CARACTERIZACIÓN DE LA MICROFLORA ORAL EN NIÑOS DE 0 A 6 MESES DE EDAD SANDRA PAOLA MORENO YASMÍN ROJAS MARTÍNEZ

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CARACTERIZACIÓN DE LA MICROFLORA ORAL EN NIÑOS DE 0 A 6 MESES DE EDAD

SANDRA PAOLA MORENO YASMÍN ROJAS MARTÍNEZ

TRABAJO DE GRADO Presentado como requisito parcial

Para optar al titulo de

BACTERIÓLOGA

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA FACULTAD DE CIENCIAS

CARRERA DE BACTERIOLOGÍA Bogotá, Mayo 31 del 2002

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Dra. MARÍA CECILIA MARTÍNEZ Dra. ADRIANA RODRÍGUEZ Directora Codirectora

______________________________ ____________________________

Dr. HUGO DIEZ ORTEGA Dra. SILVIA BARRIENTOS Jurado Jurado

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Dra. AURA ROSA MANASCERO Dra. ANGELA UMAÑA

Directora de la carrera de Bacteriología Decana Académica de la Facultad

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Primero que todo le doy gracias a Dios por haberme dado unos padres ejemplares que me permitieron realizarme como persona y como profesional,

de igual manera dedico este trabajo a Omar quien ha sido un apoyo muy importante en mi vida, este trabajo va dirigido especialmente

a ellos.

Sandra Paola Mo reno Ch.

(5)

Primero que todo quiero dar gracias a Dios por haberme dado la oportunidad de tener unos padres maravillosos que me han colaborado durante

toda mi carrera, por lo cual dedico este trabajo a ellos y de igual manera a Amalia y Eusebio quienes han sido incondicionales y me han apoyado para poder culminar con mi carrera.

Yasmín Rojas Martínez.

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NOTA DE ADVERTENCIA

Articulo 23 de la resolució n N°13 de julio de 1946: “ La Universidad no se hace responsable por los conceptos emitidos por sus alumnos en sus tesis de grado.

(7)

TABLA DE CONTENIDO

Pag.

INTRODUC CIÓN

9

1. Marco

Teorico

11

1.1 Microbiota de la cavidad oral

11

1.2 Naturaleza de la microbiota oral

12

1.3 Ecosistemas primarios 13

1.4 Cocos grampositivos 15

1.4.1 Staphylococcus aureus 16

1.4.2 Estreptococos 16

1.4.2.1 Estreptococos del grupo mutans

17

1.4.2.2 Estreptococos del grupo mitis

18

1.4.2.3 Estreptococos del grupo salivarius

18

1.4.2.4 Estreptococos del grupo sanguis

19

1.4.3 Peptostreptococcus 20

1.4.4 Peptococcus 20

1.4.5 Genero Enterococcus 20

(8)

1.4.6 Genero micrococcus 21

1.5 Coco Gramnegativo 22

1.5.1 Genero

veillonella

22

1.5.2 Neisseria 22

1.6 Bacilo grampositivo 23

1.6.1 Genero Lactobacillus 23

1.6.2 Genero Actinomyces 23

1.6.3 Genero bifidobacterium 24

1.6.4 Genero

difteroides

24

1.6.5 Leptotrichia bucalis

25

1.7 Bacilo gramnegativo 25

1.7.1 Fusubacterium 25

1.7.2 Genero actinobacillus 26

1.7.3 Genero Eikenella corrodens 27

1.7.4 Genero porphyromonas 27

1.7.5 Genero

prevotella

28

1.7.6 Genero haemophylus 29

2. Justificación 30

3. Objetivo

General

31

(9)

3.1 Objetivos Específicos 31

4. Materiales y Métodos 32

4.1 Tipo de

Estudio

32

4.2 Población y muestra 32

4.3 Análisis de la información 33

4.4 Recolección de la muestra 34

4.5 Cultivo para aerobios 34

4.5.1 Identificación 35

4.6 Cultivo de Anaerobios 35

4.6.1 Identificación 36

4.6.2 Lectura 36

5. Resultados 37

5.1 Gráfico #1 37

5.1.1 Tabla # 1 38

5.1.2 Gráfico # 2 39

5.2 Tabla # 2 40

5.2.1 Gráfico # 3 41

5.3 Tabla # 3 41

5.4 Tabla # 4 42

5.3.1 Gráfico # 4 43

5.4.1 Gráfico # 5 43

(10)

5.5 Tabla # 5 44

5.6 Tabla # 6 45

5.7 Gráfico # 6 46

5.7.1 Tabla # 7 47

6. Discusión 48

7. Conclusiones 53

8. Recomendasio

nes

54

9. Bibliografía 55

ANEXOS

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INTRODUCCIÓN

La cavidad oral sana constituye un sistema ecológico equilibrado en el que se presenta una microbiota extraordinariamente compleja, de la que se han llegado a aislar hasta 200 especies diferentes de las cuales, un alto número son transeúntes y tan solo unas 20 especies se consideran autóctonas o residentes ^{1, 2, 3}. El nacimiento es el primero de los acontecimientos ambientales que afectan a la sucesión alogénica de la cavidad oral. En el útero, el feto se encuentra libre de microorganismos. Por el paso a través del canal del parto (contacto con la microbiota vaginal) y por las relaciones con el mundo exterior (p.ej. aire o alimentación) se inicia la colonización oral ^4,5. Por lo tanto en la cavidad oral del recién nacido se pueden encontrar microorganismos del canal vaginal (Lactobacillus, Corinebacterias, Staphylococcus, Micrococcus, Bacilos gram negativos entéricos, Levaduras y Streptococcus), que desaparecen 2 a 5 días después, siendo remplazados en algunos casos la microbiota materna de familiares o personal sanitario. La microbiota anaerobia estricta, como veillonella spp, peptostreptococcus spp, fusobacterium spp,

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1. BEIGHTON. B, Hardie JM, Whilei RA. Schem e for the identification of viridans streptococci. J Med Microbiol 1991; 35:

367 -372

2. BERNARD, Henrry, Diagnostico y Tratamiento Clínico por el laboratorio, novena edición, Masso, S.A. Barcelona, España, 1998, p. 1055.

3. BREA, Manuel López, Procedimientos en Microbiología Clínica, recomendaciones de la sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica,1999.

4. CERRIL, Pearce, G.H. Bowden, Mishell Evans, Identification of pioneer viridans streptococci in the oral cavity human neonates. J Med Microbiol, 1995; 42: 67-72.

5. ESCOBAR, Miriam, Microbiología de la Cavidad Oral, Centro Editorial Javeriano CEJA, 1999, p. 57 y 58.

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y otras especies anaerobias facultativas como Actinomices spp., Actinobacillus actinomycetencomitans y Eikenella corrodens, aparece en baja cantidad y solo en estrecha relación simbiótica con la aerobia. ⁶

Las infecciones de la cavidad oral a veces pueden actuar como foco de enfermedad en otras áreas del organismo humano, por lo tanto los odontólogos deben conocer la s posibles consecuencias sistémicas de estos focos debido a que el reconocimiento y tratamiento precoz evita las complicaciones secundarias, especialmente en pacientes de alto riesgo como los inmunosuprimidos.^{7, 8}

Para realizar la investigación microbiológica de los procesos infecciosos de la cavidad bucal, es indispensable conocer los diferentes ecosistemas orales primarios y la microbiota residente y autóctona de cada uno de ellos para poder establecer la importancia patogénica de los microorganismos aislados. ^{9, 10}

En el presente estudio se identificó la flora oral bacteriana en niños de 0 a 6 meses de edad, que no presentaban ninguna complicación perinatal, y se encontraban en etapa predental, es decir que no presenten ningún diente erupcionado, para así conocer el tipo de colonización de la cavidad oral de niños con estas características.

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6. KONEMAN, Elmer. W, Diagnostico Microbiologico, Editorial Médica Panamerica, 5 edición , 1999 7. LIÉBANA, José Ureña, Microbiología Oral, Editorial Interamericana, Mdrid, 1995, p. 58,278.

8. RESTREPO, Jorge M, Enfermedades Infecciosas, 5 Edición, CIB, Medellí Colombia, 1996,. P. 108

9. SMIT, DJ. Anderson JM, King WF, Houte J, Taubman MA, Oral streptococcal colonization of infants. Oral Microbiol Inmunol, 1993; 8: 1-4.

10. WALTER, J. Loesche,DMP, PhD, Association of the Oral flora with important Medical Diseasses. Current opinion in Periodontology, 1997, 4: 21-2.

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RESUMEN

Con el propósito de aislar e identificar los microorganismos que componen la flora oral de niños predentales sanos entre 0 y 180 días de edad, se realizó un estudio observacional descriptivo en el que se analizaron 25 hisopados de cavidad oral. Los géneros de aparición más frecuente en estas muestras fueron Estreptococos viridans (72%), Enterococcus (68%), S.intermedius (52%) y Lactobacillus (44%). No se observaron diferencias en la composición de la flora oral bacteriana de la muestra estudiada a pesar de que esta abarca un rango de edad en la que se especula pueden presentarse eventos que la modifiquen. Llama la atención la aparición en estas muestras de la especie anaerobia como Veillonella, considerada generalmente como colonizadora tardía. También se destaca la detección de Estreptococos mutans en 14 de la s muestras, hecho que permite suponer que este microorganismo puede aparecer en la cavidad oral independientemente de la aparición del primer diente.

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1. MARCO TEÓRICO

1.1 MICROBIOTA DE LA CAVIDAD ORAL

La cavidad oral comprende la lengua, los dientes, la mucosa bucal y el surco gingival.

Su microbiota se caracteriza por una gran variabilidad, que depende de diversos factores, tales como la presencia o ausencia de dientes o de caries y de la zona de la que se trate, siendo muy diferente incluso en zonas relativamente próximas y similares.¹¹

El ser humano no presenta dientes en el momento del nacimiento y tiene una flora característica de este estado. Desde el nacimiento, la cavidad bucal esta expuesta a muchos y distintos microorganismos que están presentes en el ambiente. Los microorganismos, que llegan a ser residentes en la cavidad bucal, serán aquellos que se ven favorecidos por las condiciones fisiológicas y nutricionales y no son inhibidos por factores mecánicos o por otros factores antagonistas de ese territorio corporal.¹²

La cavidad bucal debe considerarse como una incubadora bacteriológica ideal. Tiene una temperatura entre 35°C y 37°C con abundante humedad y un excelente aprovisionamiento de diferentes tipos de alimentos y variadas tensiones de oxigeno.¹³

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11.LIEVANO, José.U. Microbiologia Oral. España: Mc-Graww-Hill, 1997. p. 92

12.BURNETT, George. W. Microbiologia Oral y enfermedades infecciosas, Ed. Mecica Panamericana S.A, 1982. P. 170 -171 13.NOLTE, William. A. Microbiologia Odontológica, México: Ed. Interamericana, 1984. P. 193

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Por esto las bacterias aerobias, facultativas y las anaerobias encuentran condiciones favorables para su crecimiento.

In útero, el feto normalmente está lib re de gérmenes. Durante el nacimiento es posible que el niño sea inoculado con la flora normal del tracto genital de la madre.

Por lo tanto, la cavidad oral del neonato puede contener microorganismos del canal vaginal como (lactobacilos, corinebacterias, estafilococos, micrococos y bacilos gram negativos entéricos), que desaparecerán entre los 2 a 5 días posteriores al nacimiento, siendo reemplazados por microorganismos orales de la madre, familiares o personal sanitario. Esos tipos microbianos, en conjunto, se denominan flora residente, flora normal, o bien, flora natural y constituyen el ecosistema de la cavidad bucal.

1.2 NATURALEZA DE LA MICROBIOTA ORAL

La microbiota oral es extraordinariamente compleja. Se han llegado a aislar hasta 200 especies distintas de una misma cavidad oral en el transcurso del tiempo; la mayor parte de estas especies tendría la característica de ser transitorias, de tal forma que, como flora residente sólo quedarían unas 20 especies aproximadamente.

A continuación se indican algunos de los microorganismos que constituyen esta microbiota, especialmente la que tiene el carácter de ser residente o autóctona.¹⁴

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14. LIEVANO. Op. Cit,p . 93-94

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1.2 ECOSISTEMAS PRIMARIOS

Es prácticamente imposible mencionar todos y cada uno de los microorganismos que colonizan o pueden colonizar los ecosistemas primarios orales. A continuación, se indica la distribución microbiana aproximada en dichos nichos ecológicos.

Mucosa: La microbiota de la mucosa oral esta constituida, salvo encías y labios, casi

exclusivamente por cocos grampositivos anaerobios facultativos, especialmente por Streptococcus viridans.

Labios: Al existir una transición de piel a mucosa no es extraño que estén colonizados por una microbiota cutánea, como el Staphylococcus epidermides y Micrococcus spp. Además se detectan también abundantes Streptococcus viridans, procedentes de la saliva, las mejillas el paladar duro y el dorso de la lengua debido al acto de humedecimiento.

Paladar blando: Aparecerán bacterias propias de las vías respiratorias como Haemophylus, spp. y S. pyogenes y Streptococcus viridans.

Dorso de la lengua: Ofrece amplias posibilidades para la colonización bacteriana.

Aproximadamente un 45% son cocos grampositivos anaerobios facultativos, destacando sobre los demás S. salivarius. Le siguen en proporción los cocos gram negativos anaerobios estrictos, aproximadamente el 16%, con diversas especies de Veillonella, y bacilos grampositivos anaerobios facultativos, aproximadamente 12%, fundamentalmente, Actinomyces spp.

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Saliva: Al carecer de microbiota propia, todos los microorganismos aislados tendrán

un carácter transitorio y dependerá de la composición de los otros ecosistemas primarios. Los microorganismos que se hallan en la saliva proceden del desprendimiento que se produce en otras áreas bucales, especialmente del dorso de la lengua. Existe una amplia variabilidad en las características de la saliva, ya que ésta va estar influida por numerosos factores como humedad, pH, temperatura y el potencial de oxido-reducción. En general, predominan los cocos grampositivos anaerobios facultativos, aproximadamente un 44%, los cocos gram negativos anaerobios estrictos como veillonella spp, aproximadamente 15% y los bacilos anaerobios facultativos grampositivos, como Actinomyces spp; con aproximadamente un 15%.

pH: El pH de la cavidad oral oscila, en condiciones normales, entre 6,7 y 7,5 que es el pH óptimo para el desarrollo de la mayor parte de los microorganismos relacionados con el hombre. Sin embargo este pH está sometido a numerosas variaciones, como bebidas o alimentos dulces o el metabolismo bacteriano de los carbohidratos pueden provocar descensos importantes, mientras que el metabolismo de las proteínas o condiciones de ayunas lo elevan. Es la saliva la que ejerce la función amortiguadora más importante. Los reguladores salivales contienen bicarbonatos, fosfatos y proteínas¹⁵.

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15. LIEVANO. Op. Cit,p., p. 405

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1.4 COCOS GRAMPOSITIVOS:

Staphylococcus

Las bacterias grampositivas, especialmente los cocos, son los microorganismos aislados con mayor frecuencia a partir de muestras clínicas humanas en el laboratorio de microbiología. Estas bacterias están ampliamente distribuid as en la naturaleza y pueden ser recuperadas a partir del ambiente o como habitantes comensales de la piel, las mucosas y otros sitios del cuerpo de los seres humanos y los animales. ¹⁶

Casi todas las bocas alojan cocos grampositivos facultativos, catalasa positivos que fermentan la glucosa y reducen el nitrato, siendo identificados como micrococos- estafilococos. Los datos disponibles indican que suman aproximadamente 2% de la cuenta viable del surco gingival y cerca del 6.5% del dorso de la lengua aunque son bastante raros en la placa. ¹⁷

Morfología de las colonias

Las especies de Micrococus y de Sthaphylococcus producen colonias características en agar sangre de carnero. Algunas cepas producen pigmentos y son amarillas, rosadas, anaranjadas o pardas, en tanto que otras son de color blanco sucio o blanco hueso. Las colonias de la mayoría de las especies de Staphylococcus se desarrollan con mayor rapidez y tienen entre 1 y 2 mm de diámetro después de 12 horas de incubación. Las colonias habitualmente son lisas, mantecosas y ligeramente convexas con bordes enteros. ¹⁸

16.KONEMAN, Elmer. W. Diagnostico Microbiológico, Editorial Médica panamericana, quinta edición, 1999 17.Nolte, Op. cit., p. 188.

18.KONEMAN, Op. Cit., p.

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1.4.1 Sthaphylococcus aureus

Sthaphylococcus aureus es sin duda el patógeno humano más importante entre los estafilococos. Aunque este microorganismo suele formar parte de la microflora humana normal, puede producir infecciones oportunistas importantes.

La mayoría de las cepas de Staphylococcus aureus producen toxinas alfa, beta y gama y una serie de otras proteínas extracelulares, que incluyen leucocidina, ureasa, lipasa, gelatinasa y fosfatasa.¹⁹

1.4.2 Estreptococos

Los estreptococos facultativos forman el grupo más numeroso en la cavidad oral, promediando en la mayoría casi la mitad de las cuentas viables de saliva y dorso de la lengua, y aproximadamente un cuarto de las cuentas viables de la placa y el surco gingival.

Las variedades pyógenas (hemolíticas) son generalmente escasas en la cavidad oral, donde en ocasiones originan infección local o sistémica. Los estreptococos pyógenes aislados ocasionalmente de la cavidad oral probablemente derivan de la oronasofaringe y no deberían ser considerados como parte de la flora residente.

Los estreptococos orales más abundantes son los del grupo viridans. Estos han sido divididos en cuatro grupos: Estreptococo salivarius, Estreptococo mutans, Estreptococo mitis y estreptococo sanguis²⁰ (Anexo # 11).

–––––––––––––––––––––––––

19. Ibit.,p.

20.BURNETT, George. W. Microbiologia Oral y enfermedades infecciosas de la boca, Editorial Limusa, S.A. 1988. p. 283-285.

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Muchas especies de estreptococos viridans que habitan la cavidad oral han surgido como importantes agentes patógenos, asociados predominantemente con el comienzo y la patogenia de la caries dental. S. mutans, S. sobrinus y otros miembros del

“grupo mutans” de estreptococos orales son capaces de producir enzimas denominadas glucosiltransferasas, que hidrolizan la sacarosa de la dieta (un disacárido de glucosa y fructosa) y une los residuos de glucosa entre sí por medio de uniones alfa-1,6 y alfa -1,4 glucosídicas para formar glucanos insolubles. Estos glucanos confieren a los microorganismos la propiedad de adherirse a las superficies lisas de los dientes y de formar la matriz extracelular de la placa dentobacteriana. La adherencia específica e inespecífica de S. mutans y de otros microorganismos a los glucanos insolubles, y la subsecuente formación de ácidos conduce a la desmineralización del esmalte dental y a la iniciación de las lesiones cariosas. Otros estreptococos orales, incluidos S. sanguis, S. salivarius y posiblemente S. gordonii, también son capaces de sintetizar estos polisacáridos. ²¹

1.4.2.1 Estreptococos del grupo mutans

Su hábitat principal son las superficies dentales de la cavidad oral humana, sobre las que forman la placa dentobacteriana o biofilm. Su presencia en el biofilm se ve favorecida por los niveles altos de sacarosa de la dieta.

La incidendia de Estreptococos mutans en la etiología de la caries dental ha sido demostrada por la producción de lesiones cariosas después de su introducción en la cavidad bucal de animales libres de gérmenes.

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21. KONEMAN, Elmer. W. Diagnostico Microbiológico, Editorial Médica panamericana, quinta edición, 1999

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Los estudios epidemiológicos han demostrado una relación directa entre los recuentos de mutans y la presencia de caries dental. En la actualidad esta relación se usa para predecir caries dental a partir de mutans recuperados de la saliva. Los recuentos bacterianos altos, como 1 x 10⁶ UFC por mililitro de saliva, se consideran indicadores de un alto riesgo para el desarrollo de caries dental.

1.4.2.2 Estreptococos del grupo mitis

Este grupo está conformado por Streptococcus mitis, Streptococcus sanguis tipo 2, Streptococcus mitior y Streptococcus oralis.

Se han descrito dos biotipos. El biotipo 1 coloniza la mucosa de la cavidad bucal y forma parte inicial de la placa cariogénica de superficies libres. Sólo algunas cepas tienen actividad de IgA1 proteasa. El biotipo 2 se encuentra en el dorso de la lengua.

La producción de neuraminidasa es variable en ambos, pero su capacidad peroxidogénica es constante. Carecen de ácidos lipoteiocoicos, y su capacidad de adhesión a la película adquirida y superficies epiteliales indican que en el proceso de colonización deben participar otras adhesinas.

1.4.2.3 Estreptococos del grupo salivarius

Actualmente ha sido reclasificado como “grupo salivarius”, conformado por dos especies: Streptococcus salivarius y Streptococcus vestibularis. Ambas especies colonizan superficies epiteliales.

Estos microorganismos aparecen como células esféricas u ovoides con cadenas de tamaño variable y pueden ser cultivadas en distintos medios, en presencia de oxígeno.

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Estreptococo salivarius es uno de los primeros microorganismos que infectan la cavidad bucal del niño después del nacimiento y puede encontrárselo en las hendiduras del dorso de la lengua y en la saliva. Algunas especies han sido aisladas de la sangre en pacientes con endocarditis infecciosa. Estreptococo salivarius no ha sido relacionado con caries dental, razón por la cual se le considera un verdadero comensal.

1.4.2.4 Estreptococos del grupo sanguis

Este grupo está conformado por Streptococcus sanguis, Streptococcus gordonii y Streptococcus parasanguis.

El primer hábitat de Streptococcus sanguis parece ser la placa dental, donde representa cerca de la mitad del total del número de estreptococos. Coloniza la cavidad bucal de los niños después de la erupción dentaria y los estudios han demostrado que es el primer microorganismo que se instala en superficies dentarias limpias. Estos microorganismos producen glucanos solubles a partir de la sacarosa, generan peróxido de hidrógeno y tienen actividad de IgA1 proteasa y así pueden inhibir el desarrollo y la adherencia de otros microorganismos.

El Streptococcus gordonii se puede encontrar en la placa supragingival madura.

Produce polisacáridos extracelulares solubles (glucanos) y es incapaz de formar polisacáridos intracelulares. Genera peróxido de hidrógeno²².

____________________________

22. NEGRONI, Marta, Microbiología Estomatológica, Fundamentos y guía práctica, Editorial Médica Panamericana, Buenos Aires, Argentina, 1999, p. 203-208.

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1.4.3 Peptostreptococcus

Son un grupo de cocos grampositivos anaerobios y no móviles que se presentan en pares y en cadenas cortas o largas. Los peptostreptococcus en general no son invasivos, se les considera parásitos endógenos que habitan en la piel, vías respiratorias y digestivas, vagina y cavidad bucal.

Se aíslan a partir de la placa subgingival de bolsas periodontales, gingivitis, periodontitis e infecciones de canales radiculares. Todas las especies tienen nula o escasa actividad sacarolítica.

1.4.4 Peptococcus

Son cocos grampositivos asociados en parejas, tetradas o masas irregulares. Se aísla como microbiota normal en numerosos puntos del organismo, como la vagina, el ombligo o el intestino. Muy rara vez se recuperan de la cavidad oral.

1.4.5 Genero Enterococcus

El género Enterococcus incluye los enterococos clasificados previamente dentro de los estreptococos grupo D. Estos microorganismos son habitantes normales de los tractos gastrointestinal y biliar, y, en menor cantidad, de la vagina y la uretra masculina. Este género fue separado de los Estreptococos en función de distintas características, por su capacidad de desarrollarse a 10°C y 45°C, desarrollo en presencia de 6,5% de NaCl, desarrollo a pH 9,6, capacidad de hidrolizar la esculina en presencia de 40% de bilis, y producción de pirrolidonil arilamidasa. .

(24)

Son productores de una gran variedad de procesos infecciosos: meningitis, otitis, neumonías, endocarditis subagudas, abscesos intraabdominales e infecciones urinarias. En una buena parte de los casos se tratan de procesos nosocomiales u hospitalarios.²³

Su importancia ecológica oral es dudosa, aislándose a veces como microbiota normal en la mucosa, el dorso de la lengua y las placas. Se han descrito aislamientos en infecciones radiculares o abscesos odontogénicos.

1.4.6 Genero micrococcus

Se hallan aisladas en racimos o tétradas. Son cápsulados, no forman esporas y todas las especies son inmóviles, salvo M. agilis. Las colonias son convexas, circulares, enteres, lisas y dependiendo de las especies pueden ser amarillas, crema, naranjas, rosas o rojas.

El género Micrococcus se caracteriza por ser aerobio estricto, tienen solamente metabolismo oxidativo y no producen ácidos de la glucosa por procesos fermentativos. Estas propiedades, junto a su actividad oxidasa, producción de catalasa y la ausencia de coagulasa, los diferencian de otros cocos grampositivos.

Los Micrococcus no suelen ser patógenos para el hombre. A veces, se han asociado con infecciones en pacientes inmunocomprometidos. Se han aislado algunas especies de la cavidad oral, especialmente de placas supragingivales, desconociéndose su importancia patógena.

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23 .LIEVANA, José.U. Microbiologia Oral. España: Mc-Graww-Hill, 1997. p. 251 -252, 254,255

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1.5 COCOS GRAMNEGATIVOS 1.5.1 Género Veillonella

El género Veillonella está formado por cocos anaerobios, pequeños, no móviles, gramnegativos y negativos a la reacción de oxidasa. Estas bacterias se presentan en las cavidades naturales del hombre, se encuentra en grandes cantidades en el cavidad bucal humana, vías respiratorias y vías digestivas.

Veillonella se caracteriza por su incapacidad de fermentar los hidratos de carbono y los polioles y por su marcada actividad metabólica sobre los ácidos láctico, succínico y otros ácidos orgánicos.

También pudieran participar en la formación de la enfermedad dental cuyo punto de partida es la placa, como la caries y la periodontitis, ya que contribuyen en forma impórtate en la formación de la placa una vez que el depósito se ha iniciado en el diente por la adherencia de otras bacterias.²⁴

1.5.2 Neiseria

Los microorganismos denominados Neiseria han sido hallados en varios sitios de la cavidad oral, incluyendo los labios, la lengua, los carrillos, la placa bacteriana y la saliva. No obstante las proporciones medias fueron menores al 1% de la flora cultivable estudiada y no parecen tener una afinidad especial por cualquiera de estas superficies orales. ²⁵

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24. BURNETT, George. W. Microbiologia Oral y enfermedades infecciosas, Ed. Mecica Panamericana S.A, 1982. P. 180-181 25. Ibit.,p. 180-181

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1.6 BACILOS GRAMPOSITIVOS 1.6.1 Genero Lactobacillus

Desde el punto de vista morfológico, son bacilos grampositivos no ramificados, con gran pleomorfismo, pudiendo presentarse formas alargadas, bacilos cortos e incluso cocoides. Aparecen aislados, asociados en parejas cadenas o en empalizadas. Desde el punto de vista metabólico presentan escasa o nula actividad proteolítica. Con respecto a su hábitat, las especies del género Lactobacillus se encuentran de forma constante en la boca, la vagina y el tracto digestivo del hombre.

En la cavidad oral humana los Lactobacilos se aíslan principalmente de la saliva, el dorso de la lengua y las placas coronales, variando su concentración según el estado de salud oral. Su falta de poder adhesivo les resta interés como iniciadores del proceso carioso de superficies lisa, de forma de que su papel sería más de invasor secundario que contribuye al avance de las lesiones ya en curso. ²⁶

1.6.2 Genero Actinomyces

Son bacilos grampositivos, no esporulados e inmóviles. Pueden presentarse con diversas morfologías, observándose formas rectas, curvas, filamentosas, cocobacilares o con ramificaciones. Aparecen como elementos aislados, en parejas, cadenas cortas o empalizadas, son anaerobios facultativos. El hábitat principal de estos microorganismos en el hombre es la cavidad oral, las criptas amigdalares y el tracto genital femenino.²⁷

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26. BURNETT, Op. Cit., p. 181,183 -184.

27. LIEVANA, José.U. Microbiologia Oral. España: Mc-Graww-Hill, 1997,p 256 -257.

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El cuadro clínico más importante que producen las especies del género Actinomyces es la actinomicosis, proceso endógeno cuya localización más frecuente es la cervicofacial (mejilla, cuello, senos paranasales, lengua, regiones parotideas, submandibular y retromandibular, y apéndice mastoides).

1.6.3 Genero Bifidobacterium

Constituido por bacilos grampositivos inmóviles, pleomórficos, algunos de ellos con engrosamientos o abultamientos terminales, y bifurcados. Pueden presentarse aislados, en cadenas cortas o en empalizadas. Son fermentativos y anaerobios.

La mayor parte de las especies tienen su hábitat primitivo en la vagina y en el intestino humano.

En la cavidad oral, la única especie de interés es B. dentium aislada de placa dental, lesiones cariosas y abscesos odontogénicos.²⁸

1.6.4 Género Difterioides

Por lo menos tan numerosos en la cavidad oral como Veillonella , se cuentan los bacilos grampositivos. Se ha informado que las cepas facultativas promedian el 13%

de la cuenta viable del dorso de la lengua, el 15% del surco gingival y el 24% de la placa bacteriana, son obligadamente anaerobias, debido a su pleomorfismo, las formas ocasionales en clava, la disposición angular en grupos que se semejan a ideogramas chinos.²⁹

Esta diferenciación morfológica, no obstante, no es confiable, ya que muchas de estas bacterias crecen como filamentos ramificados bajo condiciones adecuadas.

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28.LIÉBANA, Op. Cit., p, 251 29. BURNETT, Op. Cit., p, 183

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1.6.5 Leptotrichia buccalis

La bacteria L. buccalis es uno de los microorganismos más grandes encontrados en la cavidad bucal. Requiere un ambie nte de anaerobiosis para el aislamiento inicial, pero crece en subcultivos en ambiente de microaerofilia o tensión de oxigeno reducida. El microorganismo es un filamento en forma de bastoncito no ramificado, no móvil, no esporulante, recto o ligeramente curvo. En general es plano en un extremo y redondeado en el otro. Estos microorganismos se encuentran en el material de la placa dentaría y también en el surco gingival.³⁰

1.7 BACILOS GRAMNEGATIVOS

1.7.1 Fusobacterium

Son bacilos obligadamente anaerobios, gramnegativos, que no forman esporas. Las Fusobacterias son miembros normales de la microflora normal y en esa localización en general exhibe una patogenicidad baja.

Sin embargo en algunas condiciones pueden participar en infecciones mixtas con espiroquetas y Estreptococos de la boca, como la gingivitis necrosante ulcerosa aguda o en infecciones mixtas similares de otras superficies mucosas sobre todo de los genitales.³¹

––––––––––––––––––––––––––––––

30. BURNETT, Op. Cit., p, 187 31. LIÉBANA, Op. Cit., p. 249

(29)

1.7.2 Género Actinobacillus

El que tiene mayor interés en la cavidad oral es el Actinobacillus actinomycetemcomitans, este es un bacilo o cocobacilo gramnegativo inmóvil. El nicho ecológico primario de esta bacteria no se conoce, Sin embargo, en la cavidad oral puede encontrarse en la placa bacteriana supra y subgingival e incluso en la mucosa bucal. En la colonización oral se han implicado a las fimbrias las vesículas superficiales, y las interacciones antagónicas que se establecen con otras bacterias (probablemente debido a la producción de bacteriocinas por parte de estos microorganismos o por su susceptibilidad a las bacteriocinas elaboradas por otros).

El hábitat principal de estos microorganismos en el hombre es la cavidad oral las criptas amigdalares y el tracto genital femenino. El cuadro clínico más importante que producen las especies del género Actinomyces es la actinomicosis, proceso endógeno cuya localización más frecuente es la cervicofacial (mejilla, cuello, senos, lengua, regiones parotideas, submandibular y retromandibular y apéndice mastoides). Con frecuencia, existe el antecedente de extracciones dentarias, microtraumatismos bucales o infecciones por otras bacterias, que disminuyen el potencial de oxido-reducción y favorecen el desarrollo de Actinomyces ₃₂

––––––––––––––––––––––––––––––

32.BURNETT, Op. Cit., p. 261

(30)

1.7.3 Género Eikenella corrodens

Es un bacilo pequeño gramnegativo, inmóvil, oxidasa positivo, que crece en atmósfera con 7.5% de dióxido de carbono . En sus requerimientos de oxígeno es facultativo y presenta una marcada necesidad de hemina. Esta especie es relativamente inactiva en sus reacciones bioquímicas con los hidratos de carbono.

En Agar sangre las colonias forman pequeñísimas depresiones en la superficie del Agar en 36 o 48 horas, característica a la cual se le debe su nombre. Las colonias son redondas, lisas, blanco grisáceas y crecen hasta 2 mm en cinco días de incubación a 37°C. Se han aislado de las porciones superiores de la vías respiratorias, las heridas por mordeduras del hombre, alvéolos posextracción, y del esputo. ³³

1.7.4 Género Porphyromonas

Son bacilos o cocobacilos gramnegativos inmóviles. Son sacarolíticos, y utilizan sustratos nitrogenados como fuente de energía. Las colonias en agar sangre son lisas, brillantes, convexas, circulares y con un pigmento marrón oscuro o negro tras varios días de incubación.

P. gingivalis es la especie más importante del género en la cavidad oral. Se localiza en el surco gingival especialmente cuando no existe una buen salud periodontal, en casos raros se aíslan de la lengua, amígdalas, o incluso la saliva.

––––––––––––––––––––––––––––––

33.LIÉBANA, Op. Cit., p. 263

(31)

Se relaciona con gingivitis, infecciones endodontales, abscesos periapicales y periodontales, y especialmente con la destrucción y progresión de las periodontitis.

Su participación en infecciones extraorales es excepcional.³⁴

1.7.5 Género Prevotella

Son bacilos gramnegativos pleomorficos, inmóviles, sensibles a bilis al 20% y moderadamente fermentativos que carecen de las enzimas glucosa 6-fostato deshidrogenasa y 6-fosfo-gluconato deshidrogenasa. Las colonias en agar sangre son circulares, convexas, pequeñas, lisas, traslúcidas u opacas, grises o con pigmento marrón o ne gro.

Tienen su hábitat primario en la cavidad oral, en el surco gingival, sin embargo, su papel patógeno a este nivel no ha sido claramente demostrado, aunque en principio parecen asociadas con periodontitis, gingivitis, infecciones endodontales, absceso s periodontales y periapicales.

También se ha comprobado su capacidad para degradar inmunoglobulinas, la estimulación de su crecimiento por hormonas esteroides como estradiol y progesterona, su acción tóxica de fibroblasto, y su actividad fibrinolítica.³⁵

________________________________________

34.Ibit., p. 247

35.Ibit., p. 248

(32)

1.7.6 Género Haemophilus

Son bacilos gramnegativos, inmóviles, algunas de cuyas especies requieren factor X (hemina), factor V (NAD), CO2, tiamina y ácido pantoténico.

Tienen actividad sacarolítica. Por sus necesidades nutritivas puede emplearse Agar chocolate que permite la liberación de factores X y V y la destrucción de las sustancias inhibidoras de este último.

Las colonias son blancas o amarillentas, convexas circulares, lisas e incluso mucosas.

La especie tipo H. influenzae, es aislada muy rara vez a partir de la saliva, y habitualmente de la nasofaringe. Origina numerosos procesos como, meningitis, otitis, neumonía, endocarditis, sepsis e infecciones neonatales, tras la colonización de la vagina materna.³⁶

–––––––––––––––––––––

36. Ibit., p. 263

(33)

2. JUSTIFICACIÓN

No se dispone en la literatura de un conocimiento suficiente sobre los géneros bacterianos que componen la flora microbiana de la cavidad oral de niños que se encuentran en etapa predental. Se desconocen también los diferentes factores que pueden intervenir en la adquisición inicial de estas bacterias, aunque se sugiere en la literatura que los hábitos alimenticios, las costumbres de higiene, el estado de salud general y el tipo de contacto con familiares y allegados pueden ser determinantes importantes.

Las condiciones ambientales de la cavidad oral cambian dramáticamente con la edad, por esto se ha relacionado la adquisición de algunos géneros bacterianos nativos de la cavidad oral a edades específicas, siendo importante la identificación de estas edades de contagio por la posibilidad de llevar a cabo algún tipo de intervención preventiva en el caso de bacterias que bajo situaciones particulares se comportan como patógenos orales o sistémicos.

(34)

3. OBJETIVO GENERAL

Aislar, identificar y preservar los géneros bacterianos que hacen pare de la microflora oral de niños en etapa predental de 0 a 6 meses de edad.

3.1 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

? Aislar e identificar los géneros bacterianos orales de neonatos en etapa predental, sistémicamente sanos de 0 a 180 días de edad.

? Identificar los grupos de Estreptococos viridans: mutans, mitis, salivarius en 14 muestras.

? Preservar por congelación los microorganismos aislados con el fin de utilizarlos en futuros estudios.

(35)

4. MATERIALES Y METODOS

4.1 TIPO DE ESTUDIO

El estudio es de tipo observacional descriptivo, ya que busca determinar cuales microorganismos están presentes en la cavidad oral de niños de 0 a 6 meses de edad en etapa predental.

4.2 POBLACIÓN Y MUESTRA

La población esta constituida por niños sistémicamente sanos, en etapa predental de 0 a 6 meses de edad.

La muestra estuvo constituida por 25 niños que fueron distribuidos en cua tro grupos según la edad de la siguiente manera:

Grupo 1: 0 a 15 días (7 niños) Grupo 2: 16 a 50 días (6 niños) Grupo 3: 51 a 110 días (6 niños) Grupo 4: 111 a 180 días (6 niños)

Los sujetos integrantes de esta muestra cumplieron los siguientes criterios de inclusión:

? Niños sanos que se encuentren en etapa predental entre 0 y 180 días de edad.

Los criterios de exclusión tenidos en cuente fueron:

? Complicaciones perinatales con fiebre.

? Ruptura prolongada de membranas fetales

(36)

? Tratamiento antibiótico madre o hijo primeros 30 días de vida.

? Complicaciones metabólicas o infecciosas durante los primeros 30 días.

? Malformaciones oro faciales.

? Niños con dientes erupcionados aunque estuviesen dentro del rango de edad.

.

4.3 ANÁLISIS DE LA INFORMACIÓN

Se contó con el consentimiento de los padres, a los cuales se les realizó una encuesta (Anexo # 9), con el fin de reunir información sobre los diferentes datos de los individuos que participaron en el estudio y se aplicó en forma individual para cada niño, los parámetros incluidos fueron los siguientes:

? Edad del bebé.

? Tiempo de gestación.

? Enfermedades locales o sistémicas.

? Consumo de Antibióticos.

? Personas con los que tiene más contacto.

? Hábitos: lactancia materna, uso de tetero, chupos, succión digital, higiene.

Para la presentación de los resultados obtenidos fueron reunidos en tablas que incluyen las variables en estudio y los resultados de las pruebas realizadas y se utilizó

(37)

estadística descriptiva que incluyó cálculos de porcentaje, lo que permitió analizar la aparición de los diferentes géneros bacterianos.

4.4 RECOLECCION DE LA MUESTRA

Se obtuvieron 25 muestras de niños de 0 a 6 meses de edad en etapa predental. Estas muestras se recolectaron en el Hospital la Granja y el Hospital Universitario San Ignacio, fueron tomadas por medio de isopado oral de las superficies de la mucosa, las mejillas, la lengua, paladar duro, surco yugal y rebordes alveolares edéntulos, en forma uniforme, y se transportaron en caldo Tripticasa de soya (SIGMA) previamente prerreducido; estas muestras fueron llevadas al Centro de Investigación Odontológica donde fueron incubadas durante 24 horas para obtener una mayor cantidad de microorganismos haciendo más fácil su recuperación.

4.5 CULTIVO PARA AEROBIOS

Una alícuota de la muestra fue sembrada en Agar Sangre (Anexo # 1) y Chocolate para la recuperación de microorganismos que requerían CO2 al 5%, estos fueron incubados durante 48 horas, posteriormente se observo el crecimiento de las diferentes colonias y se aislaron las más significativas realizando diferentes repiques hasta obtener cultivos puros, comprobándose por medio de coloración de gram.

Posteriormente, el cultivo puro fue emulsionado en caldo tripticasa de soya más glicerol al 3% y alicuotadas en viales de congelación para ser preservadas a - 85?C.

(38)

4.5.1 IDENTIFICACION

Para la identificación de los microorganismos fueron descongelados a temperatura ambiente, recuperadas en agar sangre e incubados durante 24 horas. Luego se llevó a cabo la identificación de los microorganismos utilizando pruebas bioquímicas, incluyendo Catalasa (Anexo # 2) para los cocos grampositivos (Esquema # 1), coagulasa (Anexo # 3) para los catalasa positivo para la identificación de Staphylococcus, se observó la producción de hemólisis alfa, beta en los catalasa negativo y donde había hemólisis alfa se hizo la prueba de resistencia a la optoquina para S. viridans (Anexo # 4) y para la identificación de bacilos gram positivos (Esquema # 2).

4.6 CULTIVO DE ANAEROBIOS

En cuento a la identificación de microorganismos anaerobios primero fueron cultivados en Agar Fenil Etil Alcohol (FEA) (Anexo # 5), Shaedler (Anexo # 6) y Chocolate, fueron incubados en cámara de anaerobiosis por 72 horas y posteriormente fue observado el crecimiento de las diferentes colonias, y se procedió al aislamiento de las más significativas. Se utilizó la técnica de gram para verificar la pureza de los cultivos, a los repiques con dos o más cepas diferentes fueron sometidas a nuevos aislamientos hasta obtener cultivos totalmente puros, para luego ser preservadas en emulsión en caldo tripticasa de soya más glicerol al 3%, en viales de congelación a - 85°C, hasta el momento de la identificación. Después que se obtuvieron los cultivos puros de cada tipo de colonia encontrada en las muestras, se

(39)

procedió a descongelarlas a temperatura ambiente y fueron recuperadas nuevamente en Agar Shaedler, incubadas en cámara de anaerobios durante 72 horas.

4.6.1 IDENTIFICACION

Se utilizó el sistema de identificación BBL CRISTAL para anaerobios, sistema que permite por medio de pruebas bioquímicas la determinación de especies bacteriana anaerobias (Anexo # 7). Este sistema requiere los resultados previos de la tinción de Gram y de las pruebas de catalasa e indol. Los paneles del sistema BBL CRISTAL ANR ID contienen 29 substratos bioquímicos y enzimáticos deshidratados. Para rehidratar los substratos fue utilizada una suspensión de bacterias en el fluido de inóculo, es te fluido es un tubo que contiene solución salina que viene con el sistema BBL CRISTAL ANR ID . Las pruebas usadas en el sistema se basan en la utilización y degradación microbiana de substratos específicos detectados por varios sistemas indicadores (Anexo # 8).

4.6.2 LECTURA

Después de un periodo de incubación de 12 horas, se examinaron los pocillos para determinar cambios de color o presencia de fluorescencia que resultan de las actividades metabólicas de los microorganismos, usando la luz UV de un trasniluminador de la filas A a F y las columnas G a J , usando la luz blanca.

La serie de colores resultante de las 29 reacciones se convierte en un numero de perfil de diez dígitos que se utiliza para la identificación, por medio de la base de datos BBL CRISTAL ANR apropiada para anaerobios.

(40)

5. RESULTADOS

La población en estudio fueron niños entre los 0 y 6 meses de edad, en etapa predental y sistémicamente sanos. La muestra se recogió por medio de un escobillón estéril con el que se realizó un barrido de las superficies orales.

La distribución de los cuatro grupos en estudio de las 25 muestras se describe a continuación:

5.1 Gráfico # 1

Distribución de la muestra por grupos etareos en días

28%

24%

24% 0 - 15

16 - 50 51 - 110 111 - 180

Gráfico 1. Resultados de los cuatro grupos de niños en días.

Para la identificación inicial de los géneros bacterianos presentes en las muestras, se utilizaron técnicas como coloración de gram, y pruebas bioquímicas.

Los microorganismos que se encontraron en mayor proporción en las 25 muestras analizadas de niños de 0 a 180 días de edad en etapa predental, fueron el Estreptococos viridans con un 72% (18 casos), seguido por Enterococcus con un 68% (17 muestras) y S. intermedius con 52% (13 casos) (Tabla #1) (Gráfico # 2).

(41)

5.1.1 TABLA # 1

RESULTADOS DE LOS MICROORGANISMOS MÁS ENCONTRADOS EN LAS 25 MUESTRAS

MICROORGANISMO # CASOS (%)

Estreptococos viridans

18 72

Enterococcus spp

. 17 68

S. intermedius

13 52

Lactobacillus spp.

11 44

S.coagulasa negativa.

11 44

Veillonella spp.

9 36

Peptostreptococcus spp.

8 32

Propionibacterium

6 24

Bacteroides spp.

5 20

S.beta hemoliticus

5 20

Leptotrichia bucalis

4 16

Actinomyces spp.

3 12

Clostridium spp.

3 12

S.saccharolyticus

1 4

S.aureus

1 4

Ruminococcus spp.

1 4

Tabla 1. Microorganismos más encontrados en las 25 muestras.

(42)

2.1.2 Gráfico # 2

MICROORGANISMOS MAS PREVALENTES EN LAS 25 MUESTRAS

0 10 20 30 40 50 60 70 80

GENEROS BACTERIANOS

Estreptococos viridans Enterococcus spp S. intermedius Lactobacillus spp.

S. coagulasa negativa.

Veillonella

Peptostreptococcus spp Propionibacterium Bacteroides

Gráfico 2. Distribución de los microorganismos más encontrados en las 25 muestras.

Los principales resultados obtenidos del grupo 1 (0-15 d, n=7), indican que los microorganismos aislados en mayor proporción fueron cocos gram positivos, seguidos por los bacilos gram positivos, siendo los géneros bacterianos más sobresalientes Enterococcus que fue encontrado en el 100% de las muestras de este grupo, seguido por S. intermedius 85% y Estreptococos viridans 71% (Tabla # 2).

El grupo 2 (16-50 d, n = 6), presentó mayor proporción de cocos gram positivos, seguidos por bacilos gram positivos. El género bacteriano más sobresaliente fue Enterococcus en un 66% de las muestras, seguido por Staphylococcus coagulasa negativo 50%, Estreptococos viridans 66% y Lactobacillus spp 50% (Tabla # 2).

El grupo 3, (51-110 d, n = 6), presentó mayor proporción de cocos gram positivos, seguidos por cocos gram negativos y bacilos gram positivos, siendo los géneros

(43)

encontrados con mayor frecuencia en este grupo de muestras, Estreptococos viridans en un 66%, Staphylococcus coagulasa negativo 66%, Enterococcus 66%, Veillonella spp 66%, Lactobacillus spp 50% y Peptostreptococcus spp 50%.

El grupo 4 (111-180 d, n = 6), donde se encontró igual proporción de cocos gram positivos y bacilos gram positivos seguidos por cocos gram negativos. Los géneros bacterianos identificados fueron Estreptococos viridans 83%, Streptococcus intermedius 66%, Lactobacil lus spp 50% y Veillonella spp 50% (Tabla # 2).

5.2 TABLA # 2

GÉNEROS BACTERIANOS MÁS PREVALENTES EN LOS CUATRO GRUPOS ETAREOS

MICROORGANISMO 0-15 DIAS 16-50 DIAS 51-110 DIAS 111-180 DIAS

% % % %

Enterococcus spp. 100 66 66 33

Estreptococos viridans 71 66 66 83

Peptostreptococcus spp. 28 33 50 16

Propionibacterium 14 16 33 33

Lactobacillus spp. 0 50 50 50

Veillonella spp. 0 33 66 50

S. intermedius 85 0 16 66

S.coagulasa negativa. 28 50 66 0

Bacteroides spp. 28 16 16 0

S.beta hemoliticus 28 16 0 16

Leptotrichia bucalis 0 33 16 16

Actinomyces spp. 0 16 0 16

Clostridium spp. 0 0 33 16

S.saccharolyticus 0 16 0 0

S.aureus 0 0 16 0

Ruminococcus spp. 0 16 0 0

OTROS 28 33 16 28

Tabla 2. Variabilidad de Microorganismos encontrados en los cuatro grupos de niños por edad.

(44)

Se encontró un alto porcentaje de Enterococcus en todos los grupos, obteniéndose una presencia del 100% en las muestras del primer grupo, seguido por Estreptococos viridans con el 83% en él ultimo grupo (Gráfico # 3).

5.2.1 Gráfico # 3

Gráfico 3. Distribución de las especies más prevalentes en los diferentes grupos.

Según los resultados de los microorganismos encontrados en las 25 muestras de las cuales 13 son niños del genero femenino, se identificó con mayor frecuencia Estreptococos viridans 76%,y en los 12 niños del genero masculino el microorganismo predominante fue Enterococcus spp con un 75%( Tabla 3 y 4) (Gráfico # 4 y 5).

5.3 TABLA # 3

IDENTIFICACION DE LOS MICROORGANISMOS ENCONTRADOS EN LOS NIÑOS DEL

GENERO FEMENIMO

ESPECIES BACTERIANAS AISLADAS EN LOS CUATRO GRUPOS ETAREOS

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

0-15 16-50 51-110 111-180

GRUPOS ETAREOS

Enterococcus spp.

S. intermedius Estreptococos viridans S.coagulasa negativa.

Peptostreptococcus spp.

Veillonella spp.

(45)

#

MICROORGANISMO CASOS %

N# 13

Estreptococos viridans 10 76

Enterococcus spp. 8 61

Lactobacillus spp. 6 46

Peptostreptococcus spp. 5 38

S. intermedius 5 38

Propionibacterium 4 30

Vellonella spp. 4 30

S.coagulasa negativa. 4 30

Bacteroides spp. 2 15

Leptotrichia bucalis 2 15

Actinomyces spp. 2 15

Clostridium spp. 2 15

S.beta hemoliticus 1 7

S.saccharolyticus 1 7

S.aureus 0 0

Ruminococcus spp. 0 0

5.4 TABLA # 4

IDENTIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS ENCONTRADOS EN LOS NIÑOS DEL

GENERO MASCULINO

#

MICROORGANISMO CASOS %

N # 12

S. intermedius 8 66

S.coagulasa negativa. 7 58

Vellonella spp. 5 41

Bacteroides spp. 3 25

S.aureus 1 8

Ruminococcus spp. 1 8

(46)

5.3.1 Gráfico # 4

IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS MAS PREVALENTES EN EL GENERO FEMENINO

0 10 20 30 40 50

GRUPO ETAREO

Estreptococos viridans Enterococcus spp Lactobacillus spp Peptostreptococcus S. intermedius Propionibacterium spp veillonella spp S.coagulasa negativa

Gráfico 4. Distribución de los microorganismos encontrados en el género femenino.

5.4.1 Gráfico # 5

IDENTIFICACION DE LOS MICROORGANISMOS MAS PREVALENTES EN EL GENERO MASCULINO

0 5 10 15 20 25 30 35 40

GÉNEROS BACTERIANOS

Enterococcus spp Estreptococos viridans

S. intermedius S.coagulasa negativa Lactobacillus spp veillonella spp S.beta hemolíticos Peptostreptococcus spp

Gráfico 4. Distribución de los microorganismos encontrados en el género masculino.

(47)

Según los datos obtenidos de la encuesta que se les realizó a los niños, se tuvieron en cuenta para el estudio las siguientes variables: Niños lactantes con hábito de succión digital y niños lactantes con uso de tetero ya que en las 25 encuestas obtenidas todos los niños lactaban y solo 9 de los niños presentaban succión digital y 7 hicieron uso de tetero. Los resultados obtenidos son los siguientes:

5.5 TABLA # 5

TABLA REPRESENTATIVA DE LOS MICROORGANISMOS PRESENTES EN NIÑOS QUE LACTAN Y TIENEN HABITO DE SUCCION DIGITAL

MICROORGANISMO # DE CASOS

N # 9 (%)

S.intermedius 4 44

S.coagulasa negativa 3 33

Veillonella spp. 2 22

Bacteroides spp 2 22

Ruminococcus spp 0 0

S.aureus 0 0

Tabla 5. Microorganismos encontrados en niños lactantes y que tienen hábito de succión digital.

(48)

5.6 TABLA # 6

TABLA REPRESENTATIVA DE LOS MICROORGANISMOS PRESENTES EN NIÑOS QUE LACTAN Y USAN TETERO

MICROORGANISMO # DE CASOS

N # 7 (%)

Estreptococos viridans

5 71

Enterococcus spp.

4 57

Veillonella spp.

4 57

Peptostreptococcus spp.

3 42

S.intermedius

3 42

S.coagulasa negativa

3 42

Propionibacterium

2 28

Leptotrichia bucalis

1 14

S.aureus

1 14

Ruminococcus spp

0 0

S.beta hemoliticus

0 0

Bacteroides spp.

0 0

Actinomyces spp.

0 0

Clostridium spp.

0 0

S.saccharolyticus

0 0

Tabla 6. Microorganismos encontrados en niños lactantes y que usan tetero.

Según los resultados de las tablas se pudo observar que el microorganismo más sobresaliente fue la Veillonella spp con un 57% en los niños que lactan y usan tetero.

(49)

En el estudio, los resultados de las 14 muestras a las que se les realizó identificación de los grupos de Estreptococos viridans, utilizando las pruebas de Manitol, Voges Proskauer (VP) y Arginina dehidrolasa (ADH), indican la presencia de una alta cantidad de cepas de mutans, seguido por mitis y salivarius, esta descripción se observa en Gráfico #6, Tabla # 7 (Anexo # 10 ).

5.7 Gráfico # 6

Clasificación de Estreptococos viridans en 14 muestras

0 1 2 3 4 5

1 3 4 5 7 9 12 13 14

Numero de la muestra

Numero de cepas

E. Mutans

E. Salivarius

E. mitis

Gráfico 6. Distribución del grupo de Estreptococos viridans encontrados en las 14 muestras analizadas.

(50)

5.7.1

TABLA # 7

CLASIFICACIÓN DE ESTREPTOCOCOS VIRIDANS EN 14 MUESTRAS

# MUESTRA # COLONIA VP MANITOL ADH IDENTIFICACIÓN

001- 00103- - P P Estreptococo mutans

00104- - P P Estreptococo mutans

003- 00301- - P P Estreptococo mutans

00306- P N N Estreptococo salivarius

004- 00402- P N N Estreptococo salivarius

00407- - P Estreptococo mutans

005- 00504- N - N Estreptococo mitis

00710- N - N Estreptococo mitis

Tabla 7. Identificación del grupo de Estreptococos viridans mediante las pruebas de Manitol, Voges proskauer (VP) y Argnina dehidrolasa (ADH).

(51)

6. DISCUSIÓN

En las 25 muestras, se encontró una gran variedad de microorganismos siendo el género encontrado en una mayor proporción Estreptococos viridans 72%, seguido por Enterococcus spp 68%. Los Estreptococos tienen su hábitat principal en la cavidad oral y están claramente implicados en la colonización de superficies duras y blandas de la misma. Los Enterococcus spp, tienen una importancia dudosa en la ecológica oral, han sido aislados como parte de la microflora normal de la mucosa, el dorso de la lengua y la placa dentobacteriana.³⁷ Estos dos grupos fueron encontrados en proporciones altas en los 4 grupos distribuidos por edades, a sí mismo se encontraron Streptococcus intermedius 52%, Lactobacillus spp. 44% y Staphylococcus coagulasa negativa 44%. S. intermedius tiene una distribución muy amplia pudiendo encontrarse en la placa dentobacteriana, nasofaringe, intestino, piel etc. En el presente estudio, este microorganismo fue detectado con una alta frecuencia en el grupo 1, posiblemente debido a la lactancia materna ya que el niño mantiene en contacto con la piel del seno de la mamá. En cuanto a Lactobacillus spp. estos se aíslan principalmente de la saliva, el dorso de la lengua y la placa dentobacteriana supragingival, y, con respecto a su hábitat, otros estudios demuestran que se puede encontrar en forma constante en la boca, debido a que aprovechan las condiciones ácidas y la retentividad existente en la lesión cariosa, además se les considera invasores secundarios, son grandes productores de ácido láctico, presentan poca afinidad por las superficies dentarias y en consecuencia no se les implica en el

__________________________

37. LIÉBANA,José. U. Microbiología Oral. España: Mc-Graw-Hill,1997. P. 227,238