2. PROTOCOLO DE ESTUDIO
2.3. Pruebas de malabsorción de los hidratos de carbono
A todos los participantes se les ha realizado pruebas de absorción para cada uno de los siguientes azúcares: lactosa, fructosa y lactulosa con, al menos, 2 días de diferencia entre ellas y completando el estudio en un período máximo de 3 semanas.
Protocolo de preparación
Todos los sujetos debían cumplir una serie de condiciones previas a la realización de las pruebas para evitar posibles resultados erróneos:
1. No debían haber tomado antibióticos ni haber sido preparados para la realización de exploraciones colonoscópicas o enema opaco al menos 15 días
antes de la prueba, con el fin de que la flora intestinal no hubiera sido disminuida.
2. Debían evitar la ingesta de fibra dietética durante un periodo de, al menos, 15 días previos al estudio y hasta su finalización para evitar la presencia de exceso de residuos en el colon.
3. La noche anterior a la realización de cada una de las pruebas se les instruía para que la cena constara de alimentos con poco contenido en hidratos de carbono. Se les recomendaba ingerir: caldo, pollo o pescado a la plancha, tortilla a la francesa y una sola pieza de fruta. Debían evitar comer pan y sólo podían beber agua.
4. La mañana de la realización de cada prueba debían realizarse una limpieza bucal, acudir en ayunas, evitar fumar y no realizar ejercicio físico antes y durante la prueba.
Protocolo de realización de los tests del aliento
Las pruebas de malabsorción mediante test del aliento consisten en la ingesta del azúcar correspondiente y la determinación posterior de la concentración de H2 en el aire
espirado.
Las dosis de azúcar ingerido en cada prueba eran de 25 g de lactosa o fructosa, o 10 g de lactulosa, disueltos en 200 ml de agua.
Antes de la ingestión del azúcar se recoge un muestra del aire espirado en ayunas (nivel basal de H2). Para ello, tras una inhalación normal, el individuo exhala a través de
una boquilla hasta llenar de aire alveolar una bolsa estanca de 750 ml, lo cual permite realizar más de una medición de la misma muestra.
Una vez ingerida la solución del azúcar (tiempo 0) se toman muestras del aire espirado a los 15 minutos y, a continuación, a intervalos de 30 minutos durante 3 horas.
La concentración de H2 en las muestras del aire espirado se ha determinado
mediante un cromatógrafo de gases por conductividad térmica Micro Lyzer 12i (QuinTron Instrument Company, Milwaukee, WI, USA.). El cromatógrafo se ha
calibrado antes de la medición de cada prueba con un gas de referencia que contiene H2
a 95 ppm en aire comprimido. Los resultados son expresados en ppm (1 ppm = aproximadamente a 0.05 µmol/L de H2). La mínima concentración de H2 que es capaz
de detectar dicho cromatógrafo es de 1 ppm, con una respuesta linear precisa entre 1- 150 ppm.
Valoración de los resultados:
a) Tiempo de tránsito oro-cecal
El tiempo de tránsito oro-cecal (TTOC) se ha definido como el tiempo (en minutos) que transcurre entre la ingestión de los 10g de lactulosa y la aparición de un incremento mayor o igual a 10 ppm de la concentración de H2 respecto del valor basal
en, al menos, dos medidas consecutivas (88, 116).
Este incremento, que corresponde a la llegada de la lactulosa al colon, es lo que conocemos como pico colónico.
Se han considerado como TTOC normales los comprendidos entre los percentiles 25 y 75, como TTOC rápidos aquéllos con valores por debajo del percentil 25 y como TTOC lentos los superiores al percentil 75.
b) Sobrecrecimiento bacteriano
La existencia de sobrecrecimiento bacteriano en el intestino delgado (SB) se ha valorado mediante el test con lactulosa y se ha definido como la presencia de un pico de hidrógeno ≥ 10 ppm que aparece en la primera hora del test, regresando a los niveles basales, al menos, 15 min. antes del pico colónico (88).
También los pacientes con un nivel basal de hidrógeno elevado (≥20 ppm), seguido de un aumento rápido de la concentración de H2 tras la ingestión de lactulosa se
Los casos en que debido a la presencia de SB la valoración de la malabsorción de lactosa y/o fructosa o la estimación del TTOC resultaron dudosas fueron tratados con ciprofloxacino 500 mg/día durante 15 días y posteriormente se repitió el estudio.
c) Malabsorción de la lactosa o de la fructosa
Se ha considerado como un test positivo para malabsorción de la lactosa o de la fructosa cuando en alguna de las muestras recogidas durante la prueba el incremento de la concentración de H2 por encima del valor basal es ≥ 20 ppm. El tiempo en el que
ocurre dicho incremento, que coincide con la llegada del sustrato no absorbido al colon, se considera el TTOC para ese azúcar (88).
d) AUC, H2máx y tH2máx
La capacidad de producir hidrógeno se ha cuantificado para cada prueba de absorción, según la curva generada (116), mediante los siguientes valores:
- AUC, es el área comprendida por debajo de la curva y por encima del basal, calculada por el método de Simpson y expresada en ppm x min.
- H2máx, es el valor del pico de H2 por encima del nivel basal en ppm (máxima
concentración de H2 – mínima concentración de H2).
- tH2máx, es el tiempo en minutos en que aparece dicho pico de H2.
e) Definición de no productor de H2
Aquellos individuos del estudio en los que no se obtuvo un incremento suficiente de la concentración de H2 en el test de lactulosa como para poder cuantificar su TTOC
(incremento <10 ppm.) y que presentaban, al mismo tiempo, resultados negativos en las pruebas de malabsorción de lactosa y fructosa (incrementos < 20 ppm) fueron considerados como no productores de H2 y excluidos para el posterior análisis.