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CULTIVO DE MICROALGAS

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Academic year: 2021

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Especies de microalgas

cultivadas

Tetraselmis suecica

lsochrysis galbana

(3)

Tetraselmis suecica

• Microalga verde unicelular (Prasinophyceae) • 4 flagelos

• morfología comprimida elipsoidal

• mide de 7 -9 micras de diámetro y de 10 - 16 de largo

• color verde brillante.

• Especie eurihalina

• Posee una pared celular delgada • Crecimiento óptimo de 18 - 22 ºC, a

pH de 7.5 - 8.0 y salinidad de 25 - 30 o/oo.

(4)

lsochrysis galbana

• Microalga parda (Haptofita).

• morfología subesférica a fusiforme • Biflageladas

• Mide de 6 a 8 micras.

• Crecimiento óptimo a 16 -20 ºC , salinidad de 25 - 28 o/oo y 4000 lux. • fácilmente digerible por los

consumidores

• Alto valor nutritivo. Importante

contenido en ácido docosahexaenoico (DHA)

(5)

Nannocchloropsis oculata

• Perteneciente a la clase Eustigmatophyceae • Sin flagelos

• Con uno o más cloroplastos verde amarillos • Morfología esférica de 2 a 4 micras.

• Temperatura óptima de 20 a 24 ºC. • elevados porcentajes de EPA (Ácido

(6)

Chaetoceros calcitrans

• Diatomea perteneciente a la clase Bacillariophyceae

• Presenta un color café oscuro • Tamaño de 3 a 7 micras

• Presenta cuatro largas espinas.

• Rango de temperatura óptimo para de 17 a 26 ºC

• Se caracteriza por su alto contenido de ácido

(7)

Chlorella Texcoco

• Algas verdes unicelulares del filo

Chlorophyta

• Tiene forma esférica

• Mide de 2 a 10 micras de diámetro

• Sin flagelo.

• Caracterizada por contiener alta cantidad

clorofila-a y -b en su cloroplasto.

(8)

Chlamydomonas coccoides

• Algas verdes unicelulares (clase

clorophyceae)

• Dos flagelos apicales

• Mide cerca de 10 micras de

diámetro

(9)

EQUIPO DE TRABAJO

Podemos distinguir dos zonas en el laboratorio de

producción: la zona de gabinete y la zona húmeda.

La zona de gabinete es la que proporciona todo el

material necesario para el cultivo.

(10)

EQUIPO DE TRABAJO

Podemos distinguir dos zonas en el laboratorio de

producción: la zona de gabinete y la zona húmeda.

La zona húmeda comprende aquella donde se

llevan a cabo los cultivos.

(11)

CONDICIONES DE CULTIVO

Para conseguir un cultivo de microalgas en crecimiento activo es necesario:

 inóculo viable de tamaño mínimo.

 suministro de nutrientes y microelementos .  adecuadas condiciones químicas y físicas .

Factores influyentes en la productividad y composición de las micoalgas:

 alcalinidad del medio.  Salinidad.

 Temperatura.  Oxígeno.

 disponibilidad y concentración de nutrientes.  intensidad y tipo de luz.

 densidad celular del cultivo .

(12)

TRATAMIENTO DEL AGUA

Toda aquella agua utilizada para el cultivo de microalgas debe ser

tratada para remover materia particulada, protozoarios, otras

especies de microalgas, bacterias y ciertos metales disueltos.

DESINFECCIÓN FÍSICA:

o

Filtros de arena, de cartucho, ultravioleta

o

Mangas de 100 a 1 micra

o

Autoclave

DESINFECCIÓN QUÍMICA:

o

Adicción de cloro a 15 ppm

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CINÉTICA DE CRECIMIENTO DE

LAS MICROALGAS

Curva representativa de crecimiento de un cultivo de microalgas o 1 Fase de adaptación

o 2 Fase de crecimiento exponencial o 3 Fase de declinación de crecimiento o 4 Fase estacionaria

(14)

CUANTIFICACIÓN DE LAS

MICROALGAS

Recuento directo de la población celular mediante

hemocitómetro tipo Neubauer y un microscopio óptico.

C = N x 104 x FD

Donde:

C ( cel/ml)

N (promedio de células contadas en un cuadrante) FD (factor de dilución)

(15)

CULTIVO DE MICROALGAS

El tipo de cultivo utilizado en este nivel es el denominado

semicontinuo:

Caracterizado por la remoción regular de un volumen estándar

de cultivo a ciertos intervalos de tiempo y el reemplazo de éste

con medio nuevo para obtener el volumen original.

Se cultivan de 18 a 22 °C y a una distancia de 15-20 cm de

las lámparas fluorescentes de 60 W, con dos lámparas por

estante.

(16)

CULTIVO DE MICROALGAS

Cultivo semicontinuo de microalgas a) cepa de 250 ml b) inóculo de 500 ml c) inónulo de 1.5L d) inóculo de 4L e) garrafón de 20 L f) bolsas de 140 L

(17)
(18)

CONTAMINACIÓN

Indicadores de contaminación química:

o Si el cultivo se ha caído recién sembrada la microalga, conservando su color natural, podría deberse a la composición del agua, poca circulación o cambio repentino de temperatura.

o Cuando el cultivo se toma blanco dentro de las 24 h de sembrado probablemente se debe al cloro residual y otros químicos disueltos en el agua.

o Si el cultivo conserva un color claro después de 3 ó 4 días

observando poco crecimiento, se puede deber a que la fuente de luz es poca o existe un desbalance en los nutrientes.

o Cultivos viejos de 15 o más días de cultivo que inician una

deficiencia en nutrientes generalmente se toman turbios y algunos otros levemente claros.

(19)

CONTAMINACIÓN

Indicadores de contaminación biológica:

Los tipos más comunes de contaminación biológica son excesivos niveles de bacterias, otras microalgas, protozoarios o macroalgas. o Si un cultivo después de 3 o 7 días cambia de color y

eventualmente se aclara la causa más común se debe considerar provocada por protozoarios.

o El excesivo crecimiento de bacterias se manifiesta como agua turbia, bajo crecimiento y colapso del cultivo.

Probablemente esto se debe a una mala manipulación de los cultivos, fallo en el tratamiento del agua o por cambios en los parámetros físicos como son temperatura, pH o salinidad.

(20)

RUTINA DIARIA

o Agitar los tubos de ensayo y matraces dos veces/día.

o Revisar los parámetros (pH, salinidad y temperatura) y anotarlos en la bitácora.

o Tomar muestras, ver características, contar y anotar en la bitácora. o Lavar material: matraces, garrafones, mangueras, tubos… y esterilizar. o Meter agua o material a esterilizar en autoclave, esperar 24 h.

o Si es necesario desinfectar agua con cloro, esperar 24h.

o Neutralizar el cloro de los garrafones con tiosulfato, tras 24 h.

o Revisar con ayuda del kit de cloro el agua de los garrafones para confirmar su ausencia.

o Agregarle los nutrientes a los frascos a inocular (bayfolan, EDTA, vitaminas y para Chaetoceros agregarle sílicatos).

o Inocular matraces y garrafones necesarios. o Desdoblar cepas en caso de ser necesario. o Preparar nutrientes en caso de ser necesario.

o Ordenar y asear cada una de las áreas al término de todas las actividades.

(21)

MEDIDAS DE HIGIENE

o

Estar en buen estado de salud

o

Desinfectarse las manos con alcohol antes de agitar las cepas

e inocular

o

Desinfectar con ácido o cloro todo el material a utilizar

o

Utilizar únicamente material estéril para inocular tubos de

ensayo y matraces.

o

Mantener tapados los cultivos, para evitar la contaminación

con otros microorganismos.

o

Aislar el material sucio

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