UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Facultad De Ciencias Biológicas
Programa De Segunda Especialidad en Ciencias Biológicas
CICLO BIOLÓGICO DE DOS POBLACIONES NATURALES DE Aedes taeniorhynchus, PROCEDENTES DE LIMA Y PIURA
TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO DE SEGUNDA ESPECIALIDAD
PROFESIONAL EN ENTOMOLOGÍA MEDICA Y CONTROL DE VECTORES
AUTORES: Blga. Lama Figueroa, Pamela Denisse Blga. Suarez Grandez, Natalia Marlene
ASESOR: Dra. Roldan Rodriguez, Judith Enit
TRUJILLO – PERÚ 2022
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DEDICATORIA
Dedicamos esta tesis a Dios, por permitirnos poder realizar este trabajo de investigación, a nuestra familia, por ser nuestra inspiración y motivo, a nuestros padres, por enseñarnos que todo es posible en la vida si tenemos perseverancia; a nuestros hermanos, por su amor incondicional y sus palabras de aliento. Agradecemos su comprensión, su apoyo y el interés que día a día pusieron en nuestro trabajo.
Natalia Marlene Suarez Grandez Pamela Denisse Lama Figueroa
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JURADO DICTAMINADOR Y APROBACIÓN
Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que el presente informe de tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo aprobado por UNANIMIDAD.
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AGRADECIMIENTOS
A Dios, por conducir nuestras emociones e incrementar nuestra fortaleza espiritual en la lucha laboral y académica, a nuestros amigos biólogos y a las personas que durante el período del presente estudio nos apoyaron, les damos un reconocimiento por el apoyo brindado.
Natalia Marlene Suarez Grandez Pamela Denisse Lama Figueroa
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ÍNDICE
DEDICATORIA ... ii
JURADO DICTAMINADOR Y APROBACIÓN ... iii
AGRADECIMIENTOS ... iv
ÍNDICE ... v
RESUMEN ... vi
ABSTRACT ... vii
I. INTRODUCCION ... 1
II. MATERIALES Y MÉTODOS ... 3
III. RESULTADOS ... 7
IV. DISCUSIÓN ... 11
V. CONCLUSIONES ... 13
VI. RECOMENDACIONES ... 14
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ... 15
VIII. ANEXOS ... 20
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RESUMEN
Este estudio se realizó con el propósito de determinar las características del ciclo biológico de dos poblaciones de Aedes taeniorhynchus procedentes de los distritos Vice (Sechura- Piura) y Ventanilla (Callao). Se colectaron estadios inmaduros (larvas de II, III, IV y pupas), de criaderos naturales; los cuales fueron trasladados al laboratorio e instalados en jaulas de crianza y mantenidos a una temperatura de 27°C+ 2° y una humedad relativa promedio de 85%. Los estadios inmaduros fueron alimentados con alimento balanceado, los adultos con solución azúcar al 10% y a las hembras adicionalmente con sangre de ratones lactantes para la colonia del distrito de Ventanilla (Lima) y con sangre humana a través de un alimentador artificial (glyotubo) para la colonia del distrito de Vice ( Piura); se registraron los tiempos de duración de cada estadio evolutivo durante cuatro generaciones, porcentaje de eclosión y porcentaje de emergencia de adultos machos y hembras; los datos fueron sometidos al ANOVA. Se encontró que el tiempo de duración del ciclo biológico del estadio de larval de las cuatro generaciones fue en promedio 9 y 10 días para la población de Piura (AtP) y de Lima (AtL) respectivamente, no encontrándose diferencias estadísticas significativas; el mayor porcentaje de emergencia de adultos (90%) y de eclosión (100%) se presentó en la población de AtL.
Palabras clave: Aedes taeniorhynchus, ciclo biológico
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ABSTRACT
This study was carried out with the purpose of determining the biological cycle characteristics of two populations of Aedes taeniorhynchus from the Vice (Piura) and Ventanilla (Lima) districts. Immature stages (larvae of II, III, IV and pupae) were collected from natural breeding sites; which were transferred to the laboratory and installed in breeding cages and maintained at a temperature of 27°C + 2° and an average relative humidity of 85%. The immature stages were fed with balanced food, the adults with a 10%
sugar solution and the females additionally with blood from lactating mice for the colony in the district of Ventanilla (Lima) and with human blood through an artificial feeder (glyotube) for the colony in the district of Vice (Piura);; The duration times of each evolutionary stage during four generations, hatching percentage and emergence percentage of adult males and females were recorded; data were subjected to ANOVA. It was found that the duration of the biological cycle of the larval stage of the four generations was on average 9 and 10 days for the population of Piura (AtP) and Callao (AtL) respectively, with no statistically significant differences being found; the highest percentage of adult emergence (90%) and hatching (100%) occurred in the AtL population.
Keywords: Aedes taeniorhynchus, life cycle
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I. INTRODUCCION
El Aedes taeniorhynchus es un mosquito de coloración uniforme oscura, de tamaño mediano, fuerte, ágil de probóscide oscura que presenta un anillo blanco, ancho, bien marcado en su parte media que facilita su diferenciación. El tórax es de color castaño oscuro y no presenta ornamentación alguna: sus alas presentan escamas oscuras; el abdomen tiene manchas blancas laterales; las patas con anillos blancos y los palpos y antenas tienen las mismas características diferenciales entre macho y hembra que el Aedes aegypti (14).
Los huevos de Ae. Taeniorhynchus suelen ser alargados y/o ovoides. Generalmente pone los huevos en el suelo donde permanecen hasta que se inundan. Los huevos de estas especies pueden sobrevivir entre 3 y 5 años si no se producen inundaciones y en algunos casos, eclosionan tan pronto como son inundados y pueden haber varias generaciones. En las larvas el tubo de respiración es relativamente corto y robusto. Las branquias traqueales están bien desarrolladas en formas que se alimentan en el fondo del agua, en las larvas la esclerotización del segmento anal suele ser incompleta alrededor del segmento (13).
Ae. Taeniorhynchus, conocido como “el mosquito negro de la marisma”, es muy común en las áreas costeras orientales de las Américas y aunque no es un vector principal de gran preocupación, puede transmitir patógenos a los humanos y otros animales. Su aparición característica en grandes cantidades después de lluvias e inundaciones, así como su mordedura agresiva contribuyen a su notoriedad como insecto plaga (7).
La importancia del Ae. taeniorhynchus en cuanto a Salud Pública se refiere es que es considerado como un eficiente vector del virus de la encefalitis equina venezolana tipo epidémico - epizoótico y existe evidencia de que es también transmisor de la encefalitis del Este(16).
Eastwood et (7), analizaron la distribución de poblaciones de Ae. taeniorhynchus en la Isla Galápagos y demostraron los correlatos ecológicos y ambientales de la variación temporal y espacial en su abundancia, así mismo investigaron su fuente alimenticia con la sangre de reptiles como de mamíferos. Bello et al (2), han reportado aspectos de la biología de este insecto (ciclo de vida y longevidad), tablas de vida y algunos parámetros
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físicos, ambientales y nutricionales que garantizarán el mantenimiento y la continuidad de la especie en condiciones de Laboratorio a partir de una colonia procedente de Barranquilla y Atlántico (Colombia).
En el Perú, existen pocos estudios sobre Ae. Taeniorhynchus. Se ha reportado su distribución en diferentes regiones, determinó la presencia de larvas I, II, III y IV, y pupas en criaderos con pH entre 7,0 y 9,5 en las localidades de Santa, Chimbote, Nuevo Chimbote, Casma, Huarmey y Puerto Huarmey, tanto en el peridomiciliarios y extradomiciliarios en la región Ancash. (14)
Ae. taeniorhynchus no es considerado un vector principal dentro de las principales enfermedades metaxénicas en Perú; sin embargo, se ha involucrado como un vector eficiente en la trasmisión de enfermedades causantes de epidemias en el mundo como la Encefalitis Equina Venezolana, Encefalitis Equina del Este y el Virus del Nilo;
enfermedades que aún no han sido reportadas en el país; pero que son de importancia para la Salud Pública. Siendo necesario realizar diferentes estudios como su ciclo biológico, estudios comparativos sobre si las diferentes condiciones climáticas de cada hábitat podrían influir en este. Es así que el presente trabajo tuvo como finalidad determinar las características del ciclo biológico de dos poblaciones naturales de Aedes taeniorhynchus procedentes de los distritos Vice (Piura) y Ventanilla (Lima).
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II. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1 Área de estudio
Se obtuvieron especímenes de Aedes taeniorhynchus (Wiedemann, 1821) de los criaderos naturales de los distritos Vice (Región Piura) (AtP) en 9400834.01 N y 522590.40 E y de los Humedales de Ventanilla (Región Callao) (AtL) en 8686810 N y 267100 E (Anexo 1A y 1B).
El distrito de Vice está localizado a 05º 25’ 26’’ de latitud sur y 80º 46’ 35’’ de longitud oeste. Tiene una superficie de 595.87 km² y una a altura de 17 msnm. La temperatura varía de 17 a 32°C y con bajas precipitaciones pluviales (23 y 24). La localidad de Ventanilla está localizada a 18 km del centro del Callao y 34 km al noreste de Lima, a la altura del km. 28,5 de la Panamericana Norte, pertenece al norte de la Provincia Constitucional del Callao; la temperatura varía de 16 a 26°C, el distrito de Ventanilla está localizada a 11º 49’ 40’’ de latitud sur y 77º 11’ 16’’ de longitud oeste. Tiene una superficie de 73.52 km² y una a altura de 500 msnm.(21) 2.2 Obtención de las poblaciones P1 de Aedes taeniorhynchus en laboratorio
2.2.1 Colecta y transporte de especímenes
Se colectaron 213 larvas y 26 pupas de criaderos naturales de las lagunas ubicadas al costado de la carretera del distrito de Vice Región Piura durante los meses de noviembre de 2019 a febrero de 2020; y 28 larvas y 18 pupas de los pozos aledaños a las lagunas ubicadas en los Humedales del distrito de Ventanilla en los meses de agosto a setiembre del 2019 y enero a febrero del 2020 para Lima. Durante las colectas se registraron datos de temperatura del agua, pH, turbidez y conductibilidad con ayuda del equipo multiparamétrico.
Los datos obtenidos se llenaron en la ficha de campo (Anexo 2).
Los especímenes colectados, fueron transportados con agua del criadero en recipientes de plástico transparente de un litro, hasta el laboratorio.
2.2.2 Determinación taxonómica
La determinación taxonómica de los especímenes se realizó mediante el uso de la clave propuesta por Michele M Cutwa & George F O’ Meara,
”PHOTOGRAPHIC GUIDE TO COMMON MOSQUITOES OF FLORIDA” y la clave propuesta por Theodore G. Andreadis, Michael C.
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Thomas, & John J. Shepard. “IDENTIFICATION GUIDE TO THE MOSQUITOES OF CONNECTICUT”.
2.2.3 Establecimiento de las colonias Aedes taeniorhynchus en el laboratorio
● Crianza de larvas
Las larvas de ambas poblaciones (Vice-Piura y Ventanilla-Lima) colectadas de criaderos naturales, fueron separadas por estadios en recipientes plásticos transparente de un litro de capacidad conteniendo 500mL de agua reposada libre de cloro y alimentadas con alimento balanceado y mantenidas a temperatura ambiental de 29+3°C para la población de Vice-Piura (AtP) y 21+2 °C para la de Ventanilla – Lima (AtL ). Hasta la obtención de pupas.
● Crianza de adultos
A partir de las pupas se obtuvieron especímenes adultos machos y hembras, los cuales fueron mantenidos en jaulas de crianza de 30 x30cm2. Los adultos fueron alimentados con solución azucarada al 10%; y las hembras además con alimento sanguíneo de acuerdo al procedimiento propuesto por el INS(10).
Las colonias de AtP, fueron alimentadas con sangre humana en tubo alimentador llamado “Glyotubo” método propuesto por Costa Et Al, 2013 (7) y cuyo modo de preparación del glyotubo se encuentra detallado en el anexo 07 y la AtL con ratones lactantes de aproximadamente 9 días (figuras 23A,23B, 24A, 24B).
● Obtención de huevos
Para las ovoposturas se colocó dentro de cada jaula de crianza vasos ovitrampa de acuerdo al Protocolo Sanitario de Urgencia para el Reforzamiento de la Vigilancia Entomológica del Vector Aedes aegypti mediante el uso de Ovitrampas (18) para la población AtP y recipientes con tierra húmeda según lo propuesto por Hernández et al (9) para la población AtC (Anexo 14A). Ambos tipos de depósitos fueron inspeccionados diariamente para evidenciar la presencia de huevos y nivel de agua o humedad de los recipientes de ovoposición. Los huevos fueron contados y colocados
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en bandeja de crianza de 30x20 cm con un litro de agua reposada hasta la obtención de larvas.
2.2.4 Control de temperatura y humedad
Se realizó el monitoreo de temperatura y humedad relativa dentro de la jaula de cría y dentro del laboratorio con un termohigrómetro. Las tomas de temperatura se realizaron a las 8 am 2 pm y 6 pm.
2.3 Evaluación del ciclo biológico de dos poblaciones de Aedes taeniorhynchus
2.3.1 Implementación del diseño
Para la evaluación del ciclo biológico se utilizó 612 huevos de AtP y 750 de AtL. Para ello, se trabajó ambas colonias bajo condiciones controladas de laboratorio (temperatura, humedad relativa y alimentación controlada). Se evaluó el ciclo biológico de cada colonia hasta la 4ta generación.
a. Evaluación de las larvas
Las larvas obtenidas de la eclosión de los huevos se seleccionaron por estadio, y se colocaron en recipientes de plástico boca ancha de 1L de capacidad, el cual contenía 500 mL de agua reposada. Se midió la temperatura a las 8:00, y 18:00 h. Los datos se registraron en un formato de registro diario, según el Protocolo para crianza de mosquitos en condiciones de Laboratorio INS. (12).
En cada recipiente se colocaron 25 especímenes, los cuales fueron alimentados con alimento balanceado y se evaluó diariamente el desarrollo de los estadios larvales, registrándolos en un formato de registro diario hasta la obtención de adultos.
b. Evaluación de adultos
Las pupas fueron trasladados a las jaulas de crianza de adultos y evaluadas diariamente a fin de registrar la cantidad de hembras y machos emergidos, lo cual nos permitió obtener el porcentaje de emergencia de adultos.
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Los adultos tanto machos como hembras, fueron alimentados con algodón embebido en sacarosa al 10% (12). Las hembras, además fueron alimentadas sanguínea según lo descrito en el punto 2.3.3.
Dentro de cada jaula, se colocó previamente recipientes con agua (ovitrampa) para la colonia Piura y recipientes con tierra húmeda para la colonia Lima. Las ovitrampas fueron revisaron cada 4 días por un período de dos semanas para observar si eclosionaron, lo que permitirá determinar el porcentaje de eclosión. Posteriormente, las larvas obtenidas fueron colocadas en recipientes con agua reposada, repitiendo el mismo proceso detallado anteriormente para cada generación hasta la 4ta generación.
2.3.2 Parámetros del ciclo biológico
Se evaluó el porcentaje de eclosión de los huevos, el tiempo de desarrollo larvario por cada estadio (tiempo que dura cada instar larvario), porcentaje de emergencia de larvas y adultos y número de hembras y machos emergidos por cada generación.
2.4 Análisis de información
Con los tiempos obtenidos de cada estadio, porcentaje de emergencia de adultos y porcentaje de hembras y machos emergidos se elaborarán tablas de vida. Los datos fueron sometidos al análisis de varianza (ANOVA) para determinar si existe diferencias entre las cuatro generaciones de Ae. taeniorhynchus; para ello se utilizó el SPSS (Statistical Package for the Social Sciences) versión 10.0.
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III. RESULTADOS
Se recolectaron 213 larvas en los siguientes estadios: 5 (II), 66 (III) y 142 (IV); y 26 pupas en el distrito de Vice, provincia de Sechura- Piura y 28 larvas en los siguientes estadios: 2 (II), 11 (III) y 15 (IV); y 18 pupas en el distrito de Ventanilla, provincia del Callao que fueron los progenitores (P1). De los parámetros tomados con el equipo multiparámetro para aguas se obtuvo los siguientes datos: temperatura de 27ºC y 25°C en las localidades de Vice y Ventanilla respectivamente, pH de 6,56 (Piura) y 6,46 (Lima) y una turbidez de 2,22 NTU (AtP) y 2,36 NTU (AtL).
Después de 6 días se obtuvieron 148 adultos: 84 hembras y 64 machos en la colonia de Piura y 28 adultos: 16 hembras y 12 machos después de 5 días en la colonia de Lima. Durante el establecimiento y mantenimiento de las colonias Piura (AtP) y Lima (At L) se obtuvieron cuatro generaciones y en cada una de ellas se registró el tiempo promedio de duración de los estadios de desarrollo del ciclo de vida del mosquito: huevo, larva y pupa. Además, el Porcentaje de Emergencia de adultos y el Porcentaje de Adultos de cada generación de acuerdo al Género. Los datos obtenidos se detallan a continuación.
Tabla 1: Porcentaje de eclosión y emergencia de adultos de Aedes taenorhynchus procedentes de criaderos naturales del distrito de Vice, provincia de Sechura- Piura (AtP) y del distrito de Ventanilla, provincia del Callao-Lima (AtL), bajo condiciones de laboratorio.
GENERACIO NES
% de eclosión % de emergencia de adultos (%M - %H)
AtP AtL AtP AtC
G1 94.4a 97.3a 73 (34 - 66) 87 (55 - 45)
G2 97.6a 100.0a 61 (47 – 53) 90 (51 – 49)
G3 88.7b 96.8a 64 (53 - 47) 90 (45 - 55)
G4 81.3b 99.2a 50 (43 - 57) 89 (34 - 66)
M: macho; H: hembra a,b letras iguales no hay diferencias significativas
En la Tabla 1 se observa el porcentaje de eclosión y emergencia de adultos de Ae.
taeniorhynchus procedentes de criaderos naturales del distrito de Vice, provincia de
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Sechura- Piura (AtP) y del distrito de Ventanilla, provincia del Lima (AtL), bajo condiciones de laboratorio, encontrándose el mayor porcentaje de eclosión (desde 96.8 hasta100%) y mayor porcentaje de adultos en la población AtL, en las cuatro generaciones en comparación con la población de AtP. Sin embargo, no existe diferencias estadísticas significativas (p>0.01) entre el porcentaje de eclosión y las generaciones en AtL.
Tabla 2: Tiempo promedio (días) de desarrollo e intervalos de confianza de los diferentes estadios de Aedes taeniorhynchus procedentes de criaderos naturales del distrito de Ventanilla, provincia del Callao-Lima , en cuatro generaciones criados en laboratorio.
Estadio Promedio (DS) Intervalos de confianza
Superior Inferior
L1 2.0 + 0.0 0.0 0.0
L2 5.0 + 0.0 0.0 0.0
L3 7.5 + 0.6 8.1 6.9
L4 10.0 + 0.0 0.0 0.0
PUPA 12.8 + 0.5 13.2 12.3
ADULT
O 14.8 + 0.5 15.2 14.3
*DS: desviación estándar
LI L2 L3 L4 PUPA ADULTO
2
5
7
10
13
15
2
5
7
10
12
14
2
5
8
10
13
15
2
5
8
10
13
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1ERA GENERACION 2DA GENERACIÓN 3ERA GENERACIÓN 4TA GENERACIÓN
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Fig. 1: Tiempo (días) de desarrollo de los diferentes estadios de Aedes taeniorhynchus procedentes de criaderos naturales del distrito de Ventanilla, provincia del Callao- Lima en cuatro generaciones, criados en el Laboratorio.
Tabla 3: Tiempo promedio (días) de desarrollo e intervalos de confianza de los diferentes estadios de Aedes taeniorhynchus procedentes de criaderos naturales del distrito de Vice, provincia de Sechura- Piura, en cuatro generaciones criados en laboratorio.
Estadio
Promedio (DS)*
Intervalos de confianza
Superior Inferior
L1 3.0 +1.4 4.4 1.6
L2 4.8+1.9 6.6 2.9
L3 7.0+2.2 9.1 4.9
L4 9.0+2.6 11.5 6.5
PUPA 11.3+3.0 14.2 8.3
ADULTO 13.8+3.3 16.9 10.5
*DS: desviación estándar
Fig. 2: Tiempo (días) de desarrollo de los diferentes estadios de Aedes taeniorhynchus procedentes de criaderos naturales del distrito de Vice, provincia de Sechura- Piura, en cuatro generaciones, criados en laboratorio
LI L2 L3 L4 PUPA ADULTO
4
6
8
10
12
14
4 5
7 8
10
13
3
6
9
12
15
18
1 2
4 6
8
10
1ERA GENERACION 2DA GENERACIÓN 3ERA GENERACIÓN 4TA GENERACIÓN
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Fig.3: Tiempo de duración en días del ciclo biológico de Aedes taeniorhynchus procedentes de criaderos naturales del distrito de Vice, provincia de Sechura- Piura (AtP) y del distrito de Ventanilla, provincia del Callao- Lima (AtL), bajo condiciones de laboratorio.
Fig.4: Comparación del Tiempo de duración en días del ciclo biológico de Aedes taenorhynchus de dos colonias procedentes de criaderos naturales del distrito de Vice, provincia de Sechura- Piura (AtP) y del distrito de Ventanilla, provincia del Callao- Lima (AtL), bajo condiciones de laboratorio
AtP AtL
HUEVO LARVA PUPA ADULTO
3
6
2 2
2
8
3
2 H-LI 2
LI-LII 3
LIII-LIV 3 LIV-Pupa
3
Pupa-Adulto 2
AtL
H-LI 3
LI-LII 2
LIII-LIV 2 LIV-Pupa
2
Pupa-Adulto 2
AtP
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IV. DISCUSIÓN
El porcentaje de eclosión fue mayor en la colonia de la Región Lima-Callao, manteniéndose por encima del 96 % en cada generación a diferencia de la colonia de Piura en donde este porcentaje disminuyó de una generación a otra (Tabla 1). En un estudio sobre las características del ciclo biológico y la tabla de vida de Ae. aegypti, en condiciones de Laboratorio realizado en el Laboratorio de Referencia de la Regional de Salud Dirección-Sede de La Libertad también se obtuvo que el porcentaje de eclosión fue mayor en la generación P1 y de allí fue disminuyendo en cada generación (19).
En un estudio, Aedes taeniorhynchus como factor de riesgo a encefalitis equina venezolana en la zona costa de la región Ancash muestra que el tiempo de duración de huevo a adulto en las condiciones de laboratorio a una temperatura de 21ºC y una humedad relativa de 96-98%, fue de 13 días, en el cual el porcentaje de eclosión de los huevos fue de 60% y los tiempos promedio fueron : de huevo a larva I fue de 2 días, de larva I a larva II 2 días, de larva II a larva III 2 días , de larva III a larva IV dos días, de larva IV a pupa 3 días y de pupa a adulto 3 días (15). Estos tiempos en días de este estudio fueron muy parecidos a los de las colonias de Piura y Lima; los cuales fueron:
de huevo a larva 2 y 3 días, de larva I a larva II 3 y 2 días, de larva II a larva III 2 días para ambas colonias, de larva III a larva IV 3 y 2 días, de larva IV a pupa 3 y 2 días, y de pupa a adulto 2 día respectivamente (Figura 3).
El porcentaje de emergencia de adultos en la colonia Lima (AtL) para las cuatro generaciones fue de 87% al 90% y de la colonia Piura fue menor de 73% al 50%
(Figura 1), disminuyendo en cada generación conforme aumentaba la temperatura ambiental, esto se debería a que la crianza se realizó a 23°+ 2 para la AtL, mientras que la AtP a 28°+ 2. Se ha reportado que a temperaturas superiores el desarrollo del mosquito cae dramáticamente, aunque algunos estudios han revelado que se han presentado eclosiones larvales a temperaturas altas, lo que puede significar una posible respuesta fisiológica adaptativa. (25)
Otros estudios sobre ciclo biológico de mosquitos Aedes afirman que bajo las condiciones óptimas, la emergencia de adultos puede ocurrir en tiempos tan pequeño como seis días seguida de la eclosión del huevo (15), en el presente estudio el ciclo biológico de huevo a adulto tuvo un promedio de13.8 días para la colonia de Piura (AtP) y de 14.8 para la colonia de Lima (AtL). En la Tabla 1, estos resultados fueron
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similares a los obtenidos en un estudio comparativo del ciclo de vida del mosquito Aedes taeniorhynchus de dos colonias de la costa atlántica colombiana las cuales reportaron que el tiempo de duración fue en promedio 13.88 días para la colonia de Barranquilla y de 13.65 días para la colonia de Cartagena (11).
Además, el tiempo de duración del estadio de larva de las cuatro generaciones tuvo un promedio de 9 días para la colonia de Piura (AtP) y de 10 días para la colonia de Lima (AtL). (Figura 4), similares resultados a los reportados en el estudio comparativo de dos colonias de Aedes taeniorhynchus de la costa atlántica colombiana, quienes determinaron que el tiempo de duración del estado de larva fue entre 8 y 9 días. (11) La colonia de Piura (AtP) presentó tiempos de duración de la larva de 10, 12,8 y 6 días en las cuatro generaciones respectivamente mientras que el tiempo de duración para la colonia de Lima (AtL) fue de 12 días y se mantuvo constante en las cuatro generaciones. Este tiempo está dentro del rango en el que los estados larvales con frecuencia pueden tardar entre 5 y 15 días en completarse, según la temperatura ambiental (25). Numerosos factores influyen sobre el crecimiento, algunos inherentes a la propia especie y otros dependientes del ambiente, como temperatura, disponibilidad de elementos nutritivos, densidad larval y presencia de depredadores (15).
En el tiempo de duración de larva y pupa para la colonia de Piura y Lima no presentó diferencias significativas. Al igual que un estudio comparativo del ciclo de vida de Ae.
taeniorhynchus procedente de Barranquilla y Cartagena tampoco hubo diferencias significativas para los tiempos de duración de larva y pupa pero si para el tiempo de eclosión de la larva. (3)
En el presente estudio se encontró que la diferencia en el tiempo de duración de los diferentes estadios se hizo más marcada a partir de la tercera generación en la colonia Piura a diferencia de la colonia Callao donde no hubo diferencias significativas en las cuatro generaciones (Figura 1 y 2). Podría ser esta la causa de que en la cuarta generación de la colonia de Piura el tiempo del ciclo biológico fue de 10 días debido a que en este periodo “ mes de febrero” la temperatura ambiental en la ciudad llego hasta 35°C y la del agua del criadero de los estadios inmaduros llego hasta los 31 °C, o podría ser que el tiempo del ciclo biológico se acorto de una generación a otra debido a que las generaciones de esta especie se van adaptando a las condiciones de laboratorio.(3).
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V. CONCLUSIONES
⮚ La colonia de Lima-Callao (AtL) presentó mayor porcentaje de emergencia de adultos siendo este de 87% a 90% a diferencia de la colonia Piura (AtP) que fue de 73% a 50% debiéndose a las altas temperaturas que registra en época de verano la ciudad de Piura.
⮚ La colonia de Lima-Callao (AtL) presentó mayor porcentaje de eclosión en las cuatro generaciones, encontrándose este entre 97.3% a 100% a diferencia de la colonia de la Región Piura que fue de 81.3% a 97.6%.
⮚ El ciclo biológico de huevo a adulto tuvo un promedio de13.8 días para la colonia de Piura con temperaturas ambiental de 27°C a 35°C y de 14.8 para la colonia de Lima con temperaturas de 25°c a 29°C.
⮚ No existió diferencias estadísticas significativas (p>0.01) para el porcentaje de eclosión y emergencia en relación a las cuatro generaciones de la colonia AtL . Así mismo no existió diferencias significativas entre el porcentaje de eclosión de las dos colonias AtL y AtP en relación a las dos primeras generaciones. Sin embargo si hubo diferencias significativas a partir de la tercera generación de AtP.
⮚ En el tiempo de duración de larva y pupa para la colonia de Piura y Lima no presentó diferencias significativas.
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VI. RECOMENDACIONES
1. Continuar con las investigaciones entomológicas, ecológicas, epidemiológicas de reservorios, y participar en ellas; relacionadas al Aedes taeniorhynchus, que es un mosquito de importancia en la salud pública y actualmente no se encuentra muy estudiado en el Perú.
2. Capacitar a los encargados de Vigilancia Entomológica y Control Vectorial sobre la biología y taxonomía del vector Aedes taeniorhynchus en el Ministerio de Salud y otras instituciones con el fin de saber distinguir taxonómicamente entre el Aedes aegypty y Aedes taniorhynchus y de esa manera evaluar permanentemente estas dos especies.
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VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Andreadis T, Thomas M, & Shepard J. Identificacion guide to the mosquitoes of Connecticut. The Connecticut Agricultural Experiment. [Internet] 2005 [Consultado 5 Agos 2019]. Disponible en URL: https://portal.ct.gov/- /media/CAES/DOCUMENTS/Publications/Bulletins/b966b996pdf.pdf
2. Arias A & Gonzales E. Montaje, Implementación y mantenimiento de una colonia de mosquitos género Anopheles para investigaciones en el laboratorio de zoonosis y salud pública y montaje de un sistema de alimentación artificial de insectos hematófagos. Universidad Distrital Francisco José de Caldas. Facultad de Medio Ambiente y Recursos Naturales Tecnología en Saneamiento Ambiental Bogotá D.C..
[Internet] 2015 [Consultado 2 Agos 2019]. Disponible en URL:
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3. Bello F, Olano V, Cassaleth E, Giraldo L, Hernánder C. Establecimiento y mantenimiento de una colonia de Aedes taeniorhynchus, Wiedemann, 1821 (Díptera:
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VIII. ANEXOS
FOTOS
ANEXO 01: ÁREAS DE ESTUDIO
FIGURA 01A: Mapa de ubicación del punto de muestreo en distrito de Ventanilla - Provincia de Callao(A)
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FIGURA 01B: Mapa de ubicación de los puntos de muestreo en distrito de Vice - Provincia de Sechura-Piura (B)
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ANEXO 2: ZONAS DE MUESTREO ZONA DISTRITO DE VENTANILLA-LIMA
Figura 2A: Zona de muestreo-lagunas de del distrito de Ventanilla, flora predominante junco y algas filamentosas, también se observó fauna asociada a Culex sp. para la colonia Lima
Figura 3A: zona de muestreo-lagunas de Ventanilla, flora predominante junco y algas filamentosas, también se observó fauna asociada a Culex sp. para la colonia Lima
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23 ZONA DISTRITO DE VICE -PROVINCIA DE PIURA-
Figura 2B: zona de muestreo-lagunas de arrozales al costado de la carretera de vice del distrito de Vice- Piura
Figura 3B: Zona de muestreo-lagunas de arrozales al costado de la carretera de Vice del distrito de Vice- Piura
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ANEXO 03: OBTENCIÓN DE LAS POBLACIONES y CICLO BIOLÓGICO COLECTA Y TRANSPORTE DE ESPECIMENES
Figura 4A: Extracción de los estadios inmaduros de Aedes taeniorynchus. Distrito de Ventanilla
Figura 4B: Extracción de los estadios inmaduros de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura 5A: Separación de las larvas y pupas de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura 5B: Separación de las larvas y pupas de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura 6A: Distribución de los especímenes para su traslado al laboratorio. Distrito de Ventanilla-Callao
Figura 6B: Distribución de los especímenes para su traslado al laboratorio. Distrito de Vice-Piura
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25 DETERMINACIÓN TAXONÓMICA
Figura 7A: Larva de Aedes taeniorhynchus (IV ESTADIO).
Obsérvese las escamas del octavo segmento, la sela del lobo anal, las papilas y el sifón.
Figura 7B: Huevo de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura 8A: Aedes taeniorynchus. Distrito de Ventanilla- Callao
Figura 8B: Larvas de IV estadio de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura 9A: Aedes taeniorynchus ,Distrito de Ventanilla- Callao
Figura 9B: Sifón con banda blanca al medio de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
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Figura10A: Ovitrampa para oviposición y bandeja con pupas de Aedes taeniorynchus. Distrito de Ventanilla, Callao
Figura 10B: Ovitrampa para oviposición y bandeja con pupas de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura11A: Huevos de Aedes taeniorynchus. Distrito de Ventanilla ,Callao
Figura11B: Tira de Ovitrampa con huevos de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura 12A: Colocación de la tira sobre una bandeja plástica para secado. Distrito de Ventanilla, Callao
Figura 12B: Colocación de la tira sobre una bandeja plástica para secado. Distrito de Vice,Piura
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27 Figura13A: Extracción de los huevos de Aedes
taeniorynchus hacia la bandeja para iniciar la eclosión.
Distrito de Ventanilla, Callao
Figura13B: Extracción de los huevos de Aedes taeniorynchus hacia la bandeja para iniciar la eclosión.
Distrito de Vice-Piura
Figura14A: Huevos de Aedes taeniorynchus en la bandeja metálica con agua Distrito de Ventanilla, Callao.
Figura14B: huevos de Aedes taeniorynchus en la bandeja metálica con agua Distrito de Vice-Piura
Figura 15A: Envases con las larvas de Aedes taeniorynchus provenientes de las oviposturas en laboratorio.Distrito de Ventanilla, Callao.
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Figura15B: Baldes con las larvas de Aedes taeniorynchus provenientes de las oviposturas en laboratorio. Distrito de Vice,Piura.
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ALIMENTACION
Figura16A: Larvas y pupas de Aedes taeniorhynchus.
Distrito de Ventanilla-Callao
Figura16B: Se colocó doble balde a los baldes que contenían pupas y larvas de IV estadio. Distrito de Vice- Piura
Figura17A:Recipiente de vidrio en el cual se colocaron los huevos de Aedes taeniorhynchus Distrito de Ventanilla, Callao
Figura 17B: Los baldes colocados sobre el balde de las larvas de IV y pupas se les hizo un agujero en la parte inferior para la salida del vector adulto de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura 18A: Otros recipientes para probar cual es el recipiente más eficaz para la crianza de Aedes taeniorhynchus Distrito de Ventanilla, Callao
Figura 18B: La técnica del doble balde disminuyó el porcentaje de mortalidad de adultos de Aedes taeniorynchus Distrito de Vice-Piura
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29 Figura 19A: Jaulas con los vectores adultos de Aedes
taeniorynchus. Distrito de Ventanilla-Callao
Figura 19B: Jaulas con los vectores adultos de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura 20A: Alimentación: colocando los ratones lactantes de 8-9 días en las jaulas entomológicas con los vectores adultos de Aedes taeniorynchus. Distrito de Ventanilla- Callao.
Figura 20B: Preparación del tubo alimentador (glyotubo) para alimentar a las hembras de Aedes taeniorynchus. Distrito de Vice-Piura
Figura 21A: Aedes taeniorhynchus alimentándose de los ratones lactantes. Distrito de Ventanilla-Callao
Figura 21B: Aedes taeniorhynchus alimentándose del glyotubo. Distrito de Vice Piura.
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ANEXO 4: TABLAS INICIALES
OVIPOSTURAS DE LAS COLONIAS DE CALLAO - LIMA
Generación Ovipostura Huevos
eclosionados
Huevos no eclosionados
F1 246 241 5
F2 350 340 10
F3 420 410 12
F4 250 240 15
OVIPOSTURAS DE LAS COLONIAS DE VICE-PIURA
Generación Ovipostura Huevos
eclosionados
Huevos no eclosionados
F1 612 578 34
F2 676 660 16
F3 355 315 40
F4 107 87 20
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ANEXO 5: Ficha de campo para el registro de colecta de adultos de Aedes taeniorhynchus
UBICACIÓN GEOGRAFICA
DEPARTAMENTO
PROVINCIA
DISTRITO
LOCALIDAD
LUGAR
G.P.S.
INDICADORES METEREOLOGICOS
TEMPERATURA °C
HUMEDAD RELATIVA %
COLECTA DE ADULTOS Y LARVAS
METODO
HORA
NUMERO
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ANEXO 06 PREPARACION DE LA OVITRAMPA SEGÚN PROTOCOLO SANITARIO DE URGENCIA-MINSA
Las ovitrampas. son envases de forma cónica, de material plástico liviano y de color negro con capacidad para un volumen de 500mL, con base plana que permite mantener la posición vertical y pueden ser apiladas para su fácil transporte. El envase posee una etiqueta donde se registra el código, las coordenadas de longitud y latitud, fechas de inspección y siglas del responsable (F Contiene dos elementos:
a) Soporte para recoger los huevos de Aedes aegypti: El soporte es de papel toalla con dimensiones de 30.0 x 6.0 cm (tira de papel), que se coloca en el borde interno de la ovitrampa, (Figura 3) el cual es sujetado con un clip de color (el de color evita la oxidación), esta tira de papel debe ser cambiada
cada siete (07) días.
b) Agua reposada con la adición de infusión de pasto al 10% en un volumen de 300 mL, que presenta 270 mL de agua reposada y 30 mL de infusión de pasto. Para la preparación de la Infusión de pasto: se pesa 9 gr de pasto seco tipo “grama americana” (Stenotaphrum secundatum) en 2 L de agua y se macera durante siete (07) días.(PSU,2016)
ANEXO 07: EXPERIENCIA DEL GLYOTUBO
Glyotubo; el cual se basa en un tubo con fondo cónico de 50 ml con tapa de rosca, parafilm, película de sellado “plástico resistente al calor” y 40 ml de glicerina al 100%. Este Glyotubo se preparó cortando un orificio de aproximadamente 2.5 cm de diámetro en el centro de la tapa del tubo cónico, luego se frotó un cuadrado de membrana parafilm (5 cm x 5 cm), sobre la piel humana para adherir olor natural y mejorar su atractivo para mosquitos. Esta membrana se estiró a través de la tapa hasta volverla translúcida, colocándola sobre la tapa plegando los bordes laterales en el lado exterior de la tapa;
fijándolos con otra tira de parafilm y eliminando el exceso estirado. El tubo cónico se llenó con 40 ml de glicerina al 100% previamente calentada en un vaso de precipitación a temperatura de 70 ºC, el extremo abierto del tubo se selló con película del plástico resistente al calor (10 cm x13 cm) y se fijó lateralmente con una liga. A la tapa que contiene la membrana se le coloco 2 ml de sangre humana del grupo Rh Opositivo ( muestras donadas por el laboratorio clínico y de anatomía patológica del Hospital Regional III José Cayetano Heredia de
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Piura) precalentada en baño maría a 40ºC. Luego se procedió a ensamblar el tubo enroscando con cuidado la tapa en el tubo cónico. Posteriormente se introdujo el glytubo dentro de una pequeña caja de tecnopor con un agujero en la parte inferior para de esta manera mantener el calor del glytubo, la cual estaba dentro de la jaula de las hembras.
Figura 22 B: Preparación de la glicerina, la cual se
calentó a 70°C. Figura 23B: Preparación de la membrana
Figura 24 B: Sangre humana “O” Rh positivo Figura 25B. Los tubos con sangre humana se
calentaron a 40°C.
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ANEXO 10: CONSENTIMIENTO INFORMADO SOBRE DONACION DE MUESTRAS SANGUINEAS HUMANAS TAMIZADAS. (ver documento adjunto)
