UNIVERSIDAD CENTROAMERICANA
FACULTAD DE CIENCIA, TECNOLOGÍA Y AMBIENTE DEPARTAMENTO DE CIENCIAS AMBIENTALES Y AGRARIAS
Calidad de Eclosión de Cistos de Artemia: Estudio Técnico de la Marca Bio Marine Premium y Bio Marine Clase C, bajo los parámetros de Calidad de Agua del Laboratorio de Levantamiento
Larvario DELIMAR S. A., Jiquilillo, Chinandega, en el periodo Junio-Agosto 2004
Tesis para optar al Título de Ingeniero en Producción Acuícola
Autores:
Br. Walter Alberto Orozco Montiel Br. Albert Nathaniel Palacios González
Tutora: MSc. Ana Rosa Mayorga Rodríguez
Managua, Nicaragua.
Mayo del 2005
CONTENIDO
RESUMEN
I. INTRODUCCION II. OBJETIVOS
III. MARCO TEÓRICO
IV. MARCO METODOLÓGICO V. RESULTADOS
VI. DISCUSIÓN VII. CONCLUSIONES VIII. RECOMENDACIONES IX. BIBLIOGRAFÍA
X. ANEXOS
PÁGINA DE ACEPTACIÓN
Esta tesis fue Aprobada por el tribunal examinador de la Facultad de Ciencias, Tecnología y Ambiente de la Universidad Centroamericana como requisito para optar al Título de Ingeniero en Producción Acuícola.
Msc. Ninoska Chow Wong
--- Presidente del Tribunal
Lic. Nelvia Hernández
--- Secretario
Lic. Zunilda Castellanos
--- Vocal
Msc. Ana Rosa Mayorga Tutora
Br. Walter A. Orozco Montiel Br. Albert N. Palacios González --- ---
Graduando Graduando
DEDICATORIA
A Dios por haberme iluminado durante los momentos más difíciles.
A mi madre Ana Julia Montiel por apoyarme emocional y económicamente.
A Julia Robleto Flores por haberme acompañado y animado en todo momento.
A mis hermanos Miguel Ernesto, Oscar Danilo, Juan Carlos y Claudia Marcela por apoyarnos en los momentos más difíciles.
Walter A. Orozco Montiel
DEDICATORIA
A Dios por haberme iluminado durante los momentos más difíciles, por darme la vida y la oportunidad de llegar hasta donde estoy.
A mis padres, José Palacios y Aura Elena González, por su apoyo económico durante tanto tiempo y en especial a mi madre por su apoyo, cariño y comprensión en todos los momentos en que la necesité.
A Cela del Carmen Mendieta, por ser tan especial, por animarme cuando me desanimé, por alentarme y llenarme de alegría y amor.
A Arena y amigos por compartir conmigo tantos momentos de júbilo.
A todos aquellos docentes que supieron apoyarme en mis necesidades y que con su incansable labor dieron lo mejor de sí mismos para sacarme adelante.
Albert N. Palacios González
AGRADECIMIENTO
Al Ing. Pablo Gallardo, Gerente general del laboratorio DELIMAR S.A., por habernos apoyado en la realización de la presente tesis, al prestarnos las instalaciones del laboratorio.
A Lic. Martha Vázquez, Bióloga del laboratorio, por sus correcciones al documento y por habernos ayudado en la Fase de campo. De igual forma a todo el equipo técnico del laboratorio y en especial a Doña Sherley.
A Lic. María Auxiliadora Saavedra Martínez, Coordinadora Ing. en Producción Acuícola, por su incansable labor y su aporte a las correcciones del documento final.
A Lic. Martha Rizo Berríos, Docente de la Universidad Centroamericana, por la revisión metodológica del Protocolo de Investigación.
A Jessica Moreno Montoya, Compañera de clases, por su ayuda desinteresada.
A Lic. Zunilda Castellanos, Investigadora del Centro de Investigaciones de Ecosistemas Acuáticos CIDEA, por su apoyo incondicional en la revisión del documento final.
RESUMEN
Con el fin de determinar la calidad de eclosión de dos clases de cistos de artemia de la marca Bio Marine, Premium y Clase C se realizó la medición del porcentaje, eficiencia y tasa de eclosión. Los cistos fueron incubados bajo los parámetros de calidad de agua que se registran en el laboratorio de levantamiento larvario DELIMAR S.A. ubicado en las costas de Jiquilillo, Chinandega. Para determinar el porcentaje y eficiencia de eclosión se hidrataron 0.25 g de cistos de artemia en agua de mar durante una hora, se descapsularon, posteriormente se incubaron durante 24 horas, realizándose luego el conteo de los nauplios eclosionados. Para la tasa de eclosión se siguió el mismo procedimiento con la diferencia de que el conteo de los nauplios se realizó cada dos horas a partir de las 12 hasta las 24 horas de incubación. El conteo de nauplios eclosionados (n= 40) reveló que el porcentaje de eclosión promedio para los cistos de artemia Clase C fue de 61.74%, mientras que para la Premium fue de 86.47%. La eficiencia de eclosión resultante para los cistos de artemia Clase C fue de 135,840 nauplios por gramo, mientras que en la Premium fue de 218,940 nauplios por gramo. Las tasas de eclosión resultantes para los cistos de artemia Clase C y Premium revelaron que a las 12 horas de incubación fueron de 1.8 y 43% y a las 24 horas fueron de 63.40 y 89.89% respectivamente.
Palabras claves: Cisto de artemia, nauplio, porcentaje de eclosión, eficiencia de eclosión, tasa de eclosión, Jiquilillo, calidad de agua.
ABSTRACT
With the purpose of determining the quality of appearance of two classes of cysts of artemia of the mark Bio Marine, Premium and Class C was carried out the mensuration of the percentage, efficiency and rate of appearance. The cysts was incubated under the parameters of quality of water that they register in the laboratory of larvae rising DELIMAR S. A. located in the costs of Jiquilillo, Chinandega.
To determine the percentage and efficiency of appearance were moisturized 0.25 g of artemia cysts in sea water during one hour, they were incubated during 24 hours, being carried out the count of the nauplii then. For the rate of appearance the same procedure was continued with the difference that the count of the nauplii was carried out every two hours starting from 12 o'clock until the 24 hours of incubation. The count of nauplios (n = 40) revealed that the percentage of appearance average for the cysts of artemia Class C was 61.74%, while for the Premium it was 86. 47%. The efficiency of resulting appearance for the cysts of artemia Class C was 35,840 nauplii per gram, while in the Premium it was 218,940 nauplii per gram. The resulting rates of appearance for the cysts of artemia Class C and Premium revealed that at the 12 hours of incubation it was 1.8 and 43% and at the 24 hours it was 63.40 and 89.89% respectively.
Key words: Artemia Cysts, nauplii, percentage of appearance, efficiency of appearance, rate of appearance, Jiquilillo, quality of water.
I. INTRODUCCION
La Artemia es un recurso de vital importancia para el desarrollo de la camaronicultura, dado que es un insumo insustituible para la nutrición del camarón en las etapas del desarrollo larval en la producción de laboratorio.
En el cultivo de camarones del género Litopenaeus es necesario definir la calidad de los tipos de alimentos vivos que se pretenden o que se están suministrando, especialmente en las etapas tempranas del desarrollo larvario, debido a que la sobrevivencia de éstos organismos depende en gran medida de la calidad de los tipos de alimentos vivos que se les suministran. En el mercado existen diferentes marcas de artemia que varían en cuanto a la calidad de eclosión, sin embargo, en el Laboratorio DELIMAR, no se ha determinado la calidad de eclosión de los cistos de artemia que actualmente se suministra, incubada bajo los parámetros de calidad de agua que se presentan en dicho laboratorio
En el Laboratorio DELIMAR S. A., se desconocen datos sobre el porcentaje, eficiencia y tasa de eclosión, sin embargo se presume que no se obtienen los resultados esperados de las especificaciones técnicas del proveedor de los cistos de artemia que se utilizan en este laboratorio. El presente estudio surge de la necesidad de determinar la calidad de eclosión de la marca de artemia Bio Marine, de dos categorías: Premium y Clase C, con el fin de establecer una comparación en la calidad de eclosión de los cistos, respecto a lo que establece la casa comercial.
Se tienen pocos antecedentes sobre estudios realizados al respecto. En Bélgica, en el año 1987, Sorgeloos et al, realizaron un estudio sobre la calidad de eclosión de cistos de artemia de diversos orígenes: Macau (Brasil), San Francisco Bay (California, USA), San Pablo Bay (California USA), Great Salt Lake (Utah USA),
entre otras. El estudio se llevó acabo bajo condiciones estándares de eclosión (Salinidad 35 % y a 25° C).
De las marcas estudiadas, la Macau, procedente de Brasil presentó los mejores resultados en la calidad de eclosión, con 82% de eclosión y 304,000 nauplios por gramo de eficiencia. En cambio, la Bio Marine presentó un bajo porcentaje de eclosión (43.9%), y 106,000 nauplios por gramos en la eficiencia. Actualmente en Nicaragua no existen datos sobre estudios realizados sobre la calidad de eclosión de cistos de artemia de diferentes marcas bajo los parámetros de calidad de agua que se registran en la zona donde se cultiva camarón.
II. OBJETIVOS
2.1. OBJETIVO GENERAL
Determinar la Calidad de Eclosión de los cistos de artemia de la Marca Bio Marine (Premium y Clase C) bajo los parámetros de calidad de agua del Laboratorio DELIMAR, Jiquilillo, Chinandega.
2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
v Describir los parámetros de calidad de agua para la eclosión de cistos de artemia la marca Bio Marine, Premium y Clase C, en el laboratorio DELIMAR S.A.
v Determinar el porcentaje, eficiencia y tasa de eclosión de cistos de artemia de las marca Bio Marine, Premium y Clase C.
III. MARCO TEÓRICO
3.1. IMPORTANCIA DE LA ARTEMIA EN LA ACUACULTURA
La Artemia, Artemia sp, es un crustáceo pequeño comúnmente utilizado en la acuicultura como alimento vivo de peces y camarones. Constituye la ración primaria y la mayoría de las veces es el único alimento para las larvas de muchas especies cultivadas: camarones peneidos, langostinos, cangrejos y peces (Tuñon, 1991).
La importancia de la artemia en la acuacultura está ampliamente difundida, diversos autores explican las características y ventajas que presenta la artemia como alimento vivo para peces y crustáceos en las etapas tempranas de su vida.
La artemia tiene varias características que la hacen ideal para su uso en la acuicultura, de las cuales se mencionan, su fácil manejo, ya que se mantiene en un estado de latencia en forma de cistos secos, los cuales pueden ser fácilmente almacenados, transportados, etc. También por su amplio rango de tolerancia a las condiciones ambientales, no es selectivo en su alimentación (debido a que es un animal puramente filtrador), es capaz de crecer a altas densidades (10,000 individuos/litro), presenta alta fecundidad y largo ciclo de vida (mas de seis meses). La artemia tiene un elevado valor nutritivo, conteniendo de 40-60% de proteína (Tuñon, 1991).
Treece y Yates (1993), resumen el valor de la artemia en la acuacultura debido a sus características únicas de reproducción, desarrollo y fisiología.
Pillay (1997), menciona que de los animales vivos utilizados como alimento en la acuicultura, la artemia o camarón de las salinas ha recibido considerable atención en años recientes, debido a su uso creciente en el cultivo de crustáceos. La artemia se utiliza en la etapa naupliar, proveniente de cistos desecados, recién
emergidos o congelados. La ventaja de utilizar artemia es la facilidad y rapidez con que puede inducirse la eclosión de los cistos.
La artemia posee características que la hacen básica para la nutrición de peces y crustáceos; de las cuales se puede mencionar el alto índice nutritivo que posee, con elevados porcentajes de: proteínas, lípidos y glúcidos. (Molina, 2002)
Otras características favorables que presenta la artemia como alimento son:
pequeño tamaño (los adultos no sobrepasan los 15 mm de longitud), su contenido proteico elevado (los nauplios o estados larvarios contienen hasta un 50-60% y los adultos un 40-50%), su gran eficacia para convertir el alimento y su sistema de reproducción mediante cistos, que toleran incluso la desecación y que pueden ser activados en cualquier momento restaurando las condiciones adecuadas (Molina, 2002).
3.2. BIOLOGÍA Y ECOLOGÍA DE LA ARTEMIA
3.2.1. Clasificación sistemática Phyllum: Artropoda
Clase : Crustacea Subclase: Branquiopoda Orden : Anostraca Familia : Artemiidae
Género : Artemia, Leach, (1819)
3.2.2. Especies
El nombre específico Artemia salina no es taxonómicamente válido en la actualidad. Experiencias de cruzamiento entre diferentes poblaciones de Artemia han demostrado el aislamiento reproductivo de algunos grupos de poblaciones y esto ha llevado al reconocimiento de especies hermanas a las que se les han dado nombres diferentes (Sorgeloos et al. 1986).Entre las cepas bisexuales o
zigogenéticas de Artemia (poblaciones compuestas por individuos machos y hembras) se han descrito hasta la fecha 6 especies hermanas:
Artemia salina: Lymington, Inglaterra (extinta) Artemia tunisiana: Europa
Artemia franciscana: América (Norte, Centro y Sur) Artemia persimilis: Argentina
Artemia urmiana: Irán
Artemia monica: Mono Lake, CA-USA
3.2.3. Ciclo biológico
Después de 24 horas de incubación en agua de mar a 28º C el corión o capa dura del cisto se rompe. El embrión todavía rodeado por la membrana transparente donde se crió, es liberado. El embrión se puede observar en movimiento dentro de la membrana. Pocas horas después, el nauplio se desprende de la membrana y nada libremente usando antenas modificadas para locomoción y filtración del alimento (ver foto 1). El nauplio puede vivir a base del vitelo y reservas almacenadas hasta por cinco días, pero sus reservas proteínicas y calóricas disminuyen constantemente durante este tiempo (Treece y Yates, 1993).
Cisto 12 horas 18-20 horas
20-22 horas 22-24 horas 24-30 horas Foto 1. Etapas de la eclosión de un cisto de artemia
Los cistos bicóncavos cuando son colocados en agua de mar, se hidratan tomando la forma esférica y el embrión recobra su metabolismo reversible. En unas 24 horas la membrana externa se rompe apareciendo el embrión, el cual permanece unido en forma de paraguas a la membrana de eclosión, que es donde se completa el desarrollo del nauplio y en un periodo breve esta membrana de eclosión se rasga, emergiendo el nauplio con sus apéndices, nadando libremente.
Cisto: es un huevecillo de aproximadamente 200 a 300 micras de diámetro, puede mantenerse inactivo por algún tiempo hasta que existan las condiciones óptimas para su eclosión.
Nauplio: inmediatamente después de la ruptura de la membrana del cisto, sale el nauplio, el cual mide aproximadamente 0.4 a 0.5 mm y pesa aproximadamente 0.002-0.003 mg.
Juveniles: son pequeñas larvas de aproximadamente 2 a 4 mm, las cuales nadan libremente. Se les observa un tracto digestivo funcional, un abdomen alargado y muchos apéndices bien diferenciados.
Adultos: miden de 8 a 10 mm, (Tuñon, 1991). Diferentes cepas geográficas se han adaptado a un amplio margen de temperaturas, de 6-35ºC; a salinidades por encima de 70 ppt, donde sus depredadores no pueden sobrevivir (Sorgeloos et al.
1986).
3.2.5. Morfología y metabolismo de cistos de artemia
Los cistos son en realidad embriones en estado de diapausa. En este estado pueden llegar a permanecer incluso años, lo que favorece enormemente su producción y almacenaje (Molina, 2002).
La cáscara de los cistos secos está formada de tres estructuras:
El corión: es una capa dura formada de lipoproteínas constituidas por quitina y hematina. Su principal función es la de proporcionar protección al embrión contra rompeduras mecánicas y radiaciones. Esta capa puede ser removida por oxidación con hipoclorito.
Membrana cuticular externa: protege al embrión contra la penetración de moléculas mayores que la molécula del CO2; actuando como barrera permeable.
Cutícula embrionaria: es una capa transparente de gran elasticidad que queda separada del embrión por la membrana cuticular interna (Sorgeloos et al. 1986).
3.2.6. Hábitos alimenticios
La artemia es un filtrador no selectivo y se alimenta tanto de materia orgánica particulada (ejemplo: detritos biológicos procedentes de aguas de manglares), como de organismos vivos de tamaño apropiado (microalgas y bacterias).
3.2.7. Distribución geográfica
La artemia es un pequeño crustáceo que vive en casi todas las aguas continentales salobres o hipersalinas. La artemia soporta variaciones de temperatura de entre 6-35ºC, soporta concentraciones superiores a las del agua marina, pudiendo llegar a niveles de saturación (Molina, 2002).
En la naturaleza este crustáceo vive en condiciones de salinidad sumamente extremas, que pueden variar de 60 a 200 ppt. En estas condiciones desarrolla su vida normal y no tiene competidores por el alimento (Tuñon, 1991).
Sorgeloos (1986) menciona que las poblaciones de artemia se encuentran distribuidas en más de 300 lagos salinos naturales o salinas de construcción artificial a lo largo de todo el mundo. Diferentes cepas geográficas se han adaptado a unas condiciones que fluctúan dentro de un amplio margen de
temperatura (6–35°C) y composición iónica del biotopo (aguas ricas en cloruros, sulfatos y carbonatos).
Esta especie se desarrolla perfectamente en agua de mar, sin embargo, no posee ningún mecanismo de defensa contra los predadores, lo que la convierte en una presa fácil de otras especies carnívoras (peces, crustáceos o insectos).
3.3. OBTENCIÓN Y PROCESO DE INDUSTRIALIZACIÓN
Los cistos deshidratados pueden ser guardados por meses o años sin perder la habilidad de producir huevos. (Dutiew 1960, citado en Bernabé 1996). El cisto es de 200 a 300 micrómetros de diámetro, dependiendo de la clase. Su capa externa está compuesta de un corión lipo-proteínico duro, de color café oscuro (Anderson et al. 1970, citado por Bernabé 1996).
Una vez recolectados mecánica o manualmente de las orillas (se recogen de 10 a 100 kg/ha/año), estos huevos son separados de la arena mediante filtración y lavados con agua sobresalada (300 ppt de salinidad); luego son lavados con agua dulce, secados con papel y acondicionados en seco en latas (tipo lata de conserva), sometidos a una atmósfera preferentemente de nitrógeno. En esta forma pueden ser transportados y conservados durante años (Bernabé, 1996).
Los cistos secos se obtienen en el comercio cada vez en mayor número de sitios.
La mayoría de dichos cistos se recolectan por acumulaciones a lo largo de las costas de lagunas saladas y como subproducto de la explotación de la sal. (Pillay, 1997). En el presente, los cistos de Artemia pueden conseguirse en: Estados Unidos, Brasil, Canadá, China y algunos países de Europa (Tuñon, 1991).
Se ha demostrado que los nauplios obtenidos de cistos provenientes de diferentes regiones geográficas no dan resultados igualmente buenos en la cría de larvas de camarón. Las diferencias entre cepas, modos de cosecha, manejo y condiciones
de eclosión influyen en el valor nutricional de la artemia. Debido a las variaciones en el coeficiente de eclosión la longitud y el peso de los nauplios, los cistos deberán seleccionarse con gran cuidado.
Se informa que se han registrado más de 50 cepas de artemia alrededor del mundo. Igualmente, en la actualidad existen numerosos productores comerciales y distribuidores que venden marcas de diferentes calidades. Liao et al (1983, citado por Pillay 1997) han recopilado datos sobre el rendimiento de cistos de distintos lugares, lo cual podría orientar la selección de las fuentes de cistos. La eficiencia y el porcentaje de eclosión son las características más importantes, sin embargo, un tiempo de eclosión más corto significa mejores cistos y mayor puntualidad en el suministro de nauplios (Pillay, 1997).
Existe una amplia variedad de cistos de artemia de diversos orígenes. Sorgeloos et al. (1986) realizaron un estudio sobre la calidad de eclosión de cistos eclosionados bajo condiciones estándares (35 ppt y 25ºC), cuyos datos de detallan a continuación.
Tabla 1. Datos sobre la calidad de eclosión de cistos de artemia de diversos orígenes incubados bajo condiciones estándares (35 ppt y 25ºC).
Tasa de eclosión (hrs.) Origen de los cistos H% HE
(nauplios/g) T0 T10 T90 TS
San Francisco Bay, Ca- USA 71.4 267,200 15.0 15.5 20.5 5.0 San Pablo Bay, Ca- USA 84.3 259,300 13.9 15.1 20.1 5.0
Macau, Brasil 82.0 304,000 15.7 19.3 23.7 4.4
Borotac Nuevo, Filipinas 78.0 214,000 14.7 15.7 22.0 6.3 Great Salt Lake, UT-USA 43.9 106,000 14.1 14.7 21.7 7.0 Shark Bay, Australia 87.5 217,600 20.3 21.1 28.1 7.0 Chaplin Lake, Canadá 19.5 65,600 14.3 15.7 33.0 17.3 Buenos Aires, Argentina 62.8 193,600 16.1 17.3 22.6 5.3 Lavalduc, Francia 75.8 182,400 19.5 20.5 30.5 10.0 Tientsin, China 73.5 129,600 16.0 17.1 27.2 10.1 Margherita di Savoia, Italia 77.2 137,600 18.7 20.0 25.3 5.3
Artemia Bélgica 45.7 211,000 18.0 - 32.2 -
H%: Porcentaje de eclosión; HE: Eficiencia de eclosión.
Fuente: Sorgeloos et al. 1986.
3.4. PARÁMETROS DE CALIDAD DE AGUA PARA LA ECLOSIÓN DE CISTOS DE ARTEMIA
Existe bibliografía sobre los parámetros óptimos de eclosión de los cistos de artemia. En estas investigaciones, la producción de nauplios por incubación de los cistos en agua de mar se presenta como un método muy simple. Sin embargo, cuando se trabaja a gran escala y con altas densidades de cistos, algunos parámetros pueden ser críticos para asegurar una eficiencia de eclosión máxima.
Según Pillay (1997), para la eclosión de los cistos de artemia los parámetros se deben mantener en los siguientes rangos: deberá emplearse agua de mar natural con temperaturas entre 25-30ºC y pH de 8-9, oxígeno a saturación e iluminación continua de 1,000 lux.
Según Molina (2002), los parámetros que se deben controlar para la producción de artemia a altas densidades son: temperatura del medio entre 25ºC y 30ºC, salinidad de 35%, valores cercanos a la saturación de oxígeno, intensidad lumínica de 1,000 lux.
A continuación se detallan los valores de los parámetros recomendados por Sorgeloos et al. (1986), para una eclosión óptima:
3.4.1. Temperatura
Deberá mantenerse en el intervalo de 25–30°C. A temperatura por debajo de 25°C la eclosión es más lenta y por encima de 40°C el metabolismo de los cistos se detiene irreversiblemente, causando su mortalidad. Es mejor mantener una temperatura constante en el medio de eclosión (ejemplo: usando calentadores y termostatos) para obtener una producción máxima de nauplios en estadio I (con un contenido energético máximo) en el mismo periodo de incubación; para ello se deben poner a punto métodos rutinarios de eclosión y recogida de nauplios, asegurando unos resultados de eclosión constantes, independientemente de las fluctuaciones estacionales de la temperatura.
3.4.2. Salinidad y pH
Por razones de conveniencia práctica, se usa mayormente el agua de mar para la eclosión de los cistos. Sin embargo, a una salinidad de 5‰ aumenta la tasa de eclosión (ya que se tiene que producir menos glicerol) y se han registrado eficiencias de eclosión más elevadas para algunas cepas de cistos, teniendo los nauplios un mayor contenido energético. Para esto es necesario mantener niveles de pH por debajo de 8.
3.4.3. Oxígeno
Para obtener una eclosión máxima (tanto en tasa como en eficiencia), se recomienda mantener unos niveles de oxígeno por encima de 2 mg/l. Las tasas óptimas de aireación han sido controladas localmente en función del tamaño del tanque y de la densidad de cistos incubados; por ejemplo, para lograr una eclosión máxima de 100 gramos de cistos en un recipiente de 20 litros, se debe mantener una tasa de aireación de siete litros de aire por cada tanque.
En la tabla 2 se detallan las condiciones de incubación de cistos de artemia recomendados por la marca Bio Marine para obtener un alto rendimiento en la eclosión de artemia del tipo Premium.
Tabla 2. Condiciones de Incubación de cistos de artemia según la marca Bio Marine
Condición Valores
Salinidad del agua (ppt) 15 – 25
Temperatura del agua (ºC) 27 - 30
pH 8
Densidad de Incubación ( g cistos/l de
agua) 2 g o menos
Diseño óptimo del tanque Fondo cónico, constante aireación e iluminación
Tiempo de Incubación (horas) 18 - 24
Fuente: www.aquafauna.com
3.5. PROCESO DE CULTIVO DE ARTEMIA
Según Treece & Yates (1993) el cultivo de la artemia se realiza de la siguiente manera:
3.5.1. Hidratación
La superficie externa de los cistos de artemia puede estar cubierta con esporas de bacterias y hongos o estar contaminada con impurezas orgánicas, por lo que es necesario eliminar dicha contaminación a través de un método rutinario de desinfección, conocida como hidratación. Los cistos se colocan en agua de mar limpia con cloro activo durante una a dos horas. Durante ese tiempo se mantiene una aireación o agitación fuerte para exponer todos los cistos a la solución desinfectante; el tiempo de desinfección se puede reducir a unos 20 minutos usando mayores concentraciones del desinfectante. Después del tratamiento, los cistos se lavan con abundante agua de mar limpia sobre una malla de 100 micras.
3.5.2. Descapsulación
Este proceso tiene la finalidad de remover la dura capa externa de color marrón de los cistos, ésta se puede eliminar sin afectar la viabilidad del embrión por medio de una exposición de los cistos hidratados en una solución compuesta de cloro activo e hidróxido de sodio. La eliminación completa del corión se puede lograr únicamente cuando los cistos son esféricos, esto último se obtiene durante una correcta hidratación de los cistos.
La importancia de la descasulación radica en que el porcentaje de eclosión se incrementa significativamente. Con la utilización del proceso de descapsulación no solo se eliminan los problemas de separación de los nauplios y cistos no eclosionados, sino que se logra la eliminación de residuos de partículas contaminantes (Soluap, 1998).
3.5.3. Incubación
Después del proceso de descapsulación, los cistos pueden ser incubados bajo los parámetros de calidad de agua descritos en el apartado 3.4. A escala industrial es necesario tener el control de los siguientes factores:
Ø Densidad: se recomienda no sobrepasar densidades de 5 gramos de cistos por litro de agua, especialmente cuando se trabaja con grandes cantidades.
Ø Iluminación: La iluminación de los cistos durante las primeras horas después de su hidratación, es necesaria para lograr una eclosión máxima. Es aconsejable mantener una iluminación de aproximadamente 2,000 lux en la superficie del agua. Este nivel de iluminación se logra, principalmente en el día en tanques transparentes. Es necesario disponer de una fuente artificial, por ejemplo con tubos fluorescentes instalados cerca de la superficie del agua.
3.5.4. Cosecha
Luego de haber transcurrido aproximadamente 24 horas de incubación, se procede a suspender la aireación con el fin de que los nauplios se depositen en el fondo y los cistos no eclosionados permanezcan en la superficie al igual que las impurezas, ya que a menudo son la causa de perturbaciones digestivas y enfermedades infecciosas en estadíos larvarios de crustáceos. Para eliminar las impurezas y cistos durante la cosecha, se debe colocar sobre el tanque de cultivo una tapa que evite la penetración de la luz y dado que los nauplios poseen fototropismo positivo se reunirán en el fondo, cosechándose así solamente los nauplios.
Posteriormente, se coloca una malla de 100 micras en el tubo cosechador para sacar la artemia y se lava suavemente con agua de mar limpia y está lista para alimentar a las postlarvas de camarón.
Los nauplios de artemia se cosechan en el estadío I, cuyo valor proteínico es de 47%. Se pueden almacenar de 0ºC a 4ºC por 48 horas mientras su viabilidad permanece en un 90%. La artemia es suministrada en los primeros estadíos larvales de los crustáceos, específicamente desde Zoea III hasta post-larva 10 (muchas veces hasta postlarva 15).
3.6. CALIDAD DE ECLOSIÓN DE LA ARTEMIA
Las cualidades heterogéneas presentadas por los cistos de artemia debido a su origen y características particulares, hacen necesario desarrollar técnicas de control de calidad de sus principales criterios de eclosión antes de que sean usados como alimento vivo en el cultivo de camarones. Se advierte que existe una variabilidad en la calidad de eclosión según el origen geográfico de las cepas y también entre lotes de cistos de una misma marca. La calidad de eclosión de los cistos de artemia se determina a través de la medición de los siguientes criterios de eclosión:
3.6.1. Porcentaje de eclosión
Es el número de nauplios que pueden ser producidos a partir de 100 cistos hidratados y conteniendo un embrión; en este criterio no se incluyen impurezas o cistos defectuosos. Ej. Cáscaras rotas, arena, sal, etc.
El porcentaje de eclosión de los cistos de artemia es muy variable según el origen, el rango es de 35 a 83% (Bernabé, 1996).
3.6.2. Eficiencia de eclosión
Número de nauplios que se producen a partir de 1 gramo de cistos secos cuando se les incuba bajo condiciones óptimas. Cada gramo de cistos debe rendir de 200,000 a 300,000 nauplios (Treece y Yates. 1993). Según Bernabé (1996), a partir de un gramo de cistos se obtienen de 105,000 a 300,000 nauplios.
3.6.3. Tasa de eclosión
Esta es la tasa y sincronía con la que los nauplios eclosionan (los mejores productos comienzan a eclosionar a partir de las 15 horas de incubación en agua de mar, alcanzando el 90% de su eclosión máxima en el plazo de las 5 horas siguientes. Los datos sobre la tasa de eclosión, permiten calcular el período de incubación óptimo para cosechar los nauplios con su máximo contenido energético. La eclosión, puede tener una duración de 18 a 24 horas, que es el período donde aparece el mayor número posible de nauplios en el primer estadío larvario (Estadío I).
Este criterio también es conocido como la sincronía de eclosión, es decir, el tiempo transcurrido desde que comienza la incubación (hidratación de los cistos) hasta la liberación del nauplio (eclosión). Considerándose los siguientes intervalos de tiempo:
T0=-Tiempo de incubación hasta que aparecen los primeros nauplios nadadores.
T10=-Tiempo de incubación hasta que aparece el 10% del total de los nauplios eclosionables.
T90 =-Tiempo de incubación hasta que aparece el 90% del total de los nauplios eclosionables.
Ts =-T90 - T10; Este valor da una idea de la sincronía de la eclosión.
En la tabla 3 se presentan datos específicos sobre las características de los cistos de artemia distribuidos por la marca Bio Marine del tipo Premium cuya presentación se muestra en la foto 2.
Tabla 3. Características de los cistos de artemia Bio Marine Premium
Características de los Cistos Valor o Rango Porcentaje de Eclosión 90 % mínimo
Nauplios por gramo 240,000 – 279,000 Cistos secos por gramo 270,000 – 310,000
Designación HUFA Franciscana, Great Salt Lake Longitud naupliar 486 micrones (promedio) Porcentaje (20:5w3) 2.9 – 5.7 %
Fuente: www.aquafauna.com
Foto 2. Latas de artemia Bio Marine
IV. MARCO METODOLÓGICO
4.1. ÁREA DE ESTUDIO
La presente investigación se llevó a cabo en el Laboratorio de levantamiento larvario de camarón (Litopenaeus vannamei) DELIMAR S.A., este se encuentra ubicado en la entrada al balneario de Jiquilillo aproximadamente a 75 Km. de El Viejo, Departamento de Chinandega y aproximadamente a 190 Km. de la capital Managua.
Figura 1. Mapa de la ubicación de la zona de estudio.
La investigación se realizó, específicamente, en el área de cultivo de artemia de dicho Laboratorio.
El Laboratorio cuenta con las siguientes Áreas de trabajo:
Área de cultivo de Artemia Área de Cultivo de Algas
Área de Larvicultura
Área de Análisis de muestras
4.2. TIPO DE ESTUDIO
Según el alcance y análisis, el presente estudio es descriptivo, la determinación de la calidad de eclosión de cistos de artemia Premium y Clase C, de la marca Bio Marine, se realizó a través de la medición de los siguientes aspectos: Porcentaje, Eficiencia y Tasa de eclosión. Asimismo, se registraron los parámetros de calidad de agua bajo los cuales se llevó a cabo la incubación de los cistos de artemia. El alcance del estudio se limita a la descripción de la calidad de la eclosión a través de los valores obtenidos para las variables mencionadas.
Según Hernández et al. (1998), el presente estudio es del tipo ¨NO EXPERIMENTAL¨, ya que no existe una manipulación intencional de los parámetros de la calidad del agua.
4.3. UNIVERSO Y MUESTRA
El universo de estudio se compone de los cistos de una lata de artemia Bio Marine de las clases Premium y clase C. El número de muestras necesarias para determinar el porcentaje y eficiencia de eclosión, se obtuvo a partir de la siguiente fórmula, esto para que la muestra fuese representativa y estadísticamente confiable:
N = (Z2*S2)/E2 Donde:
Z= nivel de significancia. Para 95% es de 1.96 (Daniel, 1999) S = Desviación estándar
E = Error (5% del promedio)
Dado que se desconoce la desviación estándar de la población, fue necesario extraer una muestra piloto a partir de la cual se determinó la cantidad de submuestras o el tamaño de la muestra necesario para el análisis.
Para las variables porcentaje de eclosión y eficiencia de eclosión se trabajó con una muestra de cuatro réplicas con diez submuestras cada una, para un total de 40 submuestras. La variable tasa de eclosión se trabajó con una muestra de 18 réplicas.
4.4. VARIABLES DEL ESTUDIO
Tabla 4. Matriz de operacionalización de las variables de estudio.
Variable Indicador Fuente de
Verificación
Calidad de eclosión
Porcentaje de eclosión Tasa de eclosión Eficiencia de eclosión
Hoja de registro
Parámetros de
calidad de agua Temperatura, Oxígeno, pH y Salinidad. Hoja de registro
4.5. INSTRUMENTO DE RECOLECCIÓN DE INFORMACIÓN
El instrumento para la recolección de la información fueron Hojas de Registro de datos de Porcentaje, Tasa y Eficiencia de Eclosión de dos clases de artemia de la Marca Bio Marine. También se utilizó una Hoja de Registro de los Parámetros de calidad de agua en la incubación de los cistos de artemia de las clases en estudio.
(Ver anexo III-VI)
5.6. PROCESAMIENTO DE LA INFORMACIÓN
Para el procesamiento de los datos se hizo uso del Programa Microsoft Excel.
Se elaboraron gráficos y tablas para la presentación de los resultados. Se aplicó Estadística descriptiva a las variables de estudio: valores promedios, máximos y mínimos. La Tasa de eclosión de cistos de artemia se expresa de dos formas:
Porcentaje de eclosión vs. Horas de incubación y Eficiencia de eclosión vs. Horas de incubación. Para relacionar dichas variables con las Horas de incubación, se obtuvo la ecuación lineal a través de la Regresión lineal. De esa forma se pudieron calcular los diferentes tiempos requeridos en la Tasa de eclosión.
(T0, T10, T90 y TS).
4.7. PROCEDIMIENTO
El procedimiento utilizado para determinar la calidad de eclosión de los cistos de Artemia Bio Marine Premium y Clase C, se basa en el método descrito por Sorgeloos et al (1986). Para el presente estudio el método fue ajustado según los materiales disponibles en el laboratorio. El método de Sorgeloos sugiere que se incuben los cistos bajo parámetros estándares de calidad de agua, sin embargo, lo que se realizó en este estudio fue determinar la calidad de eclosión de la artemia bajo los parámetros de calidad de agua que se presentan en el laboratorio DELIMAR S.A.
4.7.1. Porcentaje de Eclosión
1. Se hidrataron en una botella de vidrio de 500 ml de capacidad, 0.25 g de cistos de artemia en 100 ml de agua de mar, con iluminación permanente.
(Véase foto 3). Se instaló la aireación suave desde el fondo para mantener los cistos en suspensión (evitando la aireación fuerte para que no se formasen espumas). A partir de las 6:00 pm las botellas se iluminaron con una lámpara de 40 watts suspendida desde el techo.
2. Al cabo de una hora, se descapsuló con una solución de hidróxido de sodio (NaOH) y cloro líquido. Se lavó con abundante agua. Las cantidades utilizadas fueron: 5 ml de NaOH (100%) y 20 ml de cloro (90%)
3. Con una pipeta de vidrio de 1 ml, se tomaron 10 submuestras (i=10) de unos 100 cistos cada una.
4. Los cistos se depositaron en un plato petri para realizar el conteo de cistos (ci), los valores se anotaron en la hoja de registro.
5. Luego se depositaron en la botella de vidrio para incubación, se llenó con 200 ml de agua de mar limpia.
6. Al cabo de 24 horas de incubación se contaron los nauplios (ni) en cada submuestra y los valores se anotaron en la hoja de registro
Fórmula utilizada.
Porcentaje de eclosión en cada submuestra:
H% = ni/ci * 100 Donde:
H% = Porcentaje de eclosión ni = Número de nauplios ci = Número de cistos
Foto 3. Montaje del sistema de incubación de cistos de artemia
4.7.2. Eficiencia de Eclosión
1. Se hidrataron en una botella de vidrio de 500 ml de capacidad, 0.25 g de cistos de artemia en 100 ml de agua de mar, con iluminación permanente.
(Véase foto 3). Se instaló la aireación suave desde el fondo para mantener los cistos en suspensión (evitando la aireación fuerte para que no se formasen espumas). A partir de las 6:00 pm las botellas se iluminaron con una lámpara de 40 watts suspendida desde el techo.
2. Al cabo de una hora, se descapsuló con una solución de hidróxido de sodio (NaOH) y cloro líquido. Se lavó con abundante agua. Las cantidades utilizadas fueron: 5 ml de NaOH (100%) y 20 ml de cloro (90%)
3. Los cistos descapsulados se depositaron en una botella de vidrio con 100 ml de agua de mar y por medio de una pipeta de 1 ml se tomaron 10 submuestras (i= 10) de 0.25 ml cada una.
4. Las submuestras se depositaron en una botella de vidrio, añadiendo 200 ml de agua de mar previamente aireada. La botella se tapó con papel de aluminio para evitar la introducción de insectos.
5. Se incubaron bajo iluminación continua. Al cabo de 24 horas se realizó el conteo de los nauplios eclosionados. Los valores de cada submuestra se anotaron en la hoja de registro.
Fórmula utilizada.
HE = Eficiencia de eclosión N = Valor medio submuestras.
4 = Constante 100 = Constante.
(HE) = N * 4 *100 * 4 (Número de nauplios por gramo de cistos)
4.7.3. Tasa de Eclosión
1. Se hidrataron en una botella de vidrio de 500 ml de capacidad, 0.25 g de cistos con 80 ml de agua de mar; se instaló la aireación desde el fondo para mantener los cistos en suspensión. (Véase foto 3). A partir de las 6:00 pm las botellas se iluminaron con una lámpara de 40 watts suspendida desde el techo.
2. Después de una hora, se descapsuló con una solución de hidróxido de sodio y cloro líquido, 5 ml de NaOH (100%) y 20 ml de cloro (90%). Luego se enjuagó con abundante agua de mar.
3. Los cistos descapsulados se depositaron en una botella de vidrio con 100 ml de agua de mar y se incubó por 24 horas.
4. Al cabo de 12 horas, se añadió agua de mar para ajustar el volumen compensando las pérdidas por evaporación. Se tomó 0.5 ml de cistos, por medio de una pipeta de 1 ml, a intervalos de dos horas.
5. Las muestras se depositaron sobre un plato petri y se contaron los nauplios y los cistos presentes en cada muestra. Los valores se anotaron en la hoja de registro.
6. Los valores medios totales de las muestras tomadas cada ahora, se expresaron como porcentaje de eclosión máxima, representándolos en una curva de tasa de eclosión.
4.7.4. Parámetros de calidad de agua
Los parámetros de calidad de agua se tomaron durante las horas del día (Véase foto 4), directamente de los recipientes de incubación de los cistos de artemia.
Cada una o dos horas se tomaron los datos, los cuales fueron anotados en la hoja de registro de datos. Los parámetros monitoreados fueron los siguientes:
Temperatura, Salinidad, pH y Oxígeno.
4.8. MATERIALES Y REACTIVOS UTILIZADOS
REACTIVOS
Ø 2 Latas de Artemia de las marcas (Bio-Marine )
Ø Cloro
Ø Hidróxido de sodio
MATERIALES
Ø 1 Caja de papel de aluminio Ø 1 Espátula
Ø 20 Botellas de vidrio de 500 ml Ø 2 Pipetas de vidrio de 1ml Ø 1 Caja de papel absorbente Ø 1 Rollo de masking tape
Ø 1 Marcador Ø 1Balanza digital Ø Plato petri
Ø 2 Pipetas de vidrio de 0.5 ml Ø 2 Lupas de disección
EQUIPOS: Oxigenómetro, salinómetro, pH- metro y termómetro.
Foto 4. Toma de parámetros de calidad de agua en los recipientes de incubación.
V. RESULTADOS
Los resultados obtenidos durante la investigación revelan datos concisos respecto a la calidad de eclosión de cistos de artemia de la marca Bio Marine, para las clases estudiadas. Los resultados se presentan a continuación:
5.1. PARÁMETROS DE CALIDAD DE AGUA
Figura 2. Oscilaciones diarias de la Temperatura (ºC) del agua durante la incubación de cistos de artemia Bio Marine (Premium y Clase C).
Figura 3. Oscilaciones del Oxigeno Disuelto durante la incubación de cistos de artemia Bio Marine (Premium y Clase C).
24.0 26.0 28.0 30.0 32.0 34.0 36.0
06:00 a.m.
07:00 a.m.
08:00 a.m.
09:00 a.m.
10:00 a.m.
11:00 a.m.
12:00 p.m.
01:00 p.m.
02:00 p.m.
03:00 p.m.
04:00 p.m.
05:00 p.m.
06:00 p.m.
Hora de medición
Temperatura (ºC)
3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00
06:00 a.m.
07:00 a.m.
08:00 a.m.
09:00 a.m.
10:00 a.m.
11:00 a.m.
12:00 p.m.
01:00 p.m.
02:00 p.m.
03:00 p.m.
04:00 p.m.
05:00 p.m.
06:00 p.m.
Hora
Oxígeno Disuelto (mg/l)
La temperatura del agua osciló entre los 25.1ºC y 37.4ºC. Las temperaturas que se muestran en la figura 2 corresponden a valores registrados durante el día.
Cabe señalar que la temperatura ambiental era más alta que esta, ya que la sala de artemia no contaba con ventilación y dada la necesidad de luz presentaba un techo traslúcido por el que pasaba un 80 a 90% de la luz solar. La media de la temperatura fue de 30.8ºC. La temperatura muestra un comportamiento ascendente hasta el medio día donde se mantiene en 34ºC durante tres horas.
Durante la tarde se nota un descenso de la temperatura sin exceder los 4ºC.
El Oxígeno Disuelto osciló entre 2.3 mg/l a 6.22 mg/l, con un promedio de 4.3 mg/l.
Las variaciones observadas en los niveles de oxígeno durante el día se debieron al suministro irregular de éste en el área de artemia (ver figura 3). Durante las tardes se observó un incremento en el nivel de oxígeno debido a que la aireación se distribuía en menos tanques porque se cosechaban varios. Durante las horas de la mañana existía una mayor demanda de oxígeno en el área de cultivo de artemia, por lo que el suministro de oxígeno en las botellas de incubación se reducía.
El pH del agua osciló entre los valores de 7.5 y 8.1, se mantuvo con un valor promedio de 7.7. Los valores de la salinidad oscilaron entre los 32 y 35 ppt, manteniéndose en los 33.3 ppt en promedio (ver anexo I).
5.2. PORCENTAJE DE ECLOSIÓN
El porcentaje de eclosión, según el promedio global para n=40, fue de 61.74%
para la Clase C y 86.47% para la Premium. Según datos proporcionados por la casa comercial que procesa y distribuye este tipo de Artemia enlatada, el porcentaje de eclosión mínimo es de 90% para la Premium y 50% para la clase C.
Figura 4. Porcentajes de Eclosión de Cistos de Artemia Bio Marine: Premium y Clase C. Promedios por réplicas.
En la figura 4 se observa que en las cuatro réplicas la artemia Premium presenta un mayor porcentaje de eclosión respecto a la Clase C, y dicha diferencia es bastante homogénea.
Figura 5. Porcentaje de Eclosión de Cistos de Artemia, Bio Marine (Premium y Clase C). Datos de cada submuestra.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Porcentaje de Eclosión (%)
1 2 3 4
Réplicas Clase C Premium
40 50 60 70 80 90 100
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 Submuestras
Porcentaje de Eclosión (%)
CLASE C PREMIUM
Como se puede apreciar en la figura 5, el rango del porcentaje de eclosión obtenido para las dos clases de artemia fue el siguiente: 50-75% para la Clase C y 72-96% para la Premium. El margen de diferencia en promedio entre las dos clases de cistos es de un 25%.
Es importante destacar que para la artemia Clase C la mayor cantidad de observaciones del porcentaje de eclosión se encontraron entre el 55 y el 65%
como se presenta en la figura 6.
Figura 6. Distribución de Frecuencia del Porcentaje de Eclosión de Cistos de artemia Bio Marine clase C.
La distribución de frecuencia para el porcentaje de eclosión de la artemia Premium muestra que la mayor cantidad de observaciones se encuentra entre el 82 y el 92% con una mayor frecuencia entre el 87-92% como se muestra en la figura 7.
0 2 4 6 8 10 12
Frecuencia
50-55 55.1-60 60.1-65 65.1-70 70.1-75 Porcentaje de Eclosión (%)
Figura 7. Distribución de Frecuencia del Porcentaje de Eclosión de Cistos de artemia Bio Marine Premium.
5.3. EFICIENCIA DE ECLOSIÓN
La Eficiencia de eclosión resultante para ambas clases de artemia fue: 135,840 nauplios/g en promedio para la Clase C, con un rango de 86,400-198,400 nauplios/g. Para la Premium el promedio fue de 218,940 nauplios/g, con un rango de 90,400-332,800 nauplios/g (figura 8).
0 50,000 100,000 150,000 200,000 250,000
Eficiencia de Eclosión HE (Nauplios/g)
1 2 3 4
Réplicas Clase C Premium
0 2 4 6 8 10 12 14 16
Frecuencia
72-77 77.1-82 82.1-87 87.1-92 92.1-97 Porcentaje de Eclosión (%)
Figura 8. Eficiencia de Eclosión de Cistos de Artemia Bio Marine (Premium y Clase C). Datos promedios por réplica.
Figura 9. Eficiencia de Eclosión de Cistos de Artemia Bio Marine (Premium y Clase C). Datos de todas las submuestras.
Figura 10. Distribución de Frecuencia de la Eficiencia de Eclosión de Cistos de Artemia Bio Marine Clase C.
La mayor cantidad de frecuencias en la eficiencia de eclosión de la clase C se encuentra en el rango 120,000- 160,000 nauplios/g (figura 10). En cambio, en la clase Premium la máxima eficiencia de eclosión se encuentra en el rango
0 50,000 100,000 150,000 200,000 250,000 300,000 350,000
1 4 7 10 13 16 19 22 25 28 31 34 37 40
Submuestras Eficiencia de Eclosión HE (Nauplios/g)
Clase C Premium
3
8
12 12 2
3
0 3 6 9 12
80-100 100-120 120-140 140-160 160-180 180-200
HE (miles n/g)
Frecuencia
170,000-250,000 nauplios/g, el comportamiento en la distribución de frecuencia se presenta más homogéneo en la clase Premium que en la clase C.
Figura 11. Distribución de Frecuencia de la Eficiencia de Eclosión de Cistos de Artemia Bio Marine Premium.
5.4. TASA DE ECLOSIÓN
La tasa de eclosión está expresada de dos formas: Porcentaje de eclosión vs.
horas de incubación y eficiencia de eclosión vs. horas de incubación. En la Figura 12 se observa que en la artemia Bio Marine Clase C, la eclosión inicia a las 12 horas de incubación con 1.8% de los nauplios eclosionados y se alcanza 63.40%
de eclosión a las 24 horas de incubación. Al analizar la gráfica y aplicarle la ecuación de regresión lineal se determina que para alcanzar el 90% de eclosión se debería dejar incubando por 5 horas luego de transcurridas las 24 horas requeridas para la eclosión, lo que incrementa el tiempo de cosecha de los nauplios e incrementa la cantidad de bacterias presentes en estos al momento de ser cosechados. Esto último es la causa de enfermedades que se presentan en las crías de camarón.
1
6
11 11 6
4 1
0 3 6 9 12
90-130 130-170 170-210 210-250 250-290 290-330 330-370
HE (en miles n/g)
Frecuencia
Tabla 5. Intervalos de tiempo de eclosión de cistos de artemia Premium y Clase C.
Figura 12. Tasa de Eclosión de Artemia Bio Marine, Clase C (Porcentaje de Eclosión vs Horas de Incubación).
Figura 13. Tasa de Eclosión de Artemia Bio Marine Clase C (Eficiencia de Eclosión vs Horas de Incubación).
20,000 40,000 60,000 80,000 100,000 120,000 140,000
10 12 14 16 18 20 22 24 26
Tiempo de Incubación (Hrs)
Eficiencia de Incubación (N/g)
y = 5.6x - 73.1 R2 = 0.9582
-5 2 9 16 23 30 37 44 51 58 65
10 12 14 16 18 20 22 24 26
Tiempo de Incubación (Hrs)
Porcentaje de Eclosión (%)
T10 T50 T90 TS
Clase C 14.84 21.98 29.13 14.29
Premuim 1.65 12.35 23.05 21.39
Tasa de eclosión (Horas) Cistos de
Artemia
La Figura 14 muestra que la Artemia Bio Marine Premium a las 12 horas de incubación presenta 43% de los nauplios eclosionados, por lo que la eclosión de los nauplios inicia antes de este tiempo. Según la ecuación lineal, el 90% de la eclosión de los nauplios se alcanzaría a las 23 horas de incubación.
Figura 14. Tasa de Eclosión de Artemia Bio Marine Premium (Porcentaje de Eclosión vs. Horas de Incubación)
Figura 15. Tasa de Eclosión de Artemia Bio Marine Premium (Eficiencia de Eclosión vs Horas de Incubación)
y = 3.7397x + 3.8115 R2 = 0.9541
40 50 60 70 80 90 100
10 12 14 16 18 20 22 24 26
Tiempo de Incubación (Hrs)
Porcentaje de Eclosión
20,000 40,000 60,000 80,000 100,000 120,000 140,000 160,000 180,000 200,000
10 12 14 16 18 20 22 24 26
Tiempo de Incubación (Hrs)
Eficiencia de Eclosión (N/g)
VI. DISCUSIÓN
6.1. PARAMETROS DE CALIDAD DE AGUA
Los parámetros de calidad de agua que se registraron durante la incubación de los cistos de artemia de las dos clases se encuentran en el rango óptimo de incubación sugeridos por la mayoría de las fuentes consultadas. Existieron variaciones en los valores de los parámetros registrados a lo largo del día, especialmente de la temperatura, la cual excedió los 30ºC durante gran parte del día.
Al comparar las condiciones de incubación sugeridas por la casa comercial Bio Marine que distribuye y comercializa los cistos de artemia utilizados en el presente estudio, se deduce que los parámetros de calidad de agua que se registran en el Laboratorio DELIMAR S.A., son similares, por lo tanto existen las condiciones óptimas para el cultivo de cualquier tipo de artemia a gran escala.
6.2. PORCENTAJE DE ECLOSIÓN
Contraponiendo el porcentaje de eclosión que se debe alcanzar según la casa comercial con el obtenido durante la investigación, el obtenido es más alto en el caso de los cistos de artemia Clase C, esto se debe a que la descapsulación de los cistos incrementa el porcentaje de eclosión por lo que se alcanza en promedio un 15% más de lo esperado de nauplios en Estadío I.
Este incremento se le puede atribuir a demás a los parámetros de calidad de agua con que se incubaron los cistos, principalmente a la temperatura. Por el contrario, en los cistos de artemia Premium se obtiene un poco menos de lo que según la casa comercial se debería alcanzar. El déficit se encuentra en un rango de 10% lo que se significa pérdidas para el productor al no obtenerse lo estimado.
En el caso de la Premium, el porcentaje de eclosión mínimo obtenido se encuentra en un 18% por debajo de lo que señala la casa comercial (ver tabla 3), sin embargo, la distribución de frecuencia señala que los valores comprendidos entre 87-92% son los más frecuentes y se encuentran cerca del porcentaje de eclosión mínimo que presenta la casa comercial. Solamente un 17.5% del total de la muestra se encuentra por encima del 92% de eclosión.
6.3. EFICIENCIA DE ECLOSIÓN
El comportamiento de la eficiencia de eclosión es similar a lo que se presenta con el Porcentaje de eclosión, debido a que dichas variables se encuentran estrechamente relacionadas. El número de nauplios que se obtiene a partir de un gramo de cistos depende del porcentaje de eclosión presentado para cada clase de artemia
6.4. TASA DE ECLOSIÓN
La artemia clase Premium es la que presenta una mejor tasa de eclosión de nauplios, ya que el inicio de la eclosión se dio en menor tiempo que en la Clase C.
Incluso se presenta una mejor sincronía de eclosión.
Durante el transcurso de la incubación en algunas de las botellas se observó una eclosión más rápida que otras, esto podría deberse a las condiciones individuales de cada recipiente de incubación. Existe una alta relación entre el tiempo transcurrido y el porcentaje de nauplios en cada conteo, lo que indica que una vez iniciada la eclosión esta sucede en forma casi exponencial hasta que eclosionan todos los cistos viables en incubación.
Dentro de cada clase de artemia, las diferencias entre las muestras para el porcentaje, eficiencia y tasa de eclosión se puede atribuir a las variaciones diarias de los parámetros de calidad de agua.
VII. CONCLUSIONES
v Los parámetros de calidad de agua (temperatura, oxígeno, pH y salinidad) registrados en el laboratorio DELIMAR S.A. necesarios para la incubación de cistos de artemia de la marca Bio Marine se mantuvieron en los rangos óptimos.
v El porcentaje de eclosión promedio de cistos de artemia de la marca Bio Marine fue mayor en la clase Premium (86.47%), que en la clase C (61.74%).
v La eficiencia de eclosión promedio de cistos de artemia de la marca Bio Marine fue mayor en la clase Premium (218,940 nauplios por gramo), que en la clase C (135,840 nauplios por gramo)
v La clase Premium presentó una mejor tasa de eclosión de cistos de artemia, ya que se alcanzó mayor porcentaje de eclosión (43%) en un menor tiempo de incubación (12 horas), respecto de la clase C, que alcanzó 1.8% de los nauplios eclosionados a las 12 horas de incubación.
VIII. RECOMENDACIONES
v Cosechar los nauplios a las 24 horas de incubación y separar los cistos no eclosionados e incubarlos por un periodo de 6-12 horas, con el fin de alcanzar un 90% de eclosión, en el caso de usar cistos de artemia de la clase C.
v Usar cistos de artemia Bio Marine Premium para obtener una mayor y mejor producción de nauplios de artemia.
v Aplicar correctamente las dosis de Cloro e Hidróxido de sodio utilizados para la descapsulación de los cistos de artemia.
v Mantener un control de los parámetros de la calidad del agua utilizada para la incubación de los cistos de artemia.
v Mantener una iluminación adecuada durante la noche para asegurar el máximo porcentaje de eclosión.
v Iniciar el proceso de cultivo de los cistos de artemia en las primeras horas de la mañana para aprovechar al máximo la luz solar.
IX. BIBLIOGRAFÍA
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Año 6, julio de 1997. Talleres Litográficos.
X. ANEXOS
ANEXO I. Valores registrados de salinidad y pH durante la investigación.
Oscilaciones de la Salinidad durante la investigación
31.0 31.5 32.0 32.5 33.0 33.5 34.0 34.5 35.0 35.5
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35
Cantidad de mediciones
Salinidad (ppt)
Clase C Premium
Oscilaciones del pH durante la investigación
7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 8.1 8.2
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35
Cantidad de mediciones
pH
Clase C Premium
ANEXO II. Metodología analítica para la caracterización de la calidad de eclosión de cistos de artemia, según Sorgeloos et al. (1986)
Porcentaje de Eclosión
1. Incubar en un tubo cilindrocónico (preferentemente) o en una probeta, 250 mg de cistos en 100 ml de agua de mar de 35 ppt con iluminación permanente (1,000 lux) y a una temperatura de 25ºC; instalar aireación suave desde el fondo para mantener los cistos en suspensión.
2. Al cabo de una hora se tomarán, por medio de una micropipeta automática (preferentemente) o de una pipeta de vidrio de 0.5 ml, 10 submuestras de unos 100 cistos cada una.
3. Depositar los cistos de cada submuestra sobre papel filtro, contarlos (ci) con una lupa de disección y se determina el valor medio (c).
4. Lavar con agua de mar de 35 ppt los cistos del papel filtro sobre cápsulas petri de vidrio (5 ml) e incubarlos a 25ºC bajo iluminación continua (>1,000 lux).
5. Al cabo de 48 horas, fijar los nauplios añadiendo unas gotas de una solución de lugol o formalina.
6. Contar los nauplios (ni) y calcular el valor medio (ñ).
Porcentaje de eclosión en cada submuestra:
H% = ni/ci * 100
Porcentaje de eclosión de los valores medios:
H% = ñ/C * 100
Donde:
H% = Porcentaje de eclosión
ni = Número de nauplios ci = Número de cistos
Eficiencia de eclosión
1. Incubar en un tubo cilindrocónico (preferentemente) o en una probeta, 250 mg de cistos en 80 ml de agua de mar de 35 ppt con iluminación permanente (1,000 lux) y a una temperatura de 25ºC; instalar aireación suave desde el fondo para mantener los cistos en suspensión.
2. Tras una hora de incubación ajustar el volumen a 100 ml, añadiendo exactamente 20 ml de agua de mar de 35 ppt y tomar por medio de una micropipeta automática, 10 submuestras (i= 10) de 250 ul exactos, cada una.
Comprobar que no se ha pipeteado ninguna burbuja de aire.
3. Depositar las submuestras en agua de mar de 35 ppt previamente aireadas en placas petri rotuladas.
4. Cubrir las placas petri; cerrar los tubos con sus tapones (asegurándose de dejar algo de aire bajo el tapón) y fijarlos en el equipo rotatorio de eclosión (5 rpm).
5. Incubar bajo condiciones de iluminación continua (1,000 lux) a 25ºC.
6. Al cabo de 48 horas, fijar los nauplios con algunas gotas de una solución de lugol
7. Contar los nauplios de cada submuestra (ni). Calcular el valor medio (ñ) de cada submuestra.
i = Submuestra
ni = Número de nauplios por submuestra ñ = Valor medio de nauplios por submuestra N = Valor medio de la tres submuestras.
4 = Constante 100 = Constante.
(HE) = N * 4 *100 * 4 (Número de nauplios por gramo de cistos)
Tasa de eclosión
1. Incubar en un tubo cilindrocónico (preferentemente) o en una probeta, 250 mg de cistos en 80 ml de agua de mar de 35 ppt con iluminación permanente (1,000 lux) y a una temperatura de 25ºC; instalar aireación suave desde el fondo para mantener los cistos en suspensión.
2. Tras una hora de incubación ajustar el volumen a 100 ml, añadiendo exactamente 20 ml de agua de mar de 35 ppt.
3. A las doce horas, añadir agua de mar para ajustar el volumen, compensando las pérdidas por evaporación. Tomar por medio de una micropipeta automática a intervalos de una hora, una submuestra de 250 ul exactos cada una.
4. Depositar las submuestras en placas patri, fijar los nauplios con unas gotas de solución de lugol y contar los nauplios.
5. Ajustar el nivel de agua en los tubos de eclosión cada tres horas. Suspender el recuento hasta que el valor de los nauplios permanezca constante, durante tres horas consecutivas.
6. Los valores medios totales de las muestras tomadas cada hora, se expresan como porcentaje de eficiencia de eclosión máxima. Se representan en una curva de tasa de eclosión.
