2. MATERIALES Y MÉTODOS
2.2 CONDUCCIÓN DEL EXPERIMENTO
2.2.1 Importación de bulbos. Se importaron 400 bulbos de las variedades
Cristal Blush de color blanco y Flame de color naranja provenientes de California (U.S.A) a través de la empresa Callafornia Callas, a finales del mes de Diciembre de 2008 y se mantuvieron almacenados en cuarto frío a 8ºC y 70% de HR hasta 15 días antes de la siembra en febrero de 2009.
2.2.2 Adecuación de camas y parcelas. Se escogieron dos camas comerciales
de 30 m de largo, 0,8 m de ancho y 40 cm de profundidad, ubicadas en el centro del invernadero a fin de eliminar el efecto de borde.
En cada cama se independizaron parcelas de 1,36 m2, con polietileno para evitar drenaje de soluciones entre tratamientos y se dejó un espacio de 90 centímetros entre parcela y parcela.
Como sustrato de siembra se utilizó una mezcla en proporción 7:5:1 en base a volumen, de tierra negra, cascarilla de arroz y arena lavada de río, previamente desinfectado con 75 g m-2 de Basamid ® GR.
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2.2.3 Análisis de sustrato y de aguas para riego. Antes de la siembra se realizó
análisis de contenido de elementos mayores y menores solubles en el sustrato de acuerdo a las metodologías estándar establecidas para análisis de enmiendas y sustratos orgánicos (Anexo 1).
A fin de determinar los contenidos de cationes y aniones solubles presentes en el agua de riego se realizó el análisis correspondiente, según las metodologías establecidas para análisis de calidad de aguas de riego (Anexo 1.)
Los análisis se realizaron en los laboratorios de Análisis de suelos y de análisis de aguas de la Universidad Tecnológica de Pereira UTP.
2.2.4 Aplicación de enmiendas y fertilizante de Precarga. Tres meses antes de
la siembra y con base en los resultados del análisis de sustrato, se realizó encalado con un equivalente a 134 kg CaO ha-1, para corrección del pH.
Al momento de la siembra se incorporó a cada parcela como fertilizante de precarga y dependiendo del tratamiento, un equivalente al 30% de la dosis total de los requerimientos de N, K+, Mg++ y B. La foto 3, muestra las camas y parcelas ya preparadas y el momento de la aplicación del fertilizante de precarga.
Foto 3. Adecuación de camas. Aplicación fertilizante de precarga, trazado y
ahoyado para siembra
2.2.5 Establecimiento del ensayo
Siembra: Se sembraron bulbos con diámetros entre 2 y 2,5”. Los bulbos se
pesaron y se clasificaron en tres grupos por rango de peso tras lo cual se distribuyeron en cada bloque a fin de lograr la mayor uniformidad posible.
Los rangos de peso de bulbos oscilaron entre 32,1 y 60,6 g para la variedad Cristal Blush y entre 41,1 y 63,2 g para la variedad Flame.
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La densidad de siembra fue de 11 bulbos por metro cuadrado y la profundidad de siembra fue de 10 centímetros (Foto 4). No se realizó tratamiento hormonal puesto que los bulbos nuevos vienen pretratados. Inmediatamente después de la siembra se realizó aplicación en drench de 3 g/l de Orthocide®, para prevención de ataques de hongos del suelo. La siembra se realizó el 3 de febrero de 2009.
Foto 4. Siembra en las parcelas experimentales
Labores de Cultivo: Se realizaron aplicaciones preventivas con fungicidas y
bactericidas en drench a los cinco, quince y cuarenta y cinco días después de la siembra para el control de Erwinia.
Se hicieron tres deshierbas manuales y el control de insectos plaga se hizo de acuerdo al protocolo establecido por la empresa y a la normatividad establecida por el ICA para el control de plagas cuarentenarias.
Muestreos para Análisis Foliar: Se hicieron muestreos destructivos escalonados
en seis épocas del cultivo para determinación de materia seca (MS) y absorción de nutrientes en bulbo y parte aérea por separado, una planta por tratamiento y por repetición (Foto 5). La tabla 4, resume las fechas, la etapa fenológica y los órganos de la planta sobre los que se hicieron las determinaciones.
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Tabla 4. Épocas de muestreo
Semanas después de la siembra
Etapa fenológica Muestreo de MS y contenido de nutrientes
Antes de siembra. 2 feb/2009 Inicial (Reservas del bulbo) Bulbo
Semana 4: 3 mar/2009 Desarrollo de raíces y
expansión de primeras hojas
Bulbo y Parte aérea Semana 7 : 24 mar/2009 Pleno Desarrollo vegetativo e
inicio de floración
Bulbo, hojas y peciolos, flores.
Semana 9 : 7 abr /2009 Plena Floración Bulbo, hojas y peciolos,
flores.
Semana 11 : 21 abr/2009 Fin floración Bulbo, parte aérea
Semana 14 : 12 may/2009 Comienzo Senescencia Bulbo y Parte aérea
Semana 20 : 22 jun/2009 Senescencia y final de
tuberización
Bulbo
Cosecha bulbos y raíces Cosecha y conteo de hojas Cosecha y medición de flores Foto 5. Cosecha de plantas para análisis de tejidos
Los análisis foliares se realizaron en el laboratorio de análisis de tejidos de CENICAFÉ según las metodologías estándar establecidas para análisis de tejidos, las cuales se encuentran descritas en el Anexo 2.
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2.2.6 Absorción de Nutrientes. La cantidad de nutrientes absorbidos por la
planta en cada etapa fenológica, se calculó a partir de la relación entre el peso seco de cada uno de los tejidos con sus respectivos contenidos de nutrientes. A partir del peso seco promedio y el contenido promedio de cada nutriente en bulbos, hojas y tallos florales de las plantas muestreadas, se calculó la cantidad de biomasa acumulada y la cantidad extraída de cada nutriente por el cultivo en gramos por planta.
Teniendo en cuenta la densidad de siembra para el cultivo (11 bulbos m-2), se extrapolaron los resultados para calcular la extracción de cada nutriente y la acumulación de materia seca en kg ha-1.
Con el objetivo de conocer la relación que existe entre el peso inicial de bulbos, la concentración de nutrientes en bulbos y el contenido de cada nutriente por kilogramo de peso fresco, así como las relaciones entre nutrientes, se realizó análisis de varianza para concentración de nutrientes en bulbos (anexo 6) y análisis de correlación múltiple de Pearson. Para las variables en donde la correlación fue altamente significativa, se realizó análisis de regresión por el método Steepwise.
La matriz de correlación y el coeficiente de Pearson por variable con su respectiva prueba de significancia para concentración inicial de nutrientes en bulbo, puede observarse en el anexo 7. La matriz de correlación para contenido de nutrientes por kilogramo de peso fresco se encuentra en el anexo 8.
La curva de acumulación de materia seca se obtuvo graficando en el eje de las X el tiempo (épocas de muestreo) y en el eje de las Y el peso seco total en cada uno de los tejidos.
Se realizó análisis de varianza a fin de identificar las variaciones de concentración de nutrientes en los diferentes tejidos en relación con los tratamientos y estados de desarrollo de las plantas. Los resultados pueden verse en los Anexos 10 y 11. Las curvas de absorción diferencial de nutrientes se obtuvieron graficando en el eje de las X el tiempo y en el eje de las Y el total extraído de cada nutriente en kg ha-1.
Los datos de relación entre nutrientes se compararon con las variables productivas materia seca de hojas, numero de tallos florales, longitud de tallos florales y porcentaje de tuberización.
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