Introducción al cultivo de tejido en plantas

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(1)I I. t I I. I I. 14'"tl'¿ a,au or. ga*peres üFdrC.H¡qE. ñ hdFdó. AGROPECUARIA DE INVESTIGAC¡ON COLOMBIANA CORPORACION 7 REGIONAL. AL CULTIVODE TEJIDOEN PLANTAS CURSO:INTRODUCCION. I. t I I. I I I I. I. Eiac:Í: :,:íE:u 0 ? :;1. 1996. trFF.. l. il. aRt^. por:C. l. CIMPA Organizado Fecha:22 y 23 de agosto,1996 Dr.LuisLago ¡nvitado: Profesor Visitante Pr¡ncipal Investigador Uno. Regional CORPOICA,.

(2) I. T I. t I I. t I I I I I. t I I I. I. lllrigsgs!úL?tgtlllro ielglqgsnlleDgs I á .Aqri.ultrlraconslillrye|lna ectiridadmfiy impodñnlptlent¡ndr' l¡s econonrlasd¡ hs Paises Ftonónricit Sr¡hFe¡arnltad+sy en algrrnas¡nslanciasconsliluye¡¡ ¡¡¡t;¡t acliuidarJ Arrnqrrees ltna necesid¡rl¡le rli¡-hosFaispsFl incrpntFnlñde l¡ f'roduceiünde alirnrnlopara stt p r o p i ¿s | | h s i s t o n r i al a . prodrtcción d ¡ c t r l t i v o sr l e d i c a d o s. l ; r r . r p o r l ¡ . i ó nc o n l h | l r ár i é n d o televantc¡cr la ¡¡eneración dp ?rpod.lcionesq e élloimFlic;ry por ¡on5rq¡rienlth gpneranión de irt¡r,^scrpor c0Fr-.['todo exFcrl;rrionás. cr?.it]tiÉnloernnónliroV qpfleració¡dc empbos I a [ t r o l e ¡ n o l o q loah e c p n u e v a sy F r c i l a n l c so p o r l u ¡ ¡ d a d F es n e s p e c i apl a r a e l n e i o r a m i e n t o dF imfiorlanleslimilecioncrno sotjr¡o ahhs med¡ánlélos nlélodoscónvencionahsexfjresados d¡ especial la falla dé mátpriel sienlbra. en nor El rol polenciálqur la Biofecnoloofasr ve erpresadoa¡ ¡5pecialen las siquienlesestpras Produrciónde materialfibr¡ d? €nf?rmpdádes oara ler rrsadocomo mal?rialire siembra - P r o p a g a c i ór á n p i d ad e g e n o t i p odse i n l e ré s -Reduccióndel lier¡ps dRcreaciónde una variedad 'ln ]..lanlenimienlo de Germoplasma vilro" -lv'lapeo genomicopara lacililarel procesode selección ' D e s a r r o tdce p l a n l a tl r a n s g é n i c acso n r e s i s t " n c ¡oa l n l e r a n c i a i m p o r l a n l " s plagasy ?slré!; abiótico enfermedades. -Desaflnüode diagnóFlico para la deleccidndp palógenos. jirqnb-lla,_l!-bl-C_!_C_e,!&I.!re4qd.e-F, f¡-5r..d¡¡q-c_ié-n_d-q_rllqt-Stilgr Se con.idera 4uc rs [a hrgc da l¡do Programa de prt'drrcción4o cemilladr' r.producción Por tal ra¡ón se dan algunoselemenlosque deb?nde tenerseen cuenla vegetalir./a Cultlvo_deteiido_rp_¡4¡_!aEl¡minacjón úi Patóqeno-e: I o s F : r ! ó q e n ovr f , l ¡ t a l e s .l a l e , i e o m D n a m á l o d o s h . o n $ o r b a c l . r i ¡ r y v i r u s p t r e d e ns e r !ra¡rnriti.iosd? pl:rnl¡rcp[l¡rmis á phrtas s¡nas $in prFha¡rlo.na !aalarlis f¡fir!ás tesrtltin itfpi:tirdaF:l,rslpjidósntÉri"qtlnr:rticós sÉ encU¿nllat)ahrln:¡:u*'reql¡hresde t|)f¿fl rdarlFsprll lo ql'i rs froaihlarFfohtar pl r¡tns no inlacl¡d3g madlát-rtrlé.¡tic¡r CF eU[ivo "i|r \,'ttfo'dÉ f r r a f i $ l a n r ¡yF l o g t a rs t rc r a c i m i e n c o m cp l a n t a s a n a s tlno loc asFertr¡r¡u¡ aloctafl!l uilor dp rtsodt cl|akluitrqer'till:r]¡ rr'liredr,.ri^fl,Jl(|tt¿thri ?,i l ¿ ¡ r e l ¡ r ¡ c i ¡ d . e n f ¡ i r F d á d Évs p l r q a si , r e l ¡ a h c l ; ! n d i á ' r i r l ! ! pr l t ! r ! t i v o . l p l r i l d ó s F e r a h Eli¡nia¡ri4n qle F¡tóOcn.,"s,adq'tierarrnaqran ¡mFqrlan.i. ¡Frñ pr rr!'rrñnteytadé u!¡!i;ación d e ¡ aB i o l s c n o l o q cí ao m nr j n ¡ v i a d e ' e p r o d l r c ¡ ó n¿ c e l e r á d.ar ? lr i r a l . r i ?dl É ' i i p n r b r a 1 _E9t_elitz-?! ióLrlq L?-$!Fgfrq1! S ¡ l a s l p e ¡ f l r r i et l e l r n a ! e r i avl r 0 e l a lp s l á c o n l e ¡ n i n a dpar r t ) ¡ t o q e , i o so s a ¡ r ó l i l r : rV é s l e e s !,if'nrhr.d^¡tr rn l$pdio d- tullivo. ;rl{tlnoi dp lor a0ntamin:!r:l.rrrei.¡n iinid¿rr¡nle v p||eden m a t a r a l l e l i d +v a l o r o a n ot . r F l a n t e lr , e l a p l a n t a l . á n r l i ; n r l a d e h ' s r + n l a n l ¡ n a n l eds9 s ¡ r n e r f i c i el a l e , rf . r n r 0 h a c l q ¡ i a q\ l h o n q 4 r ,¡ l l e r l e n c p r r . l i n i r r r ¡ ; l ¡p- o r r j ! e | | l i r a { : i r i n d(' l<] s u p á r f ¡ c idô lr n J l e r i a i v a o ? tcaol n u n a g e n t ee s l € r i l i ; a d c, ,rr F r o ¡ , ¡ r r !.

(3) lT-:. t t t I I I. t I I I I I I. t I. t t I I. t. -.,,- r 8lF,f,Jü'; --[, ,. .. ''. , -*. - -!Éaár. dP ta qttperftri?s¡ :tplic;rnnorm.tlnlpñtrrlrr¡nt¡ l0 a 15 minuto$ l.os tg.n!?s o,ilpriliz¡dnres q?ic collrlieiortÉ.s y fl malarialvegelal asÉDl¡cásla sohrciónesterilzadorafs lup{o ?lirrrinarla lavadnll ó.4 vecp( drrrantf5 minrtloseadavcz por aqilaciónell ¡ot's .lesliltdr rFléril Fl |tuado eri nIrV irlrporlantppara eliminarel exceso d?l aqanle rsl¡rilizador el cual guede ínhiblr €l crecimieniode la planta e| Eianol( alcoholl nomtinrJr la st-|f'crli.i.par;rFfrnhdr hanl.ri'|s y hongos,y .!r lln r(|tqlt ?sleriñzárlot fl alnrrfiol es ftccrrlrl¡lllPr]tÉrlilizado conto un hreve l .iado aDlrq dr áFli(¡r $lros lra!air]ientosd? eqlpiiliraeióndf la slrF?rliaicdr lar Fhntas Tienr lrnahai¡ l.nqió t pptlieialV ptr.dt pfn?lrar facihlrÉnle ¡ntre las Filos¡dádos tofiaresv moiar la s prrfciF (lf la nlanla El elanol al 70"ices qua ?l l'li-.ó t e0'l',r nlirsrfe.tluo como ao?hlcÉslatif,zador b! Hir'oclaril0de sodiaa de calcio L a r l r F a r l i e i .d e l m a t e t i a tl ¡ q a l ¡ i p r f d . l a r n h i é nc $ e s f r l i l , l ¡ r l ¿e n n s n h ¡ c l a r r rase u o s a sd e h i p o c h r i t or l n s D d i r tJN a r ) C l io d e h i F o c l o r i ldoe c a h i o ( C a O t i l l l a c a l r l e r e h i o f s p r r l e r i d a pofqtc ej rhpnns litotórice ¡.'trchoshhorn!ariaql|tiliza||lFiir dE lrs0 dfmés!ico tal eomo Clornr Eslos produ.lrs comerciálesconl¡Fntnnorfilallnrnle4.?5q"di NaOCIeonlo princ¡p¡o ¡clivo aurnrlo sr lÉsditrye eon aqua{ una pa¡le de la leqial)or g pi'les de rqua}. L?solrtción r"sflianlf drb?rá contFn?rno m?nosrle 0-5Dhilñ Na{)r-l ?qteriliTadora [)ehidna h disoci¡¡ión aompl.ta fl hipoeloritolien¡ un¡ a.tnrirli!.troljrli!,i¡rr'n!ep?.üt?ñitít u|l 0h srrp¿r¡of a li.0 v es mas plecliunrrjandola solucionalr?dedord¡ Ín ¡rhde ñ.0 I e s perlicir dÉl lpiirln dir.ctrrlo y rlist.relatllrnlÉ,lumerqido.rrrFle!ám.rl" ¡n lq sotrión de hipothrito, q l e d a ? " . l i l i r a d a d e s p l r a sd e t | 0 á ¡ r F o s i . t r i ódnr 1 0 ó ! 5 o r i | l r r l o s A c o n l i n u a c i ó nd e l lratani?nlo, cl matlrial trala.lo d?hÉs¡r hvado .uida.losamÉnlecon vário( .áflbios rlf aí44 para rliminerconrplelamcnle dFsl¡lada ?l desinfcclanle c) Bicbruro dr mrrcuria Fl hicloruro dr m?rcurio (HgCl .,) ha sido rrtilizadocor o rt.s¡nlFelarrtÉfirsr a qu. rs Frtr.n!irrlámqrlle léyieo La sotraión.lr triclonrorla mtrcrrria.r volál¡lrr fémBlratttra.lmhipn!e y puede ptouocarenveñenemirnl0por mficur¡o For lo tanto rocrJrnaldámoslrj usó como agenlaeslcrltzador. d) Bactericidasy frinEicidds f.on pl matÉrial que st encttenlta frt¡rlamenla contartrin¡dn alqUnos inuFsliga.lortt r e c ñ t r l i É n d aenl l a v a d oe n t | | l am a z c l áb a ( : l e r i c i dj áÍ u n q i e i d ra0 n r . r c i a la n l r s d e ¡ r ó c t d a r á l a F r l . r i l i ? n c ¡ ódnf l a s r t F a r f i e ¡ f+l É h a r ¡ c o r . l ¡ r s a .s i n a m h l i r t o r l | r . ¡ c l . l r a ! a m i f | l l on o l i . n e e f e c l os o b r ei n l + ¡ ¿ ¡ n n " .F i $ l a r n i c a sl a s e c c i ó n5 d a u n á l i s l 4 d r h a c t t r i t i r l a sy f u f l g i c i d a s cñnjunlamrnl..on informaciónr?ferrnl?a su uso rI antibiótieos .1 pesar de ser liliznd06tltinátiltnFnl| ¿n el fltltiuo d¿ cÁlul;rr:rnimaft.sF;lre IrrÉirFnir ( onlrnrinacion?s hacle¡ianas.l(|sanlihiólicosno han sido muv uliliTados¿n el cr¡lliuorte lFiírlos ue¡elaler I os tisiófogos.a linalesrle l':s airos50. s¡hlnn i á lo,rl)rod||.losoat||ralFsF'ledan alerar ¡l creeimi¡nloV d¡sárrcio rle lor rultivrs "in vilra" de leiido,:lreqelalos De hechñ,los téi¡dos\.'aqFlal.!son srnsibl¿!a Inqanlihióllcosy mt|esltarrürla lerprnrla r.,a¡iable de ¡cr-rpldo a sl|oFnolino l a ¡ r a y o r l : d . I n . re c p . . ^ i n l i ¡ l a r 4 n . r f i i i , a d € t e j i d ñ r D o . r r n f f i t r ¡ l l l o t i h t i l , i é r i . c i p : t f ¡ É l l r l t i n n l los cor|lamrnanlri( s[¡.ificiahs FF lac dlstcfion?c I slnq I'rorlrtrlis son c¡tos f o[to||lr6 es.

(4) ,'l. I. t I I I I I. t I T. I. t I I I I I I I. efecli,roconlrá todcr kts tipos poclhiárda organisntosconl:rfilhranl.s I os ánlibióllcÉ¡son son dificilésde iliminar por nlros m?cl¡os r itTadossóloc0and0los microorqanismos d se l o sm ¡ s m o sh a n q i d oe r i l o s a m e n laPp l i c a d o s l L o ss i g o i e n t eesn t i b i ó t i c oosc o m h ¡ n a c i o n e Cefolarina Gentanricira Bifanrpicino Nisletina. Ca¡benecilina Genlamieina+ AmfolericinaI Vancon¡ieina HCI , t'licoslalin FslrcFlomicina+ CBrbenecilina qlA_lgUrq¡-c 3soC_gLbA:nf-SIlrud¡. fi!qt-o-!St!Le-d.g4gsad,ap-o-r-i. Penicilina Eslrrptomicina Bac!ericina Esparsomicina E n e ! C I P F a r a e ¡ r á d i t a r h a c l F r i á ro h v a d u r a ss P e s l á u l i l i T l r r d (ct o n c i l r l n É r i l o l e incar¡oracióndp antibióllcosal m0dio de cultivo En easo d,: b.¡clcr!¡e.se recomiendausar f?ifampieina( Rimaclán 300 - CIBA ) a una concenlraiiónde 40 qll o Celolarimásódica ( ClaforánIiOUSSFI ) a ?00 mgrl 5e oreparauna sofuciónconcentradadel antibióticoa lllili:ar ( Flifanrpicina1?000 mg,/lo ctradlado$de paDel Ctafaran¿0 000 mglt¡. se esleril!¡¡por lillraciony se rokrrâ,"n ¡reqrreños ftifo pslérila 5 r 5 mml l4s cuales5F deia stcar en t.!nar'ám;rrá dr fltliola¡n¡nalSP coloDan a p r o v i m a d a l n e n0l e. 0 ' ! m l d e s o h ¡ c i ó nc o n c e n l r a d ap n r c a d a c t r a d r a d od e l p a p e l S e recomienrlano rdilizarlosdesDuésse siete diás de habeflos preparado.ya que pi?rd?n progresivamrnle su eftcaeia d ? h e r e a ñ 7 a r s eb a i n ¡ n n d i c i o n e sd f a s ? p s i a L o s c l ! a d r 0 sd e p a p e l s o n t r a b a i o Fslp i¡lroducitlnsen el madio de cttlrvc ittnlo a la yema sembrada.y erln rlehe ser lransferidaa mFdin fresco con olÍo lraDel antibiólieocada J ó 5 dias lanhién se puedenusaf olros anlihióticos.omo ceforitina( ¡¡etotin¡"'|FRf:K) en dosisd? 50o Pnm sr recorriFrlrtallsar Anllol¡ricinaB en dosis Fn el caso d? la coNaminación\aa por levadrJras. de 0.?5 ppm a 0.5 ppm. siguiendoen todoslos casosel misrnosistonrad?l papelfillto Frecuenlemenlelas pbntas de reproducciónvegelal¡vason infecladassislemlcamenlepor ü r u s .v i r o i d e sh. o n g o sh a c l e r i a ys m i c o p l a s m a s En alqünoscasos como el del hanano. la infeslaDiónPor fln'málldoseonsti!uveun serio probhma para aque[os campesinosqtte cont¡nuamenleprodücen sll Frop¡o mal"rial de siembra l.a Biolecnolnglaofreceúna apropiaday simplerohtciónPirradi.hâ problemas.medianle el 'in vitro- para la de ittleccionessislém¡casy la desarrollode técn¡casde cui¡vo eüminarriór! producliónd¡ mal¡rial de 'iiembtallhrede enfermFdadFs. l.h f,ipmploa señalarlo cünslilrry?el caso d€l hananoen la Pep rlP ('tlba en !a f'ual el tralada lermicamenle Eno oriqinahael ulio de :ien'illa-v?qtt¡l¡\'a de!?rioro.Ie las planl;rciones cnnllevabaa r¡randescnslos dF Drodltccióll?tl el procesanrltrrtod? l¡ \enrillaV en divFlsoc la ef¡clividadde la misma carns era crfeslionarla l an d i c h op á i s . s e h a q a r á l l l i z a dqou e c o n l a a r ¡ a r i c i ódne l a s a p $ e a c i o n e s . llea b i o t e c n o l 4 g e lndn .l tY!alFri¡ldF li¡Fmhla frore.la rl"l Cl¡Íito .,É ta¡¡rlri E l f , J i r o t ( a n i ? ó r r n ; tr ? d d É b i 4 t ¡ b r i ñ ¡ c ' r l u ¡ F ¡ t r f t ¡ t r a tlr; F r ¡ + | t t¡ l . ! r rd * ' 4 l r r t l i l l ñe e d ? p l ; ! n t a s !¡or ai1o.{¡tilt}li/¿od(r ñsl ,11ntalerial de sitmbra libr¡ de Flohk lnar lil4s'lrlilnrloq.

(5) .T. t I I I I I I I I I I. t I. t I I I I. t. sc ha d?moslrádoiu Ulilidaden haJranopahnera pifie y -bl.o!eJ_Y-q|q!._is_tgmq: .C!l!t!!_o_dt l]aucho pero ronlint,asiendoDn prDhhmaen catao café tnco ¡alme de actlte y pimienlo ' i n v i l r o " h ao b v i a d ol a n e c e s i d a d ? l c t l l t i v od F b r o l e so . l micro-!njrrlc Fn el c¡¡o de cltricose merislfntos ofrpce consideral]h(opodunidadespara diferenles I a regeneraciónInédianleorqanógen?sis rrna ?scala r:omelciel crdt¡rossi s? plred?ndisarro[af hasla " iinv ¡ l r o ' n a r al a ? l i m i n e n i ó n q r r e y a p ñ e a c i ó nd e t p c n a l n r J l á rl desarrollo Sr prrerla eonsiderar t i e n oq r a n d e si m p l i c a c i o n eesn p a i s e s d e l o s s u h d e s a r l o l a d o s d e e n f e t n r e d a d ??sn. F l c o n l e Í o prodrtcción la ealidadde la agrlcola 2 A!qlq'!'-e_lt-o_[c]U!!j!o de tr-c!S!9 r!q-E E l ¡ r r n l o < ! e c r e c i m i e n l od e l á p i c e d e l a p l a n t ae s e l t n ¡ l i ' ; i e n r a E s r r n a z o n a p e q u e ñ a q(tese di[idenrápidamefltr conrpuestade célulasmeri,itemáltcas Fl d0n1nde la Vema conlien? las verdaderaseéhlas meristemálicasy está rodeada por firlnloldl0sfoliaresy ho¡asprima as debidoa qlle los teiidosvascl'laresnrás diferfnciadosse e n c r r e n t r aanl e j a d ods e l o s m e r i s t e m a(s h a c i al o s l e i ¡ d o sm á r i e j o sd e l l a l o l ' l o s P h m e n l o s vascllaresde los primordiosfoliaresson lncipienles,y no han hecho aúrr(:onlactoeon la part¡ p r i n e i ¡ a dl e l s i s l e m áv a s c r l l adr e l t a l l o P o r l o l a n t o ,l a s p a d l c r l h qd e v i n l s q u e p u e d e ne s l a r DrrsÉntesen el sistemavascularptradenllegar a la zona meri\málica del ápice sobmenl? moviétdosede céhrla¡n célula. un Pronesomuy hlfo Esla ¡r ttna de las razonesprineipales del potqrteuna planlainfecladacon vinrsla conc¡ntraciónd¡ eslos dlsnlinuveacropetafnenle lanlo del ápicecomo de hs yemas alilarP< hrcia lol m€r¡stemas D t l n t om ? r i s l e m á l i c yo s u E l a i s l a m i e n leon c o n d i c i o n eass é p l i c ads e l a p o r e i ó na P i c a l l a n l a d a el desarrolode plánl¡rlas pQr mito clrltivoen un medionulrilivoad;cr¡adoe igualmpnleaséptico. ' ! n p s l a s e c U e n e idae d e s a r r o l bs i g r l e P a t r ó ns i l n i l a ra l d e a q l r e lP r P s P n leen t l n a Fn orinc,Fio, planla normal l.as céfulasdel merislema se divideny la dif¡rencia¡ióndp n[evos teiid'Js por el medio continua.La nulriciónde la sección dtsectadarle la planla es proporr.:ionada apü'rada atlilieirl Fsia técnica. llamadacullivode merislemas. fuo For Frimerave7 pa(a la tl95? ] y tr?vaa la por t,4ariir] l'/lorelv erradicaciónde vir[s en rla[as hare r[los 30 ailos p a l ó q F n o s o h l e n e i ód n e p l a n l a sl i b r e sd e t a d i s e c c i ó na s é p t i c ar l e l m e r i s l e n r ae s u n P r o c e s od e l i c a d oy r e q u i e l em t l c h a sh o r a s d e p r á c t i ( ' aF l f l r o c F d i m i e nel aq e l s ¡ q t J i e n f é ' . u e a c a b ad " s e r s o m e l i d aa l e l n l . , f F r a f i ae.n s e g m e n l oqs l l e S e c r r l a n l o sl a l l o sd e l a p l a n l a q conlet)qancada uno trn nudocol] stt yema aurilar SP rPmtlpvenlal holas cttidadosámenlcSA 4 e s f n l e c t alno s s F q m e n t odse l a l l od l r a n t e 1 0 s e g u n d o se n a l ' l o l l oel l l o " i y a c o q l i n u a c i ó n aon hipoelñrilode calcio ?,6 o,/'dtlrant¡ l5 minutos I uoqo lo': l¡llos lon l¡vadoscllatro veces. por crncominulosea4ave7con aqt,adestiladaeslérilParaelitninarel Pveesode hipo(rlorilo Eajo ttn micrcbio hinoc¡rlarde diseceión,qp aft¡¡i¡an las hnirrelaqrltl? rtdFan Pl Ptlnto de la cúpulade la venra aFrcalv unos uuanlosf]rimordios crFlinripnlohaslaque qued¿solanrenle lotiare$( gpneral enlo .los I I a etipttlay dos primordi0sloli;rrñ'r','andisectado!v lransferidos A I ver secc¡ónS ) El nrerislelnadirealar,n?s translerido al nredinde culivo rneristemáticq l ) e s D u é rd e 6 a P s e m e n a s , l a s f J e q t t € ú aps l á n t t t l a s o n s e m a n a l m e n la et m e d i o B para un mayor crecimienloy micropropáqación suhetrllivadas f'tespuésde h r?goneracióna partird¡ los meristemas,la$ pt'lrllassorr¡robarlaspara deltclar cualquierinfecciónDersislBDte de vrrus 3. M.aIt qt]l11le-0!9_q,e-__c-ult¡y 9 f¡l trt¡lq'ri;i" ¡lt v¡la'i'' flr!dc- iÉl r:{'Ii.rrv,irloEl¡ rrriivris Fót !irr t;arrtrrrirrri¡t'irririu cUanri4sf l0rnnnilllici.lltr\ prrca|laion?spara .r.¡ilarc onl¿nlirar io es y 4ltirflrlnh ItasfFrenci;ra mÉdio " in vilro lrobedas contraF¡tóQenos lrascocs tealizada a int.rualosapropipdos Las plántlrlas r||FdeflsÉrnranlenidescomo eolccriofiesbasFpara la proD!úJ'rió'ran [n ploqr'rnlarlé qétnilla.

(6) IT. I I I I I. t I. t I I. a]BIJOTECs A6 ¡.cFECUÁtr|¡ De ccLCStBtA. ig$!¡¡'*. patir mantenimienlorle un periodn.4rlo las plar'ltasqon mafrlenir,ác p,r luhoe sohr¡ rl nl¿dio dr. Fr^Fagació[ C o D {v¡r sección 8) I os lubos son rpllados con taFas d? Dlástico arriorlaveablf,sFslac son meiorFsq e los lapon.s de alqodónqrre pueden ser penet¡ados s t )É l a i t cV p o r i n s p c l o s f á c i k n e n lpao r l a se s p o t a sd e h o n g o sp r e s e n l e e I a tasñ de crecimirnlode las plartásdppendcde la lempprat rn d. incubación,lá conlposición t i e lm e d i oy d ? lq o n o l i p o ( vef sacrión 8 ! ejercenrrn aslrés osmólicosobrelas I os ¡rtodiosF y F para ahnaccnamipnlo y pueden para rtlifzados almacenanrir.nlo ser a 2f¡ " (;. pl cslffs t?d ce la lasa de Flátllulas erecimienloy da trqar ,t enlrpnudocr'"t1os l¡Í¡¿hcs nudosFrlán asi disponihles¡lrando s¡ iniciala pr0Daqación del malerialalrrra.en¿do Fl matrrial a[.nanÉr]adc' haio ?slas condiciones npcpsilanormalmenlsser ltansferi(ltsolamenler¡n¡ vez al añ¡¡ ' la Irsa de crecimiento Si la lemperaluránuedetraiarsea S (: eslo rFdlrcesiqnilirativ¡nrenlp dp las plánt la( y laslranslerpnciasson feqlt?¡idassolarnpnle na'u'F7 {:adados o lres anos F $ p o s i h l F p o r l o l a n l o , m a n i e n f r u n a c o l e c c i o nd e q e l n l ¡ r t l a s m ab a i o c o n d i c i o n e sr l e d¡srril¡s rnlpr¡otmf;nl?Cuandose recihet|n nl4ido rrarala prporlaciónde Ún al'n¡'renflmienlo d e l ? r n ' l i n a dqoa n o l i p np r o b a d oc o n l r áp a l ó q e n o sé s l ef i r r e d es a r ¿ r s ed e l ¿ l t n a c e n a m i e n sl oe.r ' nricrorrropaqirdo , y fuegoser dislrib rdo in vilro'. 4 ¡4e-dio.1-d-e_e.UtÍa T o d o sl o sm p d i o sl r l i l i 2 a d opsa r ee c l et r a h a j ap G l á nh a s a d o rp n l ¡ , i , r ¡ l F tr l ¡ .l t r r a ¡ h i q aV S k o n o i f l i l I t q f i 7 l [ . a ss o h r c i o n ecso n ( : e f r l r a d a d sp s e l e ss o n n o t n t p l n r r n lD F r e o a r a d aesn c l r a l t o n a É o st F F a r a d a c. I. Srlps NlqSl) r Hip o. t. Vilaminas. I I ¡. I. a J $ o b l c r ó nc o n c P D i r a d ad ? s a l e s. N ']NO KNO.. C ecl. 2H.l) KHF0r H BO, ¡/tlSCr.i. 4llr0 l',ln$Or ll O Z n S O ^7 l l O ZnS0ú l.l-O KI Na.|'lo(tr 2H,O. 1 60 q ,10q c fto s :j5. q. 0,1 c 0.5 I 0.,f 0?. q q. atz $ 0.02 q 0,005o. ¡. I I I. L ¡ i l e l v ac a d as a le n 2 0 0m l d e a ( u a d e s t i l a d a : 'r ¡rr¡ ( {r 005 ll)isur.lva 0 ) de cusO,: 5 ,o v 5 ll]q rh I,o(rl ritJr¡ err !(, nrl ce agua, aqfequeI m l d ¡ e l l a s o h r ^ i ó an 2 0 0m l d e a g ¡ a p d r al a r o l l c i ó nc o n ¡ e n l r ¡ r l ¡ hle/rle las d¡ez solircioncidp qale'ihtd¡lid[alesiuntas nara l]3cer ?000 ml { 7 litros} de la sa'&r¡rón conr:¡nlra.lade !alps.

(7) -1,7. t I. t ¡. I I. t I I. t t t I ¡. I I I I I I. h l : n i r c r ó n c o n c e n i r a ddae s l l l l a l or l en r a q n e s i o 't r'tezclar 7 g de I!g$O' lf1;o rfl 100rnl ce ¡rquadrsliltda c ) Soh!.iónconeenlradade hierto 0 . 7 5q N a ; E I )t A 0 l FetiO'.711,o i5 q Na'I l)lA err ,¡(tlrll de aqu¡ deslilada D i s u c t v aF á $ O , t H ? ( ) e n ? 0 n r l d e t g t t á d F ¡ t i l ^ r l a aqll¡ f!eslil¡'l c o n ealierrlr l,le¡cle tas sol(lcionesftias v !lo'¡ca 1 0 0 n ¡ l d ! l o l u f l ó | l r o r l l e n l t , ¡ 4 ad e v i l ¡ n l i n ' t s. 0 { mqrl. I i¡lrr na. 2 0 mq'l Glicina Acirlonicotinico fl 5 mq l 0Srrtql PiridoYina. -'lt nlq. l D Or n q ¡5 mg r1 '1t!. Reparlit 10 ml dc l¡ f\irn[,'ar.ada \til,rmiitRV .onlnl.l¡r h¡cta l't!0 ral { nn ilqrts Ct"'til?rla (:oll(elat{o5tJl¡l¡zalun envasepor snlljciónde vitállltlrásen peqlrelios€nvasesv maltlenerlos .ád¡ l¡ltá dt rrrtdio rl Prcp;rt;rclónd.l ri.dio prrpare 1000 ml ( | tit:o l del rle¡lin há:ir-n rle fftrarhiqo s o l u c i o n e sc o l l c c n l l a d á s? l l l ¿ s S i q u i e l t t e ps l o p o r c l l ' n e s qalÉ1 l,4g$r).. 1 0 0n l t | 0 ml. H i e It o \/ilaminas lnosilr,l. 5 ml lq rnl 100 ml. ''¡¡¡o. llrl5l nle:nhndo las. P! Y sa.fl/o4jl / IFa !:! rÓ4in3siq||iellleI V Fnnqa ¡qrF0uP |Fs Ffirrnonasr¡tte ..lrtespnnr|an' trlirnrlor' u , " , t i o c o n 0 s i l a q a l .e h a l r l o c l a v¡e 1 2 1" C d t l r a n l et 5 r ! e i e i i d 0 i l l v i t r o "l l e v a h ai m p l ¡ c ¡ l ol a C o n d i c i o n e sd p c r e r ¡ l n l e n t o :e n s t l s i n i c i o se l c u t i v o para slt cullivct'ellasqon arlifciale-c creaciónda condic¡otr?5 - t 6 h¡l ás ltl?- t 9 1 1 "0c j - 1 60 0 0 l u r Fllono 5s Ftlfdr gf!r¡rJli,-arnata l{)doi Its crllli!''nt dP llio fahricasPará el Óulivomas¡vo ia ern¡rienci, tli la nesp d? Ortba'n la olqanlza(ión de dichoserilerin'i riamb¡ar ¡lqtln¡ ,ii,llt"n¿nla ihminar-iónnalulalhar hF('ho dP acll?rdoal cuhilo de 4l'e se a¡rt(lada'i que llrnfn sFr por !at razón las cnnrlici¡nesrle ruiun d !e l r a b ; l l o t t a l pv l a $c o n d i c i o n p(s, o n c r a r i ?.

(8) I. I I I I I I I. t t t I. t t I I I I. .-,11 ¡i lll : itrS'Ji-l;1"4'A 8iBlJ4)'il' . _. . 6.,1; : .:_.,-.;,j:I4{. e! ¡an¡e¡to rtP PrnFa0a.ión ¡á¡id.r rlehe ccf lrisl4 (lanlto del ronledo de f rqn;¡q¡fc i{! -¡!íplja,J¿: l ! a k r a n 7 a lr l n g l a n r r ¡ r : n n j l | n l od e l é n n i c a r h i n l ? c n o l d ( i r : a ys c o r r v e t r c i o r t a i eq st r . r , l o r t ¡ . ) i a r e n,rr¡cro de individuos D"nl!.o.le pllás la mi( r ñproFaqación rle InalPrial Ibro d.' rnfFrm"darlos e s I n á s a f ) l i c a b l ea e s f r e c i e s ( u e s n n P e r ? n n e s ? s l é r i l e s n o ¿ l t t o [ e c t J n d a d a sa,l l a m e n l e h f l e r o T i g o l i c a sq a s r r l r c ni n f e r c i ó n i i s l á m i c a d p ? h r i n a g c ¡ l e t f n ¡ o r a n v a r i e d a Cd e l é c n i r a s i n c h , V e n d oc u l l i v o 4 e h r o l e s , . ' t r r e r i s l e n t n so, l q a n o q é n e s i sy emb.iogénes¡ssomál¡c,,1han sido .lFstrrolladas para banano . hry,iaathPnrutl palmPra. palma d e a ( e i l É , p r ñ a ,p y e t r u n r , y ! r a t l e h op r r l r eo ! r o s l ! l i ¡ n t r a s q u e s i q ñ i l ¡ c ¿ t i l o sp t o l l r e \ ñ s h a n s i d o a l c e n z " d n ' i t n n r i r t a ¡ ¡ ¡ a p ¿ q " c i á n? n c a o a o . cocn. café, nrarrgo,pimierilo y ¡lqunDs fore$tehs, el nilel cDttl¡fr¡al 4" operaciDnesaÚn no ha s i ¡ l oa h a n z a d o . f l U s o q u i i v n d e r e h d ¡ s e f i b i ¡ - r e ¡ a i o r e c b a s ¡ d o 9 F l a p m h r i ^ o ó n ñ s i .si o n r á l i c a ,e s o u i T á s l a n l á s F r o n r F t e d o r av r á l i d a r t e l á s l é c F i c a s p e r o a l i f i q e e n l r e n l r a e ¡ ¡ r l ¡ s a r r o l o P a r a h a n a n o p t i l a n a f á V p l a n l a so | | r a f r r . n l a l e s I a nriaroDropagac¡ón d.bemo:,' vorlil mulv ¡el¡ci¡narla r on la elinrit¡atión de paiógenor rflpdiantÉcullirrodp brntes V mcrislpnrn'i. err-e rqr¡_i ón,d9,.var'¡aciór! ítetÉti (.a. _G l ¡ ¡ r ñ d u o c i ó n d P ' i a t i a c i o n F ss 0 m a c h n a l e s F r t p r l e s e t t t l i l ¡ i ¿ a F l d p s a r r n l l n d p n l l c v o s r t p n o t ¡ p o cs o n r e . | i $ l r n ri a a e s t r á s h i i l l i r ' ' s r ' á t J i o l i ( o ( v e | | ¡ s l ! e ' i , r l s i l a l e s r e s l s l e n . " ' i ánso son ¡lrcnn!radas denlrn de lá .-nlpr'r:róndñ fiprt-rnDl¡súra S i q n i t ¡ c a t i v o ps r o q r e s o sh a n s i d o ? n . o n l r a d o s p a r a t P s ¡ g l r r r r i ¡ a ^ n l " r n e d a d e s e n c a ñ a d e a7r.ar labacov nlloa crrtivD,; a-Irles a e_nfp-rmeda(le$,rr)sertos r'rtrés ?lrptl!q9 e¡?-r-,r.t?1,!!-?.nsfl.,e¡¡C?,,l fe9ig.t-C!teg¿ln_l_er f r r ¡ l r l n r n r a ¡ i ó n r ñ n ( l é r l r r cl . F 4 r l . r 4 s . ' d " i n l F t Á sa f : o r t ó n l ¡ c lñr ¡ t ¡ c i d r t a D n t ! a d o sl l r d i f e r p n t e s r:fillivos y ser:rDtrlrohabhmirrlr nrá:; 'lisrmirartos dehirlo al t),rñ dq difererf?s lecnolo0las qile hap vorritlnírFa,e{iFlrlo ¡ntno lt el casn de la hi,r lrrrlislica/rlnp qlri U n a d e l a s l i r r t i t a r ' t o n eIsn á s s e r i a c f a a l i r d i q e n t i n a c i ó nd c l i r ' ; r r i c n i . i r s d e l A f ) N n ¡ r a ¡ l nleiofamienlo de los culivos, h conslituye las linrilaciones que erislen Al las técnic.?s de rñ q e | l e rñ f i ó r ? o d i f ¡ r e n i a s . t r f í v o s P l a n l r s i ¡ i r n s l É n i a a s. r n t ¿ n i e n r l t ! t . n e s r t ¡ f l a r : , l l r rtsh , r t i n q l . r . r i ri ¡ r ! ! i ¡ ' h i h i . l . l r A4s ¡ p t a t p a \ a I n r . ! ¡ i n a d e l . r c a p s i d e v i r a l y n t r c s . f u e d l n ! 4 n e r u r l t i q n i l i . r ¡ l ' v r ri r n p a r , ! oe n e l r : n n l r o ld e i n s ¡ r l o i v ¡ n f e ¡ m ¡ r t ¡ ' l eq lin srr ulrrrnellto el |Jsn Ce Flar'¡tasfrirr!sqÉrricas d¡berá farnr¡r l¿rle rN.l¡,1¡nei.t krleqrado d+ f:n tirs(|o.,nene¡al¡n '¡s !|.r:|rphrtl,r!dr,l ^f fll ffer:onrt)¡nátrlrh¡l| tÉ.r,r.lort! .rprrFlén qr¡r¡er(:lal ctrPaísp. floq:rro!!¡doq f t l a c c p < ¡ d r l o s f l a t s p r l . l ' r hl \ r , i a r r n l l r . l o sa d i { h ¿ . \ l e c n o l o q l ¡ q r r ¿ s ó l o p 5 e c o r ! ó n r i c ór i n o p d t | . a . r ñ t r a lr l | l l r ¡ r ; r lV d . . r i o r i ¡ i r ( : r o |r1l p l p a l ¡ ? l q r r er r r h . d . ' j | | q ; r !l ¡ r . ¡ o r r 4 i aa t t l a s ¡ c o n o t n l l S d e r l r c h o sD ñ i s e ! Fient¡165 s¡qnifc¡ti!,n. rle ciÉnlif,r.r..qo inslillcior¡or eiislerr r,rr l alñrrbi¡, l4óxico. Atqenlhra. i1r¿lrilV r':UbaPnlrÉ (rlroq q;]fi I a o x i s l e n ¡ i a d p l C r t t r n d n h r q a ' r i t , ' í a G ¡ n í . l i c z 1 B i o l e r n ^ 1 . , ¡ 1 i ; ,l r ' l l ' ¡ t r 1 r , r e " d o r . n ! t r r ' ¡ i i \ l i O i ¡ t i l É l | l l n d¡ ¡ l l l ' , 1 r l 4 , . r ' r l t.l lll{ir ll^r ot'thll'¡r'l¡ c r ¡ r i ¡ i f i . . ñt ! r . l F r ! ! ¡ h r l É i t / ' ¡ l ! U ¡ l ¡ t ' y ' ' . ñ l ¡ n a t n c i F d ¡ d t f i r ¡ l p t r r i r t o t i r l ¡e l l l t r l a ' j r r r . ü n t r , . : i ¡ l ¡ ( : c n ó ¡ l'¡ e¡rrcidar¡rl^ fl!r. "l li.'frllrn raql!¡li4n p¡ri la F e 4 l r r f Í 4 n ¿ ! e !t j p " t n o - d n , m ¡ l o r a n r i E n t ' : s p p r rteacrón d? r!a nrlévt v¿frr(ia'J 4r ak¡rjpdor riq ffl :.¡rrls | | !¡rrl.' tjorllDn r¡'llterido en e l q t r e o c o r r t i i ¡ r , r r n r n o ¡ ¡ l é i a ! : : a a r : o a c . t a r t . h o i f . i e a t ¡ 1 . : f r l a r l l ¡ , _r¡r ¡ l 1 ¡ r r o p l o h l t l h a ¡ n . ! r4frlrrrrrFrF|1rn.

(9) t I I. t I I I. t ¡. I I I. t t t t \l. I I l\. I. I t a b a i a n d oc o n l a t i c d ¡ r l o s ¡ f e c a ñ a r l r a m f r l i ol l r o ¡ n h p l o d r | . ¡ . r ó nd ' i t ; c a t e n l a F e F d a ( i U h i s . h ¡ n l o q r a d os o n l a c l o r l e sq | | ? n r e j o l a n l a . o r n F o s i c i Á ru , r ! i p t ádl e n l r o d e h a c t i r i d a d prodt,rliuá del culliun y se ha redUcido considerahlerncnteel liernFo d¡ srt creación I a s t é c f r i c á sd e C u l l i v c r l e T e i i d o l a l e s c o m o c u l l i v o d e a n l F r a y f l r i c r o p r o p a g a c i ó on f t e c e n rolrcionei viáblFsFara diÍerenlps r"Í|lilrDs l.rlásaun, la bioleenohgia pir?de ayuder al Intinranrifnlo qenFlrr:(re|| ctriivos er] los cuales la i n c o m p a t i h i l i d a?ds r r n ah a r r p t á . n e l u r o d e g e r m o p l a s m a Qo¡s-g,tV,aS,iSir¡_d9 _G*-e-r¡ng-plqs-r¡g:la conservación de rlcrÍrqpl¡s¡na ln-sÍ¿l dp cultivori p e r e n n e sp u e d e s e r m | | y c o s l o s o , p o r s r r d e m a n r l a d e e s p a c i n v s e r r i e s g o $ od e b i C o a s u e r p o s i c i ó na l a : ;e n f e r m e d a d e so e l o s r i e g o s c l i n r á l i c o s F x p e r i e n r i a cd e s a q r a d a h l e p s r ¡ s t e na l resp?clo E l t - u l t i v o d ¡ t ¡ . i i d ñ y l a r r y o p r p s e r v a r i ó n o f i F c a n p o s i h l o s, l o I r r : i o n e s2 É r t o , : p r o h l e m a se n ctlllivos lahs como banano cacao. palma de ar:eile ca||cho rira|lgo aqfiacatp y cafta de a7|]cal !!_ap,qo _G-SIq,qlJc 9: el ntapeo genon.iicode planla; por tas iérni.?q de R¡'rtriction Fraqment t.Pnqlh PolYmorphisms IRFLP) y la de Randorn Anlr'lifiprl Pnlyrnorplric Dl'lA (RAPD) son consideradasa[amenle promeledDra:ipara el me.ioramienloqenélico an dilprenes cultivos qiaq¡ó-st¡c_o:la pfecli'.'idadeon la crral podemos rea[rar la ¡4¡¡.11¡ prevencióny con!rcl de una enferm¡dad dpp?nde da la pt er:isa identilicr.ion d¡l orrJanicmn¡ausat i a s F n f e n e d a d e s m á s i m p r r t a n t e s r n r a s g o s q e n e r a l e ss ñ n i . l c n t i f i ( a h l e sp, c r o a r i n e r i s t e n orqanismos flera los crrabs no 4xrslenlócnicas drfinidas de id"nlificación F l d i a g n ó s l i n od c b e m o sv e r l oe n s r r r e l a c i ó nc o n e l c r r l l i v od e b t o t e sy m e r i s l e m o sa s l r o m o c o n la micr,lttroDadaciónde melé!'ialfibF de enlermertades :u 'ra!ores ubicado en el contexlo de la epi.lerniologia.el conlrql v l¡ prodt|cción de rFatBrialde s i am h rá I a rFlicación de los métodos de diaqnrislicn en el caso de la lriqleza .ir lrrs f ilricos en la prodrrnr"iónrre yemac cerliti4adas há o?rmitido a la FeF d" f'uha la prlructrrraeión de rn Proqfanla .le cilrico:; moderno y acor,Je con las n¡cesida4r! ;,.:luah,s dp la agricrrllura modcrna..

(10) ""1[. I I. t t I I I. t I I I I I I I I I. TahlaI Adinion?sal mf rrioMS hásir.'o para la prnpagaciónde lipns especifros de medios. '. .A. Para ¡reristemas. 0 . 1m d I 0.0,1nrq,l 2,5(1; 0,6,7. 0,I mgl 20.? m.ttl ? 5qi 0,t,:]i, 1.0 mq:! 50 0 mq,l ¡ 1 , 0m q , l 2 . 0m q l l f 0 , 0m q r l '1.09'. 0.8o,1' 0 . 1m 0 , l ? . 5m g' f 0,8mg,'l 4 0 D" 2 0ot'. 0,8')i, 4.0ri 3 0'li, 0,3,1;. l.in.'lina satatosa agai' á.ido qiberél¡co. prrl¡esri¡a llcl sacarosa agar' aeidofó|ico aqt|áde coco | ¡ r q i n i n aH C I Pñnlolfnrlo ¡lc nalcio p u t f F s c i nlal CI saearosá aQar' ár:ídoqiherélico sa c trosa af'at. .rqr hilol sacirosa aqar manil0l s a f a tñ s a Ag,.r. r, ilizirr ¡n uliliza a un. t I. los siquientes irrgf?dianl+h 'rr;irlo qrlherélico. T.J.

(11) -_I. t I I. t. t I I I. t I. P,ABA I,sacchn'utr.spp-) 9l_€I_EMA !4 P_RqPAqAClÓ$ QE!A lAt)lAE,E_.A¿U'AR Felrua l l d n st o n l a d o Íc l e fl ó n q r e q oS i o l r c n o l c g lIal a h a r r a , g 5. E l e r n p l e od e I n é l o d o sr á p i d o sV s e o l r r o sd e p r o f a { a c i ó nq q F f r e r n \ i t anr rr r r l t i p ñ n aern p e r l o d o s cortos.Plattiasl¡hras(le .rfernt.dadc,: rte?ati.dadése rxplot;t.ió|]o la inlr4dtJcción d¡ nr¡evas v¡riprladFsha sido considcradouna npcesidar,en los pioqralyr¡sdr, ptortrtcciónde setnilfasdr . 4 f i ¡ d e a T t i c a rF s p o t e s l +q t r f s e h á n d e F a f t o { a ddoi v e r s ¡ sn r é t o ' t o p q a r al a r n r r i i p l i c a c i ódne nllevasvaliedarlcsy la lroduccirinrlc sgr illa.ccnsideiándose la lerrrroloqia del rrulivo"in vitto' la de nrayor folénrial paü ayparrdirtllat¿rii¡llihte de enferntetl¡desy prod rir qran.ir( c a | | l i d a d eqsp n é l i c a f f l e nrlren i f or r] t es. Pr-sqe-q-u t l a ¡ t o p ¡ q ¡ ¡ i 6 ¡ s e i n i r : i ¡ a p á r t i r d e á p i ( , e sm e r i s ! e n r J r t i . Ir ' <i 5 0 l l n r m f m F d i a n l Fl a irlrhrcción dÉ hrot€sarilaresen |l lnedióbaradorn lirssalpsdé l,lIashrqa V Stooq ( h1S! I Fl rrreînlifntode las planlas<e tÉal¡zaetr cánra!asco¡ ihrirrirra.ión ¡atrtral.emplcándose mc,liosde !:{lnivosófditicádós(:oi aq¡r para Fl eslahl€nirnielo dp loc á¡iro¡ y ¡6q 3 pr¡meros rle multlplicación. pa';r el fes!o el procesode pt$l¡oa.ión V el s{rb'rlrll¡vos de los "nraizanri?nto hrolesse lrlrliTen mÉdioslituirlos. t. 11 la atlaplacióndp las uilrophntása condicion?sanrbienlalp< eq reañzadaen trandejasde ' poliespuma do 120orifrios ( 22 c|h ) ilunlinosidad rertucidaa Ín 60','"nle.liántruna maña. I. 4 | a( vilroFlatas son transplarrtadas a cantp4enttp las 4 y a; srFta|as an depr'ndenciatlc la ÉDocade siomhra. t t I I I I I. Rp¡.ulta_dp_qt t La reqeneraeiónrle bs apicas y la m!tltipliraciónde los broles se eslirnrtloc<rnl¡ adición cle 6 BAfr, obsevárrdoseun aumenfo en el coefieient¿ de mutipli.zciÁn a medida que s? dán más sübcultiv'rs"¡n uitto', r?spondieñrlolcs qpnotipos de forma diler¡ r'inl Nq' nhclant. sr foqra¡Dn co?lirietrl?s de mrrhiplicación strpr.riotes a ri err tos l1 arnotipo ¡r opagados ¡ Fl Phy1aqcl ( 2 S'l ) y Agargel { 5g'l f fueron superiores a! ¡qar prra la rnulliplicaciónde los b ro l e s i Al rmplear nredios de l^rJlt¡vorllqri,{os dismin ¡,a el ti¡lnpo .r!lr¡ illhr'rtfivo,i de l¡es a dos s E m a n a sc o n l n c r r a i s e i n c r e m e f l l ee l r r t i m r r o d e b r o t e s p r o d r w r i r l opsr r r t n i d a dd e l i Á m p o e n {'omDaracióncon ios medios oelilicaiJos , l E l a n r a ¡ r e m i e n i 0V c r e c i n r i F n ! od ? l a s p l a n l a ss " ? \ l i n r u l ó¡ q n ¡ l ¿ r r m e n l od e t ¡ r o n 4 4 n l l a c i ó n de sacarosa I 4:'1;r I v lr adir:ión.4lA r I ,3 mq.'l ) .la ( l t s p l ¡ n t . S n t i t ' r o ¡ t ^ p a g a d ' r . :l ! | v i t t c n l t r l f . q . l i t n i i ^ ! ñ a ú r i . a t ' i { ó n . a ñ ¡ i h . r ! sidr'ift. ativamen!a superior: ,a s?millq lradi.t¡nal dobido a ¡tfr i!'crafn¡'!lo r't! .l nt¡ruato de l e l l n cq n i ! F 1 l 1 t ! ¡ r i c n d e n e n d e ¡ { i 3 , i " a e q r l i n g s t i p h . l r t t l t F r l r r r i ¡ ? l e rf ¡ r a . t a r i l l i c a s r l e hs Uilrofl,rnll,: ¡l allnlenlq ¡'l ¡¡l nrtnt.\'ñ r|'t l¿$6t ,,rlA .l¡en-ri¡¡ió¡! an ál .liánrelrn V Fl Déqñ rl'|. ll.

(12) .. I I. t t. rslos sin rlif?rcncias?n ios d?más componentesdc rfndimienlo aunqúe st observaron entrelos ganolipos comporlarnienlDs rtiterenriale$. Érg¿toT5cÁ',i::a:.:.:l_u.*r-1 . 1n!:. :. - r'. :e:. ;. {t''-. I r. 0 El cfectodelcuiivoin üto se rnanliene auntlespués de rlosInulliplicaciones cfonales en el campode lá srnrilaqur se $anifieslacomoun aumento cn poÍhade un t ?'l'" en el rpndimienlo en conrparaciÓn lradicisnales conlasestacas. !. " ( 2? subcr:{lir¡ns 7 | as plantacconrntyoredad 'in uil!"o } prF(énf¿rDn rrnadisminflcián en la. I I. a [ l r ! a , e l d i á n r e t f o V e l c D n l p n i d od e ¡ ¡ z t ¡ c a r { b r ¡ xI y l l n i n n r e r i r F n l re n p l n t i m p r od p l a l o s p e r o esles varia+iones ¡o lr ieron urra hase genética r,,¡ (lrte (lesaparn(rieroncon los ciclos dt nultip[.ación en el nampo. r. I S o h r e l a h a s e d c . s l r s r ¡ s u l l ¡ d o s c ? e s l | l l . l t r r ót , n e s q e n r e p a r a l e ¡ r ' o d [ c c i ó n c ó m e f c i a ld ?. I -. quecoDlent}ló senlitade cafled? azucarpormicropropagación la produr:cíón de t0 mibnesde r,illo¡hnias.n ,|995.. t I. t t I. t I I I I -,2.

(13) -l. I I I l I I I I I I I I I I. CULTIVOSDE MERISTEMOS. t t t I I. l3.

(14) -1f. I. t. il. I. I I. t I I I. EQUIPAMENTO Y ACCESORIO NECESARIOS..

(15) -t,-. t t I I I I I I. t I I. Anlesde repararel. t I I. t t. PróximoDasoreDarar . m,er¡stemos. I. t t. |'.t.

(16) I-. I I. DE GERMOPLASMA CONSERVACION. ¡. I I I I. t t. natural. I pánteniáo con iluminación. artificialesde luz y temperatura.. I. t I I I I I I I I. conservadas Ieián1ar 'in vitro".. |. I. I. I l.

(17) -U. I I T. "lN ylrRo" DE PROPAGACION PROCESO. t I T I. plantas deltubodeensayos. Renueve. t t t I I. de asepciaen fiagmentos Corteen condiciones. de las plantas"invitro". Evolución. t¡.

(18) -f. t I I tI. corl& l.o¡porr¡<ión (olombiooo de lovqstigo(lón Rgropacuof io. t I. t I I I I. t t t I I. t t I. Feeha:2l y 22 daA9olo/96 Lugar:ChiFA, Barbosa Canlidad deAlumnos:. 0esarrollo: Zl¡LQAqosto/96 8:30-9:00a.m Prcsantecióndel Curso. 9:00-10:00 a m Cullvo de brolcs,meristemosy conservac¡ón de Germoplasma l0:00-10:30 a.m R c c c s o l0:30-12:00m Cultlvodc broles,mcrislemosy conservación de Germophsma. lconiinuación) p.m Amuerzo 12:00-1:00 l:00-2:00p mp.m 2:00-3:00 p.m 3:00-3:30 p.m 3:30-5:30. Práclica No.1- Desinfecc¡ón c lmpbntación de malerlal"lnvitro" Práctica No.1- (continuac¡ón). Raeaso PrácticaNo.2, Cultlvo dc brolesy mcristemos -prpa -caña p.m PrácliceNo.3 Discusión y prrparrcióndü mrdios 5:30-0:30. 22 de Aqostol96 8:30- f 0:30¿.m lñlroducclóna lá propagac¡ón'1n vilro" -El caso del cullivod. la papa -El caso dül culivo dc h caña. | 0;00-10:30 a,m. Recago| 0:30| 2:00 m. Inlroduccióna h propagaclón"h ülro". (continuación) 'ln -TUbFrlzación vitro"(tormeclónd¡ orqanos"ln vitr0") -Cultivode cáiihs anbriogénicas. -Emhriórénesl¡ somáf lqt. 13.

(19) T. I I. t. p.m Alnuarro l2:00-1:00. FlEt ¡oit*n. oo.''='= t"^-t. te¡€FE^'. p,m. PráctlcaHo..f. Propagación 5n vilro" f :00-3:00 +rpa 3 00-3:30p.m Rcceso "¡Rlitro"' Propagación 3:30.1:30p.m PráclleeNo.4. (cor inuaclón). 5'30. p.m. ConchJElón drl Curso.. I I I I. t I I I T. TüMAT:. t. parah drsinfccción gen?ralas dc malerialde sirmbra. 2. Concaplos. I. PrácticaNo, l. Dcsinfccclón ? lmplanteclón d? material"in vitro",. ''in f -PÍncip¡osgencrabsde b manipubciónd. mahríalparab siembra virlro" +ondicionesdc lrabajo fiát.rialcs rcqucridos -¿Diagnótllco'?. y/b sislémica) y/o corfaminación (supcrficial 3,Losprobbmasd" fcnolzación l. lmpbriacióny cuiivodr brotrsy/o m?rislemos.. t I. t I I. 'ti.

(20) Frlctlce No, '1. Dr¡l¡rfrcclón r l¡nphdrcló¡ dr met¡rlC tl¡r vltró'r. Temas: l.Principlo¡¡Fn.r*c dr b menlpubciúfidc md.rirl p.re h ¡irmbra 5n úfro" -condiciom¡dc treb{o .flrdcddci ru$rarldoi. -¿Dh{ntutha". grnt'.lca prra b dÉinfccción 2. Conccplos dr mrlcri¡ldesiembra. 3.Lo¡probhmrsdc frnoüeciúny/o con|rmh|c¡ón(¡upcrfcialy/o ¡i3|ónrlc¡) y culirrodr brolcry/omorislcmo¡. l. lmpbnlackin Activldados Frdctkar. dclmalcri¡ld. sicmbra. | .D¿¡infccción 2. Siembr¡dc brolrsdet.pa 'In rüro". S.Sicmbra dcmcri¡tcmo¡dc cafr.. 20.

(21) 'T ::. I I I ,l. I. neeesarTs Meterlales. :n. :*.-. la práctica: Sancrellara. ruslicá, o unácemarade lrenrferencia l. Un ltriolam¡nar de labo¡alorio: ?. Facifirfartes J'h m?lro -deslifedor d? agüá -adoelewu ota d? prcqiónces?rá -brlen7a .cocina, qer o fl¿clrica. t. 3 Cr¡df,hriapazaacliüdeilerg?naraked? hboralorio. I. f l . e l . i ( d r 1 . 2t f r o 3 ¡ Prob?lr {rlP 2 trlro|r} l.robrlá I de ?0Onrl). t. flralor (dc 50 ml) . (:¿p3trs d? p?lri. I I I ,l. t t rl. ,l. , i. t'bos .b ?hsayo(lo id"¡] ?0 mmx 100mm) Fra:cos dc cons?rudcon lepa. {;ántldad ? 4 ?.. t0. fi. j.

(22) f_A-IrI FEai:I rJH-FlELl : f¡F,.Fr:rt I L-ütrlL-uo FHTIE ttrt. : 26?letf Jnorr. I ¡. I I I I I I I. FAX A: Dr,RlcerdoGoÉol,CrscedProv.de Véler Dc: Dr. Lufs LiSo. Fcchn:10/08/0e llo. de pagr.: A¡unto:Cur¡o.. t I I I. 9l 9!¡o. t I I I .X5. flug. 1E f?3É E8:3fÉH. Pf¡1.

(23) T'TT{_rllI. ,:rrrTrfr:rl,:it[' I | .,8,:,:I r1,I ¡f [. ]l--rr, rr-1ll_lr_ritIttlf. l,lrl. : ¡L-r¡rrtli. i,rrr.. 1i. l'-Jlrr: tjr:r:lli!. I. t t t I. t I T I I I. t t t I. t I ,l. u$ado$en cultlvodc tclldos, HeactlvoscomunrnentÉ dc¡¡le¡ el Éoh¡clón cohcGntrrda 35.0g. Nt{{NO¡. éI8';. ¿x,o. KHrPO¡ H¡BOr MnbO¡,4H¿9 MnSOr.HzO ZqBO¡,71'l¿O ZqSOa.H¡O KI NpMoOr.2RlO. lOñ rr9,0 l¡. 3,5s 0,1s 0.Ss 0,,1 c 0,2g. o'2s. 0.02g. 0,m5S. nlñrFnTAnn zfl ml dn E0uEflestllsdE ói¡uclvr F9SO¡,7H?Dcn ?0 ¡nl de n6unrfeslllnrlf,. c lrnt. ¡l.r¡1. l¡r rnhr¡lnna¡frfnf,y llFVñi lfll¡ ml nnn agrn rlnfiflladñ,. Tl¡mlne. 0,¡lm0rl. Gllclna 2,0 mgll Acldonicótiiiico 0,5mcl 0,5 mg/l Plrldoxhra. 20 mg '|fl) mg 25 mg. 23m0. Bisolvercadavitanlin¡y completathasta500 ml con aguadestilada,Repdrllrl0 ml de la o¡luolóndo 'rttrmhrlr .n Dt0 .ñnÉ .nu¿rer y m¡nfrnrrlnl rnn0¡larlnñ'l¡tlllff,I lln ftnyfl¡ll por cadalitro de medio'. ¡rl¡.

(24) rErlI|]rtÉL-r_ll pHÚrtE l.tt. I 26?lE1l. f:lug. 1€ 1538 lE:4411"1 PEt. ,. It i¡. I. t t I I I. t t I I. t ¡. t. Prcpere10(F mt ( 1 lltro ¡ dGlmedloblslco de Murdshlgá' Ekoog (MÉ)m.zcltndo ltt solucioncaconcentridNgeh IEBgigulentesproporci0neEi. Srles lllgÉ04 Hierro Vltrmlna¡ lnositol.

(25)