Efecto antifúngico in vitro e in situ del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa "tara" sobre Alternaria sp

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. AS. BI. O. LO. G. IC A. S. ESCUELA PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. CI. Efecto antifúngico in vitro e in situ del extracto etanólico de. CI. EN. vainas de Caesalpinia spinosa "tara" sobre Alternaria sp. TESIS. BIÓLOGO. TE CA. DE. PARA OPTAR EL TÍTULO DE:. IO. AUTORA: Br. ROCIO DEL PILAR, Gómez Rodríguez. BI. BL. ASESORA: Dra. MARLENE RENE, Rodríguez Espejo. TRUJILLO – PERÚ 2019. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dr. Orlando Moisés Gonzáles Nieves. IC A. S. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. AS. BI. O. LO. G. RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. Dr. Rubén César Vera Véliz. CI. EN. CI. VICERECTOR ACADÉMICO. DE. Dr. Weyder Portocarrero Cárdenas. Dr. Steban Alejandro llich Zerpa. BL. IO. TE CA. VICERECTOR DE INVESTIGACIÓN. BI. SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIOONAL DE TRUJILLO. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dr. Freddy Rogger Mejía Coico. IC A. S. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. AS. BI. O. LO. G. DECANO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. CI. Dr. Elmer Willian Zelada Estraver. EN. PROFESOR SECRETARIO DE LA FACULTAD DE. Dr. Freddy Peláez Peláez. DIRECTOR DE LA ESCUELA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. BI. BL. IO. TE CA. DE. CI. CIENCIAS BIOLÓGICAS. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. A DIOS quien supo guiarme por el buen camino,. y darme fuerzas para. superar. IC A. S. obstáculos y dificultades, por haberme dado salud para seguir adelante frente a las. LO. G. adversidades y así hacer realidad mi objetivo.. O. A mis padres Marino y Claudina por su gran. BI. apoyo constante e incondicional y por ser los que me inspiran a cumplir mis metas, mi. AS. eterno amor y agradecimiento son para. CI. ustedes.. EN. A mi hijito Mateo Rafael porque es el. motor de mi vida, el que siempre me. DE. para seguir adelante.. CI. espera con una sonrisa y me da la fuerza. A mi esposo Esmaro por el apoyo y. TE CA. paciencia que me brinda constantemente y por ser quien de una u otra forma me. IO. ayudo a terminar la carrera.. BL. A mi hermano Carlos por ser el ejemplo de. BI. hermano mayor y por ser como un padre para mí y del cual aprendí mucho; y a mis hermanas Diana, Cynthia, y Katherin por estar. conmigo. en. todo. momento,. sus. consejos y ayuda diaria.. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTOS. A nuestra alma mater, La Universidad Nacional de Trujillo, entidad. IC A. S. donde nos formamos mediante las buenas costumbres y los diferentes. conocimientos de nuestros maestros de la Facultad de Ciencias. O. LO. G. Biológicas.. BI. A la Profesora Dra. Marlene Rodríguez Espejo, Por sus. AS. enseñanzas, sugerencias, consejos y apoyo incondicional en el. EN. CI. desarrollo de la investigación.. CI. A todas las personas que de una u otra forma hicieron posible la culminación de esta tesis; en especial agradecimiento a mis amigos (as). BI. BL. IO. TE CA. DE. que de alguna u otra forma ayudaron en mi investigación.. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G. IC A. S. MIEMBROS DEL JURADO. EN. CI. AS. BI. PRESIDENTE. O. Dr. JULIO CHICO RUIZ. LO. ___________________________________. ___________________________________. CI. Dr. ROGER VENEROS TERRONES. ___________________________________ Dra. MARLENE RODRIGUEZ ESPEJO VOCAL. BI. BL. IO. TE CA. DE. SECRETARIO. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. IC A. S. Los profesores que suscriben, miembros del Jurado Examinador,. declaran que el presente Informe de tesis titulado “Efecto. G. antifúngico in vitro e in situ del extracto etanólico de vainas de. LO. Caesalpinia spinosa “tara” sobre Alternaria sp” ha cumplido con. O. los requisitos formales y fundamentales, siendo APROBADO por. EN. CI. AS. BI. UNANIMIDAD. ___________________________________. CI. Dr. JULIO CHICO RUIZ. TE CA. DE. PRESIDENTE. Dr. ROGER VENEROS TERRONES SECRETARIO. BI. BL. IO. ___________________________________. ___________________________________ Dra. MARLENE RODRIGUEZ ESPEJO VOCAL. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO……………..ii. IC A. S. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS……………....iii. DEDICATORIA ....................................................................................................iv. G. AGRADECIMIENTOS ..........................................................................................v. LO. MIEMBROS DEL JURADO…………………………………………………………….vi. O. APROBACIÓN ....................................................................................................vii. BI. ÍNDICE ..............................................................................................................viii. AS. PRESENTACION ...............................................................................................xi. CI. DE LA ASESORA ...............................................................................................xii. EN. RESUMEN…………………………………………………………………………..….xiii ABSTRACT .......................................................................................................xiv. CI. INTRODUCIÓN………………………………………………………………………....1. DE. MATERIAL Y MÉTODOS………………………………………………………………6. TE CA. RESULTADOS…………………………………………………………………………15 DISCUSIÓN………………………………………………………………………….....31 CONCLUSIONES……………………………………………………………………...35. IO. RECOMENDACIONES………………………………………………………………..36. BL. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS…………………………………………………37. BI. ANEXOS………………………………………………………………………………..42. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE DE TABLAS Tabla 1. Efecto del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa “tara” sobre el crecimiento promedio del diámetro miceliar (cm) de. S. Alternaria sp in vitro en concentraciones de 0%, 0.5%, 1%, 8% a. Tabla 2.. IC A. los ocho días de evaluación…………………………………………15. Análisis de varianza (ANAVA) para evaluar el crecimiento. G. micelial en cm. de Alternaria sp in vitro en los tratamientos de. LO. 0%, 0.5%, 1%, 8% del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa en los ocho días de evaluación. P<. O. 0.05……………………………………………..................................19. BI. Tabla 3. Prueba Múltiple de Rangos (Tukey) para crecimiento micelial. AS. CDM de Alternaria sp in vitro en los Tratamientos 0%, 0.5%, 1.0%, 8.0% en extracto etanólico de Caesalpinia spinosa. a los. CI. ocho días de evaluación.…………………………………………….20. EN. Tabla 4. Efecto del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa sobre el crecimiento promedio del diámetro miceliar (cm) de. CI. Alternaria sp in situ a concentraciones 0%, 0.5%, 1%, 8% a los. DE. ocho días de evaluación……………………………………………..22 Tabla 5. Análisis de varianza (ANAVA) para evaluar el crecimiento micelial in situ en cm. de Alternaria sp en los tratamientos de 0%,. TE CA. 0.5%, 1%, 8% del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa. en. los. ocho. días. de. evaluación.. P<. 0.05……………………………………………………………………..26. BI. BL. IO. Tabla 6.. Pruebas Múltiple Rangos (Tukely) para crecimiento micelial. CDM de Alternaria sp in situ en los Tratamientos 0%, 0.5%, 1.0%, 8.0% en extracto etanólico de Caesalpinia spinosa.a los ocho días de evaluación………………………………………………………….27. Tabla 7. Porcentaje de infección, índice de severidad y pérdida de peso inducidas por Alternaria sp in situ en frutos de tomate tratados con extracto etanólico de Caesalpinia spinosa en los tratamientos 0%, 0.5%, 1%, 8% a los ocho días de evaluación………………..28. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE DE FIGURAS Figura 1: Diseño experimental in vitro del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa “tara”………………………………………………..9. S. Figura 2: Diseño experimental antifúngico in situ en S. esculentum “tomate” en. IC A. concentraciones 0%, 0.5%, 1%, 8%....................................................11. Figura 3: Velocidad de crecimiento promedio del diámetro micelar de Alternaria. LO. G. sp en los ocho días de evaluación……………………………………….16 Figura 4: Porcentaje de inhibición del extracto etanólico de vainas de C.. O. spinosa sobre el crecimiento del diámetro micelial (DCM) de. BI. Alternaria sp in vitro en los tratamientos (0% 0.5%, 1% Y 8%), a los ocho días de evaluación…………………………………………………..18 5:. Crecimiento. micelial. de. Alternaria. AS. Figura. sp. en. las. diferentes. CI. concentraciones del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa “tara” in vitro a los ocho días de evaluación. Vista frontal: A. (0%),. B.. (0.5%),. EN. control. C.. (1.0. %),. D.. (8.0. CI. %)……………………………………………………………………………21 Figura 6: Velocidad de crecimiento promedio del diámetro micelar (CDM) de. DE. Alternaria sp in situ en fruto de S. esculentum “tomate” en los ocho días de evaluación.………………………………………….…………….23. TE CA. Figura 7: Porcentaje de inhibición del extracto etanólico de vainas de C. spinosa sobre el crecimiento del diámetro micelial (DCM) de Alternaria sp en frutos de S. esculentum en los tratamientos de 0%. IO. (control), 0.5%, 1% Y 8%, a los ocho días de evaluación……………..25. ocasionado por Alternaria sp in situ presentes sobre fruto de S. esculentum tomate a los ocho días de evaluación.………………….. 29. BI. BL. Figura 8: Porcentaje de infección (%), incidencia (%) y pérdida de peso. Figura 9: Crecimiento micelial in situ de Alternaria sp en las diferentes concentraciones del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa a los ocho días de evaluación A. 0% (control), B. 0.5%, C. 1.0%, D. 8.0%.....................................................................................30. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. S. Señores miembros del jurado:. IC A. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el. G. reglamento de Grados y Títulos de la Escuela Académico. LO. Profesional de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Biológicas. O. de la Universidad Nacional de Trujillo; someto a vuestra. BI. consideración y criterio la presente tesis titulada: “Efecto antifúngico. AS. in vitro e in situ del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia. CI. spinosa “tara” sobre Alternaria sp, con el cual pretendo obtener el. EN. título de Biólogo.. CI. Esperando que el jurado se sirva a calificar este trabajo según su criterio establecido, y a que el presente trabajo sea merecido de. TE CA. DE. vuestra aprobación. BI. BL. IO. Trujillo, Marzo del 2019.. Br. ROCÍO DEL PILAR GÓMEZ RODRÍGUEZ. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE LA ASESORA. El que suscribe, asesora de la tesis titulada: “Efecto antifúngico in. IC A. S. vitro e in situ del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia. LO. G. spinosa “tara” sobre Alternaria sp”.. O. Certifica que la presente investigación ha sido desarrollada de. BI. conformidad con su correspondiente proyecto, teniendo en cuenta. CI. AS. las orientaciones pertinentes al tesista.. EN. El informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento de acuerdo al. CI. reglamento establecido por la facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo acogiendo las observaciones y. TE CA. DE. sugerencias alcanzadas.. Por lo tanto, autorizo al Bachiller Rocío del Pilar Gómez Rodríguez,. BI. BL. IO. continuar con los procedimientos según sus fines.. Dra. Marlene Rodríguez Espejo. ASESORA. xii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto antifúngico in vitro “tara” sobre. S. e in situ del extracto etanólico de vainas de C. spinosa. IC A. Alternaria sp. Las vainas de C. spinosa fueron adquiridas en el distrito de Usquil, provincia de Otuzco (La Libertad) y el hongo fitopatógeno. G. Alternaria sp se obtuvo a partir de frutos post cosecha en estado. LO. pudrición de Solanum esculentum “tomate”. El efecto in vitro, se realizó bajo un diseño completamente al azar, con cuatro tratamientos y tres. O. repeticiones, en concentraciones (0%, 0.5%, 1%, 8%) de extracto. BI. etanólico de C. spinosa, los medios inoculados con Alternaria sp fue por punción central, expuestos a una temperatura de 23°C ± 2°C y el efecto in. AS. situ se realizó con cuatro tratamientos y cinco repeticiones en frutos de S.. CI. esculentum, se inoculo esporas de Alternaria sp, en heridas de 2mm previamente tratados por inmersión en las diferentes concentraciones del. EN. extracto indicado luego se evaluó el crecimiento micelial por 8 días. El. CI. efecto antifúngico in vitro e in situ del extracto etanólico de C. spinosa genero disminución de en la velocidad de crecimiento de Alternaria sp en. DE. el tratamiento 8% con un promedio micelial de: 0.51 cm y 0.53 cm respectivamente para cada efecto. Así mismo el porcentaje de inhibición. TE CA. de “tara” fue mayor en el tratamiento del 8% con un porcentaje de 89.72% y 79.69% y menor porcentaje en el tratamiento de 0.5% con un valor de 24.10% y 32.18%, respectivamente. El porcentaje de infección, grado de. IO. severidad y pérdida de peso en los frutos de S. esculentum tratados con extracto. etanólico. de. vainas. de. C.. spinosa. disminuyeron. BL. significativamente en el tratamiento 4 (8%) con valores de 20%, 1 grado y. BI. 0.4 gr respectivamente con respecto al control. Palabras claves: Efecto antifúngico, extracto etanólico, Caesalpinia spinosa, Alternaria sp.. xiii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT. S. The objective of the present study was to determine the antifungal effect in. IC A. vitro and in situ of the ethanolic extract of C. spinosa "tara" pods on Alternaria sp. The pods of C. spinosa were acquired in the district of. G. Usquil, province of Otuzco (La Libertad) and the phytopathogenic fungus. LO. Alternaria sp was obtained from post-harvest fruits in the rotting state of Solanum esculentum "tomato". The effect in vitro, was carried out under. O. a completely randomized design, with four treatments and three. BI. repetitions, in concentrations (0%, 0.5%, 1%, 8%) of ethanol extract of C. spinosa, the inoculated media with Alternaria sp was by central. AS. puncture, exposed to a temperature of 23 ° C ± 2 ° C and the in situ effect. CI. was performed with four treatments and five repetitions in fruits of S. esculentum, inoculated spores of Alternaria sp, in wounds of 2mm. EN. previously treated by immersion in the different concentrations of the. CI. indicated extract, then the mycelial growth was evaluated for 8 days. The antifungal effect in vitro and in situ of the ethanolic extract of C. espinosa. DE. generated a decrease in the growth rate of Alternaria sp in the treatment 8% with a mycelial average of: 0.51 cm and 0.53 cm respectively for each. TE CA. effect. Likewise, the percentage of inhibition of "tara" was greater in the treatment of 8%, with a percentage of 89.72% and 79.69% and a lower percentage in the treatment of 0.5% with a value of 24.10% and 32.18%,. IO. respectively. The percentage of infection, degree of severity and weight loss in the fruits of S. esculentum treated with ethanol extract of C.. BL. spinosa pods decreased significantly in treatment 4 (8%) with values of. BI. 20%, 1 degree and 0.4 gr respectively with respect to control Key words: Antifungal effect, ethanolic extract, Caesalpinia spinosa, Alternaria sp.. xiv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCION. En los últimos años, la tendencia hacia la utilización de alternativas más. S. seguras para el control de hongos, y reducir así, la dependencia a los. IC A. fungicidas artificiales (Troncoso y Tiznado, 2007). Entre las opciones de control. se encuentra el empleo de compuestos naturales aislados de plantas,. G. conocidos como extractos vegetales, ya que se consideran biodegradables e. LO. inocuos (Hernández y col., 2007) así mismo, se han desarrollado diversas. O. investigaciones en plantas de uso popular para precisar, comparar y clasificar. BI. sus diversas propiedades, encontrar los principios activos responsables de cortar, aliviar o curar las enfermedades, siendo una de ellas Caesalpinia. CI. AS. spinosa (Cabello, 2009).. EN. Caesalpinia spinosa (Molina) Kuntze, comúnmente conocida como “tara”, “taya”, “algarroba tanino”, pertenece a la familia de las Caesalpiniaceae,. DE. CI. orden Fabales, genero Caesalpinia.. C. spinosa, es una especie nativa del Perú, ampliamente distribuida en. TE CA. América Latina, abarcando diversas zonas áridas, en Venezuela, Colombia, Ecuador, Bolivia y el norte de Chile, siendo el Perú, el principal abastecedor de “tara” a nivel mundial debido a que posee climas y suelos que hacen posible el. IO. desarrollo de esta especie en varios departamentos del país como Apurímac, Ayacucho, Junín, Pasco, Huánuco, Cusco, Cajamarca, Huancavelica, Piura,. BI. BL. Tacna y Ancash (Agrogestión, 2013; Dostert, 2009).. Es un árbol pequeño, de dos a tres metros de altura, de fuste corto,. cilíndrico y a veces tortuoso y su tronco está provisto de una corteza gris espinosa, con ramillas densamente pobladas. En muchos casos las ramas se inician desde la base dando la impresión de varios tallos. La copa de la tara es irregular, aparasolada y poco densa, con ramas ascendentes. Sus hojas son en 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. forma de plumas, parcadas ovoides y brillantes, ligeramente espinosa de color verde oscuro y miden 1,5 cm de largo. Sus flores son de color amarillo rojizo, dispuestos en racimos de 8 a 15 cm de largo. Sus frutos son vainas explanadas e indehiscentes de color naranja de 8 a 10 cm de largo y 2 cm de ancho. S. aproximadamente, que contienen de 4 a 7 granos de semilla redondeada de. IC A. 0,6 a 0,7 cm de diámetro y son de color pardo negruzco cuando están. LO. G. maduros. (De La Cruz y Lapa, 2004).. Es un arbusto utilizado desde la época de los Incas en la tintorería y. O. curtiembre, pero también en la medicina tradicional, como astringente,. BI. cicatrizante, antidisentérico y en especial contra amigdalitis, lo que hace. AS. presumir la presencia de antimicrobianos. (Ponce y Millones, 2015).. plantas. medicinales. fueron. EN. diversas. CI. La medicina tradicional fue usada desde la antigüedad, en la cual utilizadas. para. alimentar,. curar. enfermedades, aliviar dolores, etc. Las propiedades curativas de las plantas se. CI. atribuyen a la presencia de un principio activo, el cual produce en efecto. DE. fisiológico, que están siendo estudiadas científicamente por investigadores, de forma. multidisciplinaria,. con. la. intervención. de. biólogos,. químicos,. TE CA. farmacólogos, farmacognocistas (Garrido y Yasmine, 2003).. La importancia de esta leguminosa arbórea radica en que, además de. IO. ser fuente natural de taninos y colorantes puede ser usada en reforestación. BL. asociada con otros cultivos (maíz, habas, alfalfa, sorgo o pastos) debido a que no genera mucha competencia con ellos y es utilizada como antifúngico.. BI. (Carrillo, 1974).. C. spinosa presenta un gran porcentaje de principios activos comprendidos dentro de los productos naturales o metabolitos que son compuestos de estructura compleja y de distribución restringida, entre ellos: 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. alcaloides, esteroides, terpenoides, flavonoides, taninos, gomas, fenólicos, etc. muchos de los cuales presentan actividad antifúngica así como bactericida que pueden encontrarse distribuidas por toda la planta o en alguna de sus partes.. IC A. S. (Añanca, 2009).. La presencia de microorganismos patógenos en la poscosecha de. G. productos hortofrutícolas ocasionan considerables pérdidas económicas: hasta. LO. 50% en países como México; el manejo se basa casi exclusivamente en la utilización de fungicidas químicos sintéticos, que generan un gran impacto en. O. los ecosistemas y la salud, provocando a su vez, que los productos agrícolas. AS. BI. no sean aceptados para exportación (Sudheer y Indira, 2007).. Actualmente, el control de hongos fitopatógenos requiere de aplicar. CI. técnicas alternativas, pues el manejo tradicional con agroquímicos sintéticos ha. EN. ocasionado diversos problemas como la toxicidad a los usuarios (Whalen y col.,. CI. 2003).. DE. Otro aspecto importante es que los microorganismos fitopatógenos han generado resistencia al ingrediente activo de algunos fungicidas sintéticos. altas. TE CA. (Cooke y col., 2003) como respuesta a la presión de selección debido a las dosis. y. aplicaciones. continuas,. ocasionando. grandes. pérdidas. económicas. Una alternativa económica y eficiente para el control de. IO. enfermedades, es el uso de los productos naturales derivados de las plantas. BI. BL. (Montes, 2000).. De los hongos que afectan en postcosecha, existe uno de gran importancia: Alternaria sp el cual afecta frutos de Solanum. esculentum. “tomate” en campo y en postcosecha, puede comportarse como oportunista o. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. infectar por sí solo, y sus lesiones iniciales aumentan cubriendo el fruto con un moho negro (Rotem, 2004). El género Alternaria se encuentra dentro de la Familia Dematiaceae, se. S. caracteriza por la formación de conidios polimórficos ya sean individuales o en. IC A. cadenas cortas o largas, las cuales pueden ser transportadas por el aire, agua. y permanecer en latencia en el suelo (Pattanamahakul, 1999). Las conidias son. G. de forma alargada, pequeñas y segmentadas, de forma elipsoide y septadas. El. LO. cuerpo de las conidias puede estrecharse gradualmente hasta alcanzar la. O. forma de un pico cónic (Woudenberg & al., 2013).. BI. Las enfermedades causadas por Alternaria se conocen como tizón. AS. temprano, los síntomas involucran manchas y tizones foliares, ahogamiento de plántulas, pudriciones del cuello, así como pudriciones de los frutos y. CI. tubérculos en algunas plantas, ocasionando pérdidas considerables en muchos. EN. frutos de postcosecha como Solanum esculentum “tomate”, los cuales afectan ramas, pecíolos, hojas tallos pero principalmente en frutos, causando una. CI. disminución considerable de la producción (Oirsa, 2003).. DE. Solanum esculentum “tomate” es una de las hortalizas con mayor problemática sanitaria, ya que las enfermedades constituyen un factor limitante. TE CA. en su producción. Las enfermedades patogénicas están presentes en plántulas (‘dampingoff’), follaje (tizones temprano y tardío), en tallos (Fusarium spp.) y hasta en los frutos (pudrición apical y pudrición por Alternaria) (Tigchelaar,. BL. IO. 2001; González y col., 2003).. Para controlar las pudriciones se han utilizado fungicidas químicos. BI. sintéticos, con los riesgos que implican su uso, aunque en algunos casos se ha buscado reducir los daños que ocasionan (Kanetis y col., 2007).. Como alternativas de control biológico, entre los extractos naturales, se encuentran los taninos y las saponinas. Los taninos tienen un potencial 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. fungicida que contribuye a la resistencia de las plantas al ataque de hongos y otros microorganismos (Margueron, 2006). En cuanto a la capacidad antifungica de las saponina, hay estudios que comprueban su eficaz frente al. IC A. S. ataque de hongos (Apaza y col., 2016).. Una de las alternativas en el control de plagas, es el uso de productos. G. de origen natural, como los fungicidas vegetales, que además de tener la gran. LO. ventaja de ser compatibles con otros compuestos naturales, aumentan su. BI. O. efectividad y son de bajo riesgo (Vázquez y col., 2007).. Esto se debe a una serie de factores, entre los cuales debemos destacar. actualidad. dicha. utilización. se. AS. el conocimiento preciso de su composición química, y el hecho de que en la fundamenta. en. numerosos. ensayos. CI. farmacológicos in vivo como in vitro, así como en ensayos químicos. De esta. EN. forma, el uso de las especies vegetales medicinales que se ha venido haciendo en forma empírica y basada en la tradición tiene hoy una base científica (Araujo. DE. CI. y Ramsés 2008).. TE CA. Debido a las escasas investigaciones relacionadas directamente a evaluar la actividad antifúngica de Caesalpinia spinosa “tara” sobre hongos fitopatógenos seria de mucha utilidad proponer una mejora a los agricultores en cuanto a la preparación de fungicidas vegetales que sean menos tóxicos pero. IO. sobre todo de bajo costo y así iniciar un programa de educación y capacitación. BL. para la búsqueda de nuevas fuentes de materia prima y de esta manera ir. BI. descartando cada vez más a los productos sintéticos.. El objetivo de la presente investigación fué determinar el efecto antifúngico in vitro e in situ del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa “tara” sobre Alternaria sp.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y METODOS. 1.1.. Recolección del material biológico:. S. Las vainas de Caesalpinia spinosa (Molina) Kuntze "tara" fueron. IC A. precedentes del distrito de Usquil, provincia de Otuzco, Departamento La. la Universidad Nacional de Trujillo (HUT). (Anexo 14).. G. Libertad. Perú. La especie fue determinada en el Herbarium Truxillense de. LO. El hongo fitopatógeno Alternaria sp (Fries) Keissler se aisló de frutos post. O. cosecha de Solanum esculentum “tomate” en estado de pudrición,. BI. procedente del mercado la Hermelinda, ciudad de Trujillo, departamento de. Preparación de la muestra:. EN. 1.2.. CI. AS. La Libertad. Perú.. CI. 1.2.1. Selección de la muestra: La muestra se seleccionó teniendo. DE. en cuenta su integridad física, libre de ataques de insectos, maltratos mecánicos etc. en una cantidad de 1 kg de vainas de. TE CA. secas. C.. spinosa. previamente. seleccionadas. y. desinfectadas con hipoclorito de sodio al 1% por espacio de 5. enjuagó con agua destilada.. BI. BL. IO. minutos, posteriormente por tres veces consecutivas se. 1.2.2. Secado: Se procedió a separar las semillas de las vainas, luego se secaron en una estufa por espacio de 48 horas a una temperatura de 40°C.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.2.3. Pulverización y tamización: Posteriormente las vainas fueron trituradas con ayuda de un mortero hasta convertirlas en polvo, el cual se tamizó para homogenizar el tamaño de. IC A. S. partículas.. G. 1.2.4. Almacenamiento: El polvo obtenido se guardó en un frasco. LO. color ámbar de boca ancha a temperatura ambiente hasta su. BI. O. respectivo uso.. Preparación. del. extracto. etanólico. AS. 1.3.. de. las. vainas. de. EN. CI. Caesalpinia spinosa “tara”. CI. 1.3.1. Procedimiento de Maceración: Se colocó 100 g de polvo en. DE. un recipiente de vidrio de boca ancha color ámbar y se agregó 400 ml de etanol al 96%, se dejó macerar en oscuridad a. TE CA. temperatura ambiente por 5 días agitándose diariamente, 10 minutos 2 veces al día de forma mecánica para aumentar la. BI. BL. IO. superficie de liberación de pigmentos. Posteriormente el extracto de “tara“ se filtró en papel de filtro Wathman N°2 y se llevó al rotavapor hasta obtener un extracto puro, el cual se pesó y luego se colocó en un frasco color ámbar.. 1.3.2. Determinación de las concentraciones: A partir de este extracto seco se preparó las concentraciones de 0%, 0.5%,. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1%, 8%. cada concentración fue disuelta en sus respectivos matraces previamente rotulados.. Obtención del Hongo Fitopatógeno Alternaria sp.. IC A. S. 1.4.. A partir de frutos post cosecha de S. esculentum “tomate en. G. estado de pudrición, se tomó una pequeña muestra y se observó. LO. en microscopio OLYMPUS con aumento de 40x, luego se aisló el. O. inóculo de Alternaria sp en una placa la cual fue sembrado en. BI. agar papa dextrosa en el Laboratorio de Fitopatología. Facultad Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, se dejó. AS. crecer el hongo bajo condiciones de oscuridad a una temperatura de (23 ± 2 °C), para desarrollarse y esporular, hasta obtener un. CI. cultivo puro. A partir del cual ser realizo un microcultivo. para. EN. llevar a cabo su identificación mediante tablas taxonómicas.. BI. BL. IO. TE CA. DE. CI. (Barnett, 1998). (Anexo 2 c).. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.5.. Diseño experimental antifúngico in vitro.. Se aplicó el diseño completamente al azar; con cuatro tratamientos y tres repeticiones de extracto etanolico de vainas de Caesalpinia spinosa "tara”,. S. 0%, 0.5%, 1%, 8%. Preparados en agar papa. IC A. en concentraciones de. TE CA. DE. CI. EN. CI. AS. BI. O. LO. G. dextrosa (Fig. 1). IO. Fig.1. Diseño experimental in vitro del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa “tara”.. BI. BL. 1.5.1. Siembra de Alternaría sp: El inóculo de Alternaria sp se colocó con una aza bacteriológica mediante picadura central en los cuatro tratamientos y sus respectivas repeticiones el procedimiento se realizó en condiciones asépticas, todo el sistema fue llevado bajo un fotoperiodo de 12 horas (luz) y 12 horas (oscuridad). La temperatura fue de (23 ± 2 °C). 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.5.2. Crecimiento micelial: A partir del segundo día se empezó a medir el diámetro del crecimiento micelial (cm) en todas las. S. placas, así como evaluar el crecimiento diario y el porcentaje. IC A. de inhibición para determinar que tratamiento tuvo mayor. LO. G. efecto antifúngico tomando como referencia la placa control.. 1.5.3. Evaluación: Se determinó el porcentaje de inhibición, usando. BI. O. la fórmula propuesta por (Guo et al., 2006) IA = 1- (Da / Db) X 100; donde IA es el porcentaje de inhibición, Da: es el. AS. diámetro de crecimiento de los tratamientos evaluados y Db: el. BI. BL. IO. TE CA. DE. CI. EN. CI. diámetro del crecimiento del micelio en el testigo. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.6.. Diseño experimental antifúngico in situ. Para el ensayo antifúngico in situ se emplearon frutos de Solanum esculentum “tomate” variedad Rambo, fueron precedentes del distrito. IC A. S. de Virú, provincia de Virú, departamento La Libertad, estado maduro, sin. daños mecánicos o síntomas de enfermedad. Se desinfectaron con. G. hipoclorito de sodio al 1% durante 15 min, se lavó tres veces con agua. LO. destilada estéril y se secó a temperatura ambiente (20 ± 2 °C) sobre. BI. BL. IO. TE CA. DE. CI. EN. CI. AS. BI. O. papel absorbente. (Fig. 2). Fig.2. Diseño experimental antifúngico in situ en S. esculentum “tomate” en concentraciones 0%, 0.5%, 1%, 8%.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.6.1. Preparación del inóculo de Alternaria sp.. El hongo fue sembrado en agar papa y sometido a luz por un período de 12 horas para asegurar su esporulación.. S. Posteriormente se colocó 3 ml de medio autoclavado y con la. IC A. ayuda de una aza triangular plástica estéril se raspó todo el. micelio del hongo. La solución obtenida se filtró a través de un. G. algodón estéril. Luego fue centrifugado a 13000 rpm durante 5. LO. minutos.. Se extrajo el sobrenadante. A partir de esta solución se realizó la cámara de Neubauer. O. el conteo de conidias mediante. BI. (Bastidas, 2008). Luego de este conteo se preparó un inóculo. AS. en una concentracion de 105 conidias/ml (Saskia, 2013).. EN. CI. 1.6.2. Inoculación de Alternaria sp.. En condiciones de esterilidad a cada fruto se realizó heridas. CI. de 2 mm de profundidad por 2 mm de ancho con un bisturí estéril. Posteriormente cada fruto fue sumergido totalmente. DE. durante 5 minutos en vasos de precipitación conteniendo los tratamientos con las diferentes concentraciones. del extracto. TE CA. etanólico de C. spinosa. (0%, 0.5%, 1.0%, 8.0%). Luego los frutos fueron retirados y secados por espacio de dos horas.. BI. BL. IO. Posteriormente haciendo uso de una micropipeta se inoculo a cada fruto conteniendo los diferentes tratamientos 20 uL del hongo (≈ 50 esporas). Los frutos tratados se incubaron en recipientes. de. plástico. de. boca. ancha. organizados. verticalmente para que los tratamientos tengan condiciones similares de iluminación, y temperatura 25°C y a partir del segundo día se realizó la medición diaria por ocho días.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.6.3. Evaluación: Se evaluó el porcentaje de infección y el índice de severidad. S. 1.6.4. Porcentaje de infección e Severidad. Al finalizar el periodo. IC A. de almacenamiento, se cuantificó los frutos que presentaron. G. síntomas de “podredumbre negra” en cada tratamiento, el. LO. número total de frutos se considera como el 100%. El índice. O. de severidad se determinó sobre la superficie de los frutos con. BI. grados de daño según una escala establecida con las. AS. siguientes características; 0 = 0; 1 = 1- 5%; 2 = 6-15%; 3 =1645%; 4 = 46-75% y 5 = 76 -100% de daño visual por fruto y se. CI. el índice de severidad mediante la ecuación descrita. EN. calculó. por (Pérez et al., 1995): Índice de severidad = Xi(0) + Xi(1) +. CI. Xi(2) + Xi(3) + Xi(4) + Xi(5) / N. donde Xi = número de frutos. DE. enfermos por cada grado de daño; 0, 1, 2, 3, 4, 5 = grado de daño en la escala utilizada y N = número total de frutos por. TE CA. unidad experimental (Alvarado y col., 2011).. BI. BL. IO. 1.6.5. Pérdida de peso. Los frutos de cada tratamiento se pesó individualmente al inicio y al final del experimento. La pérdida de peso se evaluó a partir de la siguiente fórmula: pérdida de peso = (peso inicial - peso final). (Alvarado y col., 2011).. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.7.. Análisis estadísticos.. Se realizó análisis de varianza ANOVA para efecto antifungico in vitro e para. determinar. si. existe. diferencias. estadísticamente. S. situ. IC A. in. significativas entre los tratamientos tanto del extracto etanólico y luego la. G. prueba de comparación de medias según Tukey para determinar cuál es. LO. el tratamiento que tuvo mayor influencia en el crecimiento del hongo. BI. BL. IO. TE CA. DE. CI. EN. CI. AS. BI. O. fitopatógeno.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS. 1. CRECIMIENTO IN VITRO. S. Según los resultados obtenidos observamos en la Tabla 1, el efecto. IC A. antifungico in vitro del extracto etanólico de vainas de C. spinosa sobre. el crecimiento del diámetro miceliar de Alternaria sp alcanzando un. G. mayor valor en los tratamientos de 0.5% (5.33 cm) y 1 %(2.6 cm) y. LO. menor en el tratamiento de 8% (1.03cm), con respecto al control (7.93 cm) a los ocho días de evaluación. Así mismo en la Figura 3, se observa. O. que la velocidad de crecimiento es mayor en los tratamientos de 0.5% y. BI. 1% y menor en 8% con respecto al control durante los días de. CI. AS. evaluación.. EN. Tabla 1. Efecto del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa “tara” sobre el crecimiento promedio del diámetro micelial (cm) de Alternaria sp in. (0.5%). (1.0 %). (8.0 %). 1. 0.80. 0.60. 0.03. 0.03. 2. 1.53. 1.20. 0.63. 0.13. 3. 2.56. 2.00. 1.53. 0.23. 4. 4.06. 3.07. 1.60. 0.40. 5. 4.80. 3.93. 1.76. 0.57. 6. 5.70. 4.67. 1.90. 0.73. 7. 7.10. 4.90. 2.23. 0.96. 8. 7.93. 5.33. 2.6. 1.03. IO. (0%). BL BI. TRATAMIENTOS. TE CA. DIAS. DE. CI. vitro en concentraciones de 0%, 0.5%, 1%, 8% a los ocho días de evaluación.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) IC A. S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G. 9. LO. 8. O BI. 7.1. 6. AS. 5.7. 5. 5.33. 4.8. 4.9. CI. 4.67. 4.06. 4. 3.93. EN. CDM promedio (cm). 7. 7.93. 3.07. 3. 2.6. CI. 2.56. 1.53 1.2. 0.8 0.6. IO. 1. 0.4. 0.23. 0.13. 0 0.03. BL. 1.6. 0.63. TE CA. 1. 2 1.53. DE. 2. 2. 2.23. 3. 1.76. 1.9. 0.57. 0.73. 4. 5. 1.03. 0.96. 6. 7. 8. Días 0%. 0.50%. 1.00%. 8.00%. Fig. 3. Velocidad de crecimiento promedio del diámetro micelial de Alternaria. BI. sp in vitro en los ocho días de evaluación.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En la figura 4 se presenta el porcentaje de inhibición del extracto etanólico de vainas de C. spinosa sobre el crecimiento in vitro del diámetro micelial en los diferentes tratamientos, observándose que el porcentaje de inhibición es mayor en el tratamiento 8% (89.82%) y. S. menor en el tratamiento 0.5% (24.1%) con respecto al control (0%) a los. BI. BL. IO. TE CA. DE. CI. EN. CI. AS. BI. O. LO. G. IC A. ocho días de evaluación.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 89.72. 90. G LO. 70. O. 65.21. BI. 60. AS. 50 40. 0% 0.50% 1.00% 8.00%. CI. PORCENTAJE DE INHIBICION. 80. IC A. S. 100. 30. EN. 24.1. CI. 20. DE. 10 0. TRATAMIENTOS. TE CA. 0. Fig. 4. Porcentaje de inhibición del extracto etanólico de vainas de C. spinosa. IO. sobre el crecimiento del diámetro micelial (DCM) de Alternaria sp in vitro en. BI. BL. los tratamientos (0%, 0.5%, 1% Y 8%), a los ocho días de evaluación.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En la tabla 2, se muestra el análisis de varianza (ANAVA) para evaluar el efecto de las diferentes concentraciones del extracto etanólico de vainas de C. spinosa sobre el crecimiento de Alternaria sp in vitro, la cual indica diferencias estadísticamente significativas entre las medias del. S. crecimiento micelial de Alternaria sp, entre un tratamiento y otro, con un. G. IC A. nivel de confianza del 95.0% de confianza.. LO. Tabla 2. Análisis de varianza (ANAVA) para evaluar el crecimiento micelial en cm. de Alternaria sp in vitro en los tratamientos de 0%, 0.5%, 1%, 8% del. O. extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa en los ocho días de. Entre grupos. 25.6894. Intra grupos. 0.2214. Total (Corr.). 25.9108. Gl. Cuadrado Medio. CI. Suma de Cuadrados. 3. EN. Fuente. AS. BI. evaluación. P< 0.05. Valor-P. 309.42. 0.0000. 0.027675. CI. 8. 8.56312. Razón-F. BI. BL. IO. TE CA. DE. 11. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 3. Prueba Múltiple de Rangos (Tukey) para crecimiento micelial CDM de Alternaria sp in vitro en los Tratamientos 0%, 0.5%, 1.0%, 8.0% en extracto etanólico de Caesalpinia spinosa. a los ocho días de. Tratamientos. Casos. 8.0 %. 3. 1.0 %. 3. 1.54. 0.5%. 3. 3.21667. Control (0%). 3. 4.29667. IC A. S. evaluación.. Media. Grupos Homogéneos. G. 0.513333 X. LO. X. O. X. AS. BI. X. Sig.. Diferencia. 0.5% - 1.0 %. +/- Límites. *. 1.67667. 0.434823. EN. CI. Contraste. *. 2.70333. 0.434823. *. -1.08. 0.434823. 1.0 % - 8.0 %. *. 1.02667. 0.434823. 1.0 % - Control (0%). *. -2.75667. 0.434823. 8.0 % - Control (0%). *. -3.78333. 0.434823. 0.5% - 8.0 %. TE CA. DE. CI. 0.5% - Control (0%). * indica una diferencia significativa. IO. En la tabla 3, la prueba de Tukey confirma que existen diferencias. BL. estadísticamente significativas entre el control (0%) y los demás. BI. tratamientos evaluados (0.5%, 1.0%, 8.0%), así mismo el tratamiento de 0.5 % difiere con el tratamiento de 1.0% y 8.0%. El asterisco que se encuentra al lado de los 6 pares indica que estos pares muestran diferencias estadísticamente significativas con un nivel del 95.0% de confianza, por lo tanto se acepta de que si hay una hipótesis de que si hay efecto del extracto de C. spinosa sobre Alternaria sp. 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) B. TE CA. DE. CI. EN. CI. AS. A. BI. O. LO. G. IC A. S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. D. IO. C. BL. Fig. 5. Crecimiento del diámetro micelial de Alternaria sp en las diferentes. BI. concentraciones del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa “tara” in vitro a los ocho días de evaluación. Vista frontal de tratamientos: A. control (0%), B. (0.5%), C. (1%), D. (8 %).. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2. CRECIMIENTO IN SITU. En la Tabla 4, se muestra el efecto antifungico in situ del extracto. S. etanólico de vainas de C. spinosa sobre el crecimiento del diámetro. IC A. micelial de Alternaria sp en fruto S. sculentum “tomate”, alcanzando un mayor crecimiento en los tratamientos de 0.5% (3.72 cm) y 1% (2.02 cm). G. y menor en el tratamiento de 8% (1.28 cm), con respecto al control (5.50. LO. cm) a los ocho días de evaluación, de igual manera en la Fig. 7 se. O. observa que la velocidad de crecimiento es mayor en los tratamientos de. BI. 0.5% y 1% y menor en el tratamiento del 8% con respecto al control. AS. durante los días de evaluación.. CI. Tabla 4. Efecto del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia. EN. spinosa sobre el crecimiento promedio del diámetro micelial (cm) de Alternaria sp in situ a concentraciones 0%, 0.5%, 1%, 8% a los ocho. DE. CI. días de evaluación.. BI. BL. IO. TE CA. DIAS. TRATAMIENTOS (0%). (0.5%). (1.0 %). (8.0 %). 1. 0.14. 0. 0. 0. 2. 0.72. 0.54. 0.18. 0. 3. 1.16. 0.92. 0.5. 0.14. 4. 2.14. 1.48. 0.9. 0.34. 5. 2.92. 1.96. 1.38. 0.52. 6. 3.7. 2.48. 1.62. 0.9. 7. 4.56. 3.04. 1.84. 1.08. 8. 5.5. 3.72. 2.02. 1.28. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC A. 6. 5.5. G. 5. LO O. 4. 3.72. BI. 3.7. 3. 2.14. 2. AS. 2.92. EN. 1.48. 1.16 0.92. 1. 0.18 0. 0.14 0. TE CA. 1. 1.62. 1.38. 1.28 1.08. 0.9 0.52. 0.34. 0.14. DE. 0. 0.5. 2.02. 1.84. 0.9. CI. 0.72 0.54. 3.04. 2.48. 1.96. CI. CDM promedio (cm). 4.56. 2. 0%. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Dias 0.50%. 1.00%. 8.00%. Fig. 6. Velocidad de crecimiento promedio del diámetro micelal (CDM) de. evaluación.. BI. BL. IO. Alternaria sp in situ en fruto de S. esculentum “tomate” en los ocho días de. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En la figura 7, se presenta el porcentaje de inhibición del extracto etanólico de vainas de C. spinosa sobre el crecimiento in situ del diámetro micelial en los diferentes tratamientos, observándose que el porcentaje de inhibición es mayor en el tratamiento 8% (79.69%) y. S. menor en el tratamiento 0.5% (32.18%) con respecto al control (0%) a. BI. BL. IO. TE CA. DE. CI. EN. CI. AS. BI. O. LO. G. IC A. los ocho días de evaluación.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 79.69. G. 80. LO. 70 59.39. O. 60. AS. BI. 50. 40. 0.50%. 1.00% 8.00%. CI. 32.18. 0%. 30. EN. PORCENTAJE DE INHIBICIÓN. IC A. S. 90. CI. 20. DE. 10 0. TRATAMIENTOS. TE CA. 0. Fig. 7. Porcentaje de inhibición del extracto etanólico de vainas de C. spinosa. IO. sobre el crecimiento del diámetro micelial (DCM) de Alternaria sp en frutos de. días de evaluación.. BI. BL. S. esculentum en los tratamientos de 0% (control), 0.5%, 1% Y 8%, a los ocho. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. La tabla 5 se muestra el análisis de varianza (ANAVA) para evaluar el efecto de las diferentes concentraciones del extracto etanólico de vainas de C. spinosa sobre el crecimiento de Alternaria sp in situ en frutos de S. esculentum. La cual indica diferencias estadísticamente significativas. S. entre las medias del crecimiento micelial de Alternaria sp, entre un. G. IC A. tratamiento y otro, con un nivel de confianza del 95.0 % de confianza.. LO. Tabla 5. Análisis de varianza (ANAVA) para evaluar el crecimiento micelial in. O. situ en cm. de Alternaria sp en los tratamientos de 0%, 0.5%, 1%, 8% del extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa en los ocho días de. 0.0426 12.1956. AS. 3. CI. 12.153. Cuadrado Medio 4.051. Razón-F 1521.50. Valor-P 0.0000. EN. Gl. 16. 0.0026625. 19. BI. BL. IO. TE CA. DE. Entre grupos Intra grupos Total (Corr.). Suma de Cuadrados. CI. Fuente. BI. evaluación. P< 0.05. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 6. Pruebas Múltiple Rangos (Tukely) para crecimiento micelial CDM de Alternaria sp in situ en los Tratamientos 0%, 0.5%, 1.0%, 8.0% en extracto etanólico de Caesalpinia spinosa.a los ocho días de evaluación.. Media. Grupos Homogéneos. 1%. 5. 1.054. 0.5%. 5. 1.768. Control (0%). 5. 2.606. X X. G. 0.532. X X. LO. 5. Contraste. Sig.. 0.5% - 1%. *. 0.5% - 8%. *. 0.5% - Control (0%). *. -0.838. CI. 0.0934103. EN. BI. O. 8%. S. Casos. IC A. Tratamientos. *. 0.522. 0.0934103. *. -1.552. 0.0934103. *. -2.074. 0.0934103. 1% - 8%. 0.0934103. 1.236. 0.0934103. DE. 8% - Control (0%). +/- Límites. 0.714. AS. CI. 1% - Control (0%). Diferencia. TE CA. * indica una diferencia significativa.. En la tabla 6, la prueba de Tukey confirma que existen diferencias. IO. estadísticamente significativas entre el control (0%) y los demás tratamientos evaluados (0.5 %, 1.0 %, 8.0 %), así mismo el tratamiento. BL. de 0.5 % difiere con el tratamiento de 1 % y 8 %. El asterisco que se. BI. encuentra al lado de los 6 pares indica que estos pares muestran diferencias estadísticamente significativas con un nivel del 95.0% de confianza, por lo tanto se acepta de que si hay una hipótesis de que si hay efecto del extracto de C. spinosa sobre Alternaria sp.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 7. Porcentaje de infección, índice de severidad y pérdida de peso inducidas por Alternaria sp in situ en frutos de tomate tratados con extracto etanólico de Caesalpinia spinosa en los tratamientos 0%, 0.5%, 1%, 8% a los. PORCENTAJE DE. GRADO DE. INFECCIÓN (%). SEVERIDAD. PÉRDIDA DE PESO. G. TRATAMIENTOS. IC A. S. ocho días de evaluación.. 5. 80. 4. 1.0%. 2.72. 40. 3. 1.08. 20. 1. 0.4. EN. CI. 8.0%. 5.22. BI. 0.5%. O. 100. AS. CONTROL. LO. PROMEDIO (g). En la tabla 7, se muestra el porcentaje de infección de los frutos, se. CI. observa que extracto etanólico,. disminuyó. significativamente,. el. DE. porcentaje es mínima de 20% y un máximo valor de 80% a una concentración de 8.0% y 0.5% respectivamente, con relación al grado de severidad,. se. observó. que. los. tratamientos. que. redujeron. TE CA. significativamente este parámetro fueron los tratamientos 1% y 8%. La pérdida de peso de los frutos de S. esculentum se observa que en el tratamiento con mayor concentración es mínima a comparación de los. BI. BL. IO. demás tratamientos.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) IC A. S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. G. 120. LO. 100. O. 100 80. AS. BI. 80. CI. 60. 5.22. DE. 5. CI. 20. 0. 40. EN. 40. Control. 4. 2.72. 0.50%. 3. 1.08. 1.00% Grado de severidad. 1. 0.4. 8.00% Pérdida de peso (g). TE CA. Porcentaje de infección (%). 20. Fig. 8. Porcentaje de infección (%), grado de severidad y pérdida de peso. ocasionado por Alternaria sp in situ presentes sobre fruto de S. esculentum. BI. BL. IO. “tomate” a los ocho días de evaluación.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) BI. O. LO. G. IC A. S. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A. D. BL. IO. C. TE CA. DE. CI. EN. CI. AS. B. Fig. 9. Crecimiento micelial in situ de Alternaria sp en los diferentes tratamientos del. BI. extracto etanólico de vainas de Caesalpinia spinosa a los ocho días de evaluación A. 0% (control), B. 0.5%, C. 1.0%, D. 8.0%.. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN La reducción del crecimiento micelial promedio de Alternaria sp en el efecto antifungico in vitro (TABLA 1), luego de someter a la acción de etanólico de Caesalpinia spinosa. a los ocho días de. S. extracto. IC A. evaluación, muestra un mayor crecimiento en el tratamiento de 0.5% (5.33 cm) y menor en el tratamiento de 8% (1.03cm), con respecto al. G. control (7.93cm), del mismo modo en el efecto antifungico in situ el. LO. crecimiento micelial de Alternaria sp en fruto de S. esculentum (TABLA 4) muestra un mayor crecimiento en el tratamiento de 0.5% (3.72 cm) y. O. menor en el tratamiento de 8% (1.28 cm), con respecto al control (5.50. BI. cm). Esto puede deberse a la presencia de compuestos fenólicos con actividad antifúngica, debido al aumento de la concentración del extracto. AS. de C. spinosa, según los reportes de (Oliver & Beyer 1963). CI. determinaron que los grupos fenoles, quinonas y alcaloides tienen. EN. acción antifúngica y microbiana.. CI. Los resultados de este estudio concuerdan con otras investigaciones y se confirma a mayor concentración de extracto etanólico de vainas de C.. DE. spinosa, menor es la velocidad de crecimiento de Alternaria sp (Fig.3 y 6), y mayor es su efecto inhibitorio, el porcentaje de inhibición in vitro es. TE CA. mínima de 24.10% y un máximo 89.72% a una concentración de 0.5% y 8.0% de extracto respectivamente (Fig.4) y el porcentaje de inhibición in situ es mínima de 38.18% y un máximo 79.69% a una concentración de 0.5% y 8.0% de extracto respectivamente (Fig.7), según estudios. IO. realizados por Salvador y col (2008), demuestran que la “tara” contienen. BL. hasta un 25% de taninos, que es uno de los mayores constituyentes de que los taninos serían. los fitoconstituyentes con mayor. BI. taninos y. propiedad antífúngica. Dentro de los productos naturales o metabolitos que son compuestos de estructura compleja y de distribución restringida, son: alcaloides, esteroides, terpenoides, flavonoides, taninos, gomas, etc; que pueden encontrarse distribuidas por toda la planta o en alguna de sus partes (Escobar, 2008). 31. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Esto se puede contrastar con Sampaio (2009), que realizo un estudio similar, el cual utilizó extracto etanólico de C. spinosa sobre microorganismos patógenos como los hongos entre ellos Candida albicans obteniendo una inhibición mínima de 25% y un máximo 75% a. S. una concentración de 0.5% y 1.5% de extracto respectivamente. G. IC A. indicando una sensibilidad máxima al aumentar la concentración.. LO. Por otro lado Jativa, (2011), realizó la comparación de resultados de inhibición de taninos frente a hongos del filo Ascomycota, en el trabajo. O. titulado “Determinación de contenido de taninos procedentes de. BI. guarango (C. spinosa), aplicando concentraciones de 2500 ppm y 5000 ppm de taninos extraidos de la tara (C. spinosa), obtiene 53.5% y 87.3%. AS. sobre Penicillium sp.; pero al aplicar las mismas concentraciones de. CI. taninos sobre Aspergillius niger no obtuvo un porcentaje de inhibición. Los porcentajes de inhibición en hongos del Filo Ascomycota por acción. EN. de taninos difieren, porque no se conoce con certeza la acción de los. CI. taninos hidrolizables y condensados sobre diferentes tipos de hongos.. DE. (Scalbert, 1991).. TE CA. Además se compara el porcentaje de inhibición del efecto antifúngico in vitro e in situ del extracto etanólico de vainas de C. spinosa sobre Alternaria. sp. observando. una. ligera. diferencia. tratamientos, siendo el tratamiento 8%, el que. IO. porcentaje de inhibición. en. todos los. presenta un mayor. debido a que presentan un conjunto de. BL. metabolitos secundarios que inhiben su crecimiento. Cabe resaltar que el crecimiento del Alternaria sp in situ en frutos de S. esculentum es. BI. temporal. La agresión es más fuerte e interna en los tratamientos 0% y 0.5 % que al final termina por licuar, deshidratar el fruto, a comparación de los tratamientos 1.0% y 8.0 % el micelio tiende a localizar y el crecimiento es muy lento. Se contrasta con (Lock de Ugas, 1994) la cual demuestra. que. los. fenoles. y. flavonoides. tienen. propiedades. antifúngicas, antibacterial cuyo contenido provoca lesiones en la 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. membrana citoplasmática, ocasionando una disfunción en composición interna de la célula. Alternaria sp es un patógeno que puede ser encontrado en una gran cantidad de hospedadores, es de gran impacto en las plantaciones de tomate aunque también puede ser encontrado en. S. una gran variedad de frutas y verduras entre las que se encuentran. IC A. especies de Brassicaceas como es el brócoli. Se han reportado casos de Alternaria alternata identificados en el Ecuador aislados desde tomates,. LO. G. sandías y coliflores (Espinoza, 2009).. O. EL extracto etanolico de C.spinosa no logro disminuir significativamente. BI. el porcentaje de infección de los frutos, resultado que podría atribuirse a la naturaleza química del extracto que contienen una amplia gama de. AS. compuestos volátiles, los cuales podrían disiparse de la superficie de los. 9),. CI. frutos y afectar la capacidad de inhibir la infección de Alternaria sp (Fig. el porcentaje es mínimo de 20% y un máximo valor de 80% a una. EN. concentración de 8.0% y 0.5% respectivamente. Así mismo existen. CI. diversos factores tales como el pH, temperatura, el contenido de azúcares y proteínas que pueden afectar la actividad antimicrobiana del. DE. extracto (Gutiérrez et al., 2009).. TE CA. Se puede comparar con los autores (Alvarado y col., 2011) que nos indican que el único tratamiento que logró inhibir significativamente la infección de Rhizopus stolonifer en los frutos de tomate fue el. IO. quitosano a 10 mg mL-1, los frutos presentaron solamente un 23,3% de infección, mientras que en el testigo sin tratamiento se observó un 80%.. BL. Del mismo modo los datos son consistentes con los resultados. BI. reportados recientemente por (Badawy y Rabea, 2009) quienes demostraron que el quitosano aplicado en concentraciones de 2 a 4 mg mL-1 puede controlar infecciones de Botritis cinerea en frutos de tomate.. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..