ETEC serotipo O

Sobre un total de 16 cepas de ETEC O157 analizadas, se establecieron seis patrones ERIC- PCR (A-F) con 45 % de similitud, los cuales presentaron entre 6 y 10 bandas en un rango comprendido entre 300 y 1500 pb aproximadamente (Imagen 14).

El patrón A, agrupó cinco ETEC (EC 447, EC 547, EC 571, EC 549 y EC 570), aislados a partir de distintos cerdos de 86 días de edad, provenientes de la granja 5 (localizada en Inés Indart). Estos aislamientos compartieron serotipo (O157:H19) y genotipo (rfbO157/estII/aidA), mostrando diferencias entre ellos, a nivel de biotipo (3, 2 y 5) y perfil de resistencia antimicrobiana (TET, NAL; TET, FOSF; TET; TET, NIT, FOSF).

El patrón B agrupó dos ETEC O157 (EC 543 y EC 545), los únicos que no pertenecieron a la granja 5. En este caso, se aislaron de animales de 165 días de edad (M8), perteneciente a la granja 4, localizada en el partido de Chacabuco. La única diferencia observada entre ellos fue el patrón de resistencia antimicrobiana (TET, FLOR; TET). Compartieron biotipo (2), serotipo (O157:H19) y genotipo (rfbO157/estII/aidA/asta). Entre los patrones A y B se observó 87 % de similitud.

El patrón C corresponde a EC 568, aislado del mismo cerdo que EC 570 incluido en el patrón A. Entre ellos se observó 83 % de similitud. La diferencia entre ellos se observó a nivel de perfil de resisencia (TET, NIT, FOSF; TET, FOSF).

El patrón D agrupó seis ETEC (EC 546, EC 550, EC 445, EC 446, EC 448 y EC 451) aislados de animales pertenecientes al mismo grupo productivo y granja que las agrupadas en los patrones A, C, E y F.

Las cepas EC 447 y EC 448 están incluidas en los patrones A y D respectivamente y se aislaron del mismo animal, observándose entre ellas 79 % de similitud, diferenciándose en el biotipo (3 y 5) y perfil de resistencia antimicrobiana (TET, NAL; TET). EC 571 y EC

572, pertenecen a los patrones A y F respectivamente. Al igual que en el caso anterior, se aislaron de un mismo cerdo. El porcentaje de similitud es 45 %, y las diferencias son a nivel fenotípico: serotipo (O157:H19; ONT:H-) y resistencia antimicrobiana (TET, FOSF; S, TET, NAL). Otros ejemplos de ETEC O157 aislados a partir de un mismo animal son EC 549 (A) – EC 550 (D), difieren en perfil de resistencia (TET; TET, TMS); EC 451 (D) - EC 449 (E) presentan 65 % de similitud y difiere el serotipo (O115:H-; O157:H19) y EC 445 - EC 446. Estas últimas difieren con las demás, en que presentan 100 % de similitud (patrón D) pero difieren su biotipo (2 y 3) y perfil de resistencia antimicrobiana (S, TET, NAL; TET, NAL).

La figura 21 corresponde al dendograma generado a partir de los patrones ERIC- PCR, incluyendosé origen, biotipo, perfil de resistencia antimicrobiana y genotipo de cada uno de los aislamientos.

Imagen 14. Patrones ERIC-PCR de ETEC O157 aislados de cerdos sin manifestación clínica de diarrea

4.4.6.5 ETEC

Por cuestiones relacionadas con el análisis de las imágenes, los ETEC se dividieron en dos grupos.

1º grupo ETEC. Sobre un total de 12 ETEC analizados, se establecieron 10 patrones ERIC-PCR (A-K) con 38 % de similitud, los cuales presentaron entre 6 y 15 bandas en un rango comprendido entre 80 y 1500 pb aproximadamente (Imagen 15a).

Los patrones A, B, C, D, F, G, H e I, pertenecen a un aislamiento cada uno, correspondientes a distintos cerdos de 86 días de vida (M6), de la granja 3 (Salto). Los patrones A (EC 440) y B (EC 557) presentan 82 % de similitud. Comparten el mismo biotipo (5), serotipo (O8:H-) y genotipo (estI/estII) pero difieren en cuanto a su perfil de resistencia antimicrobiano (S, TET, CMP, TMS, FLOR; S, TET, NAL, CMP, TMS, FLOR). El patrón C (EC 441) corresponde a un aislamiento con 79 % de similitud con los anteriores, compartiendo biotipo, serotipo y genotipo, pero difieriendo también, su perfil de resistencia (S, TET, CMP, FLOR). Los patrones D y E presentan 77 % de similitud. Corresponden a aislamientos (EC 439 y EC 523) de diferentes granjas 3 y 6 respectivamente (Salto y Venado Tuerto). Comparten serotipo (O8:H-) y genotipo (estI/estII) pero difieren su biotipo (5 y 1) y perfil de resistencia antimicrobiano (S, TET, NAL, CIP, CMP, FLOR; AMP, TET, TMS). El patrón F corresponde al aislamiento EC 436. Si bien su origen y sus características fenotípicas y genotípicas son exactamente iguales a EC 557 (granja 3, biotipo 5, serotipo O8:H-, perfil de resistencia antimicrobiana S, TET, NAL, CMP, TMS, FLOR; genotipo estI/estII) presentan una similitud de sólo 68 %.

Entre los patrones G (EC 561) y H (EC 562) se observó un similitud de 71 % y 59 % con los patrones precedentes. Estos patrones corresponden a aislamientos provenientes de distintos animales de la granja 3 y grupo M6. Difieren entre ellos en todas las características

resistencia antimicrobiano (S, TET, NAL, CMP, FLOR y S, ET, NAL, CMP, FLOR) y genotipo (estI/estII/fanC y estI/estII).

El patrón I (EC 541) presenta 53 % de similitud con el resto de los patrones precedentes y corresponde a un aislamiento obtenido a partir de un cerdo del grupo M6 de la granja 3, cuyo biotipo fue 1, serotipo O7:H16, perfil de resistencia S, TET, CMP, FLOR y genotipo eltA/estII/astA/aidA.

El patrón J (EC 551) corresponde al único ETEC aislado en la granja 7 (Carmen de Areco) a partir de un animal del grupo M6. Presenta 46 % de similitud con los precedentes. Su biotipo es el 1, antígeno O no tipificable e inmóvil, resistente a tetraciclina y genotipo estI/astA/fasA.

El patrón K agrupa dos aislamientos (EC 478 y EC 479) provenientes de un único animal del grupo M8 (165 días de vida), de la granja 9, pero que muestran diferentes biotipo (1 y 3), perfil de resistencia antimicrobiano (TET, NAL; TET) y genotipo (estII/astA y estII/astA/aidA).

La figura 22a corresponde al dendograma generado a partir de los patrones ERIC- PCR, incluyendosé origen, biotipo, perfil de resistencia antimicrobiana y genotipo de cada uno de los aislamientos.

Imagen 15a. Patrones ERIC-PCR de ETEC aislados de cerdos sin manifestación clínica de diarrea

2º grupo ETEC. Sobre un total de nueve ETEC analizados, se establecieron nueve patrones ERIC-PCR (A-I) con 22 % de similitud, los cuales presentaron entre 8 y 13 bandas en un rango comprendido entre 90 y 1500 kb aproximadamente (Imagen 15b).

Imagen 15b. Patrones ERIC-PCR de ETEC aislados de cerdos sin manifestación clínica de diarrea

Los patrones A (EC 435) y B (EC 427) corresponden a dos aislamientos provenientes de la granja 3, de dos cerdos del grupo M6 (86 días de vida). Entre ellas hay una similitud de 73 %. Comparten genotipo (estI/estII), pero sus características fenotípicas difieren (biotipo 5 y 1; serotipo O8:H- y O8:H26; perfil de resistencia antimicrobiano S, TET, NAL, CMP, TMS, FLOR y S, TET, CMP, FLOR).

El patrón C (EC 531) corresponde al único ETEC aislado a partir de un cerdo del grupo M6, de la granja 11, localizada en el partido de Pergamino. Tiene 60 % de similitud

con las precedentes. Comparte con las anteriores el genotipo (estI/estII). Pertenece al biotipo 1, serotipo O8:H-, perfil de resistencia antimicrobiano S, TET.

El patrón D (EC 501) corresponde al único ETEC aislado a partir de un cerdo del grupo M3 (21 días de vida), de la granja 10, localizada en el partido de San Andrés de Giles. Tiene 33 % de similitud con las precedentes. Su genotipo es estI, pertenece al biotipo 1, antígeno O no tipificable e inmóvil, fue sensible a todos los antimicrobianos probados.

Los ETEC EC 502 y EC 577 pertenecen a los patrones F y G respectivamente, presentan 91 % de similitud. Ambos se aislaron de animales pertenecientes a la granja 8, EC 502 de un lechón de 21 días de vida (M3) y EC 577 de un animal del grupo M8 (165 días de vida). Comparten biotipo (1) y perfil de resistencia antimicrobiano (S, TET, NAL, CIP). Difiere su serotipo (O7:H- y O7:H16) y genotipo (eltA/estII/astA/aidA/fedA y eltA/estII/astA/aidA).

Los patrones E (EC 524), H (EC 539) e I (EC 538), corresponden a ETEC aislados a partir de animales de la granja 9 (Henderson). EC 524 se aisló de un animal del grupo M6 y mostró 22 % de similitud con EC 539 y EC 538 que se aislaron a partir de un mismo cerdo del grupo M8 (165 días de vida). EC 524 (E), pertenece al biotipo 8, antígeno O no tipificable e inmóvil, resistente a TET y genotipo estII/astA/aidA. Los patrones H e I presentaron 67 % de similitud. Comparten biotipo (3), serotipo (O8:H31) y genotipo (estI/estII). Difieren en el perfil de resistencia antimicrobiano (GEN, TET, FLOR y AMP, AMC, CEF, TET, FLOR).

La figura 22b corresponde al dendograma generado a partir de los patrones ERIC- PCR, incluyendosé origen, biotipo, perfil de resistencia antimicrobiana y genotipo de cada uno de los aislamientos.