Respuesta al desafío experimental con Coccidia en pollos alimentados con maíz fortificado en carotenoides Ph
T2 Ooquistes/g heces (x1000)
6.4.8 Histología 1 Hígado
En los resultados histológicos de hígado, no hubo lesiones de esteatosis, fibrosis o necrosis hepatocelular en ningún tratamiento, sí que hubo lesiones de inflamación hepática con diferencias significativas (
2=20,052, P=0,02) entre los lotes que han sido infectados concoccidia (T2 y T4) y los que no han sido infectados (T1 y T3).
Algunos autores han reportado daños hepáticos en pavos como consecuencia de la infección ascendente de este órgano vía conducto biliar o cístico-entérico por parte de los coccidios, (Critchley et al. 1986) y en aves silvestres (Reece 1989) casos similares han sido descritos por (Long 1970; Long y Millard 2009) en pollos después de infección experimental vía oral con E. Tenella. La diferencia en la respuesta inmunitaria en hígado de pollos infectados y no infectados, puede ser explicada por una posible infección a través del conducto cístico o cístico-entérico.
T1
T2
137 Tabla 68: Efecto de la dieta Ph3 y de la infección con coccidia en la presentación y
gravedad de lesiones hepáticas.
Lesión T1 nº (%) T2 nº (%) T3 nº (%) T4 nº (%) Inflamación* Sin lesión 4(80,00)a 0b 3 (60,00)a 0b Leve [<2 focos] 1(20,00) 0 2 (40,00) 0 Moderada[2-4 focos] 0b 5(100)a 0b 5 (100)a Severa [>4 focos] 0 0 0 0
Los valores expresan el número y el % de casos. n=5,*P<0,05, ab Letras diferentes en la misma
fila indican diferencias significativas, P<0,05.
T1 maíz M37W, no infectados; T2 maíz M37W, infectados; T3 maíz Ph3, no infectados; T4 maíz Ph3, infectados.
Tabla 69: Presencia de agregados linfocitarios en hígado.
Lesión T1 T2 T3 T4
Agregados linfocitarios
nº por campo (x10)* 0,34±0,169 b 3,1±0,719 a 0,6±0,084 b 3,08±0,465 a
Los valores expresan la media y el error estándar. n=5, P<0,05, ab letras diferentes en la
misma fila indican diferencias significativas, T1 maíz M37W no infectado; T2 maíz M37W infectados; T3 maíz Ph3 no infectado; T4 maíz Ph3 infectado.
Las muestras de hígado observadas al microscopio (x10) presentan diferencias significativas entre los tratamientos en el nº de agregados linfocitarios (P<0,05) entre los tratamientos que han sido infectados con coccidia (T2 y T4) y los que no han sido infectados (T1 y T2).
6.4.8.2 Bolsa de Fabricio
En el estudio de la bolsa de Fabricio, se contaron los espacios vacuolares en las áreas medular y cortical del folículo (media de 10 campos a 40 aumentos por muestra) y se valoró el grado de depleción.
Tabla 70: Efecto de la dieta Ph3 y de la infección con coccidia en la presentación de lesiones
de depleción, en bolsa de Fabricio. T1 nº (%) T2 nº (%) T3 nº (%) T4 nº (%) Depleción Sin lesión 3 (60,00) 1 2 (40,00) - Leve 2 (40,00) 2 (40,00) 3 (60,00) 3 (60,00) Moderada - 2 (40,00) - 2 (40,00) Severa - - -
Los valores expresan el número y el % de animales. n=5; T1 maíz M37W no infectado; T2 maíz M37W infectado; T3 maíz Ph3 no infectado; T4 maíz Ph3 infectado.
No hubo diferencias significativas en el grado de depleción entre los tratamientos 2 =
138
Tabla 71: Efecto de la dieta Ph3 y la infección por coccidia en el número medio de vacuolas
por campo (x40) en bolsa de Fabricio.
Vacuolización T1 T2 T3 T4
Medular 0c 11,94±2,333a 2,28±0,301bc 5,38±0,218b
Cortical 0c 12,54±1,460a 2,12±0,343bc 4,32±0,116b
Media y error estándar n=10; ab letras diferentes en la misma fila indican diferencias
significativas, (P<0,05).T1 maíz M37W no infectados; T2 maíz M37W infectados; T3 maíz Ph3 no infectados; T4 maíz Ph3 infectados.
El tratamiento T2, presenta significativamente más vacuolas (zona medular o cortical) que el resto de tratamientos. El tratamiento T4 también presenta más vacuolas que el tratamiento T1. No existen diferencias entre los tratamientos no infectados T1 y T3.
La dieta alta en carotenoides puede haber promovido la repoblación folicular más rápido que la dieta de control, reduciendo la inflamación inicial y mejorando la respuesta inmune (Blount et al. 2003; Chew y Park 2004).
6.4.8.3 Tonsilas cecales
Tabla 72: Nódulos linfoides activados en tonsilas cecales.
T1 nº (%) T2 nº (%) T3 nº (%) T4 nº (%) Sin lesión 1 (20,00)ab 0b 4 (80,00)a 4 (80,00)a Leve 4 (80,00)b 5 (100,00)b 1 (20,00)a 1 (20,00)a Moderada - - - - Severa - - - -
Los valores expresan el número y el % de animales para cada nivel. n=5; ab letras diferentes
en la misma fila indican diferencias significativas,(P<0,05).T1 maíz M37W no infectados; T2 maíz M37W infectados; T3 maíz Ph3 no infectados; T4 maíz Ph3 infectados.
La distribución de las muestras presenta diferencias significativas
2=10,303 y P=0,016. Las muestras de los pollos del tratamiento T1 y T2, manifestaron la presencia significativa de más nódulos linfoides que los tratamientos T3 y T4 (P<0,05).Existe una agrupación de valores entre los tratamientos en función del tipo de maíz que han comido (M37W o Ph3).
139 Fig. 46: Cortes histológicos de tonsilas cecales, se aprecian los nódulos linfoides en cada uno
de los tratamientos. T1 maíz M37W no infectados; T2 maíz M37W infectados; T3 maíz Ph3 no infectados; T4 maíz Ph3 infectados.
Fig. 47: Afectación de la mucosa de ciego por la invasión intracelular de coccidios.
Tratamientos infectados T2 y T4, en ambos pueden verse diferentes formas del parásito invadiendo la mucosa del ciego. T2 maíz M37W infectados; T4 maíz Ph3 infectados.
T4
T2
140
6.5 CONCLUSIONES
1. En los pollos que comen maíz Ph3 se observa una reducción significativa del número de ooquistes (E.tenella) excretados.
2. La infección con coccidia (probablemente por la humedad de la yacija) incrementa la pododermatitis y el número de ulceras en las patas, que se reducen significativamente en los pollos que comen maíz enriquecido en carotenoides Ph3. 3. Los analitos sanguíneos marcan diferencias entre tratamientos para colesterol,
creatinina, lactato deshidrogenasa, glucosa, y fósforo. El efecto tipo de maíz, es determinante en las variables colesterol, creatinina, glucosa y fósforo. El efecto infección con coccidios, es determinante en la variable lactato deshidrogenasa. Tanto el efecto infección con coccidios como el efecto maíz y la interacción entre ambos son determinantes en la variabilidad de las medias del fósforo.
4. El consumo de maíz Ph3 incrementa significativamente el color de la piel en las patas de los pollos en la gama amarillo naranja y la infección con ooquistes de
E.tenella únicamente produce una disminución transitoria (5 dpi).
5. La infección con coccidia produce una disminución en el peso de los pollos y un aumento del peso de hígado, bazo y bolsa de Fabricio. Se constata inflación hepática y depleción linfocitaria en bolsa de Fabricio en los grupos infectados con coccidia.
141
151
153 BKT; α- y
154
155
Fig. 50: Panel de yemas procedentes de cada una de las
dietas desde que se inicia el tratamiento (día 0) hasta la finalización del mismo (día 20).
Fig. 51: Contrastación con abanico DSM
del valor obtenido automáticamente en el Egg Analizer.