EFECTO DEL ACEITE ESENCIAL DE HOJAS DE Piper aduncum “MATICO” SOBRE EL CRECIMIENTO DE Escherichia coli

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. BI O. LO. G. IC AS. PROGRAMA DE SEGUNDA ESPECIALIDAD. Efecto Del Aceite Esencial De Hojas De Piper Aduncum. AS. “Matico” Sobre El Crecimiento De Escherichia Coli. EN CI. TESIS. PARA OPTAR EL TÍTULO DE SEGUNDA ESPECIALIDAD PROFESIONAL EN. DE. CI. LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICO Y BIOLÓGICOS. Autores: Blgo. Mblgo. Aguilar Sánchez, Luis Anthony. CA. Blgo. Zavaleta Castro, Linda Cristina. BI. BL. IO. TE. Asesor. Dra. Zavaleta Espejo, Gina Genara. Trujillo – Perú 2019 N° de REGISTRO:. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. LO. Dr. Orlando Gonzáles Nieves. G. IC AS. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. AS. BI O. Rector de la Universidad Nacional de Trujillo. EN CI. Dr. Rubén Vera Véliz. CI. Vice-Rector Académico de la Universidad Nacional de Trujillo. DE. Dr. Enrique Rodríguez Rodríguez. Dr. Steban Alejandro Ilich Zerpa. Secretario General de la Universidad Nacional de Trujillo. BI. BL. IO. TE. CA. Vice-Rector Administrativo de la Universidad Nacional de Trujillo. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS. G. LO. Dr. Freddy Rogger Mejía Coico. IC AS. PROGRAMA DE SEGUNDAD ESPECIALIDAD. BI O. Decano de la Facultad de Ciencias Biológicas. AS. Dr. Cesar Augusto Jara Campos. EN CI. Director del Programa de Segunda Especialidad en Laboratorio de. DE. CI. Análisis Clínicos y Biológicos. CA. Dr. Luis Ángelo Luján Bulnes. de Análisis Clínicos y Biológicos. BI. BL. IO. TE. Director Administrativo de Segunda Especialidad en Laboratorio. iii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIAS. IC AS. A nuestros padres por brindarnos siempre su apoyo incondicional, gracias por su cariño, formación y confianza en cada etapa de nuestras. BI O. LO. G. vidas.. A ese ser espiritual “Dios” por darnos la vida, salud, fortaleza;. EN CI CI. nuestra vida.. AS. además de ser guía de nuestros pasos importantes en cada momento de. DE. A nuestros amigos por siempre estar de nuestro lado apoyándonos en cada momento de nuestra vida, y por ser leales e. BI. BL. IO. TE. CA. incondicionales. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTOS. IC AS. Al laboratorio de Biología Celular y Molecular. SAM 101. Departamento de Ciencias Biológicas. Escuela Académico Profesional. G. de Ciencias Biológicas. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad. LO. Nacional de Trujillo, por el apoyo brindado para el desarrollo de la. AS. BI O. presente tesis.. A nuestra profesora; Dra. Gina Genara Zavaleta Espejo, por su. EN CI. apoyo y otorgarnos el asesoramiento para la realización de la presente. CI. tesis.. de. nuestras. metas,. nuestro. más. profundo. y. sincero. CA. logro. DE. A todas las personas que colaboraron y que hicieron posible el. BI. BL. IO. TE. agradecimiento.. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. LO. G. IC AS. MIEMBROS DEL JURADO. Dr. Luis Ángelo Luján Bulnes. EN CI. AS. BI O. Presidente. Secretario. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. Ms. C. Juan Hector Wilson Krugg. Dra. Gina Genara Zavaleta Espejo Miembro. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben miembros del jurado examinador,. IC AS. declaran que la presente tesis ha cumplido con los requerimientos. AS. BI O. LO. G. formales y fundamentales siendo aprobado por unanimidad.. EN CI. Dr. Luis Ángelo Luján Bulnes. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg Secretario. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. Presidente. Dra. Gina Genara Zavaleta Espejo Miembro. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INDICE. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ........... ii. IC AS. AUTORIDADES DEL PROGRAMA DE SEGUNDA ESPECIALIDAD ....... iii. DEDICATORIA… ....................................................................................... iv AGRADECIMIENTOS ................................................................................. v. G. MIEMBROS DEL JURADO ........................................................................ vi. LO. APROBACIÓN .......................................................................................... vii. BI O. INDICE… ................................................................................................. viii PRESENTACIÓN ....................................................................................... ix DEL ASESOR….......................................................................................... x. AS. RESUMEN ................................................................................................. xi. EN CI. ABSTRACT ............................................................................................... xii I. INTRODUCCIÓN ..................................................................................... 1 II. MATERIALES Y MÉTODOS… ................................................................ 6. CI. 1. Material Biológico.............................................................................. 6 2. Identificación, Lavado y Secado de Hojas de Piper aduncum ........... 6. DE. 3. Preparación del Aceite Esencial de Piper aduncum .......................... 6 4. Microorganismo ................................................................................ 7. CA. 5. Reactivación de la cepa de Escherichia coli ATCC 25922................ 7. TE. 6. Estandarización de la cepa de Escherichia coli ATCC 25922 ........... 7 7. Determinación del efecto antibacteriano ........................................... 8. IO. 8. Evaluación de los tratamientos ......................................................... 8. BL. 9. Análisis estadístico de resultados ..................................................... 9. BI. III. RESULTADOS… ................................................................................. 10 IV. DISCUSIÓN ......................................................................................... 13. V. CONCLUSION ………...…………………..……………………….………..18 VI.RECOMENDACIONES...……………………………………………………19 VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………………20 VIII.ANEXOS……………………………………………………………………..29. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. IC AS. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO:. Cumpliendo con las disposiciones establecidas por el reglamento de. LO. G. grados y títulos de la Universidad Nacional de Trujillo, presentamos a vuestra consideración y claro discernimiento la presente tesis titulada:. BI O. EFECTO DEL ACEITE ESENCIAL DE HOJAS DE Piper aduncum “MATICO” SOBRE EL CRECIMIENTO DE Escherichia coli., con el. EN CI. Análisis Clínicos y Biológicos.. AS. propósito de obtener el título de Segunda Especialidad en Laboratorio de. CA. DE. CI. Trujillo, 2019. BI. BL. IO. TE. Blgo Mblgo. Aguilar Sánchez Luis Anthony. Blgo. Zavaleta Castro Linda Cristina. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. DEL ASESOR. El que suscribe: Dra. Gina Genara Zavaleta Espejo asesora de la. G. presente Tesis titulada: EFECTO DEL ACEITE ESENCIAL DE HOJAS. LO. DE Piper aduncum “MATICO” SOBRE EL CRECIMIENTO DE. BI O. Escherichia coli.. AS. CERTIFICA:. EN CI. Que, la investigación ha sido desarrollada de conformidad con su correspondiente proyecto de tesis y teniendo en cuenta las orientaciones. CI. pertinentes.. Que el informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento,. DE. acogiendo las observaciones y sugerencias alcanzadas. Por ello,. CA. autorizo a los Biólogos Zavaleta Castro Linda Cristina y Aguilar Sánchez Luis Anthony para continuar con los procedimientos correspondientes. TE. según sus fines.. BI. BL. IO. Trujillo, 2018. Dra. Gina Genara Zavaleta Espejo ASESORA. x. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN El objetivo de la presente investigación fue determinar el efecto de las diferentes concentraciones del aceite esencial de hojas de Piper aduncum. IC AS. “matico” sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922 en condiciones de laboratorio. Para obtener el aceite esencial de hojas de Piper aduncum “matico” se utilizó 2.5 Kg de hojas mediante destilación. G. por arrastre de vapor, se prepararon las concentraciones (40, 60, 80 y. LO. 100%) utilizando Tween80. Se preparó el inóculo de E. coli ATCC 25922 con un nivel de turbidez del tubo N° 0.5 en la escala de Mc Farland. BI O. sembrándolo en agar Muller Hinton; para evaluar el efecto del aceite esencial se empleó el método Kirby-Bauer con discos de papel Watman. AS. N°4 de 6 mm de diámetro con 30 ul para concentración, posteriormente fueron secados en a 30°C; luego se colocaron 6 discos por cada placa: 4. EN CI. discos (uno por cada concentración), más un control positivo (disco de ciprofloxacino) y un control negativo (disco impregnado en Tween80), las placas fueron incubadas a 37ºC durante 24 horas, transcurrido este. CI. tiempo, fueron medidos los diámetros (mm) de los halos de inhibición. Los resultados evidencian que a mayor concentración del aceite de P.. DE. aduncum mayor es la inhibición del crecimiento de E. coli obteniendo un halo de 17.4 a 100% del aceite. Se concluye que el aceite esencial de P.. CA. aduncum a diferentes concentraciones inhibe el crecimiento de E. coli ATCC 25922, esto se debería probablemente a la presencia de los. TE. flavonoides presentes en el aceite.. halo de inhibición, crecimiento, concentración, Tween80.. BI. BL. IO. Palabras clave: Aceite esencial, Piper aduncum, Escherichia coli,. xi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT The objective of the current research was to determine the effect of the different concentrations of the essential oil of Piper aduncum "matico". IC AS. leaves on the growth of Escherichia coli ATCC 25922 under laboratory. conditions. To obtain the essential oil of Piper aduncum "matico" leaves, 2.5 kg of leaves were used by steam distillation, concentrations were. G. prepared (40, 60, 80 and 100%) using Tween80. The inoculum of E. coli. LO. ATCC 25922 was prepared with a turbidity level of tube No. 0.5 on the scale of Mc Farland planted on Muller Hinton agar; To evaluate the effect. BI O. of the essential oil, the Kirby-Bauer method was used with 6 mm diameter Watman No. 4 paper discs with 30 ul for concentration, then they were. AS. dried at 30 ° C; then 6 disks were placed for each plate: 4 disks (one for each concentration), plus a positive control (ciprofloxacin disc) and a. EN CI. negative control (disc impregnated in Tween80), the plates were incubated at 37ºC for 24 hours; after this time, the diameters (mm) of the inhibition zones were measured. The results show that the higher the oil. CI. concentration of P. aduncum, the greater the inhibition of the growth of E. coli obtaining a halo of 17.4 to 100% of the oil. It is concluded that the. DE. essential oil of P. aduncum at different concentrations inhibits the growth of E. coli ATCC 25922, probably due to the presence of the flavonoids. CA. present in the oil.. halo, growth, concentration, tween80.. BI. BL. IO. TE. Key words: Essential oil, Piper aduncum, Escherichia coli, inhibition. xii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. I. INTRODUCCIÓN Los productos naturales, como es el caso de las plantas. IC AS. medicinales, han sido ampliamente utilizados desde tiempo atrás, bien sea como alimento, medicamento, agente conservante, etc. Aunque los. G. avances tecnológicos han ido desplazando cada vez más su uso por. LO. sustancias artificiales, en los últimos años se viene notando un creciente. BI O. interés a nivel mundial por el uso y estudio de plantas medicinales; y hoy por hoy, los consumidores han percibido que los compuestos naturales. AS. son más inocuos, por lo que la tendencia al consumo de productos naturales está desplazando al uso de productos sintéticos, lo que motiva. EN CI. al esfuerzo científico (biólogos, químicos, farmacólogos, etc.) por. CI. precisar, clasificar, analizar dichas plantas y sus diversas propiedades1,2.. DE. Existe una gran diversidad de plantas medicinales que despiertan el interés de los científicos; dentro de esta diversidad encontramos en. CA. América Latina el Piper aduncum conocido en nuestro país como. TE. “matico”, cuyas propiedades curativas de su aceite esencial lo han hecho. IO. muy popular en su uso tanto interno, para aliviar enfermedades. BI. BL. estomacales y renales, como externo por sus propiedades cicatrizante3.. Piper aduncum pertenece a la familia Piperácea, la cual tiene una. amplia distribución en zonas templadas y tropicales del mundo4, el género Piper cuenta con alrededor de 2000 especies, en tres regiones. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. geográficas del mundo: América (1300 sp.), Asia (600 sp.) y el pacífico Sur (100 sp.) 5. Particularmente Piper aduncum, es un árbol que se puede. IC AS. encontrar desde una altitud del nivel del mar hasta 2000 msnm. Ramificado cerca de la base y con la copa extendida, las hojas alternas, a veces en 2 hileras, tienen peciolos cortos, las láminas finas tienen borde. LO. G. liso, el envés de color pálido y con vellos blandos. Florece y fructifica. semejante a cordones curvos6.. BI O. durante todo el año, con flores y frutos diminutos, que están en un eje. AS. Piper aduncum, es una planta umbrófila, encontrada en varias. EN CI. estructuras boscosas, especialmente en suelos con elevado contenido de materia orgánica y humedad7. Sus hojas y ramas contienen aceites. CI. esenciales en un 1,8 a 2,2%; un estudio en 2014 sobre la caracterización. DE. del limbo de Piper aduncum se obtuvo que el contenido predominante y presente en mayor proporción del aceite esencial de las hojas de Piper. CA. aduncum fueron terpenoides, el monoterpeno, linalol y flavoniodes8, a los. TE. cuales en la mayoría de casos se les atribuye las variadas propiedades biológicas que presentan, entre ellas, diuréticas, antiparasitarias,. IO. antimicrobianas,. antioxidantes,. antiinflamatorias,. antiviral,. contra. BI. BL. mordidas de serpiente, insecticida, etc. Sus aceites esenciales en particular inhiben el crecimiento de un amplio grupo de microorganismos que causan infecciones importantes en el hombre, las plantas y los animales, presentando además, diversos tipos de actividades como citotóxica,. antifúngica,. antiinflamatoria;. antioxidante,. insecticida,. larvicida,. que. sirven para el tratamiento de diversas 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia. 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. enfermedades9, 10, 11.. IC AS. Actualmente las infecciones del tracto urinario, constituyen un problema de salud pública importante dado que se asocian a un incremento de la morbilidad, mortalidad y los costos hospitalarios para. LO. G. los pacientes, sus familias y la sociedad. La infección urinaria de las vías bajas es una enfermedad muy frecuente en mujeres en edad fértil,. BI O. durante la menopausia y posmenopausia; en varones, después de los 50-60 años, y en ambos sexos, cuando hay alteraciones funcionales o. AS. estructurales del aparato urinario; siendo la Escherichia coli una de las. EN CI. principales bacterias causantes de esta realidad12, 13.. CI. Escherichia coli es un bacilo gram negativo, anaerobio facultativo de la familia Enterobacteriaceae, tribu Escherichia, cuyas principales. DE. características son no forma esporas, ser móviles (flagelos perítricos),. CA. miden 0.5 µ de ancho por 3 µ de largo, son catalasa positivos, oxidasa negativos, reducen nitratos a nitritos, fermentan glucosa y lactosa con. TE. producción de gas, son indol positivo y citrato negativo. Esta bacteria. IO. coloniza el intestino del hombre pocas horas después del nacimiento y. BI. BL. se le considera un microorganismo de flora normal, pero hay cepas que pueden ser patógenas y causar daño produciendo diferentes cuadros clínicos14. En general se acepta que la mayoría de estas infecciones son causadas por gérmenes presentes en la flora intestinal. El 93 % de los casos son producidos por bacilos gramnegativos, un 6 % por cocos gram positivos y el 1 % restante por levaduras, virus, protozoos y parásitos15.. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En dependencia de la localización en el sistema genitourinario, de. IC AS. la capacidad de virulencia de Escherichia coli y de factores predisponentes como edad, sexo, estado inmunológico, malformaciones renales, los malos hábitos sanitarios pueden predisponer a una infección,. LO. G. también se produce infección cuando la bacteria contamina catéteres y otro equipamiento médico urinario; todo esto determinan diferentes. BI O. formas clínicas de presentación, entre las que se pueden mencionar la. AS. pielonefritis, cistitis o uretritis, con evolución aguda o crónica16.. EN CI. A pesar de la amplia cobertura de antibióticos existentes para tratar la infección urinaria, en ocasiones la sintomatología urinaria no. CI. desaparece por factores de riesgo o más aún por un fenómeno creciente y que preocupa a la comunidad médica nacional e internacional,. CA. DE. denominado resistencia bacteriana17.. Debido a esto en los últimos años se ha detectado una progresiva. TE. disminución en la sensibilidad de este microorganismo y por ende una. IO. mayor resistencia a los antimicrobianos utilizados habitualmente para el. BI. BL. tratamiento de las infecciones del tracto urinario. Por todo esto y cumpliendo con las estrategias planteadas por la OMS para el periodo 2014-2023 de fomentar la cobertura universal a través de la integración. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. de la medicina no tradicional en la prestación de servicios de salud, aprovechando las posibilidades para contribuir a mejorar los servicios y. IC AS. los resultados sanitarios; además de fortalecer su garantía de calidad, seguridad, uso adecuado y eficacia de la medicina no tradicional mediante su reglamentación, evaluación e integración de productos y. LO. G. práctica18; el objetivo de esta investigación fue determinar el efecto de las concentraciones de 40, 60, 80 y 100 % del aceite esencial de hojas de. BI O. Piper aduncum “matico” sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. 25922.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II. MATERIAL Y MÉTODOS. IC AS. 1. Material Biológico. Las planta Piper aduncum “matico”, fue recolectada en el campus de la Universidad Nacional de Trujillo, perteneciente a la Provincia de. BI O. LO. G. Trujillo, Departamento de la Libertad.. 2. Identificación, lavado y secado de hojas de Piper aduncum. Las hojas de Piper aduncum fueron recolectadas y transportadas. AS. en bolsa de malla; luego se procedió a identificar la especie de la. EN CI. planta; siendo identificada por el HERBARIUM TRUXILLENSE (HUT) de la Universidad Nacional de Trujillo con registro N° 59701. CI. (Anexo 4). Luego se lavó las hojas con lejía al 1%, se secó en estufa. DE. a 37 °C durante 24 horas, finalmente el producto se almacenó en frascos de vidrio; este material se utilizó para procesos de. CA. extracción19.. TE. 3. Preparación del Aceite Esencial de Piper aduncum. BI. BL. IO. El aceite esencial fue extraído a partir de 500g de hojas, previamente cortadas en trozos, este material se colocó en un balón de vidrio de 1000mL. Luego se armó el equipo de destilación, sometiendo la muestra a una corriente de vapor de 500mL de agua sobrecalentada, arrastrando la esencia que posteriormente por acción del refrigerante, fue condensada, repitiéndose esta operación hasta completar los 2.5Kg de muestra seleccionada. El. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. destilado se separó tomando en cuenta sus propiedades de inmiscibilidad y diferencia de densidades entre agua y aceite. IC AS. esencial, para lo cual se utilizó una pera de decantación de vidrio. Finalmente se prepararon las diferentes concentraciones (40, 60, 80 y 100%) utilizando Tween 80 los cuales fueron almacenados a 4°C. LO BI O. 4. Microorganismo.. G. para su posterior utilización.(Anexo 1). Escherichia coli ATCC 25922 donado por el Laboratorio Referencial. EN CI. AS. de La Libertad.. 5. Reactivación de la cepa de Escherichia coli ATCC 25922.. CI. Se utilizó Agar Mac Conkey que es un medio de cultivo selectivo y diferencial; enseguida mediante la técnica de siembra en estría. 20,. DE. después de 18 horas de incubación, se aisló la cepa de Escherichia. TE. CA. coli ATCC 25922 para la obtención del cultivo joven (Anexo 2). BI. BL. IO. 6. Estandarización de la cepa de Escherichia coli ATCC 25922. Una vez obtenido las colonias de Escherichia coli ATCC 25922, se tomó con un asa de 1 a 2 colonias con las mismas características morfológicas y se inoculó en un tubo con solución salina fisiológica hasta que alcance la turbidez de 0,5 (1x108UFC/mL) Mc Farland21.. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 7.. Determinación del efecto antibacteriano (Prueba de. susceptibilidad). IC AS. Se empleó el método recomendado por el Sub Comité de Ensayos de Susceptibilidad del NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards), basado en el procedimiento descrito. LO. G. originalmente por Kirby- Bauer22. Para lo cual se cortaron discos de papel watman N° 4 de 6 mm de diámetro en los cuales se inyecto. BI O. 30 ul de cada concentración del aceite esencial (cada 10 ul se secó en estufa a 30°C; así sucesivamente hasta alcanzar los 30ul).. AS. En tres placas Petri con agar Mueller-Hinton se procedió a realizar. EN CI. la siembra del microorganismo (Escherichia coli ATCC 25922) según el nivel de turbidez de 0.5 de Mac Farland. A continuación,. CI. se colocaron 6 discos por cada placa: 4 discos con las diferentes. DE. concentraciones, más un control positivo (disco del medicamento ciprofloxacino) y un control negativo (disco seco previamente. CA. impregnado en Tween 80) sobre la superficie de las placas. TE. sembradas, las mismas que fueron incubadas a 37ºC durante 24. BI. BL. IO. horas, transcurrido este tiempo, fueron medidos los diámetros (mm) de los halos de inhibición 23. (Anexo 3) 8. Evaluación de los tratamientos El efecto de las concentraciones del aceite esencial de hojas de Piper aduncum fueron determinados por el diámetro de los halos de inhibición que se obtuvieron por ausencia de crecimiento bacteriano. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. alrededor del disco para cada tratamiento. Para esto se han fijado tres categorías: sensible (S), intermedia (I) y resistentes (R). Las. IC AS. interpretaciones por regla general, son las siguientes: un diámetro de inhibición de 20 a 35 mm es indicativo de una cepa altamente sensible al tratamiento, mientras que diámetros de zona de. LO. G. inhibición inferiores a 15 mm son presentadas por las cepas resistentes; finalmente diámetros de zona de inhibición del. AS. BI O. crecimiento entre 16 mm y 19 mm se considera intermedio21.. 9. Análisis estadístico de resultados.. EN CI. El efecto de las concentraciones del aceite esencial de hojas de Piper aduncum “matico” sobre el crecimiento de Escherichia coli. CI. ATCC 25922, fueron recogidos y organizados en tablas,. DE. determinándose los promedios de los halos de inhibición. Para determinar si existen diferencias significativas o semejanzas entre. CA. los tratamientos se aplicó el análisis de varianza y la prueba de. TE. comparación multiple de Tukey realizados en el programa IBM. BI. BL. IO. SPSS Statistics versión 25.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III. RESULTADOS. EN CI. AS. BI O. PROMEDIO DE DIAMETRO DE HALOS DE INHIBICIÓN (mm). LO. G. IC AS. Figura 1: Promedio de los diámetros (mm) de los halos de inhibición formados por el efecto de las concentraciones del aceite esencial de Piper aduncum sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922 a las 24 horas de incubación.. 3. 2. 7.4. 17.4. 14.1. 11.3. DE. 40. 4. CI. 1. 34.6. 60. 0 80. 100. CONTROL POSITIVO. CONTROL NEGATIVO. TE. CA. CONCENTRACIÓN DE ACEITE ESENCIAL (%). BI. BL. IO. En la Figura N°1 se muestran los promedios de los diámetros de los halos de inhibición que fueron de 34.6 mm para el control positivo (Ciprofloxacino), de 0.0mm para el control negativo (Twenn80), de 7.4mm para los discos de 40%, de 11.3mm para los disco 60%, de 14.1mm para los discos de 80%, de 17.4mm para los discos de 100% de Aceite Esencial de Piper aduncum.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Halos de inhibición formados por el efecto de las concentraciones del aceite esencial de Piper aduncum sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922 a las 24 horas de incubación en condiciones de laboratorio.. LO. G. IC AS. Figura 2:. BI O. 40 %. AS. 80 %. EN CI. 100 %. Control positivo. 60 %. IO. TE. CA. DE. CI. Control negativo. CONTROL POSITIVO. BI. BL. En la Figura N°2 podemos observar que conforme aumenta la concentración del aceite esencial de Piper aduncum, aumentan los diámetros de los halos de inhibición.. Control 80 % negativo. 6040 %%. Control positivo. 100 %. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Tabla N°1: Análisis TUKEY indicando las diferencias significativas que presentan las diferentes concentraciones de Piper aduncum “matico” sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC25922.. HSD Tukeya. 3 3. 80.00. 3. 100.00. 3. 1.000. EN CI. Sig.. 2. 3. 4. 11.3333. AS. 60.00. 1 7.4333. LO. N. BI O. Concentración 40.00. G. Subconjunto para alfa = 0.05. 14.1000 17.4333. 1.000. 1.000. 1.000. DE. CI. Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos. a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media armónica = 3.000.. BI. BL. IO. TE. CA. Los datos obtenidos en el análisis Tukey de la tabla N°1 demuestran la existencia de diferencia significativa entre las diferentes concentraciones; es decir que ningún halo de inhibición de las concentraciones es igual entre sí.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV. DISCUSIÓN. IC AS. La Fitoterapia o tratamiento con las plantas medicinales está siendo cada vez más aceptada en los diferentes estratos sociales. alcanzando un auge insospechado. La información científica sobre la. LO. G. utilidad de las plantas medicinales es sin embargo, hoy en día, muy numerosa y el creciente número de plantas conocidas e investigadas. BI O. hace que el profesional de la salud se vea cada vez más obligado a tener un conocimiento serio y objetivo sobre la utilidad real de las plantas. AS. medicinales24. En la actualidad el uso indiscriminado de los antibióticos. EN CI. en la práctica médica ha provocado, entre otros males, el desarrollo de cepas bacterianas resistentes; tales como Escherichia coli causante de. CI. infecciones del tracto urinario, lo que motiva a la búsqueda en las plantas. DE. de nuevos productos que sirvan de alternativa terapéutica para superar. CA. los problemas de dichas resistencias.. TE. En el presente trabajo se evidencia el efecto antibacteriano del. efecto del aceite esencial de Piper aduncum ”Matico” sobre Escherichia. IO. coli ATCC 25922 constatado en la medición de los halos de inhibición. BI. BL. obtenidos (Figura N°1); es decir el diámetro de los halos de inhibición formados por el aceite esencial de las hojas de Piper aduncum fueron. aumentando conforme se aumentó la concentración del aceite obteniendo un halo de inhibición de 7.4mm para los discos de 40%, de 11.3mm para los disco 60%, de 14.1mm para los discos de 80%, de. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 17.4mm para los discos de 100%; además se observó que al realizar el análisis Tukey y realizar la comparación de subconjuntos homogéneos,. IC AS. existe diferencia significativa entre las diferentes concentraciones (Tabla N°1); es decir que cada concentración tiene un efecto totalmente. LO. G. diferente sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922.. Todos esto resultados se relacionan con lo estudiado en 1998 en. BI O. plantas medicinales hondureñas, mostrando que el extracto del Piper aduncum el cual contenía: 2,6-dihidroxi-4-metoxi-chalcona, ácido. AS. nervogénico y 2,2 - dimetoxi - 8- (3 - metil - 2 - butenil) - 2H – cromeno-. EN CI. 6-carboxílico); es activo contra Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis y Mycobacterium intracellulare a una concentración 25;. además, en 2005 un estudio del. CI. minima inhibitoria de 100 ug/ml. DE. extracto de las partes aéreas del Piper aduncum probado contra diferentes linajes bacterianos, se demostró ser significativamente más. TE. CA. activo contra bacterias Gram-positivas que contra las Gram-negativas26.. Un estudio realizado en 2010 sobre la toxicidad de extractos. IO. herbáceos. sobre. microorganismos. aislados. en. infecciones. BI. BL. nosocomiales, donde se evaluó la actividad antibacteriana de Piper aduncum sobre Escherichia coli, Enterobacter sp, Staphylococcus sp, Streptococcus sp y Neisseria sp; demostró que sobre Escherichia coli a. las concentraciones de 50, 100 y 200 mg/mL presentó un potencial antibacteriano moderado; mientras que contra Enterobacter sp, Staphylococcus sp, Streptococcus sp y Neisseria sp presentó un 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia. 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. potencial antibacteriano ligero, esto actividad esta mediada por la cantidad de extracto utilizado; es decir que conforme aumenta la. IC AS. concentración del extracto, mayor es la acción antimicrobiana28. Un estudio en Brasil en 2010 sobre el uso del extracto de las hojas. G. de Piper aduncum sobre el crecimiento de Streptococcus mutans, un. LO. agente microbiano presente en la placa dental, perjudicial para la. BI O. cavidad bucal y principal causante de la caries dental; se demostró que dicho extracto de Piper aduncum actuó como bactericida inhibiendo el. EN CI. inhibitoria de 0,16 mg/mL 29.. AS. crecimiento de Streptococcus mutans con una concentración mínima. En 2014 se realizó un estudio para evaluar la actividad bactericida. CI. del aceite esencial de Piper aduncum contra cepas de Staphylococcus. DE. spp, donde el aceite fue eficaz contra la cepa ATCC 25923 de Staphylococcus aureus a concentraciones de 500 μg / mL, 750 μg / mL. CA. y 1000 μg / mL, inhibiendo el crecimiento bacteriano en 50%, 90% y. TE. 100%, respectivamente; y de la cepa ATCC 12228 de Staphylococcus. IO. epidermidis a concentraciones entre 250 y 1000 μg / ml; demostrando. BL. que el aceite esencial de Piper aduncum tiene una actividad bactericida. BI. significativa contra Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis. que son agentes infecciosos nosocomiales peligrosos30. Todas estas actividades antimicrobianas se atribuyen a la composición química de Piper aduncum, se ha encontrado que su aceite esencial tiene presencia de metabolitos secundarios como alcaloides,. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. triterpenos, esteroles, taninos, flavonoides y antraquinonas 31. Además, también se sugiere que los principales componentes son canfeno,. IC AS. alcanfor, piperitona y viridiflorol32. Estudios demostraron que los compuesto fenólicos como los. G. flavonoides presentan una buena inhibición de las bacterias gram. LO. negativas, y el efecto antibacteriano se debería a: (I) hiperacidificación. BI O. en la interfase de la membrana plasmática de los microorganismos, o (II) la acidificación intracelular, que resulta en la inhibición de la bomba H+. AS. K+ ATPasa necesaria para la síntesis del ATP en las bacterias o (III) puede estar relacionado con la inactivación de enzimas celulares que. EN CI. causan cambios en la permeabilidad de la membrana, todo esto afectaría las reacciones en cadena de las bacterias, llevando a su destrucción. CI. celular. Por consiguiente es probable que ocurra el mismo efecto. DE. antibacteriano sobre Escherichia coli33, 34.. CA. Otros autores como Balbuena plantearon que los flavonoides. TE. podrían ser los responsables del efecto de inhibición de crecimiento. IO. bacteriano por la inducción de la ruptura de su DNA en un sitio. BL. determinado; por bloqueo del complejo aminoacil transferasa, por. BI. intercalación entre bases de DNA alterando la síntesis de ácido nucleico o por la formación de dímeros de timina. Además considero que dichos compuestos pueden propiciar la alteración de la composición de las membranas y el metabolismo celular por medio de inhibición de la fosforilación de proteínas o por la formación de complejos con proteínas. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. solubles de la pared de las células bacterianas35.. IC AS. El presente estudio es relevante porque, conlleva a nuevas posibilidades en la investigación clínica y farmacológica de Piper aduncum, e incentiva al desarrollo de nuevos estudios con la finalidad de. LO. G. que la población disponga de una alternativa antibacteriana natural,. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. causadas por Escherichia coli.. BI O. eficiente y de bajo costo para tratar infecciones del tracto urinario. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. V.CONCLUSIONES:. IC AS. Se demostró que el aceite esencial de Piper aduncum “matico” en sus diferentes concentraciones tiene efecto sobre el crecimiento de. G. Escherichia coli ATCC 25922.. LO. Se demostró que el aceite esencial de Piper aduncum “matico” en. BI O. la concentración de 100% tuvo mayor efecto sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922, con un halo de inhibición de 17.4mm, que. AS. la concentración de 40% que solo presentó un halo de inhibición de. EN CI. 7,4mm.. Se demostró que a mayor concentración del aceite esencial de aduncum “matico”,. mayor. actividad. antibacteriana. sobre. CI. Piper. DE. Escherichia coli ATCC 25922.. CA. Se concluye que según la evaluación de los tratamientos, Escherichia coli ATCC 25922 presenta una sensibilidad intermedia frente. TE. a la concentración de 100%; mientras que para las concentraciones de. IO. 80%, 60% y 40% presenta resistencia a la actividad antibacteriana del. BI. BL. aceite esencial de Piper aduncum “matico”.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VI.RECOMENDACIONES:. IC AS. Se recomienda realizar estudios in vivo para valorar la efectividad y toxicidad que podrían producir los componentes activos del aceite. esencial de Piper aduncum “matico”, obteniendo dosis terapéuticas para. LO. G. el ser humano.. BI O. Se recomienda separar los principios activos del aceite esencial de Piper aduncum “matico”, responsables de la acción antimicrobiana,. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. para identificar su posible mecanismo de acción.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VII.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:. IC AS. 1. Lahlou M. Methods to study the phytochemistry and bioactivity of essential oils. Phytotherapy Research. 2004;18(6):435-448.. LO. G. 2. Castañeda L. ESTUDIO DE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA Y LA. ACTIVIDAD BIOLÓGICA DE LOS ACEITES ESENCIALES DE. BI O. DIEZ PLANTAS AROMÁTICAS COLOMBIANAS. Scientia et. AS. Technica Año XIII. 2007; N°3:165-167.. EN CI. 3. Shimabukuro Y. Estudio técnico de la extracción de aceite esencial de Piper Aduncum L. “Matico” y diseño de planta piloto. CI. [Internet]. Repositorio Institucional Universidad Nacional de Ingeniería. 1992 [citado 11 ENERO del 2019]. Disponible en:. DE. http://cybertesis.uni.edu.pe/bitstream/uni/1019/1/shimabukuro_y. CA. d.pdf. BI. BL. IO. TE. 4. Jaramillo M, Manos P. Phylogeny and patterns of floral diversity in the genus Piper (Piperaceae). American Journal of Botany. 2001;88(4):706-716.. 5. Quijano-Abril M, Callejas-Posada R, Miranda-Esquivel D. Areas of endemism and distribution patterns for Neotropical Piper species (Piperaceae). Journal of Biogeography. 2006; 33(7):1266-1278.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 6. Abreu Guirado Orlando A, Rodríguez Tamargo Ana A, Morgado Montes. Maybel,. Cao. Vocero. Laura. B.. Farmacognosia,. IC AS. farmacobotánica, farmacogeografía y farmacoetimología del platanillo de Cuba (Piper aduncum subespecie ossanum). Rev Cubana Plant Med [Internet]. 2012 Jun [citado 2019 Enero 11]. LO. G. ;17(2):181-193.Disponible en:. 47962012000200007&lng=es.. BI O. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1028-. AS. 7. Michiles Elizabeth. Diagnóstico situacional dos serviços de. EN CI. fitoterapia no Estado do Rio de Janeiro. Rev. bras. farmacogn. [Internet]. 2004 [citado 2019 ENERO 11]; 14: 16-19. Disponible. CI. en:http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0102-. DE. 695X2004000300007&lng=en.http://dx.doi.org/10.1590/S0102-. CA. 695X2004000300007.. TE. 8. DOUSSEAU S, et al. Caracterización del limbo de Piper aduncum. BI. BL. IO. L. (Piperaceae): Análisis estructurales, histoquímicos y de sus aceites esenciales. Gayana Bot. [Internet]. 2014 Jun [citado 2019 Enero. 11];. 71(1):. 147-162.. Disponible. en:. https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S071766432014000100015&lng=es.. http://dx.doi.org/10.4067/S0717-. 66432014000100015.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 9. Jaramillo-Colorado,. B,. Duarte-Restrepo,. Pino-Benítez,. N.. Evaluación de la actividad repelente de aceites esenciales de. IC AS. plantas Piperáceas del departamento de Chocó, Colombia. Revista de Toxicología [Internet]. 2015; 32(2):112-116. Disponible. LO. G. en: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=91942717007. 10. Arroyo Jorge, Herrera-Calderón Oscar, Chávez-Asmat Roberto,. BI O. Ventura Edith, Buendía Jesús, Pacheco José et al. Efecto antitumoral in vitro del aceite esencial de Piper aduncum L.. AS. (matico) y su toxicidad oral en ratones. An. Fac. med. [Internet].. EN CI. 2014 Ene [citado 2019 Ene 11]; 75(1): 13-18. Disponible en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S102. DE. CI. 5-55832014000100003&lng=es.. 11. Lock O, Rojas R. Química y Farmacología del Piper aduncum L.. CA. ("Matico") [Internet]. Revistas.pucp.edu.pe. 2004 [citado 11 Enero 2019].. Disponible. en:. TE. del. BI. BL. IO. http://revistas.pucp.edu.pe/index.php/quimica/article/view/18713/ 18954.. 12. Chávez Torres L, Díaz Castañeda F, Escalante Rosadio G, Estrada Montañez E. Vista de EFECTO SINÉRGICO DEL ACEITE ESENCIAL DE Origanum vulgare A LA GENTAMICINA EN CULTIVOS DE Escherichia coli. [Internet].. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Cimel.felsocem.net. 2008 [citado 11 Enero del 2019]. Disponible en:https://www.cimel.felsocem.net/index.php/CIMEL/article/view/. IC AS. 146/pdf. 13. Andreu A, Planells I. Etiología de la infección urinaria baja. LO. G. adquirida en la comunidad y resistencia de Escherichia coli a los. antimicrobianos de primera línea. Estudio nacional multicéntrico.. BI O. Medicina Clínica. 2008; 130(13):481-486.. AS. 14. Rodríguez-Angeles Guadalupe. Principales características y. EN CI. diagnóstico de los grupos patógenos de Escherichia coli. Salud pública Méx [revista en la Internet]. 2002 Sep [citado 2019 Ene 44(5):. 464-475.. Disponible. en:. CI. 11];. DE. http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S003. CA. 6-36342002000500011&lng=es.. TE. 15. Goldraich N, Manfroi A. Febrile urinary tract infection: Escherichia. BI. BL. IO. coli susceptibility to oral antimicrobials. Pediatric Nephrology. 2002; 17(3):173-176.. 16. González R. Trastornos urológicos en lactantes y niños. En: Behrman RE, Kliegman RM, Arvin AM, editores. Nelson Tratado de Pediatría. Barcelona: Editorial Mc Graw –Hil Interamericana; 1998. pp.1903 –19. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 17. Llop. A.. Resistencia. a. los. antimicrobianos. y. Vigilancia. epidemiológica en Cuba. En: Resistencia antimicrobiana en las. IC AS. Américas. Ed. OPS/HCP/HCT/163/2002; 116 – 123.. 18. Organización Mundial de la Salud OMS. Estrategia de la OMS. LO. G. sobre medicina tradicional 2014-2023. Ginebra: Organización. BI O. Mundial de la Salud; 2013.. AS. 19. Calle, J. y Ferreira, S. Estudio Fotoquímico del aceite esencial de. EN CI. Piper lenticellosum C. DC. Revista Colombiana de Ciencias químico- farmacéutico. Universidad Nacional de Colombia.. CI. Colombia.2006. 84pp.. DE. 20. Santambrosio, E. Siembra y recuento de microorganismos. Universidad. Tecnológica. Nacional. 3pp.2009.Disponible. CA. en:www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/practicoIII.p. IO. TE. df.. BI. BL. 21. Sacsaquispe, C. R., Velásquez, P. J., Suarez, M. V. y col. Manual de Procedimientos para la Prueba de Sensibilidad Antimicrobiana por el Método de Disco Difusión. Instituto Nacional de Salud. 2002.17pp.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 27. Monzote Fidalgo Lianet, Sariego Ramos Idalia, Montalvo Álvarez Ana M., Garrido Lorente Nidia, Scull Lizama Ramón, Abreu Payrol. IC AS. Juan. Propiedades antiprotozoarias de aceites esenciales extraídos de plantas cubanas. Rev Cubana Med Trop [Internet]. 2004 Dic [citado 2019 Ene 11]; 56(3): 230-233. Disponible en:. LO. G. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0375-. BI O. 07602004000300014&lng=es.. 28. Odio A, Grillo R, Villalba A, Sánchez C. Toxicidad de extractos. AS. herbáceos sobre microorganismos aislados en infecciones. EN CI. nosocomiales [Internet]. Medigraphic.com. 2010 [citado 11 Enero del. 2019].. Disponible. en:. CI. http://www.medigraphic.com/pdfs/patol/pt-2010/pt103g.pdf.. DE. 29. Magalhães C. Efeito de extratos e frações de Piper aduncum. CA. sobre o crescimento e metabolismo dos Streptococcus mutans e Streptococcus sanguis. Domínio Público - Detalhe da Obra. BI. BL. IO. TE. [Internet]. Dominiopublico.gov.br. 2010 [citado 11 Enero del 2019].Disponibleen:http://www.dominiopublico.gov.br/pesquisa/D etalheObraForm.do?select_action=&co_obra=198347. 30. BRAZÃO, MA, BRAZÃO, F, MAIA, JG, MONTEIRO, M. Antibacterial activity of the Piper aduncum oil and dillapiole, its main constituent, against multidrug-resistant strains. Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 35. Balbuena-Escalona V. Evaluación del efecto antimicrobiano de flavonoides obtenidos de extractos de hojas de Tamarindus indica. IC AS. Lin. MULTIMED [revista en Internet]. 2017 [citado 2019 Ene 11]; 16(1):[aprox.15p.].Disponibleen:http://www.revmultimed.sld.cu/in. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. dex.php/mtm/article/view/517.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VIII. ANEXOS Anexo 1: Elaboración del Aceite esencial de hojas de Piper aduncum. b. Extracción del Aceite Esencial mediante el equipo por arrastre de vapor.. BL. IO. TE. CA. DE. CI. a. Lavado y secado de las hojas de Piper aduncum. EN CI. AS. BI O. LO. G. IC AS. “matico”.. BI. c. Separación del Aceite Esencial de Piper aduncum.. d. Preparación de las concentraciones de Aceite Esencial (40, 60, 80 y 100%) de Piper aduncum. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AS. BI O. LO. G. IC AS. Anexo 2: Reactivación de la cepa de Escherichia coli ATCC 25922.. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. Cepa de Escherichia coli ATCC 25922. Reactivación de cepa de Escherichia coli ATCC 25922 en Agar Mac Conkey. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. IC AS. Anexo 3: Repeticiones de la determinación del efecto antibacteriano del Aceite esencial de Piper aduncum sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922 a las 24 horas de incubación.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. IC AS. Anexo 4: Identificación de la especie Piper aduncum por el Herbarium Truxillense (HUT) de la Universidad Nacional de Trujillo con Código N°59701. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Anexo 5: Diámetros totales de los halos de inhibición formados por el efecto del Aceite Esencial de Piper aduncum “matico” sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922 en las 3 repeticiones.. Concentraciones Disco. Disco. 40%. 60%. 80%. 100%. Repeticiones. 0.0 mm. 35.0 mm. 7.0 mm 12.0 mm 14.0 mm 17.0 mm. 0.0 mm. 34.0 mm. 7.0 mm 10.0 mm 15.0 mm 16.0 mm. 0.0 mm. 35.0 mm. 7.0mm 12.0 mm 13.0 mm 18.0 mm. 0.0 mm. 35.0 mm. 0.0 mm. 35.0 mm. 0.0 mm. 34.0 mm. 0.0 mm. 34.0 mm. 8.0 mm 11.0 mm 14.0 mm 18.0 mm. 0.0 mm. 34.0 mm. 7.0 mm 11.0 mm 15.0 mm 19.0 mm. 0.0 mm. 35.0 mm. BI O. 8.0 mm 11.0 mm 14.0 mm 16.0 mm. CI. EN CI. AS. R1. 7.0 mm 12.0 mm 14.0 mm 19.0 mm. DE. R2. CA. 8.0 mm 11.0 mm 13.0 mm 18.0 mm. BI. BL. IO. TE. 8.0mm 12.0 mm 15.0 mm 17.0 mm. R3. Control Control Negativo Positivo (Tween 80) (Ciprofloxacino). G. Disco. LO. Disco. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Anexo 6: Promedio de los diámetros de los halos de inhibición formados por el efecto del Aceite Esencial de Piper aduncum “matico” sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922 en las 3 repeticiones.. Concentraciones Disco. Disco. 40%. 60%. 80%. 100%. BI O. Repeticiones. Control Control Negativo Positivo (Tween 80) (Ciprofloxacino). G. Disco. LO. Disco. 7.3mm 11.0mm. 14.3mm. 16.3mm. R2. 7.3mm 11.7mm. 13.3mm. 18.3mm. 6.0mm. R3. 7.7mm 11.3mm. 14.7mm. 17.7mm. 6.0mm. 14.1mm. 17.4mm. 6.0mm. 34.7mm. 34.7mm. 34.3mm. 34.6mm. CA. 7.4mm 11.3mm. 6.0mm. BI. BL. IO. TE. PROMEDIO TOTAL. DE. CI. EN CI. AS. R1. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC AS. Anexo 7: Análisis de varianza del efecto del Aceite esencial de Piper aduncum “matico” sobre el crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922 en condiciones de laboratorio.. 3.500. 8. 165.222. 11. LO. BI O. 3. Sig. .000. .437. EN CI. Dentro de grupos Total. gl. Media F cuadrática 53.907 123.217. AS. Entre grupos. Suma de cuadrados 161.722. G. ANÁLISIS DE VARIANZA. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. p<0.05 existe diferencia significativa.. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(48) BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. IC AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(49) BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI. EN CI. AS. BI O. LO. G. IC AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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