BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
ESCUELA DE POSGRADO
UNIDAD DE POSGRADO EN CIENCIAS BIOLÓGICAS
Cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus después
del nacimiento
TESIS
PARA OBTENER EL GRADO ACADÉMICO DE:
DOCTOR EN MICROBIOLOGÍA
Autor: Ms. Carranza Quispe, Luis Emilio
Asesor: Dr. Hilario Vargas, Julio Santos
TRUJILLO – PERÚ 2022
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
JURADO DICTAMINADOR
____________________________________
Dra. Manuela Natividad Luján Velásquez PRESIDENTE
____________________________________
Dr. Anthony Jordan De la Cruz Castillo SECRETARIO
____________________________________
Dr. Julio Santos Hilario Vargas ASESOR
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
AGRADECIMIENTO
Gracias a todos los que participaron y me acompañaron en este esfuerzo de investigación, que han sido mi apoyo y fortaleza.
A mi familia, a mis queridos padres Jorge y Jesús por creer en mí, a mis hermanos Cristhy y Marlon, a mi tía Chely, quienes siempre han estado a mi lado pendientes de mí y a mi amado hijo Emiliano, por ser mi fuente de energía para seguir realizando los proyectos de vida.
A mis maestros, colegas y amigos, quienes han colaborado con la ejecución de esta investigación, en especial a mi maestro, asesor y amigo Julio Hilario Vargas. A Cristhy Carranza, Jefa del servicio de apoyo al diagnóstico del Hospital Santa María de Cutervo, por el apoyo en la toma y procesamiento de las muestras de los pacientes.
“Es extraño que sólo las personas extraordinarias hagan descubrimientos que luego aparecen de manera fácil y sencilla”
Georg Lichtenberg
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
ÍNDICE
JURADO DICTAMINADOR ... ii
AGRADECIMIENTO ... iii
RESUMEN ... iv
ABSTRACT ... vii
ÍNDICE ... iv
ÍNDICE DE FIGURAS Y TABLAS ... v
I. INTRODUCCIÓN ... 1
II. MATERIAL Y MÉTODOS ... 5
2.1. OBJETO DE ESTUDIO ... 5
2.2. INSTRUMENTOS Y FUENTES DE DATOS ... 5
2.2.1. Reactivos y Materiales de Laboratorio ... 5
2.2.2. Equipos... 5
2.2.3. Fuentes de datos ... 5
2.3. MÉTODO Y TÉCNICAS ... 6
2.3.1. Muestra: ... 6
2.3.2. Criterios de Inclusión y exclusión ... 6
2.3.3. Toma de muestra en pacientes ... 6
2.3.4. Transporte de la muestra ... 7
2.3.5. Determinación y cuantificación de los niveles de IgG e IgM anti- citomegalovirus ... 7
2.3.6. Ética ... 8
2.3.7. Estadística ... 8
III. RESULTADOS ... 9
IV. DISCUSIÓN ... 15
V. CONCLUSIONES ... 19
VI. RECOMENDACIONES ... 20
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ... 21
ANEXOS ... 24
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
ÍNDICE DE FIGURAS Y TABLAS
Figura 1: Dispersión por edades de los niveles de IgG anti-citomegalovirus en niños menores de 1 año... 9 Figura 2: Dispersión por edades de los niveles de IgM anti-citomegalovirus en niños menores de 1 año... 10 Figura 3A: Cinética de IgG anti-citomegalovirus por trimestres de edades de en niños menores de 1 año... 12 Figura 3B: Cinética de IgM anti-citomegalovirus por trimestres de edades de en niños menores de 1 año... 13 Tabla 1: Niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus en madres y recién nacidos por sexo ... 9 Tabla 2: A Distribución por edades de los niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus en niños menores de 1 año.. ... 11 Tabla 3: Niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus distribuido por trimestres de edades en niños menores de 1 año”. ... 12 Tabla 4: Encuesta epidemiología de citomegalovirus a madres ... 13
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
RESUMEN
El citomegalovirus (CMV) es un patógeno viral prevalente, en la mayoría de las personas con CMV agudo experimentan una infección inaparente. La fuente principal de infección primaria por CMV ocurre durante el embarazo y en el primer año de vida. El objetivo del presente trabajo fue determinar la cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus después del nacimiento. Se analizó un total de 90 individuos, conformado por 20 madres con sus recién nacidos y 50 niños menores de un año, atendidos en el Hospital Santa María de Cutervo. La medición de los niveles de IgG e IgM anti- citomegalovirus, fue por la técnica de inmunoquimioluminiscencia, además se realizó una encuesta para conocer datos epidemiológicos. Los niveles de anticuerpos entre las madres y los recién nacidos se mantienen en niveles similares. En los IgG, se observa una disminución de los niveles de anticuerpo desde el momento del nacimiento hasta los 9 meses de edad, después se muestra un aumento hasta los 12 meses. La dispersión por edades de los niveles de IgG e IgM anti- citomegalovirus en niños menores de 1 año, se observa que los niveles IgG está en niveles altos en todos los grupos, señalando una positividad del 97%. En cambio, los niveles de IgM se mantienen bajos dando una positividad de solo 2.8% del total de los niños analizados. Se determinó la cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus después del nacimiento, donde su respuesta humoral con respecto al IgG durante el primer año de vida, evidencia que se encuentra en concentraciones elevadas después del nacimiento y continua con una disminución de los niveles de anticuerpos hasta los 9 meses, posterior a esto, se da un aumento de su concentración hasta los 12 meses. La cinética del anticuerpo IgM anti-citomegalovirus aparece con la respuesta humoral en el primer año de vida, donde sus concentraciones se elevaron en respuesta a la infección con el citomegalovirus entre el primer y tercer trimestre después del nacimiento.
Palabras clave: IgG, IgM, anticuerpos, cinética, citomegalovirus.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
ABSTRACT
Cytomegalovirus (CMV) is a prevalent viral pathogen; most persons with acute CMV experience inapparent infection. The main source of primary CMV infection occurs during pregnancy and in the first year of life. The aim of the present work was to determine the kinetics of anti-cytomegalovirus IgG and IgM antibodies after birth. A total of 90 individuals were analyzed, comprising 20 mothers with their newborns and 50 children under one year of age attended at the Hospital Santa María de Cutervo. Anti-cytomegalovirus IgG and IgM levels were measured by immunochemiluminescence technique, and a survey was carried out to obtain epidemiological data. The levels of antibodies between mothers and newborns remained at similar levels. In IgG, a decrease in antibody levels was observed from the time of birth until 9 months of age, after which an increase was observed until 12 months of age.
The dispersion by age of IgG and IgM anti-cytomegalovirus levels in children under 1 year of age shows that IgG levels are at high levels in all groups, indicating a positivity of 97%.
On the other hand, IgM levels remained low, giving a positivity of only 2.8% of the total number of children analyzed. The kinetics of anti-cytomegalovirus IgG and IgM antibodies were determined after birth, where their humoral response with respect to IgG during the first year of life, evidence that it is found in high concentrations after birth and continues with a decrease in antibody levels until 9 months, after this, there is an increase in its concentration until 12 months. The kinetics of anti-cytomegalovirus IgM antibody appears with the humoral response in the first year of life, where its concentrations rose in response to cytomegalovirus infection between the first and third trimester after birth.
Key words: IgG, IgM, antibodies, kinetics, cytomegalovirus.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
I. INTRODUCCIÓN
El citomegalovirus (CMV) es un herpesvirus común en todo el mundo. Las dos fuentes principales conocidas de infección primaria por CMV durante el embarazo son la actividad sexual y el contacto con niños pequeños. La infección primaria ocurre en aproximadamente 1 a 4% de los embarazos y es asintomática en su mayoría en adultos inmunocompetentes. Sin embargo, la infección primaria puede manifestarse como una mononucleosis leve o un síndrome similar a la gripe con fiebre persistente y fatiga. El CMV puede transmitirse de madre a hijo en el útero, durante el parto o durante la lactancia1.
La transmisión intrauterina puede provocar una infección congénita por CMV, una de las principales causas de pérdida permanente de la audición y la visión y discapacidad neurológica entre los niños. Las tasas de transmisión congénita del CMV llegan al 50 % en mujeres que contraen la infección primaria por CMV durante el embarazo y menos del 2% en mujeres con infección no primaria. No existe una vacuna contra el CMV autorizada2. Se han sugerido buenas prácticas de higiene y evitar el contacto íntimo con niños pequeños (p. ej., besar en la boca y compartir utensilios) como un enfoque para prevenir la infección materna primaria por CMV durante el embarazo, pero sigue siendo un método no probado para reducir el riesgo de infección congénita por CMV. Aproximadamente 1 de cada 10 bebés que adquieren CMV en el útero tendrán signos clínicos al nacer, y un 10 a 15 % adicional desarrollará secuelas tardías. El tratamiento antiviral prenatal y posnatal no ha demostrado ser eficaz para prevenir la infección por CMV congénita o posnatal, y no se recomienda para la atención clínica de rutina. Sin embargo, se recomienda el tratamiento antiviral cuando se inicia en el primer mes de vida para la infección por CMV congénita sintomática para mejorar los resultados audiológicos y del neurodesarrollo1.
El citomegalovirus establece una infección latente de por vida después de la infección primaria que puede reactivarse periódicamente con la eliminación del virus infeccioso. La infección primaria, la reactivación y la reinfección durante el embarazo pueden conducir a la transmisión en el útero al feto en desarrollo. Las infecciones congénitas por CMV son una causa importante de pérdida auditiva permanente y deterioro neurológico. La infección por CMV era relativamente común entre las
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
mujeres en edad reproductiva, con una seroprevalencia que oscilaba entre el 45 y el 100%. La seroprevalencia de CMV tendió a ser más alta en América del Sur, África y Asia y más baja en Europa Occidental y Estados Unidos 3.
Se estima una seroprevalencia global de CMV del 83% (95%UI: 78-88) en la población general, del 86% (95%UI: 83-89) en mujeres en edad fértil y del 86%
(95%UI: 82-89). 89) en donantes de sangre u órganos. Para cada uno de estos tres grupos, la seroprevalencia más alta se observó en la región del Mediterráneo Oriental de la Organización Mundial de la Salud (OMS) 90 % (95 % UI: 85-94) y la más baja en la región europea de la OMS 66 % (95 % UI: 56-94). 74) 4. La región del Mediterráneo Oriental de la Organización Mundial de la Salud (OMS), muestra también una seroprevalencia alta de un 90% (95% UI: 85-94) y la más baja en la región europea de la OMS 66% (95% UI: 56-74). Estas estimaciones de la distribución mundial del CMV ayudarán a desarrollar modelos nacionales y regionales para entender y controlar la enfermedad e informarán los futuros esfuerzos de desarrollo de vacunas 5.
Comprender la epidemiología de este virus es un elemento clave en el desarrollo de estrategias para prevenir la enfermedad por CMV. Después de la infección, el CMV puede permanecer latente, con reactivación subsiguiente; se desconocen los factores que controlan la latencia y la reactivación, además, de los factores que determinan si una infección por CMV será sintomática 6. La enfermedad por CMV se puede adquirir por vías naturales, incluida la transmisión horizontal y vertical. Debido a la ubicuidad de CMV, la delineación de la transmisión de CMV por estas rutas naturales es complicada por la miríada de posibles fuentes. Además, se han planteado preocupaciones sobre el riesgo de transmisión del CMV a la mujer embarazada seronegativa en relación con la prevención de la transmisión del CMV 7. La infección primaria, la reactivación y la reinfección son los tipos de infecciones activas por CMV. Además de las rutas naturales de infección, la introducción de órganos presuntamente infectados de forma latente y la necesidad de múltiples transfusiones de sangre aumentan la exposición potencial al CMV 8.
La transmisión del CMV ocurre cuando hay contacto directo con fluidos corporales (por ejemplo, la lactancia materna, transfusiones sanguíneas, trasplantes de órganos). Cuando la lactancia materna es una práctica generalizada y la mayoría de las
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
madres son seropositivas, la mayoría de los niños adquieren el HCMV durante el primer año de vida. De hecho, dado que las infecciones por HCMV adquiridas por recién nacidos sanos parecen ser en gran medida de naturaleza asintomática, no ha habido un incentivo real para desarrollar o implementar estrategias para prevenir la transmisión por esta vía 9. Sin embargo, estudios recientes10 han identificado un riesgo significativo para los bebés prematuros de bajo peso al nacer para el desarrollo de la enfermedad por HCMV después de adquirir la infección a través de la leche materna.
Tales infecciones pueden causar una morbilidad considerable a corto plazo y, en algunos casos, enfermedades graves que ponen en peligro la vida. Hay poco consenso entre los neonatólogos sobre el enfoque para la prevención y el tratamiento de tales infecciones 11.
El citomegalovirus (CMV) es responsable de la infección oportunista viral más común en personas con síndrome del virus de la inmunodeficiencia adquirida (SIDA)
12. La enfermedad clínica debida al CMV se ha reconocido en hasta el 40% de los pacientes con enfermedad avanzada por VIH. La presentación más común es la retinitis, aunque también se reportan con frecuencia colitis, esofagitis, neumonitis y trastornos neurológicos. La retinitis por CMV generalmente se diagnostica clínicamente y las pruebas serológicas para inmunoglobulina contra CMV son útiles para respaldar el diagnóstico. Partes del tracto gastrointestinal (esófago y colon) son los sitios extraoculares más comunes de infección por CMV en pacientes con SIDA
13.
La infección materna está asociada con el CMV congénito (CMVc), la principal causa de pérdida auditiva neurosensorial no genética. CMVc también causa deterioro del desarrollo cognitivo y parálisis cerebral. La transmisión del CMV se produce a través del contacto directo con fluidos corporales como la saliva, la orina o el semen de alguien que está eliminando activamente el virus 14. Las tasas de transmisión son más altas después de la infección primaria y la tasa de transmisión aumenta con la edad gestacional. Sin embargo, los efectos fetales graves son más comunes cuando la infección ocurre antes de las 20 semanas. La infección pasada no confiere inmunidad a la madre ni protege al feto 15. El CMVc puede presentarse con anomalías cerebrales o extracerebrales en la ecografía, restricción del crecimiento pérdida fetal. El diagnóstico de CMV materno primario en el embarazo debe basarse en la seroconversión en el embarazo (aparición de novo de inmunoglobulina G (IgG)
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
específica del virus en el suero de mujeres embarazadas que previamente eran seronegativas) o en la detección de inmunoglobulina M (IgM) e IgG específicas. El diagnóstico prenatal de CMV fetal es imperfecto y se basa en la amniocentesis realizada al menos 8 semanas después de la supuesta infección materna y después de las 17 semanas de gestación. La información y educación higiénica de las mujeres embarazadas es actualmente la estrategia más eficaz para la prevención de la infección por CMV. El diagnóstico de CMV materno primario en el embarazo debe basarse en la seroconversión en el embarazo (aparición de novo de inmunoglobulina G (IgG) específica del virus en el suero de mujeres embarazadas que previamente eran seronegativas) o en la detección de inmunoglobulina M (IgM) e IgG específicas 16.
La infección humana por CMV es ubicua, la seroprevalencia de CMV en mujeres jóvenes en edad fértil 90-100% en los países en desarrollo como el nuestro, además en un estudio previo que hemos realizado en los donantes de sangre del Hospital Santa María de Cutervo se encontró el 100% de reactividad a IgG 17 lo que significa que en etapas temprana de desarrollo han estado expuestos al virus. El CMV es la causa más común de infección intrauterina viral pudiendo causar defectos de nacimiento, como retraso mental, y aumentar el riesgo de morbilidad y mortalidad en recién nacidos.
Estudios han demostraron que la inmunidad maternal para CMV proporciona una protección sustancial contra la transmisión vertical y disminuir la incidencia de enfermedades y secuelas físicas permanentes en los lactantes. Pero hasta la fecha, los eventos inmunológicos después de la transferencia transplacentaria de IgG materna anti-CMV después del nacimiento están pobremente caracterizados. Por lo que, el objetivo del presente trabajo es determinar la cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus después del nacimiento.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
II. MATERIAL Y MÉTODOS
2.1. OBJETO DE ESTUDIO
- Niveles de anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus.
2.2. INSTRUMENTOS Y FUENTES DE DATOS
2.2.1. Reactivos y Materiales de Laboratorio
2.2.1.1. Reactivos
- Kit de CMV IgM, Laboratorio Elecsys®.
- Kit de CMV IgG, Laboratorio Elecsys®.
2.2.1.2. Material de laboratorio
- Tubos de flebotomía sin anticoagulante.
- Kit de sistema al vacío de flebotomía.
- Micropipetas.
- Viales de 1mL.
2.2.2. Equipos
- Centrífuga “Semca®”
- Analizador para inmunoensayos “COBAS E411- ROCHE/HITACHI®”
2.2.3. Fuentes de datos - Tesis de grado.
- Artículos publicados en revistas indizadas: Redalyc, Scielo, Sciencedirect, Pubmed, entre otras.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
- Organizaciones Mundiales: FAO, OMS, OMGE - Normativa Nacional e Internacional.
2.3. MÉTODO Y TÉCNICAS 2.3.1. Muestra:
20 madres y sus recién nacidos.
50 niños menores de 1 año.
2.3.2. Criterios de Inclusión y exclusión 2.3.2.1 Criterios de inclusión
Madres que hayan dado a luz de 12/11/2020 al 05/10/2021 en el Hospital Santa María de Cutervo.
Recién nacidos y niños menores de un año, que han sido atendidos del 12/11/2020 al 05/10/2021 en el Hospital Santa María de Cutervo.
2.3.2.1 Criterios de exclusión
Madres que se hayan encontrado dentro del cuadro de emergencia obstétrica por trastornos hipertensivos, hemorragias y/o sepsis obstétrica.
Recién nacidos y niños menores de un año, cuyos padres no dieron el consentimiento de participar en el estudio.
2.3.3. Toma de muestra en pacientes
Se obtuvo la muestra de sangre por venopunción de la madre a las 24 horas de haber dado a luz. En los recién nacidos se tomó la muestra sangre a partir del cordón umbilical en el momento del nacimiento y en los niños menores de un año se realizó la toma de muestra por venopunción durante su control pediátrico en el hospital.
Las muestras de madres, recién nacidos y niños menores de 1 año fueron tomadas entre 12/11/2020 al 05/10/2021. Las muestras fueron recolectadas en tubos al vació sin anticoagulante, luego se centrifugó a 3
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
500 rpm x 5 min, el suero se separa en microviales y se puso a congelación a -20 °C hasta su uso, en el Hospital Santa María de Cutervo, Cajamarca- Perú.
2.3.4. Transporte de la muestra
Las muestras se transportaron en cadena de frio hasta la ciudad de Chiclayo, donde fueron analizados en RayLab -Laboratorio de análisis clínicos y biología molecular.
2.3.5. Determinación y cuantificación de los niveles de IgG e IgM anti- citomegalovirus
La cinética se determinó mediante la cuantificación de los niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus, por inmunoensayo de electro quimioluminiscencia en analizador automatizado por la técnica ECLIA (Electrochemiluminescence Immunoassay), se realizó con el uso de los kits Elecsys CMV IgM e IgG, en el analizador para inmunoensayos
“COBAS E411- ROCHE/HITACHI”.
Los rangos referenciales del kit de reactivos:
Para IgG:
- Negativo: < 16.0 RU/mL
- Indeterminado: 16.0 - 22.0 RU/mL - Positivo: > 22.0 RU/mL
Para IgM
- Negativo: <0.7 RU/mL
- Indeterminado: 0.7 - 1.0 RU/mL - Positivo: > 1.0 RU/mL
Una vez obtenido los valores de la cuantización de la respuesta humoral en los recién nacidos, se evalúa la respuesta humoral en los niños menores de año de manera secuencial (1 – 12 meses), determinando la evolución de la respuesta humoral y su cinética.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
2.3.6. Ética
El protocolo de ética sigue la “Declaración de Helsinki de la AMM – Principios Éticos para las Investigaciones Médicas en Seres Humanos”18. Además, el estudio se sometió a una revisión ética por parte de las autoridades del Hospital Santa María de Cutervo y se dispuso la firma de los consentimientos informados de cada uno de los participantes.
2.3.7. Estadística
Los datos se registraron en el software Microsoft Excel office 365 (Microsoft Corporation®) y se usó el software SigmaPlot 12 (Systat Software Inc.®). El análisis estadístico se realizó la prueba estadística t- student. La significancia se definió con valores de p≤0.05.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
III. RESULTADOS
La respuesta humoral de madres y recién nacidos se observa en la Tabla 1, donde el promedio de la concentración de los niveles de los anticuerpos de las madres es ligeramente mayor al de los recién nacidos.
Tabla 1. Niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus en madres y recién nacidos por sexo.
Individuos IgG (RU/mL) IgM (RU/mL)
Madres 131.39 ± 34.90 0.245 ± 0.04
Recién nacidos
Mujeres 106.50 ± 55.24 0.45 ± 0.78 Hombres 127.17 ± 42.51 0.22 ± 0.02
En la Figura 1 y 2 podemos observar la respuesta humoral del IgG e IgM de manera secuencial por meses (1-12meses), donde casi la totalidad de las muestras son seropositivas a IgG anti-citomegalovirus y solo dos muestras son seropositivas a IgM anti-citomegalovirus en niños de 1 y 8 meses de edad.
Figura 1. Dispersión por edades de los niveles de IgG anti-citomegalovirus en niños menores de 1 año.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
Figura 2. Dispersión por edades de los niveles de IgM anti-citomegalovirus en niños menores de 1 año.
La respuesta humoral de IgG e IgM anti-citomegalovirus de manera secuencial en meses, de 1 a los 12 meses se observa en la Tabla 2, destacando la seropositividad de IgG anti- citomegalovirus en todos los meses y en IgM anti-citomegalovirus en 1 y 8 meses.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
Tabla 2. Distribución por edades de los niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus en niños menores de 1 año.
Edad (meses) IgM IgG
0 0.22±0.02 126.77±33.79 1 0.99 ±1.34 112.2 ±71.74 2 0.28 ±0.15 107.4 ±67.16 3 0.22 ±0.01 148.5 ±33.85 4 0.21 ±0 112.4 ±32.47 5 0.24 ±0.03 136.9 ±51.76 6 0.22 ±0.02 108 ±19.41 7 0.21 ±0 106.1 ±42.47 8 0.73 ±1.15 106.8 ±62.29 9 0.28 ±0.15 103.6 ±60.71 10 0.22 ±0.01 144.6 ±26.75 11 0.21 ±0 80.67 ±29.69 12 0.25 ±0.03 130.2 ±62.39
En la tabla 3, se agrupo por trimestres de edad, y acá se observa que la concentración del IgM anti-citomegalovirus entre el grupo 0 y 1-3 hay una amplia diferencia, pero en todos los grupos no hay diferencia significativa (p≤0.05). En IgG los resultados son similares y tampoco hay diferencia significativa entre los grupos (p≤0.05).
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
Tabla 3. Niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus distribuido por trimestres de edades en niños menores de 1 año
Edad (meses) IgM IgG
0 0.22 ± 0.02 126.77 ± 33.79
1-3 0.50 ± 0.85 119.25 ± 64.59 4-6 0.22 ± 0.02 118.59 ± 38.70 7-9 0.44 ± 0.77 105.57 ± 57.13
10-12 0.23 ± 0.02 121.11 ± 49.55 p≤0.05
La cuantificación de la respuesta humoral en los recién nacidos y los cambios en relación con los meses de los niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus, se observa en la Figura 3A y 3B. Destaca en una disminución de la concentración de IgG anti-citomegalovirus en el trimestre de 7 a 9 años, y dos picos de elevación de IgM en los trimestres de 1 – 3 meses y de 7 a 9 meses.
Figura 3A. Cinética de IgG por trimestres de edades de en niños menores de 1 año Edad (meses)
IgG (RU/mL)
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
Figura 3B. Cinética de IgM anti-citomegalovirus por trimestres de edades de en niños menores de 1 año
En la tabla 4 muestran los resultados de la encuesta a las madres sobre citomegalovirus, donde destaca que la totalidad de las madres mencionan que ningún miembro de su familia han sido diagnosticado con citomegalovirus, también que la mitad de las madres menciona que sus niños tienen contacto constante con menos de 10 personas y que el 70% de las madres da lactancia de manera natural.
Tabla 4: Encuesta sobre citomegalovirus a madres.
N° Pregunta Alternativas Porcentaje
1 Edad de la madre.
a. Menor de 20 años 0%
b. De 20 a 30 años 50%
c. De 30 a 40 años 50%
d. Mayor de 40 años 0%
2 Número de partos.
a. 1 60%
b. 2 30%
c. 3 0%
d. Más de 3 10%
3 Tipo de lactancia. a. Natural 70%
IgM (RU/mL)
Edad (meses)
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
b. Artificial 0%
c. Mixta 30%
4 Zona de vivienda.
a. Rural 20%
b. Urbana 80%
5
Número de personas en contacto con el niño.
a. Solo padres y hermanos 20%
b. Familias con menos de 10 personas 50%
c. Familia con 10 personas o más 20%
d. Familia y amigos 10%
6
Usted ha presentado síntomas de infección por citomegalovirus antes o durante del embarazo.
a. Si 2%
b. No 90%
c. No estoy segura 8%
7
Su niño después del nacimiento ha presentado síntomas de citomegalovirus.
a. Si 2%
b. No 90%
c. No estoy segura 8%
8
Conoce si miembros de su familia han sido diagnosticados con citomegalovirus
a. Si 0%
b. No 100%
c. No estoy segura 0%
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
IV. DISCUSIÓN
El citomegalovirus humano es la infección viral más común en el feto en desarrollo. Una fracción de los bebés infectados en el útero desarrollan una enfermedad significativa que pone en peligro la vida y los órganos, y más del 90% de los bebés infectados no muestran evidencia clínica de infección en el período neonatal. Los primeros estudios enfatizaron la importancia de la infección materna primaria por CMV durante el embarazo como un determinante crítico de la transmisión intrauterina, así como en la época de la lactancia materna 19. Los hallazgos de múltiples estudios sugieren que la inmunidad materna preexistente al CMV brinda, en el mejor de los casos, una protección parcial contra la enfermedad en la descendencia infectada y, de manera similar, puede tener un impacto limitado en la transmisión intrauterina20,21.
Los resultados de la Tabla 1, muestran que la totalidad de las madres son positivas a IgG y negativas a IgM, indicando que las madres en algún momento de su vida se han infectado con CMV. Estos resultados se comparten con estudio que nuestro equipo de investigación realizó en Donantes de Sangre donde el 95% de donantes eran positivos a IgG17. Esto nos muestra que casi la totalidad de la población de la ciudad de Cutervo, ciudad donde se han hecho estos trabajos de investigación han sido expuestos al CMV, y en muchos casos no han mostrado evidencia clínica de la infección.
Los niveles de anticuerpos entre las madres y los recién nacidos se mantienen en niveles similares, esto indicando los anticuerpos medidos a partir de la sangre extraída del cordón umbilical, se mantienen por trasmisión vertical. En los IgG se observa una disminución de los niveles del anticuerpo desde el momento del nacimiento hasta los 9 meses de edad, después se muestra un aumento hasta los 12 meses. En un estudio
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
similar frente al comportamiento de los anticuerpos contra el sarampión, se ve el comportamiento de la concentración de anticuerpos en los recién nacidos fue similar al de las madres y así mismo en los niños disminuyeron hasta 9 meses después del nacimiento22.
Referente a la dispersión por edades de los niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus en niños menores de 1 año, se muestran en la figura 1 y 2. Los niveles IgG podemos ver los niveles altos de anticuerpo en todos los grupos, señalando una positividad del 97%. En cambio, los niveles de IgM se mantienen bajos dando una positividad de solo 2.8% del total de los niños analizados. La presencia de IgM positivo en dos niños, nos indica que desde el momento del nacimiento el niño queda expuesto al CMV, y que desarrolla una inmunidad adquirida durante el primer año de vida, mostrando afectación subclínica, tal como lo muestra el estudio de Stagno et all que estudian la infección congénita por citomegalovirus, donde además señalan que es posible que la inmunidad humoral materna no proteja al feto contra la infección vertical por citomegalovirus 23.
En la Tabla 2, se muestra la distribución por edades (meses) de los niveles de IgG e IgM anti-citomegalovirus en niños menores de 1 año, pero debido a la cantidad de datos fueron agrupados en trimestres (Tabla 3) en: 0, 1-3, 4-6, 7 -9, 10-12 meses, con la finalidad de analizar las diferencias estadísticas entre los niveles de anticuerpos entre los grupos de edades. En el IgM entre el grupo 0 y 1-3 hay una amplia diferencia numérica, pero en todos los grupos no hay diferencia estadística significativa (p≤0.05).
En IgG los resultados son similares y tampoco hay diferencia estadística significativa entre los grupos (p≤0.05).
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
La cinética de IgG e IgM anti-citomegalovirus por trimestres de edades en niños menores de 1 año, se muestran en la figura 3A y 3B. En estas figuras podemos apreciar que el IgG va disminuyendo hasta los 9 meses y posterior a esto sufre una elevación hasta los 12 meses. En el IgM se observa unos picos en 1-3 meses y en 7-9 meses.
Estudios de IgM positiva en infección congénita por CMV24, muestran que la detección IgM anti-citomegalovirus en suero neonatal tiene baja sensibilidad para identificar citomegalovirus congénitos, tratando de asociar la presencia/ausencia de IgM con la gravedad de la enfermedad, y se pudo evidenciar que de los niños que dieron positivo el 67% mostro sintomatología. La tasa de enfermedad sintomática en ese estudio fue estadísticamente más alta (67,7 %, P < 0,001), similar con nuestro estudio, donde 1 de los niños encontrados con IgM positiva mostró sintomatología según refiere la madre en la encuesta aplicada. A pesar de que un anticuerpo IgM positivo para CMV se asocia con una enfermedad con sintomatología clínica, no es válido como marcador de laboratorio preciso para la gravedad.
También dentro de este estudio se incluyó una encuesta epidemiología de citomegalovirus a las madres. Dentro de lo más resaltante es que el 70% de madres han dado lactancia de manera natural, el 80% viven en la zona urbana y la 50% de viven con menos de 10 persona en casa y que las personas con las que se convive no han mostrado sido diagnosticados con infección por citomegalovirus. Además, la encuesta revela que un 2% de madres ha presentado síntomas de infección por citomegalovirus durante el embarazo al igual que sus recién nacidos, pero manifiestan que no conocen que miembros de su familia hayan sido diagnosticados con citomegalovirus. Estos resultados comparten algunos resultados con niños infectados por citomegalovirus humano en Weifang (este de China), donde la probabilidad de infección activa por CMV no mostró diferencias de género en ningún grupo de edad.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
Además, que muestra que las infecciones recientes centradas en los primeros 6 meses de vida, son presumiblemente debidas a la lactancia 25.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
V. CONCLUSIONES
Se determinó la cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus después del nacimiento, donde su respuesta humoral con respecto al IgG durante el primer año de vida, evidencia que se encuentra en concentraciones elevadas después del nacimiento y continua con una disminución de los niveles de anticuerpos hasta los 9 meses, posterior a esto, se da un aumento de su concentración hasta los 12 meses. La cinética del anticuerpo IgM anti-citomegalovirus aparece con la respuesta humoral en el primer año de vida, donde sus concentraciones se elevaron en respuesta a la infección con el citomegalovirus entre el primer y tercer trimestre después del nacimiento.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
VI. RECOMENDACIONES
Se recomienda ampliar los trabajos de investigación en relación con la infección y las afectaciones del citomegalovirus, principalmente en mujeres embarazadas y recién nacidos ya que en la mayoría de los casos pasa por una afectación subclínica, pero si demostrará sintomatología podría traer consecuencias en la salud principalmente a los niños.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Davis NL, King CC, Kourtis AP. Cytomegalovirus infection in pregnancy. Birth Defects Research. 2017;109(5):336-346. doi:10.1002/bdra.23601
2. Pass RF, Anderson B. Mother-to-Child Transmission of Cytomegalovirus and Prevention of Congenital Infection. J Pediatric Infect Dis Soc. 2014;3(Suppl 1):S2.
doi:10.1093/JPIDS/PIU069
3. Cannon MJ, Schmid DS, Hyde TB. Review of cytomegalovirus seroprevalence and demographic characteristics associated with infection. Rev Med Virol.
2010;20(4):202-213. doi:10.1002/RMV.655
4. Zuhair M, Smit GSA, Wallis G, et al. Estimation of the worldwide seroprevalence of cytomegalovirus: A systematic review and meta-analysis. Rev Med Virol.
2019;29(3). doi:10.1002/RMV.2034
5. Varga M, Görög D, Kári D, et al. Cytomegalovirus seroprevalence among solid organ donors in Hungary: correlations with age, gender, and blood group.
Transplant Proc. 2011;43(4):1233-1235.
doi:10.1016/J.TRANSPROCEED.2011.03.067
6. Wu CA, Paveglio SA, Lingenheld EG, Zhu L, Lefrancois L, Puddington L.
Transmission of murine cytomegalovirus in breast milk: a model of natural infection in neonates. J Virol. 2011;85(10):5115-5124. doi:10.1128/JVI.01934-10
7. Drebber U, Hardt A, Dienes HP, Odenthal M. [Cytomegalovirus. Pathological- anatomical manifestations and detection methods]. Pathologe. 2011;32(5):418-427.
doi:10.1007/S00292-011-1449-8
8. Forbes BA. Acquisition of cytomegalovirus infection: an update. Clinical Microbiology Reviews. 1989;2(2):204. doi:10.1128/CMR.2.2.204
9. Schleiss MR. Acquisition of human cytomegalovirus infection in infants via breast milk: natural immunization or cause for concern? Rev Med Virol. 2006;16(2):73-82.
doi:10.1002/RMV.484
10. Hu X, Hu W, Sun X, Chen L, Luo X. Transmission of cytomegalovirus via breast milk in low birth weight and premature infants: a systematic review and meta- analysis. BMC Pediatr. 2021;21(1). doi:10.1186/S12887-021-02984-7
11. Osterholm EA, Schleiss MR. Impact of breast milk-acquired cytomegalovirus infection in premature infants: Pathogenesis, prevention, and clinical consequences?
Rev Med Virol. 2020;30(6):1-11. doi:10.1002/RMV.2117
12. Gilbert GL, Hudson IL, Hayes K, James J. Prevention of transfusion-acquired cytomegalovirus infection in infants by blood filtration to remove leucocytes.
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
Neonatal Cytomegalovirus Infection Study Group. Lancet. 1989;1(8649):1228- 1231. doi:10.1016/S0140-6736(89)92330-1
13. Cheung TW, Teich SA. Cytomegalovirus infection in patients with HIV infection.
Mt Sinai J Med. 1999;66(2):113-124.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10100416
14. Stagno S, Reynolds DW, Huang ES, Thames SD, Smith RJ, Alford CA. Congenital cytomegalovirus infection. N Engl J Med. 1977;296(22):1254-1258.
doi:10.1056/NEJM197706022962203
15. Yinon Y, Farine D, Yudin MH, et al. Cytomegalovirus infection in pregnancy.
Journal of obstetrics and gynaecology Canada : JOGC = Journal d’obstetrique et gynecologie du Canada : JOGC. 2010;32(4):348-354. doi:10.1016/S1701-
2163(16)34480-2
16. Navti OB, Al-Belushi M, Konje JC. Cytomegalovirus infection in pregnancy - An update. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2021;258:216-222.
doi:10.1016/J.EJOGRB.2020.12.006
17. Luis Emilio Carranza-Quispe, Cristhy Graciela Carranza-Quispe. Detección de IgG e IgM anti-citomegalovirus en donantes voluntarios de sangre Cajarmarca, Perú. The Biologist (Lima). 2014;12(1):57-65.
18. Asociación Médica Mundial (AMM). Declaración de Helsinki de la AMM – Principios éticos para las investigaciones médicas en seres humanos – WMA – The World Medical Association. Accessed February 25, 2022.
https://www.wma.net/es/policies-post/declaracion-de-helsinki-de-la-amm- principios-eticos-para-las-investigaciones-medicas-en-seres-humanos/
19. Britt W. Controversies in the natural history of congenital human cytomegalovirus infection: the paradox of infection and disease in offspring of women with immunity prior to pregnancy. Medical Microbiology and Immunology. 2015;204(3):263-271.
doi:10.1007/s00430-015-0399-9
20. Coppola T, Mangold JF, Cantrell S, Permar SR. Impact of Maternal Immunity on Congenital Cytomegalovirus Birth Prevalence and Infant Outcomes: A Systematic Review. Vaccines (Basel). 2019;7(4). doi:10.3390/VACCINES7040129
21. Kagan KO, Hamprecht K. Cytomegalovirus infection in pregnancy. Arch Gynecol Obstet. 2017;296(1):15-26. doi:10.1007/S00404-017-4380-2
22. Science M, Savage R, Severini A, et al. Measles Antibody Levels in Young Infants.
Pediatrics. 2019;144(6). doi:10.1542/PEDS.2019-0630
23. Alford CA, Stagno S, Pass RF, Britt WJ. Congenital and perinatal cytomegalovirus infections. Rev Infect Dis. 1990;12 Suppl 7:S745-S753.
doi:10.1093/CLINIDS/12.SUPPLEMENT_7.S745
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
24. Bilavsky E, Watad S, Levy I, et al. Positive IgM in Congenital CMV Infection. Clin Pediatr (Phila). 2017;56(4):371-375. doi:10.1177/0009922816684596
25. Sun X, Liu Z, Wang B, et al. Sero-epidemiological survey of human
cytomegalovirus-infected children in Weifang (Eastern China) between 2009 and 2012. Virology Journal. 2013;10(1):1-4. doi:10.1186/1743-422X-10-42/TABLES/2
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
ANEXOS
Anexo 1
CONSENTIMIENTO INFORMADO
1. Título del proyecto: Cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus después del nacimiento.
2. Equipo de Investigadores
M. Cs. Luis Emilio Carranza Quispe Correo: [email protected]
Teléfono: 941946294
Institución: Universidad Nacional de Trujillo
Dr. Julio Hilario Vargas
Correo: [email protected] Teléfono: 949751021
Institución: Universidad Nacional de Trujillo 3. Introducción / Propósito:
El CMV la causa más común de infección intrauterina viral pudiendo causar defectos de nacimiento, como retraso mental, y aumentar el riesgo de morbilidad y mortalidad en recién nacidos. Estudios han demostraron que la inmunidad maternal para CMV proporciona una protección sustancial contra la transmisión vertical y disminuir la incidencia de enfermedades y secuelas físicas permanentes en los lactantes. Pero hasta la fecha, los eventos inmunológicos después de la transferencia transplacentaria de IgG materna anti-CMV después del nacimiento están pobremente caracterizados, hace necesario determinar la cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-CMV después del nacimiento.
4. Participación:
- Número por grupo: 1
- Número total en el proyecto: 90 - Rango de edades:
- Madres: 18-40 años - Niños: Menor de 1 año
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
5. Procedimientos:
Extracción de sangre venosa de la madre y del recién nacido con tubos de sistema al vacío, luego se llevara a su respectivo análisis en laboratorio.
6. Riesgos / incomodidades
En el caso de la venopunción es posible dejar que se produzca pequeños hematomas durante la toma de muestra de sangre.
7. Beneficios
Análisis gratuito para citomegalovirus para la madre y recién nacido, además de vigilancia de un año para el recién nacido.
8. Compensación
No existirá beneficio económico.
9. Confidencialidad de la información.
La Información es confidencial, serán codificados solo los investigadores manejaran la los datos personales, en la redacción del informe los resultados será presentados de forma anónima.
10. Informe de los avances a los participantes:
Si se realizarán informes periódicos ya demás de un informe final para los participantes.
11. Consentimiento / Participación voluntaria
Dejo constancia que estoy participando en la Investigación titulada “Cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus después del nacimiento en el Hospital “Santa María” de Cutervo, Cajamarca” , de forma VOLUNTARIA Y SIN COACCIÓN ALGUNA, aclarando además que se me ha informado los beneficios y posibles efectos colaterales como hematomas superficiales producidos durante la toma de muestra de sangre.
Por lo expuesto, doy mi consentimiento para la extracción de muestra de sangre de mi persona como de mi niño, para la investigación de la que se me ha informado, y que su uso es exclusivamente para la presente investigación, sin posibilidad de compartir o ceder éstas, en todo o en parte, a ningún otro investigador, grupo o centro distinto del responsable de esta investigación o para cualquier otro fin.
Declaro que he leído y conozco el contenido del presente documento, comprendo los compromisos que asumo y los acepto expresamente. Y, por ello, firmo este consentimiento
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
informado de forma voluntaria hasta que decida lo contrario. Al firmar este consentimiento no renuncio a ninguno de mis derechos. Recibiré una copia de este consentimiento para guardarlo y poder consultarlo en el futuro.
12. Nombres y firmas del participante o responsable legal Madre
Nombres y Apellidos: _________________________________
Edad:______ DNI: ________________ HCL: ______________
Dirección: __________________________________________
Referencia: _________________________________________
Teléfono: ___________________________________________
Recién Nacido
Nombres y Apellidos: _________________________________
Sexo: ______________________________________________
Observaciones: ______________________________________
Firma de la Madre
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
Anexo 2
Encuesta epidemiológica a la madre sobre citomegalovirus 1. Edad de la Madre:
a. Menor de 20 años b. De 20 a 30 años c. De 30 a 40 años d. Mayo de 40 años 2. Número de partos:
a. 1 b. 2 c. 3
d. Mas de 3 3. Tipo de lactancia
a. Natural b. Artificial c. Mixta
4. Zona:
a. Rural b. Urbana
5. Número de personas en contacto con el niño a. Solo padres y hermanos
b. Familias con menos de 10 personas c. Familia con 10 personas o más d. Familia y amigos
6. Ud a presentado síntomas de infección por citomegalovirus antes o durante del embarazo.
a. Si b. No
c. No estoy segura
7. Su niño después del nacimiento a presentado síntomas de citomegalovirus.
a. Si b. No
c. No estoy segura
8. Conoce si miembros de su familia han sido diagnosticados con citomegalovirus a. Si
b. No
c. No estoy segura
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO DECLARACIÓN JURADA
Los autores suscritos en el presente documento DECLARAMOS BAJO JURAMENTO que somos los autores responsables legales de la calidad y originalidad del contenido del proyecto de investigación científica, así como, del informe de la investigación científica realizado.
TITULO: Cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus después del nacimiento
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN CIENTIFICA INFORME DE INVESTIGACIÓN CIENTIFICA PROYECTO DE INVESTIGACIÓN ( ) TRABAJO DE INVESTIGACIÓN (PREGRADO) ( ) PREGRADO
PROYECTO DE TESIS PREGRADO ( ) TESIS PREGRADO ( )
PROYECTO DE TESIS MAESTRIA ( ) TESIS MAESTRÍA ( )
PROYECTO DE TESIS DOCTORADO ( ) TESIS DOCTORADO ( X )
El equipo investigador integrado por:
N° APELLIDOS Y NOMBRES FACULTAD
CONDICIÓN (NOMBRADO, CONTRATADO, MERITO, estudiante,
OTROS)
CÓDIGO docente Número de matrícula
del estudiante
Autor coautor
asesor
1 Carranza Quispe, Luis Emilio Posgrado Estudiante 813270114 Autor
2 Hilario Vargas, Julio Santos Posgrado Nombrado 4373 Asesor
……… 44524326
FIRMA DNI
……… 17940908
FIRMA DNI
BIBLIOTECA
DE POSGRADO
- UNT
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
CARTA DE AUTORIZACIÓN DE PUBLICACIÓN DE TRABAJO DE INVESTIGACIÓN EN REPOSITORIO DIGITAL RENATI – SUNEDU
Trujillo, 05 de abril de 2022 Los autores suscritos del INFORME DE INVESTIGACIÓN CIENTIFICA
Titulado: Cinética de los anticuerpos IgG e IgM anti-citomegalovirus después del nacimiento
AUTORIZAMOS SU PUBLICACIÓN EN EL REPOSITORIO DIGITAL INTITUCIONAL, REPOSITORIO RENATI – SUNEDU, ALICIA-CONCYTEC, CON EL SIGUIENTE TIPO DE ACCESO:
A. Acceso abierto:
B. Acceso restringido (datos del autor y resumen del trabajo) C. No autorizo su publicación
Si eligió la opción restringido o No autoriza su publicación sírvase justificar
_______________________________________________________________________________
ESTUDIANTE DE PREGRADO: TRABAJO DE INVESTIGACIÓN TESIS
ESTUDIANTE DE POSGRADO: TESIS MAESTRIA TESIS DOCTORAL
DOCENTE: INFORME DE INVESTIGACIÓN OTROS
El equipo investigador integrado por:
N° APELLIDOS Y NOMBRES FACULTAD
CONDICIÓN (NOMBRADO, CONTRATADO, MERITO, estudiante,
OTROS)
CÓDIGO docente Número de matrícula
del estudiante
Autor coautor
asesor
1 Carranza Quispe, Luis Emilio Posgrado Estudiante 813270114 Autor
2 Hilario Vargas, Julio Santos Posgrado Nombrado 4373 Asesor
……… 44524326
FIRMA DNI
……… 17940908 FIRMA DNI
x
