Los objetivos de este estudio son: (i) determinar los niveles de ácidos grasos en las membranas de las células germinales y los espermatozoides del epidídimo en ratones de tipo salvaje y cftr -/-; y (ii) determinar los efectos de la administración oral de DHA a ratones de tipo salvaje y cftr -/- sobre la incorporación de DHA en estas células y la producción de esperma. La mayoría de las células responden a una disminución de los niveles de DHA aumentando la biosíntesis de ácidos grasos poliinsaturados de la vía n-6 (AA y DPA) y/o de la vía n-9 (20:3n-9 o ácido eicosatrienoico).
Nuevo protocolo de estimulación con FSH recombinante en pacientes ano- vuladoras grupo II de la OMS con ciclos cancelados por nula respuesta
En estas 125 mujeres, realizamos 376 ciclos de inducción de la ovulación con FSHr en un protocolo clásico de aumento de dosis bajas. Este grupo II de anovulatorios de la OMS (especialmente pacientes con SOP) está formado por mujeres con ovarios anormales (poliquísticos) y con cambios hormonales (aumento de LH y/o andrógenos).
Análisis citoquímico ultraestructural de los componentes glucídicos conte- nidos en la zona pelúcida y gránulos corticales de ovocitos humanos
Esto muestra que la composición de carbohidratos de la zona pelúcida es heterogénea en su espesor. Se observa un marcado intenso en la región externa (más cercana a la granulosa) de la PZ humana.
Incremento de la expresión del inhibidor de CDKs (“Cyclin Dependent Kinase”) p27 en embriones bloqueados en estadío de células
En el embrión humano, la expresión de los propios genes comienza cuando el embrión se encuentra en el estadio de 4-8 células (Braude et al., 1988; Tesarik et al., 1988). Por lo tanto, las estrategias para superar el bloqueo de los embriones in vitro implican comprender los requisitos del embrión humano y mejorar los sistemas de cultivo (Heikinheimo y Gibbons, 1998; Jones, 2000; Loutradis et al., 2000). Las proteínas de la matriz extracelular desempeñan un papel importante durante el desarrollo embrionario, influyendo en el crecimiento y la diferenciación celular (Sueoka et al., 1997).
Un aumento en los niveles del inhibidor de CDK p27 provoca la detención del ciclo celular en las células que se desprenden del sustrato (Sgambato et al., 2000). Dubey AK, Cruz JR, Hartog B et al .: Expresión de la molécula de adhesión (v integrina) durante el desarrollo de embriones humanos previos a la implantación.
Prevención de embarazos triples transfiriendo “al menos un embrión de muy buena calidad”
Se puede observar que la mayor tasa de embarazo corresponde a la transferencia de 3 embriones, aunque no se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre las tasas de embarazo (p = 0,083). En la tabla 3 se muestran las tasas de embarazo según la calidad del "embrión 1". Se puede observar que la mayor tasa de embarazo corresponde a los casos en los que había al menos un embrión 10, independientemente del número de embriones transferidos.
Combinamos el factor 'embrión 1', que está directamente relacionado con la tasa de embarazo, con el factor 'número de embriones transferidos', que en sí mismo no tiene influencia sobre la tasa de embarazo. Las transferencias guiadas por ultrasonido mejoran las tasas de embarazo y aumentan la frecuencia de las transferencias fáciles.
La transferencia ecoguiada mejora las tasas de embarazo y aumenta la frecuencia de las transferencias fáciles
Homogeneidad de los grupos. (Tabla 1)
Tasa de embarazo. (Tabla 2)
Coroleu B, Carreras O, Veiga A et al: Embryo transfer under ultrasound guidance improves pregnancy rates after in vitro fertilization. Kan AKS, Abdadlla HI, Gafar AH et al: Embryo transfer: ultrasound-guided versus clinical touch. Sieck UV, Jaroudi KA, Hollanders JM, Hamilton CJ.: Ultrasound-guided embryo transfer does not prevent ectopic pregnancies after in vitro fertilization.
Tang OS, Ng EHY, So WWK, Ho PC.: Ultrasound-guided embryo transfer: a prospective randomized controlled trial. Wood C, McMaster R, Rennie G, Trounson A, Leeton J.: Factors affecting pregnancy rates after in vitro fertilization and embryo transfer.
Inhibina y desarrollo folicular en el trasplante heterotópico de ovario sin pedículo vascular en ratas lewis singénicas
Para el análisis de FSH, utilizamos un kit RIA altamente sensible (Amersham Life Science, Amersham, Little Chalfont, Reino Unido). Se observó una disminución de los niveles de E2 asociada con un aumento de FSH después de la manipulación ovárica en el grupo B. La restauración de la función endocrina de estos folículos se confirmó y duró más de seis meses en este modelo experimental (9), mientras que en humanos hemos referencias de más de dos años (10, 11).
La menor población de folículos antrales en el grupo B se asocia con un aumento significativo en el área de la granulosa uno (una hiperplasia de la granulosa), en el grupo B en comparación con el grupo ovárico normalmente insertado, funcionalmente compensatorio como se evidencia en los niveles de E2. (Figura 6). La disminución de FSH y el aumento de GnRH aumentan la secreción de fibronectina de la granulosa.
Isquemia Congelación/
Oktay K, Newton H, Aubard Y, Salha O, Gosden RG.: Cryopreservation of immature human oocytes and ovarian tissue: an emerging technology?. Salle B, Lornage J, Demirci B, Vaudoyer F, Poirel MT, Franck M, Rudigoz RC, Guerin JF. sheep. Callejo J, Vilaseca S, Ordi J, Cabré S, Lailla JM, Balasch J.: Heterotopic ovarian transplantation without vascular pedicle in syngeneic Lewis rats: long-.
Oktay K, Aydin BA, Economos K, Rucinski J, Kan MT, Veeck L, Rosenwaks Z.: Recovery of ovarian function after autologous transplantation of ovarian tissue into the forearm. Oktay K, Economos K, Kan M, Rucinski J, Veeck L, Rosenwaks Z.: Endocrine function and oocyte retrieval after autologous transplantation of ovarian cortical strips to the forearm.
Callejo J, Salvador C, Miralles A, Vilaseca S, Lailla JM, Balasch J: Evaluation of long-term ovarian function after autotransplantation by implantation with fresh and frozen thawed human ovarian tissue. Nugent D, Meirow D, Brook PF, Aubard Y, Gosden RG.: Transplantation in reproductive medicine: past experiences, current knowledge and future perspectives. Callejo J, Jáuregui MT, Valls C, Fernández ME, Cabré S, Lailla JMª.: Heterotopic ovarian transplantation without vascular pedicle in syngeneic Lewis rats: six-month monitoring of estradiol and follicle-stimulating hormone concentrations after intraperitoneal and subcutaneous implants.
Muttukrishna S, Child T, Lockwood GM, Groom NP, Barlow DH, Ledger WL.: Serum concentrations of dimeric inhibins, activin A, gonadotrophins, and ovarian steroids during the menstrual cycle in older women. Gook DA, Edgar DH, Stern C.: Effect of cooling rate and dehydration regime on the histological appearance of human ovarian cortex after cryopreservation in 1,2-propanediol.
Población folicular Daño estroma
Hiperplasia granulosa
Inhibina
Hovatta O, Wright C, Krausz T.: Human primordial, primary and secondary ovarian follicles in long-term culture: effect of partial isolation. Abel MH, Wootton AN, Wilkins V, Huhtaniemi I, Knight PG, Charlton HM.: Effect of a null mutation in the follicle-stimulating hormone receptor gene on mouse reproduction. Differential effects of cryopreservation on in vitro nuclear or cytoplasmic maturation in immature mouse oocytes from stimulated ovaries.
Liu X, Andoh K, Yokota H, Kobayashi J, Abe Y, Yamada K, Mizunuma H, Ibuki Y.: Effects of growth hormone, activin and follistatin on the development of preantral follicle of immature female mice.
Estrategia ante el fallo repetido de implantación
De manera similar, ahora parece indiscutible que la transferencia cuidadosa de embriones, incluso bajo guía ecográfica, puede mejorar la implantación de embriones humanos (14, 15). Para ello, existen dos estrategias: cultivar los embriones hasta convertirlos en blastocisto y/o realizar un análisis preimplantacional de un conjunto de cromosomas. Además, Gianaroli et al (21) demostraron que la implantación mejora en mujeres con FRI porque se pueden seleccionar embriones cromosómicamente normales.
Actualmente ambos métodos son complementarios en nuestras manos, ya que los embriones de la biopsia permanecen en cocultivo hasta convertirse en blastocistos. Por todos estos motivos, nuestra recomendación actual es realizar una biopsia de los embriones y permitir que se desarrollen hasta convertirse en blastocisto.
Cult Alternativo
Diagnóstico preimplantacional de aneuploidías en pacientes con fecundación in vitro de mal pronóstico: . definiendo las categorías para las cuales se debe proponer. 22. Rubio C, Vidal F, et al.: La influencia de las anomalías cromosómicas en el desarrollo preimplantacional de embriones humanos. Sensibilizar a la audiencia sobre la necesidad de limitar el número de embriones a transferir (no más de dos) para reducir el número de embarazos múltiples. Es bien sabido que la mayoría de los embarazos múltiples resultan de la tendencia a transferir múltiples embriones (>2) para aumentar la tasa de embarazo.
Según una de las últimas encuestas de la ESHRE, las clínicas de reproducción asistida (RA) españolas tienen el honor de estar a la cabeza de los países europeos en cuanto a número de embarazos. Según el registro del SEF, el 74% de las transferencias se realizan con 3-4 embriones, lo que provoca el 34% de los embarazos múltiples, de los cuales el 7% son trillizos o más.
Prevención del embarazo múltiple en reproducción asistida
Para reducir el número de embarazos múltiples, en Madrid IVF solemos transferir dos embriones y si es necesario los aumentamos dependiendo de cada caso. En un futuro no muy lejano, el aspecto más valorado de una clínica de reproducción asistida no serán tanto las tasas de embarazo, sino el número de embarazos múltiples. Cuanto mayor sea éste, peor será el grado de consideración; ya que la tasa de embarazo múltiple será una referencia directa a la calidad del equipo.
Pero al precio del dudoso privilegio de ser el país con mayor número de embarazos múltiples. Dadas las graves consecuencias de los embarazos múltiples entre madre y feto, se ha iniciado un movimiento de sensibilización entre los especialistas en artritis reumatoide, que ha llevado a una estrategia para limitar el número de embriones a transferir, ya sea por ley o por elección.
Congelación de ovocitos y tejido ovárico: situación actual y perspectivas futuras
Estudios recientes demuestran que el tejido ovárico humano resiste la congelación y la descongelación (Hovatta et al., 1996). La posibilidad de realizar autotrasplantes de tejido ovárico criopreservado ya ha sido probada en especies como el ratón (Harp et al., 1994) y la oveja (Gosden et al., 1994). Sin embargo, la duración de la acción del injerto fue corta, ya que la secreción hormonal volvió a los niveles basales aproximadamente seis meses después (Callejo et al., 2001).
Un estudio realizado en ratones demuestra que es posible transferir el linfoma a ratones sanos que reciben trasplantes de tejido ovárico de un ratón afectado de la misma cepa (Shaw et al., 1996). Sin embargo, en un estudio reciente en el que se trasplantó tejido ovárico previamente congelado de pacientes con linfoma, ninguno de los animales huéspedes desarrolló la enfermedad (Kim et al., 2001).
Diagnóstico genético preimplantacional
El porcentaje de señales superpuestas, que están en la misma posición o se superponen entre sí, aumenta en núcleos de menor tamaño, provocando un aumento de los errores de diagnóstico (Munné et al., 1996). Esta sustancia forma una capa en todo el portaobjetos que puede interferir con el análisis de la señal. Una gran cantidad de clones también mueren a las pocas horas de nacer.
En bovino, la disección de células individuales de embriones de 4 u 8 células y su implantación en diferentes madres. Luego, los embriones clonados se incubaron en el útero de ovejas receptoras temporales y los que se desarrollaron normalmente se implantaron en madres sustitutas.
La Clonación: la actualidad y el futuro
Gran parte de la atención que se ha prestado para explicar la baja tasa de éxito se ha centrado en las influencias epigenéticas sobre la expresión genética. Es interesante observar que la obesidad de los ratones clonados no se transmite a su descendencia (Tamashiro et al. 2002). El gen del receptor IGF-2 no está impreso en los humanos, lo que ha llevado a afirmar que este hecho significa que clonar humanos sería más fácil que clonar animales.
La clonación de unos pocos toros o vacas seleccionados tendrá muy poco impacto en la cría de animales. Las sugerencias de que será posible identificar embriones anormales antes de la implantación mediante un cálculo del estado de metilación de genes clave son peligrosamente ingenuas.
