Medios de cultivo deshidratados

I. Introducción

BD suministra mayor de 400 tipos distintos Difco ™ y Bundesliga ™ formulaciones de medios BD suministra mayor de 400 tipos distintos Difco ™ y Bundesliga ™ formulaciones de medios BD suministra mayor de 400 tipos distintos Difco ™ y Bundesliga ™ formulaciones de medios BD suministra mayor de 400 tipos distintos Difco ™ y Bundesliga ™ formulaciones de medios BD suministra mayor de 400 tipos distintos Difco ™ y Bundesliga ™ formulaciones de medios BD suministra mayor de 400 tipos distintos Difco ™ y Bundesliga ™ formulaciones de medios BD suministra mayor de 400 tipos distintos Difco ™ y Bundesliga ™ formulaciones de medios marca en forma deshidratada para la comodidad del técnico de laboratorio y

procesamiento biológico especialista. Ciertas formulaciones se designan por un “II” en el nombre medio; estas formulaciones están optimizados para proporcionar resultados de la prueba más consistente, superiores que las versiones anteriores.

Los ingredientes individuales y el producto deshidratado final son cuidadosamente calidad controlado para asegurar un rendimiento de calidad consistente y de alta y obviar la necesidad de medios de comunicación para ser preparados en el laboratorio a partir de materias primas. Un número de factores deben ser considerados en el uso de medios deshidratados para asegurar la calidad del producto acabado. Estos factores se discuten a continuación.

medios de cultivo deshidratado puede ser ofrecido como 100 g y 500 g botellas, 2 kg, 5 lb, 25 lb y 10 contenedores kg.

II. Fórmula (e)

Generalmente, ingredientes de medios de comunicación se enumeran de acuerdo con las formulaciones “clásicos” publicados. Sin embargo, ya que las materias primas biológicas pueden variar ligeramente, las formulaciones se enumeran como “aproximado” y pueden ser ajustados y / o complementan para satisfacer los criterios de rendimiento.

Peptonas en las formulaciones presentadas en este manual pueden ser expresados ​​por sus nombres tradicionales o por sus equivalentes genéricos. los Farmacopea de los sus nombres tradicionales o por sus equivalentes genéricos. los Farmacopea de los Estados Unidos listas de cultivo de peptonas de medios de comunicación por nombres Estados Unidos listas de cultivo de peptonas de medios de comunicación por nombres genéricos e incluye especificaciones de peptona (peptona de carne), digerido pancreático de caseína, digerido péptico de tejido animal y papaico Recopilación de harina de soja. Las peptonas en Bundesliga los medios de comunicación de la marca han sido Las peptonas en Bundesliga los medios de comunicación de la marca han sido Las peptonas en Bundesliga los medios de comunicación de la marca han sido convertidos a sus equivalentes genéricos. En general, las peptonas en Difco convertidos a sus equivalentes genéricos. En general, las peptonas en Difco los medios de comunicación de la marca han conservado sus nombres tradicionales, que también aparecen en las formulaciones publicadas en muchos libros de texto y en las referencias “estándar” que contienen los métodos de análisis microbiológico de alimentos, productos lácteos y aguas y aguas residuales.

Tradicionalmente, la cantidad de una infusión enumerado para un medio infusioncontaining se ha expresado como el peso del material fuente (por ejemplo, corazón de res, Infusión de 250 g) utilizados en el proceso de extracción de la infusión. Estos valores han sido convertidos a sus equivalentes en peso seco de este manual, lo cual es consistente con su uso en medios de cultivo deshidratado.

III. Advertencias y precauciones

medios de cultivo deshidratados son para uso en laboratorio. La azida de sodio es un agente selectivo en ciertos medios de cultivo. Los medios que contienen azida de sodio son muy tóxico por inhalación, contacto con la piel y por ingestión. En contacto con ácidos libera gases muy tóxicos. Después del contacto con la piel, lavar

inmediatamente con abundante agua. La azida de sodio puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar azidas metálicas altamente explosivas. Para su eliminación, lavar con un gran volumen de agua para evitar la acumulación de azida.

Una técnica aséptica y las precauciones establecidas contra riesgos microbiológicos durante todos los procedimientos, ya que hay que suponer que todas las muestras / muestras recogidas podría contener microorganismos infecciosos. Después de su uso, las placas preparadas, espécimen / recipientes de muestras y otros materiales contaminados deben esterilizarse antes de desechar. Modo de empleo Se deben leer y seguir cuidadosamente.

Para minimizar el riesgo en los laboratorios de microbiología de trabajar con microorganismos y muestras infecciosas y muestras sospechosas de contener ellos, el Departamento de Salud y Servicios Humanos de Estados Unidos ha publicado directrices para el manejo de estos agentes y materiales. 1 Las directrices publicado directrices para el manejo de estos agentes y materiales. 1 Las directrices publicado directrices para el manejo de estos agentes y materiales. 1 Las directrices describen cuatro niveles de bioseguridad, algunos de los que se mencionan en este manual en asociación con microorganismos específicos:

•

y caracterizadas de microorganismos viables no se sabe que provocan sistemáticamente enfermedades en seres humanos adultos sanos.

•

trabaja con el amplio espectro de agentes de riesgo moderado indígenas que están asociados con la enfermedad humana; Las actividades pueden ser llevadas a cabo en el banco abierto proporcionan el potencial para producir salpicaduras o aerosoles es baja.

•

trabajan con agentes con un potencial de transmisión respiratoria y que pueden provocar una infección grave y potencialmente letal. Todas las manipulaciones de laboratorio deben realizarse en una cabina de seguridad biológica u otro equipo cerrado para proteger al personal y al medio ambiente de la exposición a aerosoles potencialmente infecciosos.

•

altamente peligrosas que pueden ser transmitidas a través de la ruta de aerosol, para la que no existe una vacuna o terapia disponible y para el que el equipo especializado y se requieren instalaciones.

Consulte la referencia para las recomendaciones específicas sobre las prácticas, equipos e instalaciones de los cuatro niveles de bioseguridad. 1

e instalaciones de los cuatro niveles de bioseguridad. 1

IV. Instrucciones de almacenamiento

La mayoría de las formulaciones se debe almacenar en el intervalo de 2-25 ° C en un lugar La mayoría de las formulaciones se debe almacenar en el intervalo de 2-25 ° C en un lugar La mayoría de las formulaciones se debe almacenar en el intervalo de 2-25 ° C en un lugar seco a una distancia de fuentes de calor y la luz solar; para unos pocos, el

almacenamiento a 2-8 ° Se requiere C. A menos que se indique lo contrario, los medios de almacenamiento a 2-8 ° Se requiere C. A menos que se indique lo contrario, los medios de almacenamiento a 2-8 ° Se requiere C. A menos que se indique lo contrario, los medios de comunicación descritos en este manual debe ser almacenado a 2-25 ° DO.

comunicación descritos en este manual debe ser almacenado a 2-25 ° DO. comunicación descritos en este manual debe ser almacenado a 2-25 ° DO.

Medios de cultivo deshidratados

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sección II

medios de cultivo deshidratados son higroscópicos. Cuando se han abierto botellas de medios deshidratados para su uso inicial, que deben cerrarse tan pronto como sea posible para protegerlos de hidratación.

Debe preverse para hacer girar el stock de medios deshidratados para garantizar la frescura del producto, evitando el uso de materiales de edad, y el descarte de medios de comunicación que no está actualizado.

V. Fecha de vencimiento

La fecha de caducidad se aplica a los productos en sus envases intactos cuando se almacena como se indica. No utilice un producto si no cumple con las

especificaciones de identidad y rendimiento.

VI. Deterioro del producto

Verificar que las características físicas del polvo son típicos. La hidratación puede conducir al apelmazamiento y la contaminación / o microbiana que hacen que el medio de cultivo inutilizable.

VII. Espécimen / Recolección y Transporte

El éxito de un procedimiento de aislamiento microbiológico no depende únicamente de la calidad de los medios de cultivo utilizados. Adecuado del espécimen / recogida de muestras y el transporte son pasos cruciales en el proceso de aislamiento. Una variedad de sistemas de transporte y los medios que llevan a cabo se han ideado para prolongar la supervivencia de los microorganismos cuando se espera un retraso significativo entre la recolección y el cultivo definitivo.

Los especímenes clínicos

Para las muestras clínicas, Bundesliga ™ CultureSwab ™ y Port-A-Cul ™ Para las muestras clínicas, Bundesliga ™ CultureSwab ™ y Port-A-Cul ™ Para las muestras clínicas, Bundesliga ™ CultureSwab ™ y Port-A-Cul ™ Para las muestras clínicas, Bundesliga ™ CultureSwab ™ y Port-A-Cul ™ Para las muestras clínicas, Bundesliga ™ CultureSwab ™ y Port-A-Cul ™ Para las muestras clínicas, Bundesliga ™ CultureSwab ™ y Port-A-Cul ™ Para las muestras clínicas, Bundesliga ™ CultureSwab ™ y Port-A-Cul ™ Para las muestras clínicas, Bundesliga ™ CultureSwab ™ y Port-A-Cul ™

recogida y transporte de productos están disponibles. Para el transporte y el crecimiento del patógeno Neisseria, sistemas Transgrow, Gono-Pak y crecimiento del patógeno Neisseria, sistemas Transgrow, Gono-Pak y crecimiento del patógeno Neisseria, sistemas Transgrow, Gono-Pak y JEMBEC ™ * que contiene Modificado Thayer-Martin (MTM II), Martin-Lewis o GC-Lect ™ Se recomiendan agares. Las muestras deben obtenerse antes se o GC-Lect ™ Se recomiendan agares. Las muestras deben obtenerse antes se o GC-Lect ™ Se recomiendan agares. Las muestras deben obtenerse antes se o GC-Lect ™ Se recomiendan agares. Las muestras deben obtenerse antes se ha administrado la terapia antimicrobiana. Se debe prever para un transporte inmediato al laboratorio.

El laboratorio clínico debe estar equipado con la información del paciente suficiente para que el microbiólogo para seleccionar los medios de comunicación más adecuados y técnicas adecuadas. Para obtener información detallada, las referencias apropiadas deben ser consultados.

*JEMBEC es una marca comercial de Miles Scientific.

Las muestras industriales

recipientes estériles deben ser utilizados para recoger muestras. Para la vigilancia del medio ambiente, las muestras se pueden recoger usando BD estériles paquete de hisopos.

Las muestras deben representar la masa de material que está siendo examinada. Las muestras pueden requerir una manipulación especial, incluyendo la refrigeración, para evitar la contaminación directa de la muestra por los microorganismos y el posterior crecimiento de tales contaminantes durante el muestreo, transporte y almacenamiento antes del examen. Para obtener información detallada, las referencias apropiadas deben ser consultados.

VIII. materiales suministrados

Medio de cultivo deshidratados Suplementos y enriquecimientos (si es aplicable)

IX. Materiales necesarios pero no suministrados

Material de vidrio de medición de pH escala metros Autoclave agua purificada, pH 5.5 a 7.5 baño de agua platos Incubadora de Petri estériles o tubos

Medios de cultivo auxiliar, reactivos y equipos de laboratorio como se requiere.

Procedimientos X.

rehidratación

El procedimiento empleado para la disolución de los medios de cultivo deshidratado muy a menudo determina la claridad y el rendimiento del producto acabado. La homogeneidad de la solución y la exposición mínima de calor son consideraciones importantes. Antes de usar, examinar el material deshidratado. material de Caked o descolorida no debe utilizarse para la preparación de lotes de medios de cultivo.

Añadir la cantidad precisa de material en polvo a aproximadamente la mitad del volumen de agua purificada. Después de mezclar bien, añadir el resto del agua teniendo cuidado para lavar los lados del recipiente (preferiblemente un matraz Erlenmeyer que es al menos 2-3 × el volumen del medio). Disolución se ve reforzada por permitiendo es al menos 2-3 × el volumen del medio). Disolución se ve reforzada por permitiendo es al menos 2-3 × el volumen del medio). Disolución se ve reforzada por permitiendo preparaciones de agar reposar durante 5 minutos con agitación ocasional antes de la ebullición. Fórmulas que no contienen agar, gelatina o cistina se disuelven sin calentamiento, pero se requiere calor para disolver otros de modo que puedan ser dispensados ​​y esterilizados. Cuando se requiere calentamiento, el calor debe aplicarse suavemente y la preparación se agita según sea necesario para evitar que se queme. Sin embargo, se debe tener cuidado para evitar erupciones de medios de comunicación que pueden producirse cuando se agita un frasco de medio que está en o muy cerca del punto de ebullición. Hervir lo más brevemente posible para obtener la solución; 1 minutos es generalmente suficiente. La exposición por períodos más largos puede oscurecer el medio y reducir seriamente sus propiedades de estimulación del crecimiento. En ningún caso se debe añadir medio en polvo a agua y se colocó inmediatamente en un autoclave desde capas y la separación de los ingredientes, la formación de precipitado y el oscurecimiento es probable que ocurran con disminución de rendimiento.

Esterilización

Siga las instrucciones de la etiqueta para la longitud y la temperatura de esterilización. Los tiempos de esterilización recomendados asumen un volumen de un litro (1000 ml) o menos. Para volúmenes más grandes, el tiempo de esterilización debe extenderse pero la temperatura no debe

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ser criado. Cuando se utilizan volúmenes más grandes, los estudios de validación se debe realizar para determinar el ciclo de esterilización óptima para cada combinación única contenedor tamaño / volumen. medios autoclave que contiene hidratos de carbono a una temperatura que no exceda de 116-118 ° C para evitar la caramelización carbono a una temperatura que no exceda de 116-118 ° C para evitar la caramelización carbono a una temperatura que no exceda de 116-118 ° C para evitar la caramelización de los carbohidratos. Es importante que los parámetros físicos del esterilizador y la eficacia de la matanza vigilarse con frecuencia a través del uso de instrumentos de calibración y los indicadores biológicos. No esterilizar en autoclave los medios de comunicación que no deben ser esterilizados con calor. Hay numerosas formulaciones disponibles que sólo pueden ser disueltas y se usó directamente. La actuación de estos medios se ve seriamente afectada, sometiéndolos a calor.

La adición de enriquecimientos y Suplementos

Enriquecimientos y suplementos tienden a ser sensibles al calor. Se enfría el medio a 45-55 ° C en un baño de agua antes de añadir enriquecimientos o suplementos. 45-55 ° C en un baño de agua antes de añadir enriquecimientos o suplementos. 45-55 ° C en un baño de agua antes de añadir enriquecimientos o suplementos. Asegurar una mezcla adecuada del medio basal con enriquecimientos o suplementos por turbulencia para mezclar a fondo.

caldos estériles pueden enfriarse a temperatura ambiente antes de la adición de enriquecimiento.

pH

medios de cultivo deshidratados comerciales están diseñados para caer dentro del intervalo de pH especificado después la esterilización con vapor. Para la esterilización del intervalo de pH especificado después la esterilización con vapor. Para la esterilización del intervalo de pH especificado después la esterilización con vapor. Para la esterilización del filtro, ajustar el pH, si es necesario, antes del filtrado.

Medida de pH a temperatura ambiente (25 ° DO). Evitar los ajustes de pH Medida de pH a temperatura ambiente (25 ° DO). Evitar los ajustes de pH Medida de pH a temperatura ambiente (25 ° DO). Evitar los ajustes de pH excesivas.

Dispensación y almacenamiento de Medios Preparados

Después de la esterilización, los medios preparados en el laboratorio deben ser retirados de la autoclave tan pronto como la presión ha caído a cero. La aceleración de la apertura de la autoclave antes de presión cero se alcanza puede resultar en la expulsión de los medios de comunicación de los vasos de esterilización con considerable pérdida de contenido. Para la preparación de placas, enfriar el medio a 50-55 ° C antes de la contenido. Para la preparación de placas, enfriar el medio a 50-55 ° C antes de la contenido. Para la preparación de placas, enfriar el medio a 50-55 ° C antes de la dispensación para reducir la evaporación de agua. Asegurar un mezclado suave durante la dispensación y dispensar rápidamente. Si se utiliza un dispensador automático de planchas, prescindir de medios de propósito general antes de dispensar medios selectivos. Invertir llena y se enfrió fondos (solidificado) plato Petri sobre sus tapas off-set y deje reposar durante 1-2 horas para obtener una superficie seca. Es aconsejable el uso de medios en placa recién vertida en el día de la preparación. Alternativamente, las placas deben ser colocados en el refrigerador tan pronto como se han solidificado (agar hacia arriba) y varias placas representativas incubaron a 35 ± 2 ° C como un control de arriba) y varias placas representativas incubaron a 35 ± 2 ° C como un control de arriba) y varias placas representativas incubaron a 35 ± 2 ° C como un control de esterilidad. Si el almacenamiento de placas es por más de varios días, se recomienda que ser envueltos en plástico o de otro modo protegidas para evitar la pérdida de humedad. La mayoría de los medios de comunicación, y especialmente aquellos colorantes o indicadores que contienen, deben ser protegidos de la luz durante el almacenamiento.

Cuando se hayan enfriado, apretar los tapones de los medios de comunicación que están contenidos en tubos o botellas con tapón de rosca; almacenar todos los tubos y botellas en condiciones apropiadas, por lo general a temperatura ambiente. La vida útil de algunos medios de comunicación, como Löwenstein Medio, puede prolongarse por refrigeración. medios preparados que han sido refrigerados deben ser retirados de la refrigeración y se equilibraron a temperatura ambiente antes de la inoculación para permitir que el agua de condensación se evapore o disipar y para evitar el choque de temperatura para el inóculo.

XI. Control de calidad del usuario

Para los medios preparados en casa, cada lote de cada medio debe ser probado. Cuando la calificación de un nuevo lote de medio de cultivo, se recomienda probar el nuevo lote de medio en paralelo con una gran cantidad aprobada de medio. organismos de control de calidad se deben mantener de manera adecuada y la preparación del inóculo se deben realizar de acuerdo con las directrices publicadas (consulte la monografía “control de calidad organismos”). Mantener los registros apropiados e informar las deficiencias al fabricante.

Comentarios sobre BD Control de calidad del usuario

En las descripciones de los productos, la sección de control de calidad del usuario contiene los procedimientos para la identidad (Especificaciones de la identidad) y rendimiento (Respuesta del cultivo). Las diferencias en las especificaciones de identidad y Respuesta del cultivo de prueba para los medios ofrecidos ya que ambos Difco y Bundesliga Respuesta del cultivo de prueba para los medios ofrecidos ya que ambos Difco y Bundesliga Respuesta del cultivo de prueba para los medios ofrecidos ya que ambos Difco y Bundesliga Respuesta del cultivo de prueba para los medios ofrecidos ya que ambos Difco y Bundesliga las marcas pueden reflejar diferencias en el desarrollo y prueba de los medios de comunicación para aplicaciones industriales y clínicos, por las publicaciones

referenciadas. Para Especificaciones de la identidad, la aparición esperada de la de polvo, y de la solución después de la adición del polvo a agua purificada y de ebullición, cuando sea apropiado, se indican. El preparado (acabado) apariencia medio y el pH final, tanto determinaron a 25 ° C, se especifican. Para Respuesta del cultivo, los organismos de determinaron a 25 ° C, se especifican. Para Respuesta del cultivo, los organismos de determinaron a 25 ° C, se especifican. Para Respuesta del cultivo, los organismos de prueba, inóculos y los resultados se proporcionan. Con excepción de los medios de comunicación que se prueban con cultivos frescos (agar sin diluir o cultivos de caldo), se proporciona el número de unidades formadoras de colonias (CFU) por placa. En Recuperación, en el crecimiento Difco y Bundesliga medios en placa pueden ser Recuperación, en el crecimiento Difco y Bundesliga medios en placa pueden ser Recuperación, en el crecimiento Difco y Bundesliga medios en placa pueden ser