo rmica (Anexo No. 3) que tambie n indica positivo para marihuana (tabla No. 1).

En la Tabla No. 2 se observa las caracterí sticas de las muestras antes de ser inyectadas en el equipo, se tomo en cuenta el nombre con que se archivo en el equipo y la cantidad de MV utilizada para realizar la extraccio n que fue de aproximadamente 150 mg. El volumen de metanol para extraer los componentes de marihuana, que fue de 2.5 mL del cual se dejo reposar por 15 minutos y la cantidad de extracto filtrado que se coloco en el vial para inyectar fue de 1.5 mL.

Los resultados de la muestra en el equipo, (Tabla No. 3) se observo que todas las muestras tení an un pico caracterí stico como se observa en el cromatograma (anexo No. 4-5) en un tiempo de retencio n con un promedio de 7.10 y que al comparar en la biblioteca del equipo, el nombre del compuesto era Dronabinol que es sino nimo del Tetrahidrocannabinol (THC). Segu n la referencia de Naciones Unidas contra la droga y el delito, el THC tiene un tiempo de retencio n de 7.1 por lo que concuerda dichos datos, concluyendo de que se trata del THC, componente importante que se encuentra presente en la marihuana el cual le da la propiedad de euforizante. Tambie n se compararon las muestras de THC experimental con un esta ndar de THC y se observo que habí a similitud en los tiempos de retencio n ya que el esta ndar tuvo un TR de 7.11 que es cercano al TR experimental y en los fragmentos en masa/carga (m/z) vistos en el espectro de masas del THC del MV y es esta ndar fueron los mismos (55, 231, 271, 2,99, 314) (anexo 5). El Quality de las muestras para el THC fue de 99, este factor indica el grado de coincidencia que tiene el componente (THC) de la muestra experimental con los de la literatura (Stashenko y Martí nez, 2010).

Tambie n en algunas muestras como la 4, 6, 7 y 10 de la tabla No. 3; se observaron otros componentes como el Cannabinol que tiene propiedad como sedante y es soluble en

61 metanol y el Δ-9-Tetrahidrocannabivarin que es un ana logo del THC que tiene una cadena de propilo en vez de un grupo pentil y que se encuentra regularmente en la marihuana (Turner, 1973) (anexo 6) y el quality de estos dos componentes eran mayor de 90 por lo que se considera que tiene un grado de coincidencia alto.

Al observar el promedio de los TR de THC del MV, se comparo con el TR del Esta ndar de THC y se obtuvo una significancia de 0.01; por lo que se cumple la hipo tesis nula que indica que no hay diferencia significativa entre el valor experimental y el valor de referencia, cumpliendo con el nivel de confianza del 95%.

Tambie n se realizo un ana lisis en espectro metro UV-Vis del material vegetal como otra prueba confirmatoria y se comparo con el esta ndar de THC que fue otorgado por el laboratorio. El material vegetal (MV) disuelto en metanol, analizado en espectro metro UV-Vis; Se logro identificar un pico a 208 nm (ver tabla No. 4) que al comparar con el esta ndar de THC se comprobo que se encontraba presente el mismo pico a 208 nm. El valle de 247 nm observado en el MV es cercano al valle del esta ndar de THC que es de 249 nm, la diferencia permitida en el laboratorio entre los picos y valles del espectro UV-Vis es de ma s/menos 2 nm; por lo observado anteriormente se considera que la muestra de MV posee THC en su composicio n.

CONCLUSIONES

 Se logro implementar un me todo instrumental para la identificacio n de los componentes principales de la marihuana.

 Se identifico en el equipo de CG/EM componentes quí micos de la marihuana; tales como Tetrahidrocannabinol, Cannabinol y Δ-9-Tetrahidrocannabivarin.  Se logro comparar el tiempo de retencio n del THC del material vegetal

(marihuana) con valores de literatura y con el Esta ndar de THC proporcionado por el laboratorio, siendo estos valores similares.

 Los fragmentos segu n el m/z del Espectro de masas para el THC del MV y del Esta ndar fueron los mismos, por lo que se concluye que efectivamente se trata de THC.

62 RECOMENDACIONES

 Realizar otro me todo en el que se utilice cloroformo como medio de extraccio n y de solucio n, debido a que la mayorí a de los componentes quí micos que no se logro observar en un medio de metanol y que esta n presentes en la marihuana son solubles en cloroformo.

 Tener Esta ndares de los dema s componentes identificados en las muestras, para tener mayor referencia y comparacio n.

 Solicitar otro cromato grafo de gases acoplado a espectrometrí a de masas para realizar los ana lisis de la identificacio n de marihuana y así no interferir en el ana lisis cualitativo y cuantitativo de la cocaí na.

LECCIONES APRENDIDAS

 Poder manejar el equipo de cromatografí a de gases/espectrometrí a de masas y así mismo poder desarrollar una nueva metodologí a que posteriormente sera implementada por la seccio n de Laboratorio de Sustancias Controladas para poder identificar los componentes específicos de la marihuana y así mismo tener una documentación confirmatoria que le dé validez a dicho análisis.

63 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Arreola, E., (20 de marzo 2017). Se Incrementa consumo de marihuana en la capital. Guatemala: Prensa Libre. p.3

Fernández, Nicolas, Mercedes, Vigo, Olivera, N. Mónica, Ridolfi, Adriana S, & Quiroga, Patricia N. (2016). Validación de un método para cuantificar ácido-11-nor-9-carboxi- Δ9- tetrahidrocannabinol en orina por cromatografía gaseosa-espectrometría de masas previa extracción en fase sólida. Acta toxicológica argentina, 24(2), 116-127.

Recuperado en 30 de marzo de 2017, de

http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1851- 37432016000200004&lng=es&tlng=es

Galand N, Ernouf D, Montigny F. (2004). Separation and identification of Cannabis

components by different planar chromatography techniques (TLC, AMD, OPLC). JChromatogrSci. Mar; 42(3): p.130-134.

García. R., (2015). Relación de hechos violentos con el consumo de Marihuana en la población guatemalteca. Guatemala: INACIF con la ciencia a la verdad. 1(4), 3-10 Moffat, A. C. (1986). Clarke´s Isolation and Identification of drugs, second edition. London.

423-425

Naciones Unidas, (2010). Métodos recomendados para la identificación y el análisis del cannabis y los productos del cannabis (Revisado y actualizado). Viena: Oficina de las Naciones Unidas contra la droga y el delito (UNODC).

Stashenko, E., y Martínez J., (2010). Algunos aspectos prácticos para la identificación de analitos por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. Scientia Chromatographica Vol.2, N°1, 29-47, Instituto Internacional de Cromatografia Steve Kilts, vice president of CannLab, Denver, CO, USA. (2012). Industry Needsto Start

Taking Medical Cannabis Testing, Labeling Seriously. Medical Marijuana Business Daily, www.mmjbusinessdaily.com, 2nd of October 2012.

Street drugs, (2005). Drogas callejeras, Guía para identificar las drogas. EE.UU. PublishersGroup, LLC.

Turner, CE, Hadley, KW, y Fetterman, P. 1973. Componentes de Cannabis Sativa L., VI: Homólogos de Propilo en muestras de origen geográfico conocido. J. Pharm. Sci. 62 (10): 1739-1741

64 ANEXOS

Anexo No. 1 Imagen de prueba botánica de marihuana vista por estereoscopio

Fuente: Laboratorio de Sustancias Controladas INACIF, Zona 6 de Guatemala Anexo No. 2 Imagen de pruebas químicas con PABA para Marihuana

Fuente: Laboratorio de Sustancias Controladas INACIF, Zona 6 de Guatemala Anexo No. 3 Prueba de Duquenois-Levine modificado para marihuana

65 Anexo 4 Cromatograma de gases de Dronabinol

Fuente: Laboratorio de Sustancias Controladas INACIF, Zona 6 de Guatemala