Curso optativo
Microbiología de los alimentos-2015
Leche y productos lácteos
Definición Alimentos lácteos
Artículo 553 -
“Con la designación de
Alimentos Lácteos, se entiende la leche
obtenida de vacunos o de otros mamíferos,
sus derivados o subproductos, simples o
elaborados, destinados a la alimentación
humana.”
Definición de leche
Definición a nivel legislativo: Artículo 554 - "Con la denominación de Leche sin calificativo alguno, se entiende el producto obtenido por el ordeño total e ininterrumpido, en condiciones de higiene, de la vaca lechera en buen estado de salud y alimentación, proveniente de tambos inscriptos y habilitados por la Autoridad Sanitaria Bromatológica Jurisdiccional y sin aditivos de ninguna especie. La leche proveniente de otros animales, deberá denominarse con el nombre de la especie productora".
leche de oveja, de cabra, de burra, de yegua y leche de camella.
Definición a nivel bioquímico: emulsión de materia grasa en una solución acuosa que contiene numerosos elementos, unos en disolución (azúcares y sales) y otros en estado coloidal (proteínas).
Composición química de
la leche
Calidad higiénico-sanitaria de
la leche
FACTORES QUE
AFECTAN A LA
CALIDAD
Factores genéticos •La especie •La raza •El individuo Factores genéticos •La especie •La raza •El individuo Factores fisiológicos•La fase de lactación •El número de lactaciones •Edad del animal
Factores fisiológicos •La fase de lactación •El número de lactaciones •Edad del animal
Factores de manejo •La alimentación •El ordeño Factores de manejo •La alimentación •El ordeño Factores patológicos •La mastitis Factores patológicos •La mastitis Factores ambientales •Clima •Alimentación •Estrés Factores ambientales •Clima •Alimentación •Estrés
Calidad de la leche
Calidad higiénica
Calidad bioquímica (fisicoquímica y composición)
Conservadores y adulterantes
Buenas prácticas de producción
CALIDAD GLOBAL
DE LA LECHE
Calidad Fisico-química (Calidad nutritiva)
Características fisico-químicas que definen la leche y
composición en principios inmediatos.
Calidad Organoléptica
Características de olor, color y sabor.
Calidad Sanitaria
Factores bióticos y abióticos que determinan
la inocuidad de la misma para el consumidor.
PARÁMETROS DE CALIDAD
FÍSICO-QUÍMICA
PARÁMETROS DE CALIDAD
FÍSICO-QUÍMICA
PARÁMETROS DE CALIDAD
FISICO-QUÍMICA
La leche es un suero con grasa emulsionada en forma de
glóbulo graso. En su composición destacan:
Proteínas: proteínas de suero y caseína
Hidratos de carbono: lactosa
Grasa: triglicéridos con ácido grasos
Saturados (butírico, palmítico, esteárico)
Sales minerales: fosfatos de calcio y citratos de
calcio, sodio y magnesio. Pobre en hierro
Vitaminas del grupo B, vitamina A y D, y pobre en
Requisitos físico-químicos
para leche de vaca según el CAA
Proteínas de alto valor biológico (perfil de aminoácidos) Presencia de péptidos bioactivos (inmunomoduladores, antimicrobianos, antitrombocíticos y antihipertensivos)
La lactosa es un sustrato que proporciona energía
Cubre un alto porcentaje de las necesidades de calcio en la dieta (1 litro cubre sobradamente 100% de la CDR de calcio)
2 raciones de lácteos cubre el 60% de la CDR de calcio. La lactosa, la caseína y la presencia de vitamina D favorece la absorción del calcio por lo que presentan una alta biodisponibilidad.
Problemas de alergia a la proteína de la leche de
vaca (2.5 al 5% de los recién nacidos).
Intolerancia a la lactosa (deficiencia de enzima
lactasa en el epitelio intestinal) (alternativas con
preparados lácteos).
Alto contenido en ácidos grasos saturados.
Las leches desnatadas tienen un menor contenido de
vitaminas liposolubles A y D.
PROBLEMAS NUTRICIONALES
DE LA LECHE
Tipo de Leche Grasa Lactosa Proteínas Cenizas Acidez ESM
Vaca 3 4.2 3.2 0.65 0.2 8.2
Oveja 7 4.6 4.7 1 0.3 10.3
Cabra 3.3 4 3.8 - 0.2 8.4
Tipo de leche Grasa Lactosa Proteína Ceniza ESM Acidez Natural 3.5 4.2 3.2 0.64 8.2 0.2 Higienizada 3.5 4.2 3.2 0.64 8.2 0.19 Certificada 3.5 4.2 3.2 0.64 8.2 0.19 Desnatada <0.3 4.2 3.2 0.64 - 0.19 Semidesnatada 1.5 4.2 3.2 0.64 - 0.19 Evaporada 7.5 - - - 25 -En polvo 26 - - - 40 -Condensada 9 - - - 31
-PARÁMETROS DE CALIDAD
ORGANOLÉPTICA
PARÁMETROS DE CALIDAD
ORGANOLÉPTICA
PARÁMETROS DE CALIDAD
ORGANOLÉPTICA
Color: La leche es un líquido opaco de color blanco
amarillento, ligeramente cremoso por la presencia de
grasa.
Variaciones en el color:
Alteraciones fisiológicas
Estados patológicos.
Crecimiento microbiano
La alimentación.
Tratamiento térmico.
PARÁMETROS DE CALIDAD
ORGANOLÉPTICA
Sabor y olor
El sabor es ligeramente dulce (por la presencia de lactosa) y el olor es inespecífico:
Estado fisiológico Estado patológico. Alimentación
Higiene en los establos
Crecimiento microbiano (acidificación)
Consecuencias tecnológicas: la alteración de la membrana protectora del glóbulo graso, permite el contacto entre la grasa y las lipasas
Calidad bioquímica
Factores que influyen en la calidad bioquímica:
Características organolépticas: olor, sabor y color.
Características fisicoquímicas: densidad, acidez y
punto crioscópico.
Composición química: agua, glúcidos, grasas,
proteínas, materias minerales y otros componentes
PARÁMETROS DE CALIDAD
HIGIÉNICO-SANITARIA
PARÁMETROS DE CALIDAD
HIGIÉNICO-SANITARIA
Calidad higiénica de la leche
Factores que influyen en la calidad higiénica:
Los componentes biológicos de la leche: células somáticas y células bacterianas
La presencia de sustancias extrañas: sustancias inhibidoras.
Componentes biológicos de la leche
Células Somáticas:- Origen: descamación de la glándula mamaria, células de la sangre
- Actividad en la leche: no proliferan, actividades degradativas mínimas.
- Significado del recuento: estado sanitario de rebaño. Falta de higiene en el ordeño y/o conservación
Células Bacterianas:
- Origen: glándula mamaria: patógenos mastitis. Contaminación durante la producción.
- Actividad en la leche: si proliferan. Actividades degradativas: acidificación, lipólisis, proteólisis.
- Significado del recuento: falta de higiene en el ordeño y/o conservación.
Vía de entrada de microorganismos
en la leche
Vía mamaria
a) Adhesión a la piel de la ubre y entrada por canal del pezón
Staphylococcus aureus Streptococcus Coliformes b) Procedentes de la sangre Salmonella Brucelas Mycobacterium tuberculosis
Vía de entrada de microorganismos
en la leche
Vía externa a) Utensilios de ordeño b) Tanques de almacenamiento c) Transporte d) Personal Aire- MO en la atmósfera de los establos (excrementos, paja, alimentos) - MO resistentes a cambios de To,O2, luz, humedad
Esporulados, mohos (Aspergillus, Penicillium) Agua
- Utilizada para limpieza de equipos, utensilios,higiene del animal - Fuente de MO psicrófilos (Pseudomonas)
Suelo
-
Fuente de MO termófilos y termodúricosCalidad bacteriológica de la leche
Bacteriología de la leche
gérmenes aeróbicos y
mesófilos
Calidad microbiana alta:
- No microorganismo patógeno. Microorganismos banales limitado - No presencia de microorganismos que produzcan cambios
bioquímicos indeseables
- Leche se conserva por un tiempo limitado
- Leche puede usarse elaboración de productos lácteos
Medidas para mantener la calidad microbiana alta:
- Mantener refrigerada a 4ºC
- Almacenar en granja no más de 48 horas
- Manipuleo en condiciones de higiene de materiales y utensilios
PARÁMETROS DE
CALIDAD HIGIÉNICO-SANITARIA
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOHembras domésticas sanas
Rebaños exentos de brucelosis y tuberculosis Sin lesiones ni inflamaciones en la glándula mamaria Carga microbiológica admitida < 100.000 ufc/ml
ANÁLISIS CITOLÓGICO
Células somáticas < 400.000 células/ml
CONDICIONES HIGIENICAS CONTAMINACION MICROBIANA
Satisfactorias < 50,000 gérmenes Que se pueden mejorar 50,000 – 200,000 gérmenes
Insuficientes > 200,000 gérmenes
TIPOS DE
MICROORGANISMOS PROBLEMA ASOCIADO
Estreptococo Mastitis
Coliformes Higiene/contaminación por manipuleo Termoresistente Higiene en el ordeño
Psicrótrofos Higiene en tanque de almacenamiento
RECUENTO DE CELULAS SOMATICAS
En condición normal: < 200,000 cél/ml. En condición de riesgo: 500,000 cél/ml.
PARÁMETROS DE CALIDAD
HIGIÉNICO-SANITARIA
• Presencia de sustancias de actividad farmacológica o
residuos de medicamentos de origen veterinario
• Presencia de contaminantes
• Aflatoxinas
•
Presencia de sustancias de actividad farmacológica o
residuos de medicamentos de origen veterinario
• Presencia de contaminantes
• Aflatoxinas
Presencia de sustancias extrañas
CONTROL DE INHIBIDORES
Inhibidores: sustancias que retardan el crecimiento bacteriano que afecta a los procesos fermentativos y posibles riesgos de toxicidad para el consumidor.
- Residuos de medicamentos: antibióticos, sulfamidas, antiparasitarios. - Detergentes antisépticos y desinfectantes
CONTROL DE AGUA AÑADIDA
- Involuntario: operaciones de limpieza, enjuague de recipientes - Voluntario: adulteración de la leche
Efectos de la penicilina
en los cultivos starters
TRANSPORTE DE LA LECHE
TRATAMIENTO DE LA LECHE ANTES
DE SU TRANSFORMACIÓN
TRATAMIENTO DE LA LECHE ANTES
DE SU TRANSFORMACIÓN
Refrigeración < 4ºC
Normalización: solo se admite
modificar el contenido en grasa
(leche semidesnatada o desnatada)
Homogeneización:
tratamiento
para disminuir el tamaño del glóbulo
graso.
Derivados lácteos
TIPOS DE LECHE DE CONSUMO
LECHES TRATADAS TERMICAMENTELeche pasteurizada (HTST, 72ºC/15 seg) Leche esterilizada (120ºC/20 min)
Leche esterilizada a alta temperatura (145ºC/ 2 seg) (leche UHT, uperizada)
LECHES CONSERVADAS Leche condensada Leche en polvo Leche evaporada PREPARADOS LÁCTEOS Leche especiales Leche enriquecidas Leches aromatizadas
OTROS PRODUCTOS
YOGURES
Yogur
Yogur pasteurizado después de la fermentación
(menor efecto benéfico)
LECHES FERMENTADAS
Leches fermentadas
Kéfir
Leches acidófilas
Lactobacillus bulgaricus Streptococos termophilus Otros microorganismosVALOR NUTRITIVO
Composición química similar a la leche, con diferentes
características organolépticas. Es un producto agradable por su
sabor, bueno para la salud.
Proteínas están hidrolizadas, de más fácil digestión y
asimilación
Menor
contenido
en
lactosa,
está
digerida
por
los
microorganismos fermentativos.
Alto contenido en minerales
Presencia de microorganismos vivos que colonizan el intestino,
mejoran la flora intestinal y refuerzan la función inmune
(PROBIÓTICOS).
NATAS (Crema de leche)
Nata acidificada
Nata
Doble nata
Centrifugación de la leche Separación de la grasa Normalización Tratamiento térmico y envasadoVALOR NUTRITIVO
La nata es la materia grasa concentrada de la leche que contiene un tercio de la proteína y la mitad de la lactosa de la leche. Es un alimento altamente calórico.
Su grasa, es rica en ácidos grasos saturados y colesterol, por lo cual se aconseja un consumo moderado.
Interés en nutrientes
Alto contenido en vitaminas liposolubles:
Aporte en vitamina A, que supera unas seis veces, e incluso más, el contenido de la leche entera de la que procede, aunque es inferior al contenido de la mantequilla.
Es rica en vitamina D.
MANTEQUILLA
Mantequilla dulce
Mantequilla acidificada
Mantequilla fácil de untar
Nata pasteurizada Maduración Batido Amasado de la mantequilla
VALOR NUTRITIVO
La mantequilla es un producto que tiene •Un alto contenido de grasas (80 %) •Grasas saturadas, colesterol •Bajo contenido en proteínas
• Alto contenido en vitaminas liposolubles, principalmente vitaminas A y D.
Cucharada de mantequilla contiene 12 gramos en total de grasas, 7 gramos de ácidos grasos saturados, 31 miligramos de colesterol y 100 calorías.
Calentamiento por encima de 90º C la mantequilla se quema y se forma
ACROLEÍNA
QUESOS
LECHE COAGULACIÓN ÁCIDA LACTOSUERO COÁGULO Cuajo animal Cuajo vegetalQUESO
REQUESÓN
Quesos frescos (coagulación ácida)
Quesos maduros (maduración por bacterias y hongos)
(semiduros o duros)
Quesos de pasta azul (hongos del género Penicilium)
Quesos fundidos
Queso desnatado
Queso semidesnatado
Queso graso
Queso extragraso
VALOR NUTRITIVO DEL QUESO
Menor contenido lactosa que la leche. El contenido
depende de la maduración
Valor biológico de la proteína es igual que el de la leche
Contenido mineral es mayor que en la leche
Alto contenido en calcio (quesos maduros)
Alto contenido en fósforo y zinc
Problemas: presencia de aminas biológicamente activas en
los quesos curados, alto contenido en TIRAMINA que es
hipertensora y puede producir jaquecas.
CONTROL DE RUTINA
TOMA DE MUESTRAS RECIPIENTES: LIMPIOS Y SECOS MATERIAL INERTE CIERRE HERMÉTICO CAPACIDAD ADECUADAENVASES FINALES: INTACTOS SIN AVERÍAS CONDICION DE LA MUESTRA :
COMPLETAMENTE HOMOGÉNEO (USAR AGITADORES, ÉMBOLOS, SONDAS)
EMPLEAR AGITACIÓN SIN FORMACIÓN DE ESPUMA CALENTAR 35-40 DE SER NECESARIO
Determinación del peso especifico
Fundamento: La leche tiene mayor densidad que el agua:
1.0296 – 1.0340 g/ml. Por elementos disueltos o en suspensión. Método: densimétrico; Material: lactodensímetros provistos de termómetros y probeta de diámetro suficiente para el instrumento. El peso específico disminuye por el aguado y aumenta por el descremado
DETERMINACION DE LA ACIDEZ
La leche fresca carece de ácido láctico en el momento de ser ordeñada, y su contenido va en aumento conforme el tiempo transcurre hasta su llegada a la planta de proceso.
Método: Titulo-volumétrico
Fundamento: La acidez titulable de la leche se valora con una solución de NaOH N/10 (Reactivo: Fenolftaleina 1%, Hidróxido de sodio N/10
El pH normal de la leche fresca es de 6,5 - 6,7. Valores superiores generalmente se observan en leches con mastitis. Valores inferiores indican presencia de calostro o descomposición bacteriana. La presencia de ác. Láctico se puede sospechar, cuando se produce floculación al mezclar la leche con etanol al 68-72%.
DETERMINACION DE
MATERIA GRASA
Método: Volumétrico (Gerber)Fundamento: El ácido sulfúrico al 90% disuelve todos los componentes de la leche, excepto la grasa, en presencia de alcohol amílico puro. Con el calor y la fuerza centrífuga la grasa se separa en una capa refringente y transparente
Material: butirómetros, pipetas de 11, 10 y 1 ml, baño maría, centrífuga de gerber
- Reactivos: ácido sulfúrico, alcohol amílico - Técnica:
DETERMINACION DEL EXTRACTO SECO Método: directo, gravimétrico
Fundamento: está constituida por componentes que no se volatilizan calentando la leche a 100ºC., como materia nitrogenadas, lípidos, glúcidos y sales. Si al extracto seco se le resta el contenido de materia grasa se obtiene el extracto seco magro
- Material: cápsula de porcelana, estufas de 102 ± 2ºC, desecador
pipetas de 10 ml, balanza analítica.
DETERMINACION DE CENIZAS Método: Gravimétrico
Fundamento: El producto resultante de la incineración del extracto seco expresado en porcentaje en peso, obtenido según el procedimiento anteriormente descrito se le conoce como cenizas (ClNa y ClK)
Material: balanza de sensibilidad 0,1 mg, desecador con un buen deshidratante, estufa de desecación regulado a 102ºC, horno eléctrico con circulación de aire, cápsula de platino o porcelana.
Valores superiores de Cl al normal (0.07-0.13%) indican posible mastitis
Fundamento: La enzima fosfatasa se destruye a la temperatura alcanzada por la pasteurización; es mas resistente que los microorganismos patógenos. La enzima peroxidasa presente en la leche descompone el peróxido de hidrógeno. El oxígeno liberado oxida la 1,4
difenildiamina, incolora, que se convierte en indofenol púrpura, dando una
coloración azulada que es proporcional a la concentración de la enzima en la leche.
Presencia de fosfatas Leche cruda
Leche sometida a Tº inferior a la de pasteurización
Leche pasteurizada mezclada con leche cruda
DETECCION DE ALMIDON Y FECULAS
La adición de almidón se realiza con fines fraudulentos con la finalidad de aumentar la cantidad de materia seca en la leche y/o disminuir un posible aguado.
- Fundamento: El almidón es detectado por una mezcla ioduro-iodurada pues se colorea de azul.
- Material: tubos de ensayos, pipetas de 5 y 10 ml.
- Reactivo: solución de yodo: 1 gr yodo, 1 gr. Ioduro de K - Técnica:
PRUEBAS DE ESTABILIDAD AL CALOR
- Fundamento: Al añadir una cantidad de alcohol etílico a la leche se produce
una deshidratación de algunos coloides hidrófilos, con lo que se puede llegar a producir una desnaturalización y pérdida de equilibrio seguido de floculación.
- Material: tubos de ensayo, pipetas de 2 ml.
- Reactivo: alcohol de 74% (v/v) o de 68% (p/v) - Técnica:
Método: reducción del azul de metileno Fundamento: El método mide en términos
de intervalos de tiempo requerido, la decoloración producto del cambio de estado del colorante azul de metileno, (azul estado oxidado a blanco estado reducido) por acción de actividad metabólica de las bacterias
Material: tubos de prueba estériles con tapa rosca, gradilla de acero inoxidable, pipetas de 1 y 10 ml, baño maría, temporizador.
Reactivo: solución de azul de metileno 0,005%
Clasificación: I Muy buena (51/2h); II Buena (2-5h); III Mediana (20min-2h) IV Mala (menos 20min)
TIEMPO DE REDUCCION DEL AZUL DE METILENO (TRAM)
Fundamento: La técnica se basa en el crecimiento de
microorganismos que se encuentran en la leche utilizando un medio de cultivo adecuado.
Material: Autoclave, tubos de ensayo, pipetas de 1 ml, baño maría matraz tipo erlenmeyer placas petri
Reactivo: solución diluyente, medio de cultivo agar-agar
RECUENTO DE
AEROBIOS Y MESOFILOS
BRUCELOSIS
Con leche entera
■Ring Test
Permite conocer si en el establo hay animales infectados. Es muy sensible.
1 ml + 1 gota Ag
37º C 35-40 min Anillo rojo
(superficie) (1 a 4 cruces) Antígeno: suspensión de Brucellas muertas teñidas con 2,3,5-trifeniltetrazolium cloruro.
Con el suero de la leche (o con el suero del animal)
Interpretación de resultados
Aglutinación: 1/100 infección
TUBERCULOSIS
Homogeneizado
Siembra en Lowestein Jensen (M. tuberculosis var.humana)
Siembra en Stonebrink (M. bovis var. bovina)
Coloración de Ziehl Neelsen
METODOS DE ANALISIS
AUTOMÁTICO
En resumen…
La calidad de la leche comienza a definirse en el tambo
Rodeo controlado, libre de brucelosis, tuberculosis, mastitis Identificación y separación de animales tratados con antibióticos o enfermos
Adecuada alimentación y agua para el ganado Control de higiene y desinfección durante el ordeñe Mantenimiento de las instalaciones y equipo
Registros: es imprescindible anotar la actividad diaria realizada Organizar los recorridos de recolección
Usar transportes adecuados
Clasificar la leche y separar la que no cumple los requisitos Conservar la calidad de la leche