en las células de adenocarcinoma. Los 4 niveles fueron los siguientes: 0: No reactividad;
1+: expresión débil. Reactividad marrón claro a nivel de la membrana, cito- plasma, o ambos. La tinción de la membrana no necesariamente completa. La tinción del citoplasma es uniforme. No presenta acentuación de la intensidad en la región citoplasmática submembrana.
2+: expresión moderada. La tinción de la membrana celular es marrón inter- medio en cuanto a intensidad se refiere. Normalmente la reacción es completa alrededor de la célula, también se considera nivel 2 si en alguna célula no es
Referencia % células marcadas Intensidad de la tinción Score global Cunningham <10% >10-20% 20-35% >35% Leve Moderado fuerte No existe
Hirsch Variable continua de 0 a 100% Negativo= 1 Leve=2 Moderado=3 Fuerte=4
% de células teñidas multiplicado por la intensidad
- 0-200: negativo o bajo - 201-300: intermedia - 301-400: alto
Kersemckers 0:Ninguna celula positiva 1: (1-25%) 2: (26-50%) 3: (51- 75%) 4: (76-100%) Negativo= 0 Leve=1 Moderado=2 Fuerte=3
Suma de proporción e intensidad 0 negativo
2-3 leve 4-5 moderado 6-7 fuerte
Scartozzi <1% de células tumorales teñidas >1% de células marcadas
Leve=1 Moderado=2 Fuerte=3
Positivo o negativo basado en la propor- ción de células marcadas
Spano Grado 0 (ninguna) Grado 1(1-25%) Grado 2 (25-50%) Grado 3 (>50%) Negativo= 0 Leve=1 Moderado=2 Fuerte=3
Grado multiplicado x intensidad, rango de 0-9
- <6 expresión baja - <6 expresión alta Tabla 3. Métodos de evaluación de EGFR
completa. La mayoría de las células presentan reactividad citoplasmática que es de intensidad más débil que la reactividad de la membrana. Algunas célula pueden presentar un reborde periférico de la reactividad citoplasmática mo- derada que era más oscuro y más intenso en la región inmediatamente subya- cente a la membrana celular.
3+: expresión fuerte. Color marrón oscuro con manchas negro y normalmente en un patrón de membrana completo, produciendo un contorno grueso de la célula. Muchas células con reactividad 3+ membrana presentan también in- tensa moderada citoplasmática. Muchas células tienen una región prominente de acentuación citoplasmática submembrana, produciendo una zona de es- pesa nebulosa de reactividad membranosa. Algunas células pueden tener un pequeño segmento de la membrana de menor intensidad. Las células que pre- sentaban con fuerte reactividad citoplasmática exclusivamente también fue- ron clasificados como expresión fuerte, 3+.
Al igual que Goldstein, varios investigadores han tenido en cuenta la inten- sidad de la expresión de EGFR.
Spano (2005)81 tiene en cuenta extensión e intensidad. El porcentaje de célu- las marcadas se calificó como sigue:
-! grado 0: no hay células positiva;
-! grado 1: 1-25 % de las células tumorales expresan EGFR; -! grado 2: 25-50% células tumorales expresan EGFR; -! grado 3: > 50 % de células tumorales positivas .
La intensidad de la expresión de EGFR la evaluó visualmente según el color de la membrana celular, el citoplasma o ambos, desde beige claro a marrón y se puntuó como 0 (negativo ) , 1 (débil ) , 2 (moderado ) o 3 (fuerte ) . Definió un score que integraba la extensión y la intensidad, va desde 0 a 9: Dicho score se obtuvo multiplicando el grado por la intensidad. Los pacientes fueron analizados en función de su expresión de EGFR : baja: < 6 y alta: > 6 .
Es decir, que varios autores han intentado definir la expresión del EGFR.
Expresión+de+EGFR+y++pronóstico+tumoral+
Ya es conocido que el EGFR interviene en el desarrollo embrionario y el cre- cimiento de diferentes tejidos. La expresión de EGFR varía según con la etapa del desarrollo en la que se encuentran los tejidos.
Estudios in vivo de tejido epitelial de ratón sano han demostrado que la ex- presión de EGFR es mayor en células con capacidad proliferativa que en aquellos tejidos que ya que han comenzado a diferenciarse o han perdido su potencial de crecimiento cuya expresión de EGFR es menor.
A fecha de hoy se conoce el papel que juegan los factores de crecimiento en la patogénesis del cáncer. Los factores de crecimiento contribuyen a la pro- gresión del tumor a través de diferentes mecanismos:
1.! El aumento de la expresión de los receptores de membrana de las células tumorales que incrementa la sensibilidad frente a concentraciones bajas de factores de crecimiento.
2.! Existe una relación directa entre los factores de crecimiento y proto-on- cogenes celulares. De hecho, varios proto-oncogenes codifican proteínas que son: factores de crecimiento, receptores de factores de crecimiento, o proteínas que están implicadas en la vía de transducción de señales intra- celulares para factores de crecimiento. Además, los proto-oncogenes ce- lulares activados también pueden controlar la producción endógena y / o la respuesta de las células tumorales a los factores de crecimiento. 3.! Se ha demostrados la participación de los factores de crecimiento en el
mantenimiento de la supervivencia de las células tumorales, promoviendo la angiogénesis inducida por el tumor.
La expresión de EGFR varía en función de los tumores de cada órgano o te- jido, y también pueden variar en tumores del mismo tipo. Las posibles causas de esta situación son:
- En primer lugar, que los tumores solidos se han clasificado clásicamente según sus características histológicas, sin embargo, las nuevas técnicas mole- culares han demostrado que los que considerábamos como mismo tipo histo- lógico son heterogéneas respecto a la citogenética y los perfiles de expresión proteica.
- En segundo lugar, las diferencias debidas a los diferentes métodos utilizados para la medida de la expresión de EGFR
- En tercer lugar, la determinación del EGFR se realiza sobre una muestra de tumor que en alguna situación podría no ser representativa.
La sobreexpresión de EGFR en los diferentes tipos de tumores se ha correla- cionado con mal pronóstico, períodos libres de enfermedad más cortos, con estadios de la enfermedad más avanzados en el momento del diagnóstico, me- nor diferenciación del tumor o un comportamiento más agresivo del mismo. Nicholson82 y colegas publicaron en 2001 un extenso trabajo que incluye más de 200 estudios realizados entre 1985 y 2000, en el cual participaron más de 20.000 pacientes. En esta revisión se dispone de datos de expresión de EGFR y su significado pronóstico. Hay datos de la sobreexpresión de EGFR en 10 tipos de tumores respecto al tejido sano normal. De estos, la sobreexpresión de EGFR es indicador pronóstico en cinco tipos de tumores: cérvix, ovario, cabeza y cuello , vejiga y esofágicos. En mama, gástrico, endometrio y colo- rrectal esta relación pronóstica fue moderada y en NSCLC menos importante. La crítica que se hacen los mismos autores es que el verdadero significado pronóstico de EGFR probablemente puede estar subestimado por tratarse de un análisis retrospectivo. En primer lugar, hay una considerable heterogenei- dad en las poblaciones de pacientes en relación con la enfermedad en estadio
precoz y tardía. En segundo lugar, la determinación de la expresión de EGFR en el tumor es variable, así como las definiciones de lo que significa sobreex- presión alta.
Aunque las determinaciones fueron por técnica de inmunohistoquímica en todos los casos , hubo variaciones respecto al laboratorio utilizado, los reac- tivos y el método empleado. Por último, los estudios sólo midieron la expre- sión de EGFR celular en lugar del receptor fosforilado, forma activa del re- ceptor.
Los mecanismos por los que el EGFR podría relacionarse en estos tumores con una biología más agresiva se explican por la interacción del receptor de la célula tumoral, mediante mecanismos autocrinos, yuxtacrinos y paracri- nos, con el microambiente tumoral, favoreciendo la multiplicación celular, la supervivencia celular, la permeabilidad de los vasos y la formación de una red vascular más rica (angiogénesis), que favorezca la aparición de metástasis a distancia.
Describiremos mas adelante el papel pronóstico del EGFR en cáncer colo- rrectal