LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR (VSG)
La velocidad de sedimentación globular, también conocida como velocidad de eritrosedimentación, es una prueba inespecífica, o lo que es lo mismo, una prueba no concluyente ni definitiva de ninguna enfermedad o lesión determinada, pero se solicita como apoyo al diagnostico de procesos inflamatorios, neoplásicos, e infecciosos. No obstante, esta prueba puede usarse para averiguar enfermedades no sospechadas, usándose en la valoración rutinaria y en la evolución de la enfermedad, pudiendo controlar el resultado del tratamiento.
La técnica consiste en dejar en reposo durante período de tiempo determinado (1-2 horas), la sangre total sin coagular, produciéndose la separación de los hematíes de la concentración plasmática, de modo que se sedimentan en el fondo del recipiente formando cúmulos o conglomerados en forma de pilas de monedas por la atracción de la superficie de los eritrocitos (formaciones de Rouleaux). La velocidad con la que se da el descenso de estos hematíes sedimentados es lo que define a la prueba de la velocidad de sedimentación globular (VSG) o eritrosedimentación.
Existen dos métodos para ésta finalidad; el método de Westergren y el método de Wintrobe, el cual es más sencillo con respecto al primero, esto desde el punto de vista técnico. Ambas técnicas son reportadas en mm/a los 60 minutos
Esta prueba analítica por lo general está incluida un estudio hematimétrico completo, pudiendo denotar la presencia de enfermedad, pero no la identifica ni determina su gravedad,
Factores que influyen en los resultados
Se observa una aceleración de la velocidad de eritrosedimentación cuando las proteínas del grupo de las globulinas se encuentran elevadas en proporción a las de la albúmina; asimismo, puede notarse acelerada cuando existe una alta concentración de fibrinógeno.
Una apreciación a destacar es la que la velocidad de sedimentación globular es menor en los niños que en los adultos. A partir de los 60 años, la velocidad observa un incremento en relación con los índices normales. La aceleración también es indicativo de cambios de proporción y calidad en las proteínas del plasma, cambios que son encontrados en una buena parte de las infecciones agudas y crónicas, neoplasias, y durante los procesos de las enfermedades degenerativas.
Utilidad clínica de la VSG
La medición de la VSG se emplea principalmente para:
· La detección de los procesos inflamatorios e infecciosos
· Controlar el progreso algunas enfermedades tanto crónicas como infecciosas. · La detección de procesos crónicos inflamatorios ocultos o neoplasias.
Como valor clínico es poco sensible y específico, teniendo poco valor por si solo; no obstante, su utilidad radica en ser una herramienta de apoyo clínico en el momento del diagnóstico.
CONTEO DE RETICULOCITOS
Este examen mide la cantidad de reticulocitos (nuevos eritrocitos ligeramente inmaduros) en la sangre. Se usa para supervisar la producción de las células rojas de la sangre y ayudar manejar la anemia.
Pronormoblasto, normoblasto basófilo, normoblasto policromático, normoblasto ortocromo, reticulocito y finalmente el eritrocito maduro.
Las primeras cuatro etapas se encuentran confinadas a la médula ósea. El reticulocito, sin embargo se puede encontrar en médula ósea o en la sangre periférica.
La cuenta de reticulocitos es una importante herramienta diagnóstica, ya que es un reflejo relativamente exacto de la cantidad efectiva de la producción de eritrocitos que se lleva a cabo en la médula ósea.
Debido a que el periodo de vida de los eritrocitos es de 120 días (+ - 20), la médula ósea reemplaza aproximadamente al 1% de los eritrocitos maduros diariamente. Es por eso que los valores normales de la cuenta de reticulocitos están entre 0.5 – 1,5% es decir, es el promedio de reticulocitos por cada 100 eritrocitos contados.
Los reticulocitos son células anucleadas predecesoras de los eritrocitos con la diferencia de que poseen gránulos de ribosomas y algunas mitocondrias que les son útiles para sintetizar el 35% de la hemoglobina restante. Este tipo de células esta en circulación periférica aproximadamente un dia para convertirse posteriormente en un hematíe maduro que cumplirá con todas las funciones biológicas de estas células. A diferencia de los hematíes o glóbulos rojos maduros, los reticulocitos aún poseen ARN.
REACTIVOS Y MATERIAL:
1. Colorante para reticulocitos (ya sea Azul de metileno N o azul de cresil brillante en solución de NaCl al 0.85%)
2. portaobjetos
3. tubo de ensayo y pipetas Pasteur con gradilla 4. Microscopio y aceite de inmersión
5. Contador
6. Sangre total anticoagulada EDTA METODO:
2. Añada 3 gotas de la sangre homogenizada
3. Mezclar y dejar reposar por lo menos 15 minutos a temperatura ambiente
4. Al término de la incubación o reposo, con una pipeta Pasteur tomar lo necesario para confeccionar un frotis. 5. Dejar secar al aire el frotis
6. Observar al microscopio con el objetivo de inmersión y seguir con el siguiente protocolo:
Contar el número de reticulocitos presentes en 10 campos en donde no estén encimados los eritrocitos y se toquen las células (en promedio se encuentran 100 eritrocitos por campo microscópico); promediar los reticulocitos contados por el número de campos, siendo el resultado el porcentaje de reticulocitos en la muestra. REFERENCIA: 0.5 – 1.5 %
Una disminución se encontrará en anemia aplástica y en las condiciones en que la médula ósea no está produciendo eritrocitos.
El aumento de reticulocitos se encuentra en las anemias hemolíticas, por déficit de hierro bajo tratamiento, en talasemia, anemia sideroblástica y en las pérdidas agudas o crónicas de sangre.
LA CUANTIFICACIÓN PLAQUETARIA
La cuenta de plaquetas es de gran importancia cuando se trata de diagnosticar un problema de sangrado, pero debe incluirse en el estudio hematimétrico completo.
La función primaria de las plaquetas está en la hemostasis (inhibición de un sangrado) y en el mantenimiento de la integridad capilar (las lesiones en las paredes capilares son taponadas por las plaquetas para detener el sangrado, manteniendo la función sellante mientras es reparada ésta).
Una trombocitosis (cuenta elevada), es posible encontrarla en policitemia vera, trombocitemia idiopática, leucemia mielógena crónica y posterior a una esplenectomía.
En tanto que una trombocitopenia (cuenta disminuida), se encuentra en púrpura trombocitopénica, anemia aplástica, leucemia aguda, enfermedad de Gaucher, anemia perniciosa y algunas veces posterior a quimio o radioterapia. Un tiempo de sangrado prolongado y una retracción del coagulo reducida son consecuencias de una trombocitopenia importante.
METODOS DIRECTOS PARA EL CONTEO PLAQUETARIO
Existen tres métodos para la cuenta directa de plaquetas: el Rees & Ecker que emplea la luz brillante estándar del microscopio compuesto fotónico, El método de Brecker – Cronkite, que utiliza el microscopio de fase y el tercer método es el del contador celular electrónico. En cualquiera de ellos se eliminan los eritrocitos para evitar la interferencia en el conteo.
Por cuestión práctica el método de Brecker-Cronkite modificado es el que a continuación se describe: MATERIAL:
- Microscopio
-Pipeta de Thoma para cuenta de blancos con boquilla
- Cámara de Neubauer con cubre hematocitómetro (deben estar escrupulosamente limpios) - Contador
- Solución acuosa de oxalato de amonio al 1% (recién preparada y debe mantenerse refrigerada)
- Caja de Petri con papel filtro*(opcional el empleo de una cámara húmeda para el reposo en días calurosos) METODOLOGÍA:
- Obtener la muestra de preferencia con EDTA y mantenerla homogenizada
- Cargar la pipeta de Thoma con la muestra hasta la marca 0.5 (limpie el exceso y afore correctamente) - Llene con la solución dilutora de oxalato de amonio hasta la marca 11 (arriba del bulbo sin burbujas) - Mezcle la pipeta durante 3 minutos (es crítico el tiempo para la hemólisis total)
- Deseche las primeras 3- 4 gotas del contenido de la pipeta, limpie la punta y - Cargue la cámara de la misma manera que se cargan los eritrocitos y leucocitos
-Permita la sedimentación durante 5 minutos*(en días calurosos se recomienda reposar en cámara en húmeda) - Cuente las plaquetas presentes en la misma zona en la que se cuentan los eritrocitos con el objetivo de 40X
El número obtenido de plaquetas en las cinco cuadrículas es multiplicado X 1000 = plaquetas/ mm3
El rango normal se ha considerado entre 100,000 – 400,000 ó 150,000 – 450,000/mm3 dependiendo del autor
Puntos que se deben considerar al contar plaquetas:
* La cámara de Neubauer y el cubre hematocitómetro deben estar escrupulosamente limpios y libres de polvo o marcas de suciedad de conteos anteriores (esto es recomendable para cualquier conteo, no solo de plaquetas). * Es muy importante que la cámara ya cargada, repose libre de vibraciones, por lo menos 3 minutos pero no más de 5; las plaquetas deberán estar en un solo plano para ser debidamente contadas. Por lo que no es recomendable dejar el reposo por más tiempo, a menos que sea en una cámara húmeda, ya que al evaporarse el diluyente, las plaquetas se agrupan imposibilitándose su conteo.
* Siendo las plaquetas transparentes, debe utilizarse UNA CANTIDAD DE LUZ REDUCIDA, de esta manera, la poca luz que ingresa a la cámara permitirá que las plaquetas refracten la luz, haciéndose muy brillantes y por lo tanto, evidentes.
