La variable Aislam ient o no es significat iva; sin em bargo, se realiza com paración de m edias, ut ilizando la prueba del rango m últ iple de
RESULTADOS Y DI SCUSI ON ORI GEN DE AI SLAM I EN TOS
Los aislamientos de hospedero humano se obtuvieron a partir de la recuperación de conservaciones en agua de 12 cultivos de hongos que provenían de onicomicosis. Se obtuvo un buen desarrollo de diez de estos y los dos restantes crecieron con flora acompañante. La selección de las nueve cepas a trabajar, se realizó teniendo en cuenta el buen desarrollo de las colonias en PDA y se descartó el aislamiento que presentó menor esporulación con respecto a los otros. Para completar los diez aislamientos necesarios para el desarrollo del proyecto, se obtuvo un aislamiento proveniente de queratitis que estaba siendo utilizado en el proyecto de investigación “Estudio in vitro de germinación de Fusarium sp. en los materiales de lentes de contacto blandos y eficacia de las soluciones multipropósito contra este microorganismo”. Esta cepa se encontraba en PDA con un buen desarrollo y alta esporulación
El porcentaje de recuperación de los aislamientos de humanos conservados en agua, tomando las 12 muestras procesadas como el 100%, corresponde al 83%. Este porcentaje no difiere en gran medida de los resultados obtenidos por Bueno y Gallardo (1998) y por Panizo y colaboradores (2005), en los estudios orientados a evaluar la viabilidad del método de conservación de cepas en agua destilada, en los cuáles se obtuvo un porcentaje de recuperación del 100%, debido a que ninguno presentó contaminación bacteriana, por ácaros o por otros hongos. La razón por la cuál durante el desarrollo del presente trabajo se obtuvo el 83% de recuperación, se atribuye a la presencia de contaminación en dos de las muestras, la cual puede ser relacionada a errores experimentales en el momento de la conservación, como lo relacionaron Panizo y colaboradores en su estudio.
El presente estudio no permite establecer ningún tipo de prevalencia y/o predilección de las patologías causadas por Fusarium sp., debido a que la cantidad de aislamientos es muy baja para este tipo de estudios. Sin embargo, se logró corroborar que este género está relacionado con patologías en humanos, como se ha venido reportando desde hace ya dos décadas y que se puede comprobar con el origen y la hoja de vida de estos aislamientos. Y permite confirmar que entre las patologías producidas por Fusarium sp. en humanos, se destacan afecciones dérmicas y oftálmicas relacionadas con la característica de ser hongos queratinolíticos, lo que concuerda con lo reportado por Hennequin y colaboradores (1997), Mayayo (1999), Kunert (2000), Garcés y colaboradores (2001).
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resultaron positivas para hongos (Tabla 1), y en 10 de estas se aisló Fusarium sp. Las 38 muestras restantes no se tuvieron en cuenta ya que presentaban contaminación bacteriana o porque el cultivo no presentaba crecimiento del mismo agente aislado en todos los puntos de siembra.
Tabla 1. Procesamiento de muestras provenientes de lesiones de animales N º ident i ficaci ón Orige n Lesión Organism o aislado
101 Canino Dermatitis generalizada
en lomo
Micelio estéril
108 Bovino Lagrimeo abundante e
inflamación del párpado
Fusarium
sp.
111 Canino Dermatitis generalizada, extremidades anteriores Fusariumsp.
112 Canino Lesión costrosa
interdigital
Micelio estéril
116 Bovino Descamación de piel en lomo Micelio estéril
119 Ave Descamación en pata Dermatofito
120 Ave Descamación en pata Aspergillus
sp.
121 Canino Dermatitis generalizada, lomo zona anterior Fusarium sp.
122 Bovino Lagrimeo abundante y tumor en ojo Micelio estéril
127 Bovino Descamación en pata Dermatofito
131 Canino Dermatitis en lomo, zona anterior Fusarium sp.
138 Ave Descamación pata Micelio estéril
143 Bovino Costras en hocico Scopulariopsis
sp.
146 Bovino Costras en párpado Scopulariopsis sp.
152 Canino Dermatitis generalizada
en lomo
Aspergillus
sp.
153 Canino Dermatitis cola Aspergillus
sp
154 Bovino Dermatitis lomo zona media Dermatofito
155 Canino Dermatitis lomo zona
posterior
Fusarium
sp.
156 Canino Dermatitis lomo zona posterior Fusarium sp.
157 Canino Lagrimeo abundante e
inflamación párpado
Aspergillus
sp.
159 Canino Dermatitis generalizada
zona abdominal
Fusarium
sp.
160 Bovino Dermatitis en lomo, zona media Fusarium sp.
161 Canino Dermatitis zona media
del lomo
Fusarium
sp.
162 Canino Dermatitis lomo zona
posterior
Fusarium
sp.
La prevalencia de los hongos en las muestras de animales analizadas presenta un valor de 39%, el cual es relativamente bajo si se tiene en cuenta que las infecciones por dermatofitos fueron las primeras enfermedades infecciosas descritas y reconocidas desde el siglo pasado, como lo menciona Mitchell (1983) en su trabajo. A partir del reconocimiento de hongos patógenos, los estudios histopatológicos van orientados principalmente para el diagnóstico de micosis en patología veterinaria, como lo mencionan Pérez y Carrasco (2000). Adicionalmente, si se tiene en cuenta que otros organismos que afectan la dermis de animales son agentes patógenos oportunistas (bacterias y ácaros), los resultados obtenidos de las lesiones evaluadas se pueden correlacionar con los estudios y reportes mencionados anteriormente. Sin embargo, es importante resaltar que las muestras que no se identificaron como hongos (61%), agrupan no solo a otros agentes patógenos, sino también a los casos donde no todos los puntos de siembra presentaban el mismo agente aislado,
desinfección en la dermis del animal. Este último caso pudo ser un factor que imposibilitó el crecimiento fúngico, debido a que las muestras a analizar no se sometieron a ningún tratamiento de inmersión en antibióticos, y el medio preparado fue PDA sin suplementos. Los resultados obtenidos fueron un punto de corrección durante el desarrollo del trabajo ya que, para realizar los repiques y purificación de los aislamientos, se tuvo en cuenta la importancia de suplementar PDA con cloranfenicol.
El porcentaje de aislamiento de Fusarium sp., en el total de las muestras tomadas de animales es del 16%. No obstante, en la Figura 6.1 se observa que la incidencia de aislamiento de Fusarium sp. frente a otros hongos es de 41.7%, comprobando lo establecido en varios estudios llevados a cabo en los últimos años por Andrew y colaboradores (1998) y, Betbeze y colaboradores (2006), donde se ha visto incrementada su relación con afecciones oftálmicas y sistémicas principalmente. Este estudio permite demostrar la incidencia que presenta este hongo como agente causal de micosis superficiales (infecciones dérmicas), que se reportan con menor frecuencia frente a otras patologías causadas por este género, como son intoxicaciones por producción de toxinas, onicomicosis en los cascos e infecciones sistémicas. (Oliveira et al., 2002; Ortoneda, 2003;Elligot
et al., 2006).
Frecuencia aislam ient o
20,8
41,7 16,7
12,5 8,3
Micelio estéril Fusarium sp. Aspergillus sp.
Dermatófitos Scopularipsis sp.
Figura 1. Porcentaje de frecuencia de aislamiento de hongos en muestras animales
Algunos de los patrones que se pueden establecer a partir de los resultados obtenidos en este proyecto, permiten establecer a Fusarium sp., como agente causal no solo de queratomicosis sino también como patógeno frecuente que causa lesiones superficiales en la dermis de una gran variedad de especies animales. Igualmente permite establecer que causa infecciones con mayor frecuencia en caninos y bovinos como lo indica la Tabla 6.2. Adicionalmente, se comprobó lo reportado por Ortoneda (2003) y Godoy y colaboradores (2004), quienes afirman que las patologías causadas por
Fusarium sp. son mayores en áreas tropicales y subtropicales (clima cálido y húmedo) aumentando su incidencia en temporadas de lluvia por las variaciones de temperatura y humedad, condiciones que se relacionan directamente con la capacidad de germinación de las esporas del microorganismo y de esta forma causar patologías.
El último origen de aislamiento pertenece a especies vegetales, de las cuales se procesaron un total de 17 muestras de plantas (diez solanáceas, una cucurbitácea y seis claveles) siendo positivas 16 para Fusarium sp, como se muestra en la Tabla 2.
5 N º iden t ific ació n
Origen Sint om at ología H ongo aislado
301 Tomate Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp. 302 Clavel Marchites unilateral de la planta y pudrición de haces vasculares Fusarium sp. 303 Tomate Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp. 304 Tomate de árbol Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp. 305 Tomate de árbol Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp. 306 Tomate Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp.
307 Calabacín Marchites Fusarium sp.
308 Tomate Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp. 309 Tomate Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp 310 Tomate Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp 311 Tomate Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp 312 Tomate Marchites generalizada y pudrición de haces vasculares Fusarium sp 313 Clavel Marchites unilateral de la planta, pudrición de haces vasculares Fusarium sp. 314 Clavel Marchites unilateral de la planta y pudrición de haces vasculares Fusarium sp. 315 Clavel Marchites unilateral de la planta y pudrición de haces vasculares Fusarium sp. 316 Lulo Marchites unilateral de la planta y pudrición de haces vasculares No identificado 317 Clavel Marchites unilateral de la planta y pudrición de haces vasculares Fusarium sp.
La Tabla2 permite establecer una prevalencia del 94% de
Fusarium sp. en las muestras analizadas, confirmando la frecuencia que tiene este patógeno en las especies investigadas (solanáceas y clavel) y cómo puede ser aislado frecuentemente (Caracuel et al., 2003; Ardila & Higuera, 2005). Por otro lado, esto permite confirmar que la sintomatología que ha sido descrita por varios autores como típica de la infección causada por este género, orienta eficazmente a la identificación de
Fusarium sp. como fitopatógeno. A su vez, los resultados permiten ratificar la razón por la cual el género Fusarium
sp., ha sido uno de los más estudiados como fitopatógeno, por su alta prevalencia en cultivos de importancia económica y su severidad en estos hospederos (Monzón & Rodríguez,2007).