Identificación preliminar de fitoconstituyentes presentes en las raíces, tallos, hojas y flores de trixis cacalioides procedentes del cerro campana de la provincia de Trujillo, departamento de La Libertad

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. O. Q. UI. M IC. A. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. Y. BI. Informe de Tesis I. AC I. A. Identificación preliminar de fitoconstituyentes presentes. RM. en las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides. FA. procedentes del Cerro Campana de la Provincia de. TE CA. DE. Trujillo, Departamento de la Libertad AUTORES:. BI BL IO. NUÑEZ ECHEVARRÍA ANNI JOHANA VARGAS LEZAMA JAIME SAMUEL ASESORA:. Dra. Q.F. SOTO VÁSQUEZ MARILÚ ROXANA. TRUJILLO – PERÚ 2013. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO DICTAMINADOR. PRESIDENTE. Dr. Roger Antonio Rengifo Penadillos. MIEMBRO. UI. M IC. A. Dr. Segundo Guillermo Ruiz Reyes. MIEMBRO. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. Dra. Marilú Roxana Soto Vásquez. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. A nuestro Padre Dios. Por el amor y el perdón que nos regala para que juntos con él. UI. M IC. A. podamos concluir todos los proyectos de vida.. O. Q. A nuestros Padres.. Y. BI. Por la confianza y el esfuerzo que cada día nos ayudaron a seguir. AC I. A. adelante. Gracias por el amor pues por ustedes hoy somos personas. DE. FA. RM. con muchos valores, los amamos.. TE CA. A nuestros maestros. Gracias por su apoyo, por su tiempo, por su paciencia, por sus palabras. BI BL IO. constructivas así como por los conocimientos impartidos durante el desarrollo de nuestra Tesis I, en especial: a la Dra. Marilú Soto Vásquez por habernos guiado durante el desarrollo de este trabajo y llegar a la culminación del mismo, gracias por su tiempo compartido, por su apoyo en los momentos dificultosos de este trabajo, y porque siempre nos impulsa a perseverar en nuestra formación profesional en el área de la investigación científica.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE ÍNDICE .......................................................................................................................... I PRESENTACIÓN ....................................................................................................... III RESUMEN.................................................................................................................. IV ABSTRACT ................................................................................................................. V. A. I. - INTRODUCCIÓN ................................................................................................... 1. M IC. II.- MATERIALES Y MÉTODOS ............................................................................... 7 MATERIALES .................................................................................................. 7. 2.. MÉTODO........................................................................................................... 9. BI. O. Q. UI. 1.. Y. III.- RESULTADOS ................................................................................................... 17. AC I. A. CUADRO 1: FITOCONSTITUYENTES EN EL EXTRACTO DICLOROMETÁNICO DE LAS RAÍCES, TALLOS, HOJAS Y FLORES DE TRIXIS CACALIOIDES ........................................ 17. FA. RM. CUADRO 2: FITOCONSTITUYENTES EN EL EXTRACTO ETANÓLICO DE LAS RAÍCES, TALLOS, HOJAS Y FLORES DE TRIXIS CACALIOIDES ................................................... 18. DE. CUADRO 3: FITOCONSTITUYENTES EN EL EXTRACTO ACUOSO DE LAS RAÍCES, TALLOS, HOJAS Y FLORES DE TRIXIS CACALIOIDES ................................................... 19. TE CA. IV.- DISCUSIÓN ........................................................................................................ 20. BI BL IO. V.- CONCLUSIÓN ..................................................................................................... 32 VI.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ................................................................ 33 ANEXO I .................................................................................................................... 46 ANEXO II ................................................................................................................... 47 ANEXO III .................................................................................................................. 48 ANEXO IV ................................................................................................................. 49 ANEXO V ..................................................................................................................... 1 ANEXO VI ................................................................................................................... 2 ANEXO VII ................................................................................................................ 12. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO VIII ............................................................................................................... 14 ANEXO IX ................................................................................................................. 15 ANEXO X ................................................................................................................... 16. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M IC. A. ANEXO XI ................................................................................................................. 17. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN Señores Miembros del Jurado: En cumplimiento con las disposiciones vigentes emanadas del reglamento de Grados y Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad. A. Nacional de Trujillo, sometemos a vuestra consideración y elevado criterio, la. M IC. presente Tesis I titulada: Identificación preliminar de fitoconstituyentes presentes en. UI. las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides procedentes del Cerro Campaña. BI. O. Q. de la Provincia de Trujillo, Departamento de La Libertad.. A. Y. Esperando que el jurado se sirva a calificar este trabajo según su criterio. AC I. establecido, a pesar de la existencia de alguna deficiencia encontrada durante el. DE. FA. RM. desarrollo del presente trabajo de investigación.. BI BL IO. TE CA. Trujillo, Julio de 2013. __________________________ Núñez Echevarría Anni Johana Autora. _________________________ Vargas Lezama Jaime Samuel Autor. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN El presente trabajo de investigación tiene la finalidad de identificar los fitoconstituyentes de la planta Trixis cacalioides procedentes del Cerro Campana, provincia de Trujillo, Región La Libertad, mediante la marcha Fitoquímica preliminar de la Dra. Miranda Martínez M. y Cuellar A. La extracción de principios activos se. M IC. A. realizó a partir de 50 g de muestra seca y molida de raíz, tallo, hojas y flores con. UI. respectivamente. Luego se inició la separación de los fitoconstituyentes. O. Q. solventes de diferentes polaridades: diclorometánico, etanólico y acuoso. Sobre. coloración. y. precipitación.. Se. Y. de. identificaron. los. siguientes. A. reactivos. BI. estos, se procedió a realizar la identificación de tipo cualitativo, para lo cual se usó. AC I. fitoconstituyentes en las raíces, tallos, hojas y flores: alcaloides, triterpenos y. RM. esteroides, compuestos fenólicos, flavonoides, antocianidinas, quinonas y azúcares. FA. reductores; cardenólidos y taninos en las raíces, tallos y flores; saponinas en raíces,. TE CA. DE. tallos y hojas; y aminoácidos en hojas y flores.. BI BL IO. Palabras claves: Trixis cacalioides, Marcha Fitoquímica, Fitoconstituyentes.. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT The present research aims to identify plant phytoconstituents Trixis cacalioides from The Cerro Campana, Province of Trujillo, La Libertad Region, by running preliminary Phytochemistry Dr. Miranda Martinez M. and Cuellar A. The extractions of active ingredients are made from 50 g of dried and ground sample of root, stem,. M IC. A. leaves and flowers, respectively. Then began separating the solvent phytoconstituents. UI. different polarities dichloromethanic, and aqueous ethanol. On these, we proceeded to. O. Q. perform qualitative identification, which was used for staining reagents and. alkaloids,. triterpenes. and. steroids,. Y. flowers:. phenolics,. flavonoids,. A. and. BI. precipitation. Phytoconstituents following were identified in the roots, stems, leaves. AC I. anthocyanidins, quinones and reducing sugars, tannins and cardenolides in the roots,. RM. stems and flowers; saponins in roots, stems and leaves, and amino acids in leaves and. DE. FA. flowers.. BI BL IO. TE CA. Keywords: Trixis cacalioides, phytochemical, phytoconstituents. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I. - INTRODUCCIÓN El hombre y todos los seres vivos a lo largo de su existencia consumen alimentos para su supervivencia y reproducción creando una perpetuación de su especie y de sus genes. El hombre, en particular, ha creado un contacto con las plantas, animales y derivados de estos, de los cuales depende su sobrevivencia. Es. M IC. A. sobre el avance del conocimiento de las plantas que fijaremos nuestra mira; el hombre. UI. comenzó a emplearlo para su alimento, vestimenta, habitación, adorno del cuerpo,. Q. vivienda y como medicina, llegando así a tener una relación más íntima con las. Y. BI. O. plantas 1.. AC I. A. Cada zona geográfica del mundo tiene una vegetación autóctona utilizada para. RM. la cura de diversas enfermedades. Muchas de las especies vegetales fueron utilizadas. FA. por egipcios, griegos y romanos, entre otros, por sus virtudes curativas que pasaron. DE. luego a formar parte de la farmacopea medieval, que más tarde se enriqueció con los. TE CA. conocimientos del nuevo mundo 2. Se llaman plantas medicinales a los vegetales que tienen sustancias. BI BL IO. denominadas principios activos, las cuales ejercen una acción farmacológica, beneficiosa o perjudicial, sobre el organismo vivo. Su principal utilidad, a veces específica, es la de servir como droga o medicina que en algunos casos alivie la enfermedad o restablezca la salud 3. La existencia de las plantas medicinales no constituye una casualidad, sino que fueron puestas en la creación para el bien del hombre y que estos medios tan sencillos y naturales fueron usados con fe por nuestros antepasados desde hace miles de años 4. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Las plantas medicinales han sido por muchos años una fuente de medicamentos, tenemos el caso de los alcaloides vinblastina y vincristina de la vincapervinca de Madagascar (Catharanthus roseus) utilizados en tratamiento de leucemias; el analgésico morfina obtenido de Papaver somniferum y el antipalúdico quinina de la corteza de la quina (Cinchona officinalis). Actualmente el gran interés. M IC. más sana, una vuelta a la frase “lo natural es más sano” 5.. A. suscitado en torno a su uso no obedece a una moda, sino que busca lograr una vida. Q. UI. Las plantas medicinales y los remedios de ese entonces se siguen utilizando. BI. O. hasta hoy. A principios del siglo XX, el desarrollo de la química y el descubrimiento. Y. de complejos procesos de síntesis orgánica desembocaron en la puesta en marcha, por. AC I. A. parte de la industria farmacéutica, de una nueva producción de medicamentos. Para la. RM. fabricación de muchos de ellos se utilizaron los principios activos de innumerables. FA. plantas medicinales. No se debe olvidar que los remedios a base de plantas. DE. medicinales presentan una inmensa ventaja con respecto a los tratamientos químicos. TE CA. o de otras fuentes. No obstante, a pesar de que han aumentado las investigaciones y estudios científicos de las plantas medicinales, todavía no se conocen muchos de los. BI BL IO. principios activos a los que se debe las extraordinarias cualidades de las especies vegetales 2. Los metabolitos secundarios de las plantas medicinales son responsables de algunas “propiedades curativas” que en la medicina tradicional se les atribuye, y constituyen un gran potencial de reserva inexplorada de gran utilidad al hombre 6. La Organización Mundial de la Salud (OMS) reconoce la importancia del rol que desempeña el uso y utilización de las plantas medicinales en la “Atención Primaria de la Salud”, recomienda y respalda su integración en los sistemas nacionales de salud, quienes estiman que casi el 80% de todos los habitantes de la 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. tierra los usan para resolver sus principales problemas de salud. Para el año 2020 se estima que la población mundial será de 7 500 millones de personas, de las cuales 75% corresponderán a países en desarrollo que consumirán sólo 15% de los medicamentos convencionales del mercado. Estos datos permiten predecir que la mayoría de la población dependerá de las plantas medicinales, principalmente por sus. A. escasos efectos secundarios, amplio margen terapéutico y su utilidad en la mejora de. M IC. la calidad de vida de quienes sufren enfermedades leves o determinadas. O. Q. UI. enfermedades crónicas 7.. BI. En la actualidad es el Instituto Nacional de Salud (INS) a través del Centro. A. Y. Nacional de Salud Intercultural (CENSI) que propone las políticas y normas en salud. AC I. intercultural, promueve el desarrollo de la investigación, docencia, programas y. RM. servicios, transferencia tecnológica y la integración de la medicina tradicional,. FA. medicina alternativa y medicina complementaria con la medicina académica, para. TE CA. DE. contribuir a mejorar el nivel de salud de la población peruana 8. Es así que a los profesionales de la salud y más aún a los Químicos –. BI BL IO. Farmacéuticos nos toca el deber de contribuir con nuestros conocimientos científicos y hacer extensivo las propiedades de nuestras especies que pueden abarcar el mercado interno y el externo. La posibilidad de industrialización de nuestros recursos naturales, terapéuticos, es una línea promisoria que tendría sustento siempre y cuando corroboremos su eficacia, primero con la identificación de sus componentes y posteriormente su aplicación en personas 9.. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El Perú es un país con una diversidad de flora única en el mundo, la misma que está representada por más de 25,000 plantas, de las cuales cerca de 1,400 tienen propiedades curativas 9. Se sabe que los antiguos peruanos empleaban las plantas no sólo como alimentos, sino que además lo empleaban para curar los males que los aquejaban.. A. Existen informaciones bibliográficas y folklóricas en la que se da a conocer el empleo. M IC. de plantas para estos fines. Se sabe que las plantas medicinales fueron las bases para. O. .. BI. 9. Q. UI. muchos tratamientos, y que muchos fármacos tienen orígenes en plantas medicinales. Y. En el Perú, por sus condiciones climáticas y por la diversidad de biorregiones. AC I. A. existe una abundante flora silvestre cuyas aplicaciones medicinales, aún no están muy. RM. difundidas. Las comunidades rurales del interior del país utilizan tradicionalmente las. FA. plantas como medio de curar sus enfermedades. Ellos han recibido de generación en. DE. generación un bagaje de conocimientos que se ha acumulado desde tiempos. TE CA. inmemoriales sobre selección, manejo, conservación y usos de las diferentes especies de plantas que crecen en nuestra patria 10.. BI BL IO. En el departamento de La Libertad a 15km al noroeste de la ciudad de. Trujillo, se erigen imponentes los Cerros Campana, Cabezón y Prieto. A simple vista parecen no tener vegetación, pero mientras se asciende a ellos se empiezan a notar formaciones propias de las lomas. En este lugar se aprecian 2 zonas distintas: una que llega hasta los 200 msnm, de suelo arenoso y seco, con comunidades de tilandsias, suculentas y cactáceas; y otra que alcanza los 1,000 msnm con herbáceas pegadas al suelo y comunidades arbustivas dispersas. Investigaciones recientes indican que en estas lomas hay alrededor de 220 especies de flora y 260 especies de fauna entre 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. vertebrados e invertebrados. Es en el cerro Campana donde encontramos la Trixis cacalioides, planta que será el objeto de nuestra investigación 11. Trixis cacalioides es autóctona de argentina, pertenece a la familia Asteraceae, su nombre común es “coca inca”, “inga”, “hierba linda”. 11 Presenta sinonimias tales como: Trixis paradoxa, Trixis hexantha, trixis. A. papillosa, Perdicium cacalioides. Crece en el Sur del Ecuador, Perú, Norte de Chile y. M IC. en Argentina. Se desarrolla en la costa, parte baja de los valles occidentales y valles. . Esta planta se vende en los mercados de Trujillo y Chiclayo. O. 11, 12, 13. BI. 1500 m.s.n.m.. Q. UI. interandinos de Ancash, Cajamarca, Lambayeque, La Libertad, Piura entre los 200 a. Y. con el nombre de “Añasquero Chico” 14.. AC I. A. Trixis cacalioides es un arbusto de 0.2 – 1.5m de altura, entre sus. RM. características morfológicas tenemos que posee: las brácteas del involucro más o. FA. menos del mismo tamaño, a menudo con otro verticilio de brácteas más cortas en la. DE. base. Las hojas coriáceas (gruesa y con la superficie endurecida), simples, obovadas y. TE CA. elípticas hasta lanceoladas. Las flores bilabiadas, amarillas, 5 – 7 por receptáculo, florecen de marzo a mayo. El receptáculo sin páleas (brácteas), pero con pelos. Y sus. BI BL IO. tallos son marrones claros y ásperos, con pelos sedosos o algunas veces glandulares 15, 16, 17. .. La especie Trixis cacalioides (Kunth), es usada como: diaforético, para. inflamación de la próstata, contra la mordedura de la culebra, para curar “aire en la cabeza” y fiebre mediante baños con el cocimiento de las hojas e incluso para el reumatismo. 18, 19, 20. .. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Analizando el interés por el estudio y empleo de medicina tradicional en la asistencia médica y el reconocimiento de la importancia de las plantas medicinales para el sistema de salud de países en desarrollo, es que a través del presente trabajo de investigación se desea contribuir con el conocimiento y proporcionar información de los fitoconstituyentes que presenta la especie Trixis cacalioides. Debido a que existen. UI. M IC. diferentes propiedades (como actividad tripanocida y otras).. A. diferentes estudios de otras especies del mismo género, la mayoría de ellos tienen. O. Q. Según lo expuesto anteriormente se planteó el siguiente problema: ¿Cuáles. BI. son los fitoconstituyentes presentes en la raíces, tallos, hojas y flores de Trixis. A. Y. cacalioides procedentes del Cerro Campana de la provincia de Trujillo, región La. RM. AC I. Libertad?. FA. La presente investigación es de tipo descriptiva por tanto su hipótesis esta. DE. implícitamente sostenida en el enunciado del problema científico.. Determinar los fitoconstituyentes de las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis. BI BL IO. -. TE CA. Durante la realización del presente trabajo se cumplió el siguiente objetivo:. cacalioides procedente del Cerro Campana de la provincia de Trujillo, región La Libertad.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.- MATERIALES Y MÉTODOS 1. MATERIALES 1.1. Material biológico: Se utilizó las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides 1.2. Materiales y equipos de laboratorio:. M IC. A. 1.2.1. Material de vidrio:. UI. De uso común en el laboratorio. O. Q. 1.2.2. Equipos:. BI. Molino a discos CORONA. A. Y. Equipo de baño maría. AC I. Balanza analítica OHAUS GA 200. RM. Lámpara UV 254-366nm DESAGA. FA. Cocina eléctrica Finely. DE. Refrigeradora Coldex. TE CA. Estufa Memmert. BI BL IO. Balanza triple brazo OHAUS 700/800 series 1.2.3. Reactivos Glicerina Ácido nítrico Subnitrato de bismuto Yoduro de potasio Yodo Ácido pícrico (2, 4, 5 – trinitrofenol). 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Hidróxido de sodio Cloruro mercúrico Ácido sulfúrico Anhídrido acético Sulfato de cobre. A. Tartrato de sodio y potasio. M IC. Cloruro férrico al 10% en agua. Q. UI. Ninhidrina. BI. O. Ácido clorhídrico. Y. Magnesio metálico. AC I. A. Ácido 3,5-dinitrobenzóico al 2% en metanol. FA. Alcohol amílico. RM. Hidróxido de potasio al 5.7% en agua. DE. 1.2.4. Solventes. TE CA. Diclorometano. BI BL IO. Etanol 70º. Cloroformo Agua destilada. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2. MÉTODO 2.1. Preparación de la muestra: 2.1.1. Identificación y determinación taxonómica de la especie: La identificación botánica del material estuvo a cargo del Dr. Eric Rodríguez Rodríguez, encargado del Herbarium Truxillensis (HUT).. A. El ejemplar de la especie vegetal fue depositado en el Herbarium. M IC. Truxillensis (HUT) con el código 53822 (Anexo 1).. Q. UI. 2.1.2. Selección de la muestra:. BI. O. La especie de Trixis cacalioides se recolectó en el Cerro Campana. Y. ubicado a 16,7 kilómetros al norte de la ciudad de Trujillo;. AC I. A. geográficamente está entre los 8° 00’ 18.16” LS - 79° 06´18.34” LW y. RM. los 7° 58’ 36.98” LS - 79° 06´16.18” LW. A 340 metros de altura. FA. sobre el nivel del mar. Pertenece al distrito de Huanchaco, Provincia. DE. de Trujillo, Departamento de La Libertad. La recolección de la especie. TE CA. se realizó por el método convencional o clásico de la herborización, seleccionando el material en el campo y verificando que esté en buenas. BI BL IO. condiciones.. 2.1.3. Transporte de la muestra: El material recolectado fue transportado en cajas de cartón grandes al Laboratorio de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, en donde se eliminó las sustancias extrañas presentes en el material vegetal.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.1.4. Lavado de la droga: Luego de la separación de sustancias extrañas, se lavó el material vegetal con agua potable a chorro. 2.1.5. Secado de la muestra: Posteriormente al lavado se procedió a extender la muestra en papel. A. kraft para que seque a temperatura ambiente y luego en la estufa por 2. M IC. horas. Este procedimiento se realizó solo para hojas, tallos y raíces.. Q. UI. 2.2. Preparación de los extractos:. BI. O. Una vez secada la muestra, se procedió a la obtención de los extractos,. Y. utilizando disolventes de diferentes polaridades: Diclorometano, etanol y. AC I. A. agua.. RM. 2.3. Tamizaje fitoquímico preliminar. FA. El Tamizaje Fitoquímico preliminar se realizó siguiendo el método de. DE. Miranda Martinez Migdalia y Cuéllar Cuellar A.. TE CA. De acuerdo con este método de Miranda Martínez Migdalia y Cuéllar Cuellar A., cada muestra se sometió a la acción extractiva de solventes de. BI BL IO. polaridad creciente: éter etílico (o Diclorometano), Etanol y Agua, modificando el pH obteniéndose de esta manera los metabolitos secundarios de acuerdo a su solubilidad. Luego de separar las fracciones se realizó la identificación de los metabolitos secundarios haciendo uso de reactivos de coloración y precipitación. 28,29 Método y procedimiento: En este se empleó un esquema general, el cual utiliza una extracción sucesiva con solventes de polaridad creciente. De este modo, se realizará la extracción sucesiva del material vegetal para la 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. aplicación de técnicas de Tamizaje fitoquímico detallado en el Anexo II. Posteriormente de acuerdo a los Anexos III, IV y V. En cada caso, para realizar los ensayos se procedió de la siguiente forma: Ensayo de Sudán: Permitió reconocer en el extracto la presencia de compuestos grasos, para ello, a la alícuota de la fracción se le añadió 1 mL. A. de la solución diluida en agua del colorante Sudán III. Se calentó en baño de. M IC. agua hasta evaporación del solvente. La presencia de compuestos grasos se. BI. O. seno del líquido o en las paredes del crisol.. Q. UI. consideró positiva si aparecen gotas o una película coloreada de rojo en el. Y. Ensayo de Dragendorff: Permitió reconocer en los extractos la presencia de. AC I. A. alcaloides. Para ello, a las alícuotas con solventes orgánicos (extracto de. RM. diclorometano y etanol), se evaporaron en baño maría y el residuo se. FA. redisolvió en 1mL de ácido clorhídrico al 1%. En caso del extracto acuoso, a. DE. la alícuota se le añadió 1 gota de ácido clorhídrico concentrado, (se calentó. TE CA. suavemente y se dejó enfriar). Con la solución acuosa ácida se realizó el ensayo, añadiéndose 3 gotas del reactivo de Dragendorff, si hay precipitado. BI BL IO. se considera (+).. Ensayo de Mayer: Permitió reconocer en el extracto la presencia de alcaloides. Se realizó de la forma descrita anteriormente, hasta obtener una solución acida. Se añadió luego, 2 mg de cloruro de sodio en polvo, se agitó y filtró. Luego se añadió II o III gotas del reactivo de Mayer, si se observa: precipitado se considera (+).. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Ensayo de Wagner: Permitió reconocer en el extracto la presencia de alcaloides. Se partió igual que en los casos anteriores de la solución acida, se añadió II o III del reactivo y clasificó los resultados de la forma anterior. Ensayo de Baljet: Permitió reconocer en el extracto diclorometánico y etanólico la presencia de compuestos con agrupamientos lactónicos, en. A. particular las cumarinas, aunque en otros compuestos lactónicos pueden dar. M IC. positivo a este ensayo. Para ello, se evaporó el solvente en baño María y se. Q. UI. redisolvió con 1 mL de alcohol. En estas condiciones se adicionó 1mL del. BI. O. reactivo. Se consideró un ensayo positivo a la aparición de coloración o. Y. precipitado rojo (+).. AC I. A. Ensayo de Liebermann-Burchard: Permitió reconocer en el extracto la. RM. presencia de triterpenos y/o esteroides, porque ambos tipos de productos. FA. poseen un núcleo de androstano generalmente insaturado en el anillo B y en. DE. la posición 5 – 6. Como el extracto no se encuentro en cloroformo, el. TE CA. disolvente se evaporó en baño María y el residuo se redisolvió en 1 mL de cloroformo. Luego se adicionó 1 mL de anhídrido acético y se mezcló bien.. BI BL IO. Por la pared del tubo de ensayo se dejó resbalar de II a III gotas de ácido sulfúrico concentrado sin agitar. Se consideró como ensayo positivo la aparición de las siguientes coloraciones: 1. Rosado – azul muy rápido. 2. Verde intenso visible aunque rápido. 3. Verde oscuro negro final de la reacción.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Muy pocas veces puede observarse el primer cambio. El tercer cambio generalmente ocurre cuando del material evaluado tiene cantidades importantes de estos compuestos. IMPORTANTE: Para realizar esta reacción es necesario que no haya presencia de agua en el medio de la reacción, pues ésta con el ácido sulfúrico. M IC. A. reacciona de forma violenta y puede ocurrir un accidente.. UI. Ensayo de Catequinas: Para ello se tomó 1 gota del extracto etanólico con. O. Q. la ayuda de un capilar y se aplicó sobre papel filtro. Sobre la mancha se. BI. aplicó la solución de carbonato de sodio. La aparición de una mancha verde. AC I. A. Y. carmelita a la luz UV, ha de indicar un ensayo positivo.. RM. Ensayo de Resinas: Para detectar este tipo de compuestos a 2 mL del. FA. extracto etanólico se añadió 10 mL de agua destilada. La aparición de un. DE. precipitado indica un ensayo positivo.. TE CA. Ensayo de Fehling: Permitió reconocer en el extracto la presencia de azúcares reductores. Para ello, a las alícuotas de extracto de etanol, se. BI BL IO. evaporaron en baño María y el residuo se redisolvió con 2 mL de agua destilada. Se adicionó 2 mL de reactivo y se calentó en baño de agua de 5 a 10 minutos. El ensayo se consideró positivo si la solución se coloreaba de rojo o aparece precipitado rojo. Ensayo de la espuma: Permitió reconocer en el extracto etanólico y acuoso la presencia de saponinas, tanto del tipo esteroidal como triterpénica. De modo que si la alícuota se encontró en alcohol, esta se diluyó con cinco veces su volumen en agua y se agitó dicha mezcla fuertemente por 5. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. minutos. El ensayo se consideró positivo cuando apareció la espuma en la superficie del líquido de más de 2mm de altura y permaneció persistente por más de 2 min. Ensayo de Cloruro férrico: Permitió reconocer la presencia de compuestos fenólicos y/o taninos en un extracto vegetal. Cuando el extracto de la planta. A. se realiza con alcohol, el ensayo determino tanto fenoles como taninos. Para. M IC. esto, a 1mL del extracto alcohólico se le adicionaron 3 gotas de una solución. Q. UI. de tricloruro férrico al 5 % en solución salina fisiológica (cloruro de sodio al. BI. O. 0.9 % en agua). En cambio cuando el extracto fue acuoso, el ensayo. Y. determino fundamentalmente taninos. Para esto, a 1mL del extracto se. AC I. A. añadió acetato de sodio para neutralizar y tres gotas de una solución de. Se observó el desarrollo de una coloración rojo-vino, compuestos. DE. -. FA. ensayo positivo cuando:. RM. tricloruro férrico al 5 % en solución salina fisiológica. Se consideró un. -. TE CA. fenólicos en general. Se observó el desarrollo de una coloración verde intensa, taninos del. BI BL IO. tipo pirocatecólicos.. -. Se observó el desarrollo de una coloración azul, taninos del tipo pirogalotánicos.. Ensayo de Ninhidrina: Permitió reconocer en el extracto etanólico la presencia de aminoácidos libres o de aminas en general. Para lo cual, se tomó 1 mL del extracto etanólico, se mezcló con 2 mL de solución de Ninhidrina en agua. La mezcla se calentó de 5 a 10 minutos en baño de agua.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Este ensayo se consideró positivo cuando se observó el desarrollo de una coloración azul – violáceo. Ensayo de Borntrager: Permitió reconocer en un extracto la presencia de quinonas. Para ello, cuando la alícuota del extracto no se encontraba en cloroformo, este se evaporó en baño María y el residuo se redisolvió con 1. A. mL de hidróxido de sodio al 5 % en agua. Luego se agitó mezclando las. M IC. fases y se dejó en reposo hasta su ulterior separación. Cuando la fase acuosa. Q. UI. alcalina (superior) se coloreó de rosado o rojo, el ensayo se consideró. BI. O. positivo. Coloración rosada (++), coloración roja (+++).. Y. Ensayo de Shinoda: Permitió reconocer la presencia de flavonoides en un. AC I. A. extracto de un vegetal. Cuando la alícuota del extracto se encontró en. RM. alcohol, este se diluyó 1mL de ácido clorhídrico concentrado y un pedacito. FA. de cinta de magnesio metálico. Después de la reacción se esperó 5 minutos,. DE. se añadió 1 mL de alcohol amílico, se mezclaron las fases y se dejó reposar. TE CA. hasta que se separen.. Si la alícuota del extracto se encontraba en agua, se procedió de igual forma, a. BI BL IO. partir de la adición del ácido clorhídrico concentrado.. El ensayo se consideró positivo, cuando el alcohol amílico se coloreó de amarillo, naranja, carmelita o rojo; intensos en todos los casos. Ensayo de Kedde: Permitió reconocer en un extracto la presencia de glucósidos cardiotónicos. Para lo cual se mezcló 1 mL del extracto etanólico con 1 mL del reactivo y se dejó reposar de 5 a 10 min. Se consideró un ensayo positivo la aparición de una coloración violácea que debe persistir durante 1 a 2 horas. 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Ensayo de Antocianinas: Permitió reconocer en los extractos vegetales la presencia de estas estructuras de secuencia C6-C3-C6 del grupo de los flavonoides. Se calentó 2 mL del extracto etanólico durante 10 min. con 1 mL de HCl concentrado. Se dejó enfriar y se adicionó 1 mL de agua y 2 mL de alcohol amílico. Se agitó y se dejó separar las dos fases. Se consideró un. A. ensayo positivo la aparición de color rojo a marrón en la fase amílica.. M IC. Ensayo de la gelatina: Permitió reconocer la presencia de taninos en el. Q. UI. extracto acuoso. Se tomó 1 ml de muestra y se añadió 1 gota de solución de. BI. O. gelatina al 1%. Se consideró positivo la presencia de un precipitado blanco.. Y. Ensayo de Mucílagos: Permitió reconocer en el extracto la presencia de una. AC I. A. estructura tipo polisacárido, el cual formará un coloide hidrófilo de alto. RM. índice de masa que aumenta la densidad del agua donde se extrae. Para ello 2. FA. mL del extracto se enfrió en agua de 0 a 5 °C. Se consideró positivo cuando. DE. la solución presentó una consistencia gelatinosa.. TE CA. En el estudio fitoquímico se buscaron los siguientes componentes: Alcaloides, aminoácidos, antocianidinas, azúcares reductores, catequinas,. BI BL IO. compuestos grasos, cumarinas, esteroides, fenoles, flavonoides, glicósidos cardiotónicos, hidrocarburos, lactonas, mucílagos, quinonas, resinas, saponinas, taninos, triterpenoides 16,17. TRATAMIENTO DE RESULTADOS. Los resultados fueron reportaron en cuadros utilizando el programa de Microsoft Office ®, donde se indicó la ausencia (-) o presencia (+) de los fitoconstituyentes.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.- RESULTADOS Cuadro 1: Fitoconstituyentes en el Extracto Diclorometánico de las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides. EXTRACTO DICLOROMETÁNICO Tallos. Hojas. Flores. +. +. +. +. +. +. +. +. Wagner Lactonas y Cumarinas. +. Sudan. Aceites y Grasas. +. Triterpenos y Esteroides. +. +. +. -. +. -. -. +. +. +. +. +. Y. A AC I. RM. Liebermann Burchard. +. O. Baljet. +. M IC. Alcaloides. Mayer. UI. Dragendorff. A. Raíces. Q. Fitoconstituyentes. BI. Ensayos. FA. Leyenda:. DE. Presencia. -. Ausencia. BI BL IO. TE CA. +. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Cuadro 2: Fitoconstituyentes en el Extracto Etanólico de las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides. Dragendorff Alcaloides. Mayer Wagner. Raíces. Tallos. Hojas. Flores. +. +. +. +. +. +. +. +. +. +. +. +. -. +. -. +. +. +. +. +. +. +. +. +. +. +. +. -. -. -. -. A. Fitoconstituyentes. M IC. Ensayos. UI. EXTRACTO ETANÓLICO. Baljet. Lactonas. -. Liebermann Burchard. Triterpenos y esteroides. +. Tricloruro Férrico. Compuesto fenólicos. +. Shinoda. Flavonoides. Bornträger. Quinonas. Catequinas. Catequinas. Resinas. Resinas. -. -. -. -. Fehling. Azúcares Reductores. +. +. +. +. Espuma. Saponinas. -. +. +. -. Aminoácidos. -. -. +. +. Cardenólidos. +. +. -. +. Antocianidinas. +. +. +. +. Antocianidinas. Q O. BI. Y A AC I. RM. FA. DE. BI BL IO. Kedde. +. TE CA. Ninhidrina. +. Leyenda: +. Presencia. -. Ausencia. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Cuadro 3: Fitoconstituyentes en el Extracto Acuoso de las raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides. Tallos. Hojas. Flores. +. +. +. +. +. +. +. +. Wagner. +. +. +. A. +. Tricloruro Férrico. +. +. -. +. Q. Ensayo. Fitoconstituyentes. +. -. +. +. +. +. +. -. -. -. +. +. -. +. -. -. -. -. Dragendorff Alcaloides. Mayer. M IC. Raíces. AC I. EXTRACTO ACUOSO. UI. Taninos Azúcares reductores. +. Espuma. Saponinas. Shinoda. Flavonoides Mucílagos. A. FA. RM. Mucilagos. BI. Fehling. Y. O. +. Gelatina. DE. Leyenda: Presencia. -. Ausencia. BI BL IO. TE CA. +. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.- DISCUSIÓN En el presente trabajo se realizó la identificación preliminar de los Fitoconstituyentes de Trixis cacalioides en raíces, tallos, hojas y flores. Las plantas, poseen un metabolismo secundario que les permite producir y acumular compuestos de. naturaleza. química. diversa. denominados. metabolitos. secundarios. o. M IC. A. fitoconstituyentes, los que se distribuyen diferencialmente entre grupos taxonómicos,. UI. presentan propiedades biológicas, muchos desempeñan funciones ecológicas y se. Q. caracterizan por sus diferentes usos y aplicaciones en medicina, farmacia, cosmética,. Y. BI. O. entre otros. 30. AC I. A. Esta identificación se llevó a cabo mediante el método de Miranda Martínez. RM. M. y Cuellar Cuellar A. De acuerdo con este método para la marcha fitoquímica, cada. FA. muestra fue sometida a la acción extractiva de solventes de polaridad creciente:. DE. diclorometano, etanol y agua con el fin de obtener los metabolitos secundarios de. TE CA. acuerdo a su polaridad. Luego de obtener los extractos se realizó la identificación de los fitoconstituyentes haciendo uso de reactivos de coloración y precipitación. 31. BI BL IO. La polaridad es una propiedad muy importante pues permite describir la forma. como se comportan los electrones entre los átomos. Un enlace no polar es aquel en el cual los electrones se comparten de igual manera entre dos átomos. Un enlace polar, es aquel en el cual un átomo ejerce mayor atracción sobre los electrones que el otro. La capacidad de un átomo de atraer electrones por sí mismo en un enlace químico se conoce como electronegatividad. Esta propiedad puede definirse como la afinidad electrónica y la energía de ionización que reflejan la tendencia de un átomo gaseoso aislado de ganar o perder electrones. 32, 33, 34 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La extracción de los fitoconstituyentes sigue un orden de polaridad ascendente; debido a que las células de donde se los ha de extraer, constituyen sistemas hidrofílicos internos, donde se encuentran los primeros, inmersos dentro de una vesícula, que consta de una membrana lipofílica. Cuando se pulveriza la droga, se rompen las paredes y membranas celulares, dejando libres las vesículas que. A. almacenan a los fitoconstituyentes mencionados. En la identificación cualitativa de. M IC. los fitoconstituyentes se usó extracciones con diferentes solventes (diclorometano,. Q. UI. etanol 70º y agua), que penetran en la materia vegetal y disuelven las sustancias,. BI. O. luego se conserva a baja temperatura.; se realiza a polaridad creciente, para facilitar la. Y. solubilidad de principios activos que contienen las drogas crudas, según la marcha de. AC I. A. la Dra. Miranda Migdalia. 31, 35. RM. El diclorometano, al ponerse en contacto con la droga triturada, va a. FA. difundirse por la membrana vesicular, disolviéndola a su paso y extrayendo los. DE. principios activos de polaridad semejante (lipofílicos); este disolvente, no extrae. TE CA. aquellos metabolitos secundarios unidos no covalentemente a sistemas hidrofílicos. 31. BI BL IO. (proteínas, péptidos) en el citoplasma expuesto; sino que se repele con estos últimos.. El etanol, como solvente de polaridad intermedia, ofrece la capacidad de. formar enlaces de hidrogeno y de ceder pares de electrones debido al grupo que esté presente; así también, como el agua, pero además también poseen un extremo lipófílo que puede ayudar a la solvatación de sustratos orgánicos. Debido a esta combinación de propiedades, los disolventes como el alcohol etílico pueden considerarse como lo mejor bajo todos los conceptos. 36. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El agua tiene el dipolo más elevado, por poseer un número grande de enlaces de hidrógeno, surgiendo la interacción dipolo-dipolo. 32, 36 Debido a la capacidad del agua de poder formar enlaces de hidrógeno con diferentes iones, del mismo en que puede formarlo con otra molécula de agua; es un disolvente especial, ya que puede solvatar diferentes especies (aniónicas o. A. catiónicas). El agua no solo tiene dos átomos de hidrógeno enlazados al oxígeno y. M IC. capaces de dar enlaces de hidrógeno, sino que además posee dos pares de electrones. O. BI. solvatación de especies acidas según Lewis. 32, 36. Q. UI. en el átomo de oxígeno, que son básicos y pueden actuar como dadores en la. Y. En el Cuadro N° 1, se reflejan los resultados obtenidos de los. AC I. A. fitoconstituyentes en los extractos diclorometánico de los cuatro órganos (raíces,. RM. tallos, hojas y flores) de Trixis cacalioides. Notándose que los alcaloides, triterpenos. FA. y esteroides se encuentran en las raíces, tallos, hojas y flores. Mientras que las. DE. lactonas y cumarinas sólo se encontraron en las raíces, tallos y flores. Asimismo se. TE CA. evidenció la presencia de aceites y grasas sólo en las raíces y flores.. BI BL IO. En el Cuadro N° 2, se puede observar los resultados de los fitoconstituyentes en los extractos etanólicos de los cuatro órganos (raíz, tallo, hoja y flor). Según se refleja, la raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides presentan: alcaloides, triterpenos y esteroides, compuestos fenólicos, flavonoides, quinonas, antocianidinas y azúcares reductores. Mientras que las lactonas sólo se encontraron en las hojas. Respecto a los cardenólidos se encontraron sólo en las raíces, tallos y flores. Los aminoácidos sólo fueron encontrados en las hojas y flores. En relación a las saponinas. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. estas se encontraron sólo en los tallos y hojas. Asimismo en las raíces, tallos, hojas y flores no se evidencio la presencia de catequinas y resinas. En el Cuadro Nº 3, se reflejan los resultados obtenidos de los fitoconstituyentes en los extractos acuosos de los cuatro órganos (raíces, tallos, hojas y flores) de Trixis cacalioides. Notándose que los alcaloides y los azúcares reductores. M IC. A. se encontraron en las raíces, tallos, hojas y flores. Mientras que los flavonoides y. UI. azúcares reductores se encuentran en las raíces y tallos. Asimismo los taninos sólo se. O. Q. encuentran en las raíces, tallos y flores. Respecto a las saponinas sólo se encuentran. Y. BI. en las raíces.. AC I. A. Según los resultados obtenidos en los cuadros 1, 2 y 3 se tiene que los. RM. alcaloides se encuentran en los extractos Diclorometánico, Etanólico y Acuoso de. FA. raíces, tallos, hojas y flores de Trixis cacalioides. La mayoría de los alcaloides son. DE. insolubles o muy poco solubles en agua, pero se disuelven bien en alcohol, éter,. TE CA. cloroformo u otros solventes orgánicos, cuando se presentan en forma de bases, lo cual sería la explicación para la obtención de alcaloides en los solventes. BI BL IO. Diclorometánico y Etanólico y debido a la existencia de alcaloides en forma de sales, las cuales son solubles en agua, es por lo que las pruebas dieron positivo para este tipo de solvente. 43, 44 Las técnicas de reconocimiento de alcaloides son basadas en la capacidad que tienen los alcaloides en estado de sal (extractos ácidos), de combinarse con el yodo y metales pesados como bismuto, mercurio, tugsteno formando precipitados. 38. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En la práctica se utiliza los reactivos generales para detectar alcaloides como: la solución de yodo-yoduro de potasio (Reactivo de Wagner), mercurio tetrayoduro de potasio (reactivo de Mayer), tetrayodo bismuto de potasio (reactivo de Dragendorff). 38 La reacción de Dragendorff, fue positiva en todos los extractos luego del. M IC. A. análisis correspondiente. En esta reacción el ácido nítrico extrae los protones H+ del. UI. alcaloide y éste va a formar una sal con el anión BiI4, producto de la disolución del. O. Q. complejo KBiI4, Complejo coordinado Ioduro de potasio bismuto (III), que va a. BI. precipitar. 34 El bismuto presenta una geometría octaédrica, con una carga formal de –. A. Y. 2, en su esfera de coordinación (anión voluminoso) para interactuar con dos. AC I. moléculas de alcaloide protonada, evidenciándose por una coloración anaranjada.. FA. RM. 40. 39,. DE. La reacción de Mayer, fue positiva en todos los extractos al realizar el análisis. TE CA. fitoquímico, lo cual demostró que esta reacción presenta como metal de coordinación al mercurio (Hg2+), el cual forma una coordinación tetraédrica con una carga formal,. BI BL IO. en su esfera de – 2, interactuando de manera semejante al reactivo anterior y evidenciándose por una coloración blanco cremosa. 39, 40 En la reacción de Wagner también fue positiva para todos los extractos obtenidos. En esta reacción se forma un complejo de triyoduro en algunos casos se puede formar pentayoduro y/o heptayoduro, esto depende de la concentración de I2, se comporta como un ácido de Lewis frente al Yoduro (I-), el anión triyoduro es el que atrae de manera electrostática al alcaloide protonado. 41, 42. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Las cumarinas están relacionadas con la defensa química de la planta ya que presenta efectos antibacterianos, sedantes y analgésicos. 45 La prueba de Baljet es útil para reconocer la presencia de compuestos con agrupamiento lactónico. 46 La reacción se basa en la formación de un complejo formado entre el ácido pícrico y la lactona, β y γ insaturada, dicho complejo presenta coloración rojo claro a oscuro. 47. M IC. A. La presencia de este fitoconstituyente se observa en la raíces, tallos y flores. UI. del extracto diclorometánico y solo se observa su presencia en el Extracto Etanólico. BI. O. Q. de hojas, como se observa en el Cuadro N° 1 y 2.. Y. El Sudan III es un método utilizado fundamentalmente para demostrar. AC I. A. triglicéridos, aunque también tiñe otros lípidos selectivamente de color rojo –. RM. anaranjado. 48. FA. El fundamento para esta prueba es que los colorantes para grasas son más. DE. solubles en las propias grasas que en el medio en el que van disueltos. Así, al bañar la. TE CA. grasa con la solución del colorante, éste tiende a disolverse en la grasa que se va cargando del colorante. Por regla general estos colorantes siempre van en solución. BI BL IO. alcohólica o bien en una mezcla de alcohol/acetona o alcohol/agua. 49 Las grasas las identificamos en los extractos diclorometánicos de raíces y. flores como se observa en el Cuadro N ° 1. La prueba de Lieberman – Burchard es utilizada en una prueba colorimétrica para detectar colesterol.. 50. Esta reacción se realiza en medio ácido fuerte. El. colesterol sufre una reacción gradual, formándose en cada etapa una molécula de colestapolieno que posee un doble enlace adicional con respecto al compuesto del 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. cual deriva. En la etapa inicial de esta reacción, y a la cual se debe la coloración, consiste en al protonación del grupo OH del colesterol, con la consiguiente pérdida de agua obteniéndose el ion carbonio 3,5 – colestadieno que constituye el primer paso de la reacción de color. 51 Este fitoconstituyente fue encontrado, y se observa en los resultados, en los. M IC. A. extractos diclorometánico y etanólico en las raíces, tallos, hojas y flores. Según. UI. algunos reportes, de un trabajo realizado por Kotowicz. Hernadez y co.l en el año. O. Q. 2001, en otra especie de la familia Asteraceae, Trixis pallida, se encontraron 7 tipos. BI. de trixanolides en las partes aéreas de la planta, lo que confirmaría la presencia de. AC I. A. Y. este constituyente en Trixis cacalioides. 52. RM. Bohlmann, Suwita y col. analizaron dos especies nuevas de Trixis, las cuales. FA. dieron como resultado cinco sesquiterpenos nuevos relacionados con trixikingolide,. DE. seis nuevos derivados germacreno y un sesquiterpeno derivado de rotundene.. TE CA. Algunos compuestos adicionales conocidos se aislaron también, que en parte puede. BI BL IO. ser de importancia taxonómica. 53 Riscala, Catalan, Sosa y col. en Trixis praestans se obtuvieron como. resultados nuevos sesquiterpenos de tipo trixano. 54 El ensayo de Kedde permite reconocer en un extracto la presencia de cardenólidos. Esta prueba dio positivo para hojas en el extracto alcohólico. Con esta prueba detectamos la presencia de cardenólidos en los Extractos Etanólicos de raíces, tallos y flores, como se observa en el Cuadro N° 2.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En la prueba del tricloruro férrico, el Fe se une al grupo fenóxido. Estos son más reactivos hacia la sustitución aromática electrofílica, ya que tienen una carga negativa reaccionan con electrófilos (en este caso Fe) para formar complejos. 55 Los compuestos con grupos fenoles fueron encontrados en los extractos etanólico y acuoso, excepto en el extracto acuoso de hojas. (Ver Cuadro N° 2 y 3 de. M IC. A. los Resultados). UI. Los flavonoides se les atribuye diversas propiedades en las plantas, entre ellos. BI. O. Q. podemos citar antioxidantes, antiinflamatorio, antialérgico, entre otros como la. Y. protección a los vegetales contra la incidencia de insectos, hongos virus y bacterias.. AC I. A. Estos son metabolitos secundarios de una gran distribución en el reino vegetal y. RM. pueden estar presentes en todas las partes de las plantas. En éstas se encuentran. FA. fundamentalmente en forma de glucósidos, esto les infiere una alta solubilidad en. TE CA. estructuras. 56, 31. DE. agua y disolventes polares, lo cual se incrementa por la alta polaridad de sus. BI BL IO. La variación estructural de los flavonoides es inmensa, tanto por la naturaleza del azúcar como para la posición del enlace glucósido. Los glucósidos flavonoides se extraen de forma eficiente con alcoholes de baja masa molecular, en particular metanol y etanol, cuando el material es seco, ofrece ventajas emplear una serie de extracciones con tres o cuatro disolventes, incrementando la polaridad. Esto explicaría como es que los flavonoides fueron encontrados en todos los extractos etanólicos y solo en los extractos acuosos de raíces y tallos. 56. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En la reacción de Shinoda, el magnesio metálico es oxidado por el HCl concentrado, dando como productos al H2, que es eliminado en forma de gas y el MgCl2, que es el que forma complejos con los flavonoides dando coloraciones características. El magnesio divalente intensifica la coloración por estar doblemente coordinado. 31. M IC. A. Ribeiro, Piló y col determinaron flavonoides en Trixis vauthieri con actividad. UI. tripanocida. Y esto justificaría la presencia de flavonoides en la familia Asteraceae y. BI. O. Q. sobre todo en Trixis cacalioides. 57. Y. En el análisis químico que se realizó a partes aéreas de Trixis divaricata que. AC I. A. encontró, en el extracto etanólico, flavonoides y taninos con actividad antiulcerosa. 58. RM. En el ensayo de Bornträger se obtuvo una gran intensidad de coloración en el. FA. extracto Etanólico. Esto indica que las quinonas presentes en Trixis cacalioides, son. DE. de naturaleza de mediana polaridad, considerando a las antraquinonas y. TE CA. naftoquinonas, como constituyentes principales. Al estado libre, los derivados. BI BL IO. quinónicos son prácticamente insolubles en agua y solubles en disolventes orgánicos. La presencia de quinonas puede estar puesta de manifiesto mediante el empleo de reacciones coloreadas, entre las que destaca la reacción de Bornträger. Esta diferencia pudiera explicarse, principalmente por la desigualdad de polaridad del etanol 70º respecto al agua; debido a que el etanol 70º tiene mayor selectividad extractiva que el agua o a que en este extracto acuoso, las concentraciones presentes de dichos metabolitos no fueron suficientes para ser identificarlas. 31, 35. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La principal reacción de identificación de quinonas es la de Bornträger, Esta reacción consiste en agregar un reactivo alcalino como amoníaco, solución de hidróxido de sodio o de potasio directamente a la droga en polvo o a un extracto y se basa en la coloración roja que dan los derivados antraquinónicos en medio alcalino; la aparición de una coloración anaranjada o roja indicará la presencia de agliconas libres. A. oxidadas y la intensidad del color será proporcional a la concentración de principios. UI. M IC. activos. 59. O. Q. La reacción de Bornträger, produce una coloración roja cuando el Hidróxido. BI. de sodio reacciona con uno de los grupos hidroxilo, tanto de las antraquinonas como. A. Y. de las naftoquinonas ya que la coloración depende de la cantidad de electrones. RM. AC I. deslocalizados en movimiento. 35. FA. Los procedimientos para el aislamiento de estas sustancias dependen del tipo. DE. de núcleo de interés. Por su color amarillo a violeta, contribuyen a la pigmentación de. TE CA. numerosos vegetales inferiores como algas, líquenes, y plantas superiores. Las plantas que contienen estos compuestos son especies vegetales que pueden utilizarse como. BI BL IO. laxantes o como purgantes según las dosis administradas. 60 Para la identificación de los aminoácidos, se empleó el ensayo de Ninhidrina.. La ninhidrina es un poderoso agente reactivo, reacciona con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8; y esta ninhidrina reducida formada reacciona con una molécula de ninhidrina no reducida y con el amoniaco resultante de la desaminación para formar un compuesto complejo, dando una coloración que varía de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado púrpura de Ruhemann) se. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. estabiliza por resonancia, la coloración producida por la ninhidrina es independiente de la coloración original del aminoácido. El átomo de carbono de un carbonilo tiene una carga positiva parcial, por lo que el C central de un 1, 2, 3 – tricarbonilo es menos estable y más electrofílico que una cetona simple. 61, 62 En la experiencia se encontró que los extractos etanólicos de hojas y flores. M IC. A. resultaron positivos para el ensayo de identificación de aminoácidos con la. UI. ninhidrina. Los aminoácidos libres constituyen el grupo de los aminoácidos no. O. Q. proteicos. Éstos se caracterizan por ser de mediana a elevada polaridad; debido a que. BI. poseen los grupos – amino y carboxílico; los cuales le confieren una polaridad. AC I. A. Y. relativa; lo que explicaría su presencia en este extracto. 35. RM. Las saponinas poseen propiedades tensoactivas, que constituyen un amplio. FA. grupo de heterósidos muy frecuentes en los vegetales, se disuelven en agua formando. DE. disoluciones espumosas. En plantas se encuentran en forma de mezclas complejas,. TE CA. poseen fuerte polaridad, relativa fragilidad y muy pequeñas diferencias estructurales de masa molecular elevada, difícil de obtener en forma pura, difícilmente cristalizan,. BI BL IO. son higroscópicas y raramente se obtienen puntos de fusión neta y sin descomposición. Son solubles en agua y por lo tanto se pueden extraer generalmente a ebullición, sin embargo se prefiere extraerlos en medio alcohólico (metanol o etanol), seguido de una partición con n-butanol y precipitarlos posteriormente con extracciones de éter dietílico. La prueba de la espuma fue empleada y se hallaron saponinas en los extractos etanólicos de tallos y hojas y en el extracto acuoso de raíces. 47. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El ensayo para identificar los azúcares reductores resultó positiva para el extracto etanólico y acuoso (en las partes: raíces, tallos, hojas y flores). Esta situación está más que justificada porque dichos azúcares se caracterizan por ser de naturaleza altamente polar, debido al marcado número de grupos funcionales hidroxilo (– OH) que poseen. Éstos, según su estructura de Fisher (forma abierta) poseen un grupo. A. carbonilo en el primer o segundo carbono o según la cíclica, un Carbono anomérico,. UI. M IC. el cual es altamente reactivo. 32, 35. O. Q. En el ensayo se emplearon reactivos diferentes, el llamado Fehling A, que es. BI. una solución acuosa de sulfato de cobre (II) y el Fehling B, que contiene hidróxido de. A. Y. sodio y tartrato de sodio y potasio; la función de este último es formar un quelato con. AC I. el Cu2+ y evitar que este ion sea precipitado por los iones hidróxido. Al mezclarlos, se. RM. genera el tartrato de cobre (II), éste va a reaccionar con la forma abierta del azúcar. FA. reductor, específicamente con el grupo aldehído (que en las 2-hidroxicetonas, puede. DE. producirse por una tautomería). Como productos se va a llevar a la oxidación del. TE CA. grupo aldehído, hacia el carboxílico correspondiente y un metal con su mínimo estado. BI BL IO. positivo de oxidación (Cu1+). Esta peculiar forma del metal se caracteriza por presentar un color rojo ladrillo, característico de una reacción positiva para dicho ensayo. 32, 35. De estos resultados podemos mencionar que en todos los órganos estudiados existen, casi por igual, los mismos fitoconstituyentes. Por lo que habría que realizar un estudio más profundo; es decir, cuantificar los fitoconstituyentes de cada órgano para determinar con exactitud las diferencias reales existentes.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.- CONCLUSIÓN. -. La especie de Trixis cacalioides procedente del Cerro Campana de la provincia. de. Trujillo,. región. La. libertad. presenta. los. siguientes. fitoconstituyentes en las raíces, tallos, hojas y flores: alcaloides, triterpenos y. M IC. A. esteroides, compuestos fenólicos, flavonoides, antocianidinas, quinonas y azúcares reductores; cardenólidos y taninos en las raíces, tallos y flores;. BI BL IO. TE CA. DE. FA. RM. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. saponinas en raíces, tallos y hojas; y aminoácidos en hojas y flores.. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. VERA, A. Estudio de Plantas Medicinales en el Municipio de Cuetzalan. La Etnobotánica en la Salud revista en Internet2003. Enero. accesado 14 de abril de. 2011.. Disponible. en:. http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/documentos/laec/vera_d_aa/capitulo2.pdf. “maca”.base 14. de. datos. abril. de. en. línea.. 2011.. Perú:. SisBib-. Disponible. en:. O. UNMSM.2006.accesado. de. UI. chacón. Q. peruvianum. M IC. A. 2. AYAMBO, L. Optimización del proceso de extracción etanólica de Lepidium. Y. BI. http://www.cybertesis.edu.pe/sdx/sisbib/notice.xsp?id=sisbib.2006.ayambo_sl|TH. AC I. A. .1&qid=pcd-. RM. q&base=documents&dn=1&id_doc=sisbib.2006.ayambo_sl&num=&query=plant. FA. as medicinales&isid=sisbib.2006.ayambo_sl|TH.1&idcorreo=@@@@@. DE. 3. RIOS, K. RIQUEZ, I. Determinación del recuento microbiano de productos de la. método. TE CA. maca (Lepidium peruvianum) utilizando placas petrifilm y su comparación con el convencional.base 14. datos de. abril. en. línea. de. Perú:. 2011.. SisBibDisponible. BI BL IO. UNMSM.2007.accesado. de. en:http://www.cybertesis.edu.pe/sdx/sisbib/notice.xsp?id=sisbib.2007.riquez_ai|T H.3&qid=pcd-. q&base=documents&dn=1&id_doc=sisbib.2007.riquez_ai&num=&query=planta s medicinales&isid=sisbib.2007.riquez_ai|TH.3&idcorreo=@@@@@ 4. DEL VALLE, D. “Preparación del ácido pipitazóico a partir de la raíz de Trixis cacalioides”.Catálogo de Plantas Medicinales estudiadas en la facultad de farmacia y Bioquímica de la UNMSM.base de datos en línea. Perú: SisBib-. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.