Comportamiento Reproductivo

Para esta parte del estudio, entre octubre del 2007 y abril del 2008 se efectuaron las primeras 17 recolectas diurnas, con tres a cuatro participantes. Durante este periodo se capturaron 186 arañas vivas, adultas e inmaduras, las que fueron llevadas al laboratorio. Durante este periodo, el cuarto de cría se mantuvo con un fotoperiodo natural, 18 a 28°C de temperatura y 36 a 60% de humedad relativa. El cortejo y la cópula fueron observados en este local, pero la inducción de esperma y la construcción

de ovisacos se efectuaron en otro sitio. Los comportamientos de las arañas fueron observados principalmente durante la noche y fueron registrados con una videocámara digital Sony© DCR-TRV 280 de 8 mm, equipada para grabar con luz infrarroja. Las grabaciones fueron analizadas posteriormente.

6.7.1. Inducción de Esperma

Para describir los comportamientos de construcción de la tela espermática y el de de carga de semen, se colocaron individualmente cinco machos criados en el laboratorio y 2 machos recolectados en campo en botes de plástico transparente de 1750 ml (13 cm de diámetro), con arena fina a un nivel de 2.5 cm. Se colocó una pequeña piedra plana para fijación de la tela espermática, un cartón arqueado como refugio y un pequeño contenedor con algodón y agua (Fig. 15).

Figura 15. Terrarios para observar la inducción de esperma en machos adultos de H. selenopoides.

Cada semana se proporcionó a los machos tres o cuatro larvas de Tenebrio. Los machos fueron observados diariamente desde el 14 de marzo hasta el 14 de abril del 2008, de 20:00 a las 8:00 hs. Usando luz infrarroja, se hicieron observaciones por 5 segundos cada 20 minutos para detectar el posible inicio de la elaboración de las telas e iniciar las grabaciones. Las observaciones se realizaron en dos locales, en diferentes períodos y bajo condiciones de temperatura y humedad relativa resumidas en la Tabla II. Las telas espermáticas construidas se midieron dentro del terrario con una reglilla de papel flexible graduada en milímetros, y el ángulo de inclinación de las telas se midió desde afuera con un transportador ordinario.

Tabla II. Temperatura y humedad relativa durante el periodo de observación de inducción de esperma de de H. selenopoides.

Período de observación Local Temperatura (°C) Humedad relativa (%)

14-25 marzo 1 17.2-30.7 20-38

25 marzo-4 abril 2 25.1-26.3 37-47

4-14 abril 1 23.5-26.9 20-33

6.7.2. Comportamiento de Apareamiento

Se formaron 45 parejas durante dos periodos para observar el comportamiento sexual en laboratorio. De enero a marzo de 2008 se formaron 25 parejas con ocho machos y 23 hembras, todos recolectados en el campo (edad y estado reproductivo desconocido). Porque hubo pocos machos para la formación de parejas, se usaron con más frecuencia los machos que fueron más activos en búsqueda y cortejo; los otros machos fueron poco activos o huyeron de las hembras. Durante julio de 2008 se formaron otras 20 parejas con 14 machos y 12 hembras criados en laboratorio (vírgenes y de edad conocida), excepto una hembra recolectada en campo. En estos ensayos, las parejas fueron formadas al azar, aunque los machos fueron también variables en comportamiento. Algunos especímenes, principalmente machos, fueron reutilizados para formar nuevas

parejas. Se formaron parejas adicionales (una en octubre de 2008 y 18 de julio a agosto de 2009) para detectar posibles actos de comportamiento adicionales, que no hubieran sido registrados durante los apareamientos previos. Los resultados de estos apareamientos no fueron utilizados en los análisis estadísticos, principalmente porque en julio-agosto se utilizaron sólo 2 machos. Los horarios de observación y condiciones de laboratorio para los meses de cada periodo se resumen en la Tabla III. El recinto utilizado fue el mismo donde se mantuvo al resto de las arañas.

Tabla III. Número de parejas (n) de H. selenopoides observadas por mes, horario de observación, temperatura y humedad relativa durante el estudio del comportamiento sexual. Mes de observación n Horario de observación (hs) Temperatura (°C) Humedad relativa (%) Alimentación previa a la observación enero 2008 13 14:30-18:00 18-19 50-60 Grillos o Blattella febrero 2008 11 15:00-20:00 24-251 _{50-60 Grillos y}

Tenebrio

marzo 2008 1 01:00-01:05 28 21 Grillos y Tenebrio

julio 2008 20 20:00-23:00 24-28 36-55 Grillos y Tenebrio julio-agosto 2009 18 20:00-23:40 25-29 32-46 Tenebrio

1 _{mantenida con calefactor eléctrico.}

Cada hembra se colocó individualmente en un terrario de vidrio de 20 × 20 × 10 cm, con 2 cm de arena fina del sitio de recolecta. Cada macho fue introducido al terrario 20-177 min después (mediana = 72 min). Si la hembra fue receptiva se filmaron los comportamientos, y se continuó registrando 15 min después de la cópula. El equipo infrarrojo se utilizó desde que obscureció. Se estableció un tiempo de espera de 55 min, separando a los individuos o cambiándoles de pareja cuando la cópula no ocurrió. También se les separó antes, cuando las arañas intentaron escapar constantemente, cuando ambos resultaron huidizos o cuando asumieron posición defensiva de patas pareadas (Vetter y Cokendolpher, 2000). Para explorar sobre posible interacción antagónica, en un ensayo de julio de 2008 se introdujeron simultáneamente dos machos en el terrario.

6.7.3. Construcción de Ovisaco y Oviposición

Veinte hembras recolectadas en campo, de edad y estado reproductivo desconocido pero con el opistosoma más agrandado que en otras hembras, se utilizaron para observar la construcción de ovisacos. Estas hembras fueron capturadas en campo en el invierno del 2008. Cada hembra fue colocada en un bote de plástico transparente de 1750 ml. Cada recipiente contuvo 3 cm de sustrato arenoso, un tapón bebedero y uno de tres tipos de refugio: una pieza de cartón arqueada; otro construido con piedras planas pegadas con silicón; y otro con techo de vidrio para tratar de ver la oviposición (Fig. 16). Con excepción del primero, estos refugios proporcionaron un techo plano horizontal de al menos 5 × 5 cm y una altura libre de 2.0 a 2.5 cm sobre el nivel de la arena.

Figura 16. Terrarios para registrar la elaboración de ovisacos por hembras de H. selenopoides.

Se colocaron cinco hembras en sus terrarios, sustituyéndolas cada cuatro o cinco días si ellas no hicieron ovisaco, procediendo a grabar cuando alguna de ellas sí inició su construcción. El período de vigilancia para los registros fue del 22 de abril al 16 de mayo del 2008 y las observaciones se hicieron en el local 2 referido con anterioridad. Las condiciones fueron: fotoperiodo natural, temperatura ambiente de 24.8 a 33.8°C, y

16 a 31% de humedad relativa. No se hicieron grabaciones en julio del 2008, cuando las hembras copuladas en laboratorio construyeron ovisacos; peroe varias de ellas construyeron varios ovisacos. Adicionalmente, a finales de julio y principios de agosto de 2009, se efectuaron observaciones de hembras copuladas en laboratorio en esos meses y de hembras recolectadas en campo en noviembre del 2008. La información obtenida de la construcción de tres ovisacos sólo se utilizó para la descripción de la salida de las hembras de los ovisacos, no registrada en el 2008.

6.8. Estrategias de Protección Antidepredadora

Fue innecesario realizar actividades exclusivas para observar el comportamiento de empolvado y de enterramiento, así como el de la postura de patas pareadas o en “X”, dada su frecuente ocurrencia. Se registraron estos comportamientos antes, durante o después de los estudios u observaciones de emergencia de arañuelas, inducción de esperma, comportamiento sexual y construcción de ovisacos, así como en observaciones ocasionales en laboratorio. Se utilizaron las grabaciones de julio del 2008 de los otros estudios para analizar los comportamientos de empolvado y de enterramiento en machos y hembras adultos. Asimismo, no se provocó en las arañas la autotomía de patas, dada su frecuente evidencia en los individuos recolectados en campo y a su ocurrencia espontánea en laboratorio.