Resultados

Al estar expuestos durante 50 días a la composición del medio de cultivo, los explantes manifestaron diferentes respuestas morfogénicas que fueron evidentes a dos niveles, cualitativo y cuantitativo como era de esperarse; es decir entre las dos diferentes auxinas (IAA y NAA) utilizadas, así como también entre las varias concentraciones de reguladores de crecimiento empleadas (0.5, 1.0 y 2.0 mg/L).

Así podemos notar que en aquellos tratamientos donde se empleó como fuente de auxina la aplicación de NAA al medio de cultivo, se originó principalmente una tendencia hacia la formación de callo más o menos abundante que varió dependiendo de la concentración de la auxina, más que un desarrollo de las yemas axilares propias del explante; pues dicho callo cubrió la mayor parte del mismo, desde la base presentándose únicamente crecimiento de la yema apical del explante.

El callo en todos los casos fue fotosintético pero no presentó características de ser friable, aunque en algunos tratamientos a partir de estas masas celulares se presentó el crecimiento de algunos brotes pequeños (organogénesis indirecta). La abundancia del callo recayó en la concentración de los reguladores siendo mayor en aquellos con bajas (0.5 mg/L) o altas (2.0 mg/L) dosis de NAA, siendo equivalente a las dosis empleadas de citocinina BA (0.5 o 2.0 mg/L, respectivamente) en comparación con las concentraciones intermedias (1.0 mg/L BA y NAA).

Para el caso de los tratamientos en los que se utilizó como fuente de auxina IAA (Figura 17), la respuesta morfogénica tendió al desarrollo de las yemas axilares donde la cantidad de brotes formados, varió dependiendo de la concentración de reguladores de crecimiento usada.

88 Figura 17 Desarrollo de yemas axilares en híbridos interespecificos de lisianthus. De izquierda a derecha: los explantes originales contenían entre 3-4 pares de yemas; tratamiento control (T1) con crecimiento de las plántulas y desarrollo radicular; T2, T3 y T4 con desarrollo de callo y algunos brotes; T5, T6 y T7 con crecimiento de numerosos brotes. Barra: 5 cm.

89 Particularmente, cuando se emplearon concentraciones bajas y equivalentes de ambos reguladores de crecimiento (IAA y BA a 0.5 y 1.0 mg/L) además del desarrollo de las yemas axilares presentes en el explante original, también se observó la formación de algunos brotes en la parte del peciolo donde se realizó el corte de la lámina foliar. Caso contrario, al adicionar mayores concentraciones de ambos reguladores (2.0 mg/L) pues se detectó la presencia de callo que aunque fue escaso se encontró creciendo en la parte basal del explante, el cual era de color verde oscuro y no friable.

Si se comparan tratamientos con la misma concentración de reguladores pero diferente auxina (IAA vs NAA) se observan ciertos patrones a pesar de que la respuesta obtenida fue diferente, es decir la mayor inducción ya sea de callo o de brotes se detecta cuando se emplea 0.5 mg/L en los tratamientos T2 y T5.

Encontrándose un decrecimiento en la respuesta en concentraciones intermedias y altas de ambos reguladores (1.0 mg/L y 2.0 mg/L), observándose que se forma una menor cantidad de callo con aplicación de NAA (tratamientos T3 y T4) y el desarrollo de los brotes también se ve afectado en los tratamientos que contenían IAA (tratamientos T6 y T7).

Cabe destacar que a diferencia de los demás, en el tratamiento control (T1) que carecía de reguladores de crecimiento no se observó un desarrollo de las yemas axilares como era de esperarse, más bien se continuó con el crecimiento del explante original manteniéndose la dominancia apical, las hojas que se desarrollaron eran grandes y no presentaron problemas de hiperhidricidad; además se indujo la formación de raíces principales y adventicias, a diferencia de los demás tratamientos.

Respecto al número y altura de los brotes desarrollados (Tabla 9 y Figura 18), existió diferencia significativa para el número de brotes generados entre cada uno de los tratamientos, y como se mencionó anteriormente, dicha diferencia fue más evidente entre aquellos tratamientos a los que se les adicionó una u otra axina. Así, los tratamientos T2, T3 y T4 que contenían NAA presentaron un bajo número de estructuras vegetativas formadas por explante, teniendo hasta 4 brotes en el tratamiento que fue adicionado con bajas concentraciones de ambos reguladores de

90 crecimiento (0.5 mg/L NAA y 0.5 mg/L BA, T2) observando una disminución del 50%

en los subsiguientes tratamientos conforme la concentración de ambos reguladores aumentó en los tratamientos T3 y T4 (1.0 mg/L y 2.0 mg/L respectivamente) pues la respuesta morfogénica estuvo dirigida hacia la formación de callo principalmente, al contabilizarse cerca de 2 brotes en promedio por explante. Aunque, estos tres tratamientos con NAA se consideran estadísticamente iguales. Así mismo, en la altura de los brotes no existieron diferencias.

Para el caso de los tratamientos donde el medio de cultivo estuvo suplementado con IAA se presentó una tendencia similar, pues aquellos explantes que se expusieron a bajas concentraciones de ambos reguladores de crecimiento (0.5 mg/L IAA y 0.5 mg/L BA) en el tratamiento T5, formaron más de 18 brotes en promedio, siendo mayor si se compara con cualquier otro tratamiento con concentraciones similares (T2) o mayores (tratamientos T6 y T7; Figura 18). En consecuencia, la aplicación de mayores concentraciones de IAA en los T6 y T7 resultó en una disminución del número de brotes, contabilizándose hasta 3 estructuras vegetativas empleando 2.0 mg/L de ambos reguladores en el tratamiento T7. Así mismo, la altura de los brotes se consideró igual estadísticamente aunque de manera numérica también hay una tendencia hacia la reducción de tamaño desde las bajas (T5) hasta las altas concentraciones de ambos reguladores (T6 y T7) a pesar de que en ningún caso los brotes alcanzaron a medir más de 6 mm.

Se consideró que todos los tratamientos tuvieron el 100% de explantes regenerados a pesar de que en algunos tratamientos hubo repeticiones que se contaminaron.

Tabla 9 Respuesta generada respecto al número y altura de brotes formados a partir de yemas axilares de híbridos inespecíficos de lisianthus.

T N. B. A (cm) 1 1.03 a 0.49 a 2 4.23 a 0.36 a 3 2.46 a 0.31 a 4 1.73 a 0.32 a 5 18.56 c 0.63 a 6 9.86 b 0.52 a 7 3.80 a 0.32 a

91 T: tratamiento; N.B: número de brotes; A. altura. Entre cada columna, valores con la misma letra son estadísticamente iguales.

Figura 18 Comparación del número de brotes desarrollados a partir de yemas axilares de híbridos interespecificos de lisianthus. El tratamiento T7 presentó la mayor cantidad de brotes desarrollados.

0 1 2 3 4 5 6

Medias y 95.0% de Tukey HSD

tratamiento -2

2 6 10 14 18 22

numero brotes

1 2 3 4 5 6 7

92