Planes Nacionales de Cultivos Marinos

(1)

Emilia Abellán Martínez. Coordinadora

Planes Nacionales de Cultivos Marinos

Plan Nacional JACUMAR de Espáridos (2001-2003)

Desarrollo de técnicas de cultivo de nuevas especies de espáridos:

Dentón, pargo y hurta

DENTÓN

(Dentex dentex) PARGO

(Pagrus pagrus) HURTA

(Pagrus auriga)

(2)

¾Dirección General de Pesca-Govern Balear

¾IMEDEA. CSIC

Subproyecto Pargo

Subproyecto Hurta Subproyecto Dentón

PARTICIPANTES

¾Instituto de Investigación y Tecnología Agroalimentaria (IRTA)

¾Universidad Autónoma de Barcelona. Facultad de Veterinaria

¾Consejería de Agricultura, Agua y Medio Ambiente

¾Instituto Español de Oceanografía

¾Consejería de Agricultura y Pesca. CICEM El Toruño

¾Universidad de Cádiz. Facultad de Ciencias del Mar

¾Instituto Canario de Ciencias Marinas

¾Universidad de Las Palmas. Facultad de Ciencias del Mar

¾Instituto Canario de Ciencias Marinas

¾Universidad de Las Palmas. Facultad de Ciencias del Mar

¾Instituto de Acuicultura de Torre de la Sal (CSIC)

(3)

Objetivo General

Mejorar los aspectos tecnológicos del cultivo integral de tres especies de espáridos: Dentón (Dentex dentex), pargo (Pagrus pagrus) y hurta (Pagrus auriga)

OBJETIVOS

DENTÓN

(Pagrus auriga)

(4)

OBJETIVOS

DENTÓN

(Pagrus auriga)

Objetivos parciales:

REPRODUCCIÓN. Formación de stocks de reproductores.

Desarrollo y optimización de técnicas de reproducción.

Alimentación de reproductores. Crioconservación de esperma, huevos y embriones tempranos. Estudios de diferenciación sexual.

 CULTIVO LARVARIO. Desarrollo embrionario y larvario. Desarrollo y optimización de técnicas de cultivo larvario y postlarvario:

factores ambientales, secuencias de alimentación, requerimientos nutricionales. Destete.

 PREENGORDE Y ENGORDE. Nutrición de alevines. Diseño de piensos. Relación óptima proteína/energía. Estrategias alimentarias.

Consumo de oxígeno.

 PATOLOGÍA. Elaboración de un atlas histológico. Definición de la importancia relativa de agentes patógenos asociados a morbilidad y mortalidad.

(5)

Subproyecto Hurta

ACTIVIDADES REALIZADAS

Histología de la hurta

Domesticación y 1º puesta en cautividad

Cría larvaria y preengorde

Captura, transporte,

identificación sexual y marcaje de juveniles y reproductores.

Mantenimiento

Estudios de comportamiento, crecimiento y alimentación

Cultivo Larvario

Andalucía

(6)

Subproyecto Dentón

ACTIVIDADES REALIZADAS

Baleares

Recogida de muestras para histología y

procesado

Prueba de densidad larvaria

Prueba de engorde con inmunoestimulantes

Reproducción

(7)

Subproyecto Pargo

ACTIVIDADES REALIZADAS

Canarias

Captura y aclimatación de de reproductores

Formación de lotes experimentales

Composición de las dietas y análisis

Experimentos con distintas dietas

Siembra y seguimiento de cultivos larvarios

Subproyecto Hurta

Muestreos biológicos

Talla y peso

Histología de gónadas

Identificación de sexo.

Reproducción

Captura y aclimatación

(8)

Subproyecto Dentón

ACTIVIDADES REALIZADAS

Cataluña

Captura y estabulación de reproductores y juveniles

Obtención de huevos y larvas: características de las puestas

Cultivo larvario: Ensayos para la determinación de la secuencia de

alimentación y pautas de alimentación

Elaboración de de una emulsión

enriquecedora para rotífero y Artemia.

Estudios de requerimientos en ácidos grasos

(9)

Subproyecto Dentón

ACTIVIDADES REALIZADAS

Murcia

•CONSEJERÍA DE AGRICULTURA, AGUA Y MEDIO AMBIENTE

•INSTITUTO ESPAÑOL DE OCEANOGRAFÍA

Captura y mantenimiento de reproductores

Engorde

Modelo de consumo de oxígeno en función del peso corporal, temperatura y alimentación

Patrón de actividad alimentaria. Utilización de alimentadores de autodemanda y piensos comerciales

Ampliación de especies y objetivos

Obtención y mantenimiento de reproductores

Obtención y caracterización de esperma de dentón

Estudio de la sexualidad del dentón en cautividad

Biometría y crecimiento

Cultivo larvario: Estudios de factores ambientales (fotoperiodo) y alimentación

(10)

Subproyecto Dentón

ACTIVIDADES REALIZADAS

Valencia

• INSTITUTO DE ACUICULTURA

DE TORRE DE LA SAL Aprovisionamiento de puestas

Optimización del cultivo larvario

Definición de la temperatura de cultivo

Definición de protocolos de suministro y calidad de presas vivas

Análisis de ácidos grasos en larvas

Aislamiento e identificación de patógenos bacterianos

(11)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

- REPRODUCCIÓN:

 Formación y mantenimiento de stocks de reproductores (Cataluña, Murcia)

 Caracterización del esperma de dentón (volumen, densidad, movilidad y pH)

Volumen (n= 54) 1.9±1.9 ml/stripping/macho

pH (n= 44) 7.85±0.34

Concentración (n= 52) 8.28±2.53 x 10⁹spz/ml Movilidad (n= 49) 2.8±0.9

Duración (n= 49) 4´56”±2´55”

Proteínas (n= 23) 7.19±3.45

Presión osmótica (n= 32) 396±28 mOsmol/kg Cloruros (n= 26) 162,7±19,1 m mol/l Sodio (n= 11) 183±9.1 m Eq/l Potasio (n= 10) 3.3±0.59 m Eq/l

Características generales del esperma de dentón

(12)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

 Recogida de muestras para estudios de reproducción y diferenciación sexual (histología y procesado) (Baleares, Murcia):

¾ Bisexualidad juvenil en dentón: 49.8% hembras, 40.8 machos, 2.6%

hermafroditas y 6,7% inmaduros indeterminados. Se confirma la presencia de hermafroditismo rudimentario en el dentón en el medio natural

¾ Las gónadas primitivas aparecen a los 72 días de edad y durante los primeros 200 días de vida no se ha detectado diferenciación sexual

(13)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

Obtención de puestas: características de las mismas (Cataluña, Murcia)

Diámetro (mm) 1.052+0.027 1.125 – 0.95

Peso seco (μg) 44.81+4.37 53.00 –

34.92

Volumen huevo (mm³) 0.611+0.047 0.746 – 0.449

Volumen gota de grasa (mm³)

0.0063+0.00 08

0.0082 – 0.0042

Peso seco (μg) 6.28+1.52 8.3 – 3.7

Diámetro (mm) 1.052+0.027 1.125 – 0.95 Peso seco (μg)^a 38.53

Huevo Max - Min

Corion

Vitelo

Volumen vitelo (mm³) 0.611+0.047 0.746 – 0.44

(14)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

- CULTIVO LARVARIO:

 Densidad larvaria inicial. Las mejores supervivencias (15 días) se consiguieron con 50 larvas/l (Baleares)

Los mejores resultados en cuanto a supervivencia se consiguieron a una intensidad de 200 lux (Murcia)

 El crecimiento en talla fue significativamente superior cuando se utilizó el sistema de cultivo extensivo. El porcentaje de peces con deformaciones esqueléticas fue mayor en el tanque intensivo (52.17%) que en el extensivo (42.86%) (Cataluña)

 Las supervivencias fueron mayores a la temperatura de 20ºC. A 16ºC el cultivo no es viable (Valencia)

(15)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

 Alimentación:

¾ Prueba con diferentes densidades de rotífero (5, 10 y 15 rotíferos/ml) y dosis.

• El número máximo de rotíferos ingeridos es similar para todas las larvas de la misma edad

• La densidad de rotífero sólo permite aumentar el porcentaje de larvas alimentadas

• La mortalidad mas elevada ocurrió entre los 10-12 días

• Las supervivencias al día 50 variaron entre 1.7 y 3.2 % (Cataluña 2001)

E d a d (d ías )

0 5 10 15 2 0 2 5 30 3 5

Talla (mm)

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

T alla (m m )

Peso seco

( μ

g)

0 2 0 00 4 0 00 6 0 00 8 0 00 1 0 00 0 1 2 00 0 1 4 00 0 P e so (μg)

Crecimiento en talla y peso seco

0 2 4 6 8 1 0 1 2 1 4 1 6 18

% LA

0 2 0 4 0 6 0 8 0 1 0 0 1 2 0

5 ro t/m l 10 ro t/m l 15 ro t/m l

Porcentaje de larvas alimentadas

(16)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

 Alimentación:

¾Prueba con diferentes densidades de rotífero

• Las larvas alimentadas con 15 rotíferos/ml crecieron y consumieron un mayor número de rotíferos

• El crecimiento en talla y peso es menor para la densidad de 15 rotíferos/ml

• Sólo las larvas alimentadas con 15 rotíferos/ml muestran un mayor número de rotíferos ingeridos (Cataluña)

Crecimiento en talla y contenidos digestivos en los tres grupos experimentales

Porcentaje de larvas alimentadas

Edad (días)

2 4 6 8 10 12 14 16 18

Nº rotiferos/larva

0 20 40 60 80 100

Talla (mm)

-2 0 2 4 5 rot/ml 6

10 rot/ml 15 rot/ml

Edad (días)

2 4 6 8 10 12 14 16 18

% LA

0 20 40 60 80 100 120

5 rot/ml 10 rot/ml 15 rot/ml

(17)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

 Alimentación:

¾Prueba con diferentes dosis de rotífero (2, 3 y 4 dosis)

• No hay diferencias significativas en talla y peso en los diferentes tratamientos.

Las larvas alimentadas con 2 dosis tienen mayor contenido de rotífero en el digestivo

¾Aclaramiento de digestivo: las larvas alimentadas con rotífero tardan, aproximadamente 4 horas en vaciar el digestivo

¾ Estudio de requerimientos en ácidos grasos. Se han realizado experimentos de enriquecimiento de rotífero y Artemia utilizando 4 tipos de aceites, 3 tipos de emulsionantes, 3 dosis de enriquecedor y 5 tiempos de enriquecimiento

(18)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

 Alimentación:

¾ Punto de no retorno:

•Las larvas supervivientes que habían estado en ayuno 8 y 9 días fueron capaces de alimentarse de nuevo (Cataluña)

• Las larvas Comienzan a alimentarse por primera vez a los 4 días de edad a 18ºC y la edad de 3 días a 19ºC

• La muerte por inanición a 18ºC se produce a los 11 días desde la eclosión

• El punto de no retorno se produce a los 7 días a 18ºC y a los 5.2 días a 19ºC ( Murcia)

Tasa ingestión

y = -11,35x + 98,75 R² = 0,9797

0 10 20 30 40 50

0 2 4 6 8 10

Edad (días)

Ingestión (%)

Tasa de ingestión

y = 426,85e^-0,6603x R² = 0,9434

0 5 10 15 20 25 30 35 40

0 2 4 6 8

Edad (días)

Ingestión (%)

(19)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

 Alimentación

¾ Influencia de la densidad de presas vivas

• Las larvas comienza a comer al tercer día tras la eclosión a 19ºC y al segundo día a 21 y 22.5ºC

• La larva come mas eficazmente a los 4 y 5 días de edad a 19ºC y a los 2 y 3 días a 21 y 22.5ºC

• La densidad inicial de rotífero no debe ser inferior a 5 rotíferos/ml

19 ºC

0 10 20 30 40 50 60

3 4 5 6

D A Y S ( a f t e r h a t c h i n g )

2 1ºC

0 10 20 30 40 50 60

2 3 4 5

D A Y S ( a f t e r h a t c h i n g ) 4

2 2 . 5 ºC

0 10 20 30 40 50 60

2 3 4 5

D A YS ( a f t e r h a t c h i n g )

1 r ot / ml 2 , 5 r o t / ml 5 r ot / ml 7 , 5 r o t / ml 1 0 r o t / ml

19 ºC

0 1 2 3 4 5 6

3 4 5 6

2 1ºC

0 1 2 3 4 5 6

2 3 4 5

2 2 . 5 ºC

0 1 2 3 4 5 6

2 3 4 5

1 r ot / ml 2 . 5 r o t / ml 5 r ot / ml 7 . 5 r o t / ml 1 0 r o t / ml

% FED LARVAENºROT/ FED LARVA

19ºC

22.5ºC 22.5ºC

21ºC 21ºC

19ºC

(20)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

- NUTRICIÓN, ALIMENTACIÓN PREENGORDE Y ENGORDE:

¾ Nutrición. Prueba de engorde con inmunoestimulantes

• Los análisis histológicos muestran que existe una tendencia a una menor presencia de sanguinicólidos y trichodínidos y quistes de epiteliocistis en branquias en los grupos alimentados con macrogard y vitamina E

• La suplementación con macrogard confiere una protección a los peces frente al estrés y enfermedades parasitarias e infecciosas, aumentando el nivel de inmunoglobulinas en sangre (Baleares)

Immunoglobulines

0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 2,50 3,00 3,50 4,00 4,50 5,00

C M VC VE

mg/ml

Proteïnes totals

50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70

C M VC VE

mg/ml

(21)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

- NUTRICIÓN, ALIMENTACIÓN PREENGORDE Y ENGORDE:

¾Adaptación de ejemplares capturados a pienso utilizando comederos de autodemanda

¾ Comparación de engorde en ejemplares mantenidos en tanques circulares y rectangulares. Los resultados muestran que a igualdad de talla, los ejemplares mantenidos en tanques circulares tienen mayor peso (Murcia)

(22)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

- NUTRICIÓN: Sargo picudo

¾ Efecto del contenido en lípidos en el pienso

• El mejor crecimiento y aprovechamiento nutritivo se obtuvieron con una dieta que contenía el 7% de lípidos

• No parece que en esta especie se consiga el efecto ahorrador de proteínas mediante el aumento de contenido en la dieta

¾ Efecto del contenido en lípidos en piensos comerciales en la biometría, composición corporal y aprovechamiento nutritivo de la dieta

• El nivel de lípidos en la dieta no influye significativamente sobre el crecimiento y la ingesta. Sin embargo, con el 22% de lípidos, una ingesta algo menor y un crecimiento en peso algo mayor conducen a una disminución significativa del índice de conversión.

•Teniendo en cuenta el precio de los piensos comerciales probados, el coste al producir un kg de pescado es un 26 % inferior cuando se utiliza la dieta con mayor contenido en lípidos (Murcia)

(23)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

- MANEJO, COMPORTAMIENTO Y OTROS:

¾ Atlas histológico del dentón. Se ha realizado la descripción anatómica, histológica e histoquímica (carbohidratos y proteínas) y el estudio ultraestructural tanto de barrido como de transmisión del sistema digestivo (Baleares)

Digestive tract of dentex dentex

Pyloric caeca of Dentex dentex. (b) 3 pyloric caeca. (c). 4 pyloric caeca

(24)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

¾ Actividad alimentaria

• Durante el verano esta especie es estrictamente diurna (máxima actividad entre las 10 y las 12 del mediodía)

•En primavera la máxima actividad corresponde a las primeras horas de luz

• En términos generales, la actividad alimentaria de esta especie, se concentra al amanecer y crepúsculo coincidiendo con el comportamiento general de los grandes depredadores (Murcia)

Patrón de actividad alimentaria durante el verano en el dentón. La barra superior negra y blanca indica los períodos de luz (día) oscuridad (noche).

Tiempo (Horas)

Actividad alimentaria (NºDemandas/10 min.)

(25)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

¾ Modelo de consumo de oxígeno en función del peso, temperatura y alimentación

• Se han desarrollado 4 ecuaciones (CO en reposo, con alimentación, medio diario y máximo debido a la alimentación)

• Se determina un valor máximo en torno a los 26ºC

• El patrón diario y el efecto de la alimentación es similar al de otras especies

• Las necesidades energéticas son bastante superiores (el CO en rutina es un 40%

superior y con alimentación casi un 80%

(Murcia)

L

0 50 100 150 200 250

12 14 16 18 20 22 24 26 28 30

Temperatura ºC

Consumo de Oxígeno (mg O2/h)

COAmax

COA COA

COR Topt.=26ºC

.

Evolución de cuatro niveles de consumo de oxígeno (mg O₂/h) en el dentón. Las curvas se han estimado para un ejemplar de 500 g de peso corporal, a partir de los modelos desarrollados. COR: consumo de oxígeno de rutina; COD: consumo de oxígeno medio diario; COA:

consumo de oxígeno con alimentación; Consumo de oxígeno máximo con alimentación.

(26)

Subproyecto Dentón

RESULTADOS

- MANEJO, COMPORTAMIENTO Y OTROS:

¾ Se ha estudiado el comportamiento respiratorio y la respuesta progresiva a la hipoxia en función del peso, temperatura y alimentación

• Los valores de oxígeno supriores al 65% son óptimos

• Entre el 35 y 65 % el dentón puede conseguir el oxígeno mediante mecanismos ventilatorios y circulatorios

• Por debajo del 35 % los niveles son peligrosos (Murcia)

O (%)

T (ºC) 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 13

16 19 22 25 28

ÓPTIMO

PRECAUCIÓN

LETAL PELIGROSO

L

(27)

Subproyecto Hurta

RESULTADOS

-CAPTURA DE REPRODUCTORES: Se han capturado, seleccionado marcado ejemplares juveniles y adultos. Se han estabulado en tanques raceway en circuito semicerrado provistos de filtro biológico.

- ESTUDIOS DE COMPORTAMIENTO: Se han realizado estudios de crecimiento y alimentación (tasas de alimentación adecuadas en función del tamaño del pez y la temperatura del agua)

(28)

Subproyecto Hurta

RESULTADOS

- REPRODUCTORES: La primera madurez ocurre cuando la talla es de 30 cm - OBTENCIÓN DE PUESTAS:

¾ Se consiguieron entre el 31 de agosto y el 8 de enero (2002), septimbre-mayo y otoño (2003)

¾ Se obtuvieron 4.6x10⁶huevos con un porcentaje de fecundación del 65% y de eclosión del 61% y un porcentaje de flotabilidad media del 69.2 %. (T^a 20-22ª). En el 2003 se consiguieron 10 x10⁶ de huevos. La tasa de eclosión media fue de 75.3±22.5

¾ A los 3-4 días las larvas alcanzan una talla de 3.2 mm y un peso seco de 16 μ g

¾Hasta el día 30 el crecimiento es rápido y de naturaleza exponencial; las larvas a esta edad tienen un peso seco de 2.5 mg y la supervivencia es del 60 %

¾ A los 60 días alcanzan pesos comprendidos entre 1.8 y 3.7 g y la supervivencia media es de 0.3 % con un máximo de 2.2 % (Andalucía)

(29)

Subproyecto Hurta

RESULTADOS

- CULTIVO LARVARIO: Se ha estudiado el efecto de la intensidad lumínica ( 400 y 800 lux) sobre el desarrollo larvario de la hurta. El crecimiento larvario y la supervivencia durante los primeros 30 días de cultivo fue afectado significativamente por la intensidad.

-PREENGORDE: Se engordaron un total de 1200 hurtas, con un peso inicial de 2-3 g, en tanques de 10-12 m³. Transcurridos 80 días el peso final fue de 20g. El crecimiento es el doble del alcanzado en dorada e inversamente proporcional a la densidad de cultivo. El índice de conversión del alimento varió entre 0.71 y 3.40.

Las mortalidades fueron inferiores al 2 % - ENGORDE EN JAULAS:

-HISTOLOGÍA: Estudios sobre histofisiología de la hurta. Se han examinado gónadas, hígado y branquias. Se han realizado aproximaciones histoquímicas:

(proteínas, glicoconjugados, lípidos) e histoenzimáticas (fosfatasa ácida y alcalina) (Andalucía)

(30)

Subproyecto Hurta

RESULTADOS

MUESTREOS BIOLÓGICOS: Entre enero y diciembre se han muestreado 188 ejemplares (talla, peso, sexo, estado de madurez y peso de las gónadas)

- SEXUALIDAD:

 Las hembras son significativamente mas abundantes que los machos

 La proporción de individuos de cada sexo varía con la talla:

¾ Las hembras son mas abundantes que los machos en longitudes inferiores y los machos en superiores

¾ Los intersexuales, poco frecuentes, se distribuyen en las tallas intermedias -REPRODUCCIÓN

 Los mayores porcentajes de individuos que presentan estado de prepuesta, puesta y postpuesta se encuentran entre septiembre y marzo

 El índice gonadosomático alcanza los valores mas elevados entre septiembre y febrero

 La talla media de la primera madurez corresponde a 455 mm (Canarias)

(31)

Subproyecto Pargo

RESULTADOS

¾Captura y aclimatación de reproductores

¾ Formación de lotes experimentales

¾ Suministro de dietas experimentales: análisis

¾ Recolección y cuantificación de las puestas obtenidas: determinación de número de huevos por kg de hembra y día, porcentaje de eclosión, porcentaje de supervivencia larvaria al tercer día (Canarias)

(32)

Subproyecto Dentón

CONCLUSIONES

REPRODUCCIÓN

¾ Se ha conseguido un número importante de reproductores (CARM) contribuyendo al abastecimiento y formación de stocks en otras CCAA participantes en este proyecto

¾ La reproducción no tiene problemas, obteniéndose puestas espontáneas con facilidad. Para ello es necesario disponer de un número suficiente de ejemplares adaptados a la cautividad

CULTIVO LARVARIO

¾ Los resultados obtenidos sobre condiciones y sistemas de cultivo (temperatura, densidad larvaria inicial, intensidad de luz etc) unidos a los procedentes de investigaciones previas nos permiten una mayor aproximación a los parámetros óptimos de cultivo, aumentando las posibilidades de éxito del mismo

¾ Los resultados obtenidos en alimentación (tipos y calidad de presas vivas, densidad, dosis, enriquecimiento etc) permiten contribuir a la definición de la secuencia óptima de alimentación y establecer un protocolo y estrategia de alimentación adecuada

(33)

Subproyecto Dentón

CONCLUSIONES

Es necesario investigar en el manejo y nutrición de

reproductores para conseguir puestas de calidad que

permitan mayores supervivencias y calidad larvaria. Se

recomienda también investigar sobre las necesidades

nutritivas en larvas

(34)

Subproyecto Dentón

CONCLUSIONES

NUTRICIÓN, ENGORDE Y COMPORTAMIENTO

¾ Se han establecido los parámetros de cultivo (consumo de oxígeno, comportamiento respiratorio y patrón de actividad alimentaria)

¾ Diseñado dietas y estrategias de alimentación

¾ Tipo de tanque mas adecuado para el engorde

¾ Estos resultados permiten abordar con mas posibilidades de éxito y mayor rendimiento el engorde de esta especie

(35)

Subproyecto Hurta

CONCLUSIONES

¾ Obtención de reproductores y domesticación: adaptación a las condiciones de cautividad. Se ha establecido la calidad mas adecuado del agua para esta especie

¾ Se han conseguido por primera vez puestas en cautividad y realizado los primeros ensayos de cría larvaria y preengorde

¾ Estudio de la biología reproductiva de la hurta en Canaria:

 hermafroditismo proterogínico

 Proporción macho:hembra 1:6.13

 Período de reproducción (septiembre- febrero)

 Talla de la primera madurez (400-500 mm)

(36)

Subproyecto Hurta

CONCLUSIONES

Para aumentar las supervivencias larvarias y conseguir

mejores resultados en la fase de engorde es necesario

desarrollar técnicas específicas en las diferentes fases del

cultivo: Establecer condiciones de cultivo y determinar

requerimientos nutritivos

(37)

CONCLUSIONES

Los resultados de este proyecto han generado 13 publicaciones 20 comunicaciones a Congresos Nacionales e Internacionales y 1 tesis doctoral