Influencia de la ingestión calostral sobre algunos parámetros hematológicos en el neonato bovino

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(1)l^l. G 3 9 0-3. Instituto Colombiano. gropeuario. Centro de tiocumentaciin CEISA. INFLUENCIA DE LA INGESTION CALOSTRAL SOBRE ALGUNOS PARAMETROS HEMATOLOGICOS EN EL NEONATO BOVINO. WmLIOTECA A FE CLQj. 25N. ¡qqq. SANDRA CRISTINA ROMERO MARTIN LUZ ANGELA VEGA MORALES. SANTAFE DE BOGOTA, D.C. UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA 1992.

(2) Instítuto Cocmbiro. '1. Centro de Vocum3ntcl CEISA. INFLUENCIA DE LA INGESTION CALOSTRAL SOBRE ALGUNOS PARAMETRÜG HEMATOLOGICOS EN EL NEONATO BOVINO. MGOPCUA(EI4. 25. FUC U)QO. SANDRA CRISTINA ROMERO MARTIN LUZ ANGELA VEGA MORALES. Trabajo presentado corno requisito parcial para optar al título de Médico Veterinario Director: Rafael Neira Rairán. SANTAFE DE BOGOTA, D.C. UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA 1992.

(3) '1 Nota de Aceptación. Presidente del Jurado. Santafé de Bogotá, Mayo 29 de 1.992.

(4) DIRECTIVAS DE LA UNIVERSIDAD. RECTOR:. HNO. JUAN VARGAS MUFOZ. VICERECTOR ACADEMICO:. HNO. JOSE ARCADIO BOLIVAR. DECANO DE LA FACULTAD:. DR. FERNANDO VILLAFAFE. SECRETARIA ACADEM 1 CA:. DRA. DORA CARO DE HERNANDEZ. DIRECTOR DEL TRABAJO:. DR. RAFAEL NEIRA RAIRAN. PRESIDENTE DEL JURADO:. DR. JORGE ALMANSA. JURADO:. DR. MANUEL ALVAREZ RICO DR. GUSTAVO RAVE VALENCIA.

(5) Artículo 8: Ni la Universidad de la Salle, ni el comité de trabajos de grado se hacen responsables de las ideas expuestas por los graduantes..

(6) AGRADECIMIENTOS A los Doctores Rafael Neira y Manuel Alvarez por su orientación y estímulo para llevar a término nuestro trabajo. A los Doctores Martha Carpintero s Jorge Almansa y Jaime Orjuela por su valiosa y oportuna ayuda a lo largo del trabajo. A los Doctores Claudia Marín y Andrés colaboración en el trabajo de campo.. Correa por su. Al Doctor Hernando Flórez por su apoyo desintertesado durante la realización del experimento. A los seores Lucio Salazar y Julio González, personal técnico del Laboratorio de Patología Clínica del CEISA por su ayuda durante los aos de trabajo. A todo el personal Profesional, Técnico y Auxiliar del CEISA que de una u otra forma contribuyeron a la elaboración de esta tesis..

(7) DEDICATORIA. A mis padres y hermanos por su apoyo,. comprensión y porque hicieron posible la culminación de esta etapa tan importante de mi vida. Luz Angela. mis padres, mi hermana Diana y Jairo, por el amor, respaldo y colaboración que me ofrecieron durante mi etapa universitaria principalmente en la elaboración de esta tesis. Sandra Cristina.

(8) TABLA DE CONTENIDO. Página INTRODUCCION. 1. 1.. OBJETIVOS. 4. 1.1. GENERAL. 4. 1.2. ESPECIFICOS. 4. 2.. REVISION DE LITERATURA. 5. 2.1. DESARROLLO INMUNE PRENATAL. 5. 2.1.1. Inmunidad celular. 5. 2.1.2. Interacción materno--fetal. 8. 2.2. INMUNIDAD POSTNATAL. 12. 2.2.1. Perfil eritrocitario. 12. 2.2.2. Perfil leucocitario. 17. 2.2.3. Perfil proteínico. 20. 2.3. INMUNIDAD PASIVA. 25. 3.. MATERIALES Y METODOS. 28. 3.1. UBICACION. 28. 3.2. DISEO EXPERIMENTAL. 28. 3.2.1. Fincas. 28. 3.2.2. Animales experimentales. 29. 3.2.3. Toma y procesamiento de las muestras. 29. 3.2.3.1 Hemograma. 31 0. 3,2.3.2 Proteinorama. 31. 3.3. 32. ANALISJ.S ESTADISTICO.

(9) .,jJOTECA AGROPECUARIA. Pág 4.. RESULTADOS. 33. 4.1. ERITROGRM. 33. 4.1.1. Recuento eritrocitico. 33. 4.1.2. Hematocrito. 33. 4.1.3. Hemoglobina. 34. 4.1.4. Reticulocitos. 34. 4.1.5. Indices Eritrocíticos. 34. 4.1.5.1 Volumen Corpuscular Medio. 34. 4.1.5.2 Hemoglobina Corpuscular Media. 35. 4.1.5.3 Concetración de Hemoglobina Corpuscular Media.. 35. 4.2. LEUCOGRM. 36. 4.2.1. Recuento Leucocitario. 36. 4.2.2. Recuento diferencial. 36. 4.2.2.1 Línea Granulocitica. 36. 4.2.2.2 Línea fgranulocitica. 36. 4.3. PROTEINOGRM. 38. 4.3.1. Proteínas séricas totales. 38. 4.3.2. Fraccionamiento Electroforético. 39. 4.3.2.1 Albúmina. 39. 4.3.2.2 l fa-globulinas. 39. 4.3.2.3 Beta-globulinas. 40. 4.3.2.4 Gamma-globulinas. 40. 4.3.2.5 Relación lbúmina-Globulinas. 4'. 5.. DISCUSION. 42.

(10) Pág 6.. CONCLUSIONES. 52. 7. RECOMENDACIONES. 54. BIBLIOGRÇFI ANEXOS. 55.

(11) CONTENIDO DE TABLAS Páqina la. 2.. 3.. ERITROGRAMA. Valores promediados de bovinos neonatos Holstein en las cinco edades de muestreo.. 33. LEUCOGRAMA. Valores promediados de bovinos neonatos Holstein en las cinco edades de muestreo.. 3t:,. PROTEINOGRAMA. Valores promediados de bovinos neonatos Holstein en las cinco edades de muestreo.. 38.

(12) CONTENIDO DE FIGURAS. Página 1.. 2.. 3.. 4.. 5. 6.. 7.. B.. Niveles de Eritrocitos, Hematocrito y Volúmen Corpuscular Medio en bovinos neonatos durante las cinco edades de muestreo.. 33. Niveles de Hemoglobina y su Concentración Media Corpuscular en las cinco edades de muestreo.. 34. Recuento total y diferencial de Leucocitos en bovinos neonatos durante las cinco edades de muestreo.. 36. Niveles promedio de Leucocitos Inmaduros de terneros neonatos en las cinco edades de muestreo.. 36. Relación Linfocito - Neutrófilo de terneros neonatos en las cinco edades de muestreo.. 46. Cambios en la concentración de Proteína total y su fraccionamiento en las cinco edades de muestreo.. 38. Perfil Electrofortico e inmunoelectrofortico de las proteínas séricas de un neonato bovino antes de la ingestión calostral. lbúmina(1,2) Alfa-giobuiinas (3,4), Beta-globulinas (5) y Gamma-globulinas (6).. 49. Relación Albúmina - Globulinas de terneros neonatos en las cinco edades de muestreo.. 41.

(13) * It1'E. *G1OPECUtA. LISTA DE ANEXOS 1.. Variación estadística de Eritrocitos en relación con la edad. 2.. Variación estadística del Hematocríto en relación con la edad. 3.. Variación estadística de Hemoglobina en relación con la edad. 4.. Variación estadística de Reticulocitos en relación con la edad. 5.. Variación estadística de VCM en relación con la edad. é.. Variación estadística de HOM en relación con la edad. 7.. Variación estadística de CHCM en relación con la edad. S.. Variación estadística de Leucocitos en relación con la edad. 9.. Variación estadística de metamielocitos en relación con la edad. 10,. Variación estadística de bandas en relación con la edad 11.. Variación estadística de Mielocitos en relación con la edad. 12.. Variación estadística de Neutró-filos en relación con la edad. 13.. Variación estadística de Eosinófilos en relación con la edad. 14.. Variación estadística de Basó-filos en relación con la edad. 15.. Variación estadística de Linfocitos en relación con la edad. 1. Variación estadística de Monocitos en relación con la edad 17.. Variación estadística de Proteína sérica en relación con la edad. 18.. Variación estadística de Albúmina en relación con la edad.

(14) 19. Variación estadística de ?fa-g1obu1inas en relación con la edad. 20.. Variación estadística de Beta-globulinas en relación con la edad. 21.. Variación estadística de Gamma-globulinas en relación con la edad.

(15) Instituto Colombiano. ou rm. Centro de Vocum3fltacin CEISA. INTRODUCCION. La especie bovina, es quizás dentro de las especies productivas, la más estudiada a través del tiempo no solamente a nivel mundial sino en Colombia. Sin embargo, la mayoría de las investigaciones realizadas en el país a pesar de lo abundantes e importantes han tenido la tendencia a ser puntuales y aisladas, sin tener en cuenta el concepto moderno y multifactorial de salud animal considerando al bovino como el elemento principal de un sistema de producción.. El propósito -fundamental de todo sistema de producción ante la adecuada. demanda de su producto es la obtención de una. rentabilidad o ganancia que puede resultar de la calidad y cantidad del producto o por los ba j os costos de su producción. Considerando cada uno de los factores o ambos, es deber del Médico Veterinario contribuír a la generación y adopción de la tecnología necesaria para aumentar la productividad de la industria bovina.. La investigación pecuaria ha generado a nivel mundial y nacional gran cantidad de tecnología principalmente relacionada con ganado de leche. Aunque pueda existir algún interés por la adopción de la tecnología generada, la mayoría se hace en forma errónea ya que se aplica pre-ferencialmente la tecnología.

(16) 2 foránea, dada para las razas puras en los países de origen sin tener en cuenta las condiciones ecológicas, nutricionales, de manejo y socioculturales de las regiones • en las que estan siendo explotadas.. La investigación nacional o regional o la validación de la investigación -foránea es pilar básico para el desarrollo de la industria pecuaria en cada uno de sus niveles.. Considerando que el bovino es el principal elemento dentro del sistema. de. producción. es. importante. relacionar. las. investigaciones en cada una de sus etapas de desarrollo haciendo énfasis en el recién nacido, ya que de la tecnología que se genere y aplique en él, dependerá la calidad futura del bovino productor (leche o carne).. En nuestro medio es muy poca la importancia que se ha dado tradicionalmente al bovino recién nacido ya que siempre ha tenido prioridad la salud y el rendimiento del animal adulto sin tener en cuenta que las investigaciones en el neonato bovino se pueden enfocar bien sea como ayuda para la evaluación retrospectiva del manejo y condición sanitaria de la madre o como ayuda en la determinación de las condiciones necesarias para la selección del futuro elemento productor reduciendo en esta forma los costos que i.mpliarian la cría y el levante de.

(17) animales que no van a ser aptos para la producción en el fu tu ro.. Con el desarrollo de este trabajo se pretende sondear la situación de los neonatos bovinos en nuestro medio, bien sea para contribuir al establecimiento de criterios de referencia y determinar los. parámetros de selección o para reflejar la. calidad del manejo que las explotaciones bovinas estan recibiendo en un área específica como es la Sabana de Bogotá. Esto tiene gran importancia pues se han reportado datos de mortalidad de un 3 a 107. en Estados Unidos que representarían aproximadamente una pérdida en la ganancia neta del hato de un 387., datos que en las diferentes regiones de Colombia no existen..

(18) 4 .J. çS. Ve. 1. OBJETIVOS. 1.1 GENERAL. - Determinar la influencia de la ingestión calostral y de la edad del neonato bovino sobre los valores hematológicos.. 1.2 ESPECIFICOS. - Iniciar el establecimiento de parámetros hematológicos que puedan ser utilizados para evaluar el estado clínico del neonato bovino.. - Ampliar la información sobre el comportamiento inmunológico del neonato bovino.. - Promover la utilización del laboratorio como ayuda en el diagnóstico clínico del neonato bovino.

(19) 2. REVISION DE LITERATURA. 2.1 DESARROLLO INMUNE PRENATAL. 2.1.1 Inmunidad celular. En la eta p a prenatal de los bovinos la respuesta inmune celular aparece antes que la humoral y las células que hacen parte de este sistema se originan de la célula pluripotencial. Esta última se deriva del saco vitelino al inicio de la gestación y aproximadamente a los quince. días pos tconcepción. migra al hígado y bazo para continuar con su. diferenciación. (5, 36, 57 5 58. 68). Las células que incluyen. este grupo son. células fagocíticas o efectoras y precursores de. eritrocitos,. megacariocitos, granulocitos, macrófagos y linfocitos. Los precursores de linfocitos son liberados en la circulación y transportados a sitios específicos para su diferenciación posterior. El timo forma un microambiente adecuado para la maduración de linfocitos T, siendo el principal elemento de la inmunidad. celular (58, 59). Los linfocitos 8 abandonan la. médula ósea, van directamente al tejido linfoide y se observan a los 45 días en. circulación, a los 51 días en ganglios. linfáticos, a los 65 días en bazo y a los 110 días en tejido linfoide. intestinal, constituyendo del 50-60% del total de. los leucocitos. 58).. Estas. células predominan en la.

(20) circulación sanguínea hasta los 130 días. de gestación, y. contribuyen con mecanismos de defensa en las primeras fases de la vida fetal. (70).. En el. bazo, a los 55 días. gestación, se observan reticulocitos y. a los 59 días, células. productoras de inmunoglobulinas (2, 58, 68) diferenciación se muestra en el siguiente. de. El proceso de. cuadro:. DESARROLLO INMUNOLOGICO DEL FETO BOVINO. Días 42 45 55 59 130 130 135 145 155 175. Orqano Timo Linfocitos en sangre Bazo Células que contienen inmunoglobulina M Ganglios linfáticos Inmunoglobulina M en suero Granulocitos en sangre Células que contienen inmunoglobulina 8 Inmunoglobulina 8 en suero Eritrocitos Tejidos linfoides del tracto gastrointestinal. Tomado de: Schultz, R.D. 1973 Además de los mecanismos de defensa mencionados anteriormente, existe un sistema proteíco que se incrementa progresivamente aportando niveles de complemento sérico a través de las beta globulinas. Esto contribuye a la protección del feto en su ambiente intrauterino debido al estado agamaglobulinémico en el que se encuentra (8, 9 , 12. 15, 25, 38, 44, 57. 76, 77). Las funciones biológicas del complemento pueden ser usadas como respuesta individual inespecífica ya que existen dos vías de activación.. En animales clínicamente sanos la activación.

(21) 7 prenatal del complemento es a. través de la vía alterna debido a la ausencia de inmunidad específica y ocurre a los 90 días de g estación (5. 31 1 39 1 46. 47. 57). acción enzimática. Esta se inicia por. de las fracciones C3 y C5 que provoca la. separación de los productos C3a, C3b, C5a y C5b.. Una vez. activada la cascada, se forma el com p lejo de ataque de la membrana, cuya función es producir lisis de agentes extraos. Cada uno de los componentes tiene funciones diferentes; es así COMO. el C3a y el C3b reaccionan contra las anafilotoxinas, el. C3a. es un importante mediador de la inflamación, el C5a se. identificó. como una importante sustancia quemotáctica que. aumenta en primer lugar el número de células fagocíticas en el sitio de la infección (54). El C3b también tiene una importante función en la muerte de los organismos fagocitados. El C5b, unido a los factores C6 al C9, provoca lisis de bacterias Sram negativas.. Los sistemas de protección anteriormente mencionados son de origen celular e independientes de la estimulación antigénica ya que no se encuentran inmunoglobulinas por traspaso de la circulación activación. materna a la fetal.. específica ya sea materna, fetal o por agentes. microbianos, el. feto reacciona dependiendo de la naturaleza. del antígeno que encontrándose. Sin embargo, si existe. haya atravesado la barrera placentarie,. cantidades considerables de inmunoglobulinas. como mecanismo protectivo (5, 14, 24, 34, 38, 43, 57 9 58,68),.

(22) e que estimulan también. la vía alterna del complemento por. intervención de anticuerpos IgA y por alQun . as moléculas de 1gB (7). Las. inmunoglobulinas que se han identificado son Igil,. 1 g B e Iq A, previa estimulación antigénica con agentes tales COMO. los virus de IBR y DVB y con la Brucella abortus. Los. fetos responden a la infección por Brucella abortus y por virus de Parainfluenza-3 al cuarto mes de gestación, al virus de IBR al sexto (68).. y al de DVB después del séptimo mes de Además, se han encontrado niveles de. fetos infectados can DVB (46).. interferón en. A medida que el. fetal continúa, se incrementa el número de. gestación. desarrollo. antígenos que. pueden despertar la respuesta inmune hasta que al nacimiento, el animal tiene la capacidad de reaccionar a gran número de inmunógenos aunque su sistema no sea del todo maduro (5), como se aprecia en el siguiente cuadro: RESPUESTA HUMORAL DEL FETO BOVINO Días 120 141 165 190. Tipo de respuesta Anticuerpos Anticuerpos Antícuerpos Anticuerpos. contra contra contra contra. P13 Parvavirus Rinotraqueitis DVB. Tomado de: Banks, K.L. 1989. 2.1.2 Interacción materna-fetal Los métodos de transferencia de la inmunidad materna son diferentes para cada especie y se relacionan con el tipo de.

(23) •JØTECA AGJWPECUAR placenta.. 9. En general, los animales que tienen pocas capas de. te j ido que separan la circulación materna de la fetal, tienen gran transferencia de inmunidad en el itero. Los bovinos tienen un tipo de placentación epiteliocorial que hace que no exista transferencia de inmunoglobulinas de la circulación materna a la fetal, haciendo que esta se realice a través del calostro (5. 9, 15. 22, 25 3 47, 57,. 58, 66). A pesar de lo. anterior, la placenta tiene funciones muy importantes en la protección ya que los te j idos fetales tienen antígenos de histocompatibilidad dados por el padre y que son reconocidos como extraPos por la madre. Esta produce anticuerpos y linfocitos citotó><icos contra esos antígenos fetales pero su respuesta inmune no provoca efectos dainos al feto porque la p lacenta absorve los anticuerpos y. las células citotóxicas.. La inefectividad de los linfocitos se. debe a productos. inmunosupresivos del feto como la fetoproteína, esteroides derivados de la placenta y de la madre a antígenos. progesterona. La reacción inmune fetales puede prevenir abortos e. incrementar el tamafÇo del feto (5).. Una infección fetal temprana puede tener tres consecuencias. Primero, un mecanismo de defensa inadecuado que permite la libre replicación de provocando su. muerte.. organismos que daPan. los tejidos,. Segundo, puede resultar en una. infección persistente durante el transcurso de la g estación que puede continuar durante la vida neonatal o adulta. En estas.

(24) 10 infecciones se puede inducir tolerancia inmunoló q ica porque sola muy pocas cantidades del antígeno o ninguna puede. ser. identificada (17, 24). Y por último, cuando el feto ha diferenciado sus linfocitos, tiene la capacidad de reaccionar contra agentes invasores, reconociendo a su vez los antígenos inmunodominantes que aparecieron cuando estos se identificaron (5). Durante la gestación, la transferencia de inrnunoglobulinas del suero materno a la glándula mamaria ocurre por la unión con los receptores de la superficie celular epitelial, endocitosis, transporte a través de las células y exocitosis dentro de los conductos acinares. La 1gB disminuye en el suero de la madre, mientras las IgM e IgA no disminuyen, indicando que existe síntesis dentro de la glándula mamaria. Esta es realizada por las células plasmáticas en el estroma mamario subepitelial, liberándolas al epitelio glandular (5, 51, 52, 53, 63, 71).. Estas inmunoglobulinas ayudan a la protección de los terneros hasta que los componentes celular y humoral funcionan efitientemente (58). Las inmunoglobulinas IqM e IgA juegan un papel importante en la respuesta de la glándula mamaria bovina. Además, activan los mecanismos de defensa del ternero joven (63, 76)..

(25) 11 Existen estudios en los cuales se ha cuantificado el movimiento de proteínas. de la sangre al calostro, encontrándose que 2. meses antes. del parto, los niveles de proteína en sangre. empezaron a elevar-se como consecuencia del incremento en los niveles de. beta-2 y alfa-1 globulinas; 4 semanas antes del. parto, las. proteínas llegaron al máximo para luego disminuir. al nivel mínimo en el momento del parto. de albúmina,. beta-1 y beta-2. Los niveles séricos. globulinas no cambiaron. preciablemente (67).. La concentración de inmunoglobulinas en leche bovina, cae rápidamente a niveles bajos durante los primeros 3 días de lactancia y es poco probable que contribuya a la defensa local del tracto alimentario después de las primeras semanas (63). Por tal motivo la profilaxis del tracto intestinal solo se logra estimulando tempranamente la inmunidad local con la ingestión de calostro (4).. La transferencia de inmunoglobulinas del suero de la madre al calostro empieza cerca de las 4 semanas antes del parto (55), y aumenta progresivamente con la edad de la madre (47, 48, 40 80). Pierce, citado por Opdebeeck (55), demostró que la glándula mamaria bovina tiene selectividad por el transporte y concentración de 1gB..

(26) 12. 2.2 INMUNIDAD POSTNATAL. El período de tiempo transcurrido en un ternero, desde su nacimiento hasta los 28 días, está incluido dentro de la denominación de neonato. cambios. Este se enfrenta a una serie de. -fisiológicos tras el retiro de la. placentaria. haciéndolo. infecciosas, debido. más. a la. susceptible inmadurez de. a sus. circulación enfermedades mecanismos. protectivos y a la iniciación tardía de la inmunidad específica (10). Es por ello que se requiere de la generación de anticuerpos y células mediadoras de defensa, independientes de la transferencia pasiva.. Una vez ingerido el calostro se. observan cambios inmunes en el neonato ya que además de inmunoglobulinas, este ofrece protección a través de células como macró-fagos. linfocitos T en aproximadamente el 50% y linfocitos B en aproximadamente el 357., que se mueven a través del intestino ayudando a estabilizar el sistema linfoide y que responden a estimulación. antigénica y mitogénica (15, 53,. 56,78). Estas células proveen al recién nacido de inmunidad celular mediada por la madre y se. suspende hasta que las. células maternas son rechazadas por el. neonato probablemente. hasta que. (5, 38, 66).. SLt. respuesta inmune es madura.. 2.2.1 Perfil eritrocitario.

(27) 13 Dentro de las variaciones que surgen durante la etapa neonatal del bovino, las. correspondientes a. hematológicos, son. los constituyentes. muy importantes y se relacionan con la. edad.. Es así como Greatorex y Holman (67), reportaron datos sobre cambios eritrocíticos ocurridos con el incremento de la edad, en terneros de Gran Bretaa. Estos. animales al nacimiento. tenían altos niveles eritrocíticos. que -fueron disminuyendo gradualmente. hasta. alcanzar. los. del. aproximadamente entre 18 y 36 meses de edad.. adulto. (3),. Aunque se. hallaban en alto número, no dieron muestra de inmadurez (67), contrario a lo descrito por Fraser, citado por Schalm, quien observó reticulocitos en un 1.47 aunque sin aumento para el segundo día postnatal.. Sin embargo, se reportan resultados. menores del 1% de reticulocitos en terneros neonatos, poca frecuencia de normoblastos y alteraciones en el tamaPo de los eritrocitos (anisocitosis). Greatorex coincidió en afirmar que la. anisocitosis. puede. observarse. a cualquier. edad,. particularmente en las semanas tempranas de vida (67). Según gar y Smith citado por King, los eritroci tos de los animales recién nacidos son metabólicamente más activos que los de los adultos este incremento en la actividad podría deberse a la. población de células jóvenes o a la presencia de. reticulocitos (31). El tamao del eritrocito se incrementa gradualmente a partir de los 4 meses, en contraposición a la.

(28) 14 gradual disminución en su número (65. 67).. El tamao medio. del eritrocito fetal (VCM) disminuyó a lo largo. de la. gestación y hasta 3 ó 4 meses luego del nacimiento. Esta reducción coincide con la desaparición de la hemoglobina fetal, la cual tiene mayor afinidad por el oxigeno que la hemoglobina adulta. (65,67).. Holman, reportado por Schalm (67), observó. una correlación negativa entre el tamafo y. el número de. eritrocitos,. lo. mecanismo. compensatorio. para. cual el. hemtocrito y la concentración media de hemoglobina corpuscular se mantienen estables. Es así como el hematocrito disminuyó a 34-38% y la CMHC se mantuvo aproximadamente en 32 7., pero la HOM aumentaba o disminuía en relación con los cambios en el tamo del eritrocito. En terneros de un día de nacidos la HCM fué 13.3 ± 1.3 picogramos.. Las variaciones en el porcentaje del hematocrito y en la concentración de hemoglobina son descritos por varios autores. Inicialmente Meneses y Rodríguez (40) en un estudio realizado en vacas Hoistein y 3ersey, concluyeron que hacia los primeros meses de vida y antes del debido a que al momento del. ao los valores eran superiores nacimiento los animales poseen. menor número de eritrocitos pero de mayor volumen. Esta afirmación es contraria a la citada por Schalm, quien encontró que el volumen porciento de eritrocitos y la hemoglobina están relativamente altos al nacimiento, disminuyendo notoriamente con la ingestión de calostro, como. resultado de la dilución.

(29) 15 del plasma. Estos niveles permanecen altos durante los primeros meses de vida y antes del aF'o. Al avanzar la edad se normalizan llegando a un promedio del 321 para hematocrito y 10.7 q/dl de hemoglobina.. Finalmente ocurre una ligera. disminución del hematocrito conforme aumenta la edad sin variar la concentración de hemoglobina y con un comportamiento inverso para la CMHC (19, 40).. Holñan (40) describe que el aumento en. los valores del. hematocríto y de la hemo g lobina, surge como mecanismo compensatorio para satisfacer la demanda de oxigeno después del nacimiento. Aunque una vez nacen, la hemoglobina disminuye y no exactamente por una deficiencia nutricional, sino más bien por la relativa anoxia intrauterina y la destrucción de la hemoglobina fetal (11).. Los niveles del hematocrito y de la hemoglobina al nacimiento, son reseados por MacMurray y Logan en un estudio realizado con 6 terneros de carne e donde encontraron valores de 42.87. de hematocrito y. 12.93 g/dl de hemoglobina al nacimiento, que. disminuyeron en un 25% hacia las 96 horas de vida, iniciando el descenso a la segunda hora postparto (39, 42).. Un factor. importante. que altera. la. concentración. de. hemoglobina, el tamao y el número de eritrocitos en la sangre de. los neonatos es la concentración de hierro en las madres.

(30) Instut Co!ornbian. grcpCcuari3. (entra ¿le tiocumentaci5n CEISA. 1. 16. durante la gestación. Una vez nacen es común la deficiencia de hierro debido al bajo contenido en la leche y baja reserva al nacimiento, hecho que puede corregirse mediante suplementación 64, 67, 73).. (11, 37,. Según Holman, citado por Bremner (11), la concentración de hemoglobina también se afecta con el régimen alimenticio. Los neonatos bovinos alimentados con dietas tradicionales de leche y comida sólida presentan una de 12.9 q/dl al nacimiento a. disminución en la hemoglobina 10.4 g/dl a la semana de edad,. manteniendo éste nivel hasta los dos aPos de edad.. Los cambios en el eritrograma, descritos anteriormente, son ocasionados por dos causas primordiales. La primera, por el estado de deshidratación presente al nacimiento (8). La segunda, como respuesta al grado de hipoxia del neonato, el cual desencadena una policitemia compensatoria y un aumento en los niveles de 2,3 difosfoglicerato, un intermediario de la glicólisis anaerobia en los eritrocitos, que compite por la hemoglobina fetal presente en el recién nacido. De ésta forma se facilita la captación de oxígeno en los tejidos sin liqarse a la. hemoglobina.. permanecen. Los niveles de 2,3 difosfoglicerato. altos aproximadamente durante el primer mes de. vida, para luego disminuir progresivamente hasta alcanzar los niveles adultos, más o menos a los 3 meses de edad, hecho que coincide con el desarrollo del rumen y con el cambio de la.

(31) asøLIOECA 4GØPECUARI4 COL OM9M IM hemoglobina fetal a la adulta (5, 8, 28. 66). 2.2.2 Perfil leucocitario En los leucocitos de los neonatos bovinos tambien ocurren importantes cambios. Holman, citado por Schalm (67) expresó, que aunque el conteo promedio de leucocitos en terneros es similar al de los adultos, hay una alta población con leucocitosis fisiológica con pocos conteos por debajo de 6.000 células/pl.. (81) realizó un experimento con terneros Holstein a los. cuales. les suministró calostro, encontrándose valores. leucocitarios de 11.400 cel/pi en animales menores de un dia de edad al día octavo, el conteo había disminuido hasta 8.000 cel/l y finalmente, a los 28 días el conteo se encontraba en 6.900 cel/il. Comparando con los resultados anteriores, Bouda (8) encontró valores de 10.400 cel/tl el primer día, antes de la ingestión calostral, de 9.800 cel/il el día 7 y de 8.800 cel/pl el día 21, coincidiendo con los datos previamente reportados durante la etapa neonatal.. En otro experimento realizado por LaMotte y colaboradores (34), utilizando terneros recién nacidos, con y sin suministro de calostro, encontraron diferencias significativas en el número total de leucocitos en los dos grupos. terneros. calostrados el. número de. En el grupo de. leucocitos disminuyó. significativamente en las 6 primeras horas para luego aumentar.

(32) 18 en forma considerable (± 17500 cel/l) en las siguientes 6 horas, constituyendo así la mayor elevación del número de leucocitos a las 12 horas. Posteriormente hubo un descenso progresivo hasta las 36 horas. estabilizándose aproximadamente en 9800 cel/pl hasta el final del experimento (28 días). En el grupo de terneros no calostrados los recuentos mostraron una tendencia a disminuir a partir de las 6 horas, llegando a estabilizar-se a partir de las 24 horas y hasta el final del experimento (28 días) en aproximadamente 8000 cel/pl. De esta manera demostró la influencia de la ingestión de calostro sobre los valores leucocitarios del bovino neonato.. Es importante recalcar que los leucocitos ejercen un papel esencial en el recién nacido, pues en él hay una mayor presentación de enfermedades infecciosas y una menor resistencia contra agentes patógenos, aunque a medida que se incrementa la edad el neonato se hace más resistente. Este hecho se relaciona con la maduración celular, los mecanismos de defensa y la activación de los polimorfonucleares en la destrucción y fagocitosis de bacterias (2, 81).. LaMotte demostró, que. los neutrófilos son. relativamente. fagocitos ineficientes al nacimiento, pero esta actividad mejora rápidamente.. Esto puede ser el resultado de una. opsonización pobre por la ineficiencia de inmunoglobulinas (33).. Moberg, citado por Schalm (67), encontró que el conteo.

(33) 19 total de. leucocitos y el número absoluto de neutrófilos,. linfocitos y monocitos disminuye con la edad. en comparación. codn los eosinófilos que tienen un comportamiento inverso (32, 79). Al nacer, los terneros tienen patrones leucocitarios que indican una alta concentración de glucocorticoides, que provoca leucocitosis con neutrofilia, linfopenia, monocitopenia y. eosinopenia, el compararlos con los valores de animales. adultos (13). Estos niveles altos de corticoides al nacimiento, están seguidos por una rápida disminución, aunque la hipótesis de que el incremento de neutrófilos después del parto como respuesta a la hipercortisolemia no está comprobada (34).. Desde el momento del nacimiento el número de neutrófilos supera al de linfocitos, debido posiblemente a la liberación de la hormona adrenocorticotrópica por la madre como consecuencia del estrés del parto (6, 67). Sin embargo LaMotte (34), re.laciona este hecho con la ingestión de calostro, el cual podría tener algun factor que estimula aumento del plasmas cosa que no ocurre en los terneros no calostrados. Este aumento conduce a la hemodilución, seguida por la liberación de granulocitos en sangre periférica (33).. Los neutrófilos se ven influenciados por el consumo. de. calostro, es así como 6-12 horas postingestión se nota un incremento marcado de sus valores y de la actividad fagocitaria.

(34) 20 (33). El número de linfocitos circulantes es bajo en el recién nacido, debido a la relativa inmadurez de sus órganos linfoides (67, 69). Según datos de Holman los linfocitos representan solo el 331 del recuento diferencial leucocitario al nacimiento, el 72% a las cuatro semanas y entre el 50-60% hacia los 2 aos de vida (67).. Morrison (45) ' y Meneses y Rodríguez (40) coinciden con la afirmación anterior, es decir que hay un menor porcentaje de linfocitos en los primeros aPos de vida el cual va aumentando de acuerdo con la edad.. El número de eosinó-filos circulantes encontrados también varia con la edad éste aumento puede deberse al contacto con alergenos, desarrollando una especie de respuesta tardía (40). Los monocitos se incrementan durante la primera semana de vida, hasta cerca del doble del valor encontrado al nacimiento. Sin embargo, el recuento. de monocitos parece. que no. esta. influenciado por la edad (67).. 2.2.3 Perfil protenico. De acuerdo con el punto isoeléctrico de cada una de las proteínas constituyentes, el suero bovino está dividido en cuatro fracciones electroforéticas, variando así la movilidad.

(35) 21 de la albúmina y de las diferentes globulinas, influenciadas por la ingestión de calostro. Estas proteínas se sintetizan en el hígado, sistema reticuloendotelial, células linfoides y plasmáticas; su función es la de mantener la presión osmótica, catabolizar reacciones bioquímicas. mantener el balance ácido-básico, defensa, nutrición y transporte. La concentración de estas proteínas séricas aumenta con la edad; es así como al nacimiento la cantidad de proteínas es ba j a existiendo una relación muy amplia entre albúmina y globulinas, a favor de la primer-a. La composición de las proteínas y su cantidad en el calpstro dependen de la nutrición, edad, estado de salud de la madre y período de tiempo en el cual es ingerido (40). En la separación electroforética, la fracción inicial, más prominente y que migra con mayor rapidez corresponde a la albúmina que constituye entre el 35 y 50% de la proteína total Le. siguen las alfa globulinas que incluyen las alfa-1. lipoproteínas, alfa-1 antitripsina y alfa-1. glucoproteina. ácida. Las alfa-2 están constituidas por lipoproteína, alfa2. macroglobulina,. haptoglobina,. ceruloplasmina. eritropoyetina. Las beta globulinas constan de. y. transferrina,. e hemopexina, complemento (C3), ferritina, proteína C reactiva, fibrinógeno y properdina (29). Los niveles del. complemento. disminuyen drásticamente una vez el ternero nace.. Esta. disminución tiene varias explicaciones; primera, los neonatos son expuestos a numerosas sustancias y el organismo. debe. activar este sistema para aumentar la resistencia a agentes.

(36) 22 infecciosos; seQunda, en neonatos que han consumido calostro SE. han reportado complejos inmunes de inmuno q iobulinas. y. lactoglobulinas generados en la glándula mamaria. Este complejo inmune puede activar la cascada del complemento y disminuir la actividad hemolítica y ba j ar los niveles de C3 (29, 4). Las gamma globulinas se encuentran constituidas principalmente por inmunoglobulinas en su mayoría del tipo 6, la cual se encuentra en concentraciones superiores para la especie bovina, constituyendo una parte importante de la inmuniad humoral (28, 29, 50).. La concentración sérica de albúmina previa a la ingestión de calostro es de 1.5 g/dl con un incremento a 22.5 g/dl al mes de edad (38,49). Si al momento de la ingestión, el calostro contiene una gran cantidad de globulinas, estas son rápidamente absorbidas, situación que eleva la concentración de proteínas séricas de 4.4 g/dl a 7g/d1 durante cinco ingestiones repetidas (7). En el caso de tener niveles de proteínas inferiores a g/dl, el animal será propenso a sufrir enfermedades sistémicas hasta llegar a la muerte (49). Estos niveles pueden regularse mediante hormonas; es el caso de la hormona del crecimiento que actua en el tejido. aumentando la deposición de proteínas y. disminuyendo la excreción de nitrógeno (67).. Cuando un neonato bovino está frente a un proceso febril, se producen pérdidas de nitrógeno asociadas con un incremento en.

(37) 23 la salida de energía; de ésta forma aumenta la actividad adrenocortícal alterando la concentración de proteínas (67).. LaMotte, midió el nivel de proteína total sérica en un grupo de terneros alimentados con calostro y otro privado de él. Se observó un aumento de las proteínas totales en el grupo alimentado con calostro hacia las 24 horas, manteniéndose este nivel aproximadadamente hasta la hora 144 (34). El aumento de las proteínas totales tras la ingestión calostral es debido principalmente a la absorción de globulinas, actividad que cesa 24-36 horas luego del nacimiento (34, 40, 49). El grupo privado de calostro mostró una disminución en el valor de proteínas totales hacia las 24 horas, principalmente refle j ado en los niveles de albúmina y alfa globulinas presumiblemente como resultado de la hemodilución, inducida por el consumo de la leche, con un. incremento significativo 8.1 sexto día; la. concentración de albúmina para los dos grupos tuvo un comportamiento similar, disminuyendo su valor a las 24 horas para incrementarse al cabo de 144 horas (9, 34).. Tras una electroforesis sérica, LaMotte et al, encontraron que del valor total de p roteína, la fracción beta-2 presentaba inmunoglobulinas del tipoA y ti, las fracciones beta-1. beta-2 y gamma principalmente componentes del complemento, mientras que en la fracción gamma predominmaba la 1g62. Estas Igs son transferidas por 'lía calostral , empezando de ésta manera a.

(38) 24 predominar el componente inmune (34). Los valores de gamma globulina sérica al nacimiento fueron menores de 0.2 q/dl, mientras Pierce (34) reportó que la gamma globulina corresponde al 1.4% de la proteína total del suero, es decir 0.05 g/dl. El nivel inicial de beta-1 globulinas al nacimiento fué de 0.47 g/dl, al cabo de 24 horas el nivel se incrementó hasta 0.62 g/dl, -finalmente hacia las 144 horas alcanzó un valor de 0.73 g/dl.. La fracción beta-2 inicialmente se comportó igual que. la anterior; es decir, al nacimiento el valor fue de 0.06 gr/dl para luego elevarse hasta 0.24 g/dl a las 24 horas. Finalmente, el valor disminuyó a 0.19 g/dl a las 144 horas. La concentración de gamma globulinas inicialmente se encontró en 0.03 g/dl al nacimiento, a las 24 horas su valor se incrementó hasta 0.17 g /dl para disminuir a 0.13 g/dl a las 144 horas (34) . En el grupo de terneros neonatos que fueron privados de calostro se presentaron concentraciones de beta-1 globulinas de 0.5 gr/dl, sosteniendo estos niveles a las 24 horas (0.49 g/dl). A las 144 horas hubo un leve incremento a 0.57 g/dl. La concentración de beta-2 globulinas se incrementó levemente de 0.07 g/dl al nacimiento a 0.09 g/dl a las 24 y 144 horas. La concentración de gamma globulinas al nacimiento fue de 0.02 g/dl; al cabo de 24 horas se elevaron a 0.04 g/dl y finalmente, a las 144 horas se obtuvieron niveles de 0.03 g/dl.. Estas niveles de. globulinas presentaron marcadas. diferencias al compararlos con los resultados obtenidas en los terneros a los que se les suministró calostro..

(39) 25. Es así como LaMotte (34), con base en terneros alimentados con calostro, reporta valores de 0.062 g/dl de IgM al nacimiento, incrementando su nivel a 0.988 g/dl a las 24 horas, para disminuir por lo menos al 50% para el sexto día (0.044 g/dl). Para la IgGl se presentan niveles de 0.05 mg/ml al nacimiento, 2.886 g/dl a las 24 horas para terminar en 2.342 g/dl a 144 horas. Los niveles de 1 q 62 al nacimiento correspondieron a menos de 0.019 q/dl, elevando esta cifra a 0.34 g/dl, 24 horas después. Finalmente, a las 144 horas el valor se encontró en 0.242 g/dl. Como era de neonatos privados de. esperarse en el grupo de terneros. calostro, las concentraciones de IgM,. IgGi e 1g82 presentaron. niveles menores a los descritos. anteriormente (34).. 2.3 INMUNIDAD PASIVA. El recién nacido posee inmunidad específica e. inespecífica,. que lo defiende de agentes infecciosos los cuales normalmente son cata bol izados para desarrollar una respuesta inmune primaria (16, 21, 62), existen factores responsables del incremento de la susceptibilidad del neonato a enfermedades, especialmente de origen viral y bacteriano. Uno de esos factores es el grado de estrés al que repentinamente se enfrenta el recién nacido, al pasar de un medio acuático que mantenía su respiración, nutrición, metabolismo y. temperatura.

(40) 26 a un medio hostil en el que debe regular su temperatura, alimentarse respirar por si mismo y defender su organismo contra agentes patógenos (3). Otras causas posibles de la marcada susceptibilidad del ternero neonato, además de la mencionada anteriormente son:. transferencia. Primero, la. pasiva de anticuerpos retarda la. activación de la respuesta. inmune a antiqenos específicos (15, 68).. Esto es cierto. específicamente con anticuerpos de tipo IgG. que son los que. predominan en el calostro bovino (8 31, 34, 47, 48, 49, 53, 63,. 68,80);. segundo,. una. inadecuada. absorción. de. inmunoglobulinas del calostro ya sea por demora en el tiempo de ingestión, por poca. cantidad. concentración de inmunoglobulinas en el. ingerida o por. baja. calostro (23, 38, 47,. 48, 57, 61, 74. 76); tercero, la disminución. puede ser. ocasionada por competencia entre microorganismos intestinales e inmunoglobulinas por un receptor común en la e p itelio intestinal (72); cuarto, una mala. célula del. síntesis de los. receptores de membranas celulares inducidos por desaceleradores metabólicos como el cortisol, que evita que no haya reciclaje de los receptores de lg, disminuyendo la eficiencia de la absorción (72); quinto, se presume que la baja temperatura. disminuye la capacidad de absorción de. inmunoglobulinas a través del intestino (77).. En el. neonato bovino, la absorción. de los anticuerpos. calostrales no es selectiva durante las primeras 24 horas de.

(41) 27 vida, ya que son transportados a través de las células en vacuolas no libres (5, 14 5 15, 23, 25, 28, 36, 47 49 61, 63, 74, 75). Existen autores que indican que el transporte de inmunoglobulinas es selectivo y que requiere de la fijación de éstas en la membrana de la vesícula endocitica, para garantizar el transporte a través de las células y evitar así la digestión intracelular (36 72). Se han dado explicaciones para las diferentes apariciones de inmunoglobulinas en sangre. Puede ser por una diferencia en la. rata individual de. transporte de las inmunoglobulina, a. través del epitelio. celular o por competencia en la célula epitelial, ya que existe diferencia extra e intravascular entre las inmunoglobulinas (36). A demás existe diferente rata de cierre del. intestino. para cada una de las inmunoglobulinas (74).. El paso de las macromoléculas desde el lúmen intestinal a la sangre se realiza mediante su internalización por parte de las células del epitelio intestinal, transporte y expulsión dentro de la circulación sistémica con paso de inmunoglobulinas que permiten proteger al neonato de una exposición indiscriminada a agentes patógenos (15, 74, 75, 76). Las moléculas arandes son absorbidas por el conducto linfático y las pequeRas por la circulación sanguínea. aparentemente. a. través de capilares. venosos. Las moléculas más pequeas. incluyendo fragmentos de inmunoqlobulinas, son excretadas por el rión ocasionando proteinuria transitoria en los neonatos (5, 76, 77)..

(42) 3. MATERIALES Y METODOS. 3.1 UBICACION. Para la realización de esta investigación se utilizaron fincas de la Sabana de Bogotá, localizadas en los municipio de Chia Tenjo y Zipaquirá, cuyas condiciones edafológicas regionales son: - Altitud 2600 msnm - Temperatura diaria promedio de 14 grados centígrados - Pluviosidad anual promedio 1059 mm. - Topografía plana. Las muestras recolectadas se procesaron en el Laboratorio de Patología Clínica del Centro de Investigaciones en Salud y Producción Animal (CEIBA). Instituto Colombiano Agropecuario ICA. Bogotá.. 3.2 DISEO EXPERIMENTAL. 3.2.1 Fincas. Se seleccionaron 4 fincas de ganado Holstein de alto mestizaje todas con registros de producción, tamao, número de animales y manejo similares..

(43) 29 El estudio tuvo una duración de. dos aos.. Se inició en el. primer semestre de 1990 y continuó hasta el segundo semestre de 1991. Los datos que se obtuvieron de las madres se tomaron de información recopilada en los registros llevados por las -fincas durante el tiempo de la investigación.. 3.2.2. Animales experimentales. Se estudiaron 155 neonatas bovinos por un periodo de dos aos tiempo que duró la recolección de muestras desde el día 1 hasta el día 28. de edad, divididos en cinco grupos así: El grupo 1. constituido por 91 animales recién nacidos y muestreados antes de la ingestión calostral; el grupo 2 constituido por 20 animales; el grupo 3, incluye 11 animales entre 13 y 24 horas de edad; el grupo 4, 17 animales mayores de 1 día hasta el séptimo día y el grupo 5, constituido por 16 animales de cero o iguales a 28 días, incluyendo un examen clínico general.. 3.2.3 Toma y Procesamiento de las Muestras. Las muestras se obtuvieron por medio de. punción en la vena. yugular externa según la técnica descrita por Schalm, 1975, utiÍiando tubos de ensayo al vario. La sangre se tomó con anticoagulante (EDT) y sin él, antes (día 0) y después de la ingestión calostral (de 1-12, 12-24 horas, 2-7 día, mayores de.

(44) ; () 7 hasta los 28 días) con el fin de hacer las siguientes determinaciones.. 3.23.1 HemoQrama. Recuento Eritrocitar-io: Para este fin se utilizó. un contador. de células electrónico, obteniéndose el resultado en número de eritrocitos por microlitro.. Hematocrito: Para esta determinación se utilizó la técnica descrita por Schalm en 1975, basada en centrifugación de la sangre en tubos capilares a 12000 Xg/min. o técnica de microhematocrito, obteniéndose el resultado en porcentaje.. 2.. Hemoglobina: Se utilizó un hmoglobinómetro sistema. fotoeléctrico,. obteniendo. el. basado en un resultado. en. gramos/decilitro.. Recuento de Reticulocitos: Se realizó en el extendido sanguíneo, utilizando la coloración de Azul Brillante de Cresilo en solución salina y expresado como porcentaje del total de eritrocitos por microlitro de sangre.. Coulter Counter. Goulter Electronics inc. Hialeah. Florida, USA. Coulter Hemoglobinometer. Hialeah. Florida. USA.. Coulter Electronics inc..

(45) 31 Indices Eritrocíticos: Se determinaron Volumen Corpuscular Medio (femtolitros), Hemoglobina Corpuscular Media (picopramos) y concentración de Hemoglobina Corpuscular Media (porcentaie). Recuento Leucocitario: Se siguió la misma metodología y el mismo equipo utilizados. para el recuento. obteniéndose los resultados. eritrocitario,. en número de leucocitos por. mi crol itro.. Recuento Diferencial: Se realizó mediante examen microscópico del extendido sanguíneo con coloración de Wright para la identificación y conteo de leucocitos teniendo en cuenta además su morfología y la de la línea eritrocitica.. 3.2.3.2 Proteinograma. Proteínas Totales: Se determinaron mediante el sistema de refracción de la luz, para lo cual se utilizó el refractómetro de Goldberg . Los valores resultantes se expresaron en gramos/decilitro.. Fraccionamiento Electroforético: Para la evaluación de. los. diferentes componentes proteínicos del suero se utilizó la. o. Buffalo, N.Y. 14215..

(46) 32 técnica de electroforesis en tiras de acetato de celulosa. La cuantificación de cada fracción se realizó mediante el análisis densitométrico y su respectiva gricación. Los valores para cada fracción proteinica se expresaron coma porcentajes del total de las proteínas; luego se convirtieron en cantidades absolutas (g/dl), se promediaron y se determinaron las desviaciones estándar.. En aquellos casos de dificil identificación de las fracciones beta o gamma globulinas en neonatos precalostro, en utilizó latécnica de Inmunoelectroforesis mediante un suero patrón.. 3.3 ANALISIS ESTADISTICOS. Los valores obtenidos se analizaron en la división de Biometria de la Subgerencia de Investigación del Instituto Colombiano Agropecuario, ICA mediante el paquete estadístico Statistical nalysis System (SPS). Se realizaron análisis de correlación y de varianza, para cada uno de los grupos de edad con las variables ya relacionadas. Además, se empleó análisis de regresión para predecir los valores de las mismas. Finalmente se disearon curvas del comportamiento hematológico en los terneros recién nacidos mediante el programa Harvard Preentation Graphics (HPG).. Dual-Wavelength Fling-stop Scanner CS 9000.

(47) 4. RESULTADOS. 4.1 ERIT+OGRAMA. 4.1.1 Recuento eritrocitico. En la Tabla 1 se presentan los valores p romediados de los recuentos eritrocíticos para las cinco edades consideradas. En la Figura 1 se observa el comportamiento de dichos valores notándose, en los terneros menores de 12 horas y antes de la ingestión calostral, un valor promedio de 6.93 ± 1.18 X 10 cel/pl. Este valor se fue incrementando de acuerdo con la edad hasta alcanzar la cifra de 8.23 ± 2.78 X 10. cel/l hacia el. séptimo día, para finalmente disminuir hasta 7.4 ± 0.93 X 10 cel/l hacia los 28 días de edad. Sin embargo, estos valores estadísticamente no (P>0.05). presentaron diferencias significativas. (Anexo 1).. 4.1.2 Hematocrito. Los valores promediados del hematocrito se muestran en la Tabla 1 y en la Figura 1 observándose un comportamiento más o menos lineal de dichos valores, con un ligero incremento al llegar a los 28 días de edad. Estadísticamente estos valores no presentaron diferencias significativas (P >0.05) (Anexo 2)..

(48) TABLA 1 -. ERITROGRAMA. VALORES PROMEDIADOS DE BOVINOS NEONATOS HOLSTEIN EN LAS CINCO EDADES DE MUESTREO. PARAMET. EDAD 1. EDAD 2. EDAD 3. EDAD 4. EDAD 5. ERITROC. 4.93 x10 /j1 ± 1.18. 7.16 ± 1.8. 7.46 ± 3.08. 8.23 ± 2.77. 7.40 ± 0.93. RETIC. Y.. 0.11 ± 0.17. 0.09 ± 0.11. 0.12 ± 0.16. 0.12 ± 0.22. 0.07 ± 0.12. HTO Y.. 40.52 ± 7.02. 38.40 ± 5.28. 40.91 ± 8.87. 39.65 ± 6.29. 41.06 ± 4.82. HB r/d1. 11.70 ± 2.95. 11.97 ± 2.26. 12.40 ± 2.87. 12.98 ± 2.92. 13.43 ± 2.22. VCM -fi. 58.17 ± 10.95. 55.49 ± 10.59. 58.49 ± 11.96. 51.18 ± 11.54. 55.42 ± 3.08. HCM pcq. 17.04 ± 4.03. 17.11 ± 3.21. 18.33 ± 5.62. 16.51 ± 3.6. 18.19 ± 2.19. CHCM Y.. 29.21 ± 4.92. 31.10 ± 3.66. 30.86 ± 5.82. 32.8 ± 5.68. 32.71 ± 3.57. 1. EDAD 1: Pr p calostro. (n 91). EDAD 2: 1-12 horas post-calostro. (n 20). EDAD 3: 13-24 horas post-calostro. (n 11). EDAD 4: 2 a 7 días de edad. (n 17). EDAD 5: 8 a 29 días de edad. (n 16).

(49) FIGURA 1 -NIVELES DE ERITROCITOS, HEMATOCRITO Y VCM EN BOVINOS NEONATOS DURANTE LAS CINCO EDADES DE MUESTREO ChE X1O fu. 45 43. 7. 41 39. 3. 37. 1. 35 1. 2. 3. 4. ERITROCITO EMI HE1ATOORITO ___ vcri. 5.

(50) 34 4.1.3 Hemoglobina. Los valores de la hemoglobina, obtenidos en las cinco edades, y su comportamiento se presentan promediados en la Tabla 1 y en la Figura 2. En ellas se puede apreciar un incremento progresivo de los valores, que aunque bastante manifiesto, estadísticamertte no mostró diferencias significativas (P >0.05) entre las edades (nexo 3).. 4.1.4 Reticulocitos. Los resultados obtenidos de los recuentos porcentuales de reticulocitos en las cinco edades se presentan en la Tabla 1. Aunque los valores promediados obtenidos fueron bastante bajos y estadísticamente no hubo diferencias significativas entre grupos de edad (F > 0.05) (nexo 4), vale la pena destacar el ligero incremento presentado entre el primero y séptimo día. 4.1.5 Indices Eritrocíticos. 4.1.5.1 Volumen Corpuscular Medio (VCM). En la Tabla 1 y Figura 1 se presentan los valores promediados del Volumen Corpuscular Medio de los eritrocitos obtenidos en los muestreos de las cinco diferentes edades. Se destaca la tendencia progresiva a disminuir con la edad, salvo un ligero.

(51) FIGURA 2 -NIVELES DE HEMOGLOBINA Y SU CONCENTRACION MEDIA CORPUSCULAR EN LAS CINCO EDADES DE MUESTREO CHIVO %. HEMOGLOBINA gr/dl. 15. Qç. 14. 33 (. 13 12. 29. 11. 27. 11. 1. 2. 4. 3 GRUPO DE EDADES. ___ HEMOGLOBINA. Li. CHCM. 5. 25.

(52) 35 incremento en. El. tercer muestreo, correspondiente a terneros. menores de un día. En el análisis estadístico (P > 0.05) no se encontraron variaciones significativas entre las diferentes edades (nexo 5).. 4.1.5.2 Hemoglobina Corpuscular Media (HCM). Los resultados promedio de la hemoglobina corpuscular media se encuentran en la Tabla 1 y su comportamiento durante la etapa neonatal. Se puede apreciar una ligera tendencia a aumentar pero en el análisis estadístico (P >0.05) no se encontraron diferencias significativas (Anexo 6).. 4.1.5.3 Concentración de Hemoglobina Corpuscular Media (CHCM). Los valores promediados de la hemoglobina corpuscular media se presentan en la Tabla 1 y en la Figura 2. Se puede apreciar su tendencia a aumentar en forma progresiva con la edad durante los 28 días. A pesar de ser bastante evidente este incremento, en el análisis estadístico (P > 0.05) no se encontraron diferencias significativas entre las edades consideradas (nexo 7)..

(53) 4.2 LEUCOGRAMA. 4.2.1 Recuento leucocitario. Los valores obtenidos del recuento leucocitario total en cada una de las edades del período neonatal se encuentran promediados en la Tabla 2 y en la Figura 3. Se aprecia Un ligero incremento posterior ala ingestión de calostro para luego ir disminuyendo gradualmente hasta los 28 días de edad. Estos. valores estadísticamente. (F. >0.05). no. muestran. diferencias significativas entre las edades de muestreo (nexo 8).. 4.2.2 Recuento diferencial. 4.2.2.1 Línea Granulocítica. En la Tabla 2 se presentan los resultados promedios de los valóres obtenidos para la línea granulocítica, incluyendo las células inmaduras (mielocitos, metamielocitos y bandas neutrofílicas). En la Figura 4 se observa el comportamiento de las células inmaduras en la que se puede observar un incremento progresivo de los metamielocitos (juveniles) y las células en banda, las cuales al ser analizadas estadísticamente (P <0.05) mostraron diferencias altamente significativas en relación con la edad de muestreo (nexo 9 y 10). Mientras que el número de.

(54) TABLA 2 - LEUCOGRAMA. VALORES PROMEDIADOS DE BOVINOS NEONATOS HOLSTEIN EN LAS CINCO EDADES DE MUESTREO. FARAMET. EDAD 1. EDAD 2. EDAD 3. EDAD 4. EDAD 5. LEUCOCI. 11137.36 ce1/t1 ± 4245.2. 12125 ± 4086.2. 10036.36 ± 4893.7. 10211.8 ± 3855. 9050 ± 3341.6. MIELOC.. 6.05 ± 1.32. 5.36 ± 0.92. 6.17 ± 1.55. 5.58 ± 0.81. METAMIE. 0.80 Y. ± 1.45. 1.70 ± 3.1. 2.81 ± 5.83. 3.35 ± 4.01. 1.19 ± 1.6. BANDAS 7.. 5.70 ± 9.87. 6.72 ± 11.96. 10.12 ± 12.24. 4.5 ± 7.21. NEUTROF. 46.35 Y. ± 17.77. 37.6 ± 23.06. 40 ± 25.84. 34.47 ± 20.31. 30.31 ± 13.95. BASOFIL. 0.39 Y. ± 1.1. 0.25 ± 0.55. 0.27 ± 0.47. 0.35 ± 0.78. 1.0 ± 0.89. EOSINOF. 0.42 Y. ± 1.34. 0.60 ± 1.14. 1.45 ± 2.80. 0.65 ± 0.70. 0.56 ± 1.21. LINFOCI. 46.48 Y. ± 17.16. 49.20 ± 19.39. 44.90 ± 23.2. 48 ± 14.2. 80.7 ± 12.83. MONOCIT. 0.86 Y. ± 1.43. 1.10 ± 1.52. 1.27 ± 2.37. 0.76 ± 0.83. 1.25 ± 1.12. 5.28 ± 1.78. 2.8 ± 4.02. EDAD 1: Precalostro. (n 91). EDAD 2: 1-12 horas post-calostro. (n 20). EDAD 3: 13-24 horas post-calostro. (n 11). EDAD 4: 2 a 7 días de edad. (n= 17). EDAD 5: 8 a 28 días de edad. (n 16).

(55) FIGURA 3 RECUENTO TOTAL Y DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS EN BOVINOS NEONATOS DURANTE LAS CINCO EDADES DE MUESTREO 13000. 500. 11000. 400. 9000. 300. 7000 200. 5000. woloj. 3000 1000 1. 2. 3. 4. 5. GRUPO DE EDADES. __ LEUCOCITOS. 1 EOSINOFILOS. NEUTROFILOS BASOFILOS. FflP]T. LINFOCITOS MONOCITOS.

(56) FIGURA 4 - NIVELES PROMEDIO DE LEUCOCITOS INMADUROS DE TERNEROS EN LAS CINCO EDADES DE MUESTREO 12 10 L U L A S M A D U R A 5. 6. 2 1. 2. 3. 4. GRUPO DE EDADES. MlELOCITOS. ° JUVENILES. *BANDAS. 5.

(57) 37 mielocitos tuvo un comportamiento más o menos lineal tendiendo ligeramente a la disminución al término de los 28 días (nexo 11).. Los. recuentos porcentuales. promediados en la Tabla 2 y. de neutrófílos. los valores absolutos durante el. periodo neonatal en la Figura 3. disminución comportamiento. progresiva en inverso. al. se presentan. Se Puede observar la. relación con. la edad. del recuento. porcentual. y su de. linfocitos. Al analizar estadísticamente (P <0.05) la correlación de los neutró-filos con las edades se encontraron diferencias altamente significativas (nexo 12).. Los p osinó-filos (Tabla 2 y Figura 3) mostraron un aumento bastante manifiesto durante las primeras horas de vida para alcanzar su más alto valor hacia las 24 horas a partir de las cuales se evidenció una disminución progresiva hasta los 28 días. Sin embargo, estas variaciones estadísticamente (P >0.05) no fueron significativas (nexo 13). En el recuento diferencial de basófilos se muestran valores muy bajos al nacimiento que tienden aumentar notoriamente con la edad (Tabla 2 y Figura 3). Estadísticamente al correlacioar los valores obtenidos con las edades de muestreo e encontraron diferencias altamente significativas (P<0.05). (nexo 14)..

(58) 38 4.2.2.2 Línea Agranulocitica Fi comportamiento de los. porcentajes promediados de los. linfocitos obtenidos de las cinco edades muestreadas se presentan en la Tabla 2 y Figura 3. En ellas podemos destacar el incremento progresivo • en el porcentaje de linfocitos de acuerdo con la edad de muestreo en forma inversamente proporcional al comportamiento que tuvieron los porcentajes de neutrófílos. Sin embargo al realizar el estudio de correlación de los valores linfocíticos can las edades de muestreo (P >0.05) no se mostraron diferencias significativas (Anexo 15).. Los porcentajes de monocitos (Tabla 2 y Figura 3) al ser graficados se observa que sus valores fueron muy bajos y que durante los 28 días mostraron una leve tendencia a aumentar con la edad. Estadísticamente. (P >0.05) no hubo diferencias. significativas entre las edades de muestreo (Anexo 16).. 4..3 PROTEINOBRAMA. 4.3.1 Proteínas séricas totales. Los valores obtenidos de las proteínas del suero en las diferentes edades de muestreo se presentan promediados en la Tabla 3 y Figura 6). En ellas podemos destacar el bajo nivel de proteínas encontrado inmediatamente despuÉs del nacimiento y antes de la ingestión calostral; el marcado incremento ocurrido.

(59) TABLA 3. PROTEINOGRAMA. VALORES PROMEDIADOS EN BOVINOS NEONATOS HOLSTEIN EN LAS CINCO EDADES DE MUESTREO. IPARAMET. GRUPO 1. GRUPO 2. GRUPO 3. GRUPO 4. GRUPO 5. PROT.SUE 4.8 ± 0.98 g/dl. 4.04 ± 1.00. 5.85 ± 1.01. 5.43 ± 1.50. 5.44 ± 0.83. RELACION 2.78:1.71 2.37:3.28 2.51:3.55 2.30:3.24 2.85:2.75 ALBUMINA 2.78 q/dI ± 0.66. 2.36 ± 0.68. 2.51 ± 0.67. 2.30. a . GLOBUL 0.66 g/dl ± 0.45. 0.51 ± 0.20. 0.64 ± 0.27. 1 0.66. F3 GLOBUL 0.94 /d1 ± 0.32. 0.96 ± 0.45. GLOBUL 0.10 q/dl ± 0.20. 1.81 ± 1.00. T. ± 0.48. 1.24 1. ± 0.97. 1 1.64. ± 1.24. EDAD 1: Precalostro. (n 91). EDAD 2: 1-12 horas post-calostro. (n 20). EDAD 3: 13-24 horas post-calostro (n 11) EDAD 4: 2 a 7 días de edad. (n= 17). EDAD 5: 8 á 28 días de edad. (n 16). j. 2.85 ± 0.47. ± 0.56. 0.41 ± 0.09. 1.12 ± 0.38. 0.96 ± 0.14. 1.44 ± 1.19. 1.37 ± 0.54.

(60) FIGURA 6 -CAMBIOS EN LA CONCENTRACION PROTEINA TOTAL Y SU FRACCIONAMIENTO EN LAS CINCO EDADES DE MUESTREO PROTEINA TOTAL g/dI. 7 6 5 4 o. 3 2 1 o. 1. 2. 3. 4. 5. GRUPO DE EDADES. ET ALBUMINA GAMMA-GLOBULINA. ífiWi ALFA-GLOBULINA.

(61) ropecuar1. InsUtuto Coornbiano. Centro de Vocurnntaci5n CEISA. 39 entre las 12. y 24 horas postingestión y la disminución progresiva y leve hasta los 28 días. El análisis estadístico de correlación entre los valores obtenidos de las edades de muestreo. (P. <0.05). mostraron. diferencias. altamente. sicrnificativas (Anexo 17).. 4.3.2 Fraccionamiento electroforótico. Los. valores obtenidos. de cada. una de. las fracciones. electroforéticas del suero (Figura ) y en cada una de las edades de muestreo se presenta en la Tabla 3,. 4.3.2.1 Albúmina. La tendencia que presentó la albúmina durante los 28 días se muestra en la Tabla 3 y Figura 6. Aunque aparentemente no se presentan variaciones entre edades, en el estudio estadístico (P <0.05) se encontraron diferencias significativas (Anexo 18).. 4.3.2.2 Alfa - globulinas. La fracción alfa de las globulinas presentó valores promedio similares en las diferentes edades de muestreo (Tabla 3 y Figura 6) se observan sin embargo dos ligeras depresiones; la primera inmediatamente después de la ingestión calostral y la segunda hacia el final del período neonatal. En el análisis.

(62) 40 estadístico. (F. >0.05). no. se. diferencias. encontraron. significativas entre las edades de muestreo (Anexo 19).. 4.3.2.3 Beta - qlobulinas. Los valores promediados de la fracción beta se encuentran en la Tabla 3 y Figura 6. Podemos destacar: Primero, los valores encontrados en todas y cada una de las edades de muestreo fueron superiores a los obtenidos para la fracción alfa; y, segundo los valores más altos de la fracción de betaglobulinas se obtuvieron entre el primero y séptimo día. En el estudio estadístico (P >0.05) no se encuentra correlación (Anexo 20).. 4.3.2.4 Gamma - globulinas. El comportamiento promedio de esta fracción se observan en la Tabla 3 y Figura 6. En ellos podemos destacar: Primero, los bajas valores prqmedio obtenidos para la primera edad de muestreo excepto 8 animales que presentaron valores superiores. Segundo, el aumento significativo inmediatamente después de la ingestión calostral y posterior mantenimiento de los valores hasta el. final de. la etapa. neonatal.. estadísticamente los valores obtenidos en. Al. analizar. los diferentes. muestreos se encontraron variaciones altamente significativas (P (0.05) (Anexo 21)..

(63) 41 4.3.2.5 Relación al búmína- lobul mas. Los resultados obtenidos de la relación entre la albúmina y las globulinas se encuentran en la Tabla 3 y en la Figura 8. En ellas podemos observar una disminución progresiva hasta el final del experimento comportándose inversamente proporcional a la fracción globulínica..

(64) FIGURA 8 - RELACION ALBUMINAGLOBULINA DE TERNEROS NEONATOS EN LAS CINCO EDADES DE MUESTREO ri. 4. :3,5 A L B u N A. g. /. 2.5. 2.5. d. 1 g / d. 2. 2. 1.5. 1.5 1. 4. 3. 2. GRUPO DE EDADES. ' ALBUMINA. 0 ......GLOBULINA. 5.

(65) 5. DISCUSION. El establecimiento de los parámetros hematológicos normales para una especie, raza, edad, tipo de manejo y región determinados es una labor ardua que requiere de gran número de datos obtenidos a través del tiempo.. El desconocimiento, en nuestro medio, de las características hematológicas por raza, por región y por tipo de manejo del neonato bovino ha ocasionado que la práctica de la Medicina Veterinaria no incluya la evaluación e interpretación del hemograma, pilar básico para investigaciones no solo en la caracterización fisiológica sino en el diagnóstico de la variada patología que afecta a la especie en esta edad.. Con este trabajo se pretende contribuir al conocimiento de lo variado y complejo que puede resultar el establecimiento de dichos parámetros de referencia ante la gran variedad de factores tanto inherentes a los animales como al ambiente que los rodea, además de despertar el interés sobre futuras investigaciones para el esclarecimiento de las causas qUe motivan algunas de las variaciones encontradas.. Schálm. (7) • describe valores altos en el número total. de. eritrocitos para los terneros recién nacidos, con disminución.

(66) Instituto CoLombifl° PErOPEcuaflO entro de OocumfltaCt5 CEISA. t. 43. progresiva a través del tiempo y estabilización hacia los 18 a 36 meses de edad. Holme.n, citado por Meneses y Rodríguez (40) menciona que inmediatamente después del nacimiento ocurre una policitemia compensatoria para suplir la demanda de oxígeno en el neonato que va siendo estabilizada con la edad hasta llegar a los valores del adulto. Los valores eritrociticos obtenidos en el presente trabaja tienen un comportamiento aparentemente contradictorio, debido a que se realizaron tres muestreos durante el primer día que no son reportados por Schalm y durante los cuales se nota un incremento progresivo y rápido y que se ajusta más a las explicaciones dadas por otros autores (5, 8, 28, 41, 66) relacionadas con el estrés del nacimiento debida a liberación de glucocorticoides, degradación de la hemoglobina fetal, hipoxía, bajos niveles de hierro y baja concentración eritropoyesis.. de. betaglobulinas. para. necesarios. Con la ingestión calostral. la. se nota un. incremento marcado en los valores eritrocitarios. debido. posiblemente a que este proporciona las cantidades de hierro y las concentraciones de alfa-globulinas (eritropoyetina y ceruloplasmina) (27) y de beta-globulinas (transferrina) que al parecer desencadenan Ltfl incremento de los valores como ocurrió durante la primera semana de vida (Figura 1) para luego seguir el comportamiento descrito por Schalm de disminución progresiva con la edad.. Si bien es cierto que algunos investigadores han establecido,.

(67) 44 ba j o circunstancias diferentes, los niveles adecuados de hierro, transferrina, eritropoyetina, ceruloplasmina, cobre y el tiempo de persistencia de la hemoglobina -fetal en los neonatos, se desconocen las variaciones ocasionadas sobre el comportamiento eritropoyético de los bovinos debidas a las condiciones medioambientales y de manejo predominantes en la Sabana de Bogotá que pudieran explicar los bajos niveles encontrados al nacimiento.. La concentración de hemoglobina, el porcentaje del hematocrito y los valores de los indices eritrociticos están estrechamente relacionados entre sí y con el número total de eritrocitos. Sin embargo, los resultados obtenidos para el porcentaje del hematocrito y del Volumen Corpuscular Medio (VCM) de los eritrocitos se mantienen lineales o presentan una ligera tendencia a disminuir con la edad (Figura 1), al contrario de lo observado con el número total de eritrocitos. Esto es explicable al analizar los porcentajes de células inmaduras (reticulocitos) ya que a pesar de que el número de eritrocitos -fue relativamente bajo en las dos primeras edades del muestreo, el volumen celular dado por la presencia de células de mayor tamao (reticulocitos) , mantuvo constantes los valores del hematocrito y VCM con disminución progresiva a medida que aumentó la edad, por lo cual es normal encontrar cierto grado de racrocitosis en el neonato bovino debida al incremento en la actividad en la médula Ósea como respuesta a la hipoxia del.

(68) nacimiento (, 18). Por el contrario, el comportamiento de la hemoglobina analizada en la Figura 2 -fue muy homogéneo tendiendo a un incremento Con la edad.. Es sabido que la concentración de hemoglobina es. menpr en las células jóvenes (reticulocitos) lo que explica valores de hemoglobina aparentemente bajos en relación con los del hematocrito durante los primeros muestreos y con el de los eritrocitos en los dos últimos ya que el aumento en el número de eritrocitos se considera como un mecanismo compensatorio para satisfacer la demanda de oxigeno del neonato (40). Al analizar la concentración de hemoglobina sanguínea y celular en cada uno de los muestreos se encontró que las relaciones con los hematocritos correspondientes fueron siempre inferiores indicando por lo tanto que en el neonato bovino existe además hipocromía, debida a la carencia de algunos -factores nutricionales.. Los altos valores de los recuentos leucocitarios totales encontrados en las dos primeras edades de muestreo (precalostro y < 12 horas) y su disminución progresiva hasta los 28 días son similares a los descritos por Bouda y Woldehiwet (8, 81) quienes, trabajando con terneros Holstein y mestizos respectivamente, coincidieron en el descenso progresivo del recuento leucocitario con la edad. Este hecho al parecer está relacionado con la neutrofilia observada en el momento del parto como consecuencia de la liberación de la. hormona.

(69) 46 adrenocorticotrópica que induce hipercortisolemia en el feto que además de participar en la inducción del parto provoca un incremento en el número de neutrófilos circulantes que persiste durante algunas horas postnacimiento para luego decaer. en. forma rápida como se puede apreciar en la Figura 3. Además LaMótte incluye el efecto de la ingestión de calostro que provoca hemodilución del plasma y estímulo en la granulopoyesis (33 v 34).. Vale la pena destacar la presencia relativamente alta de célylas jóvenes de la línea mieloide (mielocitos, metamielocitos y bandas), que junto con el aumento en el recuento total de eritrocitos entre el primero y séptimo días de edad constituyen evidencias de incremento en la actividad de la médula ósea, posterior a la ingestión calostral como lo afirma LaMotte (34). Sin embargo, Schalm afirma que el número de leucocitos en terneros recién nacidos se incrementa con la edad, posiblemente debido al estimulo constante ocasionado por el contacto con agentes infecciosos alcanzando los máximos valores entre la 3 y 16 semanas de edad para luego disminuir progresivamente hasta alcanzar los niveles del adulto. Los resultados obtenidos en cuanto a los valores de linfocitos Figura 5, fueron similares a los reportados por SchalmAl momento del nacimiento el número de linfocitos fue similar al de los neutrófilos dando una relación neutrófilo:linfocito. de.