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6.1 Concentración y lixiviación de alicina

La concentración de alicina en el extracto de ajo recién preparado fue de 0.03 ± 0.0003%, y la mayor concentración se cuantificó cuatro días después de la extracción, lo que posiblemente se deba a, que al momento de la extracción el tiempo de reacción para la conversión de alina en alicina no fuera suficiente, por esta razón, la concentración inicial no se tomó en cuenta para el análisis estadístico. Después de un periodo de 4, 16 y 22 días de almacenamiento, la concentración de alicina en el extracto de ajo fue de 0.047 ± 0.003%, 0.043 ± 0.0004% y 0.040 ± 0.00008%, respectivamente, los cuales fueron significativamente diferentes (p=0.049) (Figura 13). A partir del día 4 de almacenamiento, se observó una disminución de la concentración de alicina, con una diferencia del 8.51% entre los días 4 al 16 y del 14.89% del día 4 al día 22.

Media Media±ES Día 4 Día 16 Día 22

Día de Evaluación 0.039 0.040 0.041 0.042 0.043 0.044 0.045 0.046 0.047 0.048 0.049 % d e a lic in a

Figura 13. Concentración de alicina (%) en el extracto de ajo. Las letras diferentes establecen diferencias significativas (p<0.05) (ANOVA de Friedman, H(2)=6.0, p=0.049). ES=error estándar. En el polvo de ajo recién procesado (día 0) la concentración de alicina fue de 2.79 ± 0.005%, a los 8 y 16 días de almacenamiento la concentración se redujo a 2.67 ± 0.004%

a

b

y 2.56 ± 0.07%, respectivamente, lo que equivale a una disminución significativa (p=0.049) del 8.24% de la concentración de alicina entre los días 0 y 16 (Figura 14).

Media Media±ES Día 0 Día 8 Día 16

Día de Ev aluación 2.50 2.52 2.54 2.56 2.58 2.60 2.62 2.64 2.66 2.68 2.70 2.72 2.74 2.76 2.78 2.80 2.82 % d e a lic in a

Figura 14. Concentración de alicina (%) en el polvo de ajo. Las letras diferentes establecen diferencias significativas (p<0.05) (ANOVA de Friedman, H(2)=6.0, p=0.049). ES=error estándar. El análisis de la concentración de alicina en el extracto acuoso y en el polvo de ajo fue fundamental para definir la forma y vía de suministro del tratamiento, con base en los resultados se escogió el polvo de ajo como la presentación adecuada para los propósitos de este trabajo.

La alimentación de los jureles involucra la introducción del alimento particulado en el agua, donde los peces lo ingieren; el contacto del alimento con el agua, supone la lixiviación de la alicina, ya que este compuesto es hidrosoluble. En la Figura 15 se observan los resultados de las pruebas de lixiviación para el alimento adicionado con la dosis baja y alta de polvo de ajo.

La máxima concentración de alicina lixiviada en la dosis baja se registró a los 1.5 min de exposición al agua (1.02 ± 0.23%) y para la dosis alta a los 4.5 min (2.36 ± 0.99%). En las medidas posteriores a los valores máximos de lixiviación para el alimento con la dosis baja, se observó una disminución significativa de la concentración de alicina (p=0.0036),

a

b

mientras que con la dosis alta no se encontraron diferencias significativas. Cabe resaltar que por el comportamiento alimenticio frenético del jurel, las partículas de alimento no permanecieron en el agua un tiempo mayor a 10 segundos, por lo que la pérdida de alicina por lixiviación debe ser menor al 28% en la dosis baja y 65% en la dosis alta de la cantidad incluida en la dieta y que fue evaluada a los 30 segundos.

Tiempo A li c in a ( % ) Media Media±ES Tratamiento: Dosis baja

0.5 min 1.5 min 4.5 min 13.5 min 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0

Tratamiento: Dosis alta 0.5 min 1.5 min 4.5 min 13.5 min

Figura 15. Lixiviación de alicina en el alimento suplementado con la dosis baja (2%) y alta (4%) de polvo de ajo. Las letras diferentes establecen diferencias significativas (p<0.05) (Kruskal-Wallis, H(3)=13.52, p=0.0036). ES=error estándar.

6.2 Calidad del agua

En la Tabla 2 se resumen los resultados del análisis de la calidad del agua de los cultivos de jurel para el periodo experimental. El experimento tuvo una duración de 61 días, en los primeros 32 días la tasa de recambio del agua en las unidades de cultivo fue de 12 veces el volumen del tanque por día y la temperatura se mantuvo entre 24.9 ± 0.2 y 25.1 ± 0.14 °C, lo que permitió mantener una condición adecuada de la calidad del agua y de la condición de los organismos. Sin embargo, con el propósito de propiciar la infestación de los jureles con Z. seriolae, a partir del día 33 se incrementó la temperatura del agua a

a ab ac ac a a a a

una tasa de 1 °C por día, hasta alcanzar 28 °C, además, se redujo la tasa de recambio del agua a 3 veces el volumen del estanque por día.

La concentración de compuestos nitrogenados como nitrógeno amoniacal total (NAT) y nitritos (NO2) se presentan en la Tabla 2. La concentración de NAT varió de 0.43 ± 0.29

a 0.58 ± 0.37 mg/l entre los tratamientos al día 32, mientras que a los 61 días del experimento fue de 0.73 ± 0.21 a 0.82 ± 0.17; solamente se registró un aumento poco significativo del NAT al día 61 en el grupo control (p=0.04). La concentración de NO2 se

mantuvo entre 0.52 ± 0.07 y 0.59 ± 0.20 mg/l al día 32 y de 0.45 ± 0.19 a 0.77 ± 0.46 mg/l al día 61, estos valores no fueron significativamente diferentes entre los 32 y 61 días. Tabla 2. Valores promedio de las variables relacionadas con la calidad del agua de las unidades de cultivo de jurel (Seriola lalandi), agrupadas en sus respectivos tratamientos: Control (0%), Dosis baja (2%) y Dosis alta (4%) de polvo de ajo en el alimento. Media ± Desviación estándar.

Día Control Dosis Baja Dosis Alta

Oxígeno disuelto (mg/l) 32 6.42 ± 0.36 6.33 ± 0.30 6.41 ± 0.29 61 5.92 ± 0.83 6.04 ± 0.60 6.13 ± 0.60 Saturación de oxígeno (%) 32 92.94 ± 8.06 101.50 ± 83.92 94.14 ± 4.04 61 90.82 ± 6.39 90.74 ± 8.23 92.12 ± 7.52 Temperatura (°C) 32 24.88 ± 0.20 24.98 ± 0.12 25.11 ± 0.14 61 28.01 ± 0.13 28.01 ± 0.10 28.09 ± 0.22 Salinidad (ups) 32 33.61 ± 0.08 33.61 ± 0.07 33.60 ± 0.07 61 33.39 ± 0.16 33.35 ± 0.13 33.32 ± 0.10 NAT (mg/l) 32 0.50 ± 0.26 0.43 ± 0.29 0.58 ± 0.37 61 0.76 ± 0.32 0.73 ± 0.21 0.82 ± 0.17 NO2 (mg/l) 32 0.55 ± 0.06 0.59 ± 0.20 0.52 ± 0.07 61 0.77 ± 0.46 0.45 ± 0.19 0.51 ± 0.12

6.3 Variables productivas

En la Tabla 3 se presenta el promedio y la desviación estándar del peso, longitud, índice de condición de Fulton y el índice hepatosomático, para cada uno de los grupos experimentales a los 0, 32 y 61 días del bioensayo. Cabe aclarar que al día 61, se registró un evento de mortalidad súbita en dos de los tres tanques del grupo control, por lo que el análisis estadístico para esta fecha solo se realizó entre los tratamientos dosis baja y alta.

En la evaluación de las variables productivas entre los tratamientos (control, dosis baja y alta), solo se observaron diferencias significativas en el incremento en peso al día 32 (p=0.002, 0.003 y 0.002, respectivamente). Para la longitud, solamente se registraron diferencias entre los días de muestreo (p=0.002, p<0.002 y p<0.034, del control, dosis baja y alta, respectivamente) (Tabla 3).

El índice de condición de los peces disminuyó al día 61 para los grupos dosis baja (p=0.005) y alta (p=0.003). Los organismos del tratamiento dosis baja, al día 32 tuvieron un índice hepatosomático menor (1.15 ± 0.18%) (p=0.02) en comparación con el control (1.41 ± 0.20%). En los peces del grupo control, el índice se incrementó de 1.18 ± 0.22 a 1.41 ± 0.20% (p=0.049) a los 32 días y en el grupo dosis alta disminuyó de 1.21 ± 0.21 a 1.06 ± 0.13 entre los 32 y 61 días del experimento (p=0.049).

Tabla 3. Análisis de los parámetros productivos en el transcurso del bioensayo, agrupados en sus respectivos grupos experimentales: Control (0%), Dosis baja (2%) y Dosis alta (4%). Media ± Desviación estándar. Letras mayúsculas se utilizaron para la comparación entre los días de evaluación en cada tratamiento y letras minúsculas para la comparación entre tratamientos, letras diferentes del mismo tipo, mayúsculas o minúsculas, son significativamente diferentes (p<0.05).

Días de muestreo Tratamiento 0 32 61 Peso (g) Control 174.88 ± 18.81aA 302.94 ± 46.48aB 340.11 ± 53.38* Dosis baja 178.76 ± 26.19aA 283.88 ± 47.87aB 335.28 ± 70.74aB Dosis Alta 189.73 ± 33.86aA 316.23 ± 40.52aB 354.14 ± 57.12aB Longitud (cm) Control 20.02 ± 0.83aA 23.81 ± 1.20aB 25.66 ± 1.07* Dosis baja 20.07 ± 1.12aA 23.38 ± 1.16aB 25.33 ± 1.42aC Dosis Alta 20.58 ± 1.17aA 24.13 ± 0.88aB 25.91 ± 1.43aC Índice de condición de Fulton Control 2.18 ± 0.11aA 2.23 ± 0.13aA 2.01 ± 0.24* Dosis baja 2.21 ± 0.20aA 2.20 ± 0.14aA 2.04 ± 0.20aB Dosis Alta 2.16 ± 0.15aA 2.24 ± 0.12aA 2.02 ± 0.13aB Índice hepatosomático (%) Control 1.18 ± 0.22aA 1.41 ± 0.20aB 1.00 ± 0.21* Dosis baja 1.21 ± 0.25aA 1.15 ± 0.18bA 1.14 ± 0.21aA

Dosis Alta 1.25 ± 0.23aA 1.21 ± 0.21abA 1.06 ± 0.13aB

* Este tratamiento no se incluyó en el análisis estadístico.

En el análisis de la mortalidad solo se consideró el periodo comprendido del día 33 al 61, ya que antes no se presentó mortalidad, donde se observó que los valores fueron de

58.33 ± 50.52, 29.17 ± 19.09 y 29.17 ± 26.02% en los grupos control, dosis baja y alta, respectivamente, los cuales no fueron diferentes.

En relación al consumo de alimento, a los 32 días del experimento los organismos consumieron todo el alimento según la ración diaria calculada y ajustada semanalmente. Cuando se realizó la infestación experimental y se modificó la calidad del agua, en el periodo comprendido entre los 33 y 61 días de experimentación, fue evidente que los peces de algunas unidades de cultivo no estaban consumiendo la ración diaria completa, por lo que se cuantificó la cantidad de alimento consumido. El consumo de alimento en los jureles fue de 7.83 ± 2.31 g/pez en el grupo control, de 8.52 ± 1.44 g/pez en el grupo dosis baja y de 9.20 ± 1.98 g/pez en el grupo dosis alta, lo que demuestra un mayor consumo a medida que aumentaba la inclusión de ajo en el alimento (p<0.0001) (Figura 16).

Media Media±ES

Control Dosis baja Dosis alta

Tratamiento (Día 61) 7.4 7.6 7.8 8.0 8.2 8.4 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 9.6 C o n su m o d e a lim e n to ( g /p e z)

Figura 16. Evaluación del consumo de alimento del jurel (S. lalandi), suplementado por 61 días con el 0, 2 y 4% de polvo de ajo (grupo control, dosis baja y alta, respectivamente) y expuesto a Z.

seriolae por los últimos 29 días de experimento. Las letras diferentes establecen diferencias

significativas (p<0.05). (Kruskal-Wallis, H(2)=41.55, p<0.0001). ES=error estándar.

Por otro lado, el factor de conversión alimenticia se evaluó al día 32 y fue de 1.57 ± 0.32, 1.82 ± 0.46 y 1.46 ± 0.32 en los grupos control, dosis baja y alta, sin observar diferencias significativas.

a

6.4 Prevalencia e intensidad parasitaria

El análisis microscópico de las branquias de los jureles reveló la presencia de Z. seriolae

en todos los tratamientos (Figura 17). En la Tabla 4 se presentan los resultados de la prevalencia e intensidad parasitaria cuantificados al día 61, después de la introducción de jureles infestados con Z. seriolae por un período de 29 días y del deterioro inducido de la calidad ambiental (incremento de la temperatura y reducción de la tasa de recambio de agua de mar); cabe resaltar que al inicio del experimento (día 0) y al día 32 (período de consumo de la dieta experimental), se analizaron las branquias en busca de parásitos o daño, con esta observación se comprobó que las branquias se encontraban en buen estado y libres de parásitos.

Figura 17. Zeuxapta seriolae adherida a un filamento branquial de jurel Seriola lalandi.

En los organismos de los tratamientos dosis baja y alta, la prevalencia e intensidad media parasitaria, no hubo diferencias significativas (Tabla 4). En el tratamiento control, la mortalidad de un 88% de los jureles en dos de las tres unidades experimentales no permitió hacer la comparación estadística de la prevalencia e intensidad con respecto a los tratamientos (dosis alta y baja), sin embargo, la intensidad parasitaria promedio de los jureles que sobrevivieron en la unidad control fue mayor (114.10 ± 132.31 parásitos/pez).

Tabla 4. Prevalencia e intensidad media de Zeuxapta seriolae en las branquias de jurel (Seriola

lalandi) alimentado con una dieta enriquecida con polvo de ajo: Control (0%), Dosis baja (2%) y

Dosis alta (4%). Media ± Desviación estándar. Las letras diferentes establecen diferencias significativas (p<0.05).

Control Dosis Baja Dosis Alta

Prevalencia (%) 100* 100a 93.33 ± 11.55a

Intensidad media (# de parásitos/pez) 114.10 ± 132.31* 89.71 ± 68.19a 52.47 ± 48.84a * Este tratamiento no se incluyó en el análisis estadístico.

En el último muestreo (61 días), se pudo observar la presencia de un dinoflagelado parásito en las branquias de los jureles de todas las unidades experimentales. Este dinoflagelado se detectó en otras unidades de cultivo del Departamento de Acuicultura de CICESE, antes de que se identificaran los signos clínicos de esta parasitosis en los organismos utilizados en este bioensayo (Figura 18). Es posible que la calidad del agua en la última etapa del experimento haya propiciado la infestación de los jureles con este dinoflagelado que ya estaba circulando en la red del sistema cerrado del Departamento.

Figura 18. (a) Dinoflagelados en branquias de jurel Seriola lalandi (2X), (b) Mucus de branquia de jurel infestado con dinoflagelados (flechas rojas) (10X).

6.5 Análisis de componentes sanguíneos

6.5.1 Parámetros hematológicos

La interpretación de estos resultados se presenta haciendo un análisis del efecto entre los tratamientos, posteriormente, el análisis de la respuesta en el transcurso de los días del experimento y por último la evaluación clínica de los parámetros sanguíneos evaluados.

En la Tabla 5 se presentan los valores de los parámetros hematológicos: concentración de glóbulos rojos (GR), hematocrito (Hct), concentración total de glóbulos blancos (GB), de sus diferentes tipos (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfocitos y monocitos) y la concentración de trombocitos. En la Figura 19 se observan los diferentes tipos de leucocitos, además de los trombocitos.

Figura 19. Glóbulos blancos del jurel (Seriola lalandi) señalados con flechas: a) Neutrófilo, b) Eosinófilo, c) Basófilo, d) Linfocito, e) Trombocito y f) Monocito.

En los jureles tratados con una dosis alta de ajo, se observó una disminución significativa (p=0.001) de la concentración total de eritrocitos a los 32 días de evaluación (8.50 ± 0.76 cel x 106 /mm3). Al inicio del experimento, el porcentaje de hematocrito de los jureles fue

significativamente mayor (p=0.01) en el grupo dosis alta con 63.52 ± 3.68% y a los 32 días disminuyó (p=0.02) en el tratamiento dosis alta con un 53.1 ± 3.49%, contrastado con el 57.69 ± 8.58 y 57.13 ± 4.51% del control y dosis baja, respectivamente. Finalmente a los 61 días, el hematocrito del grupo dosis baja es menor (47.69 ± 5.45%, p=0.046) al del grupo dosis alta (51.72 ± 5.72%) (Tabla 5).

Al inicio del bioensayo, en los peces del grupo dosis alta se registró un valor significativamente mayor (p=0.003) en la concentración total de leucocitos (10.95 ± 1.18 cel x 103/mm3). Posteriormente, se presentó una disminución del recuento total de

leucocitos en el grupo dosis alta en los días 32 (5.35 ± 1.33 cel x 103/mm3) y 61 (6.88 ±

1.67 cel x 103/mm3) (p=0.01 y 0.0008, respectivamente) con respecto al grupo control y

dosis baja (Tabla 5).

La concentración inicial de eosinófilos fue menor (p=0.02) en el grupo dosis alta (67.98 ± 62.54 cel/µl) al inicio del experimento. A los 32 días, se observó un incremento (p=0.004) en los organismos del grupo dosis alta de 614.68 ± 521.75 cel/µl con respecto a 127.01 ± 91.64 y 157.22 ± 113.17 cel/µl del control y dosis baja, respectivamente. Mientras que la cantidad de basófilos fue mayor (p=0.007) en el tratamiento dosis baja a los 32 días con 64.35 ± 61.83 cel/µl en comparación a los 9.35 ± 19.82 y 34.26 ± 29.52 cel/µl del grupo control y dosis alta, respectivamente (Tabla 5).

Al inicio del experimento, en el grupo dosis alta se observó una mayor cantidad de linfocitos (4896.99 ± 1219.65 cel/µl) (p=0.03) y posteriormente una disminución (p=0.003) a los 61 días (3452.78 ± 771.72 cel/µl) con respecto al grupo dosis baja (6123.05 ± 3824.75 cel/µl). En relación a la cantidad de trombocitos, en los peces del grupo dosis alta se registró una disminución (p=0.02) en la cantidad de trombocitos en el grupo dosis alta a los 61 días, con una concentración de 1213.70 ± 805.11 cel/µl comparado con las 2699.49 ± 1779.40 cel/µl del grupo dosis baja (Tabla 5).

En el análisis de cada tratamiento en el transcurso del tiempo, se encontraron diferencias significativas (p=0.004) en la disminución de la concentración total de eritrocitos del grupo dosis alta a los 61 días (7.06 ± 1.08 cel x 103/mm3). También se observó una disminución

del valor del hematocrito en los organismos de los grupos dosis alta (53.1 ± 3.49%) (p=0.01) a los 32 días y el grupo dosis baja (47.69 ± 5.45%) (p=0.003) al día 61 (Tabla 5).

En los organismos del grupo dosis alta, el número total de leucocitos (5.35 ± 1.33 cel x 103/mm3) disminuyó significativamente (p=0.01) a los 32 días y posteriormente aumentó

(p=0.02) a los 61 días (6.88 ± 1.67 cel x 103/mm3) (Tabla 5).

En relación a la concentración de neutrófilos, en el grupo dosis alta disminuyó significativamente (p=0.008) a los 32 días (496.6 ± 341.45 cel/µl). Por otra parte se registró un incremento significativo (p=0.005) en la concentración de los eosinófilos del grupo dosis baja a los 61 días (2280.26 ± 2120.11 cel/µl) y en el grupo dosis alta (p=0.004) a partir de los 32 días (614.68 ± 521.75 cel/µl). La cantidad de basófilos del grupo control disminuyó (p=0.03) al día 32 de 110.41 ± 188.35 cel/µlel día 0 a 9.35 ± 19.82 cel/µl. También hubo un incremento (p=0.02) del 106% en los basófilos (70.66 ± 89.33 cel/µl) en el grupo dosis alta a los 61 días (Tabla 5).

En el número de linfocitos se observó una disminución (p=0.008) en los peces del grupo dosis alta a los 32 días (2816.76 ± 941.20 cel/µl). En relación a la concentración de monocitos fue evidente una disminución en el grupo dosis baja (186.98 ± 134.65 cel/µl) y alta a los 32 días (259.24 ± 177.71 cel/µl) (p=0.008 y 0.02, respectivamente), el mismo efecto se observó en los trombocitos del grupo dosis alta a los 32 días (1130.54 ± 623.41 cel/µl) (p=0.01) (Tabla 5).

Tabla 5. Parámetros hematológicos del jurel Seriola lalandi alimentado con una dieta suplementada con ajo: Control (0%), Dosis baja (2%) y Dosis alta (4%) y evaluados a los 0, 32 y 61 días. Media ± Desviación estándar. Se utilizaron letras mayúsculas para la comparación entre los días de evaluación en cada tratamiento y letras minúsculas para la comparación entre tratamientos, letras diferentes del mismo tipo, mayúsculas o minúsculas, indican las diferencias significativas (p<0.05).

Días de muestreo

Tratamiento 0 32 61

Eritrocitos (cel x 106/mm3)

Control 8.99±1.30aA 9.86±0.77aA 9.03±1.70* Dosis baja 8.81±0.98aA 9.08±0.82abA 7.77±1.92aA Dosis Alta 8.67±1.28aA 8.50±0.76bA 7.06±1.08aB

Hematocrito (%)

Control 58.84±2.55aA 57.69±8.58aA 51.78±6.56* Dosis baja 60.34±4.88abA 57.13±4.51abA 47.69±5.45 aB Dosis Alta 63.52±3.68bA 53.10±3.49bB 51.72±5.72bB

Leucocitos (cel x 103/mm3)

Control 7.90±2.04aA 8.46±3.32 aA 13.78±5.98* Dosis baja 8.01±1.23aA 8.18±3.28abA 13.08±5.83 aA Dosis Alta 10.95±1.18bA 5.35±1.33bB 6.88±1.67bC

Neutrófilos (cel/µl)

Control 805.61±450.32aA 860.74±648.78aA 1685.08±830.32* Dosis baja 965.61±511.13aA 697.95±608.96aA 1215.74±730.27aA Dosis Alta 1331.39±749.01aA 496.60±341.45aB 978.86±749.88aAB

Eosinófilos (cel/µl)

Control 380.11±413.05aA 127.01±91.64aA 3616.04±4018.90* Dosis baja 196.72±181.58abA 157.22±113.17aA 2280.26±2120.11aB Dosis Alta 67.98±62.54bA 614.68±521.75bB 1257.89±1277.09aB

Basófilos (cel/µl)

Control 110.41±188.35aA 9.35±19.82aB 238.35±278.41* Dosis baja 53.23±61.69aA 64.35±61.83bA 97.33±92.48aA

Dosis Alta 73.10±102.82aA 34.26±29.52abA 70.66±89.33aB

Linfocitos (cel/µl)

Control 3408.77±951.73aA 3680.30±2398.55aA 5902.05±5001.55* Dosis baja 4036.53±1565.65abA 4455.56±1500.43aA 6123.05±3824.75aA Dosis Alta 4896.99±1219.65bA 2816.76±941.20aB 3452.78±771.72bB Monocitos (cel/µl) Control 449.28±197.76aA 572.41±419.59aA 121.54±119.17* Dosis baja 579.51±419.32aA 186.98±134.65aB 295.17±371.09aB Dosis Alta 930.68±733.57aA 259.24±177.71aB 280.29±346.28aB Trombocitos (cel/µl) Control 2750.60±1224.10aA 3018.35±2736.73aA 2219.45±1031.54* Dosis baja 2182.98±1240.82aA 2216.88±1333.21aA 2699.49±1779.40aA Dosis Alta 2364.45±1174.29aA 1130.54±623.41aB 1213.70±805.11bB * Este tratamiento no se incluyó en el análisis estadístico.

6.5.2 Química sanguínea

En la Tabla 6 se presentan los resultados del análisis de la concentración de proteínas totales, albúmina y globulina. La interpretación de estos resultados se realizó de la misma forma que en la sección de los parámetros hematológicos.

En el análisis entre tratamientos, al inicio del experimento, los peces del grupo dosis baja tuvieron la mayor concentración de proteínas totales (71.55 ± 4.57 mg/ml) y globulina (60.16 ± 4.12 mg/ml) (p=0.005 y 0.0003, respectivamente), y en el grupo dosis alta solamente la albúmina (15.39 ± 1.67 mg/ml) (p=0.0001). Al día 32 se presentó una disminución significativa en el grupo dosis baja de la concentración de proteínas totales (59.80 ± 3.88 mg/ml) (p=0.0007) y globulina (48.07 ± 3.03 mg/ml) (p=0.0001); en este día de evaluación también hubo un incremento en la concentración de albúmina (10.71 ± 1.72 mg/ml) en los organismos del grupo dosis baja (p=0.03), contrario a la disminución observada en el grupo dosis alta (8.89 ± 0.91 mg/ml) (p=0.03) (Tabla 6).

El análisis de los cambios temporales de la química sanguínea indicaron una disminución en la concentración de proteínas totales del grupo dosis baja a los 32 días (59.80 ± 3.88 mg/ml) (p=0.002). Los peces del grupo dosis alta, tuvieron una menor concentración de albúmina a los 32 días (8.89 ± 0.91 mg/ml) (p=0.002) y posteriormente aumentó a los 61 días (13.28 ± 2.19 mg/ml) (p=0.002) (Tabla 6).

En cuanto a la concentración de globulinas, en el grupo dosis baja se observó una disminución de 60.16 ± 4.12 a 48.07 ± 3.03 mg/ml al día 32 (p=0.002) y después de la infestación experimental se registró un aumento del 10.1% (p=0.04), mientras que, en el grupo dosis alta hubo un aumento a los 32 días (57.86 ± 6.36 mg/ml) (p=0.02) y posteriormente una disminución a los 61 días (49.40 ± 2.86 mg/ml) (p=0.01) (Tabla 6).

Tabla 6. Concentración de proteínas sanguíneas del jurel Seriola lalandi alimentado con una dieta suplementada con polvo de ajo (Control 0%, Dosis baja 2% y Dosis alta 4%) y evaluados a los 0, 32 y 61 días de cultivo. Media ± Desviación estándar. Se utilizaron letras mayúsculas para la comparación entre los días de evaluación en cada tratamiento y letras minúsculas para la comparación entre tratamientos, letras diferentes del mismo tipo, mayúsculas o minúsculas, indican las diferencias significativas (p<0.05).

Días de muestreo

Tratamiento 0 32 61

Proteínas totales (mg/ml)

Control 63.11±4.02aA 65.69±2.23aA 66.64±4.52* Dosis baja 71.55±4.57bA 59.80±3.88bB 63.54±8.53aB Dosis Alta 67.20±2.84abA 66.52±6.27aA 63.34±3.74aA

Albúmina (mg/ml)

Control 9.84±2.14aA 9.39±1.0aA 14.14±2.72* Dosis baja 10.83±2.55aA 10.71±1.72abA 11.49±4.46aA Dosis Alta 15.39±1.67bA 8.89±0.91acB 13.28±2.19aC

Globulina (mg/ml)

Control 53.55±5.37aA 56.15±2.18aA 52.50±2.70* Dosis baja 60.16±4.12bA 48.07±3.03bB 52.93±5.78aC Dosis Alta 51.08±2.82aA 57.86±6.36aB 49.40±2.86aC * Este tratamiento no se incluyó en el análisis estadístico.

6.5.3 Interpretación clínica de resultados de hematología y química sanguínea del jurel

Para interpretar los resultados del análisis clínico, primero se definieron los valores de referencia para cada una de las variables a partir de los valores obtenidos al día 0, tomando en cuenta los datos dentro de los percentiles 5 y 95, como valores mínimo y máximo, así como haber constatado que los organismos se encontraban libres de parásitos. En la Figura 20 se presenta un gráfico de dispersión de la concentración de eosinófilos donde se ejemplifica el criterio para delimitar el intervalo de los valores de referencia. Las líneas de color rojo delimitan el intervalo para cada parámetro. Los valores que estén fuera de este intervalo (inferiores o superiores) se consideraron como valores anormales. Para cada grupo se calculó la proporción de individuos, la media y la desviación estándar.

Figura 20. Dispersión de la concentración de eosinófilos en el jurel (Seriola lalandi) para establecer los valores de referencia.

Los resultados de la hematología clínica se detallan en la Tabla 7, donde se presentan los valores de referencia para cada variable, además de la proporción de organismos que se encontraron fuera del rango normal junto a la media y la desviación estándar.

El intervalo normal de eritrocitos en los peces fue de 6.9 a 11.4 cel x 106,se observó a

los 61 días de evaluación, una disminución de esta variable en el 10% (6.88 cel x 106/mm3) del grupo control, 29.41% (5.43 ± 1.49 cel x 106/mm3) del grupo dosis baja y

23.53% (5.85 ± 3.15 cel x 106/mm3) del grupo dosis alta, solamente se observó el

aumento de los eritrocitos en el 5.88% (12.81 cel x 106/mm3) del grupo dosis baja.

En el jurel, los valores de referencia para hematocrito van del 48.6 al 66.4%. A los 32 días

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