Cuarentena cerrada de post entrada

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(1)AEi::ctrEtin. n 4'l. r,'a't'. :¡¡ü.r;;rrK,¿,4Z S ¿t. ?c0í. @. iuirl Y0E¡mi0tt0 mntcutrunÁ. @A Subge¡enciade P¡evencióny Control bivisión de Sanidad Vegetal Unidad P$yectos de P¡evención. CUARENTENACERRADA DE POST-ENTRADA iirrarJ. PaulinaMartínez,Biol.,M. Sc., Ph. D..

(2) CONTENIDO. INTRODUCCIÓN NECESIDADDEL SERVICIO DE CUARENTENA CERRADA PARA GERMOPLASMA VEGETAL IMPORTADO PROCEDIMIENTO GENERAL EN UNA ESTACIÓN DE CUARENTENA CERRADA DE POST-ENTRADA. 15. INTRODUCCIóN. lf. LUGAR GEOGRÁFICO. l5. EDIFICACIONES. l6. Edificiocentral Invemaderos. l6 l6. PERSONAL. t7. MANEJO DEL MATERIAL VEGETAL. 18. Recibimiento Invernaderoy plantasen creaimiento Materosy sueloparasiembra - labo¡atorio parabioensayos Invemadero Restriccionesal acceso. 18. t9 ¿) 26. MEDIDAS ESPECIALESDE PRECAUCIÓ¡i. z7. BIBLIOGRAFIA. 3l.

(3) INTRODUCCION. Este documento contiene la filosofía sanita¡ista de lo. y a tono con las exigenciasintemacionales..

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(5) NECESIDAD DEL SERVICIO DE CUARENTENA CERRADA PARA GERMOPLASMA VEGETAL IMPORTADO mundial, el cual en muchos casoseslá disponible para los usuariosque justifiquen su solicitud. También seha comprobadoque el lib¡e movimiento intemacionalde material vegetal ha traído como consecuenciala diseminaciónde plagasentre países,en la mayotía de los casos económicas. con g¡avesconsecuencias Estación de cu¡renter¡a. Teniendo en cuentalas pérdidaseconórnicasregistradasen el sector agrÍcola, ocasionadaspor ataquesde plagas en general(patógenos,plagas,malezas),y la crecientecontaminación ambientalpor el excesivouso de pesticidas,ademásde la relativa estabilidad de esetipo de control, es fácil reconocef que uno de los aportesmás importantespara lograr un eficiente manejo de plagas y enfermedades,es el uso de de regennoplasmacon ca¡acterísticas sistenciaa esosagentes. Tales atributos de tesistencia,así como otrosde importanciaagronómica (rendimiento, calidad, etc.), se encuentrandispersosen el germoplasma. De acuerdocon estosplanteam¡entos,el sistemaquepermitela utilización de la riqueza genéticaforáneasin el riesgo de introducirproblemassanitarios,es el pasodel germoplasmaa travésdel filtro que ofrece una estaciónde cuatentena cerradade post-enü-ada El ICA cuentacon la infraestructura básicacapazde ofrecer esteservicio en Colombia. Actualmente sólo se atienden dos géneros: Saccharum y Phaseolus,bajo los convenios ICACenicañae ICA- CIAT, respectivamente.Se esperaampliarel servicioa otfos génerosvegetalesy a otros usuarios inmediatos,aun cuandoel beneficiado final siempte ha sido y será el agricultor colombiano.Esta exPectativa se hacehoy más urgenteen el país, cuando se avecina un inc¡emento en.

(6) Cuarenienacer¡adade post-entr¿da. l0 las impofaciones de material vegetal de propagación, como una consecuencia de la teciente aPertu¡a, por parte del lCA, del registro de Protección de variedadesvegetalesobüenidas dentro y fuera del Pais. Este tipo de cuarenlenaconsiste en recibir el germoplasma(semillas,pates vegetativaso plantasen crecimiento, estas dos últimas pueden estar in vitro)' sembradoy cultivado du¡anteuno o dos pedodos de crecimiento (vegetativo o reproductivo), bajo estrictascondiciones de vigilancia sanitada y agronómica. Dur¿nteel tiempo de crecimiento se detect¡n los posibles organismos plagas que hayan llegado con el material vegetal, se rcalizan tmtamientos de limpieza o erradic¿ciónde esosorganismosy los materialesque esténsanosse entregana los usuariocinteresados(ver el esquema en la Figura 1). Cuando se somete el germoPlasma vegetal importado a cuarentenade. post-entrada,se buscan dos objetivos especlficos: l.. Facilirar la entradaal pals de la dqueza genética foránea, representadaen el germoplasma importado, que será utilizada en programasde mejoramientogenético, propagándolapara lograt el effiquecimiento de los bancos de germoplasma.. 2. Eliminar los problemasfitosanitarios que puedanvenir con esematerial impofado. Para cumplir con estos dos objetivos se está reforzando la misión de la División de Sanidad Vegetal del ICA, cual es la de proteger el estado sanita¡io de los cultivos, contribuyendo con esto al logro de la sostenibilidad de la agricultura al facilitar el uso de mate¡ialesque ofrezcan rendimientos aceptablesagtonómicamente y niveles de tesistencia a plagas y que eviten o disminuenfermedades yan el uso de plaguicidas contamin a n t e s d e l m e d i o a m b i e n t a l .L o antetiof t¡ae como consecuenciafinal la contribución al desarrollo competitivo y a la intetnacionalizacióndel sector agdcola. De acuerdocon los objetivos Propuestos,las actividadesque debendesa¡¡ollarseen una estaciónde cua¡entena cenada puedenagruparse,según su meta,así: 1. Limpieza de germoplasma,cuYos métodospuedenaplicarsea semillas, partesvegetativaso plantasen crecimiento.Esosmétodosson:. Gerrnoplasma de früol eD crec¡' mienlo en condiciones de cuarcnteDEcerrrda. (fomqd¡ del archivo de Ag¡icultur¡ Tropical Vol. 33 No.l p.61).. A. Físicos:tratamientoscon agua, aire o vapor, a temPeraturasque destruyano inhiban un Patógenou otra plaga..

(7) ICA, Divisiónde SanidadVegetal B. Químicos: tratamientos con sustanciasbiocidas o bioesláticas. C. Aplicacionesbiotecnológicas: cultivos de tejidos u órganosin vitfo. La meta de esta actividad es la enadicaciónde patógenospresentesen el germoplasma. 2. Inducción de c¡ecimientos óptimos, mediante: A. Prácticasculturales:son todas las labo¡es de cultivo bajo condicionesde invemadero,específicas paracadatipo de gtupo taxonómico vegetal. B. Aplicaciones biotecnológicas: cultivo de tejidos u órganosin vitro. [-a meta de estaactividad es la ptese¡vación de los valiosos materiales genéticosen cuarentena, 3. Identificación de fitopatógenosu otrasplagas,utilizando tecnicasde deteccióncomo: Aislamiento en mediosde cultivo, bioensayos con inoculación de plantas indicadoras (mecánicamente,por inje¡to o por vectores), identificación de las plagaso sig-. Germoplasma de caña en cuarentena cedada.. l1 nos de ellos, macro o microscópicamentey también mediante Pruebas serológicas. Idealmentc se deben incluir oüas técnicas como elechoforesis y pruebas de biología molecular. La meta de estaactividades la detección de plagasen el germoplasma. Algunos críticos de la necesidad de realizarcuatentenacerradade postentmda han dicho que los organismos plagasde todasmanerasllegatántarde o temprano a invadir todas las zonas agrícolas.Pero estahipótesisno ha sido probadaafofunadamentey, Pot el conltario, muchosde esosorganismos han permanecidorestringidosen algunas zonasgeográficas.Pero si la hipótesis se llegara a cumplir, cadaaño de tardanzaen la entradade uno de esos organismosa una zona libre puederepresentarde pequeñosa inmensosbeneficios económicospara un pais, como se ha comptobadoen los análisis económicosrealizadosparavalorar los costos del control de una enfermedad o una plaga.. (. .1 ,t ). !". Paradar algunosejemplos de Co- ¡ lombia. duranteel año 1995el caficultor de la zona de mayor producción debió invertir cercade 330 mil pesospor hectáreapor año pa¡a conHolarla broca de la cerezadel café (Hypothenemus hampeiFen.), nsecto oriundo de África Central. El agricultor de bananode Urabáinvirtió 500 mil pesospor hectárea por año para controlar la sigatoka negra (Mycosphaerellafijiensis Meted. var. difformis Stov.) hongo procedente del hemisferio oriental. El control de la roya blanca del c¡isantemo (Puccinia horiana Henn.), oriunda del Japón,le cuestaal productor de flores.

(8) 12. l**",^oo",un*,1. material imnonado I f-. Cuarentena c€rrada de post-entrada. I t;;;J I. rrat"-i"nto. l-. la. Propagación (vegetativao s€xual). Tratamiento.. Figura 1. Proceso de cuarentena cerrada para germoplasma vegetal importado.. Cosecha de semilla o corte final de material de ptopagaciónasexual. 8a. Selección. Tratamientos. I¡rducción de la germinación..

(9) ICA, Divisiónde SanidadVegetal de exportaciónce¡ca de 5 millones de pesospor hectáreapor año. Ofio concepto importantea tener en cuentaesquelos olganismosplagas pueden variar ligera o marcadamente su fisiología de unaa ot¡a zonageográfica, vatiando así su relación con la planta hospeilera.Por lo cual no se puedepredecit el grado de virulencta de uno de estos organismosen una zona geográfica que ha permanecido libre de é1. Son muchos los factores ecológicos bióticos (competencras entre poblaciones,tangos de resistencia o susceptibilidad,enernigosnaturales, hospederosalternos) y abióticos (clima, ptácticas de cultivo), que intervienen en la relación planta-organismos plagas como para poder pronosticarcon exactitudel resultado de esarelación cuandose t¡ata de una pesteexótica. Para ilustra¡ lo anterior, el doctor RobertKahn (21) cita que de 614 especiesde insectosy ácarosintroducidosa EstadosUnidos, 212 han sido catalogadascomo de importanciaeconómica a pesat de que sólo 73 lo eran en sus paísesde origen- Es decir, que solame¡te L2% tuvo el mismo comportamiento. En muy pocos casosse ha tenido éxito en la prediccióndel comportamiento de pestesexóticas,corno lo cita el mismo doctor Kahn. Es naturalqueseanlasplagasexóticas las de mayor consideracióndesde el punto de vista cuarentenario;pero tratándosede germoplasmaimportado, cualquierorganismoplagaquepudiera estarpresente,exótico o no, idealmente debeset filtrado y destruidoantesde que esegerfnoplasmaseainhoducidoa los camposcolombianos.Un país no deberÍapermitir la entradade ningún. 13 tipo de mate¡ialvegetaldeficientedesde el punto de vista sanitario, mucho menos si es material de propagación. ¿Cómo podrlan los floricultores colombianosimportar esquejesde clavel infectados con Fusarium oÍysporum Sch,f.sp. dianthi, a pesatde set un patógenoestablecidoen el paísdesdehace 15 años?,o ¿cómo podría un citriculto¡ acepta¡germoplasmaforáneo infectado con el virus de la tristeza? ¿Detodaslasrazasquetieneestevirus, cuáles puede identificar con certeza? ¿Y el paquete tecnológico que tiene disponibleparasu control esfealmente eficiente? Cuandosomosconscientesque teen la identificación nemosdeficiencias de un organismoplaga, lo mismo que en el diagnósticode los problemasocasionadospor ellos, así como en su manejo y que, además,no existeuna verdaderaconcienciasanita¡iaa nivel flacional, las medidas de control preventivo son aún más necesarias. La importancia y la necesidadde impulsar y apoyar estetipo de actividad cuarentenariano sólo es llamativa desde el puntode vistateórico,sino quelos resultadosobtenidosen el mundodondese sometenespeciesvegetalesa cuafeniena cenadademuestranque el beneficiologradopor usatla riquezagenéticaforánea sin haber diseminadoorganismos plagas,es de tipo económico,social y ambiental,muy especialmentea largo plazo. A continuaciónse dan algunos ejemplosde los logrosde Cenicañacon el material que ha venido import¿ndo desdehace 15 años,asi como cifras de c'álculosde los beneficiosque en unos añosse puedanobtenercon el germoplasmade frijol importadopor el CIAT y que seha venidopasandopof cuarentena desdehaceseis años.También se.

(10) 14 dan cifras de lo que seobtendríaen caso de hacer ¡e¿lidadun proyecto que se ha planeadopata germoplasmade citncos. En análisiseconómicostealizados en el año 1995paravalorar los beneficios que ofreceal paísel uso de germoplasmade frijol liberadode la est¿ción de cuarentena(cercade 300 accesiones por año),se calculó un valo¡ de 29.385 millones de pesospor año.Estacifra se basaen el incrementoen rendimientoy reducción de costos en el manejo de plagas,una vez que los cultivado¡esde frijol adopten el germoplasmaque of¡ezcaniveles de resistenciaa plagas y enfermedadesy rendimiento aceptables económicamente. El mismo ejercicio se hizo en un p¡oyecto para trata¡ germoplasmade cítricostomandocomo ejemplola liberación de 10Oaccesionespor año. Teniendo en cuenta los mismos factores del casoanterior,y considerandoun incremento de 2.300 hectáreasen área productoratecnificada,el valor del beneficio seria de 74.619.5 millones de PesosPara el Primer año de producción, utilizando el germoplasmaliberado de cuarentenacenada. El bancode germoplasmade caña de azúcarque manejaCenicañaen Colombia contiene986 muestrasentte variedadesy clones,de las cuales590 son variedadesimportadasy liberadas por la Estaciónde Cua¡entenaCenada (convenio lCA-Cenicaña), y de ést¿s, 77% son resistentesalatoya (Puccinia melanocephalaSyd.) y el carbón (Ustilago scitamineaSyd.),dos de las más. Cuarentenacerradade post-ent¡ada importantes enfermedades.Ot¡as variedadeshan sido ya identificadascomo portadorasde genesque confieren agtonómicas excelentescaracterfsticas y/o de ¡esistenciaal carbón, a la roya, a la escaldadura(Xanthomorusalbilin¿asAsh. Dow.) y al Virus del Mosai co de la Caña.Estosmaterialesseestán utilizando como padres en pfotramas de mejoramiento(8). Como resultado, ya se cuenlacon más de 10 variedades CC, obteniüs por Cenicaña,altamente promisoriasque sin duü ooupalín los primeros puestos en área sembrada (J.L Victoria, comunicación personal, 1995). Además, algunasvariedades impofadas con atributos muy favorablesya han sido adoptadaspor los agricultores,como la V 71-51queen 1991 ocupó 11% del área total y 23% err 1995, esto, sólo para citar uno entre muchos ejemplos de las bondades ofrecidaspor el germoplasmade caña introducidoa Colombia que seha utilizado directamentepara ser propagado pof los aBricultores. La basedel programa de mejoramiento variet¡l de Cenicañaes Ia colección de germoplasma.Siete colecciones especialesson mantenidascon 43 variedadesdel grupoélite, 21 de alto contenidode azúcar,I I de tipo erecto, 8 que se autodefolian,8 tolerantesa suelos húmedos y 11 tolerantesa las sales ( 6), (7), (8). Para 1997 seguramente estascif¡as hahán aumentado, pues sólo por caracterfsticasde reststencia a enfermedadesse tepo¡tan 7 nuevasvariedadesCC (1), (2)..

(11) PROCEDIMIENTO GENERAL EN UNA ESTACIÓN DE CUARENTENA CERRADA DE POST- ENTRADA INTRODUCCION En esta sección se compilan procedimientos y pnicticas que en general deben considera¡seen una estación de cuarentenac¿rrada de post-entrada,en la cual toda actividad debe tenet como baseun alto grado de higiene y de aislamiento del medio exterior a la estación, para asl producir el mayot ntime¡o de plantas ssnasy al mismo tiempo evitar el peligro de contarninar con plagas foráneaslas plantas del medio exteriot. AquÍ se dan informaciones tomadasde la Secciónde Cuarentenade la FAO, de difefentes estacionasde cuarentenay de observacionespopias despuésde manejar gernoplasma de caña durante 10 años y de visitat otras estacionescomo la del USDA e¡rBelaville (USA), la de la Asociación de Cañicultores (SASA) en Sur .li,frica, la de plantas omamentales en Israel, entre otras. Se recomienda al lector revisar en la bibliografía de este docr¡mento los trabajos señaladoscon los nútneros (a), (9 al 2O), (23), (24), (28), (31), (37) y (38). LUGARGEOGRÁFICO El sitio geográfico más adecuadoes aqueldondeno secultivan las especies. que se van a tene¡en la estación,o por lo menosun lugar dondeno haya cultivos cercanosde esasespecies.[-os climas frios y secosson los más adecuados pueshay menosplagasque en los climas cálidosy húmedos,lo que favotece el germoplasmaen cuafentena, Las condicionesde clima cálido y húmedo facilitan el establecimientoy diseminaciónde un organismoplagaque escapede la estación. Tambiénes muy importanteque el lugar donde se establezcala estación tengamuy buenacomunicacióntemestre, telefónica y postal, buenos setvicios de energíaeléctricapermanentey de agua limpia, cercaníaa centros de información técnica y a universidades y fácil accesoa aeropuertosintemacionales. El áreaque rodealos invemadetos debepermanecermuy limpia y estarlibre de hietbaso cualquiertipo de plantas en una franja de por lo menos dos metros, y ojalá que sea en cemento o grava.Así se restringela entradahacia la estacióno la salida desdeella de organismos que puedan causar problemas al germoplasmaen cuafentena,o el escapede plagasforáneashacia las plantasdel paÍs importadot..

(12) 16 Una vezsehayanrcr¡nidoenun lugar las c¡ndiciones fisicas y de persoral que favorczcanel esablecimientodewta estación de cuare¡rt¡rra,es nec¿sariodiscutir ccn el persoralciurtlfico de la antidadque se rcsponsabilizanide dar el se¡vicio de qurent€na (el ICA or el casocolombiano), y ccn el usrario direcüodel servicio, sobreel tipo de especiesvegetalesque se po&ian sometetra cua¡enteri4 t€ni€ndo muy m cuorta lcs riesgossanitadc para el país.Orando lcs desgc sor muy altos, es necesa¡ioque el material vegetal en incuegiqr seasomaido a rmacr¡arentena ternedia, esdecir,cuarentenatloen rm lugar geogníficom dcndeno rcpresentealto riesgo;por ejemplo cuaf€ntenafespec¡es to'picales€rizoriastempladas.El Dr. Berg (4) cita el ejemplodel alto riesgoque tepresentarlapafaun paísropical cuatolenar especiesde cauchoen zcnashriLrnedas y cálidas.. EDItrICACIONES I¿s edifrcacionesdela estaciórdebenbaqueha dado sarseenlasrecomandaciotres la FAO y quepuedenresumirseasí:. Cua¡entenacerada de post-entr¿da suelo, sitio para alrnacenarel suelo tratado, henamientasy materoslimpios, cuafto para llenar materos, incinerador y/o autoclave para deshechosde empaques y de material vegetal no deseable, bodega para insumos e implementos de reserva de uso en el invemadero, oficinas, baños y cafeteria. Es fundamental que las instalaciores para toma de corriente eléctrica y de agua, así corno los sistemasde comunicación, siempte firncionencorectamente(3a), (35). Invernederos [-o primero a observarsepara decidir el tipo de invemadero(unaunidadgmnde, dos medianaso varias unidadei pequeñas) es que se facilite el conhol de las condiciones ambientales(luz, temperatura, agua,humedad), y el aislamiento entre cubiculos, que pemita su expansíón y también ques€ancoristruidoscon diseños y materiales que faciliten su limpieza permanentey, 10 más importante de todo, es que estosprevenganla entraday salidade plagas.. Edificio central Cuarto de recepción de material recien llegado, cuano de inspección, cuato de tratamiento (con cámarade fumigación, facilidades para te¡moterapia y para aplicacion de pe.sticidas)facilidades para almacenarel germoplasmaque no se pueda atender inmediatamente (cuarto ftio y/o refrigeradotes),laboratorios pata diagnóstico y biotecnologla (con cuartos de cecimiento y/o fitotrones), biblioteca, facilidades para mantener coleccionesde organismospestede importancia cua¡enteriaria,cuarto de lavado y estetilizaciónde materialesde laboratorio, unídad de tratamientode. Dospuertasen el iovernrdero,.

(13) ICA, División de SanidadVegetal La ent¡adaal invemaderodebeser una pequeña sala de recibo con dos puertas,(las que no se abren nunca al mismo tiempo,con el fin de prevenir contaminaciones).En este sitio debe instalarseuna pozetaparadesinfección del calzadoy otros elementosque vayan sobreel piso,como canetillas. El agua de deshechoque sale del invernadero debe set recogida en tanques de cemento y tratadaperiódicamentecon desinfectantes, Es muy deseabletener un pequeño invetnadero separadodel resto pero con las mismas caractefísticasde construcción y facilidades en donde se puedanmantenerplantasindicadoras para bioensayosde diagnósticoy para terapias.. l7. E n t o m o l ó g o e s p e c i a l i z a d oe n identificaciónde insectosy ácatos asi de importanciacuarentenaria, como en la aplicaciónde pesticidas. Ingenieroagrónomoespecializado en horticultura aplicadaa cultivos en invemade¡o. El personal auxiliar de técnico, tanto para trabajos de labo¡atorio como de invemadeto, dependetá del tamañode la estación,es decir, del número de especiesvegetales tratadasy del número de accesiones oue se reciban.. Tanto el personalcientífico como el auxiliar de técnicodebe¡ecibir entrenamientosespecíficosparael manejo de germoplasmaen cuarentenaceEl mantenimientode todaslas insrada. Este manejo es diferente al que talaciones de los invernaderosha de sepuedadar a materialde propagación se¡ muy oportunoy meticuloso. bajo condicionesde invemaderocomercial o de investigación,y es diferentetambién al manejo de cultivos en PERSONAL campo abierto y, por lo tanto, debe concebirseen forma diferente a como De acue¡docon las recomendaciones lo tratadaun agricultorcorriente,un fidadaspor el Dr. G. Berg (4) y por la firtomejorador o cualquier otro investientidad ma alemana PRoIND-GMBH, gador en su centro de investigación. contratadapor la Junta del Acuerdo de Con este mismo crite¡io de exclusiviCartagena-Comisiónde Comunidades ded se debe trabajar en los laboratoEuropeaspara elaborar el proyecto Esrios. Las condicionesespecialesde una tación de Cuarentena Vegetal-Colomestaciónde cuarentenacerradapara bia (35), los requerimientosde personal germoplasmaimportado son únicas y son: asl debenconcebirsepermanentemente por todo el personalque allí trabaja. 1. Director de la estación:FitopatóloEsa es la responsabilidadde cadauno. go (Ph. D), especializado en virología y biotecnologla. Las decisionesde tipo técnico son responsabilidadde la entidadencarga2. Vicedirector: Fitopatólogo espeda de dar el servicio de cuarentenacecializadoen biotecnología. nada (en Colombia es el ICA), aun parte cuando podrán se¡ discutidascon el Además, como del grupo usuafio. Es por esto que el personal cientlfico, el Dr. Berg recomiendala cientÍfico debetener [a formación acacolaboraciónde:.

(14) Cuarcntena cer¡ada de Dct- ent¡ada. 18 démicaqueseseñalóantes,asÍcomo el ent¡enamiento especifico sob¡e esta áreade ttabajo que, como seha venido insistiendo, es especial y única. MANEIO DEL MATERIAL VEGETAL Recibimiento l.. A la llegada a la estación del paquete con el germoplasmairnportado, se debe registrar toda la infotmación conce¡niente a su origen.. In6pección del moterial,. 2. El paquetedebeabritseen un cuarto especialparaello, inspeccionarse cuidadosamentey, en caso de infección o infestación, dade un tratamiento químico inmediatamente.Si el mate¡ial llega muy deterio¡ado debeser eliminado por incineradoro por autoclave. 3. En un libro de registro especialse debenanotartodoslos datosrelativos al material vegetal: númeto de individuos pof accesión,aspecto fisico, aspecto sanitatio, tratamiento que sele dio y por supuesto origen y fecha. El libro de registro debe tenet suficienteespaciopara anotar dátos que se tomen durante los ciclos de crecimientodel material en el invemadero.. nar problernassanitariosen el invernadeto. 6. Segúnla especievegetal y el tipo enviade materialde propagación do, es aconsejablebuscarmétodos de siembrabajo condicionesartificiales controladasantes de llevar elmaterial a potesen el invemadero. Son muchos los métodos descritos para semilla verdaderao para material de propagaciónvegetativaque van desdeuna simple germinaciónen bolsasplásticasen una incubadora,hastael cultivo de embriones in vitro. Esta "pregetminación" puede incrementar la probabilidadde preserva¡el mate-. 4. En todos los casos,los materiales de empaquedebenser incinerados o autoclavados. 5. Todo el material, aún el de apariencia sana debe set sometido a tratamientoquímico paraeliminar plagas. En algunos casos, como con estacasde caña de azúcat, es aconsejable someterlas a termotefapia,puesestocontribuyea elimi-. Pregermioación de estacasde caña..

(15) l9. ICA, División de SanidadVegetal. rial y ademásda la opoftunidadpata rcalizat una segundaselección sanitariay así evitar problemasen el invemadero(26 ), (28) 7. EI materialtratadoo pregerminado se siembraen potesy a densid a d e s e s p e c í f i c a sp a r a c a d a especievegetal,cuidando siempre que el espacioentre plantas sea suficientepara que su crecimiento seaóptimo.. t. ,. Rtsultados de pregerminación.. 8. Bajo ningunacircunstancía se debetán mezcla¡ diferentesimportacionesen un mismocubículo 9. Una vez hechala siembra,es aconsejableelaboratun mapade la distribución de los potes con el númeto de identificación de cada planta,la fechade siembray el origen. Este mapa se pondrá a la entradade cadacubículo.Allí mismo se podrán añadir datos sobresalientesdel estadosanitariode cada plantaa lo largo de su crecimiento. Esto evita entradasa los cubículos,. Siembra en materos.. I. 10. Si el materialllega muy tardeen el dia pata ser inspeccionadoy tratado, se debe guardar en nevera (610oC) y bajo condicionesen las cualesno se Ceteriorehastael momento en que puedaser atendido, esforzándosepor hacerlo lo mas pronto posible. Invernadero y plantas en crecimiento. I. Aislamiento entre cubículos.. 1. Todas las plantasdeben ser inspeccionadasdiariamente por el profesional especializado.Aquellas que muestfensíntomasde enfe¡medad o presenciade plagas deben ser indexadascuidadosamente. Si se trata de un patógeno exótico, la decisión sobre qué ha-.

(16) zo. Cuarentena ce¡¡adade post-entrada otra que estédisPonible.Parabactetias y hongos también se deben aplicat todas las técnicasdisponibles.Los resultadosde las pruebas serológicasdebenconfirmarsecon repetición de las pruebasrealizadas a diferentes intervalos para (32),(36). evitarfalsosresultados alguCuandolasplantaspresenten na enfermedad,se debe tratar de limpiarlas.Segúnla especievegeul y el tipo del patógenoquesedes e e e r r a d i c a r ,e x i s t e n d i s t i n t o s tfatámientoseficientesreportados a nivel mundial (ver referencias de la FAO - IPGRI), bibliogrdficas queel fique indispensable hace lo estudie responsable los topatólogo tratamientos de y aplique.Estos (sustancias limpieza son químicos biocidas o bioestáticas),físicos (termotefapias,excisión de partes y cultivode tejidosy órenfermas) ganos (yemas apicales,meristemos) y embriones in vito . Sobre el temaexisteun g¡annúmerode publicaciones(22), (27) y (39). Una v e z r e a l i z a d al a l i m p i e z a s e r e quiereque las plantasseannuevamenteanalizadas.. Mepa er ls puert¡.. Inspe.cióB plent¡ por plsnts". cer con las plantas infectadas o con la importacíón entera, dependerá del tipo de enfemedad de que se ttate, la cual irá desdetratamientos físicos, qulmicos o limPieza Por cultivo de tejidos in vitro, hastala destrucciónde Plantaso de la importación entera,si no es Posible erradicar el ProblemaPor ningún método (21), (25). 2. Para detect¡r Patógenoscomo virus, viroides,del tipo de mycoPlasmas o espiroplasmas,es necesario sometertodo el materiala Pruebas de identificación por serología o por plantasindicadoras,o Pruebas de biologiamolecularo cualquiera. )l. Mientrasse llevana cabolos anál i s i s d e l a b o r a t o r i o ,l a s p l a n t a s "sospechosas"de estar infectadas se aislan en cubículos destinados paraestefin, a loscualessóloentra el especialistaresponsable.. ) - Todas las plantasinfectadasque no se pudieton limpiar deben ser desttuidasdentrodel invemadero, en un cúbiculo aparte,usando un desinfectantefuerte en el matelo y luego se retieneasi durante24 horas; despuésse sacatodo hacia el.

(17) 21. ICA. División de SanidadVeeetal. t. t. incineradoro autoclave,en bolsas o en contenedotesmuy segufos. 6 . Todo el cúbiculodebeIavarsecon desinfectantes unavezse hayaeli minado el material enfermo. sepa7. [-asplantasdebenmantenerse fadas r¡na de otfa enhe mateto Para que no se toquenentres[ irulecesariamente-En casode tenerque to mar muestraspara análisis,debe hace¡secon las manosreciénlava- Plantas de caña obten¡das in d a s o c o n g u a n t e sl i m p i o s .y l a punlas merislemáticos. muestrase tomarácon cuchillasrc cién flameadas,aun cuandose tfate de muestrasde la mismaplanla.. viflo a partir de. 8 . El materialvegetalde muestraque va al laboratoriopa¡aseranalizado se llevará en cajas cerradasmuy seguras(especialmente si se trata de artrópodos)y marcadas. 9 . Por todos los mediosdebeevita¡se el contacto innecesariocon las plantas.. I. q. 10. Todoslos restosde las muestrasde laboratorio deben ser incinerados o autoclavados,lo mismo que los Pfantes de caña enraizad^s it mediosde cultivos y otroselemen tos que se hayan usado para la identificación de organismosplaga. El agua de deshechotambién debetratarsequímicamenteen cajas especialesde recoleccióny por ningún motivo se debe permitir que aguasin tratar se infiltre en el sueloo salgaa la cañeríacomún l l . D e s d el a l l e g a d ad e l m a t e r i a l y, du¡antesu crecimiento,se pueden presentaranomalíasde tipo fisico o fisiológico (no patológico) que pueden impedir el crecimiento y sobrevivenciadel material,a pesar de aplicar las prácticas culturales Plahtas ex in establecidas.En estecasoel esDe-. vitro.. rúro enraizando €n g¡avilla..

(18) cenadade post-entrada Cuarentena. 22. Plantqs ex ¡r vito tr¡nsplantodas a suelo.. Pero si no es por goteo, debe hacersecon cuidadode no tocar ni salpicarel follaje, ni hacet salir el suelo de los materos.El excesode humedaddebe evitarse,pues ello favorecealguriospatógenos.El piso de los cubiculos puede mantenersehúmedopermanentemente, cuidandoque los materosesténcolocadossobre algunabaseque les permita estar separadosdel piso. Así se evitan contaminacionesy se facilita la limpieza.. 1 3 .El inve¡nadero debe mantene¡se. Pl¡ntas ex ir vito. de 4 mese6 de €dod.. cialista tesponsabledebe acudir a técnicasde cultivo de tejidos u órganosin vitro pa¡atfataf de salvat el material.Segrinla especievegetal y su estadode desanollo,existe gran cantidadde técnicasreportadas a nivel mundial (ver referencias bibliográficas de la FAO IPGRI), que debenset estudiadas, evaluadasy adoptadasparapreservar el germoplasma(3), (1 1 al 20),. (22),(2e),(3o). que el riego 12. Es muy aconsejable por goteo, cual evita el consea lo tacto del operador con las plantas y evita también mojar el follaje.. bajo condicionesde corstrucción que asegurensiempreel aislamiento de cada cubículo. Esta revisión debe ser permanentey los posibles daños ocurridos o a ocurri¡. deben ser reparadosinmediatamente(roturasde vidrios,gtietasen las pared e s , d e s a j u s t ed e m o l d u ¡ a s d e ventanasy puertas,dañosen puertas,huecosen mallaso en element o s d e u n i ó n c o m o c au c h o s , esponjasy pastapara vidrios desgastada,entremuchosmás).Igua}menteimportantees la revisión de equiposcomo ventiladores,higrotermógrafos, termostatos, cortinas pararegulaciónde luz, poleas,equipos de regulaciónde temperatura, termómetros,equipos de riego, equipos para aplicacionesde químicos, instalacióneléctricay para aguay sifones,entreotros elementos que se usan en el invemade¡o. T o d o d e b e m a n t e n e r s ee n m u y buenestadode funcionamiento.Fallas en cualquierade los elementos que componenel invemade¡oo en los equiposy elementosqueseusan en é1,ponenen peligro la supervivenciadel germoplasmay rompen el aislamiento,por lo cual es nece-.

(19) 23. ICA, División de SanidadVegetal sario implantar una ¡utina de mantenimien¡o pnnanente. 14. Alrededor del invernadero debe haber una zona libre de yerbasy en perfecto estadode limpieza , de por lo menos dos metros. En caso de usaralgrínherbicida,debeseraplicado por el ingeniero agrónomo tesponsable para evitar daños al germoplasmadentro del invemadero.. Fraqia libre de vegetació[slrededordel inver-. 15. El inve¡nadero por dentro debe nodem. Entradavistadesdelejos. mantenersesiempremuy limpio (suelo,ventanas,potes). Se deben usar desinfectantesque no deterioten los materialesde la constfucción ni los equipos. Especial cuidado debe obsetvarsepara que no se afecteel materialvegetal.Al desocupatun cublculo, debelavarse y deshfectarse todo, incluyendo el techo y, si es del caso,pintar las paredes. 16. A la entradadel invemaderosedebe instalar una pozetapara desinfección del calzado y de los elementosque vayan por el piso, como cafielillas. El desinfectante siempredebeser fresco. 17. En caso de infestacionespor ácaros o insectos que amefiten una aplicación qulmica para controlarlos,éstadebehacersea la última hora del dia laborabley dejar cerado el cubiculo du¡antemínimcr 24 horas,tiempo duranteel cual se pondrá una señal para no entrar ahl. Cumplido el tiempo, seventila dutante 6 a 8 horas,usandoventiladores,o duranteun lapsomayor si no se cuentacon eseequipo. 18. Dependiendodel grupo taxonómico vegetalde que se tfate y de Ias experienciasque se hayan tenido. Aplicación de agroquimic6 dentro d€l invernadero.. con su manejo en invemadero,se debeestablecerun sistemade control preventivo de plagas que integre los métodosprobadoscomo máseficientesy segurosparala especie vegetalen cuestión,siempre bajo la consigna de presetvar el germoplasmay de evitar escapede plagas. 19. Igualmentese debe establecerur cronogramade aplicacionesde fe¡tilizantes, de acuerdo con los análisis periódicosde suelo y, si fuera necesario,de materialvegetal..

(20) Cuarentenace¡radade Post-ent¡ada 20. Las bombas de aplicaciones de plaguicidas y de fertilizantes deben lavarse cuidadosamentecon agua y jaMn despuésde cada uso Se recomienda tener bombas sePamdas pata cadatipo de aPlicación' 21. No se debe permitir que crezcan yerbas en lo materos. 22. I ^" hojas secasy ot¡as Partesvegetales que no le sirvan a las plantas, asl como los deshechosproducidc en las propagaciones,deben elirninafse Por autoclave o incine¡ador. Estaspartesse sacandel invemadero en bolsas cerradas,. 26. En los casosde especiesvegetales que se propaganasexualmentedurante el Ptoceso de cuarentena,las plantas madres se conservan hasta cuandolas plantashijas seencuentren bien establecidasy luego se incinerano autoclavan. Materos y suelo para siembre 1. Li tiera, arena, materia otgrínica, mezclasde comPosto cualquier otfo elementoque se usepara llenat los materos del invemadero debe esterilizarse por medios quimicos como el metilditiocarbamato de so-. 23. Todos los datos concemientesal estadosanitario de las plantasdeben registrarce:slntomas del disturbio registrado,edad,PtuebasY tesultadosde los análisisde identificación del organismo Plaga causantedel distulbio, tratamientos de limpieza usadosY resultados de la indexación Posterior a la limpieza. Estos datos aParecerán frente a cada accesión en el libro de registto donde se anotaprepsrar ron todos los datos tomados a la Estsces de csña co¡tadcs pera riedad y planta madre remanente' llegadadel material.Se debesistematiza¡ esta información.. la ve-. 24. Las aplicacionesde agroquimicos (nombre del producto, dosis, fecha,costo,rcsultadosde eficacia), támbién se anotan en un libro diferente al de registto y se sistematiza la informaciólr. 25. Los registros de organismosplagas detectadosen el germoPlasma se informan al servicio de sanidad vegetaldel pafsY sehacenconocer intemacionalmente.Esto da fundamentos para fijar ¡equisitos sa- Estecasde caña listas para ser liberodasde la n i t a r i o s p a r a i m P o t t a ci o n e s estaciónde cüarentenscerrad¡. oosteriores..

(21) ICA, División de SanidadVegetal. 25. dio (Vapam), formaldehido (formol), dazomet(BasamidG), o cualquier otro buen desinfectantedel suelo. También puede esterilizarse pot autoclave.Cualqüera que seael método, es necesafio calcular muy bien las dosis para que el resultado final seaun sr¡elorealmenteestéril. El sueloya estérilse almacenaen cajoneslimpios y se gumda muy bien tapado hasta su uso. Dependiendodel clima y la posibilidadEsterilizsción del suelo por autoclave. de ser infestado,la duraciónde su esterilidadvariará y ésto lo determinará el profesionalresponsable. Invernadero - laboratorio para bioensayos J. Una vez sehayanusado,los materos deben desinfectarsepor medio Al lado del invemade¡opa¡a cuarentede químicos o por autoclave,si el na se recomiendaconstruir otxo inve¡materiallo permite.Restosde suenadero con las mismas cafacteristicas lo quehayanquedadoen ellos desanterior, posiblementemás pequepués de la desinfección, se lavan del pero con facilidadescomo mesón ño, conaguayjabón y unavezlimpios con lavamanos, estanteparavidrierÍa, se almacenanen estantes. algunosreactivosy elementosbásicos pam tomar muestras de plantas y para 4. Todo el suelo que se haya usado para siembtasdebe esterilizarse realizarobservaciones sobteellas,misalgadel invema- croscopio,esteroscopio, lupas,etc.,y inmediatamente una fuentede aguadestilada. dero. Sólo en los casosen que se hayadetectadouna plagadel sueEn estesitio se mantienenplantas denlo, éstesetrataquímicamente pararealizar bioensayos. indicadoras tro del invernadero,una vez se haya llevado la plantao partede Para cadatipo de patóteno y pa¡a ella al laboratorio para intentar cada tipo de plantaindicadoraexisten limpiarlao sehayatomadola decipruebas específicasde inoculación. Se sión de eliminarla. puede inocular mecánicamente,por 5 . Al saca¡los materosusadosdel invectoreso por injerto. Las plantasindivernadero, serecomienda tenerescadoraspuedenser desdeel tipo de pepecial cuidado de no botar queñasherbáceas(p. e. Dianthus barpanlculaso terronesal piso, aun batus)hastaleñosascomo los cítricos. cuando se trate de materosdonde Por lo cual es necesatioproveer el esparacadacasoy sumicreció material sano. Pot esto, se pacioadecuado ¡ecomiendausar carretillasgran- nistra¡ las condiciones ambientales (luminosidad,temperaturayhumedad) des o catritos transportadoresy p a ¡ a q u e e s a sp l a n t a s i n d i c a d o r a s compactarel suelode cadamate¡o con palustreo pala, muestfenlos síntomasesDerados.

(22) 26 Si el patógeno que se inocula en las plantas i¡dicadoras es lransmitido por vectores, es necesatio aplicar el plaguicida especfficobajo una programación de cont¡ol Preventivo, una vez se haya realizadola inoculación si fue por vectores,o desdeel comienzo de las pruebasde inoculación si estasfueron mecánicaso pof injerto. Estosehace paraevitat escapede vectores,capaces de diseminarenfermedades. Como estas plantas tienen una edaden la cual expresanmejor su susceptibilidadal patógenoen cuestión,es necesatio mantene¡ un stock permanenteque permitautilizar estasplantas en el estadode mayor susceptibilidad. Las plantasdemasiadoviejas se debendescafar, a menosque seespere cosecha¡ semillas de ellas; pero esto siempre y cuando se trate de plantas que se usaron con Patogenosque no produjeron infección sistémica. Las plantas inoculadas con este tipo de Patogenos deben set descartadasuna vez el bioensayohaya terminado. La duración de la pruebade indexación puedeir desde4-5 díashastaalgunos meses,dependiendode la especie Yegetal. En este invemade¡o se deben observat las mismas medidas sanitarias de mantenimientoy de manejo en general que en el de cuarentena.Pero la entradaa él debeser aún másrest¡ingida que en el de cuarentena,y el personal encatgadodebeestarmuy bien capacitado e inst¡uido sobte los riesgos sanita¡ios del material a su cargo. EI personalauxiliar debe ser exclusivo pafa estazona, En este inYemadefotambién puede hacersetermoüerapiaa Plantasque hayanresultadoinfectadaspor patóge-. c€radade PosFent¡ada Cuarentena nos sistémicos.En estecaso,de plantas en crecimientose toman yemasapicales o meristemosy se cultivan in vitro. Estatécnicaque combinatermoterapia y cultivo de tejidos in vitro, esmuy eficiente para limpiar el germoplasma. Sobre este tema hay gran cantidad de información que el especialistadebe estudiar,evaluary aplicar con el objetivo de preservarel valioso mate¡ialen cuarentena,(27 ), (36 ) (entre muchas más publicaciones). Restriccionesal acceso Paraevitar el desgo de escapede organismos quehayanllegadocon el material vegetalque eslá en cuarentena,es conveniente: 1. Restringir la ent¡adaa personas extrañas,aun a los alrededoresde la estación. 2. Prohibir el pasoa los invemaderos de personal diferente al asignado exclusivamenteparaesazona. 3. El personalautorizadodebeentr¿¡ a los invemaderossólo cuanoosea absolutamentenecesario 4. El número de personalautorizado paraentrara los invernaderosdebe ser el mínimo necesario. como visi5. Otro tipo de prerconal, tantes autorizados,pueden observar las plantassólo desdeafuera. 6. El personalautorizadoentra a los invemaderoscon botas de caucho y batas de laboratorio, que deben permanecermuy limpias. 7. Al ent¡ar al invemadeto,las puertas se demo¡anabiertasel mínimo de tiempo posible,y la extemay la interna nunca se deben abrir al mismo tiempo y menosmantenerlas abiertas..

(23) 27. ICA, División de Sanidad Vegetal. impofadas, pero en dondela yema no prosperó.Mantener material enfermoo propagarloes mantener un foco infecciosodentro de la estación, es decir, es mantenet el inóculo capazde infectar el material sano.. MEDIDAS ESPECIALES DEPRECAUCIÓN l.. Es necesariocorsiderar que el material importado (semilla, partesvegetativas o plantas) que se recibe, puedeser portador de algúLnpatógeno (vinrs" viroides, organismos de tipo mycoplasma,espiroplasmas, bacterias, hongos o nematodos),o de insectos,ácaros,o malezas.Además,que éstospodían no estarregistradosen el pafs,es decir ser exóticos y por lo tanto de mayor riesgo sanitario.Estosorganisrnos peste pueden esta¡ localiz¿dos superficialmente sobre el tejido vegetal o pueden ser llevados inüemamentey su detección puede ser directa por medios mac¡oscópicos o microscópicos;también por técnicas serológicas,bioqui micas, por observación de síntomas en plantas indicadoras,entre ot¡os métodos, según el tipo de material vegetaly el organismode que se trate (5), (32), (33), (36). Cada espccievegetaldebe ser estudiada previamentepara conocer de cuálespatógenosu otfasplagas puedeserpoÍadora y así prepararsetécnicamenteparaidentificarlos desdeIa llegadaa la estacióny durante el tiempo de crecimiento de las plantas, pues algunos patógenos, especialmentelos de tipo de infección latente. son detectados con mayor facilidad en plantasen crecimientoo en su progenie.. 2. Nunca se debe propagarmaterial (yemas,esquejes,tubérculoso semilla) que provenga de material enfermo.Tampoco se debenutilizaf patronespa¡ainjerto que seutilizaron antes para ínjertar yemas. 3. Cada accesióndebe tratarsecomo un grupode individuostotalmente independientede otro; y, dentrode cada accesión,no debe asumirse que todos los individuos que la componenprovienen de la misma planta mad¡e.Por lo tanto,cuando secertifica la sanidadde un indivrduo es para él o susdescendientes y no pataotrosindiviúnicamente. duosde la misma accesión. ,1. Jamásse liberará de Ia estación materialal queno sele hayaobservado al menosduranteun período de ctecimientoy seconstaleque al momento de enttega está libre de plagas.. 5 . Cada accesión,cada individuo de una de ellas, debeser considerado como un elementode inmensovalor genético,como un posibleportador de genesde resistenciao de cualquierotra buenacafactefÍstica quepuedaserut¡lizadaparamejorar las variedades de los cultivos. Por Io tantosu manejoha de conducir a preservatesariquezaforánea, obviamente sin que esto representeun riesgo sanitario. El servicio de cuatentenacerada de post-entradadebeser considerado,visto y tratado,no como una barre¡aa la entradade germoplasma, sino como una barreraa los problemassanitarios.Por lo tanto, el materialenfermoo infestadodebe trata¡de limpiarsev el débilde-.

(24) Cuarentenacerradade post-entmda. 2E be t¡atat de pteservarsepor los medios más eficientesque se pueda. Existen técnicasde cultivo de tejidos u ótganosin vitro excelentesy a veces,las únicas técnicasdisponibles paralograr esteobjetivo, como se ha comprobadoen infinidad de casos.OÍos métodosde limpieza, corno quirniotetapias y terhoterapias,a vecesno son suficientes. E¡ todo casoel malerial que se haya limpiado debesersometidoa selección sanitatiaantesde cefificar su sanidad.El serviciode cuatentena tiene la responsabilidadde preservar el germoplasmaa su cargo hastadonde su infraestructuratécnica y física lo permitan y sin que esto signifique un riesgo san¡tario para el germoplasmaque se encuentresano, ni para las PlantasY cultivos fue¡a de la estación. Las ventajasde tipo económico,ecológico y social que ha ofrecido y que ofrece la diversidad genética (nacional y foránea) son invaluables, así que cadaindividuo en cuarentena merecetodo el esfuerzoposible para ser preservado.. 7. Cuando se libere material de propagaciónvegetativa(estacas,esq u e j e s ,y e m a s ) , o s e m i l l a s ,l a s plantas madres deben se¡ destruidas una vez se haya confirmado queel materialliberadoseencuentre seguro.Podránguardarsemuest r a s d e a c c e s i o n e ss i e m p r e y cuandoel usuarioque las importó, 1oautoricepor escrito. Siempre existe la posibilidad de que las plagasintroducidascon el germoplasmapuedanescaPardel invemadero, de allí que todas las medidasde seguridaddebancun'plirse rigurosamente.Este peligro de escapeexistedesdeel momento del recibimientodel materialvegetal en adelante. Lasposiblesvíasde escapeson muchas:conientesde aireal abrirlaspuertas,orificiosen la estructuradel edificio, aguasde deshecho,suelo y otfos elementos de deshechoy ademáslos transportadorespasivoscomo la ropa, zap a t o s , c a b e l l o , e l e m e n t o sd e trabaio.etc..

(25) ICA, División de SanidadVegetal. ALGUNOS PATÓGENOSDETECTADOS EN CAÑA DE AZÚCAR DURANTE EL PROCESODE CUARENTENA CERRADA EN ESTACAS AI]N NO SEMBRADAS. Estecás en esfado de pregerminación que muestran pudriciones fungosas.. Ceratocyslisparadora causante del mal de la piña.. Glontereua tucumsne¿J¡i caüsante de ls pudrición roja.. Xanthomonas vasculorum c üss'¡le de la gomosis de la caña.

(26) Cuarentena cenada de post-entÉda. ALGUNOS PATÓGENOSDETECTADOSEN CAÑA DEAZÚCAR DURANTE EL PROCESODE CUARENTENA CERRADA EN PI-A.NTAS. Xanlhomonc vaculoru.m, Claübacter tyli causante del raquitismo de socas(RSD).. Xanthomonss olbilir'g¿¡s en cogollosde pls¡tes.. Virus del mosaico de le cañe de gzúca¡ lSMVl,. Xarathomo nas albihn c ans,.

(27) ICA, División de SanidadVegetal. 3l FAO - IBPGR. -1989. Technical guidelines for the safe movement of Edible Aroid Cermplasm. FAO IBPGR, Rome. t2. FAO - IBPGR. 1989.Technicalguidelinesfor the safemovementof C-ocoa Germoplasm. FAO - IBPCR, Rome. 13. FAO - IBPGR. 1989.Technicalguidelines for the safe movement of Sweel Pola¿oGermoplasm.FAO, IBPGR, Rome. ll.. BIBLIOGRAFÍA 1.. ÁNGEÍ,, J. c.; VICTORIA, J. I y GUZMAN. M,L, 1995. Control de la esc¿ldadur¿de la hoja (Xanthomonas albilíneas) et el Valle del CaucaMemorias del Congreso de Ascolfi, Medellin. p. 2?. 'l. ANGEL, J.C. y VICTORIA, J. l, 1995. Seguimientode variantesdel Mosaico de la Caña de Azúca¡ en el Valle del Cauca.Memori¿sdel Cong¡esode Ascolfi, Medellín, p. 28. 3.. AUSTRALIAN PLANT QUA. RANTINE SERVICE, 1985.Planr TissueCultu¡eand Quaranline.Folleto lnformativo. 4 p.. 4.. BERG, G. 1977, Post - entry and intermediate quarantine stations. In; PIanthealthandquarenlinein intemational transfe¡ of genetic resources. Hewilt, W,B, andChiarappa,L. (eds.). CRC hess Inc. USA, pp, 315-326.. 5. BOS, L. 1977. Seed-bome viruses. In: Planthe¿l1hand qurantine in Intemational T¡ansfe¡ of Genetic Resou¡ces. Hewitt. W.B. and Chiarappa,L. (eds.)CRC PressInc, USA. pp 39 - ó9.. 6.. CENICAÑA. 1990,Informe Anual. Cali, Colombia. CENICAÑA. 1991.Informe Anual. Cali, Colombia. CENICAÑA. 1992.Informe Anual. Cali, Colotnbia.. 9.. FAO, 1978. Introducción y dispersión de plagas en América Latina: análisisy perspectivas.Boleln Fitosanitariode la FAO 26 (2')141-52.. 10. FAO. 1983. Operational procedures and practicesfor post - entry plant quarantine stations.Mimeogmfrado, 15 p.. 14. FAO - IBPGR, 1989.Technicalguidelines fo¡ the safe movement of Yam Germoplasm.FAO - IBPGR, Rome.. 15. FAO - IBPGR, 1990.Technicalguidelinesfor the safe movementof [-egume Germoplasm. FAO- IBPGR, Rome. 16. FAO - IBPGR. 1991.Technicalguidelines for lhe safe movementof Citrus Ge¡moplasm,FAO - IBPGR, Rome.. 17. FAO - IBPGR, 1991.Technicalguidelines fo¡ the safe movement of C a s s a v aG e r m o p l a s m . F A O IBPGR, Rome. lE. FAO - IPCRI. 1994.Technical guidelines fo¡ the safe movement of Small F¡uit. FAO - IBPGRI, Rome. 19. FAO - IPGRI. 1996.Technicalguidelinesfor thesafenlovementoffacalyptusspp. FAO - IPGRI, Rome. ?0. FAO - IPGRI -1996. Technicatguidelines fo¡ the safo movement of StoneFruit. FAO. IPGRI. Rome. 2t. KAHN, R. 1977. Planr quarantine: principies, methodology,and suggesled approaches,In: Plant he¿llh andquarantine in international transfer of genetic resources.Hewitt, W . B , C h i a r a p p a ,L . ( e d s . ) C R C Press.USA. pp. 289-307,. 22. KAIIN, R. 1979.Tissueculturqaplicationsfor plan quarantine.In: P¡ac-.

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