UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

FACULTAD DE PESQUERIA

PROYECTO DE TESIS:

“TASA DE CONSUMO DE OXÍGENO Y ACLARAMIENTO DE LA CONCHA DE ABANICO Argopecten purpuratus EN RELACIÓN AL TAMAÑO EN DIFERENTES ZONAS DE LA BAHÍA DE SECHURA”

EJECUTORA:

Pamela Evelyn Cabezas Huatuco

ASESOR:

Dr. Jaime Mendo

La Molina, Lima- Perú 2013

I. INTRODUCCIÓN

En el Perú, la producción de conchas de abanico se ha incrementado aceleradamente en las últimas décadas debido a su gran demanda en los mercados internacionales. (Mendo et al.

2008). La maricultura de estos pectínidos tiene carácter de exportación, destinándose los productos preponderantemente en estado congelado. (Mincetur, 2008).

Una de las zonas que sustenta las exportaciones de concha de abanico en el país es la Bahía de Sechura en la Región Piura cuya producción se basa principalmente en el cultivo de fondo (Gonzales y Yépez 2007). Esta región ha tenido un crecimiento significativo en los últimos años por las exportaciones, representando un 82% de la producción de concha de abanico en el Perú, según informó la directora Regional de la Producción al diario el Correo en el 2012. Sin embargo esta actividad ha significado una siembra masiva sin sustento técnico que podría poner en riesgo su sostenibilidad. (Mendo, 2011).

Es conocido que la sobrecarga de las zonas de cultivo puede alterar el equilibrio natural de la Bahía en aspectos como calidad química de aguas y fondo, equilibrios sedimentarios y condiciones físicas que deriven en una pérdida de la productividad de la Bahía (Boynton et al. 1980, Dame et al. 1980). Por esto, la importancia de la determinación de la capacidad de carga que necesita el conocimiento de los procesos fisiológicos como son la tasa de respiración y filtración para entender las relaciones del organismo con el medio.

En este contexto, la determinación de los requerimientos energéticos, ecología y fisiología de la concha de abanico Argopecten purupuratus in situ es importante para conocer los

flujos energéticos que pueden ser usados en la estimación de la capacidad de carga en términos productivos y ecológicos (Phillipson 1975). La tasa de respiración y la tasa de aclaramiento son dos parámetros importantes y necesarios para contribuir a la determinación de la capacidad de carga y se sabe que estos a su vez están muy relacionados al tamaño de los individuos y a diferentes parámetros ambientales (Flores 2012 y Duarte 2003).

Es por ello que en esta investigación se pretende estimar las tasas de respiración y aclaramiento de la concha de abanico considerando además de la talla, diferentes habitas que representan las áreas más comunes usadas en el repoblamiento en la Bahía de Sechura.

II. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

El éxito de un cultivo de la concha de abanico Argopecten purpuratus está relacionado a la disponibilidad de alimento y al oxígeno disponible del medio ya que ello condiciona la densidad de siembra. Se conoce que existe un mejor crecimiento de la concha de abanico a densidades bajas y por lo tanto mayor disponibilidad de oxígeno y alimento.

La Bahía de Sechura presenta una gran producción de conchas de abanico que ha conducido a un incremento de las áreas de repoblamiento y al aumento de las densidades de siembra, presentando en algunas zonas densidades de hasta 200 individuos por metro cuadrado. (com. Pers. Luis Ysla). La disponibilidad de oxígeno y alimento en esta bahía puede ser afectada por cambios ambientales del medio, así como por el consumo tanto de los organismos cultivados como por el metabolismo microbiano en la degradación de las biodeposiciones, esto indica que la cantidad de oxígeno disuelto del medio podría ser en algún momento insuficiente para soportar la demanda energética de crecimiento de estos organismos.

Por otro lado, no todas las áreas de repoblamiento dentro de la bahía presentan características iguales en crecimiento, que si bien es cierto puede explicarse por factores genéticos también puede ser resultado de factores exógenos como son la temperatura, salinidad, oxígenos disuelto, etc propios de cada área. (Sicard et al, 1999).

Las condiciones ambientales de determinadas épocas del año producen alteraciones bio- oceanográficas que en diversos grados afectan principalmente los cultivos de concha de abanico. Gonzáles et al. (2012) concluyen que las zonas de impacto no son siempre

las mismas y que obedecería a condiciones locales en la que se generaría modificaciones en el sistema de circulación a microescala, permanencia de eventos de floración algal, entre otros factores.

Aún no se han realizado investigaciones sobre crecimiento en diferentes zonas para poder determinar si existen variaciones dentro de la bahía, así como tampoco se han realizado investigaciones in situ que determinen las tasas fisiológicas como las tasas de consumo de oxígeno y filtración que presentan los organismos en diferentes áreas de repoblamiento de la bahía y estaciones del año. La mayoría de los trabajos relacionados con la alimentación y estudios fisiológicos de pectínidos se realizan en condiciones controladas que no necesariamente reflejan el hábitat natural de la especie

III. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN

3.1. Objetivo general

 Determinar y comparar las tasas de consumo de oxígeno y aclaramiento en relación al tamaño de la Argopecten purpuratus en diferentes áreas de repoblamiento y en dos estaciones del año.

3.2.Objetivos específicos

 Determinar la relación entre la tasa de consumo de oxígeno de Argopecten purpuratus en diferentes zonas de la bahía de Sechura.

 Determinar la tasa de aclaramiento en relación al tamaño de Argopecten purpuratus en diferentes zonas de la bahía de Sechura.

 Comparar las tasas de consumo de oxígeno y aclaramiento durante verano e invierno.

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IV. JUSTIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

La producción de conchas de abanico se ha incrementado en los últimos años, siendo esta actividad de suma importancia en términos socioeconómicos. Ante esto, es necesaria la construcción de modelos que pueden ser conectados a medidas ecológicas de capacidad de carga para lograr que el cultivo no cause un impacto significativo al ambiente y así el cultivo sea sostenible. Según Phillipson (1975), una de las formas de asegurar la explotación racional de un recurso consiste en conocer el flujo energético que atraviesa en el sistema. Desde este punto de vista ecológico el registro de los principales procesos fisiológicos en los organismos es un paso indispensable para entender las relaciones del organismo con el medio. Uno de estos procesos fisiológicos es la respiración que está estrechamente relacionada a la actividad metabólica del individuo, ya que de la energía transformada por la respiración muchas funciones metabólicas son posibles.

La tasa de consumo de oxígeno es una variable importante a incorporar al momento de realizar el modelo ecológico. Este modelo requiere de datos confiables de la variación estacional de la tasa de respiración (George 1997) y al igual que la tasa de aclaramiento esta se encuentra influenciada por parámetros ambientales principalmente temperatura y salinidad. (Smaal y Widdows, 1994)

En este sentido el conocimiento de las necesidades energéticas de los individuos y de los procesos fisiológicos que componen el presupuesto energético como son las tasas de aclaramiento y de respiración, relacionados a los principales parámetros ambientales en tres áreas usadas en el repoblamiento de la Bahía de Sechura es fundamental y más aún si se realiza in situ ya que bajo condiciones de laboratorio no necesariamente refleja el hábitat natural de la especie.

V. MARCO TEÓRICO

5.1. Aspectos fisiológicos

Según Flores (2012) los procesos metabólicos varían principalmente por estadios de vida, estado reproductivo, proceso de digestión y estado de salud, así como por la variación ambiental (temperatura, disponibilidad y composición de alimento, composición y variación fisicoquímica del agua entre otros) y puede ser registrado este estado metabólico a través de los índices de consumo de oxígeno (CO) y excreción de amonio.

Balducci y Mendo (2011) afirman que la concha de abanico Argopecten purpuratus al ser un bivalvo filtrador utiliza este proceso para filtrar al agua circundante y adquirir tanto oxígeno para su respiración como células fitoplanctónicas del medio para su alimentación. Según Bayne et al (1977) el proceso de la respiración ocurre principalmente en la superficie de las branquias. Estas últimas tienen también la función de la alimentación es decir tienen una función dual. Esto conlleva necesariamente a relacionar la respiración con la alimentación y por lo tanto de las entradas energéticas que toman lugar en el organismo.

Los bivalvos filtradores se alimentan de la oferta de alimento (seston) que se encuentra en suspensión a unos pocos centímetros sobre el fondo. Retienen partículas orgánicas en suspensión del agua circundante por medio del sistema ciliar en los filamentos branquiales (Laudien et al 2006 y Vahl 1973).

5.1.1. Respiración

De los diferentes componentes que incluye el balance energético Bayne y Newell (1983) indican que la respiración representa en general la mayor proporción de las pérdidas energéticas. Esto refuerza la idea de que la pérdida energética debida a la respiración tiene gran importancia para los estudios de manejo del recurso específicamente en la acuacultura.

La respiración se puede definir como la energía perdida por el organismo en forma de calor y es parte de la energía asimilada proveniente de los alimentos, que es convertida a calor directamente o mediante trabajo mecánico. Células y organismos son sistemas altamente ordenados y complejos por lo que el mantenimiento de sus estructuras requiere una continua inversión de energía (Brey, 2001).

La respiración puede ser medida tanto por vía directa (producción de calor) como por vía indirecta (consumo de oxigeno) (Brey, 2001). El oxígeno disuelto es un factor regulador metabólico en los organismos acuáticos, que puede limitar la capacidad metabólica y consecuentemente la producción de biomasa (Rosas et al., 1998), y generalmente se mide, mediante la determinación del consumo de este gas en un respirómetro (Hernández et al., 2007). El consumo de oxígeno en bivalvos marinos ha sido estudiado por varios autores, la mayoría de estos estudios se han realizado en ambientes controlados, como muestran los trabajos realizados sobre tasas de respiración con especies como Placopecten magellanicus por Bricelj y Shumway,(1991), o con Argopecten irradians por Bricelj et al., 1987).

La mayor parte de los estudios relacionan la tasa de consumo de oxígeno al tamaño de los individuos, obteniendo relaciones alométricas, que muestran iguales resultados que los obtenidos para la tasa de filtración. Así los estudios realizados por James et al. (2001) para P. canaliculus, Resgalla et al. (2006) para P. perna, Järnegren & Latín (2006) para A. excavata y Marsden (1999) para P. donacina,

entre otros, muestran que las tasas de respiración por individuo (mg. h‾ ¹) se incrementan con el tamaño de los individuos, mientras que las tasas de respiración por gramo de individuo (mg. h‾ ¹.g‾ ¹) decrecen al aumentar el tamaño de los individuos y que estas variables se relacionan de forma exponencial con pendientes positivas o negativas, según se trate de tasas respiratorias por individuo o por gramo respectivamente.

Balducci y Mendo (2011) obtuvieron una mayor tasa de respiración Argopecten purupuratus de menor tamaño (45-55mm) que en individuos de mayor tamaño (75- 85mm), registrando valores más altos durante el día en la Bahía de Sechura. En las investigaciones de Chávez (2009) en la Bahía de Paracas y Vílchez (2011) en Sechura se obtuvieron resultados similares en el que el consumo de oxígeno varió claramente en relación directa con la talla.

Estudios sobre la variación mensual de la tasa de respiración, muestran que las mayores tasas de respiración se obtienen en los meses cálidos. Resgalla et al. (2004) muestra que las tasas de respiración promedio de P. perna, muestran significativamente los mayores valores (0.8 ml. h‾ ¹.g‾ ¹) durante los meses más cálidos (p < 0.01). Además Rueda & Smaal (2003) encontraron un patrón estacional en las tasas de respiración de S. subtruncata, con mínimos valores (0.08 ml. h‾ ¹.g‾

¹) durante el invierno y máximos valores durante el verano (0.2 – 0.4 ml. h‾ ¹.g‾ ¹) Por otro lado, Peñuela (2007) indica que el consumo de oxígeno específico (COE) de la Argopecten purpuratus, evidencia que el estado fisiológico tiene una influencia directa con el nivel metabólico confirmando la existencia de una relación inversa entre el desarrollo corporal y el consumo de oxígeno por unidad de peso.

Farías et al. (2001) observó el mismo resultado en individuos reproductores de Argopecten purpuratus que fueron expuestos a dietas con diferente contenido proteico.

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5.1.2. Filtración

Los bivalvos filtradores se alimentan removiendo el material particulado que se encuentra suspendido en el agua el que además de fitoplancton incluye partículas inertes que componen el detritus, pudiendo ser este último de origen orgánico o inorgánico. La remoción de partículas suspendidas en el agua recibe el nombre de tasa de aclaramiento y se entiende como el volumen de agua liberada de sus partículas por unidad de tiempo (litros/hora). (Navarro, 2001).

La cantidad de alimento consumido por los filtradores está determinado por la tasa de filtración y la velocidad de flujo de agua (Pares Sierra, 1996) además de la eficiencia de retención de partículas y el tamaño de los individuos del cual se conoce que los de mayor tamaño consumen mayor alimento que los pequeños.

Existen dos metodologías para la medición de la actividad alimentaria, el método directo que separa y mide el flujo inhalante y exhalante en moluscos sifonados (Owen, 1974) conocido como “tasa de bombeo” y el método indirecto que se basa en la remoción de partículas en un volumen conocido como “tasa de filtración” y es calculada como una función de la corriente alimenticia y de la retención de partículas. (Coughlan, 1969).

Gosling (2003) indica que la tasa de filtración en bivalvos puede ser determinada directa o indirectamente. El método directo es más eficiente cuando es aplicado a aquellas especies donde las intensidades de inhalación y exhalación pueden ser separadas. El método indirecto se utiliza para determinar la tasa de aclaramiento. El bivalvo es colocado en un volumen conocido de agua conteniendo a una suspensión de partículas por un periodo de tiempo. La filtración resulta en un decremento de la concentración de partículas en un periodo de tiempo, la tasa de aclaramiento es determinada por la disminución exponencial de la concentración algal.

La tasa de aclaramiento se ha definido como el volumen de agua que es limpiado (filtrado) completamente de sus partículas, durante un tiempo determinado y depende principalmente del tamaño corporal del organismo (Navarro 1983, Winter 1973). La tasa de filtración se mide en forma indirecta suspendiendo algún tipo de partícula en el volumen determinado de agua y observando la disminución en la concentración de éstas como consecuencia de la actividad metabólica de los animales a lo largo de un tiempo determinado (Wong et al, 1997).

Se han realizado estudios de la tasa de filtración como el volumen de agua que pasa a través del sistema de filtración por unidad de tiempo (también llamada tasa de aclaramiento). En la mayoría de estos estudios se emplearon indistintamente el método tradicional de aclaramiento, propuesto por Coughlan (1969), en el que se utiliza el número de partículas en suspensión para determinar la cantidad de agua filtrada.

Respecto al método tradicional de aclaramiento propuesto por Coughlan (1969), el número de partículas en suspensión, puede ser estimado usando diferentes métodos entre los que están: método tradicional de conteo de células descrito por Uthermohl (1958), la lectura de la absorbancia a 750 nm y el método de cuantificar la biomasa del fitoplancton a través de la clorofila-a, descrito por Parsons et al. (1984).

Resgalla et al. (2004) hacen una comparación entre estos métodos de cuantificación de partículas para Perna perna, no encontrando diferencias significativas entre dichos métodos, sin embargo dice que los datos obtenidos utilizando la clorofila-a como estimador de la biomasa fitoplanctónica, son los más adecuados para los análisis a realizar; confirmando así lo dicho por Fanslow et al. (1995), el cual demostró que la clorofila-a es un parámetro sensible a las concentraciones del seston en un determinado tiempo y lugar.

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La actividad de filtración en bivalvos se ve influenciada por varios factores como la concentración de fitoplancton, calidad, cantidad y talla de las partículas de alimento y talla del animal. La tasa de filtración de invertebrados bentónicos ha sido tradicionalmente medida como una tasa de remoción de material suspendido (fitoplancton o partículas inorgánicas) por algunos bivalvos, en algunos periodos cortos de tiempo, utilizando recipientes experimentales confinados y bajo condiciones estáticas (Cole et al., 1992).

Flores (2012) observó mayores valores promedio de la tasa de filtración para ejemplares adultos y los menores para las semillas de Argopecten purpuratus a diferentes temperaturas, corroborando así el resultado del experimento de Winter et al., 1984 y Uribe et al., 1996 en el que se observó que la tasa de filtración de otros bivalvos se incrementaba a medida que aumentaba el tamaño corporal. Vilchez (2011) determinó que el consumo de oxígeno varía en relación directa con la talla.

En relación a tasa de filtración obtuvo que la concha de abanico filtra con mayor intensidad a una menor profundidad. Balducci y Mendo (2011) obtuvieron una mayor tasa de filtración de los individuos de menor tamaño que los grandes con una mayor actividad de filtración durante el día.

Según Winter et al. (1984) afirma que en bivalvos en general la tasa de filtración decrece con el incremento de la concentración de alimento debido a que el exceso de concentración algal comienza a tener un efecto negativo en la tasa de filtración Este autor, observó también que la alta concentración de alimento no es sinónimo de un mejor crecimiento y que incluso éste, podría ser negativo debido a la alta tasa de biodeposición producida por los moluscos filtradores, las cuales se van acumulando en el área de cultivo. Así concluyó que los organismos no son capaces de seleccionar el alimento al filtrar, por lo que una alta concentración de partículas no nutritivas disminuye significativamente el crecimiento.

Chávez (2009) determinó la tasa de filtración y la tasa de respiración de individuos de Argopecten purpuratus de tres tallas obteniendo una relación inversa entre las tasas de filtración por gramo y las tallas así como determinó la influencia de los cambios estacionales sobre la respiración de los individuos.

En un estudio realizado por Laing (2004)) con Pecten maximus se observó una relación inversa entre la concentración algal y la tasa de filtración, teniendo un rango de 0,94- 9.66 mg/l-1 que correspondería a una concentración de 20- 200 células ul-1. Schulte (1975) reporta haber encontrado la misma relación inversa entre la cantidad de alimento y la tasa de filtración, mencionando que en los casos que se utilizaron concentraciones algales muy altas a menudo se encontraron valores muy bajos e incorrectos, debido a que el mecanismo de filtración de los animales se vio perturbado por la sobrecarga de partículas en suspensión (Schulte, 1975; Laing, 2004).

5.1.3. Parámetros ambientales

El metabolismo y crecimiento en moluscos bivalvos con relación a los factores como temperatura, salinidad, oxígeno, cantidad y calidad de alimento y velocidad de corriente, han sido investigados por muchos autores. Los resultados reportados difieren ligeramente entre los distintos autores debido a que se trabajó con diferentes especies, distintas latitudes y tipos de Bahías.

La respuesta de los organismos filtradores en el medio ambiente es compleja, por lo que se deben analizar principalmente los factores que sean o puedan hacerse limitantes. La temperatura es uno de los factores que produce cambios en la fisiología de los organismos (His 1977), principalmente en la tasa de filtración de los moluscos bivalvos y en el crecimiento en esta especie (Rivas y Masse 1983, Malouf y Breese 1978).

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Según estudios realizados (Widdows, 1978; Griffiths, 1980; Navarro y Winter, 1982; Iglesias et al., 1992, entre otros) demuestran que la temperatura está entre los factores ambientales más influyentes en la fisiología de los moluscos bivalvos.

El efecto de la temperatura en el consumo de oxígeno específico (CEO) para cada estadio de desarrollo es evidente. Un incremento de este factor acelera la mayoría de procesos fisiológicos como la tasa de respiración (Griffiths & Griffiths, 1987).

Flores (2012) obtuvo incrementos desde hasta 40 veces al comparar los valores de CEO obtenidos entre 17° y 22°C, debido a que, por estar los individuos acondicionados a una mayor temperatura (22ºC) los requerimientos energéticos son muchos más elevados (Araya et al., 1993). Sin embargo, Marsden (1999) para P.

donacina creo una regresión múltiple para determinar la importancia de las variables masa corporal, temperatura, estación y consumo de oxígeno, sobre la tasa de respiración, demostrando que la variable tasa de respiración era explicada un 63% por el peso corporal y 27% por la temperatura del medio. Vahl (1978) (citado por Shumway et al 1988) concluyó que la variación estacional del consumo de oxigeno de Chlamys islandica no estuvo explicada por la variación que se vio en la temperatura, sino más bien por la cantidad de alimento disponible, también mostró una variación significativa en el consumo de oxigeno que es explicado por el peso corporal, además Bayne et al 1976 (Citado por Masrden 1999) encontró la misma relación en Paphies donacina. Así como Lértora (2008) no obtuvo una relación significativa entre las tasas de respiración y la temperatura con la almeja Gari solida en una investigación in situ.

Por otro lado, Navarro y González (1998) encontraron que la salinidad tenía un efecto directo sobre la actividad metabólica de Argopecten purpuratus, así, el consumo de oxígeno aumenta significativamente al bajar la salinidad. En el mismo estudio se encontró que el consumo de oxígeno disminuyo a menores salinidades experimentales lo que estaría relacionado con la disminución de la alimentación indicando un aislamiento para evadir el estrés osmótico. Patrones similares de

consumo de oxígeno en relación a fluctuaciones de salinidad han sido descritos para otras especies de bivalvos como Mytilus edulis (Widdows 1973).

De acuerdo a Navarro y González (1998), cuando ejemplares de la concha de abanico son expuestos a bajas salinidades, la tasa de filtración disminuye, de manera que un ejemplar que filtra 2.6 L h-1 en una salinidad de 30 ‰, baja a 0.12 L h-1, si

es expuesto a una salinidad de 18 ‰.

VI. METODOLOGÍA

El estudio se llevará a cabo en cuatro áreas de repoblamiento dentro de la Bahía de Sechura, localizada en el Distrito del mismo nombre, Región Piura. Se realizará en dos épocas distintas caracterizadas por diferencias de temperaturas y salinidad del mar, invierno y verano, durante los meses de Agosto y Enero. La primera estación experimental localizada frente a Barrancos (5°47´ 20.3¨ S - 80°54´ 17.3¨ W), la segunda frente a Vichayo (5°47´ 39¨S - 80°57´ 10.9¨ W), la tercera frente a Parachique (5° 44´ 27.9¨S - 80°55´ 32.3¨

W) y la cuarta frente a Las Delicias (5°43´ 35.7¨ S - 80°54´ 3.4¨ W).

Figura 1 : Ubicación de las zonas de estudio donde se realizaran los experimentos considerados en este estudio.

6.1. Tipo de investigación

La investigación es de tipo experimental explicativa debido a que a lo largo del presente estudio se expondrá el comportamiento de las variables tasa de respiración y aclaramiento en función de otras variables como talla y peso, requiriendo de control y cumpliendo criterios de causalidad.

6.2. Formulación de hipótesis

No existen diferencias en la relación entre la talla y tasa de consumo de oxígeno y aclaramiento de la concha de abanico en las cuatro zonas de repoblamiento y en ambas estaciones del año.

6.3. Identificación de variables

Las variables dependientes o respuestas son la tasa de respiración y la tasa de aclaramiento ya que estas son influenciadas por factores parámetros bióticos y abióticos.

Las variables independientes o explicativas son las cuatro zonas de investigación, talla y peso de las conchas de abanico.

6.4. Definiciones operacionales

Ejemplares de Argopecten purpuratus de cuatro diferentes grupos de tamaños 40 a 50 mm, 60 a 70 mm y 80 a 90 mm y de 90 mm a 11 mm colectados aleatoriamente en una misma zona serán empleados para la medición de tasas de respiración y aclaramiento. Estas tasas serán medidas dentro de un sistema cerrado de circulación

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empleando una batería de 5 cilindros o respirómetros, como se puede apreciar en la figura 2.

Figura 2: Batería de respirómetros empleados en la investigación.

Para cada experimento se empleará cinco cilindros acrílicos provistos de un o-ring que impedirá el intercambio de agua. Cuatro de estos cilindros conformaran el grupo de unidades experimentales y uno el grupo control. En cada respirómetro el agua que ingresa y sale será conectada vía mangueras de 1cm de diámetro a una bomba sumergible de 30-40W de potencia y con un flujo de 15L\min marca Cornet modelo GEO-inline PLUS 12V para crear un sistema de recirculación. La energía empleada será proporcionada por una batería de 11 placas de marca ETNA, a la que será conectada una consola de mando con la que se controlará el encendido de las bombas.

6.4.1. Instalación

Previo a la experimentación, los ejemplares colectados serán lavados cuidadosamente para retirar los sedimentos y epibiontes eliminando así cualquier organismo que pudiera interferir la medición Cada individuo será colocado al azar

en los respirómetros previamente medido. En cada respirómetro se colocará al azar un individuo previamente medido. Así mismo se introducirá un oxímetro de la marca HOBO modelo U26-001 para el registro continuo de datos de oxígeno y temperatura. El oxígeno será registrado a un intervalo de cinco minutos por el data logger HOBO en un periodo de una hora.

El set de respirómetros será colocado en el fondo mediante un sistema de cuerdas.

y se activarán las bombas con las entradas de agua provistas de un filtro de 0.08mm el cuál evitará la entrada de algún organismo que pueda obstruir las bombas. Así cada individuo permanecerá 20 minutos aproximadamente dentro de los cilindros con el sistema abierto para que pueda adaptarse. Una vez adaptado, se cerrará el sistema y se registrará la primera medida de oxígeno y se tomará una muestra inicial de 100 ml de agua para realizar el análisis de recuento de células fitoplanctónicas.

Luego de una hora, el sistema se abrirá el sistema y se tomará la muestra final de agua para ser analizada en el laboratorio y así se realizará cuatro veces que será el número de repeticiones.

6.4.2. Análisis de muestras

Las muestras de conchas de abanico serán llevadas al laboratorio, donde se realizará el peso seco de cada una, para ello se empleará el secador de marca MEMMERT en el que se colocará las muestras a 60°C por 48 horas.

Por otro lado para la determinación de la tasa de aclaramiento se emplearán muestras de agua que serán almacenadas en frascos plásticos color ámbar y conservadas en formol al 15% previamente a su traslado al laboratorio para el análisis el cual se realizará siguiendo la técnica de Utermohl (1958).

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6.4.2.1. Tasa de consumo de oxígeno

Para la determinación de la tasa de consumo de oxígeno se empleará la ecuación de Widdows y Johnson(1988): RR=[(Cto-Ct1)x (V/ ΔT)]-f, donde RR= Tasa de consumo de oxígeno (ml O2.h-1), Cto= concentración de oxígeno en el tiempo cero (mL O2.h-1), Ct1=Concentración de oxígeno al final del experimento (ml O2.h-1), V= Volumen de la cámara de prueba (L), ΔT=Intervalo de tiempo de prueba (h) y f=Factor de corrección en la cámara de control obtenido con la misma ecuación.

6.4.2.2. Tasa de aclaramiento

La tasa de aclaramiento mide el descenso de la densidad de microalgas del medio experimental. Entonces, la tasa de aclaramiento se hallará mediante la fórmula de Coughlan (1969) RC=V*[(LnCto-LnCt)-f)]/tN donde RC= Tasa de aclaramiento en ml/hora, Cto= concentración inicial de fitoplancton, Ct=Concentración de fitoplancton al final del experimento, V= Volumen del cilindro de prueba (mL), N=número de organismos por cámara, ΔT=Intervalo de tiempo de prueba (hora) y f=Factor de corrección de fitoplancton para el control calculado con la misma fórmula.

Para mejorar las comparaciones entre los rangos de tallas se calcularan las tasas de consumo de oxígeno y aclaramiento específicas es decir, por gramo de peso seco de cada individuo.

6.5. Diseño de investigación

El experimento se realizará bajo cuatro tratamientos que serán los diferentes grupos de tallas de conchas de abanico para las que se determinaran las tasas de consumo de oxígeno y aclaramiento .Los tratamientos serán repetidos cuatro veces para cada experimento es decir, para las cuatro zonas de repoblamiento en investigación. Los individuos seleccionados para cada grupo de talla serán asignados al azar a cada unidad experimental que son los respirómetros.

La siguiente tabla muestra las tasas de consumo de oxígeno o aclaramiento bajo los cuatro rangos de tallas, con las respectivas repeticiones. Los factores en estudio son:

A: Zonas o estaciones de experimentación (a1= Barrancos, a2= Vichayo, a3=

Parachique y a₄₌ Las Delicias)

B: Rango de tallas (b1= 40-50 mm, b2= 60-70mm, b3=80-90mm, =90-110mm)

Tabla 1: Diseño para cada experimento

6.6. Población y muestra

La población objeto de observación y estudio serán las conchas cultivadas en las áreas de repoblamiento. La muestra serán las 64 conchas de abanico empleadas para cada experimento. El muestreo se realizará aleatoriamente.

a1 a2 a3 a4

b₁ b₂ b₃ b₄ b₁ b₂ b₃ b₄ b₁ b₂ b₃ b₄ b₁ b₂ b₃ b₄ R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1 R1

R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2 R2

R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3 R3

R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄ R₄

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6.7. Instrumentos de colecta de datos

El estudio se realizará experimentalmente in situ y se empleará un set de cinco respirómetros dentro del cual se ingresará un oxímetro de la marca HOBO que permitirá registrar los datos de oxígeno, para la determinación de la tasa de aclaramiento se tomarán muestras de agua que serán colectadas en pequeñas bolsas de plástico para luego ser conservadas en frascos del mismo material.

6.8. Procedimiento de análisis de datos

Para determinar la tasa de consumo de oxígeno y aclaramiento, siguiendo la ecuación de Widdows y Johnson (1988) y la fórmula de Coughlan (1969) respectivamente, para cada rango de tallas y para cada zona de estudio se hará uso del programa Excel 2010 para realizar los respectivos cálculos y gráficas.

La relación existente entre la talla y las tasas de consumo de oxígeno y aclaramiento en cada zona de estudio se determinará con un análisis de regresión simple para medir el grado de correlación existente entre las variables. Para determinar si estas relaciones son diferentes o no en entre zonas y estaciones del año se realizará una comparación de las líneas de regresión. Así se comparará primero las varianzas residuales, luego las pendientes y, finalmente, las elevaciones. En términos del modelo sería: Y=αi + β_iX_ij + ε_ij , donde i=1,2,3,4 que significarán las cuatro zonas.

Primeramente se comparará las varianzas residuales σ12

y σ22, luego β1 y β2 , y finalmente las elevaciones de las líneas α1 y α2 .

Por otro lado, se realizará también el análisis multivariado de regresión lineal múltiple, en a que se relacionará las variables dependientes, tasa de consumo de oxígeno y aclaramiento con las variables independientes cualitativa talla e indicadora o dummy zonas. Este modelo permitirá establecer los parámetros

diferentes entre las tasas fisiológicas de las cuatro zonas dado el mismo grupo de tallas. El modelo de este análisis es: Y/x₁,x₂,x₃ = β ₀+ β₁X₁+ β₂X₂+ β₃X₃+εi

.

Los dos análisis de regresión se realizaran con ayuda del paquete estadístico SPSS y el programa Excel 2011.

VII. CRONOGRAMA

En la siguiente tabla 2 se muestra el cronograma de actividades a desarrollar.

Tabla 2: Cronograma de actividades

ACTIVIDAD/ MESES 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Elaboración y presentación del proyecto X

Preparación de materiales y equipos X X X X

Ensayo preliminar X

Búsqueda de información X X X

Experimento o recolección de datos X X

Análisis de muestras X X X X X

Procesamiento y análisis de datos X X X X X X

Primera redacción X X X X

Revisión y redacción definitiva X X

Sustentación X

VIII. PRESUPUESTO

En la siguiente tabla se muestra el presupuesto del proyecto.

Tabla 3: Presupuesto del proyecto de tesis

CANTIDAD UNIDADES DESCRIPCIÓN

PRECIO UNITARIO (S/.)

PRECIO TOTAL (S/.)

Equipos

5 HOBO Dissolved Oxygen

Logger

3462.5 17312.5

5 Bomba de vacío

sumergible

80 400

1 Utilización de

profundímetro

60 60

2 Utilización de GPS 60 120

1 Batería de 12 V 230 230

5 Respirómetros 550 2750

1 Rediseño de consola de

mando

40 40

Materiales

160 Frascos de plástico 0.3 48

2 Hielo 6 12

1 ciento Bolsas de polietileno para toma muestras

10 10

1 ciento Bolsas ciplox para

conservación muestras

20 20

27

30 metros Cabos o cuerdas 0.5 15

1 Estructura de soporte 100 100

Insumos

3 litro Formol 15% 10 30

IX. COLABORADORES

Patrocinador: Dr. Jaime Mendo Aguilar (Profesor principal de la Facultad de Pesquería UNALM)

Centro Leibniz de Ecología Marina Tropical- Alemania: ZMT Bremen.

Ministerio Federal de Educación e Investigación- Alemania (BMBF)

Universidad Nacional Agraria La Molina

29

X. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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