Efecto del liofilizado de vaccinium myrtillus sobre los niveles de malondialdehido en membranas hepatociticas de rattus norvergicus var albinus”

Texto completo

(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. O. Q U. IM. IC A. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. BI. “Efecto del liofilizado de Vaccinium myrtillus sobre los niveles de. AC IA. Y. malondialdehido en membranas hepatociticas de Rattus norvergicus var albinus”. FA. R M. Tesis II. de. C. A. D E. Para optar el Grado Académico. BI B. LI. O. TE. BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA. AUTORAS: -. Alcántara Díaz, Nuria Eliana Cabrera Quiroz, Betty Luz Nohely. -. Dr. YbañezJulca Roberto. ASESOR:. Trujillo – Perú 2016. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. A Dios. IC A. Por darnos las virtudes y la fortaleza necesaria para salir siempre. IM. adelante pese a las dificultades y colocarnos en el mejor camino,. O. Q U. iluminando cada paso de nuestras vidas. Por dar vida y salud a todos. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. los seres que amamos y por estar a nuestro lado en todo momento.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A mis padres Jorge y Nelly, a quienes siempre amaré, por guiar cada uno de mis pasos con su dedicación y preocupación, por sus valiosos consejos en momentos difíciles y porque sin su gran apoyo nunca lo hubiese logrado.. Con mucho amor, tu hija. O. A la luz de mi vida, mi hija Luciana, porque a su corta edad me. Q U. IM. IC A. Betty Luz. Y. BI. enseña cada día a valorar lo que tengo, pues llegó a mi vida en el. AC IA. momento menos esperado a darle sentido, ella es la prueba. R M. fehaciente de la bondad infinita de Dios y le estoy muy agradecida.. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. Con inmenso amor, Mamayuz. A mi familia, en especial a mi hermana menor Ney, quien me ayuda cuando la necesito y es junto a mi madre y mi hija otro gran motivo para trabajar en la vida y celebrar los buenos momentos juntas, porque también en los malos tiempos me tiende una mano hermana que siempre agradeceré. Con amor, tu hermana Betty Luz. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A mis padres y hermanos que con su infinito amor me han inculcado valores, con trabajo y dedicación han logrado sacar adelante para ser grande.. BI. O. consejos en cada paso que doy, para llegar a ser exitosa en la. Q U. A mis familiares que con todo cariño me brindan sus sabios. IM. IC A. Con mucho amor, Nuria. AC IA. Y. vida.. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. Con amor, Nuria. A mi hijo que cada día me alegra con sus ocurrencias y a que me impulsa a seguir adelante y a cumplir mis metas . Con amor, mamá. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTO. A nuestros profesores, que constantemente demuestran sus ganas de formarnos como profesionales de éxito, porque reflejan el amor y orgullo que sienten de nuestra carrera. Un enorme agradecimiento a nuestro asesor Dr. Roberto Ybañez Julca, por su dedicación de principio a fin en el desarrollo de la presente investigación, por. IC A. su amistad y porque nos enseñó que todo proyecto emprendido debe realizarse. Las Autoras. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. con pasión y profesionalismo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN. Señores miembros del Jurado Dictaminador:. De conformidad con las Disposiciones Legales y vigentes del. IC A. Reglamento de Grados y Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la. IM. Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a vuestro elevado criterio el. BI. O. Q U. presente informe intitulado:. AC IA. Y. “Efecto del liofilizado de Vaccinium myrtillus sobre los niveles de malondialdehido en membranas hepatociticas de Rattus norvegicus var. FA. R M. albinus”. D E. Sea propicia esta oportunidad para manifestar agradecimiento a nuestra alma. C. A. mater y toda su plana docente, por su meritoria de educadores y por la. BI B. LI. O. TE. formación profesional que nos han brindado por medio de sus enseñanzas.. Dejamos a vuestra consideración Señores Miembros del Jurado, la respectiva calificación del presente informe. Trujillo, Enero de 2016. Las Autoras.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO DICTAMINADOR. Dr. Francisco Abanto Zamora. IC A. ____________________________. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. PRESIDENTE. D E. FA. R M. Dr. Iván Quispe Díaz. MIEMBRO. BI B. LI. O. TE. C. A. ____________________________. Dr. Roberto Ybañez Julca ____________________________ MIEMBRO. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE. Resumen ............................................................................................................................ Ii. Introducción .............................................................................................................. 3. O. Q U. I.. IM. IC A. Abstract ............................................................................................................................. IIii. Material y método ................................................................................................ 12. III.. Resultados............................................................................................................ 21. IV.. Discusión ............................................................................................................. 24. V.. Conclusiones........................................................................................................ 31. VI.. Referencias Bibliográficas ................................................................................... 32. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. II.. Anexos ............................................................................................................................ 38. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. En la presente investigación se determinó el efecto del liofilizado de Vaccinium myrtillus sobre los niveles de malondialdehido en membranas hepatociticas de Rattus norvegicus var albinus. Se utilizaron 24 ratas albinas hembras, de 2 a 3 meses de edad, cuyos pesos estuvieron comprendidos entre. IM. IC A. 200 a 250 g y distribuidos al azar en grupos de trabajo; control, patrón y. Q U. problema 1 y problema 2. Se le administró vía oral al grupo control NaCl. BI. O. 0.9%, al grupo patrón, fluoxetina 25 mg/kg y a los grupo problema 1 y 2,. Y. liofilizado de Vaccinium myrtillus 40 mg/kg y 80 mg/kg respectivamente, por. AC IA. un periodo de tres semanas, se procedió a sacrificarlas y extraer las muestras. R M. hepáticas (hígado) que sirvieron para la determinación del efecto sobre la. FA. lipoperoxidación mediante los niveles de malondialdehido usando el método. D E. colorimétrico de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) a 532 nm. TE. C. A. de longitud de onda. Se concluye que el extracto de Vaccinium myrtillus en. O. dosis de 40 mg/kg y80mg/kg logró reducir significativamente los niveles de. BI B. LI. malondialdehido en membranas hepatociticas de Rattus norvegicus var albinus (p≤ 0.05).. Palabras Clave: Vaccinium myrtillus, peroxidacion lipídica, fluoxetina.. ~i~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. In this research was determinate the effect of the lyophilized of Vaccinium myrtillus on levels of malondialdehyde in hepatocyte membranes Rattus norvegicus var albinus is determined. 24 female albino rats, were used 2 to 3. IC A. months old, whose weights were between 200 to 250 g and randomly. IM. distributed in groups previously work; control, standard problem and problems. Q U. 1 and 2. You will be given orally at 0.9% NaCl control group, the group. BI. O. pattern, fluoxetine 25 mg / kg and group 1 and 2 problem, Vaccinium myrtillus. Y. lyophilized 40 mg / kg and 80 mg / kg respectively, for a period of three weeks,. AC IA. sacrifice and proceeded to extract the liver samples (liver) that served to. R M. determine the effect on lipid peroxidation malondialdehyde levels by using the. FA. colorimetric method of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS ) at 532. D E. nm wavelength. It is concluded that the extract of Vaccinium myrtillus in. TE. C. A. doses of 40 mg / kg and 80 mg / kg achieved significantly lower levels of. LI. O. malondialdehyde in hepatocyte membranes Rattus norvegicus var albinus (p ≤. BI B. 0.05).. Keywords: Vaccinium myrtillus, lipid peroxidation, fluoxetine.. ~ ii ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN. El hígado es el segundo órgano humano más grande después de la piel y desempeña innumerables funciones vitales a nivel metabólico, vascular, inmunológico, secretor y excretor 1.. El tejido hepático es un tejido estable. Presenta una gran capacidad de regeneración en respuesta a estímulos externos, como lesiones o procesos. IM. IC A. tumorales. Si hablamos de histología hepática debemos tomar en cuenta por. Q U. separado al parénquima hepático (Placas epiteliales de hepatocitos), el estroma. BI. O. hepático (el hígado se recubre de una delgada capa capsular [Glisson], vasos. Y. sanguíneos, linfáticos, conductos biliares), los sinusoides (las placas de. AC IA. hepatocitos se separan entre sí por espacios sinusoidales) y el espacio. R M. perisinusoidal (o espacio de Disse, yace entre hepatocitos y epitelio; aquí existe. D E. FA. el intercambio de substancias, inclusive secreciones endócrinas) 2.. C. A. Debido a que el hígado es tan complejo, es susceptible a una amplia. TE. variedad de trastornos, algunos causados por infecciones como la hepatitis. BI B. LI. O. vírica, el cáncer, y otros por exceso de alcohol o medicamentos 3,4.. Se han notificado efectos secundarios a nivel hepático durante la terapia. con un fármaco muy empleado en el tratamiento de la depresión, denominado Fluoxetina. Estos informes llevaron a un grupo de estudiosos a investigar la implicación de mecanismos de estrés oxidativo en el hígado de una lesión causada por Fluoxetina, considerando que se encuentra demostrado que la exposición al flúor (F-) induce la producción excesiva de radicales libres y afecta el sistema de defensa antioxidante. Estos investigadores observaron que. ~3~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. el tratamiento con Fluoxetina aumenta de los niveles de grupos carbonilo, especies reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) y el contenido de ácido úrico en el hígado. Lo cual produce un incremento del estrés oxidativo 5.. El daño celular que resulta de una producción excesiva de radicales libres de oxigeno (estrés oxidativo), ha tratado de ser explicado como consecuencia de una alteración de la membrana celular a través de la oxidación de los. IC A. residuos de ácidos grasos de la bicapa lipídica, proceso que se ha convenido en. IM. denominar peroxidación lipídica. Se considera que la peroxidación lipídica. O. Q U. ocasiona cambios en la composición química y deterioro en la organización. BI. ultra estructural de las membranas celulares, disminuyendo la fluidez de las. AC IA. Y. mismas, alterando su permeabilidad y e inactivando enzimas y receptores. R M. ligados a la membrana 6.. FA. Los lípidos peroxidados son inestables y se descomponen formando una. D E. compleja serie de compuestos que incluye los compuestos carbonil reactivos. TE. C. A. (aldehídos). La concentración de tales aldehídos se relaciona con el nivel. O. peroxidativo en las muestras biológicas. Estos aldehídos pueden difundir desde. BI B. LI. el lado de su origen (membranas), alcanzar y atacar blancos situados intra y extracelularmente, los cuales están distantes del evento inicial asociado al radical libre 7.. La peroxidación lipídica es un amplificador para los radicales libres iniciales y los aldehídos reactivos generados en estos procesos pueden actuar como “segundos mensajeros tóxicos” en la compleja cadena de reacciones que se inician si los ácidos grasos poliinsaturados de la bicapa de la membrana son convertidos en lípidos hidroperóxidos. Entre los diferentes aldehídos que. ~4~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. pueden formarse en el proceso de peroxidaciónlipídica y que más se han estudiado son: el malondialdehído y el 4-hidroxialquenal, en particular el 4hidroxinenal (HNE) y 4-hidroxihexenal 7.. Dada la relación directa entre la producción de estos aldehídos reactivos y la peroxidación lipídica, la evaluación de la concentración de uno de estos subproductos nos brinda información del nivel del nivel del estrés oxidativo en. IC A. una muestra estudiada. En otros términos estos aldehídos pueden considerarse. a. través. de. la. estimación. Q U. lipídica. cuantitativa. y. O. peroxidacion. IM. como indicadores del estrés oxidativo. Se puede medir el nivel de la. Y. AC IA. preferencia, el malondialdehido 8.. BI. espectrofotométrica de algún subproducto de tal proceso, siendo el de. R M. Recientemente, se ha demostrado que las especies reactivas de oxígeno,. FA. tienen como alternativa la capacidad de activar factores de transcripción. D E. específicos en el hígado, dos de los cuales están identificados y caracterizados:. TE. C. A. el factor nuclear kappa-B y la proteína activante 1. Estos factores pueden viajar. O. al núcleo del hepatocito o de otra célula del hígado, concretamente de la célula. BI B. LI. de Küpffer, y modular su expresión génica 9.. A nivel de los macrófagos hepáticos existen varias posibilidades. Su expresión génica puede llevar a la formación de una gran cantidad de elementos bioactivos: citoquinas, proteasas, lípidos activos, etc., además de factores que pueden modular la generación de especies reactivas de oxígeno por estas células. Es decir, además del mecanismo directo de injuria celular por acción del estrés oxidativo, también se produce una acción mediada por. ~5~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. factores de transcripción que modulan la expresión génica de algunas de las células del hígado 9.. El sistema P450, que biotransforma xenobióticos y fármacos en el hígado, es un mecanismo que opera cíclicamente y en el cual un xenobiótico de tipo XH se biotransforma para sufrir hidroxilación y luego eliminación. Este mecanismo exige electrones, que se introducen por medio de una reductasa y. IM. IC A. del NADPH, que necesita oxígeno 9.. Q U. El daño oxidativo puede ser prevenido por moléculas antioxidantes, las. BI. O. cuales son capaces de donar electrones para estabilizar a los radicales libres y. Y. neutralizar sus efectos dañinos, éstas pueden ser de origen endógeno. .. FA. R M. 10. AC IA. (sintetizados por el organismo) y exógeno (provenientes de fuentes externas). D E. Entre los antioxidantes endógenos, se encuentran: la superóxido dismutasa. C. A. (SOD) que cataliza la dismutación del Oxígeno para dar origen al Peróxido de. TE. hidrogeno que es descompuesto en oxígeno y agua por la catalasa (CT), la. LI. O. glutatión peroxidasa (GHX), dependiente de selenio que cataliza la reducción. BI B. del Peróxido de hidrogeno 10,11,12, 13.. La glutatión (GHS), quien contribuye con la GHX, para reducir el Peróxido de hidrogeno a agua, así mismo neutraliza al OH- cediéndole un electrón. Además recicla antioxidantes como la vitamina C, reduciéndolos para que puedan continuar neutralizando a los radicales libres (RL) 10, 14.. Por otra parte, los antioxidantes exógenos se encuentran en los alimentos naturales, entre estos están las vitaminas A, E y C, los b-carotenos, luteína,. ~6~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. flavonoides, licopenos, el ácido tióico o lipoico, los cofactores (cobre, zinc, manganeso, hierro y selenio) que son necesarios para la actividad del sistema enzimático endógeno y la coenzima Q 10,15.. La vitamina C es un importante antioxidante hidrosoluble que actúa potenciando el efecto de otros antioxidantes tal como sucede con la Vitamina E. La. Vitamina. C es. un. ingrediente. indispensable. en. los. IC A. procesos metabólicos de nuestro cuerpo y entre otros beneficios protege las. Q U. BI. O. disminuye la incidencia de coágulos sanguíneos10.. IM. células del cerebro y la medula espinal, estimula el sistema inmune y. Y. Algunos reportes muestran a la terapia antioxidante como una alternativa. AC IA. para prevenir y contrarrestar a las diversas enfermedades asociadas al estrés. R M. oxidativo, manteniendo el balance entre la formación y neutralización de los. D E. FA. RL 16.. C. A. Los antioxidantes obtenidos a través de la dieta, pueden actuar de dos. TE. formas: primero, previniendo la generación excesiva de RL, evitando así que se celular por efecto del estrés oxidativo. Y segundo, después. LI. O. produzca el daño. BI B. de que se ha producido el daño, los antioxidantes pueden controlar los niveles de RL evitando que el daño continúe avanzando y con ello algunos síntomas de las enfermedades producidas por el efecto del estrés oxidativo pueden disminuir 16.. Actualmente la medicina tradicional, sigue siendo la primera instancia de consulta y tratamiento en gran parte de nuestro país. Sin embargo, hasta el día de hoy se viene utilizando las plantas en base al conocimiento popular y esto. ~7~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. hace que no se aproveche la gran mayoría de las propiedades que contiene dicha planta; como es el caso del Arándano Vaccinium myrtillus. 17,18. El arándano (Vaccinium. sp.) es un frutal perteneciente al género. Vaccinium, de la familia de las Ericáceas y constituyen un grupo de especies ampliamente distribuidas por el Hemisferio Norte, básicamente por Norteamérica, Europa Central y Eurasia, encontrándose también en América. IM. IC A. del Sur, y unas pocas especies en África y Madagascar.19,20. Q U. El arándano puede llegar a soportar temperaturas muy bajas durante el. BI. O. invierno (-30ºC), no presentando grandes riesgos frente a heladas primaverales,. Y. según variedades, exposición y altitud sobre el nivel del mar. Por otro lado,. AC IA. temperaturas altas, superiores a 28-30ºC, pueden afectar negativamente al fruto. R M. al ocasionar arrugamientos y quemaduras. Los vientos fuertes dominantes,. FA. sobre todo en los primeros años de vida de la planta, perjudican el crecimiento. D E. de ésta, provocando daños en el follaje, afectando a la floración y a la. LI. O. TE. éstos.19, 20. C. A. polinización por insectos. También ocasiona la caída de frutos y lesiones en. BI B. Son arbustos que dependiendo de la especie alcanzan alturas que van. desde unos pocos centímetros hasta varios metros, sus hojas son simples y caedizas su forma varia de ovalada a lanceolada, se distribuyen en forma alterna a lo largo de la ramilla, los estomas están ubicados exclusivamente en el envés de las hojas en densidades de hasta 300 por mm cuadrado. El fruto es una baya redondeada, de 7 a 9 mm.de diámetro, de color negro azulado, cubierta de pruina azul y con un ribete en lo alto a modo de coronita, su carne,. ~8~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. de un agradable sabor agridulce, es de color vinoso, y en la parte central contiene diversas simienes.21. El Perú goza de condiciones climáticas adecuadas en las zonas de los valles interandinos, pueden plantarse desde el nivel del mar hasta una altitud los 3,000 msnm, lo que permite que se cultiven más de 30 especies diferentes de arándanos, este fruto puede ser cosechado en varias regiones del Perú.22, 23. IM. IC A. Hoy en día se sabe que el arándano contiene muchos componentes. Q U. biológicamente activos. En la actualidad, la base de datos NAPRALERT de la. BI. O. Universidad de Illinois, y bases de datos fitoquímicas y etnobotánicas, se ha. Y. publicado que existen 120 compuestos con más de 700 actividades biológicas. AC IA. en especies de Vaccinium. Por ejemplo, existen 40 compuestos con 130. R M. efectos asociados con la actividad anticancerígena, 35 compuestos con 108. FA. efectos asociados a la actividad antioxidante y 25 compuestos con 45 efectos. C. A. D E. asociados a la actividad antiinflamatoria.23. TE. Presenta cualidades nutricionales y antioxidantes lo hace un fruto de alto. LI. O. valor medicinal y nutricional. El arándano constituye una de las fuentes más. BI B. importantes de antocianinas y carotenoides, que les confieren su color característico y propiedades antioxidantes.23. Estas frutas son de bajo valor calórico, ricas en vitamina C, potasio, hierro y calcio, necesario para la transmisión y generación del impulso nervioso, para la actividad muscular normal e intervienen en el equilibrio de agua dentro y fuera de la célula. Adicionalmente, constituyen una buena fuente de fibra que mejora el tránsito intestinal. También contiene taninos que le confieren. ~9~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. propiedades astringentes y la mayor propiedad de esta fruta son sus altos contenidos de antocianinas y vitaminas que intervienen en la formación de colágeno, huesos y dientes, glóbulos rojos y favorece la absorción del hierro de los alimentos y la resistencia a las infecciones.24. Vaccinium myrtillus, arándano, posee numerosos antioxidantes, los cuales son capaces de contrarrestar un proceso de estrés oxidativo, que tiene. los flavonoides se mencionan como. IM. flavonoides y ácidos fenólicos,. IC A. lugar en nuestras células. Los compuestos antioxidantes en arándano son. O. Q U. antioxidantes particularmente poderosos. Los pigmentos naturales, junto con. BI. ácidos orgánicos como el oxálico y el málico, son los responsables de su. AC IA. Y. sabor.24. R M. Es así que, con el fin de contribuir en la investigación de esta especie de. FA. arándano, el presente trabajo no solo pretende demostrar la actividad. D E. antioxidante del extracto crudo del fruto del liofilizado de Vaccinium myrtillus. TE. C. A. (arándano) sino aportar con conocimientos que comprueben su efectividad. O. como droga, realizando ensayos in vivo a fin de que en el transcurso del tiempo. BI B. LI. pueda garantizar la elaboración de productos fitoterapéuticos de uso seguro y eficaz para en tratamiento de enfermedades relacionadas con el estrés oxidativo, de tal forma que puedan ser utilizados por la población.. ~ 10 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. De acuerdo a lo expuesto anteriormente, es así que se planteó el siguiente problema:. ¿Cuál es el efecto del liofilizado de Vaccinium myrtillus sobre los niveles de malondialdehido en. membranas hepatociticas de Rattus norvegicus var. albinus?. IC A. 1. HIPÓTESIS. IM. El liofilizado de Vaccinium myrtillus disminuye los niveles de malondialdehido. BI. O. Q U. en membranas hepatociticas de Rattus norvegicus var albinus.. AC IA. Y. 2. OBJETIVOS. Evaluar el efecto del liofilizado de Vaccinium myrtillus sobre los niveles de. FA. -. R M. 2.1. OBJETIVO GENERAL. D E. malondialdehido en membranas hepatocíticas de Rattus norvegicus var. C. A. albinus.. O. Determinar el efecto del liofilizado de Vaccinium myrtillus en dosis de 40. LI. -. TE. 2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS. BI B. mg/Kg sobre los niveles de malondialdehido en membranas hepatociticas de Rattus norvegicus var albinus.. -. Determinar el efecto del liofilizado de Vaccinium myrtillus en dosis de 80 mg/Kg sobre los niveles de malondialdehido en membranas hepatociticas de Rattus norvegicus var albinus.. ~ 11 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II. MATERIAL Y MÉTODO. 1. MATERIAL 1.1.. Animales de experimentación. - Se utilizaron 24 especímenes, Rattus norvegicus var albinus Material botánico. IC A. 1.2.. Q U. Material químico. O. 1.3.. IM. - Se emplearon 3 Kg de frutos frescos y maduros de Vaccinium myrtillus. Vencimiento: Abril 2018. AC IA. Y. BI. - 100 tabletas de Fluoxetina clorhidrato 20 mg; Lote: 104415; Fecha de. FA. R M. - 1 frasco de Ketamina 500mg/10mL solución inyectable, Lote:. A. Material de uso común en el laboratorio. TE. C. 1.4.. D E. 75HL2570; Fecha de Vencimiento: 11/2016. LI. O. 1.5. Equipos. BI B. - Balanza analítica “RADWAG” - Espectrofotómetro “JENWAY” - Centrifuga refrigerada “HETTICH” - Cocina eléctrica - Calculadora CASIO - Cámara de fotos SONY. ~ 12 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.. MÉTODO. 2.1.. Diseño experimental 25 Se realizó un estudio experimental in-vivo siguiendo el diseño clásico o. A1. E1. A2. B1. E2. B2. C1. E3. IC A. con prueba-post prueba y grupo control:. D1. E4. D2. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. C2. Leyenda:. D E. A: Grupo blanco. FA. R M. - Grupos:. A. B: Grupo control. TE. C. C: Grupo problema. LI. O. D: Grupo problema. BI B. - Estímulo: E1: Placebo (suero fisiológico 0,9%) por 6 semanas E2: Fármaco Fluoxetina 25mg/Kg por 3 semanas, luego suero fisiológico 0.9% por 3 semanas. E3: Fármaco Fluoxetina 25mg/Kg por 3 semanas, luego recurso fitoterapéutico Vaccinium myrtillus a dosis de 40mg/Kg. por 3 semanas E4: Fármaco Fluoxetina 25mg/Kg por 3 semanas, luego recurso fitoterapéutico Vaccinium myrtillus a dosis de 80mg/Kg. por 3 semanas.. ~ 13 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.. Recolección e identificación de Vaccinium myrtillus. 2.2.1. Recolección del fruto de Vaccinium myrtillus. Se adquirió 3Kg del fruto de Vaccinium myrtillus obtenidos de la Provincia de Virú, Departamento de La Libertad, luego fueron llevados al laboratorio, se seleccionaron los que se encontraban en mejor estado, seleccionando los que se encuentran sin signos de alteración o. IC A. deterioro, como picaduras, oscurecimiento o rupturas y se lavaron con. Q U. IM. agua corriente.. BI. O. 2.2.2. Identificación de la especie herbolaria de Vaccinium myrtillus. AC IA. Y. (ANEXO 01). R M. La especie herbolaria de Vaccinium myrtillus, se llevó al Herbarium. FA. Truxillense (HUT), Herbariode la Universidad Nacional de Trujillo,. D E. para su identificación.. A. Preparación. y. dosificación. del. liofilizado. de. Vaccinium. TE. C. 2.3.. O. myrtillus26,27. BI B. LI. 2.3.1. Preparación del liofilizado de Vaccinium myrtillus (ANEXO 02). 3Kg de fruto de Vaccinium myrtillus fueron llevados al Instituto de Investigación Tecnológica Agroindustrial (IITA) de la Universidad del Santa donde fue liofilizado, luego se almaceno en frascos herméticos para evitar hidratación del producto seco.. ~ 14 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.3.2. Dosificación y administración del liofilizado de Vaccinium myrtillus. Las dosis utilizadas serán de 40mg/Kg y 80 mg/Kg; considerando que se prepararán soluciones a concentraciones de 5.3 mg/mL y 10.6 mg/mL respectivamente. La administración fue por vía oral, durante 21 días entre 16:00 – 18:00. Dosificación y administración de fluoxetina 28. Q U. IM. 2.4.. IC A. horas, utilizando sondas nasogástricas N° 4.. BI. O. La administración se realizó por vía oral a dosis de 25 mg/kg,. Y. preparando una solución a concentración de 2.5 mg/mL, utilizando. Animales y tratamiento:. FA. 2.5.. R M. AC IA. sondas nasogástricas N° 4 entre 16:00 – 18:00 horas.. D E. 2.5.1. Selección de los especímenes (ANEXO 03). TE. C. A. Para demostrar el efecto del liofilizado de Vaccinium myrtillus sobre. O. los niveles de malondialdehido en Rattus norvegicus var albinus. Se. BI B. LI. escogió al azar 24 especímenes, hembras de 2 meses de edad, aparentemente sanas, con pesos entre 150. - 200 g, criados y. mantenidos en el Bioterio del Instituto Nacional de Salud (INS), en Lima. Todos los especímenes fueron mantenidos en las mismas condiciones ambientales y alimenticias. Se ubicaron en jaulas separadas, distribuidas al azar en cuatro grupos.. ~ 15 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.5.2. Distribución de los especímenes (ANEXO 04). Los especímenes se distribuyeron aleatoriamente en cuatro grupos: un grupo blanco, un grupo control, un grupo problema 1 y un grupo problema 2; cada uno constituido por 6 especímenes, alimentados con comida balanceada obtenida del INS y agua ad libitum durante el tiempo que dure la investigación.. IM. IC A. GRUPO I: Blanco. O. Q U. Estuvo conformado por 6 especímenes a los que se les administró. Y. BI. suero fisiológico por vía oral por 42 días.. R M. AC IA. GRUPO II: Control. FA. Estuvo conformado por 6 especímenes de Rattus norvegicus var. D E. albinus, los cuales recibieron tratamiento con Fluoxetina 25 mg/Kg vía. C. A. oral por 21 días, posteriormente se les administró suero fisiológico por. O. TE. vía oral.. BI B. LI. GRUPO III: Problema 1. Estuvo conformado por 6 especímenes, los cuales r recibieron tratamiento vía oral de Fluoxetina en dosis de 25 mg/Kg por 21 días posteriormente se les administró el liofilizado de Vaccinium myrtillus, a dosis de 40mg/Kg de peso durante 21 días por vía oral.. ~ 16 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. GRUPO IV: Problema 2. Estuvo conformado por 6 especímenes, los cuales recibieron tratamiento vía oral de Fluoxetina en dosis de 25 mg/Kg por 21 días posteriormente se les administró el liofilizado de Vaccinium myrtillus, a dosis de 80mg/Kg de peso durante 21 días por vía oral.. 2.6.. Determinación de malondialdehido en homogeneizado de hígado por. IM. IC A. TBARs ( especies reactivas al ácido tibarbiturico) (ANEXO 05) 29. BI. O. Q U. Fundamento:. Y. La capacidad de peroxidación lipídica de las membranas celulares se. AC IA. determina a través de la cuantificación de los productos de reacción con. R M. el ácido tiobarbitúrico (TBARS) cuyo principal representante es el. FA. malondialdehido (MDA). El malondialdehido (MDA) es un producto. D E. derivado del metabolismo del ácido araquidónico, que se produce por. TE. C. A. hidrólisis del endoperóxido cíclico PGH2 junto al ácido 12-. LI. O. hidroxiheptadecatrienoico.. BI B. La determinación de este metabolito del ácido araquidónico nos indica. de modo indirecto los niveles de peroxidación alcanzados por un tejido y, aunque no es un metabolito específico del catabolismo peroxidativo, sí es un buen indicador del funcionalismo de esta vía oxidativa. Presenta también la ventaja de que puede colorearse al reaccionar con el ácido tiobarbitúrico; lo que nos permite de forma fácil cuantificar sus niveles en cualquier muestra determinando simplemente su absorbancia espectrofotométrica.. ~ 17 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.6.1. Realización de homogeneizado de tejido hepático 29. Los especímenes fueron anestesiados por vía intra-peritoneal con Ketamina 120 mg/kg. Después se realizó la extracción de los hígados y se suspendieron en solución salina fisiológica 0.9% fría (4ºC), para secarlos luego en papel adsorbente. Posteriormente, se pesó todo el órgano en una balanza analítica, para encontrar la. IC A. relación porcentual del peso del hígado/peso del animal. Se pesó 2. IM. a 4 gramos de la muestra, se trituró con tijeras y homogenizó en. O. Q U. tampón fosfato 50 mM pH 7,40. Los homogeneizados se. BI. sometieron a centrifugación (10.000 rpm, 4°C, 10 min). Con el. AC IA. Y. sobrenadante obtenido se realizaron los ensayos de peroxidación. de. FA. 2.6.2. Determinación. R M. lipídica.. malondialdehido. en. membranas. C. A. D E. hepatociticas 29. TE. Se tomó el homogenizado del respectivo órgano y se adicionó 50. BI B. LI. O. uL de buffer fosfato 50 mmol/L, a pH 7,4, y ácido tricloroacético (TCA) al 10%. Se centrifugó a 10000 rpm durante 10 min a 4°C. Se tomó 1 mL del sobrenadante y se le adicionó ácido tiobarbitúrico (TBA) al 0,67%. Esta mezcla se calentó a 100°C durante 30 min y posteriormente se enfrió en baño de hielo. A continuación se añadió N-butanol y piridina (v/v 15:1) para extraer el complejo con el ácido tiobarbitúrico y tras agitar, centrifugar y lavar. se. leyó. la. absorbancia. del. sobrenadante. en. un. espectrofotómetro a 532 nm.. ~ 18 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.6.3. Elaboración de la curva de calibración (ANEXO 06). La curva de calibración se realizó con el método de estándar externo con 1, 1, 3, 3 – tetraetoxipropano de serie, obteniéndose un gráfico y usando la ecuación resultante para los cálculos de malondialdehido (MDA) en nM/mL.. IC A. 3. Análisis estadístico 30. IM. Para determinar si hay diferencia entre los niveles de concentración de. O. Q U. Malondialdehido (MDA) en las diferentes etapas de la investigación se. BI. utilizó el programa estadístico SPSS v19.0 realizando el análisis de varianza. AC IA. Y. (ANOVA).. R M. Para comparar las diferentes etapas de investigación se emplearon pruebas. FA. de comparaciones múltiples, como son la prueba de Tukey y la prueba de. A. D E. Duncan con un valor de significancia del 95%.. O. TE. C. 4. Ética de Investigación 31. BI B. LI. En el siguiente proyecto de investigación se procedió a utilizar Rattus norvegicus var albinus traídas del Instituto Nacional de Salud en donde se cuenta con un ambiente adecuado de crianza para estos animales. Una vez instaladas en el bioterio de la Universidad Nacional de Trujillo en donde se realizó la parte experimental de este proyecto de investigación se trató de darles todas las condiciones óptimas que necesitan para una buena estadía, como por ejemplo unas cómodas jaulas, alimento traído desde el INS que se. ~ 19 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. les daba todos los días y por supuesto el agua que no podía faltar diariamente.. Al administrar tanto el medicamento como el arándano se trabajó por medio de una sonda, en donde se buscó la más delgada posible para que no pueda hacer daño a la paredes de la faringe y esófago del animal, contando con alumnos que estaban adiestrados con este procedimiento para el beneficio. IM. IC A. del espécimen.. Q U. Todos los procesos realizados se hicieron para que se contemplara el menor. BI. O. daño posible del animal siguiendo los datos de Americam Veterinary. Y. Medical Foundation (AVMA) donde se especifica que los animales de. AC IA. laboratorios también deben de ser tratados bien al igual que el resto de los. FA. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. propósito científico.. R M. animales dado que gracias a ellos se va a realizar una investigación con un. ~ 20 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.. TABLA. N°. 1:. RESULTADOS. Comparación. del. efecto. en. la. concentración. de. malondialdehido en homogeneizado de hígado en Rattus norvegicus var albinus entre grupos analizados mediante la prueba ANOVA.. Media cuadrática. Inter-grupos. 2,638. 3. ,879. Intra-grupos. 1,704. 20. Total. 4,343. 23. IC A. gl. F. Sig.. 10,320. ,000. Q U. IM. Suma de cuadrados. O. ANOVA. R M. AC IA. Y. BI. ,085. FA. LEYENDA: gl: Grados de libertad. -. p: Probabilidad. -. p < 0.05: Significativo. -. p > 0.05: No significativo. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. -. ~ 21 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA. N°. 2:. Comparación. del. efecto. en. la. concentración. de. malondialdehido (nM/mL) en homogeneizado de hígado en Rattus norvegicus var albinus entre grupos analizados, mediante prueba de Duncan.. MDA Subconjunto para alfa = 0.05 N 1 ,38917. PROBLEMA_2. 6. ,53267. PROBLEMA_1. 6. CONTROL. 6. Q U. O Y. BI. ,70700 1,26317 ,088. 1,000. R M. Sig.. 2. IM. 6. AC IA. Duncana. BLANCO. IC A. GRUPO. FA. Se muestran las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. a. Usa el tamaño muestral de la media armónica = 6.000.. ~ 22 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A. Fig.1. Nivel de variabilidad de los grupos, en la producción de MDA (nM/mL). BI B. LI. O. TE. C. en membranas hepatocíticas de Rattus norvegicus var albinus. ~ 23 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. La lipoperoxidación es un factor importante en el daño de la membrana celular generando como producto final el malondialdehido (MAD), y éste es útil para determinar niveles de peroxidaciónlipídica 30.. Los beneficios en la salud de ciertas medicinas naturales han sido. IM. IC A. explicados por la habilidad que tienen en prevenir el daño de membranas. O. Q U. celulares por radicales libres al reducir el nivel de peróxidos lipídicos. Estas. Y. BI. medicinas naturales poseen antioxidantes no enzimáticos entre los que tenemos. AC IA. al α tocoferol, β caroteno, carotenoides, flavonoides, taninos y ciertos. R M. micronutrientes (zinc, selenio, etc), compuesto capaces de eliminar las especies. D E. FA. oxígeno reactivos, pues se ubican dentro de la bicapa de fosfolípidos de las. TE. C. A. membranas celulares para protegerla de la peroxidación lipídica 32.. LI. O. La finalidad del presente estudio fue determinar el efecto del lioilizado. BI B. de Vaccinium myrtillus, “arándano”, sobre los niveles de malondialdehido en membranas hepatociticas de Rattus norvegicus var albinus, luego de la inducción de la lipoperoxidación con fluoxetina.. En la Tabla 01, al analizar los resultados, mediante la prueba de ANOVA se pudo establecer que existe diferencia estadística significativa. ~ 24 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. (p=0.000, p<0.05) entre los grupos en estudio, esto significa que los grupos experimentales, son estadísticamente comparables entre sí.. Por otro lado, en la Tabla Nº 2 y anexo 07, se comparan, mediante las pruebas de Tukey y Duncan, los resultados de lipoperoxidación expresados en niveles de malondialdehido (MAD) nM/mLen el homogeneizado de hígado de. IC A. Rattus norvegicus var albinus, entre los grupos blanco, control, problema 1 y. Q U. IM. problema 2, tanto a dosis de 40mg/Kg como a dosis de 80mg/Kg de peso. BI. O. corporal de liofilizado del fruto de Vaccinium myrtillus. En base a estos. AC IA. Y. resultados se puede evidenciar que fluoxetina, en los especímenes que. R M. corresponden al grupo control generaron mayor inducción de lipoperoxidación,. FA. expresados en un incremento significativo de los niveles de MAD (p < 0.05).. A. D E. Investigaciones implicadas en mecanismos de estrés oxidativo en el hígado. TE. C. de una lesión causada por fluoxetina, consideran que la exposición al flúor (F-). BI B. LI. O. induce la producción excesiva de radicales libres y afecta el sistema de defensa antioxidante. Estos investigadores observaron que el tratamiento con fluoxetina aumenta de los niveles de grupos carbonilo, especies reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) y el contenido de ácido úrico en el hígado, produciendo un incremento del estrés oxidativo 33.. Al comparar las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos, se observa que existe igualdad entre los grupos blanco, problema. ~ 25 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1 y problema 2 en contraste con el grupo control. Asimismo, se encuentra diferencia entre los grupos problema, siendo el grupo problema 2 (dosis de 80mg/Kg), el que produjo bajos niveles de malondialdehído con respecto al grupo problema 1. Presentándose que estadísticamente estos grupos tienen diferencia significativa (p≤00.05). Este resultado demuestra un efecto. IC A. antioxidante dosis- dependiente por parte del Vaccinium myrtillus, a favor del. Q U. IM. grupo al que se le administró mayor dosis de liofilizado. Estos resultados se. BI. O. corroboran al observar la figura 1, referente al gráfico box plot, donde se. AC IA. Y. comparan los niveles de malondialdehido con respecto a los grupos en estudio. R M. (blanco, control, problema 1 y problema 2), aquí se puede observar que la. FA. distribución es superior para el grupo control, pues generó mayor. D E. lipoperoxidación y por ende concentraciones altas de MDA. Caso contrario. TE. C. A. ocurre con los grupos problema, los cuales presentan menor distribución y. BI B. LI. O. medianas, siendo el grupo problema 2 (80mg/Kg) el que presentó valores menores de MDA con una significancia del 95%.. El hecho de que Vaccinium myrtillus haya logrado reducir los niveles de MDA en el problema con dosis de 80mg/kg se debe a la mayor cantidad de antioxidantes que posee. Wu-yang Huangetal, en su trabajo denominado “Estudio de la capacidad antioxidante y la composición fenólica de arándano, mora y fresa en Nanjing”, encontraron que, Vaccinium myrtillus exhibió la. ~ 26 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. capacidad antioxidante total más fuerte, también tuvo el mayor contenido de fenoles totales (TPC, 9,44 mg de ácido gálico / g DW), el contenido total de flavonoides (TFC, 36,08 mg rutina / g DW), y el contenido total antocianidina (TAC, 24,38 mg de catequina / g DW). Un análisis preliminar mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) mostró que los arándanos,. IC A. moras, y las muestras de fresas probadas contenían una variedad de ácidos. Q U. IM. fenólicos (incluyendo el ácido gálico, ácido protocatéquico, ácido p-. BI. O. hidroxibenzoico, ácido vanílico, ácido cafeico, p-cumárico ácido, ácido. AC IA. Y. ferúlico, ácido elágico y ácido cinámico) y varios tipos de flavonoides. R M. (flavona: luteolina; flavonoles: rutin, miricetina, quercetrina, y la quercetina;. FA. flavanoles: galocatequina, epigalocatequina, catequina y galato de catequina;. D E. antocianidinas: malvidina-3 -galactoside, malvidina-3-glucósido y cianidina).. TE. C. A. En particular, los arándanos tenían altos niveles de proantocianidinas y. LI. O. antocianidinas, que podrían ser responsables de sus actividades antioxidantes. BI B. fuertes 34.. Todo lo anterior se refuerza por un estudio realizado por Çoban J. denominado “Efecto arándano sobre lípidos y el estrés oxidativo en el suero, el hígado y aorta de los conejillos de indias alimentados con una dieta alta en colesterol”. En el que concluyen que arándano reduce el estrés oxidativo y el colesterol Accu-formulación en la aorta y el hígado de los conejillos de indias.. ~ 27 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. De igual manera Bingul I. en su estudio “Efecto de pretratamiento de arándanosobre lesiones cirróticos,preneoplásicas y el estrés oxidativo en el hígado de ratas tratadas con dietilnitrosamina.” Indican que arándano es eficaz en la disminución de desarrollo de cirrosis hepática inducida por DEN-y lesiones preneoplásicas al actuar como un antioxidante (eliminador de. IC A. radicales) en sí, sin afectar a las actividades y expresiones de ARNm de las. Q U. IM. enzimas antioxidantes 35,36.. Y. en su trabajo denominado “Efecto. AC IA. la Universidad Forestal de Beijing,. BI. O. Jian Sheng et al, de la Facultad de Ciencias Biológicas y Tecnología de. R M. protector de las antocianinas de arándano en la lesión hepática inducida por. D E. FA. tetracloruro de carbono (CCL4)”, investigaron los efectos protectores de. C. A. arándanos antocianinas contra la lesión hepática aguda, encontrando que a. O. TE. diferentes concentraciones de antocianinas de arándanos protegen las células. BI B. LI. del hígado contra la lesión inducida por CCl4 de una manera dependiente de la dosis, pueden disminuir el ciclo celular en la fase G1, además, mostró un efecto protector contra la apoptosis y necrosis. Estos resultados apoyan los efectos protectores del extracto de arándano contra la lesión hepática aguda 37.. İlknur Bingü et al, de la Facutad de Medicina de la Universidad de Estambul, en su trabajo denominado “Efecto de arándanos en el tratamiento previo sobre el estrés oxidativo inducido dietilnitrosamina y lesión hepática en. ~ 28 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ratas”, encontraron que el tratamiento previo con dosis altas de BB reduce cambios apoptóticos, necróticos y proliferativos, asimismo disminuye los niveles de peroxidación lipídica, oxidación de proteínas y nitrotirosina hepáticas, junto con una mayor actividad GST 38.. Lin Shi et al, del Hospital General del Comando Militar de Shenyang,. IM. IC A. China, en su trabajo denominado “Antocianinas del arándano mejoran el daño. Q U. hepático inducida por ciclofosfamida en ratas mediante la reducción de la. BI. O. inflamación y apoptosis”, inyectaron ciclofosfamida (CTX) por vía. AC IA. Y. intraperitoneal en ratas para inducir toxicidad en el hígado. Administraron. R M. antocianinas de arándano (BA) en dosis de 20 y 80 mg / kg / día durante 7 días. D E. FA. (Ig), tanto antes como después de que se administraran CTX. Fue evaluada la. C. A. histopatología hepática, actividades enzimáticas hepáticas en suero, citoquinas. O. TE. y parámetros apoptóticos. Donde concluyen que BA tiene un efecto protector. BI B. LI. contra daño hepático inducido por CTX en ratas 39.. Con lo expuesto anteriormente se comprueba la actividad antioxidante del liofilizado del fruto de Vaccinium myrtillus (arándano), ante posibles acumulaciones. del. metabolito. activo. de. fluoxetina. que. genera. lipoperoxidación en hígado, dado es un fármaco implicado en el tratamiento de la depresión que presenta una alta prevalencia en el ámbito de la atención primaria, con un impacto social y sobre la funcionalidad física, superior a otras. ~ 29 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. enfermedades. Es así que se recomienda el consumo de arándanos para mejorar la calidad de vida en pacientes con problemas de salud mental y que son. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. IC A. tratados con antidepresivos 40.. ~ 30 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. - Vaccinium. myrtillus. significativamente. CONCLUSIONES. en. los. dosis. niveles. de de. 40mg/Kg. y. 80mg/Kg. malondialdehido. en. reduce. membranas. hepatociticas de Rattus norvegicus var albinus, siendo la dosis de 80 mg/Kg. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. IC A. la que presento mayor reducción de lipoperoxidación. (p≤0.05).. ~ 31 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. 1.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. MITRA V. Metabolic functions of the liver. Anaesthesia and Intensive Care Medicine. 2009; 10(7):334–335.. 2.. DELATTREE J, AVISSE C, FLAMENT J. Surgical anatomy and embriology: Anatomic basis of hepatic surgery. SurgClin NA 2000; 80(1):345-50 REID A. Nonalcoholic steatohepatitis. Gastroenterol 2001; 121 (3):. IC A. 3.. Q U. OKUDA M et al. Mitochondrial injury, oxidative stress, and. O. 4.. IM. 710- 23. BI. antioxidant gene expression are induced by hepatitis C virus core. INKIELEWICZ-STEPNIAK I. Impacto de la fluoxetina en el daño. R M. 5.. AC IA. Y. protein. Gastroenterol 2002; 122 (2): 366-75.. ROMERO F. Lipid Peroxidation Products and Antioxidants in Human. D E. 6.. FA. hepático en ratas. Pharmacol Rep. 2011; 63:441-7.. C. ESTERBAUER H. Chemistry and Biochemistry of 4-Hidroxinonenal,. TE. 7.. A. Disease. Environmental Health Perspectives. 1998; 106 (5): 1229-1933.. LI. O. Malondialdehyde and Related Aldehydes. Free Rad. Biol & Med.1991;. BI B. 11:81-128.. 8.. VALENZUELA A. The Biological Significance of Malondialdehyde. Determination in tha Assessment of Tissue Oxidative Strees. Life Sciences. 1991; 48: 301-309.. 9.. VIDELA. L.. Cytokines,. oxidative. stress. and. pathogenesis. Medwave 2003; 3(1):31-96 10.. ADAM-VIZI V. Production of reactive oxygen species in brain mitochondria: Contribution by electron transport chain and non-electron. ~ 32 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. transport chain sources, Antioxidants and Redox Signaling. 2005; 7(8),1140-1149. 11.. MARKESBERY W. Oxidative stress hypothesis in Alzheimer’s disease. Free radical Biology & Medicine. 1997; (23)1: 134-147.. 12.. AGUDO A, CABRERA L, AMIANO P. et al. Fruit and vegetable intakes, dietary antioxidant nutrients, and total mortality in spanish adults: findings from the spanish cohort of the European Prospective. IM. IC A. Investigation into Cancer and Nutrition [EPIC-Spain]. American. CISNEROS P, PUPO B, CESPEDES M. Enzimas que participan como. BI. O. 13.. Q U. Journal Clinical Nutrition. 2007; 85 (6): 1634-1642.. Y. barreras fisiológicas para eliminar los radicales libres: II. Glutation. AC IA. peroxidasa. Revista cubana Investigacion Biomedica. 1997; 16(1): 10-. ELEJALDE J. Oxidación, entre la vida y la enfermedad, Anales de. FA. 14.. R M. 15.. D E. Medicina Interna. 2001; 18 (1):1-4.. A. HALLIWELL B. Antioxidants in humans health and disease, Annual. TE. C. 15.. LI. XING D. et al. Estrogen and mechanisms of vascular protection.. BI B. 16.. O. Reviews. 1996; 16: 33-50.. ArteriosclerThrombVascBiol 2009;29:289-295.. 17.. SHARMA H. et al. SudarshanKriya practitioners exhibit better antioxidant status and lower blood lactate levels. BiolPsychol 2003;63:281-291.. 18.. GARCIA R. Orientaciones para el cultivo de arándano. [Online] ministerio de medio ambiente y medio rural y marino. [Citado el 20 de. ~ 33 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. enero. de. 2016].. Disponible. en:. http://www.naviaporcia.com/images/documentos/documento_173.pdf 19.. OFICINA COMERCIAL DEL PERÚ. Perfil de mercado de arándanos en los Estados Unidos de América. [Citado el 20 de enro de 2016]. Disponible. en:. http://www.siicex.gob.pe/siicex/documentosportal/alertas/documento/d oc/679028340radE80FF.pdf. IC A. AREX. Perfil comercial de arándano deshidratado. [Online]. [Citado el de. enero. de. 2016].. Disponible. en:. Q U. 23. IM. 20.. Y. MERCIAL%20ARANDANOS.pdf. BI. O. http://www.sierraexportadora.gob.pe/perfil_comercial/PERFIL%20CO. BENAVIDES L. Estudio de pre factibilidad para la producción y. AC IA. 21.. R M. comercialización de arándanos, en condiciones de valles andinos.. FA. [Online]. [Citado el. 23 de enero de 2016]. Disponible en:. D E. http://www.sierraexportadora.gob.pe/berries/factibilidad/arandanos. A. TAVERA M. Estudio para la selección de 10 nuevos productos, su. TE. C. 22.. O. adaptabilidad al territorio nacional, su viabilidad en Europa e identificar. BI B. LI. potenciales clientes. [Online] Sector Agricultura y Agroindustria. [Citado. el. 23. de. enero. de. 2016].. Disponible. en:. http://www.mincetur.gob.pe/Comercio/ueperu/licitacion/pdfs/Informes/ 104.pdf 23.. CUNNINGHAM. D.. Constituyentes. fitoquímicos. del. arándano. americano y sus beneficios para la salud. [Revista Online]. [Citado el 23. de. enero. de. 2016].. Disponible. en:. ~ 34 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. http://www.fitoterapia.net/revista/pdf/0516%20RDF%205.1%20ARANDANO.pdf 24.. PERALTA K. 2003. Las Plantas al Servicio de la Salud y la Belleza, II Congreso. Internacional. de. Medicinas. Tradicionales,. Área. Farmacognosia. Perú. 25.. RODRIGO E. 2010. Manual de metodología de la Investigación Científica. Universidad Nacional de Trujillo. Perú. pp:115. IC A. SHI L.Et Al. Blueberry anthocyanins ameliorate cyclophosphamide-. IM. 26.. Q U. induced liver damage in rats by reducing inflammation and apoptosis.. ZHAO M. Et.Al. Blueberry anthocyanins extract inhibits acrylamide. Y. 27.. BI. O. Journal of functional foods.China.2014. (11). 71–81. AC IA. induced diverse toxicity in mice by preventing oxidative stress and. R M. cytochrome P450 2E1 activation. Journal of functional foods. China. 2. IWONA S.Et. Al. Impact of fluoxetine on liver damage in rats.. D E. 28.. FA. 0 1 5.(14) .95–101. GONZÁLES M, FERNÁNDEZ I. Y BAUZA J. Indicadores de estrés. O. 29.. TE. C. A. Pharmacological Reports.Polish.2011, 63,441-447.. BI B. LI. oxidativo en cerebros de ratas viejas con déficit cognitivo. Biotecnología aplicada. 2007; 24:145-150.. 30.. DURSUN K. Antiulcer activity of fluvoxamine in rats and its effect on oxidant and antioxidant parameters in stomach tissue. Gastroenterology 2009; 9: 36. 31.. Report of the AVMA Panel on Eutanasia. J AVMA, 2013; 212(5): 669696.. [Citado. 23. de. enero. de. 2016].. Disponible. en:. https://www.avma.org/KB/Policies/Documents/euthanasia.pdf. ~ 35 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 32.. Howard LR, Clark JR, Brownmiller C. Antioxidant capacity and phenolic content in blueberries as affected by genotype and growing season. J Sci Food Agric.2003;83(12):1238–1247. [Citado 20 de enero de 216]. Disponible en: doi: 10.1002/jsfa.1532.. 33.. INKIELEWICZ I. Impacto de la fluoxetina en el daño hepático en ratas. Pharmacol Rep. 2011; 63:441-7.. 34.. HUANG, W., ZHANG, H., LIU, W., & LI, C. Survey of antioxidant. IM. IC A. capacity and phenolic composition of blueberry, blackberry, and. Q U. strawberry in Nanjing .Journal of Zhejiang University. Science. (2012);. BI. O. 13(2): 94–102. [Citado 23 de enero de 2016]. Disponible en:. Y. http://doi.org/10.1631/jzus.B1100137. ÇOBAN J, EVRAN B, ÖZKAN F, ÇEVIK A, DOĞRU-ABBASOĞLU. AC IA. 35.. R M. S, UYSAL M.Effect of blueberry feeding on lipids and oxidative stress. FA. in theserum, liver and aorta of guinea pigsfed on a high-cholesterol diet.. D E. Biosci Biotechnol Biochem. 2013;77(2):389-91. Epub 2013 Feb 7.. A. BINGÜL İ, BAŞARAN-KÜÇÜKGERGIN C, AYDIN AF, SOLUK-. C. 36.. O. TE. TEKKEŞIN M, OLGAÇ V, DOĞRU-ABBASOĞLU S, UYSAL.. BI B. LI. Effect of blueberry pretreatment on diethylnitrosamine-induced oxidative stress and liver injury in rats. Environ Toxicol Pharmacol. 2013 Sep;36(2):529-38. doi: 10.1016/j.etap.2013.05.014. Epub 2013 Jun 10.. 37.. CHEN J, ZHAO Y, TAO X, ZHANG M, SUN A. Protective effect of blueberry anthocyanins in a CCL4-induced liver cell model.LWT Food Science and Technology. Volume 60, Issue 2, Part 2, March 2015,. ~ 36 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Pages 1105–1112. [Citado 23 de enero de 2016]. Disponible en: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0023643814006318 38.. BINGUL ˙I, BASARAN-K U¸ UKGERGIN C et al. Effect of blueberry pretreatment on diethylnitrosamine-induced oxidative stress and liver injury in rats, Environmental Toxicology and Pharmacology. Volume 36, Issue 2, September 2013, Pages 529–538 [Citado 20 de enero de 2016]. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.etap.2013.05.014 Y,. YAN. Tetal.. liver. anthocyanins. damage. in. rats. ameliorate. by. reducing. Q U. cyclophosphamide-induced. Blueberry. IC A. TAN. IM. 39.. BI. O. inflammation and apoptosis. Journal of Functional Foods. Volume 11,. Y. November 2014, Pages 71–81. [Citado 20 de enero de 2016].. AC IA. Disponible. en:. Jusset T. Tratamiento farmacológico de la depresión mayor. Rev. FA. 40.. R M. http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1756464614002369. D E. Cubana Med Gen Integr 3.2002. [Citado 23 de enero de 2016]. en:. TE. C. A. Disponible. BI B. LI. O. http://www.bvs.sld.cu/revistas/mgi/vol18_3_02/mgi09302.htm. ~ 37 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) BI. O. Q U. IM. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. ANEXOS. ~ 38 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 01. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. IC A. IDENTIFICACIÓN DE LA PLANTA DE Vaccinium myrtillus. ~ 39 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 02. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. IC A. LIOFILIZADO DE Vaccinium myrtillus. ~ 40 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 03. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. IC A. COMPROBANTE DE COMPRA DE Rattus norvegicus var albinus. ~ 41 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 04 DISTRIBUCIÓN DE LOS ESPECÍMENES. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. IC A. GRUPO BLANCO. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. GRUPO CONTROL Y PROBLEMA 2. ~ 42 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(51) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI B. LI. O. TE. C. A. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. IC A. GRUPO PROBLEMA 1. ~ 43 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(52) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ADMINISTRACION DE FLUOXETINA Y ARÁNDANO A Rattus norvergicus var. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. IM. Preparacion de solucion de fluoxetina y liofilizado arándano. IC A. albinus. .. .. D E. Adaptación del espécimen, con el respectivo equipo. cargar las jeringas con las respectivas muestras. BI B. LI. O. TE. C. A. Adaptación completa del equipo. .. .. Colocación de la sonda. Administración de las muestras. Administración vía oral. ~ 44 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(53) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 05 CORRIDO (EXTRACCIÓN DE HÍGADO, Y LECTURA DE LA. Preparar nuestros especímenes. anestesiar a los especímenes con ketamina.. IM. .. hacer a apertura del estómago para extraer el hígado.. D E. FA. R M. AC IA. Y. BI. O. Q U. .. IC A. ABSORBANCIAS). . perfundir el hígado para eliminar algunas partículas extrañas.. pesar la muestra y luego colocar 3 g de hígado en solución salina. BI B. LI. O. TE. C. triturar y filtrar la muestra en un tubo de ensayo.. A. .. .. .. Homogenizar la muestra con buffer fosfato 50 Mm pH 7.4. centrifugar los homogenizados 5000 rpm por 15 minutos.. tomar 450 µl del homogenizado en un nuevo tubo de ensayo.. ~ 45 ~ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.