Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

(1)

OFICINA DE CENTROS DE DIAGNÓSTICO Y PRODUCCIÓN

Unidad del Centro de Control de Insumos y Residuos Tóxicos MET-UCCIRT/Res-91 MÉTODO DE ENSAYO: Determinación de multiresiduos

de plaguicidas en frutos y vegetales por cromatografía de gas acoplada a espectrometría de masa en tandem

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

1 de 30

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Cristina Toro Vilchez Especialista UCCIRT

Orlando Lucas Aguirre Director UCCIRT

Cesar Augusto de la Cruz Lezcano Director OCDP Firma

Fecha 09-09-2021 09-09-2021 29-10-2021

TABLA DE CONTENIDO:

1. Objetivo

2. Campo de Aplicación 3. Referencias

4. Definiciones 5. Metodología 6. Antecedentes 7. Anexos

(2)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

2 de 30

INTRODUCCIÓN

Es un método de ensayo que describe los pasos para la determinación de multiresiduos de plaguicidas en frutos y vegetales teniendo como referencia: Rugged Gc-Ms-Ms Pesticides Residues Analysis fulfilling the USDA pesticides Data Program Requirements K. Mastovska.

Application note food Safety. Agilent Tecnologies 2012 y Journal of Chromatography A: Fast, low-pressure gas chromatography triple quadrupole tandem mass spectrometry for analysis of 150 pesticide residues in fruits and vegetables; cuyo procedimiento consiste en la extracción de los plaguicidas con acetonitrilo en medio tamponado con ácido acético-acetato de sodio seguido de una etapa de limpieza o clean-up combinada con amina primaria secundaria y sulfato de magnesio. Para el caso de matrices con alto contenido de pigmento o grasa se adiciona C18 o carbón grafitizado para finalmente ser analizados por cromatografía de gases con detector de masa en tándem (GC-MS-MS).

El método se desarrolla a partir de las referencias mencionadas, utilizando método de estándar interno y estándares surrogados como control de calidad. Método validado ver informes de validación correspondiente.

1. OBJETIVO

El objetivo de este método es identificar y cuantificar multiresiduos de plagucidas por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masa en tandem (GC-MS-MS) presentes como residuos en muestras de frutos, vegetales y cereales.

2. CAMPO DE APLICACIÓN

El método se aplica sobre matrices frutos, vegetales y cereales para la determinación de multiresiduos de plaguicidas (diferentes tipos de familias como: clorados, fosforados piretroides, triazinas entre otros), ver listados en el Anexo 1.

Este método es aplicado por las personas autorizadas según registro REG-UCCIRT/Cal-11.

(3)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

3 de 30

3. REFERENCIAS

Referencia de los documentos relacionados al procedimiento:

 PRO-UCCIRT/Lab-16 Procedimiento preparación y procesamiento de muestras agropecuarias.

 ITR-UCCIRT/Lab-07 Lavado de material de vidrio UCCIRT.

 ITR-UCCIRT/Lab-06 Manejo del sistema de gases y de la unidad de vacío de la UCCIRT.

 ITR-UCCIRT/Res-22 Instructivo manejo del procesador de muestras robot coupe.

 REG-UCCIRT/Lab-30 Registro de verificación de la balanza.

 REG-UCCIRT/Lab-61 Hoja de trabajo.

 REG-UCCIRT/Res-10 Registro de toma de muestra.

 REG-UCCIRT/Lab-29 Registro de materiales de referencia.

 REG-UCCIRT/Lab-28 Registro listado de estándares de laboratorio de la UCCIRT

 REG-UCCIRT/Lab-46 Registro de preparación de estándares

 REG-UCCIRT/Cal-11 Registro Listado de Personal Autorizado para Realizar Ensayos

 Codex “CAC/GL 41-1993 PARTE DEL PRODUCTO A LA QUE SE APLICAN LOS LIMITES MAXIMOS DEL CODEX PARA RESIDUOS Y QUE SE ANALIZA”.

4. DEFINICIONES / ABREVIATURAS.

 Plaguicidas: También llamados agroquímicos, son sustancias químicas destinadas a matar, repeler, atraer, regular o interrumpir el crecimiento de seres vivos considerados plagas.

 Quechers: Terminología en inglés (quick, easy, cheap, effective, rugged and safe) que significa rápido, fácil, económico, efectivo, robusto y seguro.

 GC- MS-MS: Cromatógrafo de gases acoplada a espectrometría de masas en tandem.

 MeCN: Acetonitrilo.

 MgSO4: Sulfato de magnésio anhidro.

 NaAc : Acetato de sodio.

 HOAc : Ácido acético glacial

 GCB: Carbón grafitizado.

(4)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

4 de 30

 Fortificado; Matriz blanco previamente caracterizada a la que se le ha contaminado intencionalmente con una concentración conocida de plaguicida.

 Matriz representativa, Cuando se elige de un grupo de frutos y vegetales (frutos con alto contenido de agua, frutos cítricos, frutos de pepita, y otros) uno de ellos, cuya matriz ha sido previamente caracterizada.

5. METODOLOGÍA.

5.1 Principio del método

El método consiste en 4 procesos principales: proceso de preparación de la muestra, proceso de extracción que es realizada por partición líquido-liquido, proceso de limpieza realizado por extracción en fase dispersiva (Dispersive-SPE) y proceso de medición en equipos cromatógrafos acondicionados y calibrados.

El procedimiento consiste en tomar una porción de la muestra vegetal (frutos o verduras o cereal) molida y homogenizada, al cual se le adiciona acetonitrilo con ácido acético al 1% y una mezcla de sulfato de magnesio y acetato de sodio; el extracto obtenido es sometido a una limpieza o clean up en fase dispersiva (Dispersive-SPE) con sulfato de magnesio, amina primaria secundaria (PSA) y carbón grafitizado (CGB). Los residuos extraídos de plaguicidas (Compuestos organoclorados, organofosforados, piretroides, triazinas y otors) son determinados por cromatografía Gaseosa acoplada a espectrómetro de masas en tandem (GC-MS-MS).

5.2 Precauciones de seguridad en el laboratorio

Para la ejecución de este método de ensayo se deben usar los siguientes equipos de protección: guantes de nitrilo, mandil, lentes de protección y mascarillas respiradoras para la manipulación de solventes y reactivos evitando así posibles accidentes.

5.3 Precauciones analíticas

Los materiales lavados de acuerdo al instructivo ITR-UCCIRT/Lab-07 deben estar acordes para la realización del análisis.

(5)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

5 de 30

Reactivos (ACS, ISO) y estándares de referencia de pesticidas, típicamente por encima del 99% de pureza (por ejemplo, Chemservice, Accustandard, Dr. Ehrenstorfer), con certificado de análisis que incluya la estimación de incertidumbre.

Debe considerarse para todo el análisis las buenas prácticas de Laboratorio.

5.4 Materiales y equipos.

5.4.1 Materiales:

 Tubos de polipropileno descartables de 15 y 50 ml con tapa rosca.

 Tabla de picar y tazones de acero inoxidable

 Envases de vidrio para la conservación de la muestra o bolsas de polipropileno con cierre hermético.

 Cuchillos de acero inoxidables, espátulas.

 Micropipeta con volumen variable de 10-100 L

 Puntas para micropipetas de 1000-5000 l, de 10-100 L y de 100-1000 L

 Pipetas Pasteur.

 Gradillas para tubos.

 Viales de 2,0 ml para autosampler GC

 Frascos de vidrio ó Viales con tapa rosca de 10 y 20 mL.

 Jeringas descartables de 1 y 5 ml.

 Espátulas de acero inoxidable para el pesado de estándares de referencia.

 Fiolas o matraces volumétricos de 5 o 10 ml clase A.

 Frasco de vidrio de 1 Litro con tapa, para guardar soluciones de extracción.

 Columna capilar para GC: Rxt-5Ms 15.0m x 0,25um x 0,25 mm o equivalente.

 Kit de insumos para mantenimiento preventivo del GC-MS-MS (septas, o-ring, ferrules, insertos, microjeringas del muestreador, filamentos, entre otros).

5.4.2 Equipos:

(6)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

6 de 30

 Moledor de carne o Robot Coupe Blixer 3 u otra equivalente disponible

 Balanza analítica Digital (marca A & D, modelo GR 200) u otra equivalente disponible

 Vortex Mixer (Marca : Barnstead Thermolyn , modelo: Maxi Mix II 8294c50 ). u otra equivalente disponible

 Centrífuga (puede ser Marca : Thermoelectron, modelo : Multi RF u otra similar disponible)

 Software MassHunter para GC-Ms-MS.

 Cromatógrafo de gases acoplada a espectrómetro de masas Marca Agilent. Modelo GC 8890 MS-MS 7010B

 Dispensadores volumétricos digitales de 2.5ml a 25 ml.

5.5 Reactivos :

5.5.1 Sustancias químicas

 Acetonitrilo - grado LC-MS o GC

 Acetona grado GC.

 Metanol grado GC.

 Ácido acético (HOAC) - Glacial

 1% HOAc en MeCN – preparar la solución con 10 ml glacial HOAC en 1 L MeCN.

 Cloruro de sodio grado reactivo.

 Sulfato de magnesio anhidro – pureza >98%: previo secado a 500º C mínimo por 5 horas para remover los ftalatos y agua residual.

 Amina primaria-secundaria (PSA)

 Carbón negro grafitizado (GCB)- para muestras con carotenoides y pigmentos.

 Acetato de sodio anhidro.P.A.

 Adsorbente C18 para muestras con contenido de grasas mayor al 1%

 Gas Helio UHP 5.0.

 Gas Nitrógeno UHP

 Adsorbente Z-sep, para matrices con contenido de grasas.

(7)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

7 de 30

5.5.2 Estándares de referencia de pesticidas:



Estándares químicos de plaguicidas de alta pureza, de preferencia mayor a 90.0% de pureza

.(verificar en el registro listado de estándares de laboratorio de la UCCIRT, código REG-UCCIRT/Lab-28)



Mezclas de estándares en solución de concentraciones entre 100 a 2000 mg/L (verificar en el registro de preparación de estándares código REG-UCCIRT/Lab-46 )

 Estándar surrogado bromofos metilo a 2000 mg/L y prometrina 2000 mg/L.

 Estándar interno trifenilfosfato 200 mg/L

5.5.3 Preparación de los estándares de la curva matriz de los plaguicidas analizados por GC-MS

a) Solución stock primaria, aprox. 2000 ng/uL.

Pesar 20 mg de los estándar químico de plaguicidas en una fiola de 10 mL (balón aforado), disolver en acetonitrilo con 0.1% de ácido acético. Disolver con ayuda del baño ultrasónico si es necesario y enrasar. Almacenar en frascos ámbar con tapa y superficie interna de teflón, a temperatura -20°C o menor y en lugar oscuro, estable un año u dos de acuerdo al pesticida.

b) Soluciones mezcla intermedia

,

aprox. 40 ng/ul, 80 ng/ul, y 160 ng/ul.

Transferir una alícuota de 500 µL para 40 ng/ul; 1000 µL para 80 ng/ul ó 2000 µL para 160 ng/ul de las soluciones stock primario de plaguicidas a una fiola de 25 mL, diluir y enrasar con acetonitrilo en ácido acético 0,1%.

Para el análisis por GC-MS se han considerado 11 grupos de mezclas. Verificar el registro de preparación de estándares código REG-UCCIRT/Lab 46.

Mezcla 1 plaguicidas clorados, mezcla 2 plaguicidas fosforados, mezcla 3,4 herbicidas, mezcla 5 fosforados, mezcla 6 varios plaguicidas, mezcla 7 piretroides, mezcla 8, 9, 10 y 11 otros plaguicidas.

c) Solución de fortificación (QC Spike 1), 40 ng/ul, 80 ng/ul, 160 ng/ul.

(8)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

8 de 30

Transferir una alícuota de 500 µL para 40 ng/ul, 1000 µL para 80 ng/ul ó 2000 µL para 160 ng/ul de las Soluciones stock primario de plaguicidas a una fiola de 25 mL, diluir y enrasar con acetonitrilo grado GC. Almacenar a temperatura (-10° a -25°C) y en lugar oscuro, estable un año ver concentración final de cada estándar anexo 2.

Nota 1: para fiolas preparadas de menor volumen calcular el volumen adecuado.

5.5.4 Preparación del estándar interno

a) Solución stock de trifenilfosfato, 200 ng/uL.

Pesar 20 mg de los estándar químicos de plaguicidas en una fiola de 100 mL (balón aforado), disolver en acetonitrilo con 1% HOAC. Disolver con ayuda del baño ultrasónico si es necesario y enrasar con acetonitrilo en ácido acético 1%. Almacenar en frasco vial ámbar con tapa y superficie interna de teflón a temperatura (-10° a - 25°C) y en lugar oscuro, estable 12 meses

b) Solución de trabajo de trifenilfosfato, 2 ng/ul.

Transferir una alícuota de 1000 µL de la solución stock 200 ng/ul a una fiola de 100ml, diluir y enrasar con ácido acético al 1 % en acetonitrilo. Almacenar en frasco vial ámbar con tapa y superficie interna de teflón a temperatura (-10° a -25°C) y en lugar oscuro, estable 6 meses.

5.5.5 Preparación de estándar surrogado.

a) Solución stock de bromofos metilo 2000 ng/uL.

Pesar 20 mg de los estándar bromofos metilo en una fiola de 10 mL (balón aforado), disolver en acetonitrilo con 0.1% HOAC. Disolver con ayuda del baño ultrasónico si es necesario y enrasar con acetonitrilo en ácido acético 0.1%. Almacenar en frasco vial ámbar con tapa y superficie interna de teflón a temperatura (-10° a -25°C) y en lugar oscuro, estable 12 meses.

b) Solución stock de prometrina 2000 ng/uL.

(9)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

9 de 30

Pesar 20 mg de los estándar prometrina en una fiola de 10 mL (balón aforado), disolver en acetonitrilo con 0.1% HOAC. Disolver con ayuda del baño ultrasónico si es necesario y enrasar con acetonitrilo en ácido acético 0.1%. Almacenar en frasco vial ámbar con tapa y superficie interna de teflón a temperatura (-10° a -25°C) y en lugar oscuro, estable 12 meses.

c) Solución de trabajo de prometrina y bromofos metilo 20 ng/ul.

Transferir una alícuota de 250 µL de la solución stock 2000 ng/ul de bromofos metilo y 250 µL de la solución stock 2000 ng/ul de prometrina a una fiola de 25ml, diluir y enrasar con acetonitrilo. Almacenar en frasco vial ámbar con tapa y superficie interna de teflón a temperatura (-10° a -25°C) y en lugar oscuro, estable 3 meses.

5.5.6 Preparación de los estándares para la curva de calibración por GC-MS-MS.

Se preparan de acuerdo a la siguiente tabla:

Tabla 1: Curva de calibración de plaguicidas

Nivel

Solución QC spike 40, 80 y 160 ng/uL.

Volumen en (µL)

Solución AcN en 0,1%

ácido,ml

Volumen final, ml

Concentración ng/ µL

1 25 1 10

0.100

2 50 1 10

0.200

3 100 1 10

0.400

4 250 1 10

1.000

5 500 1 10

2.000

6 1000 1 10

4.000

(10)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

10 de 30

5.6 Procedimiento

5.6.1 Preparación de la muestra previa al análisis

Las muestras que ingresan con su respectiva hoja de distribución son verificadas, Todas las muestras deben estar previamente molidas y homogenizadas.

El proceso de molienda de la muestra es de acuerdo al procedimiento preparación y procesamiento de muestras agropecuarias código PRO-UCCIRT/Lab-16 y de acuerdo con el manual del procesador de alimentos.

5.6.2 Procedimiento de extracción de residuos de plaguicidas en la muestra

Para un análisis de rutina se elegirá mínimo una matriz blanco caracterizada como tal para la preparación de la curva matriz, controles de calidad blanco matriz y el fortificado al nivel del LMR. Y duplicados cada 20 muestras.

a) Se pesa 15 g ± 0,1 g de muestra en tubos de centrifuga de polipropileno de 50 mL.

(muestras secas pesar 2 a 5 gramos), una muestra control negativo o blanco de matriz, 01 o 02 blancos fortificados y un fortificado por lo menos al nivel más bajo de calibración o correspondiente al límite de cuantificación LOQ del plaguicida. Ver anexo 2 niveles de fortificaciones de cada plaguicida.

b) Para muestras secas a todos los tubos adicionar 10 ml de agua ultrapura.

c) En las muestras fortificadas, la concentración de fortificación en lo posible debe ser menor o igual al LMR, usar una alícuota de la mezcla de estándares del nivel 4 o 5 de la tabla 1 de la curva de calibración, si se utiliza el nivel 5 usar una alícuota de 75 uL y si se usa el nivel 4 una alícuota de 150 uL, se homogeniza usando vortex y dejar en reposo por 15 minutos.

Nota 2: Normalmente se preparan fortificaciones en muestras blancos entre 5 a 200 ug/Kg de cada plaguicida.

d) A todas las muestras se adiciona el mix de estándares surrogado de bromofos metilo y prometrina a una concentración de 100 ug/Kg, tomando 75 uL de la solución de trabajo sec. 5.6.5 c).

(11)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

11 de 30

e) A todos los tubos adicionar 15 ml de solución de acetonitrilo con 1% de ácido acético, homogenizar con ayuda de vortex por 1 minuto y luego adicionar la mezcla de sales (1,0 g acetato de sodio anhidro + 4 g sulfato de magnesio anhidro). Agitar con ayuda de vortex por 5 minutos para romper los grumos asegurando que se vuelva una mezcla homogénea, ocurre una reacción exotérmica por lo que se recomienda refrigerar por espacio de 15 minutos. (para muestras de cereales refrigerar a -18 C por una hora)

f) Se agita vigorosamente por 1 minuto adicional y luego se centrifuga mínimo 4000 rpm por 3 minutos.

5.6.3 Limpieza o Clean up de los extractos

a) Para la curva de estándar: Se transfiere 10 mL de extracto, Para las muestras en investigación, muestras blanco, blanco de reactivos: Se transfiere 2 o 1 mL para el análisis GC-MS a un vial conteniendo 150 mg de MgSO4 y 50 mg de PSA por cada mL de extracto.

b) Adicionar 15 mg de GCB por mL de extracto para muestras que contengan carotenoides y clorofila.

c) Adicionar 50 mg de sorbente C18 por mL de extracto para muestras que contienen

> de 1% de grasa.

d) O adicionar ambos para aquellos que tengan alto contenido de pigmentos y grasas.

Ver anexo 3 matrices ya implementadas.

e) Se mezcla vigorosamente con ayuda de vortex o manualmente por espacio de 30 a 60 segundos, luego se centrifuga a 3000 rpm por 3 minutos.

5.6.4

Preparación de los extractos para análisis por

GC-MS-MS

a) Se transfiere 500 uL del extracto limpio a un vial ámbar de 2ml del autosampler . b) A todos los viales se adiciona

50uL (o

100 uL si se usó 1000 uL de extracto limpio)

de Solución de trabajo de estándar interno de trifenilfosfato (2 ng/uL) y

25 ul (o

50

(12)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

12 de 30

ul

si se usó 1000 uL de extracto limpio

)

de acetonitrilo para los blancos y muestras y mezclar.

c) Para los viales que servirán para la curva de calibración adicionar 25 (o 50 uL si se usó 1000 uL de extracto limpio) de cada uno de los 6 niveles de estándares preparados en el punto 5.6.6, para obtener concentraciones en el rango de 5 a

40

ng/g hasta 200 a 800 ng/g. de cada plaguicida en la matriz.

d) Las concentraciones de los niveles cada estándar de calibración figuran en el anexo 2

Curva de calibración de plaguicidas

Nivel Concentración (ug/L o ng/g equivalente)

5 100 / 200 / 400

4 50 / 100 / 200

3 25 / 50 / 100

2 10 / 20 / 40

1 5 /10 /20

Finalmente transferir mínimo 500 uL de solución a viales para su lectura por el equipo cromatógrafo de gases con espectrómetro de masas GC-MS-MS.

5.7 Optimización del método 5.7.1 Aptitud del sistema

Verificar la aptitud del sistema al inicio de la secuencia de corridas, después de un cambio considerable (cambio de columna o una reparación) empleando un estándar de concentración intermedia de la curva de calibración en solvente inyectado por triplicado.

Evaluar el %RSD de las respuestas de un analito (como mínimo) correspondientes a un mismo vial, el cual no debe ser mayor del 20% respecto al área o concentración y el %RSD de los tiempos de retención no exceda de 2.5%.

5.7.2 Condiciones Instrumentales:

Sistema Cromatográfico GC-MS:

(13)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

13 de 30

Columna Capilar

Rtx® - 5MS 0,25mm ID x 0,25 um película x 15 m longitud o equivalente

Temperatura del Inyector: Gradiente desde 70 a 325 °C

volumen de inyección 1 µL

Detector: Espectrómetro de masas en tándem Ms-MS

Temperatura del Horno: Gradiente desde 60 a 310 °C *

Gas carrier: Helio UHP 5.0

Modo de inyección: Split-VEnt Multimode

Modelo del instrumento GC-MS-MS

Gradiente de Temperatura*

Caudal

(mL/min)

Temperatura final (°C)

Tiempo de permanencia a la temperatura final (min)

- 60 0

40 170 3

10 310 3

*condiciones pueden variar de acuerdo a la columna.

5.7.3 Optimización del MS

Plaguicidas analizados por GC-MS-MS, modo de ionización EI (ionización electrónica) y modo de adquisición MRM.

5.7.4 Secuencia de inyección: Se recomienda seguir el siguiente orden el cual puede variar en función a la necesidad del análisis:

Blanco Reactivo.

Blanco de matriz

Estándar de calibración Nivel 1 Estándar de calibración Nivel 2 Estándar de calibración Nivel 3 Estándar de calibración Nivel 4

(14)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

14 de 30

Estándar de calibración Nivel 5 Bk solvente

Blanco de reactivo.

Muestra 1 Muestra 2

Control positivo (a nivel LMR) Blanco de Solvente (Fase móvil).

Se recomienda reinyectar estándares de nivel intermedio o del mayor nivel después de un grupo de 20 muestras, El RSD debe ser menor o igual a 20% para la mayor parte de los plaguicidas. En caso contrario recalibrar nuevamente y solamente cuando se obtenga muestras con concentraciones mayores al límite de cuantificación LoQ.

5.8 Cálculo y expresión de resultados

El procesamiento de datos de las muestras, blancos, y estándares se realiza con el software MassHunter en el cromatógrafo de Gases GCMS-MS, marca Agilent.

Las concentraciones obtenidas de las muestras, fortificados y blancos son resultado del ploteo de los ratios en la curva de regresión.

Las fórmulas para calcular plaguicidas individuales determinados por GC-MS-MS son las siguientes:

Donde:

Cµg/kg CC: concentración de la muestra derivada de la curva de calibración matriz

fd: factor de dilución

fm : concentración final de la muestra, g/ml

fest: concentración final del extracto para la curva matriz, g/ml

Fd = fest(g/ml) / fm(g/ml)

1000 / ) /

(

/ kg = Cug kg CCx fd mg

C

(15)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

15 de 30

5.8.1 Los plaguicidas que son mezclas de isómeros y son determinados por GC-MS-MS se calibra como sumatoria del área de cada isómero.

Cuando exista interferencia de matriz y se decida cuantificar sólo con algunos de los isómeros se podrá reportar el resultado si el especialista lo justifica y coloca las observaciones respectivas en las hojas de trabajo

Para el caso de la Permetrina, cuando en el certificado tenga la información de la concentración de isómero Cis y trans, se calculará como suma de isómeros.

Los pesos de muestras, concentraciones de estándares y resultados se registran en los formatos REG-UCCIRT/Res-10 y REG-UCCIRT/Lab-46 de acuerdo al procedimiento de ensayo PRO-UCCIRT/Lab-02.

5.8.2 Recuperación: En las muestras fortificadas el porcentaje de recuperación se calcula mediante la siguiente fórmula:

% Recuperación = Conc. d x 100 Conc. f

Donde:

Conc. d =Concentración experimental del plaguicida en la muestra fortificada, ng/g Conc. f = Concentración conocida adicionada del plaguicida, ng/g

Se reportara todos los plaguicidas cuya recuperación de muestras fortificadas se encuentren entre 50 a 130 % de recuperación ó según las cartas de control de calidad A criterio del analista se reportara solamente como screening los plaguicidas cuya recuperación se encuentra fuera de los límites aceptables en las recuperaciones (sobre todo cuando se obtiene recuperaciones mayor a 130%) siempre y cuando se evidencie linealidad en la curva matriz, y no se obtenga presencia en la muestra.

No se reportará los plaguicidas que presenten interferencia en la curva matriz y no se evidencie linealidad y además no se obtenga recuperación en la muestra fortificada.

(16)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

16 de 30

5.9 Control de Calidad

Parámetro de calidad

Interno Frecuencia Criterio de

aceptación Acción inmediata Acciones en casos reiterativos * Blanco reactivo En cada lote de

muestras analizadas < LoD

Corroborar la lectura, inyectando

nuevamente, y verificar blanco matriz

Verificar solventes usados.

Repetir lote analizado, tres o más casos consecutivos, generan un SACP.

Blanco matriz En cada lote de

muestras analizadas < LMR

Cuando no se encuentre disponible, utilizar como adición estándar,

No Aplica

Calibración curva matriz mínimo 3 puntos

En cada lote de

muestras analizadas r> 0.95 Calibrar nuevamente

Verificar mantenimiento del equipo. Repetir la curva de calibración y las inyecciones de las muestras

Duplicados

Cada 20 muestras analizadas o en cada lote.

RSD <20% Repetir la muestra analizada

Verificar la homogeneidad de la muestra y repetir el análisis de los duplicados.

Muestra o blancos fortificados

En cada lote de muestras analizadas o después de 50 muestras

Recuperación 50%-130%**

Repetir la muestra analizada

Verificar la homogeneidad de la muestra y repetir análisis de la muestra fortificada.

Estándar de verificación de

calibración Cada 20 muestras

RSD < 20%

respecto a la calibración inicial

Calibrar nuevamente

Verificar estándares y fechas de vencimiento, calibrar nuevamente y repetir las inyecciones del lote analizado

Surrogados*** En todas las

muestras

Recuperación 60-130%

Corroborar

interferencias en la muestras.

Repetir la muestra que se encuentra fuera de especificación

* tres o más casos consecutivos generan una SACP

** Según el plaguicida y de acuerdo a las cartas de control.

*** A excepción de muestras de naranjas y/o mandarina, nueces

donde se registra interferencia de matriz para el plaguicida Prometrina y Bromofos metilo en GC-MS, o en algunas matrices nuevas serán evaluadas

LoD = Límite de detección del método LMR = tolerancias permitid

6. Antecedentes.

N.A.

7. Anexos

 Anexo 1:

Tabla 1 Plaguicidas analizados por GC-MS-MS

Tabla 2 Concentración de estándares y fortificaciones

(17)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

17 de 30

Anexo 1 Tabla 1 Plaguicidas analizados por GC-MS-MS

Nombre Código UCCIRT Proveedor N°

Lote

Acetochlor 586

Dr Ehrenstorfer

GmbH G138069

Aclonifen 587

Dr Ehrenstorfer

GmbH G162974

Acrinathrin 588

Dr Ehrenstorfer

GmbH G154056

Alachlor 485 Restek A0149845

Aldrín

483 Restek A0144808

Ametryn 53 Sigma Aldrich BCBT4165

Aramite 739

Dr Ehrenstorfer

GmbH 1062713

Atrazine 485 Restek A0149845

Azinfos Etil

551

Dr Ehrenstorfer

GmbH G150540

Azoxistrobina 350 Sigma Aldrich BCBT1118V

Benalaxyl 59 Sigma Aldrich BCBW3271

Bendiocarb 757 Dr.Ehrenstorfer G150366

Benfuracarb

60

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1123132

Benoxacor 630

Dr Ehrenstorfer

GmbH G985320

Bifenazate 36 Dr Ehrenstorfer

GmbH G138185

Bifenthrin 456 Dr Ehrenstorfer

GmbH H169376

Binapacryl 655

Dr Ehrenstorfer

GmbH G155527

Bitertanol

409

Dr Ehrenstorfer

GmbH G164669

Boscalid

593

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1040010

Bromacil 279 Sigma Aldrich SZBF139XV

Bromophos Ethyl 775 Dr.Ehrenstorfer G165760

Bromophos methyl 458 Sigma Aldrich BCBZ4013

Bromoproìlate 520 Sigma Aldrich BCBT3300

Bupirimate 68 Dr Ehrenstorfer

GmbH G983983

Buprofezin 69 Sigma Aldrich BCBT5762

Butaclor 23 Dr Ehrenstorfer

GmbH G979971

Cadusafos

506

Dr Ehrenstorfer

GmbH G753045

Carbaryl

71

Dr Ehrenstorfer

GmbH G150815

Carbofuran

73

Dr Ehrenstorfer

GmbH G140184

Carbosulfan

74

Dr Ehrenstorfer

GmbH G161947

Carfentrazone-ethyl 698

Sigma Aldrich G1062857

(18)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

18 de 30

Chlordane, cis 484 Restek A0141177

Chlordane, trans 484 Restek A0141177

Chlordecone 614

Dr Ehrenstorfer

GmbH G140333

chlordimeform free base 686

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1554903

Chlorfenapyr

76

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1075555

Chlorfenvinphos 776 Dr.Ehrenstorfer G999716

Chlorobenzilate 484 Restek A0141177

Chlorothalonil

485 Restek A0149845

Chlorothalonil 78 Sigma Aldrich BCBW6533

chlorpropham 613

Dr Ehrenstorfer

GmbH G167711

Chlorpyrifos

79

Dr Ehrenstorfer

GmbH G130559

Chlorpyrifós-Methyl

385 Sigma Aldrich BCBT9600

Chlortal Dimethyl (DCPA) 484 Restek A0141177

Clomazone (command) 83 Sigma Aldrich BCBV4965

Coumaphos 722 Dr Ehrenstorfer

GmbH G141883

Cyanazine (bladex) 485 Restek A0149845

Cyanophos 773 Dr.Ehrenstorfer G1073656

Cyflufenamid 612

Dr Ehrenstorfer

GmbH G138495

Cyflutrin(sum)

64 Sigma Aldrich BCBV1615 Cyhalotrin, Lambda

479

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1013070

Cypermetrin (sum) 80 Sigma Aldrich BCCB1117

Cyproconazole 87 Sigma Aldrich BCBT9296

Cyprodinil

453

Dr Ehrenstorfer

GmbH G990420

DEET 774 Dr.Ehrenstorfer G1070773

Deltamethrin

89

Dr Ehrenstorfer

GmbH G128139

Demeton-S-methyl 782 Dr.Ehrenstorfer G1077100

Diazinon

90

Dr Ehrenstorfer

GmbH H996521

Dichlobenil 711

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1011950

Dichlofenthion 92 Sigma Aldrich BCBX3929

Dichlofluanid 40 ChemService 3671000

Dichloran 601 Sigma Aldrich BCBS2325V

Dichlormid 663 Sigma Aldrich BCBT3485

Dichlorprop-metyl

Dichlorvos

93

Dr Ehrenstorfer

GmbH 997919

Dicofol 759 Dr.Ehrenstorfer G1081439

(19)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

19 de 30

Dicrotophos 94

Dr Ehrenstorfer

GmbH G163921

Dieldrin 483 Restek A0144808

Difenzoquat-methyl-sulfate) 705

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1050240

Dimethenamid 654

Dr Ehrenstorfer

GmbH G833406

Dimethipin 657

Dr Ehrenstorfer

GmbH G156436

Dimetoato

97

Dr Ehrenstorfer

GmbH G131991

Dioxathion 777 Dr.Ehrenstorfer G992365

Disulfoton (Demeton) 16 Restek A0144011

Ditalimfos 765 Dr.Ehrenstorfer G156288

Endosulfan alpha 483 Restek A0144808

Endosulfan beta

483 Restek A0144808

Endosulfansulfate 483 Restek A0144808

Endrin 483 Restek A0144808

Endrin aldehyde 483 Restek A0144808

Endrin keto

483 Restek A0144808

EPN 760 Dr.Ehrenstorfer G159867

Eptc 314 Sigma Aldrich BCBZ8663

Ethalfluralin 617 Dr.Ehrenstorfer G164061

Ethion 769 Dr.Ehrenstorfer G1037833

Ethofenprox

103

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1128744

ethofumesate 618

Dr Ehrenstorfer

GmbH G145544

Ethoprophos 168 ChemService 5747400

Etoxazole

595

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1063498

Etridiazole 484 Restek A0141177

Etrimfos 768 Dr.Ehrenstorfer 1028498

Famphur 16 Restek A0144011

Fenamidone 636 Sigma Aldrich BCBZ9055

Fenamiphos

346

Dr Ehrenstorfer

GmbH G150169

Fenarimol

105

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1075549

Fenazaquin 106 Sigma Aldrich BCBV6671

Fenchlorphos 767 Dr.Ehrenstorfer G1027875

Fenitrothión 109 Sigma Aldrich BCBW2030

Fenobucarb 772 Dr.Ehrenstorfer G1088679

Fenoxaprop-P-Ethyl

110

Dr Ehrenstorfer

GmbH G141330

Fenpropathrin

111 Sigma Aldrich BCBT7187

(20)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

20 de 30

Fenpropidin 619

Dr Ehrenstorfer

GmbH G156322

Fenpropimorph 724

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1059605

Fenthion

113 Sigma Aldrich BCBT4329 Fenvalerate(San Marton)

173

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1062689

Fipronil 115 Sigma Aldrich BCBV5192

Flonicamid 639

Dr Ehrenstorfer

GmbH BCBV8175

fluazifop-butyl 116 Sigma Aldrich BCBS8821V

Fludioxonil 33 Singenta AMS273/7

Flufenacet 696

Dr Ehrenstorfer

GmbH G976975

Flumioxazin 621

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1062747

Fluopicolide

596

Dr Ehrenstorfer

GmbH G140221

Fluopyram

24

Dr Ehrenstorfer

GmbH G996049

Fluquinconazole

405

Dr Ehrenstorfer

GmbH G171807

Flusilazole

119

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1042743

Fluthiacet-methyl 694

Dr Ehrenstorfer

GmbH G168141

Flutolanil 620

Dr Ehrenstorfer

GmbH G976521

Flutriafol

34

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1058895

Fluvalinate, tau-

176

Dr Ehrenstorfer

GmbH 147902

Fonofos 719

Dr Ehrenstorfer

GmbH G175429

Fosthiazate 658

Dr Ehrenstorfer

GmbH G984408

Fuberidazole 681

Dr Ehrenstorfer

GmbH G430284

HCH, alpha- 483 Restek A0144808

HCH-beta-

483 Restek A0144808

HCH-delta- 483 Restek A0144808

HCH-gamma- (lindane) 483 Restek A0144808

Heptachlor-endo-epoxide(trans-,isomer

A) 755 Dr.Ehrenstorfer G150874

Heptachloro 483 Restek A0144808

Heptachloroepoxid isomero B 483 Restek A0144808

Heptenophos 764 Dr.Ehrenstorfer G1038756

Hexachlorobenzene 484 Restek A0141177

hexachlorocyclopentadiene 485 Restek A0149845

Hexazinone 754 Dr.Ehrenstorfer G833415

Indoxacarb

505

Dr Ehrenstorfer

GmbH G154488

Ipconazole 687

Dr Ehrenstorfer

GmbH G992255

Iprodione 454 Sigma Aldrich BCBS3629V

(21)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

21 de 30

Isocarbofos 720

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1047430

Isofenphos-methyl 717

Dr Ehrenstorfer

GmbH G166350

Isopenphos 781 Dr.Ehrenstorfer G1089859

Isopyrazam 667

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1013714

Isoxathion 771 Dr.Ehrenstorfer G1031883

Kresoxim-Methyl 134 Sigma Aldrich BCBV7334

Malathion

137 Sigma Aldrich BCBS8709V

Mepanipyrim 712 Dr Ehrenstorfer

GmbH G451489

Metalaxyl 139 Dr Ehrenstorfer

GmbH G984930

Metalaxyl-M 783 Dr.Ehrenstorfer G1050453

Metamitron 688

Dr Ehrenstorfer

GmbH G163401

Metconazole 632

Dr Ehrenstorfer

GmbH G140002

Methacrifos 779 Dr.Ehrenstorfer G1095883

Methamidophos 141 Dr Ehrenstorfer

GmbH G1058887

Methidathion 142 Sigma Aldrich BCBX1633

Methoprene 258

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1027142

Methoxychlor

483 Restek A0144808

Metolachlor (Dual) 485 Restek A0149845

Metrafenone 410 Dr Ehrenstorfer

GmbH G140234

Metribuzin 485 Restek A0149845

Mevinphos 584 Dr.Ehrenstorfer G1058595

Mirex 748 Dr.Ehrenstorfer G855250

Myclobutanil

175

Dr Ehrenstorfer

GmbH G140237

Naled 744

Dr.Ehrenstorfer 1051239

Napropamide 631

Dr Ehrenstorfer

GmbH G156431

Nitrapyrin 685

Dr Ehrenstorfer

GmbH 50204

Norflurazon 697 Sigma Aldrich BCBT4076

o,o,o Triethyl thiophosphate 16 Restek A0144011

Orthophenylphenol 151 ChemService 6117900

Oxadiazon 152

Dr Ehrenstorfer

GmbH G148625

Oxadixyl 354 Sigma Aldrich BCBT5111

oxy-chlordane 770 Dr.Ehrenstorfer

2-

H421232ME

Oxyfluorfen 407 Dr Ehrenstorfer

GmbH G150151

p,p´-DDD 483 Restek A0144808

p,p´-DDE

483 Restek A0144808

(22)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

22 de 30

p,p´-DDT 483 Restek A0144808

Paclobutrazol 317 Dr Ehrenstorfer

GmbH G145460

Parathion 16 Restek A0144011

Parathion-methyl 16 Restek A0144011

Penconazole 157 Dr Ehrenstorfer

GmbH G165444

Pendimethalin 626

Dr Ehrenstorfer

GmbH G150077

Permethrin (sum) 484 Restek A0141177

Permethrin Cis-

484 Restek A0141177

Permethrin Trans- 484 Restek A0141177

Phenothrin 602 Sigma Aldrich BCBW2553

Phentoate 160 Sigma Aldrich BCBS4635V

Phorate 16 Restek A0144011

phosalone 624

Dr Ehrenstorfer

GmbH G163569

Phosmet 38 Sigma Aldrich BCBV7491

Phosphamidon 161 Dr Ehrenstorfer

GmbH G170501

Picoxystrobin 675

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1018524

Piperonyl Butoxide

256 Sigma Aldrich BCBX0805

Pirimicarb 345 Sigma Aldrich BCBW3080

Pirimiphos-Ethyl 778 Dr.Ehrenstorfer G1076462

Pirimiphos-Methyl 162 Sigma Aldrich BCBT5775

Procymidon 164 Sigma Aldrich BCBX0197

Profenofós 165 Dr Ehrenstorfer

GmbH G154491

Prometryn 166 Dr Ehrenstorfer

GmbH G166358

Propachlor

484 Restek A0141177

Propaquizafop 199 Sigma Aldrich BCBX0203

Propargite (Omite) 150 Sigma Aldrich BCBV0663

Propazine 529 Sigma Aldrich BCBX0853

Propetamphos 604 Sigma Aldrich BCBV4603

Propiconazole 185 Dr Ehrenstorfer

GmbH G993810

Propoxur 623

Dr Ehrenstorfer

GmbH G451304

Propyzamide 627

Dr Ehrenstorfer

GmbH G169356

Prosulfocarb 446 Sigma Aldrich BCBV4720

Prothiophos 761 Dr.Ehrenstorfer G832515

Pyraclostrobin 451 Sigma Aldrich BCBT7756

Pyridaben

170

Dr Ehrenstorfer

GmbH G169002

(23)

(GC/MS/MS)

Revisión:

00

Página

23 de 30

Pyridalyl 660

Dr Ehrenstorfer

GmbH G158635

Pyrimetanil 344 Dr Ehrenstorfer

GmbH G154496

Pyriproxyfen 208 chem service 6233200

Quinalphos 762 Dr.Ehrenstorfer G1023049

Quinoxyfen 35 Fluka BCBW5456

Quintozene (pentacloronitrobenceno) 158 Sigma Aldrich BCBT3735

Resmethrin (sum) 607 Dr Ehrenstorfer

GmbH G996399

Sethoxydim 629 Dr.Ehrenstorfer 1004497

Simazine 485 Restek A0149845

Spirodiclofen 37 Sigma Aldrich BCBW2752

Spiromesifen 689

Dr Ehrenstorfer

GmbH G171810

Sulfotep 16 Restek A0144011

Tebuconazole 120

Sigma Aldrich BCBS6124V

Tebufenpyrad 496 Dr Ehrenstorfer

GmbH G249649

Tecnazene 753 Dr.Ehrenstorfer G661119

Tefluthrin 178

Dr Ehrenstorfer

GmbH G1030272

Terbacil 665 Sigma Aldrich BCCB0349

Terbufos 633 Dr Ehrenstorfer

GmbH G158932

Terbuthylazine 677

Dr Ehrenstorfer

GmbH G145956

Terbutryn 179 chem service 5675800

Tetraconazole

339

Dr Ehrenstorfer

GmbH G154055

Tetradifon 756 Dr.Ehrenstorfer G687195

Tetrahydrophthalimide 585 Dr Ehrenstorfer

GmbH 102828

Thetrachlorvinphos 766 Dr.Ehrenstorfer G155412

Thiometon 763 Dr.Ehrenstorfer 1009246

Thionazin

16 Restek A0144011

Tolclofos metil 186 Dr Ehrenstorfer

GmbH G983982

Tolfenpyrad 640 Sigma Aldrich BCCB1796

Tolylfluanida 507 Sigma Aldrich BCBT9907

Triazofos 188 Dr Ehrenstorfer

GmbH G687249

Trifloxistrobina 347

Dr Ehrenstorfer

GmbH G163560

Triflumizole

190

Dr Ehrenstorfer

GmbH G129212

Trifluralin 484 Restek A0141177

Triticonazole 447 Sigma Aldrich BCBX0803

Vinclozolina 193

Sigma Aldrich BCBT9820