1) EJERCICIO DE PESADA
-Número de procedimiento: 1 -Técnica: Metódica de laboratorio
-Nombre técnico/a que lo realiza: Marta Rodríguez Martín -Preparación de material:
-Balanza -Vidrio de reloj
-Preparado A (metadisulfato de sodio ) y C (sal disódica) -Cucharas
-Papel de filtro -Agua destilada -Vaso de precipitados
-Organización del trabajo:
Se realiza el ejercicio por parejas. Cada persona realizará su propia pesada. Dispondremos de dos balanzas, en cada una habrá una persona responsable que estará al tanto de las primeras pesadas.
Ejercicio 1 :
Pesamos en la balanza las siguientes cantidades: 10; 1,5; 6,2 gramos del preparado A, empleando como soporte un vidrio de reloj.
Depositamos las cantidades en un pequeño trozo de papel de filtro y conservamos en nuestra mesa.
Las pesadas: - 6,18g (6,2 g) -9,96g (10 g) -1,49g (1,5 g)
Ejercicio 2
Comprueba el peso de las cantidades previamente pesadas por tu compañera de mesa (pareja) A. Anota los resultados. Mezcla las tres cantidades y anota el peso total.
El peso: -6,16 g (6,2) -9,92 g (10) -1,47 g (1,5)
Sumando las tres cantidades con la calculadora obtenemos que el peso total debería ser 17,55 g. Sin embargo, es 17,52 g. Observamos que la cantidad obtenida al realizar el proceso no es la misma, con lo cual, deducimos que el error es debido a la cantidad de sustancia que se pierde realizando el proceso.
Ejercicio 3
Pesamos en la balanza las siguientes cantidades 245, 750 y 1400 mgr. del preparado B, utilizando como soporte papel de filtro. Mezclamos las tres cantidades y comprobamos el peso total.
En la balanza ponemos: -0,245 g
-0,750 g -1,4 g
El peso total debería ser 2,395; sin embargo el resultado es 2,300. Al igual que en el ejercicio anterior se pierde sustancia al realizar el procedimiento de la práctica.
Ejercicio 4
Conseguimos mediante la balanza los siguientes volúmenes de Agua Destilada (en adelante AD): 20, 50 y 110 ml, empleando un vaso de precipitados. Comprobamos los volúmenes y anotamos los resultados.
-19,68 ml (20) -48,38 ml (50) -108,45 ml (110)
2) DISTRIBUCIÓN DE VOLÚMENES
-Preparación del material: -Gradilla
-1 pipeta de 2 ml; 1/10 -Vaso de precipitados -3 tubos de ensayo -Matraz erlenmeyer -Agua destilada
Para la medición de 2,3 ml de AD utilizamos una pipeta que la llenaremos hasta 2 ml y después hasta 0,3. Después vaciamos el agua destilada en un tubo de ensayo que colocaremos en la gradilla.
El mismo procedimiento será utilizado para llegar a los 150 microlitros, es decir, 0,15 mL llenando la pipeta primero hasta 0,1 ml, depositándola en un tubo de ensayo distinto al empleado anteriormente y midiendo después 0,05 mL más, que al juntarlos con los 0,1 mL anteriores conseguiremos finalmente los 0,15 mL propuestos.
Los 0,002 L los obtenemos midiendo en la pipeta 2 ml y después los introducimos en un tubo de ensayo que será posteriormente colocado en la gradilla junto a los 2 tubos de ensayo anteriores.
El segundo ejercicio trata de obtener 150 ml y 28ml en un matraz de enlenmeyer.
Utilizamos un matraz de enlenmeyer de 250 mL de AD. En primer lugar lo llenamos hasta 150 mL.
El tercer ejercicio consiste en obtener 65ml de AD en un vaso de precipitado.
Utilizamos un vaso de precipitado de 50 mL, lo llenamos hasta 50mL y a continuación añadimos los 15mL que nos faltan para llegar a 65 mL utilizando un tubo de ensayo, que primero llenaremos hasta 10 mL, y después hasta 5mL.
3) PREPARACIÓN DE MEZCLAS Y DILUCIONES
Las mezclas están formadas por más de un componente, cuya proporción puede variar. Estos componentes no pierden sus características por el hecho de mezclarse. Existen dos tipos de mezcla: las mezclas homogéneas cuyos componentes no se distinguen y las mezclas heterogéneas en las que los componentes sí pueden distinguirse.
La dilución es el procedimiento que se sigue para preparar una disolución menos concentrada a partir de una más concentrada.
150 ml de Suero salino fisiológico
(0,9%)
Utilizando la fórmula
obtenemos
que el volumen de soluto es 1,35x10-3
30 cc de solución de Etanol al 40% v/v
125 ml de Ácido sulfúrico 3 N
Utilizando la fórmula
Obtenemos 18,37 g.
225 ml de A. Clorhídrico 0,2 N
Utilizando la misma fórmula que antes, vemos que el resultado es 0,45
equivalentes.
4) CENTRIFUGACIÓN
FUNDAMENTO
Aprender a utilizar la centrifugadora.
MATERIALES -Agua
-Carbón activo -Arena
-Sulfato de cobre -AD
-Suero fisiológico -Alcohol
-Cuchara -Varilla
TÉCNICA
Las centrífugas nos permiten separar el soluto de su solvente. En este caso comprobamos su manejo a través de tubos de ensayo con agua y arena; agua y carbón activo; y agua y sulfato de cobre. Hay que colocar las cargas que tengan la misma masa de forma opuesta.
Seleccionamos el tiempo que queremos (en este caso será 1minuto) y el número rpm (1000-3000)
a) Agua y carbón activo
Preparamos en un vaso de precipitados 150 ml de agua destilada donde echamos una cuchara de carbón activo, y mezclamos con ayuda de una varilla. Después lo
introducimos en un tubo de ensayo y lo metemos en la centrifugadora. b) Agua y arena
Realizamos el mismo procedimiento pero esta vez utilizando agua y arena; y lo metemos en la centrifugadora.
c) Agua y sulfato de cobre
Tenemos 0,01M de sulfato de cobre y 150 ml de agua.
Aplicando la fórmula de la molaridad vemos que nos da una cantidad de 1,5x10 3 moles.
Sabiendo que 1 mol de sulfato de cobre son 250g, obtenemos que 1,5 x10 3 moles son 0,375g de sulfato de cobre.
Los 0,375 g obtenidos los diluimos en 20 ml de agua destilada y luego enrasamos hasta 150 ml.
El siguiente paso es pesar en una balanza el sulfato de cobre, utilizando como soporte un vidrio de reloj. Después, lo echamos en un vaso de precipitados hasta 20ml de agua destilada. Para ello utilizamos una pipeta y así cogemos 10ml dos veces consecutivas. Lo echamos en un vaso que llenaremos hasta 150 ml de agua destilada y lo mezclamos con una varilla. Finalmente lo metemos en un tubo de ensayo y lo colocamos en la centrifugadora.
RESULTADOS
El agua y carbón activo se diluye difícilmente, la arena y el agua no se diluye mientras que el sulfato de cobre y el agua se mezcla mejor, sí se produce una dilución.
-Hay que mantener la centrífuga limpia.
-Cuando estamos centrifugando hay que mantener la tapadera cerrada.
-No utilizar material agrietado, porque la presión centrífuga puede producir una rotura en esos puntos y contaminar las muestras.
-Debemos comprobar que la superficie donde se encuentra esta nivelada, porque sino causaría vibraciones.
-El número de las rpm debe estar entre 1000 y 3000 ya que si es de 5000 las células se rompen.
-Y por último e importante, a cerciorarse de que el cable de conexión eléctrica está conectado.
FUNDAMENTO
Aprender el concepto capilaridad y observar la capilaridad de diferentes líquidos. La capilaridad es una propiedad de los líquidos que depende de su tensión superficial (la cual a su vez depende de la cohesión o fuerza intermolecular del líquido), que le confiere la capacidad de subir o bajar por un tubo capilar.
Cuando un líquido sube por un tubo capilar, es debido a que la fuerza intermolecular entre sus moléculas es menor a la adhesión del líquido con el material del tubo. El líquido sigue subiendo hasta que la tensión superficial es equilibrada por el peso del líquido que llena el tubo.
TÉCNICA
Llena por capilaridad varios tubos capilares con AD, suero fisiológico, solución de alcohol y de sulfato de cobre.
MATERIAL -Tubos capilares -AD
-Suero fisiológico -Alcohol
-Sulfato de cobre
RESULTADOS
5) MANEJO DE PIPETAS AUTOMÁTICAS
FUNDAMENTO
Aprender a manejar las pipetas automáticas.
Las pipetas son dispositivos de amplia utilización en los laboratorios clínicos y de investigación.
Se utilizan para suministrar cantidades muy exactas de fluidos.
MATERIAL -AD
-Vaso de precipitados -Tubo de ensayo -Gradilla
Aquí visualizamos las micropipetas y Pipetas fijas
TÉCNICA
Distribuye en T/E los siguientes volúmenes empleando una Pipeta de 200ul fija: 600 microL, 800 microl, 1 ml
50/100 microL variable 100 microL 200microl 75 y125microL
Con una pipeta automática de diferentes volúmenes pesa los siguientes volúmenes de AD: 1ml, 250 mirol, 50 microL. Anota los resultados.
Pesa el volumen de las gotas de diferentes micro-pipetas y de una/s pipeta/s Pasteur. Compara y anota los resultados
En un vaso de precipitados echamos 500 ml de AD. Utilizamos una pipeta de 200ul para coger 600 microL. Echamos 3 veces 200 microL para llegar a 600 microL , 4 veces para llegar a 800 microl y 5 para conseguir 1ml , porque 1 ml son 1000 microL.
Después lo vaciamos en un tubo de ensayo y lo colocamos en una gradilla. Combrobamos con una pipeta Pasteur y observamos que la pipeta automática es mucho más precisa que la pipeta Pasteur.
Después de haber hecho todas las mediciones llegamos a una serie de conclusiones.
CONCLUSIONES
Pipetas fijas
-Primero debemos escoger la pipeta de una medida adecuada dependiendo del volumen que queramos medir. Existen pipetas fijas de
-FASES DE PIPETEADO:
1) Preparación : sostenemos el instrumento en una posición casi vertical. 2) Aspiración : sumergimos unos milímetros la punta de la pipeta en el líquido.
Hacemos girar la rueda hacia arriba para la aspiración del líquido.
3) Estabilización: esperamos un segundo para que todo el líquido tenga tiempo de moverse hacia arriba en la punta.
4) Finalización: Hacemos girar la rueda de la pipeta hacia debajo soltando el líquido.
-Último e importante: la pipeta debe limpiarse después de su uso y
almacenarse siempre en posición vertical. El lugar de almacenamiento deberá estar limpio y no se guardará en cualquier cajón sino en un sitio donde estén todas las pipetas clasificadas según su capacidad de medición.
Pipetas automáticas -Funcionamiento:
1) Debemos elegir la punta adecuada a la pipeta y asegurarnos de que está bien colocada y encaje perfectamente antes de establecer el volumen. Evitar contaminar la punta con otras sustancias.
2) Establecemos el volumen que vamos a coger haciendo una rotación con el botón que cambia la cantidad micrométrica.
3) Presionar el émbolo suavemente hasta el primer tope. Hasta este momento la punta de la pipeta no debe estar sumergida en el líquido.
4) Sumergir la punta de la pipeta en el líquido. Confirmar que la pipeta se encuentra en posición vertical. Este proceso corresponde al mostrado en la posición 1B (primera a la izquierda).
6) Colocar la punta de la pipeta contra la pared del recipiente en el cual será dispensado el líquido. Verificar que el ángulo formado entre la punta de la pipeta y la pared del elemento receptor esté entre los 30° y los 45°. Si el recipiente receptor ya tiene algún nivel de líquido, evitar que la punta de la pipeta quede sumergida en el mismo (posición 3A).
7) Dispensar el contenido de la pipeta presionando el émbolo de forma suave pero firme, hasta el primer tope.
8) Presionar el émbolo suavemente hasta que alcance el segundo tope en la carrera del pistón (posición 5C). Esto expulsa cualquier fracción de líquido que hubiera podido quedar en la punta de la pipeta. Una vez retirada la
9) pipeta, liberar suavemente el émbolo hasta la posición límite superior.
10) Desechar la punta de la pipeta. Para esto accionar el botón del mecanismo de expulsión (posición 6).
-Las pipetas deben estar sometidas a una revisión cada cierto tiempo para evitar problemas de funcionamiento bien sea por desgaste o rotura.
-La pipeta debe mantenerse limpia. Si la pipeta ha sido utilizada con sustancias peligrosas para la salud, es responsabilidad del usuario asegurar que está completamente
descontaminada.
