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Capítulo 4. Efecto del nivel de proteína en dieta manteniendo la proporción de aminoácidos esenciales

4.1. Estrategias para una proteína en dieta más eficiente

5.3.1. Formulación de las dietas

Se formularon 4 dietas iso-energéticas con un contenido energético estimado de 505 kcal/100 g y 4 niveles de proteína cruda de 51%, 46%, 46% y 37% del peso seco (i.e., dietas nombradas 51C, 46C, 46AA y 37AAE, respectivamente). La Dieta 51C y la dieta 46C se formularon como dietas control con base en estudios anteriores (ver Capitulo 4). La dieta 46AA se formuló a 46% de proteína pero utilizando como base la relación de aminoácidos esenciales cuantificada en el cuerpo entero de la totoaba (Tabla 10) agregando AAE cristalinos. A su vez, se agregaron algunos aminoácidos no esenciales (glicina, alanina y glutamina) para evaluar el aporte de los AANE en el desempeño de los juveniles de totoaba. Por último se formuló otra dieta (37AAE) reduciendo el nivel de proteína a 37% pero manteniendo la proporción de aminoácidos esenciales que se encuentran en el cuerpo entero de la totoaba.

Tabla 18. Formulación de la dietas experimentales (g/100 g en base seca) y composición proximal de las dietas

experimentales (base seca). 51C = 51% proteína cruda, 46C = 46% proteína cruda, 46AA = 46% proteína cruda con aminoácidos esenciales y no esenciales, 37AAE = 37% proteína cruda con aminoácidos esenciales.

Dietas

Ingrediente 51C 46C 46AA 37AAE

Harina Pescado 73.5 62.5 52.5 52.5 Almidón gelatinizado 11.78 12 12 12 Celulosa 0 0.08 2 Almidón 10 9.6 18.59 Aceite pescado 9.3 10 11 11 Taurina 1 1 1 1 Metionina 0 0 0.13 0.13 Arginina 0 0 0.3 0.3 Treonina 0 0 0.06 0.06 Glicina 2.33 Alanina 2.33 Glutamina 2.33

Mix vitaminas y minerales 3 3 3 3

stay C 1 1 1 1 butilhidroxitolueno 0.09 0.09 0.09 0.09 Cloruro colina 0.1 0.1 0.1 0.1 Benzoato sodio 0.23 0.23 0.23 0.23 Composición proximal (%) Proteína cruda 51.0 ± 0.76 46.5 ± 0.53 46.5 ± 2.51 37.0 ± 0.90 Lípidos crudos 15.8 ± 1.16 13.7 ± 1.29 14.3 ± 0.30 14.8 ± 0.48 Ceniza 13.9 ± 0.16 12.3 ± 0.03 11.0 ± 0.50 10.9 ± 0.01 ELN + fibra 19.8 ± 1.52 27.3 ± 1.88 29.4 ± 0.79 37.5 ± 0.48 Kcal/100 g* 505.15 504.87 506.88 502.43

5.3.2. Elaboración de las dietas experimentales

La elaboración de las dietas experimentales se realizó de acuerdo al procedimiento descrito en la sección 4.3.2. La composición del perfil de aminoácidos de las dietas se muestra en la tabla 21.

Tabla 19. Perfil de aminoácidos de las dietas experimentales* (g / 100 g) y porcentaje de los aminoácidos esenciales

respecto a lisina (lisina como 100%). 51C = 51% proteína cruda, 46C = 46% proteína cruda, 46AA = 46% proteína cruda con aminoácidos esenciales y no esenciales, 37AAE = 37% proteína cruda con aminoácidos esenciales.

Dietas

Totoaba

cuerpo completo 51CP 46CP 46AA 37AAE

Aminoácido Lisina 4.5 4.0 3.7 3.2 3.0 Metionina 1.8 1.2 1.2 1.3 1.1 Arginina 4.0 3.1 2.8 2.3 2.6 Leucina 3.9 3.9 3.5 3.2 2.9 Isoleucina 2.2 2.2 1.4 1.5 1.8 Histidina 1.2 1.4 1.3 1.2 1.1 Treonina 2.4 1.5 1.4 1.3 1.2 Fenilalanina 2.1 2.0 2.1 1.3 1.5 Valina 2.6 2.9 2.8 1.8 1.9 Triptófano 0.5 ND ND ND ND Aminoácidos No esenciales Glutamato 7.6 7.0 7.4 6.0 Glicina 3.8 3.4 4.7 2.6 Alanina 3.4 3.0 3.2 2.4

% del aminoácido respecto a lisina (lisina 100%). Lisina 100 100 100 100 100 Metionina 41 30 32 40 37 Arginina 88 76 75 73 86 Leucina 88 95 94 102 98 Isoleucina 48 55 38 47 60 Histidina 27 35 35 38 37 Treonina 54 37 38 41 40 Fenilalanina 46 48 56 41 48 Valina 57 71 73 56 61 Triptófano 10 ND ND ND ND

*Determinado por medio de HPLC. ND = no determinado

5.3.3. Condiciones experimentales

Se obtuvieron larvas de totoaba que fueron donadas por el Centro Reproductor de Especies Marinas del Estado de Sonora (CREMES) y se transportaron por aire desde Hermosillo, Sonora a Tijuana,

Baja California. A su llegada a Tijuana se transportaron vía terrestre al Laboratorio de Cultivos de Peces Marinos (LCPM) en el Departamento de Acuicultura en CICESE. Las larvas fueron cultivadas en el LCPM hasta que alcanzaron el estadio juvenil. Sesenta juveniles de totoaba con un peso inicial de 180.7 ± 30.1 g fueron distribuidos aleatoriamente en un sistema de 12 tanques (n = 5 peces por tanque). Cada tratamiento fue evaluado por triplicado. La unidad experimental consistió en 12 tanques de fibra de vidrio de 500 litros de capacidad adaptados a un sistema de recirculación de agua de mar a 25 °C compuesto por un biofiltro de cama compactada de cuentas plásticas con un volumen total de 4 pies cúbicos, un biofiltro de medio dinámico por aireación de medio Kaldness de 4 pies cúbicos, dos bombas de agua (SweetWater high efficiency She 3.0 Aquactic Eco-System) y una bomba de calor (Aqua Logic modelo 2TWB0018A1000AB). El oxígeno disuelto y la temperatura se monitorearon diariamente con un medidor de multi-parametros (YSI Pro2030, Profesional series, USA). El amonio (NH4), nitritos (NO2) y nitratos (NO3)

del agua se monitorearon diariamente durante la primera semana del experimento, después se monitoreo semanalmente con un kit para acuario (API, Mars Fishcare North América, Inc. USA). Los peces fueron alimentados a mano con las dietas experimentales a saciedad aparente 3 veces al día cada 4 horas aproximadamente durante 8 semanas.

5.3.4. Colección de muestras

Los peces fueron sacrificados y recolectados al inicio y final del bioensayo para el análisis de composición proximal. Las biometrías, el registro del consumo de alimento, y la colección del material fecal para la evaluación del coeficiente de digestibilidad aparente se efectuó utilizando la metodología descrita en la sección 3.3.4.

5.3.5. Cálculos para medir el desempeño de los juveniles

Se evaluó la ganancia en peso en gramos (GP), la ganancia en peso relativo (GP%) el coeficiente de crecimiento térmico (CCT), la tasa de conversión alimenticia (TCA), la tasa de eficiencia proteica (TEP) y el valor productivo de la proteína (VPP). Se utilizaron las fórmulas descritas en la sección 3.3.5.

5.3.6. Composición proximal

Se evaluó la composición de proteína, lípidos, ceniza humedad y extracto libre de nitrógeno de los peces y de las dietas experimentales utilizando los protocolos descritos en la sección 3.3.6.

5.3.7. Análisis de aminoácidos

El análisis de aminoácidos de las dietas y de las heces para estimar la digestibilidad aparente de los aminoácidos se realizó como se describe en la sección 3.3.7.

5.3.8. Determinación del coeficiente de digestibilidad aparente

El coeficiente de digestibilidad aparente de la materia seca, la proteína y los aminoácidos se evaluaron mediante el protocolo descrito en la sección 3.3.8.

5.3.9. Análisis estadísticos

Las valores de las variables respuesta de crecimiento y utilización del alimento fueron analizados mediante un diseño completamente aleatorizados y se presentan como promedios (n = 3) ± desviación estándar (DE). Todos los datos fueron evaluados para analizar su normalidad mediante una prueba Komologorov-Smirnov y para su homocedasticidad mediante una prueba de Levene. Subsecuentemente, se aplicó una prueba de análisis de varianza (ANOVA) de una vía para determinar si existía diferencias significativas entre los tratamientos, y una prueba Tukey cuando se encontrara diferencias (P < 0.05). Las pruebas de Kologorov – Smirnov, Levene, ANOVA y Tukey, se realizaron mediante el programa STATISTICA®

5.4 Resultados

5.4.1 Crecimiento de los juveniles de totoaba

Al final del bioensayo se encontró diferencia significativa (P < 0.05) en el peso final entre los tratamientos. Los juveniles alimentados con la dieta 37AAE (i.e., 37% proteína cruda con aminoácidos esenciales) registraron los valores más bajos de peso final, ganancia en peso (g) y ganancia en peso relativo (%).

Figura 14. Peso final de los juveniles de totoaba alimentados al final del bioensayo. Barras verticales representan la

desviación estándar. Letras diferentes indican diferencias significativas entre tratamientos a>b, ANOVA de una vía, α=0.05. 51C = 51% proteína cruda, 46C = 46% proteína cruda, 46AA = 46% proteína cruda con aminoácidos esenciales y no esenciales, 37AAE = 37% proteína cruda con aminoácidos esenciales.

Los valores del desempeño biológico (i.e., crecimiento, ganancia en peso g, ganancia de peso relativo%, supervivencia, índice de condición) registraron diferencias significativas (P < 0.05) entre los tratamientos. Los juveniles alimentados con la dieta 51C, 46C y 46AA obtuvieron los valores de crecimiento mas altos. Sin embargo no se encontró diferencias significativas en la supervivencia e índice de condición entre los tratamientos. El resto de los valores se muestran en la tabla 21.

0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 51CP 46CP 46AA 37AAE Pe so en g Dietas b ab ab a

Tabla 20. Desempeño biológico de los juveniles de totoaba (± D.E.). Letras diferentes indican diferencias significativas

entre tratamientos a>b, ANOVA de una vía, α=0.05. 51C = 51% proteína cruda, 46C = 46% proteína cruda, 46AA = 46% proteína cruda con aminoácidos esenciales y no esenciales, 37AAE = 37% proteína cruda con aminoácidos esenciales.

Dietas ANOVA

Variable 51C 46C 46AA 37AAE Valor P

Peso inicial (g) 179.5 ± 22.0 181.9 ± 17.6 181.2 ± 7.8 180.2 ± 9.0 Peso final (g) 377.0 ± 50.3ab 361.3 ± 15.6ab 400.8 ± 45.0a 313.1 ± 15.2b 0.013 Ganancia P. (g) 197.4 ± 29.1 a 179.4 ± 2.6 ab 219.6 ± 37.8 a 132.9 ± 6.2 b 0.012 Ganancia (%) 109.9 ± 6.5a 99.3 ± 10.7ab 120.8 ± 15.9a 73.7 ± 0.7b 0.012 Coeficiente crecimiento térmico 1.1 ± 0.08 a 1.0 ± 0.05 ab 1.2 ± 0.14 a 0.8 ± 0.01 b 0.002 Índice condición 1.62 ± 0.14 1.64 ± 0.02 1.71 ± 0.07 1.67 ± 0.04 > 0.05 Supervivencia (%) 100 100 100 100

5.4.2 Utilización del alimento

Los juveniles alimentados con la dieta 46AA registraron el valor más bajo de TCA con diferencias significativas con respecto a los tratamientos 46C y 37AAE. Se encontraron valores significativamente más altos de TEP en los peces alimentados con el tratamiento 46AA. Por su parte los valores de VPP el tratamiento 37AAE fueron significativamente más bajos en comparación con los peces alimentados con el tratamiento 46AA.

Tabla 21. Eficiencia alimenticia de juveniles de totoaba (± D.E.). Letras diferentes indican diferencias significativas

entre tratamientos a>b>c, ANOVA de una vía, α=0.05. 51C = 51% proteína cruda, 46C = 46% proteína cruda, 46AA = 46% proteína cruda con aminoácidos esenciales y no esenciales, 37AAE = 37% proteína cruda con aminoácidos esenciales.

Dietas ANOVA

Variable 51C 46C 46AA 37AAE Valor P

Consumo de alimento(g/día/pez) 3.7 ± 0.23 3.9 ± 0.11 3.8 ± 0.31 3.8 ± 0.07 < 0.05 Tasa conversión alimenticia 1.08 ± 0.10 ab 1.21 ± 0.05 b 0.98 ± 0.08 a 1.60 ± 0.10 c <0.001

Tasa eficiencia proteica 1.78 ± 0.16 b 1.87 ± 0.08 b 2.32 ± 0.20 a 1.69 ± 0.11 b 0.003

Valor productivo proteína 1.14 ± 0.20ab 1.26 ± 0.05ab 1.47 ± 0.14a 1.08 ± 0.10b 0.038

5.4.3 Composición proximal de los juveniles de totoaba

No se encontraron diferencias significativas (P < 0.05) en la composición proximal del cuerpo entero en sus valores de la proteína, ceniza y extracto libre de nitrógeno en los juveniles de totoaba al final del experimento. Sin embargo, se encontró diferencias significativas en el contenido de lípidos en el

cuerpo de los juveniles de totoaba entre los tratamientos al final del bioensayo, así como con respecto a la muestra inicial. La composición de lípidos de los juveniles al inicio del experimento fue menor con respecto a los juveniles al final del bioensayo. Así mismo, los juveniles alimentados con la dieta 51C, 46AA y 37AAE registraron valores significativamente más altos de lípidos.

Tabla 22. Composición proximal de los juveniles de totoaba (± D.E.). Letras diferentes indican diferencias

significativas entre tratamientos a>b, ANOVA de una vía, α=0.05. 51C = 51% proteína cruda, 46C = 46% proteína cruda, 46AA = 46% proteína cruda con aminoácidos esenciales y no esenciales, 37AAE = 37% proteína cruda con aminoácidos esenciales.

Dietas ANOVA

Variable Inicial 51C 46C 46AA 37AAE Valor P

Proteína cruda (%) 15.8 ± 0.2 15.7 ± 1.5 16.4 ± 0.6 16.0 ± 0.3 15.9 ± 1.0 >0.05 Lípidos crudos (%) 2.7 ± 0.2c 4.5 ± 0.1a 4.0 ± 0.3b 4.5 ± 0.0a 4.8 ± 0.1a <0.005

Humedad 75.4 ± 0.3 75.1 ± 0.4 74.9 ± 0.2 74.5 ± 1.0 74.9 ± 0.9 >0.05 Ceniza (%) 3.3 ± 0.4 3.4 ± 0.3 3.4 ± 0.2 3.6 ± 0.0 3.5 ± 0.0 >0.05 Extracto libre nitrógeno + fibra

(%)

2.8 1.3 1.3 1.4 0.9

5.4.4 Coeficiente de digestibilidad aparente

No se encontraron diferencias significativas (P < 0.05) en el coeficiente de digestibilidad aparente de la materia seca de las dietas entre los diferentes tratamientos. Sin embargo, si se registró diferencia significativa en el coeficiente de digestibilidad aparente de la proteína y de los aminoácidos esenciales entre los tratamientos. Los juveniles alimentados con las dietas 46AA y 37AAE registraron el valor más alto de CDA de la proteína con diferencias significativas. No se encontró diferencia significativa en el CDA de lisina entre los tratamientos. Sin embargo, se encontraron diferencias significativas en los CDA para el resto de los aminoácidos esenciales. Los resultados se presentan en la tabla 24.

Tabla 23. Coeficientes de digestibilidad aparente de la materia seca, proteína y aminoácidos esenciales (± D.E.). Letras

diferentes indican diferencias significativas entre tratamientos a>b>c, ANOVA de una vía, α=0.05. 51C = 51% proteína cruda, 46C = 46% proteína cruda, 46AA = 46% proteína cruda con aminoácidos esenciales y no esenciales, 37AAE = 37% proteína cruda con aminoácidos esenciales.

Dietas experimentales ANOVA

51C 46C 46AA 37AAE Valor

P Materia seca 65.2 ± 5.1 69.0 ± 7.6 66.3 ± 3.8 60.7 ± 1.3 0.308 Proteína 77.8 ± 3.3b 79.6 ± 4.9b 89.0 ± 1.2a 83.0 ± 0.5ab 0.009 Aminoácidos esenciales* Lisina 76.8 ± 7.3 83. 5 ± 3.1 89.8 ± 2.9 71.2 ± 13.4 0.089 Metionina 75.5 ± 7.1ab 81.0 ± 4.7ab 87.0 ± 3.1a 71.5 ± 6.8b 0.045 Arginina 81.6 ± 5.9ab 85.3 ± 4.5ab 89.2 ± 1.8a 76.3 ± 2.4b 0.023 Leucina 82.8 ± 5.5a 84.2 ± 4.4a 90.1 ± 2.2a 71.6 ± 4.0b 0.042 Isoleucina 80.8 ± 6.0ab 76.3 ± 6.0ab 86.5 ± 2.8a 71.6 ± 3.1b 0.027 Histidina 84.2 ± 3.1bc 85.7 ± 3.5ab 94.7 ± 4.9a 74.1 ± 4.8c 0.001 Treonina 80.4 ± 5.6ab 83.7 ± 4.0a 88.7 ± 2.4a 71.6 ± 1.0b 0.003 Fenilalanina 81.2 ± 5.5ab 86.1 ± 4.3a 90.7 ± 8.4a 70.4 ± 3.1b 0.012 Valina 79.8 ± 5.8a 82.9 ± 4.7a 84.3 ± 3.8a 63.5 ± 5.8b 0.003 Triptófano ND ND ND ND

*

Contenido de aminoácidos determinado por HPLC. ND = no determinado.

5.5 Discusión

En el presente estudio no se encontraron diferencias significativas (P < 0.05) en el peso final de los juveniles alimentados con las dietas 51C, 46C y 46AA, pero si con los peces alimentados con la dieta de menor proteína, 37AAE. Sin embargo, solo se obtuvo el 120% de ganancia de peso respecto al peso inicial con el tratamiento que registró la mayor ganancia (46AA) los demás oscilaron entre 73% y 109%. Es probable que debido al peso inicial (180.7 ± 30.1 g) de los organismos y al poco tiempo que duro el bioensayo (8 semanas), no se alcanzaron los incrementos en peso deseados (200% del peso inicial de los organismos al inicio del experimento). La literatura especialista en la nutrición acuícola (i.e., NRC, 2011) sugiere que la ganancia en peso debe ser como mínimo del 200% para los organismos juveniles y poder así adjudicar con mayor certeza el efecto en la variable evaluada. Sin embargo, algunos autores mencionan que solo es necesario 8 semanas de bioensayo, pero es inapropiado asignar un tiempo específico porque depende de muchos factores (i.e., condición genética, relación proteína/energía en el alimento, temperatura del agua, densidad de biomasa en el tanque experimental, peso inicial de los organismos al inicia del bioensayo) (Cowey, 1992). Además, la ganancia en peso no siempre es la más apropiada para

evaluar la respuesta de una variable de interés. La utilización del alimento y sus nutrientes pueden dar información más precisa con respecto al efecto de algún nutriente de la dieta en los juveniles de peces (Baker, 1986).

Los resultados relacionados con la utilización del alimento (i.e., TCA, TEP y VPP) indican un efecto positivo con el tratamiento 46AA, ya que registraron la mejor TCA (el valor más bajo de TCA), el más alto para la TEP y así mismo, el valor más alto para el VPP. Estos datos difieren con los reportados por Wu et al. (2015) donde se evaluó el efecto de los aminoácidos no esenciales en dieta (i.e., un 25% del total de la composición de la dieta en base seca) sobre el crecimiento o TEP en juveniles (21.1 g) de lobina rayada hibrida Morone chrysops × M. saxatilis ♂. Los autores registraron menor crecimiento en peso en comparación con la dieta control, atribuido a la pobre utilización de los aminoácidos no esenciales (i. e., glutamato y aspartato) por parte de la lobina. Este resultado, se atribuye a un efecto especie-especifico, ya que en el salmón del Atlántico si se observó una buena utilización de los aminoácidos no esenciales en la dieta (Larsson et al., 2014). Conjuntamente con los procedimientos experimentales utilizados. Los datos de la TEP y el VPP en el presente estudio sugieren que totoaba puede utilizar los aminoácidos no esenciales obteniendo un efecto positivo sobre el crecimiento, debido a que en el tratamiento 46AA el peso final (g), la GP y la GP% no obtuvo diferencia con la dieta 51C. Estos datos concuerdan con los reportado para especies como el Salmon, Salmo salar (peso inicial160 g) donde en un estudio realizado por Oehme et al. (2010) evaluaron el efecto de la incorporación de 1.1% de arginina y 0.75% de glutamato en la dieta (en base seca). Los autores reportan una mejor tasa de crecimiento específica con el tratamiento que contenía la incorporación de la arginina y el glutamato y lo atribuyen a que el glutamato pudo haberse utilizado como fuente energética, y los amino ácidos esenciales para la dieta a la síntesis de nuevas proteína.

Se observaron valores más altos en la tasa de conversión alimenticia en los tratamientos 51C y 46AA con respecto a los tratamientos restantes indicando una menor eficiencia alimenticia en estos dos tratamientos. A su vez, la tasa de eficiencia proteica fue significativamente mayor en los peces alimentados con la dieta 46AA. Estos resultados sugirieren que un balance del perfil de aminoácidos esenciales y la incorporación de los aminoácidos no esenciales en la dieta, resultaron en un mayor crecimiento por unidad de dieta y por unidad de proteína en los juveniles de totoaba. Los peces tienen un requerimiento por amino ácidos esenciales en proporcione adecuadas, así como de una proporción adecuada de amino ácidos esenciales respecto a los no esenciales (Wilson, 2002). Por lo que el balance de los amino ácidos esenciales, así como la incorporación de los aminoácidos no esenciales (i.e., glutamina, alanina y glicina) resultaron en un máximo aprovechamiento de la proteína por los juveniles alimentados con la dieta 46AA.

De acuerdo con Trushenski et al. (2006) cuando los amino ácidos esenciales de la dieta tienen la misma proporción entre ellos que los aminoácidos esenciales del cuerpo entero de la especie, la proteína de la dieta es más eficiente de ser utilizada y el crecimiento se maximiza. Es por esto que los aminos ácidos en la dieta deben de estar en proporciones y cantidades específicas, por lo que la proteína de la dieta debe de contener las proporciones y cantidades requeridas, de lo contrario, puede presentarse antagonismo de algunos amino ácidos, evitando su absorción adecuada y ocasionando una reducción del crecimiento (Wu et al., 2014). Por ejemplo uno de los principales efectos antagónicos entre aminoácidos esenciales se da entre la lisina y la arginina , puesto que al ser aminoácidos básicos compiten por el mismo mecanismo de trasporte dentro del enterocito (D’mello, 2003). En el presente estudio se formuló la dieta 46AA y 37AAE para mantener la relación de aminoácidos esenciales igual o muy similar a la relación de aminoácidos esenciales encontrados en el cuerpo entero de la totoaba, basándonos en la premisa de que este es el perfil adecuado para la mejor utilización de la proteína en la dieta, evitando algún posible efecto de antagónico entre lisina y arginina.

En el presente estudio, se encontró diferencia significativa en el contenido lipídico de los juveniles finales respecto a los iniciales. De igual forma, se encontró diferencias significativas entre los tratamientos al final del bioensayo, donde se observó el mayor contenido de lípidos en los juveniles alimentados con las dietas 37AAE y 51C. Las dietas experimentales del presente estudio se formularon a un contenido iso- energético aportado principalmente por las proteínas y lípidos y algo los carbohidratos. Con la finalidad de evaluar si existía un posible efecto positivo el aporte de energía no proteica (“protein sparing effect”) en el uso de las proteínas, se incrementó el contenido lipídico por encima del estimado para esta especie (Rueda-López et al., 2011). Sin embargo, no se observó un efecto positivo al incorporar energía no proteica por encima del nivel requerido por la especie ya que la dieta con mayor contenido aceite de pescado (37AAE) resulto en la menor eficiencia proteína (i.e., TEP = 1.69) y acumularon el mayor contenido de grasa en su cuerpo. Existen estudios con la totoaba evaluando altos niveles de lípidos (hasta 20%) en dieta donde no se reportan efectos negativos en su desempeño con niveles lipídicos en dieta del 16% (Perez-Velazquez et al., 2016)

Los juveniles alimentados con la dieta 37AAE presentaron el mayor contenido lipídico en el cuerpo al final del experimento. Es probable que alto niveles de carbohidratos presente en esta dieta no haya sido bien utilizado por la totoaba como fuente energética, por lo tanto fueron almacenados como lípidos. totoaba al igual que la mayoría de los peces carnívoros hace uso limitado de las fuentes de carbohidratos en dieta como fuente de energía (NRC, 2011). En contraste, datos reportados por Wu et al. (2015)

evaluando el uso relativo del carbohidrato por el hibrido de la lobina rayada, demuestran que esta especie pudo utilizar un 25% de carbohidrato de manera eficiente como fuente energética. Sin embargo, Gaylord y Gatlin (2000), en otro estudio realizado con este mismo hibrido pero evaluando el efecto del nivel de lípidos y la L-Carnitina, reportan que cuando el nivel de carbohidrato en dieta se encuentra por encima del 33% el crecimiento se ve disminuido significativamente.

El coeficiente de digestibilidad en el tratamiento 46AA fue más alto significativamente. Esto ayuda a explicar la mejor tasa de conversión alimenticia, y de la proteína, resultado en un mayor crecimiento. Por su parte los juveniles alimentados con la dieta 37AAE registraron altos coeficiente de digestibilidad aparente de la proteína pero sin crecer mejor. Es probable que aunque la poca proteína en la dieta haya sido bien digerida, no fue suficiente para satisfacer la necesidad por amino ácidos de la totoaba para un óptimo crecimiento. Sin embargo, en general los coeficientes de digestibilidad aparente de los aminoácidos esenciales del tratamiento 37AAE (con excepción de la lisina) registraron los valores más bajos, sugiriendo que la digestibilidad de la proteína observada en esta dieta, probablemente fue aportada por los aminoácidos no esenciales de la dieta. Aunque se obtuvieron valores de coeficiente de digestibilidad aparente de la lisina en dieta algo diferente entre tratamientos, no se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos. Esto puede deberse al alto valor de la desviación estándar calculada ocasionando que la prueba estadística no detectara diferencia significativa con el coeficiente de confianza utilizado (i.e., 95%).

En conclusión, el aporte de aminoácidos no esenciales en la dieta resulto en un efecto positivo en el la utilización del alimento (TCA, TEP y VPP) por los juveniles de totoaba, indicando que su uso en dietas

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